TW201806943A

TW201806943A - 經醯胺取代之苯基三唑衍生物及其用途

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Publication number: TW201806943A
Application number: TW106114434A
Authority: TW
Inventors: 馬里皮耶柯林; 彼得柯赫夫; 托馬斯紐包爾; 尚塔爾菲爾斯特納; 伊莉莎白波克; 馬蒂亞斯威特沃; 克萊門斯盧斯蒂格; 安嘉布赫繆勒; 漢娜提勒; 卡羅琳德羅班爾; 托馬斯蒙德茲克; 海克希爾默; 阿克塞克雷奇默爾; 卡斯坦施梅克; 皮耶爾瓦奈爾; 漢娜瑟涅卡
Original assignee: 拜耳製藥股份有限公司
Priority date: 2016-05-03
Filing date: 2017-05-02
Publication date: 2018-03-01
Also published as: US20190161454A1; EP3452470B1; AR108263A1; AR108265A1; US10815205B2; WO2017191107A1; EP3452470A1; UY37221A

Abstract

本發明關於新穎的5-(甲醯胺)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物、製備該等化合物之方法、含有該等化合物之醫藥組成物，及該等化合物或組成物用於治療及/或預防疾病(特別是用於治療及/或預防腎臟和心血管疾病)之用途。

Description

經醯胺取代之苯基三唑衍生物及其用途

本發明關於新穎的5-(甲醯胺)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物、製備該等化合物之方法、含有該等化合物之醫藥組成物以及該等化合物或組成物用於治療及/或預防疾病(特別是用於治療及/或預防腎臟和心血管疾病)之用途。

血管加壓素是一種神經激素，其基本上調節水恒定性和血管緊張性。其在第三腦室(下視丘)之壁中的視上核和室旁核(N.paraventricularis)中之特定內分泌神經元內產生且沿著神經過程中從此處轉移到腦下垂體(神經垂體)之後葉。在該處，激素被釋放至血液中以反應不同的生理和病理生理刺激。受擾之神經激素調節基本上本身表現於交感神經緊張度的升高和腎素-血管收縮素-醛固酮系統(RAAS)的不適當活化。雖然一方面由β-受體阻斷劑和另一方面由ACE抑制劑或血管收縮素受體阻斷劑抑制這些組分現在為心血管疾病的藥理學治療的固有部分，但血管加壓素分泌的不適當升高在目前仍然不能被充分治療。

血管加壓素主要經由結合至三種受體(其分類為V1a、V1b和V2受體且屬於G蛋白-偶合受體家族)發揮其作用。

V2受體係位於腎臟中的遠端小管上皮細胞和集合小管的上皮細胞上。彼等之活化賦予這些上皮細胞透水性。此現象係由於水孔蛋白(aquaporin)(特殊水通道)併入上皮細胞的管腔膜中所致。所以，血管加壓素對V2受體的作用之藥理學抑制導致尿排泄增加。因此，具有V2拮抗劑活性的藥物似乎特別適用於治療所有與身體之水過負荷有相關的疾病狀況。

V1b受體(亦稱為V3受體)主要在中樞神經系統中可檢測到。與促腎上腺皮質素釋素(CRH)一起，血管加壓素經由V1b受體調節促腎上腺皮質激素(ACTH)的基本和應力誘發之分泌。

V1a受體主要係位於血管平滑肌細胞(VSMC)上，但亦在心肌細胞、纖維母細胞和特化腎細胞如腎小球膜細胞或控制腎素的釋放的緻密斑之細胞上[Wasilewski MA,Myers VD,Recchia FA,Feldman AM,Tilley DG,Cell Signal.,28(3),224-233,(2016)]。VSMC V1a受體被血管加壓素活化引起細胞內鈣釋放及相應的血管收縮。因此，VSMC V1a受體的刺激導致血管阻力增加和心臟後負荷增加。心輸出量受V1a媒介的血管收縮不利影響。V1a受體對心肌細胞的後負荷和直接刺激的增加可導致在包括纖維化的心肥大和重塑。患有V1a受體的心臟特異性過表現之小鼠發展導致擴張和左心室功能不全之心肥大，表明V1a受體在心衰竭發展中的基本作用[Li X,Chan TO,Myers V,Chowdhury I,Zhang XQ,Song J,Zhang J,Andrel J,Funakoshi H,Robbins J,Koch WJ,Hyslop T,Cheung JY,Feldman AM,Circulation.；124,572-581(2011)]。

V1a受體亦表現於腎皮質和髓質脈管系統中，其中其調節腎血管的血管收縮和影響整個腎血流。因此，V1a受體之活化可減少誘發另外病理過程如組織缺氧、減少的氧和相應小管輸送過程的能量供應之腎髓質血流以及腎小球膜細胞和緻密斑細胞的直接損傷。已經證明腎小球膜細胞V1a受體活化調節TGFβ傳訊及造成膠原IV的產生增加。雖然此傳訊有助於腎臟中之細胞外基質積累和重塑，但相信類似傳訊途徑特別是在心肌梗塞後在心臟細胞中發生，其強調V1a受體在反應病理生理的血管加壓素含量升高之肥大和纖維化過程的發展中之核心作用[Wasilewski MA,Myers VD,Recchia FA,Feldman AM,Tilley DG.Arginine vasopressin receptor signaling and functional outcomes in heart failure.Cell Signal.,28(3),224-233(2016)]。

因為V1a受體主要係表現於VSMCs且因此參與血管功能，可想到對血管疾病如包括跛行和嚴重四肢缺血以及冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)的末梢動脈疾病(PAD)之關係。

除此之外，V1a受體也表現於人類血小板上和肝臟中。雖然血管加壓素離體地經由高濃度V1a受體誘發人類血小板之凝集，但血小板V1a受體的意義尚不完全清楚。因此，藉由V1a受體拮抗劑抑制血管加壓素誘發之血小板凝集是一種利用內源性表現V1a受體之人類組織的有用藥理離體檢定[Thibonnier M,Roberts JM,J Clin Invest.；76：1857-1864,(1985)]。

血管加壓素經由活化肝V1a受體刺激葡萄糖新生和肝醣解。動物研究顯示血管加壓素也損害葡萄糖耐受性，其可能被V1a受體拮抗劑抑制，從而提供血管加壓素受體V1a對糖尿病的關係。[Taveau C,Chollet C,Waeckel L,Desposito D,Bichet DG, Arthus MF,Magnan C,Philippe E,Paradis V,Foufelle F,Hainault I,Enhorning S,Velho G, Roussel R,Bankir L,Melander O,Bouby N.Vasopressin and hydration play a major role in the development of glucose intolerance and hepatic steatosis in obese rats.Diabetologia.,58(5),1081-1090,(2015)]。在動物模式中顯示血管加壓素有助於白蛋白尿和糖尿病誘發之腎病變，其符合人類流行病學研究結果。

最近發現血管加壓素在子癎前症(preeclampsia)的發展中似乎也起著因果的作用。在小鼠懷孕期間慢性灌注血管加壓素足以誘發與人類子癎前症相關的所有主要母體和胎兒表型，包括懷孕特異性高血壓[Santillan MK,Santillan DA,Scroggins SM,Min JY,Sandgren JA,Pearson NA,Leslie KK,Hunter SK,Zamba GK,Gibson-Corley KN,Grobe JL.Vasopressin in preeclampsia：a novel very early human pregnancy biomarker and clinically relevant mouse model.Hypertension.64(4),852-859,(2014)]。

血管加壓素含量在痛經(婦科疾病，以周期性痙攣骨盆疼痛為特徵)婦女之經期中會升高，其似乎增加子宮肌層平滑肌收縮。最近發現選擇性血管加壓素V1a受體拮抗劑(考尼伐坦(relcovaptan)/SR-49059)可減少由血管加壓素引起的子宮內收縮。

為了這些原因，抑制血管加壓素對V1a受體的作用之藥劑顯現適合用於治療幾種心血管疾病。特別地，抑制血管加壓素選擇性對V1a受體的作用之藥劑提供一種治療其他正常血壓患者(即不符合以例如高劑量的利尿劑或V2拮抗減輕充血，以及其中不希望經由V2抑制誘發之利水作用(aquaresis)的患者)之特別理想的剖面。

某些4-苯基-1,2,4-三唑-3-基衍生物已描述於WO 2005/063754-A1和WO 2005/105779-A1中作為加壓素V1a受體拮抗劑，其可用於治療婦科病症，特別是月經異常諸如痛經。

在WO 2011/104322-A1中，已揭示一雙-芳基-鍵結之1,2,4-三唑-3-酮類，包括其5-苯基-1,2,4-三唑-3-基和1-苯基-1,2,3-三唑-4-基衍生物的特別群組作為可用於治療及/或預防心血管疾病之加壓素V1a及/或V2受體的拮抗劑。然而，所述化合物沒有顯示對V1a受體的足夠選擇性，且大部分顯示對血管加壓素V1a和V2受體二者的組合活性。但，如上所述，對V1a受體的高親和力以及選擇性是治療不要減輕充血的疾病狀況之所要先決條件，並且可導致失調的體液體內平衡，包括其他正常血容量個體的血漿滲透壓降低。

在WO 2016/071212-A1中，已揭示某些5-(羥烷基)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物，其充當血管加壓素V1a和V2受體二者之有效拮抗劑，此外，在口服施用後，活體內顯示顯著提高的促排水效力。該化合物係描述為可用於治療及/或預防心血管和腎疾病。但，如上所述，對V1a受體的高親和力以及選擇性是治療不要減輕充血的疾病狀況之所要先決條件，並且可導致失調的體液體內平衡，包括其他正常血容量個體的血漿滲透壓降低。

對V1a受體具有高選擇性的活性分佈具有引起不想要的偏離目標相關的副作用之潛在性，並且也有助於減少達成和維持所要治療效果所需要的物質量，因此在治療可能已處於高風險(諸如(例如)在急性或慢性心和腎疾病中)的患者期間，限制了潛在不可接受的副作用及/或不要的藥物-藥物相互作用。

因此在鑑定和提供作為血管加壓素V1a受體的有效拮抗劑之新化合物中，可看出根據本發明要解決的技術問題。本發明的另一目的為鑑定和提供對血管加壓素V1a受體具有高親和力和選擇性的新化合物。化合物意欲避免包括經由V2抑制誘發利水作用(aquaresis)。進一步意欲相較於從先前技術已知的化合物，化合物具有相似或改良的治療情況(therapeutic profile)，例如關於彼等之活體內性質，例如彼等之藥物動力學和藥效動力學特性及/或彼等之代謝分佈及/或彼等之劑量-活性關係。

令人驚訝地，現已經發現某些5-(甲醯胺)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物代表V1a受體之高效和選擇性拮抗劑。此特異性分佈使得本發明化合物可用於治療及/或預防與V1a受體活化有關之疾病。本發明化合物對於治療及/或預防沒患體液過多且因此不應解除充血的個體之腎臟和心血管疾病特別有用。

本發明化合物具有有價值的藥理性質且可用於預防及/或治療人類和其他哺乳動物中的各種疾病和疾病誘發之狀態。

在一態樣中，本發明關於通式(I)之5-(甲醯胺)-1-苯基-1,2,4-三唑衍生物其中R¹ 表示下式之基團

其中#¹ 表示與氮原子連接的點，Ar 表示下式之基團

其中#² 表示與氮原子連接的點，R² 表示選自下列的基團：三氟甲基、三氟甲氧基、乙氧基、-C(=O)N(H)CH₃和-S(=O)₂CH₃。

根據本發明之化合物亦可以其鹽類、溶劑合物及/或鹽類的溶劑合物之形式存在。

術語「包含」當用於本說明書中時包括「由......組成」。

若在本文內有任何項目稱為「如本文中所述」，則意指可在本文中的任何地方述及。

如本文中所述之術語具有下列意義：術語「C₁-C₄-烷基」意指具有1、2、3或4個碳原子之直鏈或支鏈飽和單價烴基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、或其異構物。特別地，該等基團具有1、2、3或4個碳原子(「C₁-C₄-烷基」)，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、第二丁基、異丁基、或第三丁基，更特別地具有1、2或3個碳原子(「C₁-C₃-烷基」)，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基，甚至更特別地為甲基。

通式(I)化合物可能以同位素變體存在。本發明因此包括一或多種通式(I)化合物之同位素變體，特別是含氘之通式(I)化合物。

術語化合物或試劑之「同位素變體」係定義為呈現構成該類化合物的同位素之一或多者的非天然比例之化合物。

術語「通式(I)化合物之同位素變體」係定義為呈現構成該類化合物的同位素之一或多者的非天然比例之通式(I)化合物。

詞句「非天然比例」意指該同位素的比例高於其天然豐度。在此情況下，待應用之同位素的天然豐度描述於「Isotopic Compositions of the Elements 1997」，Pure Appl.Chem.，70(1)，217-235，1998中。

該等同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘之同位素，分別地諸如²H(氘)、³H(氚)、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁵I、¹²⁹I和¹³¹I。

關於本文中所指定病症之治療及/或預防，通式(I)化合物之同位素變體較佳含有氘(「含氘之通式(I)化合物」)。其中併入一或多種放射性同位素(諸如³H或¹⁴C)的通式(I)化合物之同位素變體可用於例如藥物及/或受質組織分佈研究。此等同位素因為彼等之併入容易及可偵測性而為特佳的。正電子發射同位素諸如¹⁸F或¹¹C可併入通式(I)化合物中。通式(I)化合物之此等同位素變體可用於活體內成像應用。在臨床前研究或臨床研究之情況下，含氘及含¹³C之通式(I)化合物可用於質譜分析(H.J.Leis et al.,Curr.Org.Chem.,1998,2,131)中。

通式(I)化合物之同位素變體通常可藉由熟習此項技術者已知的方法製備，諸如本文流程圖及/或實施例中所述之彼等方法，藉由用該試劑之同位素變體(較佳含氘試劑)取代該試劑。視所要氘化位點而定，在一些情況下，可將來自D₂O之氘直接併入化合物中或併入可用於合成該等化合物之試劑中(Esaki et al.,Tetrahedron,2006,62,10954；Esaki et al.,Chem.Eur.J.,2007,13,4052)。氘氣亦為可用於將氘併入分子中之試劑。烯鍵(H.J.Leis et al.,Curr.Org.Chem.,1998,2,131；J.R.Morandi et al.,J.Org.Chem.,1969,34(6),1889)及炔鍵(N.H.Khan,J.Am.Chem.Soc.,1952,74(12),3018；S.Chandrasekhar et al.,Tetrahedron Letters,2011,52,3865)之催化氘化為併入氘的直接途徑。金屬觸媒(亦即Pd、Pt及Rh)在氘氣存在下可用以直接將含官能基之烴中的氫交換為氘(J.G.Atkinson et al.,US Patent 3966781)。各種氘化試劑及合成建構組元(building block)可購自各公司，諸如(例如)C/D/N Isotopes,Quebec,Canada；Cambridge Isotope Laboratories Inc.,Andover,MA,USA；及CombiPhos Catalysts,Inc.,Princeton,NJ,USA。關於氘-氫交換之技術狀態的進一步資訊給出於例如Hanzlik et al.,J.Org.Chem.55,3992-3997,1990；R.P.Hanzlik et al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.160,844,1989；P.J.Reider et al.,J.Org.Chem.52,3326-3334,1987；M.Jarman et al.,Carcinogenesis 16(4),683-688,1995；J.Atzrodt et al.,Angew.Chem.,Int.Ed.2007,46,7744；K.Matoishi et al.,Chem.Commun.2000,1519-1520；K.Kassahun et al.,WO2012/112363中。

術語「含氘之通式(I)化合物」係定義為其中一或多個氫原子經一或多個氘原子置換且其中通式(I)化合物於各氘化位置之氘的豐度高於氘之天然豐度(其為約0.015%)的通式(I)化合物。特別地，在含氘之通式(I)化合物中，通式(I)化合物於各氘化位置之氘的豐度高於10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%或80%，較佳高於90%、95%、96%或97%，甚至更佳地，在該(等)位置高於98%或99%。應理解，各氘化位置之氘豐度與其他氘化位置之氘豐度無關。

