TW201803591A

TW201803591A - 用於治療乳糜瀉、非乳糜瀉麩質敏感、及難治性乳糜瀉之方法及組成物

Info

Publication number: TW201803591A
Application number: TW106119998A
Authority: TW
Inventors: 法蘭西斯可里昂; 韋恩Ｈ朱靜
Original assignee: 安美基公司; 細胞免疫有限責任公司
Priority date: 2016-06-15
Filing date: 2017-06-15
Publication date: 2018-02-01
Also published as: AU2016411388A1; EP3472202A1; CN109311972A; BR112018076287A2; MX2018015363A; JP2022001577A; TW202327653A; EA201892707A1; AR108790A1; WO2017217985A1; CA3020894A1; JP2019521981A

Abstract

本文提供用於治療炎性病症，具體而言，乳糜瀉、難治性乳糜瀉、及非乳糜瀉麩質敏感的方法及醫藥組成物。

Description

用於治療乳糜瀉、非乳糜瀉麩質敏感、及難治性乳糜瀉之方法及組成物

本申請案主張2016年6月15日申請之PCT國際申請案第PCT/US2016/037708號之優先權及權益，該申請案之整體揭示內容以引用方式併入本文中。

本文揭示之組成物及方法係關於炎性病症(具體而言，乳糜瀉、難治性乳糜瀉、及非乳糜瀉麩質敏感)之治療。

乳糜瀉(CD)係在遺傳易感性個體中由麩質消耗所引發之全身性自體免疫病(Green及Cellier,2007)。CD導致虛弱症狀，包括腸黏膜傷害及可能嚴重的醫學併發症。

CD為伴有經鑒別之抗原(麩質)之第一自體免疫疾病，該抗原係一些最常見穀類(例如，小麥、大麥、黑麥)中存在之主要蛋白質。人類缺乏完全消化麩質的酶，在正常遺傳情形下，麩質在藉由轉麩醯胺酸酶(tTG)進行去胺作用之後在腸及其他器官內引發炎症及自體免疫。CD以若干形式存在，從而存在治療挑戰。

CD係不具有核准藥物的唯一常見自體免疫病症。目前，管理CD之唯一可用策略係終生完全避免麩質。麩質之普遍存在使得完全避免即使可能，亦極其困難。少達50mg/天(普通飲食含有大於10g/天)便引發小腸內T細胞之活化且造成腸黏膜傷害(Catassi等人，2007)。出於此原因，多於 50%食用無麩質飲食(GFD)之CD患者繼續表現出活動性疾病及腸免疫活化與黏膜萎縮(Lee等人，2003；Cranney等人，2007；Hopper等人，2007；Midhagen等人，2003)。大約20%診斷有乳糜瀉之個體具有持續性症狀或貧血，伴有或不伴有陽性組織轉麩醯胺酸酶抗體(指示乳糜瀉之分子標誌物)。

非反應性乳糜瀉(NRCD)經定義為儘管已戒除飲食麩質達六至十二個月，但仍有CD所特有之持續性徵象、症狀、或實驗室異常(Rubio-Tapia等人，2013)。目前，不存在針對NRCD之有效治療。

難治性乳糜瀉(RCD)之特徵在於CD中持續暴露於麩質之少見但特有的併發症，其影響大約1%乳糜瀉患者(Lebwohl等人，2013)。RCD之特徵在於在麩質消耗不存在且小腸異常腸上皮內淋巴細胞(IEL)存在下之嚴重腸黏膜萎縮及胃腸症狀(Verbeek等人，2008；vanWanrooij等人，2014)。小腸中20%異常IEL之截止點分開RCDI型(<20%)對RCD II型(RCD-II，20%或更大)。儘管RCD-I可以類固醇對症治療，但是尚無針對RCD-I及RCD-II之核准治療或治癒性治療，且後者在50%病例中演變為明顯淋巴瘤，且預後非常差(Nijeboer等人，2015)。

腸病相關性T細胞淋巴瘤(EATL)係高級全身性T細胞淋巴瘤，幾乎專門呈RCD-II之併發症出現(Nijeboer等人，2015)。診斷包括成像及組織學，以證明惡性T細胞在上皮外位置(諸如淋巴結或其他器官)中的存在。EATL之治療依賴於手術切除及化學療法，但預後非常差，其中5年存活率小於20%(Nijeboer等人，2015)。

不具有CD之典型血清學、組織學、或遺傳學標誌物之個體及亦未經歷與小麥過敏相關之免疫球蛋白E(IgE)血清學反應之個體亦報導響應於小麥攝取而經歷的一些CD相關性症狀。已提出術語非乳糜瀉麩質敏感(NCGS)係指由此等患者報導之病狀譜(Lundin及Alaedini,2012)。非乳糜瀉麩質敏感目前理解為與響應於含小麥、黑麥、及大麥之食品之攝取而經歷各種症狀、以及從CD及小麥過敏已排除之個體的食品中移除彼等食品之後之症狀消退相關的病狀(Lundin及Alaedini,2012)。

照此，迫切需要針對CD、NRCD、RCD、EATL、及NCGS之有效治療。

在一個態樣中，本發明係關於一種治療有需要受試者中之乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之方法，其包含向該受試者投與治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段，其中該治療有效量包括各自以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約50-1000mg、較佳地75-600mg、更佳地約75mg、約150mg、約300mg、約450mg、或約600mg之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。在一個實施例中，治療有效量包含以約2週間隔投與之6個單位劑量。各單位劑量可藉由皮下注射或靜脈內注射來投與。

在另一態樣中，本發明係關於一種用於治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之醫藥組成物或用於在治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之方法中使用之醫藥組成物，其包含治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段，其中該治療有效量包含各自欲以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約50-1000mg、較佳地75-600mg、更佳地約75mg、約150mg、約300mg、約450mg、或約600mg之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。在該醫藥組成物之一個實施例中，治療有效量包含欲以2週間隔投與之6個單位劑量。各單位劑量可藉由皮下注射或靜脈內注射來投與。

本發明之另一態樣係關於一種治療有需要受試者之難治性乳糜瀉之方法，其包含向該受試者投與治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段，其中該治療有效量包含各自以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約1-50mg/kg、較佳地約4-16mg/kg、更佳地約4mg/kg、約8mg/kg、約12mg/kg、或約16mg/kg之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。在一個實施例中，該治療有效量包含以2週間隔投與之6個單位劑量、及在第1週視情況之額外速效劑量。各單位劑量藉由皮下注射或靜脈內注射來投與。難治性乳糜瀉係I型或II型難治性乳糜瀉。

本文亦提供一種用於治療難治性乳糜瀉之醫藥組成物或用於在治療難治性乳糜瀉之方法中使用之醫藥組成物，其包含治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段，其中該治療有效量包含各自以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約1-50mg/kg、較佳地約4-16mg/kg、更佳地約4mg/kg、約8mg/kg、約12mg/kg、或約16mg/kg之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。在一些實施例中，該治療有效量包含欲以2週間隔投與之6個單位劑量、及欲在第1週投與之視情況之額外速效劑量。各單位劑量可藉由皮下注射或靜脈內注射來投與。難治性乳糜瀉可係I型或II型。

在本文中所揭示之方法及/或醫藥組成物之一些實施例中，該抗體可具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。在某些實施例中，該抗體可具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。在一些實施例中，該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。在某些實施例中，該抗體可具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。

圖1繪示AMG 714之示意性結構。

圖2繪示健康受試者及患有活動性乳糜瀉之受試者腸內存在之絨毛。

圖3繪示乳糜瀉及難治性乳糜瀉病理生理學之簡化示意圖。

圖4繪示RCD-II中IL-15信號傳導之簡化示意圖。

圖5繪示IL-15於乳糜瀉及難治性乳糜瀉中之多種作用之簡化示意圖。

圖6A顯示VH：CD之與基線相比之VH：CD相對(%)減小(PP1群體)。

圖6B顯示VH：CD比率之與基線相比之相對(%)減小(PP2群體)。

圖7A顯示IEL之與基線相比之相對(%)增加(PP1群體)。

圖7B顯示IEL之與基線相比之相對變化(PP2群體)。

圖8顯示隨時間推移之平均CeD-PRO記分及改變記分(PP1群體)。

圖9顯示隨時間推移之平均CeD-GSRS記分及改變記分(PP1群體)。

圖10顯示每週具有至少1次腹瀉發作之患者之比例(PP1群體)。

圖11顯示每週具有至少1次腹瀉發作之患者之比例之與基線相比之變化(PP1群體)。

圖12顯示隨時間推移之抗-DGP IgA及IgG抗體水準(PP1群體)。

圖13顯示隨時間推移之抗-tTG IgA抗體水準(PP1群體)。

圖14顯示以劑量水準計之AMG 714血清濃度(PP1群體)。

圖15顯示以劑量水準計之AMG 714血清濃度(PP2群體)。

圖16顯示在第12週之AMG 714濃度針對VH：CD比率之與基線相比之相對(%)變化之散佈圖。

圖17顯示藉由谷濃度(給藥前，時間=0)之受試者PK中期分析從實例2獲得之AMG 714谷濃度(μg/mL)。

本文所揭示之組成物及方法係關於胃腸病症諸如CD、NRCD、RCD、EATL、及NCGS之治療，其藉由使用例如治療有效量之IL-15拮抗劑調節IL-15之活性來進行。在一些實施例中，IL-15拮抗劑係抗體。在一些實施例中，IL-15可由單株抗體AMG 714阻斷，該單株抗體可結合至IL-15並抑制其功能。

本文所提供之醫藥組成物可包括治療有效量之針對IL-15(具體而言，人類IL-15)之重組單株抗體或抗原結合片段。合適之抗體可包括例如鼠類抗體、嵌合抗體、人源化抗體、及完全人類抗體、以及此項技術中已知的其他抗體形式。在一些實施例中，抗體可包括但不限於美國專利第7,247,304號、第7,329,405號、第7,153,507號、第7,597,892號、第7,585,961號、及第8,345,105號中所揭示之抗體，所有此等專利皆以引用方式整體併入本文。抗體可使用例如國際專利申請案第WO2007/07087384號中所揭示之方法依經重組表現之醣蛋白之形式提供，該專利申請案以引用方式整體併入本文中。