將一或多個氘原子選擇性併入通式(I)化合物中可改變分子之物理化學性質(諸如例如酸性[C.L.Perrin,et al.,J.Am.Chem.Soc.,2007,129,4490；A.Streitwieser et al.,J.Am.Chem.Soc.,1963,85,2759；]、鹼性[C.L.Perrin et al.,J.Am.Chem.Soc.,2005,127,9641；C.L.Perrin,et al.,J.Am.Chem.Soc.,2003,125,15008；C.L.Perrin in Advances in Physical Organic Chemistry,44, 144]、親脂性[B.Testa et al.,Int.J.Pharm.,1984,19(3),271]))及/或代謝分佈且可導致母化合物對代謝物之比率或所形成之代謝物的量改變。該等改變可產生某些治療優勢且因此在一些情況下可為較佳的。已報導代謝速率及代謝轉換減少，其中代謝率改變(A.E.Mutlib et al.,Toxicol.Appl.Pharmacol.,2000,169,102；D.J.Kushner et al.,Can.J.Physiol.Pharmacol.,1999,77,79)。在曝露於母藥物及代謝物時此等改變可具有關於含氘之通式(I)化合物的藥效學、耐受性及功效之重要結果。在一些情況下，氘取代減少或消除不要或毒性代謝物之形成且增強所要代謝物之形成(例如，奈韋拉平(Nevirapine)：A.M.Sharma et al.,Chem.Res.Toxicol.,2013,26,410；依法韋侖(Efavirenz)：A.E.Mutlib et al.,Toxicol.Appl.Pharmacol.,2000,169,102)。在其他情況下，氘化之主要作用為降低全身性清除率。結果，化合物之生物半衰期增加。潛在臨床益處將包括以降低之峰含量及增加之波谷含量維持類似的全身性曝露之能力。視特定化合物之藥物動力學/藥效學關係而定，此將導致較低副作用及增強功效。ML-337(C.J.Wenthur et al.,J.Med.Chem.,2013,56,5208)及奧當卡替(Odanacatib)(K.Kassahun et al.,WO2012/112363)為此氘化作用之實例。已報導其他情況，其中代謝速率降低導致藥物之曝露增加而不改變全身性清除率(例如，羅非考昔(Rofecoxib)：F.Schneider et al.,Arzneim.Forsch./Drug.Res.,2006,56,295；特拉匹偉(Telaprevir)：F.Maltais et al.,J.Med.Chem.,2009,52,7993)。顯示此作用之氘化藥物可具有降低之給藥要求(例如，用於達成所要作用之較低劑量數目或較低劑量)及/或可產生較低代謝物負載。

通式(I)化合物可具有多個用於代謝之潛在攻擊位點。為使上述對物理化學性質及代謝分佈之作用最佳化，可選擇具有某種模式之一或多個氘-氫交換的含氘之通式(I)化合物。特別地，含氘之通式(I)化合物的氘原子連接至碳原子及/或位於通式(I)化合物之彼等位置處，該等位置為用於代謝酶諸如細胞色素P₄₅₀之攻擊位點。

若本文使用措詞化合物、鹽類、多晶型體、水合物、溶劑合物等等之複數形式，則其亦意謂單一化合物、鹽、多晶型體、異構物、水合物、溶劑合物或其類似物。

「穩定化合物」或「穩定結構」意指化合物足夠穩固以經受從反應混合物分離至可用純度，及調配成有效治療劑。

視各種所要取代基之位置及性質而定，本發明化合物可選擇地地含有一或多個不對稱中心。一個不對稱碳原子可能以(R)或(S)組態存在，其可導致外消旋混合物。在某些情況下，不對稱性亦可能由於圍繞既定鍵(例如與指定化合物之兩個經取代芳族環鄰接之中心鍵)限制性旋轉而存在。較佳化合物為彼等產生更合乎需要的生物活性之化合物。本發明化合物的經分離之純或部分純化的異構物及立體異構物或外消旋混合物亦包括在本發明範疇內。該等材料之純化及分離可藉由此項技術中已知的標準技術實現。

光學異構物可藉由根據習知方法來解析外消旋混合物(例如藉由使用光活性酸或鹼形成非鏡像異構鹽，或形成共價非鏡像異構物)來獲得。適當酸類之實例為酒石酸、二乙醯基酒石酸、二甲苯甲醯基酒石酸及樟腦磺酸。非鏡像異構物之混合物可根據其物理及/或化學差異而藉由此項技術中已知的方法(例如藉由層析法或分步結晶)分離成其個別非鏡像異構物。接著自經分離之非鏡像異構鹽類釋放光活性鹼類或酸類。分離光學異構物之不同方法包括在有或沒有習知衍生下使用對掌性層析(例如使用對掌性相之HPLC管柱)，最佳化選擇以使鏡像異構物之分離最大化。使用對掌性相之適當對掌性HPLC管柱為市售，諸如彼等由Daicel製造者(例如Chiracel OD及Chiracel OJ)，尤其，其全部可例行地選擇。亦可用在有或沒有習知衍生下的酶分離。本發明光活化合物同樣可藉由利用光活性起始材之對掌性合成獲得。為了區分不同類型的異構物彼此，參考IUPAC Rules Section E(Pure Appl Chem 45,11-30,1976)。

本發明包括本發明化合物之所有可能的立體異構物，其呈單一立體異構物或呈該等立體異構物(例如(R)-或(S)-異構物)於任何比率之任何混合物。例如，本發明化合物之單一立體異構物(例如單一鏡像異構物或單一非鏡像異構物)的分離係藉由任何適當技術狀態方法(諸如層析法，尤其對掌性層析法)達成。

另外，本發明化合物可能以互變異構物存在。本發明包括本發明化合物之所有可能的互變異構物，其呈單一互變異構物或該等互變異構物於任何比率之任何混合物。

另外，本發明化合物可以N-氧化物存在，其定義為本發明化合物之至少一個氮經氧化。本發明包括所有該等可能的N-氧化物。

本發明亦涵蓋本發明化合物的可用形式，諸如代謝物、水合物、溶劑合物、鹽類，特別是醫藥上可接受的鹽類、及/或共沈澱物。

本發明化合物可以水合物或溶劑合物存在，其中本發明化合物含有例如極性溶劑(特別是水、甲醇或乙醇)作為化合物之晶格的結構單元。極性溶劑(特別是水)之量可能以化學計量或非化學計量比率存在。在化學計量溶劑合物(例如水合物)之情況下，半-(hemi-)、半-((semi-)、單-、倍半-、二-、三-、四-、五-等等溶劑合物或水合物分別為可能的。本發明包括所有該等水合物或溶劑合物。在本發明的情況下，水合物為較佳溶劑合物。

特別是，根據本發明式(I-B)之3,3,3-三氟-2-丙酮基衍生物(酮形式)亦可以3,3,3-三氟-2,2-二羥基形式(I-B)'(水合物形式)存在(參見下述流程圖1)；兩種形式都被本發明明確地包含。

另外，本發明化合物可能以游離形式(例如游離鹼或游離酸)或兩性離子存在，或可以鹽形式存在。該鹽可為藥劑學中習用之任何鹽(有機或無機加成鹽，特別是任何醫藥上可接受的有機或無機加成鹽)，或其係使用(例如)於分離或純化本發明化合物。

術語「醫藥上可接受的鹽」係指本發明化合物之無機或有機酸加成鹽。例如，參見S.M.Berge,et al.“Pharmaceutical Salts,”J.Pharm.Sci.1977,66,1-19。

本發明化合物之適當醫藥上可接受的鹽可為(例如)本發明化合物之在(例如)鏈或環中具有氮原子之酸加成鹽，其具有足夠的鹼性，諸如與無機酸或與「礦酸」，諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、胺磺酸、焦硫酸(bisulfuric)、磷酸、或硝酸，或與有機酸諸如甲酸、乙酸、乙醯乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水楊酸、2-(4-羥基苯甲醯基)-苯甲酸、樟腦酸、肉桂酸、環戊烷丙酸、二葡萄糖酸、3-羥基-2-萘甲酸、菸鹼酸、雙羥萘酸、果膠酯酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、2-羥基乙磺酸、伊康酸(itaconic acid)、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟腦磺酸、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、丁二酸、蘋果酸、己二酸、褐藻酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、D-葡萄糖酸、杏仁酸、抗壞血酸、葡糖庚酸、甘油磷酸、天冬胺酸、磺基水楊酸、或硫氰酸之酸加成鹽，例如。

另外，另一種適宜之具有足夠酸性的本發明化合物之醫藥上可接受的鹽為鹼金屬鹽(例如鈉及鉀鹽)、鹼土金屬鹽類(例如鈣、鎂或鍶鹽)或鋁鹽或鋅鹽、或衍生自氨或具有1至20個碳原子的有機一級、二級或三級胺(諸如乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二異丙胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二環己胺、二甲胺基乙醇、二胺基乙醇、參(羥甲基)胺基甲烷、普魯卡因(procaine)、二苄胺、N-甲基嗎啉、精胺酸、賴胺酸、1,2-乙二胺、N-甲基哌啶、N-甲基-還原葡糖胺、N,N-二甲基-還原葡糖胺、N-乙基-還原葡糖胺、1,6-己二胺、葡萄胺糖、肌胺酸、絲胺醇、2-胺基-1,3-丙二醇、3-胺基-1,2-丙二醇、4-胺基-1,2,3-丁三醇)之銨鹽、或與具有1至20個碳原子的四級銨離子(諸如四甲基銨、四乙基銨、四(正丙基)銨、四(正丁基)銨或N-苄基-N,N,N-三甲基銨、膽鹼或苄烷銨)之鹽。

熟習此項技術者應進一步認知：所主張化合物之酸加成鹽類可能經由許多已知方法中之任一者藉由化合物與適當無機酸或有機酸之反應而製備。或者，本發明之酸性化合物的鹼及鹼土金屬鹽類係經由各種已知方法藉由使本發明化合物與適當鹼反應而製備。

本發明包括本發明化合物之所有可能鹽，其係呈單一鹽或該等鹽於任何比率之任何混合物。

在本文中，特別是在實驗部分中，對於本發明之中間物的合成及實例而言，當以與對應鹼或酸之鹽形式提及化合物時，如藉由個別製備及/或純化方法獲得，該鹽形式的精確化學計量組成在大多數情況下為未知的。

除非另有規定，否則關於鹽類之化學名稱或結構式的詞尾，諸如「鹽酸鹽」、「三氟乙酸鹽」、「鈉鹽」或「x HCl」、「x CF₃COOH」、「x Na⁺」(例如)意指沒有指定其鹽形式之化學計量。

此類似地適用於其中已藉由所述製備及/或純化方法獲得呈具有(若限定)未知化學計量組成之溶劑合物(諸如水合物)之合成中間物或實施例化合物或其鹽之情形。

此類似地適用於其中已藉由所述製備及/或純化方法以具有(若定義)未知化學計量組成的溶劑合物(諸如水合物)獲得合成中間物或實例化合物或其鹽類的情況。

此外，本發明包括本發明化合物之所有可能的晶形或多晶形，其呈單一多晶形，或呈於任何比率之一種以上的多晶形之混合物。

在一不同的具體實例中，本發明關於上述式(I)化合物，其中R¹ 表示下式之基團

其中#¹ 表示與氮原子連接的點，R² 表示選自下列的基團：三氟甲基、三氟甲氧基、乙氧基、-C(=O)N(H)CH₃和-S(=O)₂CH₃，或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。

在一較佳具體實例中，本發明關於關於上述根據式(I)之化合物，其中R¹ 表示下式之基團

其中#¹ 表示與氮原子連接的點，R² 表示選自下列的基團：三氟甲基和三氟甲氧基。或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。

根據另一較佳具體實例，本發明涵蓋上述通式(I)化合物，其中 R¹ 表示下式之(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基

其中#¹ 表示與氮原子連接的點，或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。

根據另一較佳具體實例，本發明涵蓋上述通式(I)化合物，其中R¹ 表示下式之(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基

根據另一較佳具體實例，本發明涵蓋上述通式(I)化合物，其中Ar 表示下式之基團

其中#² 表示與氮原子連接的點，或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。

在第一態樣的另一特殊具體實例中，本發明涵蓋在「本發明第一態樣的另一具體實例」標題下之上述具體實例的一或多者之組合。

本發明涵蓋上述通式(I)化合物之本發明具體實例或態樣內的任何子組合。

本發明涵蓋通式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)和(VIII)中間化合物之本發明具體實例或態樣內的任何子組合。本發明涵蓋以下本文的實施例部分中所揭示之通式(I)化合物。

根據第二態樣，本發明涵蓋製備如上述所定義的通式(I)化合物之方法，該方法包含下列步驟[A]使式(II)中間化合物：

其中R¹係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，及R³ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基，在第一步驟中在鹼存在下與通式(III)化合物反應：

其中R⁴ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基，以產生中間化合物，然後使其在第二步驟中在鹼存在下與通式(IV)肼化合物或其各自的鹽反應其中Ar係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，從而產生通式(V)化合物：其中R¹和Ar係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，及 R⁴ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基，接著後續步驟[B]使步驟[A]中所得式(V)化合物與氨反應，從而產生通式(I)化合物：

其中R¹和Ar係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，可選擇地接著步驟[C]使用已知的氧化方法，將通式(I-A)之醇類轉化：

其中Ar係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，至通式(I-B)之酮類：

其中Ar係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，在適當情況下，各[A]、[B]和[C]可選擇地接著(i)將如此獲得之式(I)化合物分離成其各自的鏡像異構物，及/或(ii)藉由用對應溶劑及/或酸類或鹼類進行處理而將式(I)化合物轉化成其各自的水合物、溶劑合物、鹽類及/或鹽類的水合物或溶劑合物。

本發明涵蓋製備本發明通式(I)化合物之方法，該方法包含如本文實驗部分中所述之步驟。

下述流程圖和程序說明至本發明通式(I)化合物之合成路徑且不意欲限制。熟習此項技術者清楚，可以各種方式來修改如流程圖2、3、4、5、6和7中所例示之轉換次序。此等流程圖中所例示之轉換次序因此不意欲限制。此外，可在所例示之轉換之前及/或之後可達成取代基R¹、R²、R³、R⁴和Ar中之任一者之相互轉化。此等修飾可為(諸如)引入保護基、裂解保護基、使官能基還原或氧化、鹵化、金屬化、取代或熟習此項技術者已知的其他反應。此等轉化包括引入官能性的轉化，其允許取代基進一步相互轉化。熟習此項技術者熟知適當保護基及其引入及裂解(參見例如T.W.Greene and P.G.M.Wuts in Protective Groups in Organic Synthesis,3rd edition,Wiley 1999)。具體實施例係描述於後續段落中。

多組分環化(II)→(V)首先係藉由使式(II)亞胺酯與式(III)醯氯在鹼存在下反應以形成中間物，其在後續步驟中與式(IV)醯基肼化合物反應來進行。通常不分離所形成的中間物且經過二步驟之反應係在一鍋中進行。用於式(I)之醯基肼化合物亦以其鹽類形式使用，諸如鹽酸鹽或甲苯磺酸鹽。在鹼性反應條件下，肼鹽將再轉化成游離鹼形式。在此方法中接著可調整所添加之鹼的量。

用於二步驟之適當鹼類通常為三級胺鹼類，諸如N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)、三乙胺、三異丙胺、N-甲基咪唑、N-甲基嗎啉、吡啶和4-(N,N-二甲胺基)吡啶。較佳地，使用N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)作為鹼。反應係在惰性有機溶劑(諸如二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、甲基第三丁基醚、四氫呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、甲苯、吡啶、乙酸乙酯、乙腈或N,N-二甲基甲醯胺)中，或在這些溶劑的混合物中實施。較佳地使用四氫呋喃或二烷或其混合物作為溶劑。第一步驟通常係在-10℃至+120℃之範圍的溫度下，較佳在0℃下進行。第二步驟通常係在+20℃至+120℃之範圍的溫度下，較佳在室溫下進行。伴隨微波照射在此反應中以及在+60℃至+150℃之範圍的溫度下，較佳地在+120℃下可具有有利的作用。

胺解反應(V)→(I)通常係在氨之溶液中進行。用於此步驟之適當氨溶液為飽和氨溶液，特別是氨在甲醇、乙醇、異丙醇、四氫呋喃、二烷或水或其混合物中之溶液。較佳地，使用甲醇氨溶液。反應較佳地係在氨溶液中而無任何另外的反應溶劑直接進行。此步驟通常係在+20℃至+120℃之範圍的溫度下，較佳地在室溫下進行。伴隨微波照射在此反應中以及在+60℃至+150℃之範圍的溫度下，較佳地在+120℃下可具有有利的作用。

氧化反應(I-A)→(I-B)係使用從文獻[例如JOC,1983,48,4155(Dess Martin氧化)；Tet Lett,1994,35,3485(IBX氧化)；JOC,1970,35,3589(酸重鉻酸鹽氧化)；Tet Lett,1979,399(PDC氧化)；Tetrahedron,1978,34,1651(Swern氧化)]得知的習知氧化方法進行。因此，通式(I-A)化合物中之醇基較佳係使用Dess-Martin過碘烷(DMP)氧化。在一典型程序中，該反應係在氯甲烷中於0℃之溫度下及隨後加熱至室溫來進行。

通式(I)化合物，其中Ar包含式-S(=O)₂CH₃之碸取代基，可藉由該項技術中已知的習用氧化方法從各個對應的甲硫基前驅物製備，諸如與3-氯過氧苯甲酸(mCPBA)之氧化。

如上述所定義之通式(II)化合物可藉由一種包含下列步驟之方法製備：[a]使下列式(VI)中間化合物：

其中R¹係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，與通式(VII)腈化合物反應，其中X表示脫離基，諸如氯、溴、碘、甲磺酸酯或甲苯磺酸酯，特別是氯或溴，從而產生通式(VIII)化合物

其中R¹係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，接著後續步驟[b]使步驟[a]中所得之式(VIII)化合物與鹼醇鹽(較佳地甲醇鈉)反應，從而產生通式(II)化合物，

其中R¹係如關於如上述所定義的通式(I)化合物所定義，及R³ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基。

N-烷基化反應(VI)+(VII)→(VIII)(步驟[a])通常在鹼存在下進行。典型且示例性的鹼類包括在乙腈、甲基異丁基酮、二烷、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯啶酮、二甲亞碸和環丁碸中之碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、N,N-二異丙基乙胺、三乙胺、第三丁酸鈉或第三丁酸鉀，較佳者為在甲基異丁基酮或乙腈中之碳酸鉀。反應可可選擇地以添加烷基化觸媒(諸如(例如)溴化鋰、碘化鈉、碘化鋰、溴化四正丁基銨、碘化四正丁基銨或氯化苯甲基三乙基銨)之有利方式來進行。反應通常在從+40℃至+120℃，較佳從+60℃至+80℃的溫度範圍內進行。該等反應可在大氣壓下、在升壓下或在減壓(例如在從0.5至5巴下)下進行；通常，反應在大氣壓下進行。經較長的時間間隔緩慢地進行烷基化劑(VII)之添加可能是有利的。

可藉由熟習該項技術者已知的標準反應方案來達成轉化至通式(II)的亞胺酯(步驟[b]：(VIII)→(II))。反應通常係在鹼性反應條件下藉由與鹼醇反應鹽來進行。可使用之典型鹼類為在甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、異丁醇和第三丁醇中之甲醇鈉、乙醇鈉、丙醇鈉、異丙醇鈉、第三丁酸鈉或第三丁酸鉀。較佳者為在甲醇中之甲醇鈉。反應在從+20至+80℃，較佳在從+20至+40℃的溫度範圍內進行。

或者，通式(VIII)腈化合物也可可選擇地如下述合成流程圖2中所示製備： TFAA=三氟乙酸酐

醯胺偶合(IX)→(X)可在縮合劑或活化劑的幫助下在鹼存在下直接進行或經過經由醯氯或羧酸咪唑化物之二步驟進行。方法步驟(IX)→(X)中用於醯胺形成之典型縮合和活化劑包括(例如)碳二亞胺類諸如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二異丙基-、N,N'-二環己基碳二亞胺(DCC)或N-(3-二甲胺基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、光氣衍生物諸如N,N'-羰基二咪唑(CDI)、1,2-唑鎓化合物諸如2-乙基-5-苯基-1,2-唑鎓-3-硫酸鹽或2-第三丁基-5-甲基-異唑鎓過氯酸鹽、醯胺基化合物諸如2-乙氧基-1-乙氧羰基-1,2-二氫喹啉、或氯甲酸異丙酯、丙膦酸酐、氰基膦酸二乙酯、雙(2-側氧-3-唑啶基)磷醯氯、苯并三唑-1-基氧基參(二甲胺基)鏻六氟磷酸鹽、苯并三唑-1-基氧基參(吡咯啶基)鏻六氟磷酸鹽(PyBOP)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HBTU)、2-(2-側氧基-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TPTU)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽(HATU)或O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽(TCTU)，可選擇地與其它添加劑諸如1-羥基苯并三唑(HOBt)或N-羥基琥珀醯亞胺(HOSu)組合。

醯氯通常係使用亞硫醯氯或草醯氯在惰性溶劑如二氯甲烷或N,N-二甲基甲醯胺中製備。也可能使用所述溶劑的混合物。

典型且示例性的鹼類包括在乙腈、甲基異丁基酮、二烷、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯啶酮、二甲亞碸和環丁碸中之碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸銫、N,N-二異丙基乙胺、三乙胺、第三丁酸鈉或第三丁酸鉀，較佳者為在甲基異丁基酮或乙腈中之碳酸鉀。反應可可選擇地以添加烷基化觸媒(諸如(例如)溴化鋰、碘化鈉、碘化鋰、溴化四正丁基銨、碘化四正丁基銨或氯化苯甲基三乙基銨)之有利方式來進行。轉化至腈(X)→(XI)可在脫水劑的幫助下進行。典型脫水劑包括(例如)三氟乙酸酐、五氧化二磷(P₄O₁₀)、氯化磷醯(POCl₃)、五氯化磷(PCl₅)、CCl₄-PPh₃(Appel試劑)、六甲基磷醯胺(HMPA)；N-(三乙基銨磺醯基)胺甲酸甲酯(Burgess試劑)、氯化(氯亞甲基)二甲基亞銨(Vilsmeier試劑)、草醯氯/DMSO和亞硫醯氯(SOCl₂)。

用於方法步驟(IX)→(X)和(X)→(XI)二者之典型且示例性的溶劑為(例如)醚類諸如二乙醚、二烷、四氫呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚、烴類諸如苯、甲苯、二甲苯、己烷、環己烷或礦物油、餾份、鹵化烴類諸如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯，或其他溶劑諸如丙酮、乙酸乙酯、吡啶、二甲亞碸、N,N-二甲基甲醯胺、N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)或N-甲基吡咯啶酮(NMP)。亦可能使用所述溶劑之混合物。

在一典型且較佳的程序中，羧酸(IX)首先係與三甲基乙醯氯在吡啶存在下反應以形成中間物，該中間物在後續步驟中與氨反應。通常不分離所形成的中間物且經過二步驟之反應係在一鍋中進行。適合作為第一步之鹼類較佳為吡啶、4-(N,N-二甲胺基)吡啶或N,N-二異丙基乙胺(DIPEA)。甲醯胺(X)轉化成腈(VIII)然後通常係藉由與三氟乙酸酐反應來進行。二反應皆在惰性有機溶劑(較佳四氫呋喃)中進行。

式(VI)和(IX)之化合物可藉由國際專利申請案WO 2010/105770和WO 2011/104322中所述之程序來合成(亦參見下述合成流程圖3和4)。

式(III)、(IV)和(VII)之化合物為市售、從文獻中得知，或者可藉由調整文獻中所述的標準方法而從容易獲得的起始材料製備。關於製備起始材料的詳細程序和文獻參考資料也可發現於實驗部分中的製備起始材料和中間物的部分。

本發明化合物的製備可利用下列合成流程圖來說明： [參見國際專利申請案WO 2011/104322-A1]。

流程圖4 [參見國際專利申請案WO 2011/104322-A1]。

TFAA：三氟乙酸酐

流程圖7

如本文中所述，本發明通式(I)化合物可藉由熟習該項技術者已知的任何方法轉化成任何的鹽，較佳醫藥上可接受的鹽類。類似地，本發明通式(I)化合物之任何鹽藉由熟習該項技術者已知的任何方法轉化成游離化合物。

本發明化合物具有有價值的藥理學性質並可用於人類和其他哺乳動物中預防及/或治療各種疾病和疾病誘發的狀態。本發明通式(I)化合物證明有價值的藥理作用範圍和藥物動力學分佈，兩者都無法預測。本發明化合物已令人驚奇地發現有效抑制血管加壓素V1a受體且因此該等化合物可能用於治療及/或預防人類和動物中之疾病，較佳腎臟和心血管疾病在。

在本發明之情況下，術語「治療(treatment或treating)」係包括抑制、延遲、緩解、減輕、阻止、降低或引起消退疾病、病症、病況或狀態、其發展及/或進程，及/或其癥候群。術語「預防(prevention或preventing)」包括降低得到、接觸或經驗疾病、病症、病況或狀態、其發展及/或進程，及/或其癥候群之風險。術語預防包括預防(prophylaxis)。病症、疾病、病況或狀態之治療或預防可為部份或完全的。

整份文件中，就簡單起見，係使用單數語優先於複數語，但若無其他陳述，則一般意指包括複數語。例如，「一種治療病患疾病之方法，係包含將有效量之式(I)化合物投予至病患」係指包括同時治療一種以上的疾病以及投予一種以上的式(I)化合物。

本發明化合物為血管加壓素V1a受體之高效且特別是選擇性拮抗劑。本發明化合物因此預期具有作為供治療及/或預防疾病(特別是供治療及/或預防心血管和腎臟疾病)之治療劑的高價值。

如本文所用，術語"血管加壓素V1a受體拮抗劑"係指藉由抑制(部份地或完全地)或阻斷血管加壓素V1a受體而作用並藉此預防受體被血管加壓素活化之化合物。

在一具體實例中，本文所述化合物對V1a受體具有活性。在另一具體實例中，根據B-1中的研究，本文所述化合物呈現V1a受體之抑制，具有IC₅₀<20nM。在另一具體實例中，根據B-1中的研究，本文所述化合物呈現V1a受體之抑制，具有IC₅₀<10nM。在另一具體實例中，根據B-1中的研究，本文所述化合物呈現V1a受體之抑制，具有IC₅₀<5nM。在另一具體實例中，根據B-1中的研究，本文所述化合物呈現V1a受體之抑制，具有IC₅₀<1nM。

在另一具體實例中，本文所述化合物對V1A受體具有選擇性活性，且對其他血管加壓素受體(諸如V1b及/或V2亞型)活性較少、實質上較少活性，及/或非活性。在另一具體實例中，如根據B-1中的研究測定，相較於V2受體，本文所述化合物對V1a受體具有至少10倍的選擇性。在另一具體實例中，如根據B-1中的研究測定，相較於V2受體，本文所述化合物對V1a受體具有至少15倍的選擇性。在另一具體實例中，如根據B-1中的研究測定，相較於V2受體，本文所述化合物對V1a受體具有至少20倍的選擇性。在另一具體實例中，如根據B-1中的研究測定，相較於V2受體，本文所述化合物對V1a受體具有至少30倍的選擇性。在另一具體實例中，如根據B-1中的研究測定，相較於V2受體，本文所述化合物對V1a受體具有至少40倍的選擇性。

根據本發明之化合物係適合於治療及/或預防腎病，特別是急性和慢性腎臟疾病、糖尿病性腎病、及急性和慢性腎衰竭。一般術語'腎病'或'腎臟疾病'描述其中腎臟不能從血液中過濾和清除廢物之病況的一類別。有兩種腎臟疾病之主要形式：急性腎臟疾病(急性腎損傷，AKI)和慢性腎臟疾病(CKD)。根據本發明之化合物可以進一步使用於治療及/或預防多重急損傷諸如缺血再灌注損傷、對比劑投與、心肺分流手術、休克和敗血症所引起之性腎損傷的後遺症。就本發明之意義而言，術語腎衰竭或腎功能不全包含腎功能不全之急性和慢性表現二者，以及潛在或相關的腎臟疾病諸如腎臟灌注不足、透析中低血壓(intradialytic hypotension)、阻塞性尿路病變、腎小球病、IgA腎病變、腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、腎小球硬化、腎小管間質疾病、神經性疾病例如原發性及先天性腎臟疾病、腎炎、Alport症候群、腎臟炎症、免疫性腎臟疾病諸如腎移植排斥反應、及免疫複合物引起的腎病、有毒物質引起的腎病變、造影劑引起的腎病變；最小變化腎小球性腎炎(類脂質)；膜性腎小球性腎炎；局部性腎絲球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis，FSGS)；溶血性尿毒症候群(HUS)、類澱粉變性症、古巴士德氏(Goodpasture's)症候群、華格納氏(Wegener's)肉芽病、舍恩萊因-亨諾紫癜(Purpura Schönlein-Henoch)、糖尿病性和非糖尿病腎病變、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化、高血壓性腎硬化和腎病症候群，該等可以診斷來表徵，例如，藉由肌酸酐及/或水排泄異常減少、尿素、氮、鉀及/或肌酸酐之血液濃度異常增加、腎臟酵素(諸如、例如、麩胺醯基合成酶)的活性改變、尿液滲透壓或尿量改變、微白蛋白尿增加、大量蛋白尿、腎小球及小動脈的病變、腎小管擴張、高磷酸鹽血症及/或需要透析。本發明亦包含根據本發明之化合物用於治療及/或預防下列的用途：腎功能不全後遺症，例如肺水腫、心衰竭、尿毒症、貧血、電解質紊亂(例如，高鉀血症、低鈉血症)以及在骨骼和碳水化合物代謝紊亂。根據本發明之化合物亦適合於治療及/或預防多囊性腎臟疾病(PCKD)及ADH分泌異常症候群(SIADH)。

在本內文中可以本發明化合物治療及/或預防之心血管疾病包括(但不限於)下列：急性和慢性心衰竭(包括惡化性慢性心衰竭(或因心衰竭住院)及包括鬱血性心衰竭)、動脈高血壓、頑固性高血壓、肺動脈高血壓、冠心病、穩定型及非穩定型心絞痛、心房及心室節律不整、心房及心室節律紊亂和傳導障礙(例如I-III度房室傳導阻斷(AVB I-III))、上心室頻脈、心房纖維顫動、心房撲動、心室纖維顫動、心室撲動、心室頻脈、尖端扭轉性心動過速、心房和心室期外收縮、房室交接區性期前收縮(AV-junction extrasystoles)、病竇症候群、暈厥、AV-結內折返性心動過速和吳爾夫巴金森懷特(Wolff-Parkinson-White)症候群、急性冠狀動脈症候群(ACS)、自體免疫心臟疾病(心包炎、心內膜炎、心瓣膜炎、主動脈炎、心肌病變)、休克諸如心因性休克、敗血性休克和過敏性休克、動脈瘤、拳師心肌炎(心室早期收縮)，再者血栓栓塞疾病和缺血諸如末梢灌注障礙、再灌注損傷、動脈和靜脈血栓、心肌機能不全、內皮功能障礙、微血管和大血管損傷(血管炎)以及用於預防再狹窄例如血栓溶解治療、經皮腔內血管成形術(PTA)和經皮腔內冠狀動脈成形術(PTCA)、心臟移植和繞道手術、動脈硬化、脂質代謝障礙、低脂蛋白血症、血脂異常、高三酸甘油酯血症、高脂血症和混合性高脂血症、高膽固醇血症、β脂蛋白血症、麥固醇血症(sitosterolaemia)、黃瘤症(xanthomatosis)、丹吉爾病(Tangier disease)、脂肪過多、肥胖症、代謝症候群、短暫性及缺血發作、中風、炎性心血管疾病、末梢和心血管疾病、末梢循環病症、冠狀動脈和末梢動脈之痙攣，以及水腫諸如，例如肺水腫、腦水腫、腎水腫和心衰竭有關的水腫。

就本發明之意義而言，術語心衰竭亦包括更特定或相關的疾病形式諸如右心衰竭、左心衰竭、全心衰竭、缺血性心肌病變、擴張型心肌病變、先天性心臟病、心瓣膜缺損、心瓣膜缺損的心衰竭、二尖瓣狹窄、二尖瓣閉鎖不全、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣閉鎖不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣閉鎖不全、肺動脈瓣狹窄、肺動脈瓣閉鎖不全、混合性心瓣閉鎖不全、心肌發炎(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病心衰竭、酒精中毒心肌病變、心儲積症、正常收縮分率的心衰竭(HFpEF或舒張性心衰竭)和低收縮分率的心衰竭(HFrEF或收縮性心衰竭)。

本發明化合物特別可用於治療及/或預防心腎症候群(CRS)及其各種亞型。此術語包含某些藉其在一器官中急性或慢性功能障礙可能引發其他的急性和慢性功能障礙之心臟和腎臟之病症。

再者，根據本發明之化合物可用於治療及/或預防末梢動脈疾病(PAD)(包括跛行及包括嚴重四肢缺血)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)(包括CMD型1-4)、原發性和續發性Raynaud氏現象、微循環障礙、末梢和自律神經病變、糖尿病微小血管病變、糖尿病視網膜病變、糖尿病肢潰瘍、壞疽、CREST症候群、紅斑性病症、風濕病及用於促進傷口癒合。

此外，根據本發明之化合物係適合於治療泌尿系疾病及男性和女性泌尿系統之疾病，諸如，例如良性前列腺症候群(BPS)、良性前列腺增生症(BPH)、良性前列腺肥大(BPE)、膀胱出口阻塞(BOO)、下泌尿道症候群(LUTS)、神經性膀胱過動(OAB)、間質性膀胱炎(IC)、尿失禁(UI)諸如(例如)混合型、急迫性、應力性或溢流性失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆疼痛、勃起功能障礙和子宮內膜異位。