在一個實施例中，該抗體係結合IL-15之完全人類單株抗體。在一特定實施例中，該抗體係AMG 714，其具有包含SEQ ID NO：2中所闡明之胺基酸序列之重鏈可變區及/或包含SEQ ID NO：4中所闡明之胺基酸序列之輕鏈可變區。抗體亦可具有與SEQ ID NO：2及/或SEQ ID NO：4有約80%、85%、90%、95%、或更大一致性之胺基酸序列。

在一些實施例中，抗體可包括輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10中所闡明之一或多個互補決定區(CDR)、或其同源序列(例如，具有與SEQ ID NO：8-10中任一者有約80%、85%、90%、95%或更大一致性之胺基酸序列)。抗體可替代地或另外地包括重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7中所闡明之一或多個CDR、或其同源序列(例如，具有與SEQ ID NO：5-7中任一者有約80%、85%、90%、95%或更大一致性之胺基酸序列)。在一具體實施例中，結合IL-15之人類單株抗體或其抗原結合片段包括輕鏈可變區及重鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10中所闡明之所有三個CDR、或其保守性胺基酸取代，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7中所闡明之所有三個CDR、或其保守性胺基酸取代。

本文所揭示之醫藥組成物可包括治療有效量之結合IL-15的經分離單株抗體或其抗原結合片段、及醫藥學上可接受之載劑。醫藥組成物可用於治療或預防與人類IL-15之過度表現相關之病症及/或其中經人類IL-15誘導之作用之下調或抑制係有利的病症。

本文亦提供一種其藉由向受試者投與治療有效量之經分離抗-IL-15抗體或其抗原結合片段來治療或預防與人類IL-15之過度表現相關之病症及/或其中經人類IL-15誘導之作用之下調或抑制係有利的病症之方法。

可使用本發明揭示之方法或組成物治療或預防的例示性病症包括但不限於乳糜瀉、非反應性乳糜瀉、難治性乳糜瀉、腸病相關性T細胞淋巴瘤、及麩質敏感性腸病。可治療的其他病症包括血管炎、牛皮癬、多發性硬化、風溼性關節炎(RA)、炎性病症(例如，炎性腸病)、異體移植體排斥、移植物抗宿主病、T細胞淋巴瘤、T細胞白血病、皮膚T細胞淋巴瘤、泡疹樣皮炎、HTLV-I-相關性脊髓病/熱帶痙攣性下肢無力、斑禿、全身性幼年風溼性關節炎、盤狀狼瘡、肌炎、子宮內膜異位炎、史提芬-強生症候群(Steven Johnson's Syndrome)、嗜酸細胞性食管炎、及類肉瘤病。

定義

為方便起見，說明書、實例、及隨附申請專利範圍中所用之某些術語彙集如下。除非另外定義，否則本文所用之所有技術及科學術語皆與本揭露所屬之技術中之一般技術人士通常所理解具有相同含義。

冠詞「一(個/種)」在本文中用於指代一個(種)或多於一個(種)(即，至少一個(種))的該冠詞之語法對象。舉例而言，「一要素」意指一個要素或多於一個要素。

如本文所用，術語「約」意指在20%內、更佳地在10%內、且最佳地在5%內。術語「實質上」意指大於50%、較佳地大於80%、且最佳地大於90%或95%。

術語「IL-15」、「IL-15抗原」、及「白介素15」在本文中可互換使用，且包括細胞天然表現的任何變體或其同功型。白介素15係促炎性細胞介素，其用作T細胞(具體地為腸上皮內淋巴細胞(IEL))及自然殺手(NK)細胞之有效生長、存活、及活化因子。在多種炎性病狀中已證實IL-15之表現增加，該等病狀包括CD、風溼性關節炎(RA)、及牛皮癬(Malamut等人，2010)。IL-15視為CD免疫病理學之重要調節子及RCD中淋巴瘤生成之非冗餘驅動子。拮抗劑對IL-15之抑制係用於治療CD之有吸引力的治療目標。藉由完全人類單株抗體結合IL-15來靶向IL-15已用以闡明CD中由IL-15促成之信號傳導機制且已對調節IL-15之下游效應子之優點建立實驗性驗證原理(Malamut等人，2010)。

如本文中所指代之術語「抗體」包括完整抗體及其任何抗原(例如，IL-15)結合片段(即，「抗原結合部分」)或單鏈。「抗體」係指包含藉由二硫鍵互連之至少兩條重(H)鏈及兩條輕(L)鏈的蛋白質，或其抗原結合部分。各重鏈包含重鏈可變區(本文中縮寫為VH)及重鏈恆定區。重鏈恆定區包含三個域CH1、CH2、及CH3。各輕鏈包含輕鏈可變區(本文中縮寫為VL)及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區包含一個域CL。VH區及VL區可進一步再分成稱為互補決定區(CDR)之高變區，穿插有稱為構架區(FR)之較保守區。各VH及VL由三個CDR及四個FR組成，該等區依以下順序自胺基端至羧基端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鏈及輕鏈可變區含有與抗原相互作用之結合域。抗體之恆定區可介導免疫球蛋白與宿主組織或因子之結合，該等宿主組織或因子包括免疫系統之各種細胞(例如，效應細胞)及經典補體系統之第一組分(Clq)。

應理解，術語「抗體」亦包括各種抗體修飾及/或衍生物形式，包括但不限於與另一分子實體偶合或連接之抗-IL-15抗體、或其抗原結合片段，該等分子實體諸如一或多種不同抗體或其抗原結合片段(例如，雙特異性、三特異性、或多特異性)、藥劑、肽或蛋白質、及檢測劑或標記。術語「抗體」亦包括單鏈抗體、雙功能抗體、域抗體、奈米抗體、及單抗體(unibody)。

如本文所用，術語抗體之「抗原結合部分」及「抗原結合片段」(或簡言之「抗體部分」)係指抗體之選擇性結合抗原(例如，IL-15)之一或多個片段。已顯示，抗體之抗原結合功能可由全長抗體之片段執行。涵蓋在術語抗體之「抗原結合部分」內的抗原結合片段之實例包括(i)Fab片段，由VL、VH、CL、及CH1域組成之單價片段；(ii)F(ab')2片段，包含藉由鉸鏈區之二硫橋連接的兩個Fab片段之二價片段；(iii)Fd片段，其由VH及CH1域組成；(iv)Fv片段，其由抗體單臂之VL及VH域組成之；(v)dAb片段(Ward等人，Nature 341：544-546(1989))，其由VH域組成；及(vi)經分離之互補決定區(CDR)；或(vii)二或更多個經分離之CDR之組合，該等CDR可視情況由合成連接子連接。此外，儘管Fv片段之兩個域VL及VH由單獨的基因編碼，但是其可使用重組方法藉由合成連接子連接，該連接子使其能夠製造成單蛋白質鏈，在該單蛋白質鏈中VL及VH區成對形成單價分子(稱為單鏈Fv(scFv)；參見例如，Bird等人，Science 242：423-426(1988)；及Huston等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85：5879-5883(1988))。此類單鏈抗體亦意欲涵蓋於術語抗體之「抗原結合部分」及「抗原結合片段」內。此等抗體片段係使用熟習此項技術者已知之習知技術獲得，且該等片段經篩選以與完整抗體相同之方式應用。

如本文所用之術語「單株抗體」係指展示對特定表位之單一結合特異性及親和力的抗體。因此，術語「人類單株抗體」係指展示單一結合特異性且具有源自人類生殖系免疫球蛋白序列之可變區及恆定區的抗體。在一個實施例中，人類單株抗體由融合瘤產生，該融合瘤包括從基因轉殖非人類動物(例如，基因轉殖小鼠)獲得之B細胞，該非人類動物具有包含人類重鏈轉殖基因及輕鏈轉殖基因之融合至永生化細胞之基因組。在另一實施例中，人類單株抗體可由中國倉鼠卵巢(CHO)細胞產生。

如本文所用之術語「重組人類抗體」包括藉由重組手段製備、表現、產生、或分離之所有人類抗體，諸如(a)自針對人類免疫球蛋白基因基因轉殖或染色體轉殖之動物(例如，小鼠)或由此製備之融合瘤分離之抗體，(b)自經轉型以表現抗體之宿主細胞(例如，CHO細胞)(例如，自轉染瘤)分離之抗體，(c)自重組、組合人類抗體文庫分離之抗體，及(d)藉由任何其他手段製備、表現、產生、或分離之抗體，該等手段涉及將人類免疫球蛋白基因序列剪接至其他DNA序列。此類重組人類抗體具有源自人類生殖系免疫球蛋白序列之可變區及恆定區。然而，在某些實施例中，此類重組人類抗體可經受活體外突變誘發(或者，當使用針對人類Ig序列基因轉殖的動物時，經受活體內體細胞突變誘發)且因此該等重組抗體之VH及VL區之胺基酸序列為雖然源自人類生殖系VH及VL序列且與該等序列相關但活體內可能不天然存在於人類抗體生殖系譜系內之序列。

如本文所用，「異源抗體」係關於產生此一抗體之基因轉殖非人類生物體而定義。此術語係指所具有的胺基酸序列或編碼核酸序列與非由基因轉殖非人類動物組成之生物體中可見者相對應，且一般來自除基因轉殖非人類動物之外的物種的抗體。

如本文所用，「經分離之抗體」係指實質上不含具有不同抗原特異性之其他抗體的抗體(例如，特異性結合至IL-15的經分離之抗體實質上不含特異性結合除IL-15外之抗原的抗體)。然而，特異性結合至IL-15之表位的經分離之抗體與其他相關細胞介素或與來自不同物種之其他IL-15蛋白具有交叉反應性。然而，抗體較佳總是結合至人類IL-15。此外，經分離之抗體通常實質上不含其他細胞材料及/或化學物。在一具體實施例中，具有不同IL-15特異性之「經分離之」單株抗體之組合係於定義明確之組成物中組合。