根據本發明之化合物亦可用於治療及/或預防發炎性疾病、氣喘性疾病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、急性呼吸窘迫症候群(ARDS)、急性肺損傷(ALI)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)、肺纖維變性、肺氣腫(例如抽菸引起的肺氣腫)和囊腫纖維化(CF)。此外，本發明化合物可用於治療及/或預防肺動脈高血壓(PAH)和其他形式的肺高血壓(PH)，包括與左心室疾病、HIV感染、鐮狀細胞性貧血、血栓栓塞(CTEPH)、類肉瘤病、慢性阻塞性肺疾病(COPD)或肺纖維變性有關的肺高血壓。

另外，本發明化合物可用於治療及/或預防肝硬化、腹水、糖尿病和糖尿病併發症諸如(例如)神經病變和腎病變。

另外，本發明化合物係適合於治療及/或預防中樞神經病症諸如焦慮狀態、抑鬱、青光眼、癌諸如特定肺腫瘤、和晝夜節律失調諸如時差和輪班工作。

此外，根據本發明之化合物可用於治療及/或預防疼痛狀況、腎上腺疾病諸如(例如)嗜鉻細胞瘤和腎上腺中風、腸道疾病諸如(例如)Crohn氏症和腹瀉、月經異常諸如(例如)痛經、子宮內膜異位、早產和過早收縮(tocolysis)。

由於彼等的活性和選擇性，本發明化合物被認為是特別適合於治療及/或預防急性和慢性腎臟疾病(包括糖尿病腎病變)、急性和慢性心衰竭、子癎前症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、Raynaud氏症候群和痛經。

上述疾病已在人類中很好地表徵，但也以相當的病因存在於其他哺乳動物，並且可用本發明之化合物和方法來治療彼等。

因此，本發明另外關於根據本發明之化合物用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)之用途。

本發明另外關於根據本發明之化合物用於製備供治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)之醫藥組成物之用途。

本發明另外關於根據本發明之化合物在用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)之方法之用途。

本發明另外關於一種藉由使用有效量的至少一種根據本發明之化合物治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)之方法。

根據另一態樣，本發明涵蓋醫藥組合(特別是藥物)，其包含至少一種本發明通式(I)化合物及至少一或多種另外的活性成分，特別是用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)。

特別地，本發明涵蓋一種醫藥組合，其包含：●一或多種第一活性成分，特別是如上述所定義的通式(I)化合物，及●一或多種其他活性成分，特別是用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)。

本發明中之術語「組合」如熟習此項技術者所知般使用，該組合可能為固定組合、非固定組合或部件之套組。

本發明中之「固定組合」如熟習此項技術者所知般使用，且定義為其中例如第一活性成分(諸如一或多種本發明通式(I)化合物)及另一活性成分一起存在於一個單位劑型或單一實體中的組合。「固定組合」之一個實例為其中第一活性成分及另一活性成分存在於同時投與之混合物中(諸如於調配物中)的醫藥組成物。「固定組合」之另一實例為其中第一活性成分與另一活性成分存在於一個單元中而未混合的醫藥組合。

本發明中之「非固定組合」或「部件之套組」如熟習此項技術者所知般使用，且定義為其中第一活性成分與另一活性成分一起存在於超過一個單位的組合。非固定組合或部件之套組的一個實例為其中該第一活性成分與該另一活性成分分開存在之組合。非固定組合或部件之套組中的組分可能分開、依序、同時、並行或按時間順序錯開地投與。

本發明化合物可以單一藥劑或與一或多種其他醫藥活性成分組合投與，其中該組合不會引起不可接受之副作用。本發明亦涵蓋該等醫藥組合。例如，本發明化合物可與用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)的已知藥劑組合使用。

特別地，本發明化合物可以固定或分開的組合與下列一起使用

●抗血栓劑，例如且較佳來自下列群組：血小板凝集抑制劑、抗凝血劑或纖溶酶原物質；

●降血壓劑，例如且較佳來自下列群組：鈣拮抗劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、NEP抑制劑、血管肽酶抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻斷劑、β-受體阻斷劑、礦皮質素受體拮抗劑及利尿劑；

●抗糖尿病劑(降血糖或抗高血糖劑)，諸如例如且較佳為胰島素及衍生物、磺醯脲類、雙胍類，噻唑啶二酮類、阿卡波糖(acarbose)、DPP4抑制劑、GLP-1類似物、或SGLT抑制劑(格列淨類(gliflozins))。

●有機硝酸鹽和NO-供體，例如硝普鈉(sodium nitroprusside)、硝化甘油、單硝酸異山梨酯、二硝酸異山梨酯、脈導明(molsidomine)或SIN-1，及吸入的NO；

●抑制環單磷酸鳥苷(cGMP)之降解的化合物，例如磷酸二酯酶(PDE)1、2、5及/或9之抑制劑，特別是PDE-5抑制劑，諸如西地那非(sildenafil)、伐地那非(vardenafil)、他達拉非(tadalafil)、烏地那非(udenafil)、達生他非(dasantafil)、阿伐那非(avanafil)、米羅那非(mirodenafil)、洛地那非(lodenafil)、CTP-499或PF-00489791；

●利鈉肽(natriuretic peptide)，諸如例如心房利鈉肽(ANP，阿那立肽(anaritide))、B-型利鈉肽或腦利鈉肽(BNP，奈西立肽(nesiritide))、C-型利鈉肽(CNP)或腎利尿素(urodilatin)；

●鈣敏化劑，諸如例如且較佳為左西孟旦(levosimendan)；

●可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之NO-和血基質-獨立性活化劑，例如且較佳為WO 01/19355、WO 01/19776、WO 01/19778、WO 01/19780、WO 02/070462和WO 02/070510中所述的化合物；

●鳥苷酸環化酶(sGC)之NO-獨立性但血基質-依賴性刺激劑，例如且較佳為WO 00/06568、WO 00/06569、WO 02/42301、WO 03/095451、WO 2011/147809、WO 2012/004258、WO 2012/028647和WO 2012/059549中所述的化合物；

●刺激cGMP合成之藥劑，例如且較佳為sGC調節劑，例如且較佳為利奧西呱(riociguat)、希納西呱(cinaciguat)、威利西呱(vericiguat)或BAY 1101042；

●人類嗜中性彈性蛋白酶(HNE)之抑制劑，諸如例如西維來斯他(sivelestat) 或DX-890(reltran)；

●抑制訊號傳導級聯的化合物，特別是酪胺酸及/或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑，諸如例如尼達尼布(nintedanib)、達沙替尼(dasatinib)、尼祿替尼(nilotinib)、博舒替尼(bosutinib)、瑞格非尼(regorafenib)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、西地尼布(cediranib)、阿西替尼(axitinib)、替拉替尼(telatinib)、伊馬替尼(imatinib)、布立尼布(brivanib)、帕唑帕尼(pazopanib)、瓦他拉尼(vatalanib)、吉非替尼(gefitinib)、埃羅替尼(erlotinib)、拉帕替尼(lapatinib)、卡紐替尼(canertinib)、來妥替尼(lestaurtinib)、培利替尼(pelitinib)、司馬沙尼(semaxanib)或坦度替尼(tandutinib)；

●影響心臟之能量代謝的化合物，諸如例如且較佳為乙莫克舍(etomoxir)、二氯乙酸鹽、雷諾嗪(ranolazine)或三甲氧芐嗪(trimetazidine)、或完全或部份的腺苷A1受體促效劑如GS-9667(以前稱為CVT-3619)、卡帕諾生(capadenoson)和那拉諾生(neladenoson bialanate)(BAY 1067197)；

●影響心率的化合物，諸如例如且較佳為伊伐布雷定(ivabradine)；

●心肌球蛋白活化劑，諸如例如且較佳為奧美卡替莫卡必爾(omecamtiv mecarbil)(CK-1827452)；

●消炎藥諸如非類固醇消炎藥(NSAIDs)包括乙醯水楊酸(阿司匹靈)、伊布洛芬(ibuprofen)和萘普生(naproxen)、糖皮質素諸如例如且較佳為潑尼松(prednison)、氫化潑尼松(prednisolon)、甲基氫化潑尼松(methylprednisolon)、曲安西龍(triamcinolon)、地塞米松(dexamethasone)、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethason)、氟尼縮松(flunisolid)、布地奈德(budesonid)或氟替卡松(fluticason)、5-胺基水楊酸衍生物、白三烯拮抗劑、TNF-α抑制劑和趨化因子受體拮抗劑諸如CCR1、2及/或5抑制劑；

●脂肪代謝改變劑，例如且較佳來自下列群組：甲狀腺受體促效劑、膽固醇合成抑制劑(諸如例如且較佳為HMG-CoA還原酶抑制劑或鯊烯合成酶抑制劑)、ACAT抑制劑、CETP抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ及/或PPAR-δ促效劑、膽固醇吸收抑制劑、脂酶抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑及脂蛋白(a) 拮抗劑。

抗血栓劑較佳係理解為來自下列群組之化合物：血小板凝聚抑制劑、抗凝血劑或纖溶酶原物質。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與血小板凝集抑制劑(例如且較佳為阿斯匹靈、氯吡格雷(clopidogrel)、噻氯匹定(ticlopidine)或雙嘧達莫(dipyridamole))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與凝血酶抑制劑(例如且較佳為希美加群(ximelagatran)、達比加群(dabigatran)、美拉加群(melagatran)、比伐盧定(bivalirudin)或依諾肝素(enoxaparin))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與GPIIb/IIIa拮抗劑(例如且較佳為替羅非班(tirofiban)或阿昔單抗(abciximab))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與因子Xa抑制劑(例如且較佳為利伐沙班(rivaroxaban)、阿哌沙班(apixaban)、奥米沙班(otamixaban)、非德沙班(fidexaban)、雷扎沙班(razaxaban)、磺達肝素(fondaparinux)、抑達肝素(idraparinux)、DU-176b、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與肝素或低分子量(LMW)肝素衍生物組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與維生素K拮抗劑(例如且較佳為香豆素)組合投與。

降血壓劑較佳了解為來自下列群組之化合物：鈣拮抗劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、NEP抑制劑、血管肽酶抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻斷劑、β-受體阻斷劑、礦皮質素受體拮抗劑及利尿劑。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與鈣拮抗劑(例如且較佳為硝苯地平(nifedipine)、氨氯地平(amlodipine)、維拉帕米(verapamil)或地爾硫卓(diltiazem))組合投藥。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與α-1受體阻斷劑(例如且較佳為哌唑嗪(prazosin)或坦洛新(tamsulosin))組合投藥。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與β-受體阻斷劑(例如且較佳為普萘洛爾(propranolol)、阿替洛爾(atenolol)、噻嗎洛爾(timolol)、吲哚洛爾(pindolol)、阿普洛爾(alprenolol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、噴布洛爾(penbutolol)、布拉洛爾(bupranolol)、美替洛爾(metipranolol)、納多洛爾(nadolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、咔唑洛爾(carazolol)、索他洛爾(sotalol)、美托洛爾(metoprolol)、倍他洛爾(betaxolol)、塞利洛爾(celiprolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡替洛爾(carteolol)、艾司洛爾(esmolol)、拉貝洛爾(labetalol)、卡維地洛(carvedilol)、阿達洛爾(adaprolol)、蘭地洛爾(landiolol)、奈必洛爾(nebivolol)、依泮洛爾(epanolol)或布新洛爾(bucindolol))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與血管收縮素AII拮抗劑(例如且較佳為氯沙坦(losartan)、坎地沙坦(candesartan)、纈沙坦(valsartan)、替米沙坦(telmisartan)、伊貝沙坦(irbesartan)、奧美沙坦(olmesartan)、依普羅沙坦(eprosartan)、恩布沙坦(embusartan)或阿齊沙坦(azilsartan))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係血管肽酶抑制劑或中性肽鏈內切酶(NEP)(諸如例如且較佳為沙可比曲(sacubitril)、奧馬曲拉(omapatrilat)或AVE-7688))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與雙重血管收縮素AII受體拮抗劑/NEP抑制劑(ARNI)(例如且較佳為LCZ696)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與ACE抑制劑(例如且較佳為依拉普利(enalapril)、卡托普利(captopril)、賴諾普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、地拉普利(delapril)、福辛普利(fosinopril)、喹那普利(quinopril)、培吲普利(perindopril)、貝那普利(benazepril)或群多普利(trandopril))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與內皮素拮抗劑(例如且較佳為波生坦(bosentan)、達盧生坦(darusentan)、安倍生坦(ambrisentan)、替唑生坦(tezosentan)、西他生坦(sitaxsentan)、阿伏生坦(avosentan)、馬西替坦(macitentan)、或阿曲生坦(atrasentan))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與腎素抑制劑(例如且較佳為阿利克崙(aliskiren)、SPP-600或SPP-800)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與礦皮質素受體拮抗劑(例如且較佳為菲利酮(finerenone)、螺內酯固醇(spironolactone)、坎利酮(canrenone)、坎利酸鉀(potassium canrenoate)、依普利酮(eplerenone)、艾沙利酮(esaxerenone)(CS-3150)、或安帕利酮(apararenone)(MT-3995))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與利尿劑(諸如例如且較佳為呋塞米(furosemide)、布美他尼(bumetanide)、吡咯他尼(piretanide)、托拉塞米(torsemide)、苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)、氯噻嗪(chlorthiazide)、氫氯噻嗪(hydrochlorthiazide)、希帕胺(xipamide)、吲達帕胺(indapindapamide)、氫氟噻嗪(hydroflumethiazide)、甲氯噻嗪(methyclothiazide)、泊利噻嗪(polythiazide)、三氯噻嗪(trichlormethiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、美托拉宗(metolazone)、喹乙唑酮(quinethazone)、乙醯唑胺(acetazolamide)、二氯磺胺(dichlorophenamide)、醋甲唑胺(methazolamide)、甘油、異山梨醇(isosorbide)、甘露醇、阿米洛利(amiloride)或氨苯喋啶(triamterene))組合投與。

脂肪代謝改變劑較佳了解為選來下列群組之化合物：CETP抑制劑、甲狀腺受體促效劑、膽固醇合成抑制劑諸如HMG-CoA還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑、ACAT抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ及/或PPAR-δ促效劑、膽固醇吸收抑制劑、聚合膽汁酸吸收劑、膽汁酸再吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑及脂蛋白(a)拮抗劑。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與CETP 抑制劑(例如且較佳為達塞曲匹(dalcetrapib)、安塞曲匹(anacetrapib)、BAY 60-5521或CETP-疫苗(Avant))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與甲狀腺受體促效劑(例如且較佳為D-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲腺胺酸(T3)、CGS 23425或阿昔替羅(axitirome)(CGS 26214))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與來自他汀類(statins)之HMG-CoA-還原酶抑制劑(例如且較佳為洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、羅蘇伐他汀(rosuvastatin)或匹伐他汀(pitavastatin))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與鯊烯合成抑制劑(例如且較佳為BMS-188494或TAK-475)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與ACAT抑制劑(例如且較佳為阿伐麥布(avasimibe)、甲亞油醯胺(melinamide)、帕替麥布(pactimibe)、依魯麥布(eflucimibe)或SMP-797)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與MTP抑制劑(例如且較佳為英普他派(implitapide)、R-103757、BMS-201038或JTT-130)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與PPAR-γ促效劑(例如且較佳為吡格列酮(pioglitazone)或羅格列酮(rosiglitazone))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與PPAR-δ促效劑(例如且較佳為GW-501516或BAY 68-5042)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與膽固醇吸收抑制劑(例如且較佳為依折麥布(ezetimibe)、替奎安(tiqueside)或帕馬苷(pamaqueside))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與脂解酶抑制劑(例如且較佳為奧利司他(orlistat))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與聚合膽酸吸收劑(例如且較佳為膽苯烯胺(cholestyramine)、考來替泊(colestipol)、考來索文(colesolvam)、CholestaGel或考來替明(colestimide))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與膽酸再吸收抑制劑(例如且較佳為ASBT(=IBAT)抑制劑，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與，脂蛋白(a)拮抗劑(例如且較佳為吉卡賓鈣(gemcabene calcium)(CI-1027)或菸鹼酸))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與TGFβ拮抗劑(舉例來說且較佳為吡非尼酮(pirfenidone)或夫蘇木單株抗體(fresolimumab)))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與HIF-PH抑制劑(舉例來說且較佳為莫立達特(molidustat)或羅沙達特(roxadustat)))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與CCR2拮抗劑(舉例來說且較佳為CCX-140))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與(TNFα拮抗劑，舉例來說且較佳為阿達木單抗(adalimumab))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與半乳糖凝集素-3抑制劑(舉例來說且較佳為GCS-100))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與BMP-7促效劑(舉例來說且較佳為THR-184))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與NOX1/4抑制劑(舉例來說且較佳為GKT-137831))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與影響維生素D代謝的藥物(舉例來說且較佳為膽鈣化醇(cholecalciferol)或帕立骨化醇(paracalcitol)))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與細胞生長抑制劑(舉例來說且較佳為環磷醯胺))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與免疫抑制劑(舉例來說且較佳為環孢素(ciclosporin)))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與磷酸鹽黏合劑(舉例來說且較佳為司維拉姆(sevelamer)或碳酸鑭))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與用於治療副甲狀腺機能亢進的擬鈣劑)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與用於鐵缺乏治療之藥劑(舉例來說且較佳為鐵產品)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與用於治療高尿酸血症的藥劑(舉例來說且較佳為異嘌呤醇(allopurinol)或拉布立酶(rasburicase))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與用於治療貧血之糖蛋白激素(舉例來說且較佳為紅血球生成素)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與用於免疫治療之生物製劑(舉例來說且較佳為阿巴西普(abatacept)、利妥昔單抗(rituximab)、依庫珠單抗(eculizumab)或貝利木單抗(belimumab))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與Jak抑制劑(舉例來說且較佳為魯索利替尼(ruxolitinib)、托法替尼(tofacitinib)、巴瑞替尼(baricitinib)、CYT387、GSK2586184、來妥替尼(lestaurtinib)、帕瑞替尼(pacritinib)(SB1518)或TG101348)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與用於治療微血栓之前列腺環素類似物)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與鹼治療(舉例來說且較佳為碳酸氫鈉)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與mTOR抑制劑(舉例來說且較佳為依維莫司(everolimus)或雷帕黴素(rapamycin))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與NHE3抑制劑(舉例來說且較佳為AZD1722)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與eNOS調節劑(舉例來說且較佳為沙丙蝶呤(sapropterin))組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與CTGF抑制劑(舉例來說且較佳為FG-3019)組合投與。