如本文所用，「特異性結合」、「選擇性結合(selective binding)」、及「選擇性結合(selectively binds)」係指抗體或其片段結合至預定抗原。例如，在一個實施例中，當使用重組人類IL-15作為分析物且使用抗體作為配位體於BIACORE 3000儀器中藉由表面電漿子共振(SPR)技術測定時，抗體以大約小於10^-7M，諸如大約小於10^-8M、10^-9M、或10^-10M、或甚至更低之親和力(K_D)結合，且與該預定抗原結合之親和力較其與除該預定抗原或密切相關之抗原外之非特異性抗原(例如，BSA、酪蛋白)結合之親和力大至少兩倍。片語「識別抗原之抗體」及「特異於抗原之抗體」在本文中可與術語「選擇性結合至抗原之抗體」互換使用。

如本文所用，術語「K_D」意欲指特定抗體-抗原相互作用之解離平衡常數。

如本文所用，術語「核酸分子」係指DNA及RNA分子。核酸分子可為單鏈或雙鏈，但較佳為雙鏈DNA。

如本文關於編碼選擇性結合至IL-15之抗體或抗體部分(例如，VH、VL、CDR3)之核酸所用，術語「經分離之核酸分子」係指編碼該抗體或抗體部分之核苷酸序列不含編碼結合除IL-15外之抗原之抗體或抗體部分的其他核苷酸序列的核酸分子，該等其他序列可天然地側接人類基因組DNA中之核酸。

在一個實施例中，人類抗-IL-15抗體可具有由SEQ ID NO：1中所闡明之核苷酸序列或其保守性核酸取代(例如，緘默突變)所編碼之重鏈可變區(VH)、及/或由SEQ ID NO：3中所闡明之核苷酸序列或其保守性核酸取代所編碼之輕鏈可變區(VL)。抗體亦可具有由分別與SEQ ID NO：1及/或SEQ ID NO：3有約80%、85%、90%、95%、或更大一致性之核苷酸序列編碼的VH及VL。

在一個實施例中，抗體可具有包含SEQ ID NO：2中所闡明之胺基酸序列或其保守性胺基酸取代之重鏈可變區、及/或包含SEQ ID NO：4中所闡明之胺基酸序列或其保守性胺基酸取代之輕鏈可變區。抗體亦可具有與SEQ ID NO：2及/或SEQ ID NO：4有約80%、85%、90%、95%、或更大一致性之胺基酸序列。

在一些實施例中，抗體可包括輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10中所闡明之一或多個互補決定區(CDR)、或其同源序列(例如，具有與SEQ ID NO：8-10中任一者有約80%、85%、90%、95%或更大一致性之胺基酸序列、或具有對該胺基酸序列之1或2或3或4個胺基酸取代或變化)。抗體可替代地或另外地包括重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7中所闡明之一或多個CDR、或其同源序列(例如，具有與SEQ ID NO：5-7中任一者有約80%、85%、90%、95%或更大一致性之胺基酸序列、或具有對該胺基酸序列之1或2或3或4個胺基酸取代或變化)。在一具體實施例中，結合IL-15之人類單株抗體或其抗原結合片段包括輕鏈可變區及重鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10中所闡明之所有三個CDR、或其保守性胺基酸取代，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7中所闡明之所有三個CDR、或其保守性胺基酸取代。

本發明之一個實施例亦涵蓋SEQ ID NO：1-10中所闡明之序列之「保守性序列修飾」或「保守性序列取代」，即，不顯著影響或改變由核苷酸序列編碼或含有胺基酸序列之抗體之結合特徵的核苷酸及胺基酸序列修飾。此類保守性序列修飾包括核苷酸及胺基酸取代、添加、及缺失。修飾可藉由此項技術中已知的標準技術，諸如定點突變誘發及PCR介導之突變誘發，來引入至SEQ ID NO：1-10中。保守性胺基酸取代包括胺基酸殘基經具有類似側鏈之胺基酸殘基置換之胺基酸取代。具有類似側鏈之胺基酸殘基之家族已在此項技術中加以定義。該等家族包括具有以下之胺基酸：鹼性側鏈(例如，離胺酸、精胺酸、組胺酸)、酸性側鏈(例如，天冬胺酸、麩胺酸)、不帶電荷極性側鏈(例如，甘胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸、半胱胺酸、色胺酸)、非極性側鏈(例如，丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、甲硫胺酸)、β-分支側鏈(例如，蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸)、及芳族側鏈(例如，酪胺酸、苯丙胺酸、色胺酸、組胺酸)。因此，人類抗-IL-15抗體中之預測非必需胺基酸殘基較佳經來自相同側鏈家族之另一胺基酸殘基置換。

替代地，在另一實施例中，可沿抗-IL-15抗體編碼序列之全部或部分，諸如藉由飽和突變誘發，隨機引入突變，且所得經修飾之抗-IL-15抗體可針對結合活性進行篩選。

因此，由本文中所揭示之(重鏈及輕鏈可變區)核苷酸序列編碼及/或含有本文中所揭示之(重鏈及輕鏈可變區)胺基酸序列(即，SEQ ID NO：1-4)之抗體包括由經保守性修飾之類似序列編碼或含有該等序列之實質上類似的抗體。另外，下文提供關於此類實質上類似的抗體基於本文中揭示為SEQ ID No：1-4之部分(即，重鏈及輕鏈可變區)序列而生成之方式的討論。

對於核酸，術語「實質同源」指示兩種核酸(或其指定序列)當最佳地比對及比較時(在適當核苷酸插入或缺失之情況下)於至少約80%之核苷酸、通常至少約90%至95%、且更佳地至少約98%至99.5%之核苷酸中為一致的。替代地，當區段將在選擇性雜交條件下與該鏈之互補鏈雜交時，存在實質同源。

對於胺基酸序列，術語「同源性」指示當最佳地比對及比較時(在適當插入或缺失之情況下)兩個胺基酸序列之間的一致性程度。

兩個序列之間的一致性百分比隨序列共用的一致位置之數目而變化(即，同源性%=一致位置數/總位置數x 100)，此考慮空隙之數目及各空隙之長度，需要引入該等空隙以達兩個序列之最佳比對。序列之比較及兩個序列之間的一致性百分比之判定可使用數學演算法來完成。

兩個核苷酸序列之間的一致性百分比可使用GCG軟體套件中的GAP程式(可在www.gcg.com處獲得)、使用NWSgapdna.CMP矩陣、以及40、50、60、70、或80之空隙加權值及1、2、3、4、5、或6之長度加權值來判定。兩個核苷酸或胺基酸序列之間的一致性百分比亦可使用已併入ALIGN程式(2.0版)中之E.Meyers及W.Miller(CABIOS,4：11-17(1989))之演算法、使用PAM120加權殘基表、12之空隙長度罰分及4之空隙罰分來判定。另外，兩個胺基酸序列之間的一致性百分比可使用已併入GCG軟體套件中之GAP程式(可在www.gcg.com處獲得)中的Needleman及Wunsch(J.Mol.Biol.(48)：444-453(1970))演算法、使用Blossum 62矩陣或PAM250矩陣、以及16、14、12、10、8、6、或4之空隙加權值及1、2、3、4、5、或6之長度加權值來判定。

本發明之核酸及蛋白質序列可進一步用作「查詢序列」以執行針對公眾資料庫之搜索，以便例如鑑定相關序列。此類搜索可使用Altschul等人，J.Mol.Biol.215：403-10(1990)之NBLAST及XBLAST程式(2.0版)執行。BLAST核苷酸搜索可利用NBLAST程式、記分=100、字長=12來執行，以獲得與本發明之核酸分子同源的核苷酸序列。BLAST蛋白質搜索可利用XBLAST程式、記分=50、字長=3來執行，以獲得與本發明之蛋白質分子同源的胺基酸序列。為獲得用於比較目的之空隙化比對，可利用如Altschul等人，Nucleic Acids Res.25(17)：3389-3402(1997)中所述的空隙化BLAST。當利用BLAST及空隙化BLAST程式時，可使用相應程式(例如，XBLAST及NBLAST)之預設參數。(參見www.ncbi.nlm.nih.gov)。

如本文所用，術語「受試者」包括任何人類或非人類動物。例如，本發明之方法及組成物可用於治療患有炎性疾病諸如乳糜瀉、難治性乳糜瀉、腸病相關性T細胞淋巴瘤、及非乳糜瀉麩質敏感之受試者。術語「非人類動物」包括所有脊椎動物，例如哺乳動物及非哺乳動物，諸如非人類靈長動物、綿羊、狗、母牛、雞、兩棲動物、爬行動物等。

針對炎性病症諸如乳糜瀉、難治性乳糜瀉、麩質敏感性腸病、及/或腸病相關性T細胞淋巴瘤、或類似病症之「治療有效劑量」或「治療有效量」將較佳地得到患者臨床結果之改良或者另外改善受試者之徵象及/或症狀。例如，AMG-714之治療有效劑量可得到改良的臨床結果及/或改良接受治療之患者之實驗室測試結果，例如在臨床試驗及/或醫師評定中監測到之參數，如本文中所闡明。

「單位劑量」係指在一個治療會期(treatment session)中向受試者投與之醫藥組成物(具體而言，其中之活性成分(例如，抗-IL-15抗體，諸如AMG 714))之量。治療會期可係連續的，例如，不間斷腸胃外投與(例如，皮下或靜脈內)單一推注持續一持續時間(例如，1小時、2小時)。治療會期亦可分成二或更多個子會期，以使得隨時間推移投與一個單位劑量(例如，12小時、24小時)，其中各推注後有一間斷或恢復時間。

如本文所用，「醫藥學上可接受之載劑」包括任何及所有溶劑、分散介質、包衣、抗細菌及抗真菌劑、等滲及吸收延遲劑、及生理學上可相容之類似物。載劑較佳合適於靜脈內、肌內、皮下、腸胃外、脊椎、或表皮投與(例如，藉由注射或輸注)。視投與途徑而定，抗體可包覆於材料中以保護化合物免遭酸及其他可能使化合物失活之自然條件的作用。

「醫藥學上可接受之鹽」係指保留親體化合物之所要生物活性且並不賦予任何非所要毒性作用的鹽(參見例如，Berge,S.M.等人，J.Pharm.Sci.66：1-19(1977))。此類鹽之實例包括酸加成鹽及鹼加成鹽。酸加成鹽包括源於無毒無機酸(諸如鹽酸、硝酸、磷酸、硫酸、氫溴酸、氫碘酸、氫氟酸、亞磷酸、及類似酸)之酸加成鹽，以及源於無毒有機酸(諸如脂族單羧酸與二羧酸、經苯基取代之烷酸、羥基烷酸、芳香酸、脂族磺酸與芳族磺酸、及類似酸)之酸加成鹽。鹼加成鹽包括源於鹼土金屬(諸如鈉、鉀、鎂、鈣、及類似金屬)之鹼加成鹽，以及源於無毒有機胺(諸如N,N'-二苄基乙二胺、N-甲基葡糖胺、氯普魯卡因(chloroprocaine)、膽鹼、二乙醇胺、乙二胺、普魯卡因(procaine)、及類似胺)之鹼加成鹽。

本發明之各種態樣進一步詳細地描述於以下分段中。

醫藥組成物及其製備

在一個態樣中，本發明包括一種醫藥組成物，其具有治療有效量之治療抗體或其抗原結合片段(例如，結合IL-15之人類單株抗體或其抗原結合片段)，該治療抗體或其抗原結合片段可連同醫藥學上可接受之載劑一起調配。

在一些實施例中，結合至白介素15(IL-15)之完全人類免疫球蛋白(IgG1κ)單株抗體(mAb)AMG 714適用作用於例如乳糜瀉、無麩質飲食(GFD)非反應性乳糜瀉(NRCD)、非乳糜瀉麩質敏感、及II型難治性乳糜瀉(RCD-II)之治療。

約14-15kDa之醣蛋白白介素15(IL-15)為與IL-2具有結構類似性之促炎性細胞介素。IL-15對許多免疫學相關性細胞發揮生物效應(Fehniger及Caligiuri,2001)。雖然跨物種存在重要差異，但是IL-15一般用作NK細胞及記憶表型CD8+ T細胞(包括IEL)之發育、穩態、及活化因子。其亦誘導該等細胞類型產生趨化介素及細胞介素。IL-15有效刺激單核細胞/巨噬細胞產生促炎性細胞介素諸如IL-1、IL-6、及TNF-α。已知由濾泡樹突細胞產生的IL-15支持生發中心B細胞增殖及免疫球蛋白分類轉換(Park等人，2004；Litinskiy等人，2002)。對於小鼠中IL-15或IL-15Rα基因的靶向破壞已顯示導致NK、NK-T、T細胞受體γδ(TCRγδ+)IEL、及記憶CD8+ T細胞損失(Lodolce等人，1998)。在IL-15基因剔除小鼠中，該等缺陷藉由投與外源IL-15而為可逆的(Kennedy等人，2000)。然而，人類NK細胞不完全依賴於IL-15(Lebrec等人，2013)。

IL-15信使RNA(mRNA)在各種各樣的組織及細胞類型中表現。然而，IL-15蛋白質之表現受到多得多的限制且經歷多種轉錄後控制機制。IL-15蛋白質之來源包括單核細胞、巨噬細胞、上皮細胞與成纖維細胞、及骨髓基質細胞(Fehniger及Caligiuri,2001)。IL-15及其受體亦在免疫系統外之一些器官中表現；IL-15在該等系統中之作用瞭解較少。在IL-15及IL-15Rα基因剔除小鼠中的免疫系統外不存在任何明顯缺失表明IL-15可能在任何其他系統中非係必需的。

IL-15結合至異三聚體受體，該異三聚體受體由與IL-2受體(CD122或IL-2/IL-15Rβ)共有之β鏈、與IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、及IL-21受體共有之常見γ鏈(γC)、及獨特α鏈組成。IL-15以高親和力結合至IL-15Rα鏈，然後與IL-2/IL-15Rβ及γC相互作用。IL-15/IL-15Rα複合物與完全受體複合物之其他兩種組分之締合可以順式組態發生，在該組態中所有三個受體組分存在於相同細胞上，或者以反式組態發生，在該組態中IL-15/IL-15Rα對在一個細胞上且受體β及γC鏈在另一細胞上(Schluns等人，2005)。IL-15亦可與細胞表面上之IL-15Rα締合且然後裂解成可溶性細胞介素/受體複合物，該複合物具有刺激CD8+ T細胞及NK細胞之潛力(Anthony等人，2015)。

IL-15之表現增加已在多種炎性病狀中得到證實，該等病狀包括RA、牛皮癬、炎性腸病、移植物抗宿主病、實體器官移植排斥(Blaser等人，2005；Conti等人，2003；Gianfrani等人，2005；McInnes及Gracie,2004)、及乳糜瀉(Gianfrani等人，2005；Meresse等人，2012)。

完全人類免疫球蛋白(IgG1κ)單株抗體AMG 714結合至IL-15並抑制所有已知形式之IL-15之功能(順式、反式、結合至IL-15受體α(IL-15Rα)之可溶性IL-15)。AMG 714抑制IL-15-誘導之T細胞增殖且顯示對IL-15-誘導之腫瘤壞死因子α(TNF-α)產生之劑量依賴性抑制。圖1中繪示AMG 714之結構。

AMG 714可藉由此項技術中一般已知的任何抗體產生方法來產生。例如，AMG 714可由B細胞融合瘤細胞株產生。AMG 714亦可由哺乳動物細胞株諸如中國倉鼠卵巢(CHO)細胞株產生。此項技術中之一般技術人士將理解，重鏈C末端離胺酸可從CHO細胞所產生之版本中缺失(Dick Jr.等人，Biotechnol.Bioeng.2008；100：1132-1143)。

在非臨床實驗中，已發現AMG 714識別人類IL-15(hIL-15)與其受體複合物之間的相互作用所必需的表位。AMG 714顯示對外周血T細胞及表現IL-15受體之細胞株的IL-15誘導之增殖之劑量依賴性抑制、以及對hIL-15-誘導之TNF-α產生之劑量依賴性抑制。已發現AMG 714在由於腸上皮細胞中人類IL-15之基因轉殖表現引發乳糜瀉的小鼠模型中係有效的。在此模型中，AMG 714防止IEL活化及增殖、以及組織學異常。另外，AMG 714能夠在來自患有活動性乳糜瀉及RCD-II之患者之小腸外植體之離體培養物中誘導人類IEL之細胞凋亡。

由於AMG 714對獼猴IL-15之結合效力低，所以已在非人類靈長動物(NHP)(特定言之，石蟹獼猴)之非臨床研究中使用替代分子Hu714MuXHu評估AMG 714之安全性曲線。在NHP中，Hu714MuXHu對IL-15之抑制在一些動物中導致可逆的NK細胞減少及相關胃腸感染；然而，在人類中未觀察到NK細胞耗盡(Lebrec等人，2013)且在人類研究中尚未將相應胃腸炎及腸感染報導為頻繁的不良事件(AE)。尚未觀察到其他毒理學信號。此觀察與NHP中可見之NK細胞耗盡之間的差異似乎係關於人類與石蟹獼猴之間的NK細胞對IL-15阻斷之敏感性的差異。人類NK細胞之存活並不依賴於IL-15，這可能是由於IL-2對人類NK細胞之冗餘作用。

迄今大約200位受試者已暴露於AMG 714，以用於治療RA及牛皮癬，包括大約140位受試者持續12週每兩週給藥一次。AMG 714已在四個臨床試驗中經研究，包括NHV的一個1期研究(30位受試者服用AMG 714，10位服用安慰劑，靜脈內[IV]及皮下[SC])、RA的一個1期研究(29位受試者服用AMG 714，無受試者服用安慰劑，IV)、牛皮廯的1b/2a期(14位患者服用AMG 714，6位服用安慰劑，SC)、及RA的2b期研究(121位受試者服用AMG 714，58位服用安慰劑，SC)。迄今，AMG 714已耐受良好且其安全性曲線大體上與安慰劑相當，除了有注射部位反應，該等注射部位反應更常見報導於暴露於AMG 714之受試者中。AMG 714未顯示誘導NK細胞損失。

在RA臨床試驗中，AMG 714證明在1期及2期研究中大約60%的患者之反應對安慰劑組中大約30%的患者之反應。AMG 714亦導致炎性生物標誌物(諸如C-反應性蛋白(CRP))及紅血球沉降速率(ESR)降低。AMG 714在具有牛皮廯患者之臨床試驗中並未證實反應，這表明AMG 714之作用係選擇性的，與廣效全身性免疫抑制劑不同。

AMG 714所具有之PK曲線與典型人類免疫球蛋白G1抗體一致，其中靶向介導之配置(disposition)不明顯且半衰期為20至22天。AMG 714之免疫原性已報導於來自RA及牛皮癬臨床方案中之一位受試者之僅一個血液樣品中。

本發明之醫藥組成物亦可以組合療法，即與其他藥劑組合投與。例如，該組合療法可包括本發明之組成物與至少一或多種額外治療劑，諸如抗炎劑、DMARD(疾病修飾抗風濕藥物)、免疫抑制劑、化學治療劑、及牛皮癬藥劑。本發明之醫藥組成物亦可結合放射療法投與。本發明亦涵蓋與其他抗體諸如CD4特異性抗體及IL-2特異性抗體之共同投與。與CD4特異性抗體或IL-2特異性抗體之此類組合被認為特別適用於治療自體免疫疾病及移植排斥。