在本發明之一較佳具體實例中，根據本發明之化合物係與抗糖尿病劑(降血糖劑或抗高血糖劑)(諸如例如且較佳為胰島素和衍生物)、磺醯脲類(諸如甲苯磺丁脲(tolbutamide)、胺磺丁脲(carbutamide)、乙醯苯磺醯環己脲、氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列吡嗪(glipizide)、格列齊特(gliclazide)、格列苯脲(glibenclamide)、格列本脲(glyburide)、格列波脲(glibornuride)、格列喹酮(gliquidone)、格列派特(glisoxepide)、格列吡脲(glyclopyramide)、格列美脲(glimepiride)、JB253和JB558)、美格列奈類(meglitinides)(諸如瑞格列奈(repaglinide)和那格列奈(nateglinide))、雙胍類(諸如二甲雙胍(metformin)和丁福明(buformin))、噻唑啉二酮類(諸如羅格列酮(rosiglitazone)和吡格列酮(pioglitazone))、α-葡萄糖苷酶抑制劑(諸如米格列醇(miglitol)、阿卡波糖(acarbose)和伏格列波糖(voglibose))、DPP4抑制劑(諸如維格列汀(vildagliptin)、西他列汀(sitagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、利格列汀(linagliptin)、阿格列汀(alogliptin)、塞格列汀(septagliptin)和替格列汀(teneligliptin))、GLP-1類似物諸如艾塞那肽(exenatide)(亦即艾塞那肽(exendin)-4、利拉鲁肽(liraglutide)、利司那肽(lixisenatide)和他司魯肽(taspoglutide))、或SGLT抑制劑(格列淨類(gliflozins)，諸如卡格列淨(canagliflozin)、達格列淨(dapagliflozin)和恩格列淨(empagliflozin))組合投與。

在本發明之一特佳具體實例中，本發明化合物係與一或多種選自由下列所組成群組之額外治療劑組合投與：利尿劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β-受體阻斷劑、礦皮質素受體拮抗劑、抗糖尿病劑、有機硝酸鹽和NO供體、可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之活化劑和刺激劑、和正強心劑。

在本發明之另一特佳具體實例中，本發明化合物係與一或多種選自由下列所組成群組之額外治療劑組合投與：利尿劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β-受體阻斷劑、礦皮質素受體拮抗劑、抗糖尿病劑、有機硝酸鹽和NO供體、可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之活化劑和刺激劑、消炎劑、免疫抑制劑、磷酸鹽黏合劑及/或調節維生素D代謝的化合物。

因此，在另一具體實例中，本發明關於用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)之醫藥組成物，其包含至少一種的根據本發明之化合物和一或多種額外治療劑。

此外，本發明化合物可以其本身或以組成物，利用於研究和診斷上，或作為分析參照標準等等，其已為本項技術所熟知的。

當本發明化合物係投與至人類和其他哺乳動物作為醫藥時，彼等可以其本身或以含有(例如)0.1%至99.5%(更佳地，0.5%至90%)的活性成分與一或多種醫藥上可接受的賦形劑組合之醫藥組成物給予。

因此，在另一態樣中，本發明關於包含至少一種根據本發明之化合物，習知與一或多種惰性、無毒、醫藥上可接受的賦形劑一起之醫藥組成物，以及其用於治療及/或預防疾病(尤其是上述疾病)之用途。

根據本發明之化合物可能具有全身性及/或局部性活性。為此目的，彼等可以合適的方式諸如(例如)經由口服、腸胃外、經肺、經鼻、舌下、經舌、經頰、直腸、陰道、真皮、經皮、結膜、耳部的途徑，或者以植入物或支架投與。

對於這些投與途徑，根據本發明之化合物可以合適的投與形式投與。

對於口服投與，根據本發明之化合物可能調配成該項技術已知的迅速地及/或以改良的方式遞送本發明化合物的劑量形式，諸如(例如)錠劑(未塗布或經塗布之錠劑，例如具有延遲溶解或不能溶解之腸溶性或控制釋放的塗層)、口服崩解的錠劑、薄膜/薄片、薄膜/凍乾物(lyophilisates)、膠囊(例如硬或軟明膠膠囊)、糖衣錠、粒劑、丸劑、粉劑、乳液、懸浮液、氣霧劑或溶液。根據本發明之化合物可能以結晶或/或非晶化及/或溶解形式併入該劑型中。

腸胃外投與可以避免吸收步驟(例如靜脈內、動脈內、心臟內、脊椎內或腰內)或包括吸收(例如肌肉內、皮下、皮內、經皮或腹膜內)進行。適合於腸胃外投與之投與形式尤其為於溶液、懸浮液、乳液、凍乾劑或無菌粉劑形式之注射及灌注用製劑。

適合於其他投與途徑之實例為用於吸入之醫藥形式[尤其粉末吸入器、霧化器]、滴鼻劑、鼻溶液、鼻噴霧；用於舌、舌下或經頰投與之錠劑/膜/薄片/膠囊；栓劑；眼藥水、眼軟膏、眼浴、眼插入件、滴耳劑、耳噴霧、耳粉、洗耳劑、耳用棉塞；陰道膠囊、水性懸浮液(洗劑、振盪合劑(mixturae agitandae))、親脂性懸浮液、乳液、軟膏、乳霜、經皮治療系統(諸如(例如)貼片)、乳狀物、糊劑、泡沫、散布劑、植入物或支架。

根據本發明之化合物可併入所述的投與形式。此可以本身已知的方式藉由與醫藥上適合之賦形劑混合來進行。醫藥上適合之賦形劑尤其包括，

●填料和載體(例如纖維素、微晶纖維素(諸如(例如)Avicel^®)、乳糖、甘露醇、澱粉、磷酸鈣(諸如(例如)Di-Cafos^®))，

●軟膏基質(例如石油膠、石蠟、三酸甘油酯類、蠟類、羊毛蠟、羊毛蠟醇類、羊毛脂、親水軟膏、聚乙二醇類)，

●用於栓劑之基質(例如聚乙二醇類、可可脂、硬脂肪)，

●溶劑(例如水、乙醇、異丙醇、甘油、丙二醇、中鏈長三酸甘油酯類脂肪油類、液體聚乙二醇、石蠟類)，

●界面活性劑、乳化劑、分散劑或濕潤劑(例如十二烷基硫酸鈉)、卵磷脂、磷脂類、脂肪醇類(諸如(例如)Lanette^®)、去水山梨醇脂肪酸酯類(諸如(例如)Span^®)、聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯類(諸如(例如)Tween^®)、聚氧乙烯脂肪酸甘油酯類(諸如(例如)Cremophor^®)、聚氧乙烯脂肪酸酯類、聚氧乙烯脂肪醇醚類、甘油脂肪酸酯類、泊洛沙姆(poloxamer)(諸如(例如)Pluronic^®)，

●緩衝液，酸類和鹼類(例如磷酸鹽類、碳酸鹽類、檸檬酸、乙酸、鹽酸、氫氧化鈉溶液、碳酸銨、氨基丁三醇(trometamol)、三乙醇胺)，

●等滲劑(例如葡萄糖，氯化鈉)，

●吸附劑(例如高分散二氧化矽)，

●增黏劑、凝膠成型劑、增稠劑及/或黏合劑(例如聚乙烯吡咯啶酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、澱粉、卡波姆(carbomer)、聚丙烯酸類(諸如(例如)Carbopol^®)；海藻酸鹽類、明膠)，

●崩解劑(例如改質澱粉、羧甲基纖維素鈉、澱粉乙醇酸鈉(諸如(例如)Explotab^®)、交聯聯聚乙烯吡咯啶酮、交聯羧甲基纖維素鈉(諸如(例如)AcDiSol^®))，

●流動調節劑、潤滑劑、助流劑及脫模劑(例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、高分散二氧化矽諸如(例如)Aerosil®等)，

●塗布材料(例如糖、蟲膠)及用於快速地或以經修改方式溶解之膜或擴散膜的膜形成劑(例如聚乙烯吡咯啶酮類(諸如(例如)Kollidon^®)、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素酞酸酯、纖維素乙酸酯、纖維素乙酸酯酞酸酯、聚丙烯酸酯類、聚甲基丙烯酸酯類諸如(例如)Eudragit^®))，

●膠囊材料(例如明膠、羥丙基甲基纖維素)，

●合成聚合物(例如聚乳酸類、聚乙交酯類、聚丙烯酸酯類、聚甲基丙烯酸酯(諸如(例如)Eudragit^®)、聚乙烯吡咯啶酮類(諸如(例如)Kollidon^®)、聚乙烯醇類、聚乙酸乙烯酯類、聚氧化乙烯類、聚乙二醇類及彼等之共聚物及嵌段共聚物)，

●塑化劑(例如聚乙二醇類、丙二醇、甘油、三醋酸甘油酯(triacetine)、檸檬酸三乙醯酯、酞酸二丁酯)。

●滲透增強劑，

●穩定劑(例如抗氧化劑諸如(例如)抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸鈉、丁基羥基苯甲醚、丁基羥基甲苯、五倍子酸丙酯)，

●防腐劑(例如對羥基苯甲酸酯、山梨酸、硫柳汞、殺藻胺、洛赫西定(chlorhexidine)乙酸鹽、苯甲酸鈉)，

●著色劑(例如無機顏料諸如(例如)氧化鐵、二氧化鈦)，

●調味劑、甜味劑、味道-及/或氣味掩蔽劑。

本發明此外關於一種醫藥組成物，其包含至少一種根據本發明之化合物、習知與一或多種醫藥上可接受的賦形劑一起、及關於根據本發明之彼等用途。

根據已知評估可用於治療心血管和腎臟病症之化合物的標準實驗室技術，藉由標準毒性測試及藉由測定哺乳動物中上述所鑑別之病況的標準藥理學檢定，且藉由比較此等結果與用於治療此等病況之已知活性成分或藥劑的結果，可容易測定本發明化合物用於治療各種所要適應症的有效劑量。治療此等病況之一中所投與的活性成分之量可根據該等如下考慮因素而在寬範圍內變化：所使用之特定化合物及劑量單位、投與模式、治療時段、所治療患者之年齡和性別、及所治療病況之性質及程度。

欲投與之活性成分總量通常範圍將每天從約0.001mg/kg至約200mg/kg體重，且較佳為每天從約0.001mg/kg至約20mg/kg體重。臨床上有用之投與計劃範圍將為每天投與一至三次至每四週投與一次。此外，患者在某一時間段內不服用藥物之「藥物假期」可能有益於藥理學效應與耐受性之間的總體平衡。單位劑量可能含有從約0.5mg至約1500mg活性成分，且可每天投與一或多次或一天少於一次。就藉由注射(包括靜脈內、肌內、皮下及腸胃外注射)，及使用灌注技術之投與而言，平均每日劑量較佳將為從0.01至200mg/kg總體重。作為示例，本發明化合物可以約0.001mg/kg至約10mg/kg，較佳為約0.01mg/kg至約1mg/kg體重劑量腸胃外投與。在口服投與中，示例性的劑量範圍為約0.01至100mg/kg，較佳為約0.01至20mg/kg，及更佳為約0.1至10mg/kg體重。上述值之間的範圍也意欲為本發明的一部分。

當然，對於各患者而言，特定起始及持續劑量方案將根據如主治診斷醫師所確定之病況的性質及嚴重性、所使用特定化合物之活性、患者之年齡及總體狀況、投與時間、投與途徑、藥物排泄速率、藥物組合等等而改變。本發明化合物或其醫藥上可接受的鹽或酯或組成物之所要治療模式及劑量次數可由熟習此項技術者使用習用治療測試來確定。

以下示例性具體實例說明本發明。本發明不限於該等實施例。

以下測試和實施例中的百分比除非另有說明，否則以重量計；份為以重量計。液體/液體溶液的溶劑比、稀釋比和濃度各以體積為基準計。

實驗部分

NMR峰形式係如其在光譜中呈現來描述，尚未考慮可能之更高階效應。

化學名稱係使用來自ACD/Labs之ACD/名稱軟體產生。在一些情形下，使用市售試劑之公認名稱來代替ACD/名稱產生之名稱。

下表1列出本段和實施例部分中所使用的縮寫，只要它們在文本正文中未說明。其他縮寫具有本身對於熟習該項技術人員來說為習知的意義。

UPLC 超高效液相層析

本申請案中所述的本發明之各種態樣係以下列實施例說明，這些實施例並不意謂以任何方式限制本發明。

本文中所述的實施例測試實驗用以說明本發明，且本發明不限於所給出的實施例。

實驗部分-通用部分

在實驗部分中未描述合成之所有試劑為市售的，或為已知化合物，或可藉由已知的方法由熟習此項技術者從已知的化合物形成。

根據本發明方法製造之化合物及中間物可能需要純化。有機化合物之純化為熟習此項技術者所熟知且可存在純化相同化合物之幾種方式。在一些情況下，可不必純化。在一些情況下，化合物可藉由結晶純化。在一些情況下，可使用適當溶劑攪拌去雜質。在一些情況下，化合物可藉由使用例如預填充矽膠筒(例如Biotage SNAP筒KP-Sil^®或KP-NH^®與Biotage自動純化器系統(SP4^®或Isolera Four^®)組合)及溶析液(諸如己烷/乙酸乙酯或二氯甲烷/甲醇之梯度)的層析，特別是急速管柱層析來純化。在一些情況下，化合物可藉由製備型HPLC純化，該製備型HPLC使用例如配備有二極體陣列檢測器及/或上線電灑游離質譜儀之Waters自動純化器，與適當預填充逆相管柱及可含有添加劑(諸如三氟乙酸、甲酸或氨水)的溶析液諸如水及乙腈之梯度組合。

在一些情形下，如上所述之純化方法可提供彼等具有足夠鹼性或酸性官能性之於鹽形式的本發明化合物，諸如，在本發明化合物為足夠鹼性之情形下，(例如)三氟乙酸鹽或甲酸鹽，或在本發明化合物為足夠酸性之情形下，(例如)銨鹽。此類鹽可藉由熟習此項技術者已知的各種方法分別轉換為其游離鹼或游離酸形式，或用作後續生物檢定中之鹽。應理解，如分離且如本文所述之本發明化合物的特定形式(例如鹽、游離鹼等等)未必為唯一形式，其中該化合物可應用於生物檢定中以定量特定生物活性。

UPLC-MS標準程序 方法1(LC/MS)：

儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 1mm；溶析液A：1L水+0.25ml 99%甲酸，溶析液B：1L乙腈+0.25ml 99%甲酸；梯度：0.0min 90% A→1.2min 5% A→2.0min 5% A；烘箱：50℃；流速：0.40ml/min；UV檢測：208-400nm。

方法2(LC/MS)：

儀器MS：Thermo Scientific FT-MS；儀器type UHPLC+：Thermo Scientific UltiMate 3000；管柱：Waters，HSST3，2.1 x 75mm，C18 1.8μm；溶析液A：1L水+0.01%甲酸；溶析液B：1L乙腈+0.01%甲酸；梯度：0.0min 10% B→2.5min 95% B→3.5min 95% B；烘箱：50℃；流速：0.90ml/min；UV檢測：210nm/最佳積分途徑210-300nm。