本發明之組成物可藉由此項技術中已知的多種方法投與。熟練技術人員應瞭解，投與之途徑及/或模式將視所要結果而變化。活性化合物可用將防止化合物快速釋放之載劑製備，諸如控制釋放調配物，包括植入物、透皮貼劑、及微囊封遞送系統。可使用生物可降解之生物相容性聚合物，諸如乙烯-乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯(polyorthoesters)、及聚乳酸。製備此類調配物之許多方法一般為熟習此項技術者所已知。參見例如，Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems,J.R.Robinson編，Marcel Dekker,Inc.,New York,1978。

為藉由某些投與途徑投與本發明之化合物，可能有必要將化合物用防止其失活之物質塗佈或將化合物與防止其失活之物質共同投與。例如，可以適當載劑(例如，脂質體或稀釋劑)將化合物投與至受試者。醫藥學上可接受之稀釋劑包括鹽水及水性緩衝溶液。脂質體包括水包油包水CGF乳液以及習知脂質體(Strejan等人，J.Neuroimmunol.7：27(1984))。

醫藥學上可接受之載劑包括無菌水溶液或分散液以及用於臨時製備無菌可注射溶液或分散液之無菌粉末。此項技術中已知用於醫藥學上活性物質之此類介質及藥劑之使用。除非任何習知介質或藥劑與活性化合物不相容，否則涵蓋其用於本發明之醫藥組成物中。補充性活性化合物亦可併入組成物中。

治療性組成物通常須在製造及儲存條件下為無菌且穩定的。組成物可調配成溶液、微乳液、脂質體、或適於高藥物濃度之其他有序結構。載劑可為含有例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、及液體聚乙二醇、及其類似物)、及其合適混合物之溶劑或分散介質。適當流動性可例如藉由使用諸如卵磷脂之包衣、藉由在分散狀況下維持所需粒子大小、且藉由使用界面活性劑來維持。在多種情況下，較佳應於組成物中包括等滲劑，例如糖、多元醇(諸如甘露糖醇、山梨糖醇)、或氯化鈉。延長可注射組成物之吸收可藉由在組成物中包括延遲吸收之藥劑(例如，單硬脂酸鹽及明膠)而達成。

無菌可注射溶液可藉由按需要於具有上文列舉之成分之一者或組合之適當溶劑中併入所需量之活性化合物、隨後進行滅菌微過濾來製備。一般而言，分散液係藉由將活性化合物併入無菌媒介物中來製備，該媒介物含有鹼性分散介質及來自上文列舉彼等成分的所需其他成分。在用於製備無菌可注射溶液之無菌粉末之情況下，較佳製備方法為真空乾燥及冷凍乾燥(凍乾)，其產生活性成分加上來自其先前無菌過濾溶液之任何額外所要成分之粉末。

可調整劑量方案以提供最佳之所要反應(例如，治療反應)。例如，可投與單次推注，可隨時間推移投與幾次分開劑量，或者可按照治療情形之緊張程度所指示，按比例減少或增加劑量。例如，本發明之人類抗體可藉由皮下注射投與每週一次或兩次，或藉由皮下注射投與每月一次或兩次。

尤其，宜以便於投與及劑量一致性之劑量單位形式調配腸胃外組成物。如本文中所使用之劑量單位形式係指對於欲治療之受試者適合作為單位劑量之物理離散單位；各單位含有經計算產生所要治療效應之預定量活性化合物與所需醫藥載劑結合。本發明之劑量單位形式之規格取決於且直接依賴於(a)活性化合物之獨特特徵及欲達成之特定治療效應，及(b)混配此一活性化合物以用於治療個體之敏感性之技術中固有之限制。

醫藥學上可接受之抗氧化劑之實例包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、及其類似物；(2)油溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、五倍子酸丙酯、α-生育酚、及其類似物；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸、及其類似物。

對於治療組成物，本發明之調配物包括合適於經口、經鼻、局部(包括經頰及舌下)、直腸、陰道、及/或腸胃外投與之調配物。調配物可宜以單位劑型提供且可藉由藥學技術中已知之任何方法製備。可與載劑物質組合以產生單一劑型之活性成分之量將視正治療之受試者、及特定投與模式而變化。可與載劑物質組合以產生單一劑型之活性成分之量將一般為組成物之產生治療效應之量。通常，以百分之一百計，該量將在約0.001%至約90%活性成分之範圍內，較佳在約0.005%至約70%範圍內，最佳在約0.01%至約30%範圍內。

用於局部或經皮投與本發明組成物之劑型包括粉末、噴霧劑、軟膏劑、糊劑、乳膏劑、洗劑、凝膠劑、溶液、貼片、及吸入劑。活性化合物可在無菌條件下與醫藥學上可接受之載劑，且與可能需要之任何防腐劑、緩衝液、或推進劑混合。

可用於本發明之醫藥組成物之合適水性及非水性載劑之實例包括水、乙醇、多元醇(諸如甘油、丙二醇、聚乙二醇、及其類似物)、及其合適混合物、植物油(諸如橄欖油)、及可注射有機酯(諸如油酸乙酯)。可例如藉由使用諸如卵磷脂之包衣材料，藉由維持分散狀況下之所需粒子大小及藉由使用界面活性劑來維持適當流動性。

該等組成物亦可含有佐劑，諸如防腐劑、潤濕劑、乳化劑、及分散劑。防止微生物存在可藉由以上滅菌程序及藉由包括各種抗細菌劑及抗真菌劑(例如對羥苯甲酸、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、及其類似物)兩者來確保。可亦需要組成物中包括等滲劑，諸如糖、氯化鈉、及其類似物。此外，延長可注射醫藥形式之吸收可藉由包括延遲吸收之藥劑(諸如單硬脂酸鋁及明膠)來達成。

當本發明之化合物作為藥物投與至人及動物時，其可單獨給予或呈含有例如0.001至90%(更佳為0.005至70%，諸如0.01至30%)之活性成分與醫藥學上可接受之載劑組合的醫藥組成物給予。

如本文所用，片語「腸胃外投與」及「腸胃外投與」意指除腸內及局部投與外之投與模式，通常藉由注射投與，且包括但不限於靜脈內、肌內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、脊椎內、硬膜外、及胸骨內注射及輸注。在一些實施例中，可使用皮下及/或靜脈內投與，其某些優勢及缺點概述如下。

無論選擇何種投與途徑，可以合適水合形式使用的本發明之化合物、及/或本發明之醫藥組成物藉由熟習此項技術者已知之習知方法調配成醫藥學上可接受之劑型。

本發明之醫藥組成物中之活性成分的實際劑量水準可變化以便獲得活性成分之有效達成針對特定患者、組成物、及投與模式之所要治療反應而對患者無毒的量。經選擇之劑量水準將取決於多種藥物動力學因素，包括使用之本發明組成物或其酯、鹽或醯胺之活性、投與途徑、投與時間、使用之特定化合物之排泄率、治療之持續時間、與使用之特定組成物組合使用之其他藥物、化合物及/或材料、所治療患者之年齡、性別、體重、病狀、一般健康狀況及先前病史，以及醫學技術中熟知的類似因素。具有此項技術中之一般技能之醫師或獸醫可易於確定且指定所需醫藥組成物之有效量。舉例而言，醫師或獸醫可在低於為達成所要治療效應所需之劑量之水準下開始用於醫藥組成物中之本發明化合物之劑量且逐漸增加劑量直至達成所要效應。一般而言，本發明組成物之合適每日劑量將為化合物之為有效產生治療效應之最低劑量的量。此一有效劑量將一般取決於上文所述之因素。較佳的是靜脈內、肌內、腹膜內、或皮下投與，較佳地鄰近標靶位點投與。必要時，治療組成物之有效每日劑量可視情況以單位劑型作為全天內以適當時間間隔分別投與之兩個、三個、四個、五個、六個、或更多亞劑量投與。雖然有可能單獨投與本發明之化合物，但較佳的是以醫藥調配物(組成物)形式投與該化合物。

治療組成物可用此項技術中已知之醫學裝置投與。例如，在一較佳實施例中，本發明之治療組成物可使用無針皮下注射裝置投與，諸如美國專利第5,399,163號、第5,383,851號、第5,312,335號、第5,064,413號、第4,941,880號、第4,790,824號、或第4,596,556號所揭示之裝置。適用於本發明之熟知植入物及模組之實例包括：美國專利第4,487,603號，該專利揭示一種用於以受控速率分配藥物之可植入微型輸注泵；美國專利第4.,486,194號，該專利揭示一種用於穿透皮膚投與藥物之治療裝置；美國專利第4,447,233號，該專利揭示一種用於以精確輸注速率遞送藥物之藥物輸注泵；美國專利第4,447,224號，該專利揭示一種用於持續藥物遞送之變流可植入輸注設備；美國專利第4,439,196號，該專利揭示一種具有多腔隔室之滲透藥物遞送系統；以及美國專利第4,475,196號，該專利揭示一種滲透藥物遞送系統。許多其他此類植入物、遞送系統、及模組為熟習此項技術者所已知。

本發明之治療抗體可經調配以有助於活體內的適當分佈。例如，血腦屏障(BBB)隔絕許多高度親水性化合物。為有助於本發明之治療化合物穿過BBB(必要時)，可將該等治療化合物例如調配於脂質體中。對於製造脂質體之方法，參見例如，美國專利4,522,811；5,374,548；以及5,399,331。脂質體可包含一或多個部分，該等部分選擇性運輸至特定細胞或器官中，因此增強靶向藥物遞送(參見例如，V.V.Ranade J.Clin.Pharmacol.29：685(1989)。例示性靶向部分包括葉酸或生物素(參見例如，Low等人之美國專利5,416,016)；甘露糖苷(Umezawa等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.153：1038(1988))；抗體(P.G.Bloeman等人，FEBS Lett.357：140(1995)；M.Owais等人，Antimicrob.Agents Chemother.39：180(1995))；界面活性劑蛋白質A受體(Briscoe等人，Am.J.Physiol.1233：134(1995))，該受體之不同種類可包含本發明之調配物、以及本發明分子之組分；p120(Schreier等人，J.Biol.Chem.269：9090(1994))；亦參見K.Keinanen；M.L.Laukkanen FEBS Lett.346：123(1994)；J.J.Killion；I.J.Fidler Immunomethods4：273(1994)。本發明之治療化合物可調配於脂質體中；且該等脂質體可包括靶向部分。調配於脂質體中之治療化合物可藉由推注注射至與腫瘤或感染鄰近之部位來遞送。該組成物必須為流體(至組成物可容易抽取至注射器中之程度)。脂質體組成物在製造及儲存條件下可為穩定的。脂質體組成物可對抗微生物諸如細菌及真菌之污染作用而保存。