方法3(LC/MS)：

儀器：Waters ACQUITY SQD UPLC系統；管柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8μ 50 x 1mm；溶析液A：1L水+0.25ml 99%甲酸，溶析液B：1L乙腈+0.25ml 99%甲酸；梯度：0.0min 95% A→6.0min 5% A→7.5min 5% A；烘箱：50℃；流速：0.35ml/min；UV檢測：210-400nm。

方法4(製備型HPLC)：

管柱：Chromatorex或Reprosil C18 10μm；125 x 30mm，流速：75ml/min，運行時間：20min，檢測於210nm，溶析液A：水+0.1%甲酸，溶析液B：乙腈+0.1%甲酸；梯度：3min 10% B；17.5min：95% B；19.5min 100% B,20min 10% B。

實驗部分-起始材料和中間物 實施例1A 5-(4-氯苯基)-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-2,4-二氫-3H-1,2,4-三唑-3-酮

將5-(4-氯苯基)-4-(3,3,3-三氟-2,2-二羥丙基)-2,4-二氫-3H-1,2,4-三唑-3-酮(如WO 2010/105770-A1中之實施例3A所述之合成)(10.0g,30.9mmol)、N-[(1R,2R)-2-胺基-1,2-二苯基乙基]-4-甲基苯磺醯胺(56.6mg，154μmol)和1-甲基-4-(丙-2-基)苯磺二氯釕(1：1)(47.3mg，77.2μmol)在乙酸乙酯中之溶液以三乙胺(8.6m，62mmol)處理，接著添加甲酸(5.8m，150mmol)。將所得混合物在回流下加熱3h及然後冷卻至室溫。然後將反應混合物用1N鹽酸(70ml)稀釋。將有機相用1N鹽酸兩次洗滌。將水相用乙酸乙酯萃取兩次。將合併的有機相蒸發。將殘餘物再溶解於甲醇(22.5ml)中並將所得懸浮液加熱至60℃直到固體完全溶解。添加1N鹽酸(22.5ml)並將所得懸浮液在78℃下加熱10min及然後冷卻至室溫。將固體濾出並在真空下乾燥。將固體再溶解於1N鹽酸(30ml)中，在35℃下加熱。將所得懸浮液以甲醇(30ml)處理，在35℃下加熱4h和在35℃下濾出。將濾液溶液蒸發提供4.9g(ee=99.6%，理論的51%)之5-(4-氯苯基)-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-2,4-二氫-3H-1,2,4-三唑-3-酮。

LC-MS(方法2)：R_t=1.40min；MS(ESIpos)：m/z=308[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO)：δ[ppm]=12.10(s,1H),7.52-7.79(m,4H),6.84(d,1H),3.54-4.52(m,3H)。

實施例2A {3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈

在2L反應容器中，將100g(273mmol)的{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙酸(如WO 2010/105770-A1實施例8A中所述之合成)、43.3g(547mmol)的吡啶和33mg(0.3mmol)的4-二甲胺基吡啶溶解在300ml THF中。將所得溶液在5℃下用52.8g(438mmol)的2,2-二甲基丙醯氯處理經15分鐘並將所得混合物在室溫下攪拌2.5小時。冷卻至0℃後，經1h添加183ml的28%氨水溶液，同時將溶液溫度保持在10℃和20℃之間，且然後將所得混合物在5℃下攪拌另1小時之時間。然後添加500ml甲基第三丁基醚和300ml 20%檸檬酸水溶液，同時將內溫保持在10℃和20℃之間。將該等相分離並將有機相用300ml的20%檸檬酸水溶液接著300ml飽和碳酸氫鈉水溶液和最後300ml的10%氯化鈉水溶液洗滌。將有機相在減壓下於60℃蒸發直到獲得油狀殘餘物。然後添加300ml THF並將溶液再次蒸發直至獲得油狀溶液。此操作重複第二次。將油殘餘物再溶解於360ml THF中，並在10℃和20℃之間的溫度下用172g(820mmol)三氟乙酸酐處理經20min。然後將所得溶液在室溫下攪拌1h。在10℃和20℃之間的溫度下添加720ml 4-甲基-2-戊酮和650ml 7.5%氫氧化鈉水溶液。最後使用7.5%氫氧化鈉水溶液將pH值調整至pH=9.5。相分離後，將有機相用450ml 10%氯化鈉水溶液洗滌兩次。將有機相在減壓下於80℃的溫度蒸發，同時添加1200ml正庚烷。將所形成的懸浮液冷卻至20℃並濾出固體及用200ml正庚烷洗滌及然後在減壓下乾燥(50℃，30毫巴)提供88g(理論的93%)之呈固體的{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=7.78(d,2H),7.55(d,2H),6.91(d,1H),5.17(s,2 H),4.34-4.23(m,1 H),3.98(dd,1H),3.81(dd,1H)。

實施例3A {3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈

將40g(130mmol)5-(4-氯苯基)-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-2,4-二氫-3H-1,2,4-三唑-3-酮(實施例1A)在400ml甲基異丁基酮中之溶液以17.9g(143mmol)溴乙腈和53.9g(390mmol)碳酸鉀處理並在60℃下攪4小時。冷卻至20℃後，添加200ml水並將混合物攪拌10min。相分離後，將有機相用200ml水洗滌。將有機相在減壓下於80℃蒸發，同時添加300ml正庚烷。將所形成的懸浮液冷卻至20℃和濾出所形成之固體並用50ml正庚烷洗滌及然後在減壓(50℃，30毫巴)下乾燥提供25.2g(理論的56%)之{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}-乙腈。

實施例4A 甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯

在4L反應容器中，將在1600ml甲醇中之200g(576.9mmol)的{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈(實施例2A)以5.2g(28mmol)甲醇鈉(在甲醇中之30%)處理並將所得混合物在50℃下攪拌2.5小時。然後將溶液在減壓下於50℃蒸發直到獲得油狀溶液。添加2000ml甲基第三丁基醚並將溶液濃縮至達到800ml的體積。然後添加3000ml正庚烷且形成懸浮液。在20℃下冷卻後，將固體過濾和用500ml正庚烷洗滌及然後在減壓(50℃，30毫巴)下乾燥提供175g(理論的80%)之呈固體的2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸甲酯。

1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ[ppm]=8.01(s,1H),7.78(d,2H),7.62(d,2H),6.93(br.s,1H),4.50(s,2 H),4.35-4.23(m,1 H),3.96(dd,1H),3.81(dd,1H),3.67(s,3 H).。

實施例5A 甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯

將8.58g(24.7mmol)的{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙腈(實施例3A)在甲醇(43ml)中之溶液以229μl(1.24mmol)的甲醇鈉溶液(在甲醇中之30%)處理。將所得混合物在室溫下攪拌過夜且然後蒸發，提供9.31g(理論的99%)之標題化合物。

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.01(s,1H),7.81-7.58(m,4H),7.00-6.84(m,1H),4.50(s,2H),4.40-4.23(m,1H),4.04-3.74(m,2H),3.66(s,3H)。

實施例6A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，將150mg(0.40mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例4A)在3ml無水THF中之溶液在0℃下以75μl(0.44mmol)N,N-二異丙基乙胺和40μl(0.44mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加93mg(0.44mmol)的[2-(三氟甲基)苯基]肼，接著145μl(0.83mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌2h，接著在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供75mg(理論的32%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=2.01min；MS(ESIpos)：m/z=591.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.07-7.56(m,8H),6.91(d,1H),5.17(d,2H),4.37-4.21(m,1H),4.09-3.80(m,2H),3.74(s,3H)。

實施例7A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，將1g(2.64mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例5A)在3ml無水THF中之溶液在0℃下以506μl(2.90mmol)N,N-二異丙基乙胺和267μl(2.90mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加617mg(2.9mmol)的[2-(三氟甲基)苯基]肼鹽酸鹽，接著506μl(2.90mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌2h，接著在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發。將所得殘餘物藉由急速層析法(矽膠，溶析液環己烷/乙酸乙酯)接著製備型HPLC(方法4)純化，提供485mg(理論的31%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.97min；MS(ESIpos)：m/z=591.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.03-7.57(m,8H),6.91(d,1H),5.17(d,2H),4.38-3.80(m,3H),3.74(s,3H)。

實施例8A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，將50mg(0.40mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例4A)在3ml無水THF中之溶液在0℃下以75μl(0.44mmol)N,N-二異丙基乙胺和40μl(0.44mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加100mg(0.44mmol)的[2-(三氟甲氧基)苯基]肼鹽酸鹽，接著145μl(0.83mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌1.5h，接著在微波爐中於120℃下1h下並蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供129mg(理論的51%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=2.03min；MS(ESIpos)：m/z=607.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=7.86-7.52(m,8H),6.91(d,1H),5.18(d,2H),4.40-4.21(m,1H),4.09-3.81(m,2H),3.77(s,3H)。

實施例9A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，1g(2.64mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例5A)在3ml無水THF中之溶液在0℃下以506μl(2.90mmol)N,N-二異丙基乙胺和267μl(2.90mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加617mg(2.9mmol)的[2-(三氟甲基)苯基]肼鹽酸鹽，接著506μl(2.90mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌1h，接著在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發，將所得殘餘物藉由急速層析法(矽膠，溶析液環己烷/乙酸乙酯)接著製備型HPLC(方法4)純化，提供765mg(理論的45%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=2.02min；MS(ESIpos)：m/z=607.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]7.85-7.46(m,8H),6.91(d,1H),5.18(m,2H),4.36-3.79(m,3H),3.77(s,3H)。

實施例10A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(2-乙氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，將150mg(0.40mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例4A)在3ml無水THF中之溶液在0℃下以75μl(0.44mmol)N,N-二異丙基乙胺和40μl(0.44mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加82mg(0.44mmol)的[2-(乙氧基)苯基]肼鹽酸鹽，接著145μl(0.83mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌2h，接著於在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供75mg(理論的33%)之標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=1.09min；MS(ESIpos)：m/z=567.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=7.81-7.44(m,6H),7.24-7.05(m,2H),6.91(d,1H),5.15(s,2H),4.39-4.21(br m,1H),4.06-3.71(m,7H),1.13(t,3H)。

實施例11A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲基胺甲醯基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，將315mg(0.83mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例4A)在6.5ml無水THF中之溶液在0℃下以290μl(1.66mmol)N,N-二異丙基乙胺和122μl(1.66mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加360mg(0.91mmol)的2-肼基-N-甲基苯甲醯胺(Journal of Heterocyclic Chemistry,1979,76(7),1411中所描述之合成)，接著290μl(1.66mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌1.5h，接著在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供100mg(理論的69%)之標題化合物。

LC-MS(方法3)：R_t=2.71min；MS(ESIpos)：m/z=580.3[M+H]⁺

實施例12A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲硫基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，將300mg(0.79mmol)的甲基-2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸酯(實施例4A)在6ml無水THF中之溶液在0℃下以151μl(0.44mmol)N,N-二異丙基乙胺和80μl(0.87mmol)氯側氧基乙酸甲酯處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。添加134mg(0.87mmol)的[2-(甲硫基)苯基]肼，接著289μl(1.66mmol)的N,N-二異丙基乙胺。將所得混合物在室溫下攪拌1.5h，接著在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供325mg(理論的68%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.97min；MS(ESIpos)：m/z=569.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=7.88-7.25(m,8H),6.92(d,1H),5.16(s,2H),4.41-4.15(m,1H),4.09-3.79(m,2H),3.74(s,3H),2.37(s,3H)。

實施例13A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲硫基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將142mg(0.25mmol)的實施例12A在氨溶液(在甲醇之7N，2ml，14mmol)的混合物在室溫下攪拌過夜，然後蒸發混合物。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(Chromatorex C18，10μm，125 x 30mm，水/乙腈-梯度0.1%甲酸)純化，提供107mg(74%理論的)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.72min；MS(ESIpos)：m/z=554.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.15(s,1H),7.88-7.16(m,9H),6.90(d,1H),5.13(d,2H),4.40-4.19(m,1H),4.08-3.75(m,2H),2.35(s,3H)。

實施例14A 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(2-乙氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯

在氬氣下，2-{3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}乙亞胺酸甲酯(200mg，528μmol，實施例5A)在無水四氫呋喃(4.0ml)中之溶液在0℃下以N,N-二異丙基乙胺(100μl，580 μmol)和氯(側氧基)乙酸甲酯(53μl，580μmol)處理且然後將混合物在0℃下攪拌30min。然後添加(2-乙氧基苯基)肼鹽酸鹽(1：1)(110mg，581μmol)，接著N,N-二異丙基乙胺(190μl，1.1mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌1.5h，接著在微波爐中於120℃下1h且然後蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供188mg(理論的61%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.98min；MS(ESIpos)：m/z=567.1[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ[ppm]：7.79-7.69(m,2H),7.65-7.58(m,2H),7.50-7.46(m,2H),7.21(d,1H),7.10(td,1H),6.91(d,1H),5.15(s,2H),4.38-4.22(m,1H),4.08-3.93(m,3H),3.91-3.66(m,4H),1.13(t,3H)。

實驗部分-實施例 實施例1 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將55mg(0.093mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例6A)在氨溶液(在甲醇中之7N，0.8m，5.6mmol)中的混合物在室溫下攪拌過夜且然後將混合物蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供55mg(quant.)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.77min；MS(ESIpos)：m/z=576.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.23(s,1H),8.00-7.55(m,9H),6.90(d,1H),5.22-5.01(m,2H),4.40-4.18(m,1H),4.10-3.76(m,2H)。

實施例2 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將445mg(0.75mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例7A)在氨溶液(在甲醇中之7N，10m，70mmol)中的混合物在室溫下攪拌1.5h且然後將混合物蒸發，提供398mg(理論的91%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.76min；MS(ESIpos)：m/z=576.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.23(s,1H),7.99-7.55(m,9H),6.90(d,1H),5.24-5.05(m,2H),4.43-3.75(m,3H)。

實施例3 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將121mg(0.20mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例8A)在氨溶液(在甲醇中之7N，1.7m， 11.9mmol)中的混合物在室溫下攪拌過夜且然後將混合物蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供101mg(86%理論的)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.82min；MS(ESIpos)：m/z=592.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.28(s,1H),7.93(s,1H),7.80-7.44(m,8H),6.90(d,1H),5.25-4.97(m,2H),4.44-4.19(m,1H),4.07-3.76(m,2H)。

實施例4 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將500mg(0.82mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例9A)在氨溶液(在甲醇中之7N，10m，70mmol)中的混合物在室溫下攪拌2.5h及然後將混合物蒸發，提供479mg(理論的97%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.80min；MS(ESIpos)：m/z=592.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.28(s,1H),7.93(s,1H),7.80-7.46(m,8H),6.90(d,1H),5.29-5.03(m,2H),4.41-3.76(m,3H)。

實施例5 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(2-乙氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將170mg(0.30mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(2-乙氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例10A)在氨溶液(在甲醇中之7N，3.2m，22.4mmol)中的混合物在室溫下攪拌過夜且然後將混合物蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供60mg(理論的36%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.76min；MS(ESIpos)：m/z=552.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.12(s,1H),7.89-6.81(m,10H),5.11(d,2H),4.39-4.20(br m,1H),4.08-3.75(m,4H),1.16(t,3H)。

實施例6 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲基胺甲醯基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將40mg(70%，0.05mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲基胺甲醯基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例11A)在氨溶液(在甲醇中之7N，4m，28mmol)中的混合物在室溫下攪拌過夜且然後將混合物蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供11mg(理論的43%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.47min；MS(ESIpos)：m/z=565.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.33-7.34(m,11H),6.92(d, 1H),5.08(s,2H),4.48-3.79(m,3H),2.54(s,3H)。

實施例7 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲基磺醯基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

在0℃下，將52mg(0.20mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(甲硫基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(實施例13A)在1ml二氯甲烷中之溶液以69mg(純度70%，0.28mmol)的3-氯過苯甲酸處理及之後在室溫下攪拌過夜。將反應混合物與得自20mg測試操作的部分合併且然後將混合物蒸發。將所得殘餘物藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供60mg(理論的77%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.59min；MS(ESIpos)：m/z=586.1[M+H]⁺

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.27-7.56(m,10H),6.88(d,1H),5.16(d,2H),4.37-4.12(m,1H),4.07-3.73(m,2H),3.07(s,3H)。

實施例8 3-{[3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-(3,3,3-三氟-2-丙酮基)-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基]甲基}-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(酮形式)或3-{[3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-(3,3,3-三氟-2,2-二羥丙基)-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基]甲基}-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(水合物形式)

在0℃下，將150mg(0.26mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2S)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例1)在2.8ml的二氯甲烷中之溶液以165mg(0.39mmol)的Dess-Martin過碘烷處理。將所得混合物在0℃下攪拌1h及然後在4℃下過夜。然後添加2ml的飽和硫代硫酸鈉溶液和2ml的飽和碳酸氫鈉溶液並將所得混合物在室溫下攪拌10min。將反應混合物用乙酸乙酯萃取(重複三次)，然後將合併的有機層蒸發及藉由急速層析法純化所得殘餘物(矽膠，溶析液環己烷/乙酸乙酯)，提供122mg(理論的82%)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.78min；MS(ESIpos)：m/z=574.1[M+H]⁺(酮形式)

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.24(s,1H),7.96-7.53(m,9H),7.44(s,2H),5.27-4.96(m,2H),4.05(s,2H),(水合物形式)。

實施例9 3-{[3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-(3,3,3-三氟-2-丙酮基)-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基]甲基}-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(酮形式)或3-{[3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-(3,3,3-三氟-2,2-二羥丙基)-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基]甲基}-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(水合物形式)

在0℃下，將150mg(0.26mmol)的3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺(實施例4)在2.8ml的二氯甲烷之溶液中以165mg(0.39mmol)的Dess-Martin過碘烷處理。將所得混合物在0℃下攪拌1h及然後在室溫下另45min。然後添加2ml的飽和硫代硫酸鈉溶液和2ml的飽和碳酸氫鈉溶液並將所得混合物在室溫下攪拌10min。將反應混合物用二氯甲烷萃取(重複四次)。然後將合併的有機層蒸發及藉由急速層析法(矽膠，溶析液環己烷/乙酸乙酯)純化所得殘餘物，提供66mg(44%理論的)之標題化合物。

LC-MS(方法2)：R_t=1.80min；MS(ESIpos)：m/z=590[M+H]⁺(酮形式)

¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ[ppm]=8.29(s,1H),7.93(s,1H),7.76-7.48(m,8H),7.44(s,2H),5.16(s,2H),4.05(s,2H)(水合物形式)。

實施例10 3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(2-乙氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲醯胺

將3-({3-(4-氯苯基)-5-側氧-4-[(2R)-3,3,3-三氟-2-羥丙基]-4,5-二氫-1H-1,2,4-三唑-1-基}甲基)-1-(2-乙氧基苯基)-1H-1,2,4-三唑-5-甲酸甲酯(143 mg，253μmol，實施例14A)在甲醇中之氨溶液(2.7m，7n)中在室溫下攪拌過夜和蒸發。將殘餘物蒸發及藉由製備型HPLC(方法4)純化，提供118mg(理論的84%)之標題化合物。

LC-MS(方法1)：R_t=0.93min；MS(ESIpos)：m/z=552.1[M+H]⁺

¹H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ[ppm]：8.12(s,1H),7.87-7.71(m,3H),7.66-7.57(m,2H),7.47-7.33(m,2H),7.15(d,1H),7.08-6.99(m,1H),6.91(d,1H),5.22-4.99(m,2H),4.41-4.19(m,1H),4.11-3.74(m,4H),1.16(t,3H)。

實驗部分-生物檢定 縮寫和縮略語：

實施例在所選生物檢定中測試一或多次。當測試超過一次時，數據係以平均值或以中位值形式報導，其中●平均值(亦稱為算術平均值)表示所得值之總和除以測試次數，及●中位值表示該等值之組當以升序或降序排列時的中間數。若數據組中值之數目為奇數，則中位值為中間值。若數據組中之值數目為偶數，則中位值為兩個中間值之算術平均值。

實施例係合成一或多次。當合成超過一次時，來自生物檢定之數據表示利用得自一或多個合成批次之測試的數據組所計算之平均值或中位值。

本發明化合物之活性的證明可經由該項技術中所熟知的活體外、離體及活體內檢定來進行。例如，可使用下列檢定來證明本發明化合物之活性。

B-1.測定血管加壓素受體活性之細胞活體外檢定

鑑別來自人類、大鼠和狗的V1a和V2血管加壓素受體之促效劑和拮抗劑以及使用重組細胞株來進行本發明化合物活性之定量。這些細胞株源自倉鼠卵巢上皮細胞(中國倉鼠卵巢，CHO K1，ATCC：American Type Culture Collection,Manassas,VA 20108,USA)。測試細胞株組成性表現人類、大鼠或狗V1a或V2受體。在G_αq-結合V1a受體之情況中，亦以鈣-敏感光蛋白水母素(aequorin)(人類和大鼠V1a)或螅蛋白(obelin)(狗V1a)的修飾形式穩定轉染細胞，其在以共因子腔腸素(coelenterazine)重建後，當游離的鈣濃度增加時發射光線[Rizzuto R,Simpson AW,Brini M,Pozzan T,Nature358,325-327(1992)；Illarionov BA,Bondar VS,Illarionova VA,Vysotski ES,Gene153(2),273-274(1995)]。所生成的血管加壓素受體細胞藉由鈣離子之胞內釋放來反應重組表現的V1a受體之刺激，其可藉由所產生的光蛋白發光來定量。在CRE-反應性啟動子的控制下，將G_s-結合的V2受體穩定地轉染至表現螢火蟲螢光酶基因之細胞株中。V2受體之活化經由cAMP增加而誘發CRE-反應性啟動子之活化，藉此誘發螢火蟲螢光酶表現。由V1a細胞株之光蛋白所發射的光以及由V2細胞株之螢火蟲螢光酶所發射的光對應個別血管加壓素受體之活化或抑制。使用適合的光度計偵測細胞株之生物發光[Milligan G,Marshall F,Rees S,Trends in Pharmacological Sciences 17,235-237(1996)]。

測試程序：血管加壓素V1a受體細胞株：

在檢定前一天，將細胞鋪在384-孔微量滴定盤中之培養基(DMEM/F12，2% FCS，2mM麩醯胺酸，10mM HEPES，5μg/ml腔腸素)上並保持於細胞培養器(96%濕度，5% v/v CO₂，37℃)中。在檢定當天，將各種濃度的測試化合物放置在微量滴定盤的孔中經10分鐘，之後添加於EC 50濃度的促效劑[Arg⁸]-血管加壓素。以光度計立即測量所產生的光訊號。

血管加壓素V2受體細胞株：

在檢定前一天，將細胞鋪在384-孔微量滴定盤之培養基(DMEM/F12，2% FCS，2mM麩醯胺酸，10mM HEPES)上並保持於細胞培養器(96%濕度，5% v/v CO₂，37℃)中。在檢定當天，各種濃度的測試化合物和於EC₅₀濃度的促效劑[Arg⁸]-血管加壓素一起加入孔中，並將滴定盤於細胞培養器中培養3小時。在加入細胞分解劑Triton^TM和基質螢光素後，以光度計測量螢火蟲螢光酶之發光。

下表1A列出得自以人類V1a或V2受體轉染之細胞株的本發明化合物(包括外消旋混合物以及分離的鏡像異構物)之個別IC₅₀值：

表1A中所列的IC₅₀數據證明本發明化合物充當選擇性且有效的血管加壓素V1a受體拮抗劑。

為了比較目的，被認為最接近先前技術的代表(參照國際專利申請案WO 2011/104322-A1及其中所述的實施例化合物)之所選的苯基-三唑和咪唑衍生物亦以上述的細胞V1a和V2檢定進行測試。這些得自以人類V1a或V2受體轉染之細胞株的化合物之IC₅₀值係列於下表1B中：

為了比較目的，被認為最接近先前技術的代表(參照國際專利申請案WO 2011/104322-A1及其中所述的實施例化合物)之所選的苯基-三唑亦以上述的細胞V1a和V2檢定進行測試。這些得自以人類V1a或V2受體轉染之細胞株的化合物之IC₅₀值係列於下表1C中：

B-2.放射性結合檢定

在放射性結合檢定中使用表現個別人類血管加壓素V1a和V2受體之重組人類胎腎細胞株293(HEK293)或CHO-K1細胞株的膜部分可測定IC₅₀和K_i值。

使用標準技術將表現於HEK293細胞中之人類重組血管加壓素V1a受體使用於50mM Tris-HCl緩衝液中，pH 7.4，5mM MgCl₂，0.1% BSA。將所製備之膜的等分試樣以不同濃度的測試化合物一式兩份和0.03nM[¹²⁵I]苯基乙醯基-D-Tyr(Me)-Phe-Gln-Asn-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH₂在25℃下培養 120分鐘。在1μM[Arg⁸]血管加壓素存在下評估非特異性結合。將受體過濾並洗滌，然後將過濾器進行計數以確定[¹²⁵I]苯基乙醯基-D-Tyr(Me)-Phe-Gln-Asn-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH₂特異性結合。

使用標準技術將用編碼人類血管加壓素V2受體的質粒穩定轉染之CHO-K1細胞係用於製備在50mM Tris-HCl緩衝液，pH 7.4，10mM MgCl₂，0.1% BSA中之膜。將所製備之膜的等分試樣以不同濃度的測試化合物一式兩份和4nM[³H](Arg⁸)-血管加壓素在25℃下培養120分鐘。在1mM(Arg⁸)-血管加壓素存在下評估非特異性結合。將膜過濾並洗滌3次，且對過濾器進行計數以確定[³H](Arg₈)-血管加壓素特異性結合。

IC₅₀值係藉由使用MathIQTM(ID Business Solutions Ltd.,UK)的非線性最小平方回歸分析確定。抑制常數K_i係使用Cheng和Prusotf之方程式(Cheng,Y.,Prusoff,W.H.,Biochem.Pharmacol.22：3099-3108,1973)計算。

B-3.偵測血管加壓素V1a受體拮抗劑對調節促纖維化基因之作用的細胞活體外檢定

細胞株H9C2(美國菌種保存中心編號CRL-1446)，描述為分離自心臟組織之心肌細胞類型，以高複製數內源性表現血管加壓素V1a受體AVPR1A，然而未偵測到AVPR2表現。同樣，分離自大鼠腎組織的細胞株NRK49F(ATCC編號CRL1570)，顯示高AVPR1A mRNA表現和AVPR2表現降低的相似表現模式。對於以受體拮抗劑抑制AVPR1A受體依賴性調節之基因表現的細胞檢定，過程如下：將H9C2細胞或NRK49F細胞以在2.0ml的Opti-MEM培養基(Invitrogen Corp.,Carlsbad,CA,USA,Cat.No.11058-021)中之50 000個細胞/孔之細胞密度植入用於細胞培養之6-孔微量滴定盤中並保持於細胞培養器(96%濕度，8% v/v CO₂，37℃)中。24小時後，將三個孔之組(一式三份)裝入媒液溶液(負性對照照)及血管加壓素溶液([Arg8]-血管加壓素乙酸鹽，Sigma，Cat.No.V9879)，或測試化合物(溶於媒液中：含有20% v/v乙醇的水)及血管加壓素溶液。在此細胞培養中，最終血管加壓素濃度為1nM。將小量的測試化合物溶液加到細胞培養中，使得在細胞檢定中乙醇的最終濃度不超過0.03%。5小時之培養時間後，將培養上清液於抽氣下抽出，將吸附的細胞溶解於350μl的RLT緩衝液(Qiagen，Cat.No.79216)中，並使用RNeasy套組(Qiagen，Cat.No.74104)從溶解產物中分離RNA。接著DNAse消化(Invitrogen,Cat.No.18068-015)，cDNA合成(Promaga,ImProm-II Reverse Transcription System，Cat.No.A3800)及反轉錄聚合酶鏈反應RTPCR(pPCR MasterMix RT-QP2X-03-075,Eurogentec,Seraing,Belgium)。所有的程序係根據試劑製造商的操作方法來進行。RTPCR之引子組係根據mRNA基因序列(NCBI GenBank Entrez Nucleotide Data Base)使用帶有6-FAM TAMRA-標記探針之Primer3Plus程式進行選擇。用於測定各檢定批次之細胞中相對mRNA表現的RTPCR係使用Applied Biosystems ABI Prism 7700 Sequence檢測器以384-孔微量滴定盤模式，根據儀器操作說明來進行。相對基因表現係參照核糖體蛋白L-32基因(GenBank Acc.編號NM-_013226)之表現量，以δ-δ Ct值表示[Applied Biosystems,User Bulletin No.2 ABI Prism 7700 SDS,December 11,1997(更新10/2001)]，且Ct之閥值Ct=35。

B-4.血管加壓素誘發之人類血小板凝集的抑制

人類血小板內源性表現V1a受體。發現離體較高血管加壓素濃度(約50-100nM)刺激血小板凝集。因此，來自人類血液之富含血小板可充當用於使用對應高濃度之血管加壓素拮抗劑的藥理研究之V1a表現組織。

藉由靜脈穿刺從至少1週內無服藥之不吸煙的健康志願者(n=4-8)將人血液收集在10mM檸檬酸三鈉溶液中。藉由在4℃下以140g離心血液樣品20分鐘獲得富含血小板血漿(PRP)。將所得團塊進一步離心(15.000rpm，2min)以產生缺乏血小板血漿(PPP)。使用血小板凝集計(APACT 4)進行比濁測量血小板凝集。藉由監測178μLPRP等分試樣在37℃繼續攪拌下對PPP對照組的光透射改變來追蹤反應。在添加20μL Arg-血管加壓素之前5min，將各種濃度的血管加壓素拮抗劑(於2μL)加至PRP(最終濃度100nM)。化合物的抑制作用係藉由測量相較於對照組反應之從形狀變化的底部之凝集波的高度來測定。藉由反複非線性回歸程式之劑量-反應抑制曲線計算IC50值。

B-5.對分離的大鼠血管環之收縮的影響 分離的主動脈

可在來自內源性表現V1a受體之雄性韋斯(Wistar)大鼠之分離的主動脈環上研究測試化合物。使用二氧化碳安將雄性韋斯大鼠安樂死。將主動脈取出並置於以下組成(mmol/l)的冰冷Krebs-Henseleit緩衝液中：NaCl 112，KCl 5.9，CaCl₂ 2.0，MgCl₂ 1.2，NaH₂PO₄ 1.2，NaHCO₃ 25，葡萄糖11.5。將主動脈切成3mm環，並轉移至含有在37℃下以95% O₂、5% CO₂平衡的Krebs-Henseleit溶液之20ml器官浴中。為了記錄等長張力，將該環安裝在兩個鉤之間。將靜張力調節至3g。在平衡期後，藉由將製劑暴露於K+(50mM)Krebs-Henseleit溶液中開始各實驗。接著使用1nmol/l Arg-血管加壓素將主動脈環預收縮。穩定收縮建立後，建立測試化合物的累積劑量反應曲線。由Arg-血管加壓素誘發之穩定收縮定義為100%張力。弛鬆表示為百分比張力。

分離的腎動脈

使用二氧化碳安將雄性韋斯大鼠安樂死。將腎動脈移出並置於以下組成(mmol/l)的冰冷Krebs-Henseleit緩衝液中：NaCl 112，KCl 5.9，CaCl₂ 2.0，MgCl₂ 1.2，NaH₂PO₄ 1.2，NaHCO₃ 25，葡萄糖11.5。為了記錄等長張力，使用二根鎢絲將長度為2mm之環段安裝在小血管室肌動描記器(Danish Myo Technology A/S,Denmark)中固定至安裝爪。一安裝爪連接到測微計，允許控制血管周長。另一安裝爪連接到用於測量張力發展的力轉換器。將整個製劑與生理鹽溶液一起保存在37℃下室內，用氧氣鼓泡。在30分鐘平衡期後，將血管拉伸至其最佳管腔直徑，用於主動張力發展，其根據內圓周壁張力比確定。如果血管暴露於相當於由100mmHg的跨壁壓所產生的被動張力，則內圓周係設定為血管會具有的90%。

之後，將血管用Krebs-Henseleit緩衝液洗滌三次並留置以平衡30分鐘。接著藉由二倍暴露於高K⁺溶液(50mmol/l KCl)測試收縮性。用Krebs-Henseleit緩衝液洗滌後，接著使用1nmol/l Arg-血管加壓素將血管預收縮。穩定收縮建立後，建立測試化合物的累積劑量反應曲線。由Arg-血管加壓素誘發之穩定收縮定義為100%張力。弛鬆表示為百分比張力。

B-6.偵測心血管效應之活體內檢定：麻醉大鼠中之血壓測量(血管加壓素'挑戰'模型)