本發明之組成物可經調配以預防或減少跨胎盤之運輸。這可藉由此項技術中已知之方法，例如藉由抗體之PEG化或藉由使用F(ab)2'片段來進行。可進一步參考「Cunningham-Rundles C,Zhuo Z,Griffith B,Keenan J.(1992)Biological activities of polyethylene-glycol immunoglobulin conjugates.」Resistance to enzymatic degradation.J Immunol Methods.152：177-190；以及Landor M.(1995)Maternal-fetal transfer of immunoglobulins,Ann Allergy Asthma Immunol 74：279-283。

該組成物必須係無菌的且為流體(至組成物可由注射器遞送之程度)。除水以外，載劑可為等滲緩衝鹽水溶液、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、及液體聚乙二醇、及其類似物)、及其合適混合物。恰當流動性可例如藉由使用包衣(諸如卵磷脂)、在分散液情況下藉由維持所需粒子大小、及藉由使用界面活性劑來維持。在許多情況下，在組成物中較佳地包括等滲劑，例如糖、多元醇(諸如甘露糖醇或山梨糖醇)、及氯化鈉。可注射組成物之長期吸收可藉由在組成物中包括延遲吸收之藥劑(例如單硬脂酸鋁及明膠)來達成。

當活性化合物受到適合保護時，如上文所述，該化合物可例如用惰性稀釋劑或可同化的食用載劑經口投與。

醫藥組成物治療乳糜瀉及非乳糜瀉麩質敏感之用途

乳糜瀉係在遺傳易感性個體中由麩質消耗所引發之全身性自體免疫病(Green及Cellier,2007)。目前約1%美國(US)及歐盟(EU)人群受到乳糜瀉影響，但僅10-20%乳糜瀉患者得到診斷。乳糜瀉為伴有經鑒別之抗原(麩質)之第一自體免疫疾病，該抗原係一些最常見穀類(例如，小麥、大麥、黑麥)中存在之主要蛋白質。現代飲食日益富含麩質且其亦用作加工食品、化妝品、及口服藥物之添加劑。麩質係繼糖之後第二種最常見食品成分，且在一些國家存在於多達80%的食物中。

人類缺乏完全消化麩質的酶，在正常遺傳情形(即，HLA-DQ2/8之存在，易Th1性免疫系統)下該麩質在藉由酶轉麩醯胺酸酶(tTG)進行脫胺作用之後在腸及其他器官內引發炎症及自體免疫，該轉麩醯胺酸酶自身成為自體抗體之靶標。據信IL-15係導致腸外表現之適應性免疫反應、及經由上皮內淋巴細胞(IEL)介導之導致腸黏膜萎縮及胃腸症狀之先天免疫反應二者中之關鍵介導物。

乳糜瀉造成衰弱症狀且潛在地造成嚴重的醫學併發症。在許多患者中，由產生炎性細胞介素之IEL增加及腸黏膜傷害所引起之胃腸症狀在診斷時患者所報導之症狀中佔優勢。如圖2中所繪示，健康個體之腸(左圖)中存在之正常絨毛(吸收性指樣延長部分)在活動性乳糜瀉(右圖)中由於黏膜萎縮及隱窩擴大而受到損失。絨毛高度(VH)對腸隱窩深度(CD)之比率(VH：CD比率)為乳糜瀉嚴重性之主要描述之一(Taavela等人，2013)。小腸傷害往往導致營養素吸收不良，進而可導致一系列另外的臨床表現(例如，貧血、骨量減少、兒童成長遲緩)。另外，常常存在腸外症狀及全身性表現，諸如皮炎、不孕、神經病症、以及骨骼病症(Gr·een及Cellier,2007)。

儘管這有相當大的發病率，但乳糜瀉係不具有核准藥物的唯一常見自體免疫病症。目前，管理乳糜瀉之唯一可用策略係終生完全避免麩質。儘管理論上簡單，但實際上麩質於食物、藥物、家用物質、化妝品、及甚至無麩質物品中之普遍存在使得完全避免麩質即使可能，亦十分困難。

成功維持無麩質飲食(GFD)之主要挑戰在於穀類粉廣泛用於食品工業中且天然地或作為添加劑存在於大部分食品產品中。儘管可購買無麩質產品，但是商業製造之無麩質產品可能難以找到，往往味道較差，且比常規含麩質食品更昂貴，這有時可能使患者停止堅持GFD。另外，許多國家缺乏食品產品之適當標示。甚至在具有優異標示準則之國家，標示「無麩質」之食品卻含有麩質。例如，在北歐國家，在指定用於乳糜瀉患者之無麩質產品中允許多達100百萬分點(ppm)之麩質量(Gibert等人，2006)。

出於該等原因，乳糜瀉患者當消耗食品及飲料時會經常暴露於麩質污染。此對麩質污染之暴露以及相關生理學及心理學原因導致社會活動之自身限制及/或經消耗食品種類之減少。因此，GFD存在相當大的挑戰及對患者之實質負擔。Shah等人，(2014)之研究發現，乳糜瀉及GFD對患者生活品質之負擔排行第二，僅次於每週需要多次透析治療之情況的末期腎病。

如上文所討論，麩質之普遍存在使得完全避免即使可能，亦極其困難。少達50mg/天(普通飲食含有大於10g/天)便引發小腸內T細胞之活化且造成腸黏膜傷害(Catassi等人，2007)。出於此原因，多於50%食用GFD之乳糜瀉患者繼續表現出活動性疾病及腸免疫活化與黏膜萎縮(Lee等人，2003；Cranney等人，2007；Hopper等人，2007；Midhagen等人，2003)。

認為儘管嘗試維持GFD但繼續具有症狀之患者係患有NRCD。NRCD已定義為「儘管避免飲食麩質6-12個月但仍有乳糜瀉所特有的持久性症狀、徵象、或實驗室異常」(Rubio-Tapia等人，2013)。患者支持組及專家贊成急迫需要獨立於GFD或與GFD組合之替代性治療選項，以改良乳糜瀉患者之生活品質。

大量實驗資料支持IL-15在CD及RCD之病理生理學中之多種作用(Abadie及Jabri等人，2014)，如圖5所繪示。例如，在先天性免疫反應內，IL-15係破壞腸黏膜之IEL之必需、非冗餘生長及活化因子。另外，IL-15於腸上皮細胞中之表現為絨毛萎縮所必需的。另外，在一些患者中，IL-15驅使朝向淋巴瘤生成及潛在致命性RCD-II進展(Malamut等人，2010)。

實驗資料表明IL-15亦介導適應性免疫反應。例如，IL-15增強抗原呈遞細胞(APC)對去醯胺麩質肽(DGP)之呈遞。另外，IL-15致使經活化CD4+ T細胞抵抗調節T細胞之抑制。

藉由活化IEL，據信IL-15係響應於乳糜瀉中之麩質暴露而接著發生的黏膜傷害中的主要介導物(Korneychuk等人，2014)。IL-15於腸上皮細胞中之表現在乳糜瀉動物模型中為絨毛萎縮所必需且情況證據表明這亦是人類中的情況。另外，IL-15致使效應T細胞抵抗調節T細胞(T_reg)對其之抑制(Abadie及Jabri 2014)，從而促使對食品抗原之耐受性損失(DePaolo等人，2011；Korneychuk等人，2014)。

乳糜瀉小鼠模型之一為IL-15-基因轉殖小鼠，其中由腸上皮細胞進行之IL-15過度表現導致乳糜瀉樣表現，包括T細胞及B細胞介導之病理(Yokoyama等人，2009及2011)。在此動物模型中在用抗-IL-15 mAb AMG 714(Malamut等人，2010)或抗-IL-15R mAb(Yokoyama等人，2009)治療之後觀察到IEL細胞凋亡。已證實IL-15係對食品抗原之耐受性損失中之關鍵性因子(DePaolo等人，2011；Korneychuk等人，2014)。

不具有CD之典型血清學、組織學、或遺傳學標誌物之個體及亦未經歷與小麥過敏相關之免疫球蛋白E(IgE)血清學反應之個體亦報導響應於小麥攝取而經歷的一些CD相關性症狀。已提出術語非乳糜瀉麩質敏感(Non-celiac gluten sensitivity)或非乳糜瀉麩質敏感(non-celiac gluten sensitivity)(NCGS)係指由此等患者報導的病狀譜(Lundin及Alaedini,2012)。非乳糜瀉麩質敏感目前理解為與響應於含小麥、黑麥、及大麥之食品之攝取而經歷各種症狀、以及從CD及小麥過敏已排除之個體的食品中移除彼等食品之後之症狀消退相關的病狀(Lundin及Alaedini,2012)。該等症狀可能伴隨麩質之抗體之水準的增加。大部分與NCGS相關性症狀係主觀性的，包括腹痛、頭痛、「腦霧(brain fog)」、手腳刺痛及/或麻痹、疲乏、及肌肉骨骼痛。然而，亦報導與NCGS相關之其他症狀諸如皮疹及腹瀉、以及更多嚴重神經病學及精神病學病狀(包括精神分裂症及小腦性共濟失調)。

本發明提供用於藉由投與治療有效量之本文所揭示之抗-IL-15 抗體或其抗原結合片段治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之方法及組成物。在一些實施例中，治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段例如對於CD或NCGS之治療可達成以下一或多者：(1)麩質誘導之小腸黏膜形態學損傷之減輕；(2)絨毛高度與隱窩深度(VH：CD)比率之減小；(3)麩質誘導之小腸黏膜炎症之減輕，其測量為上皮內淋巴細胞(IEL)密度；(4)麩質誘導之小腸黏膜形態損傷之減輕，其使用Marsh記分之分組分類獲得；(5)麩質誘導之血清抗體之減輕，其藉由測量抗組織轉麩醯胺酸酶抗體(抗-tTG IgA)及抗去醯胺麥膠蛋白肽(抗-DGP)IgA及IgG獲得；及/或(6)麩質誘導之臨床症狀之減輕，如乳糜瀉患者報導之結果(Celiac Disease Patient-Reported Outcome,CeD PRO)、布里斯托大便形狀分類表(Bristol Stool Form Scale,BSFS)、胃腸症狀評定量表(Gastrointestinal Symptom Rating Scale,GSRS)、及乳糜瀉GSRS(CeD-GSRS)、及醫師整體評定(Physician Global Assessment,PGA)所評定。NCGS之另外端點包括症狀之特別清單(Di Sabatino等人，Clinical Gastroenterology and Hepatology 2015；13：1604-1612)或類似視覺模擬評分表(VAS)之患者報導之嚴重性結果(Elli等人，Nutrients 2016,8,84；doi：10.3390/nu8020084)。

此項技術中之一般技術人士將能夠基於額外因素諸如受試者之體型、受試者症狀之嚴重性、及所選之特定組成物或投與途徑來確定此類治療有效量。

在一些實施例，本文所揭示之醫藥組成物之量或單位劑量可包括約50-1000mg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。在一些實施例中，單位劑量可係：約50-100mg、約100-150mg、約150-200mg、約200-250mg、約250-300mg、約300-350mg、約350-400mg、約400-450mg、約450-500mg、約500-550mg、約550-600mg、約600-700mg、約 700-800mg、約800-900mg、或約900-1000mg、或更高或更低、或其間的任何數值的本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例中，該量或單位劑量可係：約50-60mg、約60-70mg、約70-80mg、約80-90mg、約90-100mg、約100-110mg、約110-120mg、約120-130mg、約130-140mg、約140-150mg、約150-160mg、約160-170mg、約170-180mg、約180-190mg、約190-200mg、約200-210mg、約210-220mg、約220-230mg、約230-240mg、約240-250mg、約250-260mg、約260-270mg、約270-280mg、約280-290mg、約290-300mg、約300-310mg、約310-320mg、約320-330mg、約330-340mg、約340-350mg、約350-360mg、約360-370mg、約370-380mg、約380-390mg、約390-400mg、約400-410mg、約410-420mg、約420-430mg、約430-440mg、約440-450mg、約450-460mg、約460-470mg、約470-480mg、約480-490mg、約490-500mg、約500-510mg、約510-520mg、約520-530mg、約530-540mg、約540-550mg、約550-560mg、約560-570mg、約570-580mg、約580-590mg、約590-600mg、約600-610mg、約610-620mg、約630-640mg、約640-650mg、約650-660mg、約660-670mg、約670-680mg、約680-690mg、或690-700mg之本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例中，該量或單位劑量可係：約50、約55、約60、約65、約70、約75、約80、約85、約90、約95、約100、約105、約110、約115、約120、約125、約130、約135、約140、約145、約150、約155、約160、約165、約170、約175、約180、約185、約190、約195、約200、約205、約210、約220、約225、約230、約235、約240、約245、約250、約255、約260、約265、約270、約275、約280、約285、約290、約295、約300、約305、約310、約315、約320、約325、約330、約335、約340、約345、約350、約355、約360、約365、約370、約375、約380、約385、約390、約395、約400、約405、約410、約415、約420、約425、約430、約435、約440、約445、約450、約455、約460、約465、約470、約475、約480、約485、約490、約495、約500、約505、約510、約515、約520、約525、約530、約535、約540、約545、約550、約555、約560、約565、約570、約575、約580、約585、約590、約595、約600、約605、約610、約615、約620、約625、約630、約635、約640、約645、約650、約655、約660、約665、約670、約675、約680、約685、約690、約695、或約700mg、或介於任兩個前述值之間之任何數值的本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例，本文所揭示之醫藥組成物之量或單位劑量可包括約1-50mg/kg(患者體重)之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。在一些實施例中，單位劑量可係：約1-10mg/kg、約10-20mg/kg、約20-30mg/kg、約30-40mg/kg、或約40-50mg/kg、或更高或更低、或其間之任何數值的本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例中，該量或單位劑量可係：約1-5mg/kg、約5-10mg/kg、約10-15mg/kg、約15-20mg/kg、約20-25mg/kg、約25-30mg/kg、約30-35mg/kg、約35-40mg/kg、約40-45mg/kg、或約45-50mg/kg。在一些實施例中，較佳劑量可包括：約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、約25、約26、約27、約28、約29、約30、約31、約32、約33、約34、約35、約36、約37、約38、約 39、約40、約41、約42、約43、約44、約45、約46、約47、約48、約49、或約50mg/kg之本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例中，各受試者可接受本文所揭示之至少一個(例如，1-100)單位劑量，其取決於疾病之嚴重性及/或治療之有效性。例如，受試者可接受可彼此相同或不同的(例如，一或多個初始單位劑量可小於或大於後續單位劑量)2-20個單位劑量。

在一些實施例中，本文所揭示之醫藥組成物可藉由每1-20週皮下或靜脈內注射以本文所揭示之單位劑量來投與。在一個實施例中，該醫藥組成物經皮下投與。在另一實施例中，該醫藥組成物經靜脈內投與。在某些實施例中，投與可每1-5、5-10、10-15、或15-20週發生。在一些實施例中，投與可每1-2、2-4、4-6、6-8、8-10、10-12、12-14、14-16、16-18、或18-20週發生。在一些實施例中，投與每1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、或20週發生。單位劑量可以相同間隔(例如，每1-20週)給予。替代地，至少一部分單位劑量以不同於(例如，縮短或延長)其他單位劑量之間隔給予。

在其他態樣中，本發明係關於一種如本文所述之醫藥組成物，其用於治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感，其中該醫藥組成物包含抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在其他實施例中，該醫藥組成物包含75mg、150mg、300mg、450mg、600mg、4mg/kg、8mg/kg、或12mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在某些實施例中，該醫藥組成物包含150mg或300mg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該醫藥組成物每1、2、或4週經皮下投與，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在一個實施例中，該醫藥組成物每2週經皮下投與。在另一具體實施例中，該醫藥組成物每1、2、或4週經靜脈內投與，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該醫藥組成物每2週經靜脈內投與。

在一些態樣中，本發明係關於一種如本文所述之醫藥組成物，其用於治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之方法中，其中該方法包含投與(例如，皮下)抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含投與(例如，皮下)75mg、150mg、300mg、450mg、600mg、4mg/kg、8mg/kg、或12mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在某些實施例中，該方法包含投與(例如，皮下)150mg或300mg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含每1、2、或4週皮下投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在一個實施例中，該方法包含每2週皮下投與。在另一具體實施例中，該方法包含每1、2、或4週靜脈內投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該方法包含每2週靜脈內投與。

在另一態樣中，本發明係關於一種治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之方法，其中該方法包含投與(例如，皮下)抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含投與(例如，皮下)75mg、150mg、300mg、450mg、600mg、4mg/kg、8mg/kg、或12mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在某些實施例中，該方法包含投與(例如，皮下)150mg或300mg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含每1、2、或4週皮下投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在一個實施例中，該方法包含每2週皮下投與。在另一具體實施例中，該方法包含每1、2、或4週靜脈內投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該方法包含每2週靜脈內投與。

在本文所述之醫藥組成物及方法之具體實施例中，經由皮下注射每2週一次(q2w)投與150或300或450mg之抗-IL 15抗體(例如，AMG 714)。在另一實施例中，給藥可係450mg，每4週一次(q4w)。

醫藥組成物治療難治性乳糜瀉之用途

乳糜瀉持續暴露於麩質之少見但特殊之併發症係難治性乳糜瀉(RCD)之發展，其影響大約1%乳糜瀉患者(Lebwohl等人，2013)。RCD之特徵在於在麩質消耗不存在且小腸異常腸IEL存在下之嚴重腸黏膜萎縮及胃腸症狀(Verbeek等人，2008,vanWanrooij等人，2014)。

RCD患者可根據異常IEL之比例及特徵進一步分類。具有低比例的異常IEL之患者稱為I型RCD(RCD-I)，該低比例的異常IEL定義為小於總IEL之20%(每100個上皮細胞少於20個IEL)，如藉由流式細胞術所測定。此等異常IEL一般係多株，且RCD-I患者並未處於發展明顯上皮外淋巴瘤(即，腸病相關性T細胞淋巴瘤[EATL])之增加的風險下且具有一般5年之存活(vanWanrooij等人，2014)。為治療RCD-I，伴以臨床及組織學改良，可使用皮質類固醇(局部或全身)、硫唑嘌呤、巰基嘌呤、抗-TNF劑、或克拉屈濱(Brar等人，2007；Goerres等人，2003)。圖3繪示乳糜瀉及難治性乳糜瀉之病理生理學，如Schuppan等人所述。

當異常IEL之比例達到或超過20%時，患者經診斷有II型RCD(RCD-II)。在RCD-II中，IEL通常係單株，且發展EATL之風險顯著增加至大於50%(Nijeboer等人，2015)。異常IEL在麩質不存在下由於抗細胞凋亡機制之累積而增殖，因此術語「難治性」指示疾病(非霍奇金緩慢生長上皮內淋巴瘤)似乎並不依賴於麩質，因為其不響應於最嚴格GFD。如圖4所繪示，據信IL-15係異常IEL之轉型及保持之主要驅動子(Meresse等人，2012)。已由以下發現建立對於RCD-II中之IL-15抑制的理論實驗性驗證：用抗-IL-15 mAb AMG 714阻斷IL-15會誘導來自活動性乳糜瀉及RCD-II患者之人類小腸活檢物中之IEL細胞凋亡(Malamut等人，2010)。同樣，在用抗-IL-15 AMG 714(Malamut等人，2010)或抗-IL-15-受體mAb(Yokoyama等人，2009)治療乳糜瀉之動物模型中觀察到IEL細胞凋亡。