使用於K他命(ketamine)/甲苯噻(xylazine)/戊巴比妥(pentobarbital)注射麻醉下的雄性Sprague-Dawley大鼠(250-350g體重)。將預先填入含肝素(500IU/ml)等滲透氯化鈉溶液之聚乙烯管(PE-50，Intramedic^®)引入頸靜脈和股靜脈然後紮緊。經由一靜脈入口，在注射器的幫助下，注射Arg-血管加壓素(SIGMA)；經由第二靜脈入口投與測試物質。為了測定收縮血壓，係將壓力導管(Millar SPR-320 2F)紮入頸動脈中。將動脈導管與一壓力傳導器相連接，該壓力傳導器係將其訊號傳給配置有適合記錄軟體之記錄電腦。在一典型的實驗中，實驗動物係以10-15min的時間間隔以於等滲透氯化鈉溶中之界定量的Arg-血管加壓素(30ng/kg)投與3-4劑連續推注。當血壓再次達到起初的程度時，以推注大量投與於適當溶劑的測試物質且後續連續灌注。其後，在界定的時間間隔(10-15min)，再次投與和開始時相同量的Arg-血管加壓素。根據血壓值，測定測試物質對抗Arg-血管加壓素之高血壓效應的程度。對照組動物僅接受溶劑而非測試物質。

在靜脈內投與後，相較於溶劑對照組，本發明化合物抑制了由Arg-血管加壓素所造成的血壓增加。

B-7.用於檢測腎臟保護作用之活體內檢定：在囓齒動物中之急性缺血/再灌注損傷模式

從Taconic Biosciences獲得6-8週齡之實驗室繁殖雄性雄性C57Bl/6J小鼠，從Charles River獲得雄性6-8週齡的Sprague Dawley大鼠。大鼠和小鼠均保持在標準實驗室條件下，12小時光暗循環與隨意獲取正常食物並飲用水。對於缺血再灌注損傷模式，在各對照組和實驗組中共使用10-12隻大鼠或小鼠。

以連續吸入的異氟醚(isoflurane)麻醉動物。在對側腎臟之缺血程序前7天的透過右側切口進行右腎切除術。為了腎缺血，製造左側切口。以左腎蒂的解剖暴露腎血管。在45分鐘(大鼠)或25分鐘(小鼠)之缺血期間使用非創傷血管鉗停止血液(動脈和靜脈)。藉由移除血管鉗來建立再灌注。用5.0 聚丙烯縫線封閉腹壁(肌層和皮膚)。施加Temgesic®(丁丙諾啡(Buprenorphin)，0.025mg/kg s.c.)作為止痛劑。

在缺血24h後處死之前，在代謝籠中過夜收集各動物的尿液。犧牲後，在末端麻醉下獲得血液樣品。血液樣品離心後，分離血清。經由臨床生化分析儀(Pentra 400)測定血清肌酐和血清尿素二者。為了評估血清和尿腎損傷生物標誌物(嗜中性白血球明膠酶相關運載蛋[NGAL]、腎損傷分子-1[KIM-1]和骨橋蛋白(osteopontin))，根據製造商方案進行ELlSA。測量尿肌酐和白蛋白二者以測定白蛋白/肌酐比。

從RNA分離總RNA。在犧牲時將左腎在液態氮中迅速冷凍。然後將腎組織勻化並獲得RNA。總RNA轉錄成cDNA。使用TaqMan即時PCR分析全腎組織中的腎NGAL、骨橋蛋白、KIM-1、腎病蛋白(Nephrin)和Podocin mRNA表現。

對於多次比較，藉由單因子變異數分析(One Way ANOVA)與Dunnett氏校正對各組之間的差異進行分析。統計顯著性定義為p<0.05。所有統計學分析都使用GraphPad Prism 6進行。

B-8.偵測心血管效應之活體內檢定：麻醉狗中之血液動力學研究

將重量介於10至15kg的雄性米格魯犬(Beagle,Marshall BioResources)以戊巴比妥麻醉(30mg/kg i.v.，Narcoren^®，Meria，德國)用於外科手術和血流動力學和功能研究末端。泮庫溴銨(Pancuronium bromide)(Pancuronium Inresa，Inresa，德國，2-4mg/動物i.v.)另外充當肌肉鬆弛劑。將狗插管並送入氧/週圍空氣混合物(30/70%)，約2,5-4L/min。使用來自GE Healthcare(Avance)的呼吸器來進行送氣並使用二氧化碳分析儀(Datex-Ohmeda)監測。以戊巴比妥連續輸液(50μg/kg/min)持續麻醉；使用吩坦尼(fentanyl)作為止痛劑(10-40μg/kg/h)。

在準備介入中，狗係安裝一心臟起搏器。在實驗開始時，將一來自Biotronik(Logos®)之心臟起搏器植入皮下皮膚袋並經由起搏器電極(Siello S60®，Biotronik，德國)與心臟接觸，此電極係以照射經由外頸靜脈推入右心室。

之後移除所有的通路，並讓狗從麻醉中自發清醒。另7天後，啟動上述起搏器，並以每分鐘220次搏動的頻率刺激心臟。

實際的藥物測試實驗係在起搏器刺激開始後，使用下列儀器進行14和28天：

‧導入一導尿管供導尿及測量尿液流量

‧心電圖(ECG)之連接導致四肢供ECG測量

‧將一填充氯化鈉溶液之護套導引器導入股動脈。將此管連接至供測量全身血壓之血壓感測器(Braun Melsungen,Melsungen，德國)

‧透過固在頸動脈之接口導入一Millar Tip導管(350 PC型，Millar Instruments,Houston,USA)，供測量心臟血液動力學

‧將一Swan-Ganz導管(CCOmbo 7.5F,Edwards,Irvine,USA)經由頸靜脈導入肺動脈，供測量心輸出量、氧氣飽和度、肺動脈壓和中樞靜脈壓

‧將一靜脈導管置入頭靜脈中，供灌注戊巴比妥、液體置換及血液採樣(測定測試物質的血漿量或其他臨床血液值)

‧將一靜脈導管置入隱靜脈中，供灌注吩坦尼及投予測試物質

‧血漿血管加壓素(Sigma)以增加劑量灌注，最高4mU/kg/min之劑量。然後用此劑量測試藥理物質。

若需要，增幅主要訊號(ACQ 7700，Data Sciences International,USA，或Edwards-Vigilance-Monitor,Edwards,Irvine,USA)及隨後送入Ponemah系統(Data Sciences International,USA)進行評估。在整個實驗期間係持續記錄訊號，且進一步以軟體數位化處理，且平均超過30秒。

B-9.靜脈注射和口服投與後藥物動力學參數的測定

根據本發明之化合物的藥物動力學參數係在雄性C57bl6-小鼠、雄性韋斯大鼠、雌性米格魯犬和雌性馬來猴中測定。靜脈投與在小鼠和大鼠之情況下係利用物種特異性血漿/DMSO，和在狗和猴子之情況下係利用水/PEG400/乙醇調配物。在所有物種中，溶解的物質之口服投與係經由灌服進行，以水性/PEG400/乙醇調配物為基礎。在投與物質之前，藉由將聚矽氧導管插入右頸外靜脈內來簡化從大鼠取得血液。該操作在用異氟醚麻醉之實驗前至少一天進行並投與止痛劑(阿托品/Rimadyl(3/1)0.1ml s.c.。在包括物質投與後至少24至最多72小時的終時間點之時窗內採集血液(一般至少10個時間點)。當取血時，將其送入肝素化管。然後藉由離心獲得血漿，並可選擇地在20℃下儲存直到進一步處理。

將內標準品(其也可為化學上不相關的物質)加至根據本發明之化合物，校準樣品和限定劑的樣品中，並且隨後利用過量的乙腈追蹤沉澱蛋白質。添加與LC條件相匹配的緩衝溶液及隨後渦旋，接著在1000g下離心。藉由使用C18或聯苯逆相管柱和可變流動相混合物之LC-MS/MS分析上清液。經由特定選擇之離子監測實驗的萃取離子層析圖的峰高或面積進行定量物質。

所測定之血漿濃度/時間圖係用以使用驗證的藥物動力學計算程式計算藥物動力學參數諸如AUC(曲線下面積)、C_max(最大濃度)、t_1/2(終端半衰期)、F(生體可用率)、MRT(平均滯留時間)和CL(清除率)。

因為物質定量在血漿中進行，所以需要確定物質的血液/血漿分佈，以便能夠相應地調整藥物動力學參數。為此目的，在搖擺滾輪混合物中將限定量的物質在所述物種的肝素化全血中培養20分鐘。在1000g離心後，測量血漿濃度(利用LC-MS/MS；見上文)，並藉由計算全血濃度對血漿濃度的比例(C_血液/C_血漿值)來確定。

B-10.代謝研究

為了測定根據本發明之化合物的代謝分佈，彼等用重組人類細胞色素P450(CYP)酶、肝微粒體或來自不同動物(如大鼠、狗、猴子)和人體的原代新鮮肝細胞培養，以獲得及比較實質上關於完整肝I期和II期代謝和關於參予代謝的酶之資訊。

以約1-10μM的濃度培養根據本發明之化合物。為此，製備在乙腈中之0.1-1mM濃度的化合物原液，及接著用吸管以1：100稀釋移入培養混合物。在37℃下，於50mM磷酸鉀緩衝液、pH 7.4中，有及沒有由1mM NADP⁺、10mM葡萄糖-6-磷酸鹽和1單位葡萄糖6-磷酸去氫酶組成的菸醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯(NADPH)產生系統培養肝微粒體和重組酶。同樣在37℃下，在Williams E培養基中之懸浮液中培養原代肝細胞。0-4h之培養時間後，用乙腈(最終濃度約30%)停止培養混合物，並以約15000×g離心出蛋白質。如此停止的樣品可直接分析或儲存在-20℃下直到分析。

利用具有紫外線與質譜檢測之高效液相層析(HPLC-UV-MS/MS)進行分析。為此，以適合的C18逆相管柱和乙腈與10mM甲酸銨水溶液或0.05%甲酸的不同流動相混合物層析培養樣品的上澄液。UV層析圖與質譜數據一起用於識別、結構說明及定量評估代謝物，及用於培養混合物中的根據本發明之化合物的定量代謝評估。

B-11. Caco-2滲透性測試

測試物質之滲透性可借助Caco-2細胞株測定，一種活體外模式建立於胃腸屏障上的滲透性預測(Artursson,P.and Karlsson,J.(1991).Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial(Caco-2)cells.Biochem.Biophys.175 (3),880-885)。將CaCo-2細胞(ACC NO.169,DSMZ,Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen,Braunschweig,Germany)以插入接種在24孔盤中並培養14至16天。關於滲透性研究，將測試物質溶於DMSO中，並用輸送緩衝液(Hanks緩衝鹽溶液，Gibco/Invitrogen，19.9mM葡萄糖和9.8mM HEPES)稀釋至最終測試濃度。為了測定測試物質從頂端至底側(P_appA-B)的滲透性，將包含測試物質之溶液置於Caco-2細胞單層的頂端和在底側上的輸送緩衝液。為了測定滲透性測試物質從底側至頂端(P_appB-A)的滲透性，將包含測試物質之溶液置於Caco-2細胞單層的底側和在頂端上的輸送緩衝液。在實驗開始時，從各個供體室中取出樣品，之後以計算的質量平衡。經過37℃的二小時培養後，從兩個室中取出樣品。藉由LC-MS/MS分析樣品，並計算表觀滲透係數(P_app)。對於各細胞單層，測定螢光黃的滲透性以確保細胞層完整性。在每次測試操作中，亦測定阿替洛爾(atenolol)(低滲透性標記物)和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)(主動排泄標記物)的滲透性作為品質對照組。

C.醫藥組成物之實施例

根據本發明的物質可如下轉化為醫藥製劑：

組成物：

100mg實施例1之化合物、50mg乳糖(一水合物)、50mg玉米澱粉、 10mg聚乙烯吡咯啶酮(PVP 25)(來自BASF，德國)和2mg硬脂酸鎂。

錠劑重212mg。直徑8mm，曲率半徑12mm。

製造：

將實施例1之化合物、乳糖和澱粉的混合物用在水中的PVP的5%濃度溶液(m/m)造粒。乾燥後，將顆粒與硬脂酸鎂混合5分鐘。將該混合物在習知壓片機中壓縮(參見上述錠劑的格式)。

口服懸浮液： 組成物：

1000mg的實施例1之化合物、1000mg的乙醇(96%)、400mg的Rhodigel(黃原膠)(來自FMC，USA)和99g的水。

10ml的口服懸浮液相當於100mg的本發明化合物之單劑量。

製造：

將Rhodigel懸浮於乙醇中，將實施例1的化合物加至懸浮液中。在攪拌時加入水。將混合物攪拌約6小時，直到Rhodigel膨脹完全。

無菌i.v.溶液：

將根據本發明的化合物以低於飽和溶解度溶解在生理上可接受的溶劑(例如等滲透氯化鈉溶液，葡萄糖溶液5%及/或PEG 400溶液30%)中。藉由過濾將溶液滅菌並裝入無菌和無熱原的注射容器。

雖然已經參考特定具體實例揭示本發明，但是顯然，在不脫離本發明的真實精神和範圍的情況下，熟習該項技術者可設計出本發明的其它具體實例和變型。申請專利範圍意欲解釋為包括所有這些具體實例和等效變型。

Claims

一種通式(I)化合物，其中R¹ 表示下式之基團其中#¹ 表示與氮原子連接的點，Ar 表示下式之基團其中#² 表示與氮原子連接的點，R²表示選自下列的基團：三氟甲基、三氟甲氧基、乙氧基、-C(=O)N(H)CH₃和-S(=O)₂CH₃，或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。
根據請求項1之通式(I)化合物，其中R¹ 表示下式之基團其中#¹ 表示與氮原子連接的點， R² 表示選自下列的基團：三氟甲基、三氟甲氧基、乙氧基、-C(=O)N(H)CH₃和-S(=O)₂CH₃，或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。
根據請求項1或2之通式(I)化合物，其中R¹ 表示下式之基團其中#¹ 表示與氮原子連接的點，R² 表示選自下列的基團：三氟甲基和三氟甲氧基。或其醫藥上可接受的鹽、水合物及/或溶劑合物。
一種製備根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物之方法，該方法包含下列步驟[A]使中間物式(II)化合物：其中R¹係如關於根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物所定義，R³ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基，在第一步驟中在鹼存在下與通式(III)化合物反應：其中R⁴ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基，以產生中間化合物，接著使其在第二步驟中在鹼存在下與通式(IV)肼化合物或其各個鹽反應其中Ar係如關於根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物所定義，從而產生通式(V)化合物：其中R¹和Ar係如關於根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物所定義，及R⁴ 表示(C₁-C₄)-烷基，特別是甲基，接著後續步驟[B]使步驟[A]中所得式(V)化合物與氨反應，從而產生通式(I)化合物：其中R¹和Ar係如關於根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物所定義，可選擇地接著步驟[C]使用已知的氧化方法，將通式(I-A)之醇類轉化至通式(I-B)之酮類：其中Ar係如關於根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物所定義，其中Ar係如關於根據請求項1至3中任一項之通式(I)化合物所定義，各[A]、[B]和[C]在適當情況下，可選擇地接著(i)將如此獲得之式(I)化合物分離成其各自的鏡像異構物，及/或(ii)藉由用對應溶劑及/或酸類或鹼類進行處理而將式(I)化合物轉化成其各自的水合物、溶劑合物、鹽類及/或鹽類的水合物或溶劑合物，
根據請求項1至3中任一項之化合物，其係用於疾病之治療及/或預防。
根據請求項1至3中任一項之化合物，其係用於一種治療及/或預防急性和慢性腎臟疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、子癎前症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、Raynaud氏症候群和痛經之方法。
一種根據請求項1至3中任一項之化合物於製造醫藥組成物之用途，該醫藥組成物係供治療及/或預防急性和慢性腎臟疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、子癎前症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、Raynaud氏症候群和痛經。
一種醫藥組成物，其包含如請求項1至3中任一項所定義之化合物和一或多種醫藥上可接受的賦形劑。
一種醫藥組成物，其包含一或多種第一活性成分，特別是請求項1至4中任一項之通式(I)化合物，和一或多種其它活性成分，特別是一或多種選自由下列所組成群組之額外治療劑：利尿劑、血管收縮素AII拮抗劑、ACE抑制劑、β-受體阻斷劑、礦皮質素受體拮抗劑、抗糖尿病劑、有機硝酸鹽和NO供體、可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)之活化劑和刺激劑、消炎劑、免疫抑制劑、磷酸鹽黏合劑及/或調節維生素D代謝的化合物。
如請求項8或9所定義之醫藥組成物，其係用於治療及/或預防急性和慢性腎臟疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、子癎前症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、Raynaud氏症候群和痛經。
一種用於治療及/或預防人類或其他哺乳動物的急性和慢性腎臟疾病包括糖尿病腎病變、急性和慢性心衰竭、子癎前症、末梢動脈疾病(PAD)、冠狀動脈微血管功能障礙(CMD)、Raynaud氏症候群和痛經之方法，包含將有效量的一或多種如請求項1至3中任一項所定義之化合物，或請求項8至10中任一項所定義之醫藥組成物投與至需要其之人類或其他哺乳動物。