基於以下觀察已證實異常單株IEL係EATL之前驅物：T細胞受體(TCR)重排庫在來自發展EATL之RCD-II患者的系列活檢物中係類似的。認為RCD-II係小腸之原位低級T細胞淋巴瘤。對RCD-II中之低級IEL增殖之充分研究已顯示存在細胞內CD3而無表面CD3或TCR且一般無CD8表現且有CD103表現之特徵表型，其由高級EATL增殖所共有。此表型不同於非併發性乳糜瀉中IEL之正常表型，且連同腸活檢物中無性TCR重排之常見存在證實RCD之診斷且允許追蹤擴增。

RCD-II之治療十分困難，因為異常淋巴細胞散佈於整個小腸上皮且通常散佈於胃部及結腸內，從而排除手術。另外，不存在RCD-II之護理之標準。對於患者而言，化學療法之嘗試幾乎無效及/或危險。已使用克拉屈濱(Tack等人，2011a；Tack等人，2011b)及自體骨髓移植且其顯示暫時改良消化症狀及組織學但未改良單株增殖。RCD-II之預後較差，在3-10年內發生死亡，這主要係由於頑固性腹瀉、EATL、或低級淋巴細胞增殖很少擴散至其他組織(例如，皮膚、肺部)。

EATL係高級全身性T細胞淋巴瘤，幾乎專門呈RCD-II之併發症出現(Nijeboer等人，2015)。診斷包括成像及組織學，以證明惡性T細胞在上皮外位置(諸如淋巴結或其他器官)中的存在。EATL之治療依賴於手術切除及化學療法，但預後非常差，其中5年存活率小於20%(Nijeboer等人，2015)。

EATL之發病率逐漸增加，且此增加與飲食中之麩質污染在延長時間段內之發生率逐漸升高有關(Sharaiha等人，2012)。可減輕異常IEL之存在、組織學異常、及/或症狀的RCD-II之有效治療保持最高優先級。CD、RCD、及ETCL之特徵之概述匯總於以下表1中。

本發明提供用於藉由投與治療有效量之本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段治療I型或II型難治性乳糜瀉之方法及組成物。在一些實施例中，治療有效量之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段對於例如RCD-I或RCD-II之治療可達成以下一或多者：(1)藉由定量異常腸上皮內淋巴細胞(IEL)對比總IEL之%與基線相比之減小來測量免疫反應，如藉由流式細胞術評定；(2)藉由定量異常IEL對腸上皮細胞之%與基線相比之減小來測量免疫反應；(3)組織學反應：小腸絨毛高度與隱窩深度(VH：CD)比率、Marsh記分或總IEL計數與基線相比之改進；及/或(4)臨床反應：臨床症狀與基線相比之變化，其藉由布里斯托大便形狀分類表(BSFS)、乳糜瀉患者報導之端點(CeD PRO)、及胃腸症狀評定量表(GSRS)(包括乳糜瀉GSRS(CeD-GSRS))。

在一些實施例中，該量或單位劑量可係：約1-5mg/kg、約5-10mg/kg、約10-15mg/kg、約15-20mg/kg、約20-25mg/kg、約25-30mg/kg、約30-35mg/kg、約35-40mg/kg、約40-45mg/kg、或約45-50mg/kg。在一些實施例中，較佳劑量可包括：約2、約3、約4、約5、約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23、約24、約25、約26、約27、約28、約29、約30、約31、約32、約33、約34、約35、約36、約37、約38、約39、約40、約41、約42、約43、約44、約45、約46、約47、約48、約49、或約50mg/kg之本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例，本文所揭示之醫藥組成物之量或單位劑量可包括約50-1000mg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。在一些實施例中，單位劑量可係：約50-100mg、約100-150mg、約150-200mg、約200-250mg、約250-300mg、約300-350mg、約350-400mg、約400-450mg、約450-500mg、約500-550mg、約550-600mg、約600-700mg、約700-800mg、約800-900mg、或約900-1000mg、或更高或更低、或其間的任何數值的本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例中，該量或單位劑量可係：約50-60mg、約60-70mg、約70-80mg、約80-90mg、約90-100mg、約100-110mg、約110-120mg、約120-130mg、約130-140mg、約140-150mg、約150-160mg、約 160-170mg、約170-180mg、約180-190mg、約190-200mg、約200-210mg、約210-220mg、約220-230mg、約230-240mg、約240-250mg、約250-260mg、約260-270mg、約270-280mg、約280-290mg、約290-300mg、約300-310mg、約310-320mg、約320-330mg、約330-340mg、約340-350mg、約350-360mg、約360-370mg、約370-380mg、約380-390mg、約390-400mg、約400-410mg、約410-420mg、約420-430mg、約430-440mg、約440-450mg、約450-460mg、約460-470mg、約470-480mg、約480-490mg、約490-500mg、約500-510mg、約510-520mg、約520-530mg、約530-540mg、約540-550mg、約550-560mg、約560-570mg、約570-580mg、約580-590mg、約590-600mg、約600-610mg、約610-620mg、約630-640mg、約640-650mg、約650-660mg、約660-670mg、約670-680mg、約680-690mg、或690-700mg之本文所揭示之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)或其抗原結合片段。

在一些實施例中，本文所揭示之醫藥組成物可藉由每1-20週皮下或靜脈內注射以本文所揭示之單位劑量來投與。在一個實施例中，該醫藥組成物經皮下投與。在另一實施例中，該醫藥組成物經靜脈內投與。在某些實施例中，投與可每1-5、5-10、10-15、或15-20週發生。在一些實施例中，投與可每1-2、2-4、4-6、6-8、8-10、10-12、12-14、14-16、16-18、或18-20週發生。在一些實施例中，投與每1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、或20週發生。單位劑量可以相同間隔(例如，每1-20週)給予。替代地，至少一部分單位劑量以不同於(例如，縮短或延長)其他單位劑量之間隔給予。在一個實例中，一或多個額外速效劑量可在例如第1週或任何其他時間給出以加強劑量。

在其他態樣中，本發明係關於一種如本文所述之醫藥組成物，其用於治療II型難治性乳糜瀉患者，例如患有原位小腸T細胞淋巴瘤之患者，其中該醫藥組成物包含抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在其他實施例中，該醫藥組成物包含75mg、150mg、300mg、600mg、4mg/kg、8mg/kg、或12mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一具體實施例中，醫藥組成物包含8mg/kg之AMG 714。在一些實施例中，該醫藥組成物每1、2、或4週經投與(例如，靜脈內)，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該醫藥組成物每2週經投與(例如，靜脈內)。在另一具體實施例中，該醫藥組成物每1、2、或4週經皮下投與，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該醫藥組成物每2週經皮下投與。

在一些態樣中，本發明係關於一種如本文所述之醫藥組成物，其用於治療II型難治性乳糜瀉患者之方法中，例如患有原位小腸T細胞淋巴瘤之患者，其中該方法包含投與(例如，靜脈內)抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含投與(例如，靜脈內)75mg、150mg、300mg、450mg、600mg、4mg/kg、8mg/kg、或12mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在某些實施例中，該方法包含投與(例如，靜脈內)8mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含每1、2、或4週皮下投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在一個實施例中，該方法包含每2週皮下投與。在另一具體實施例中，該方法包含每1、2、或4週靜脈內投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該方法包含每2週靜脈內投與。

在另一態樣中，本發明係關於一種治療II型難治性乳糜瀉患者或患有原位小腸T細胞淋巴瘤之患者之方法，其中該方法包含投與(例如，靜脈內)抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含投與(例如，靜脈內)75mg、150mg、300mg、450mg、600mg、4mg/kg、8mg/kg、或12mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在某些實施例中，該方法包含投與(例如，靜脈內)8mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在一些實施例中，該方法包含每1、2、或4週皮下投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在一個實施例中，該方法包含每2週皮下投與。在另一具體實施例中，該方法包含每1、2、或4週靜脈內投與醫藥組成物，直到例如徵象及/或症狀得以減輕或消除。在另一具體實施例中，該方法包含每2週靜脈內投與。

在本文所述之醫藥組成物及方法的具體實施例中，每2週一次(q2w)靜脈內投與8mg/kg之抗-IL-15抗體(例如，AMG 714)。在本文所述之醫藥組成物及方法的其他具體實施例中，在第0週、第1週、及之後每2週一次(q2w)靜脈內投與8mg/kg之抗-IL 15抗體(例如，AMG 714)。在另一實施例中，給藥可係450mg，每4週一次(q4w)。

實例 實例1：評估AMG 714在患有乳糜瀉之成人患者中之功效及安全性之2a期、隨機化、雙盲、安慰劑對照、平行組研究

概述

在一例示性臨床試驗中，向患有CD之成人患者投與AMG 714。此試驗之目標係確定研究性抗-IL-15單株抗體AMG 714於患有無麩質飲食(GFD)非反應性乳糜瀉(NRCD)之患者中之潛在治療益處，其藉由調查藥物減輕患有乳糜瀉之成人之麩質暴露之作用的能力來進行。

具體而言，該研究經設計以：

˙評定研究藥物(AMG 714或安慰劑)對減輕患有控制良好之乳糜瀉之受試者之黏膜異常及症狀的作用，該等受試者接受10週高劑量每日麩質挑戰(GC)；在下文中稱為「根據方案群體1」(PP1)。此調查評估AMG 714作為GFD之(部分)替代物之潛在指示。

˙獲得對AMG 714在儘管堅持GFD但仍患有持久性黏膜異常之受試者中的作用的初始理解，該等受試者在無高劑量每日GC之情況下接受研究藥物；在下文中稱為「按方案治療群體2」(PP2)。此調查探索AMG 714作為GFD之輔佐物之潛在指示。

˙評定在150mg及300mg下AMG 714之劑量反應。

雖然主要端點(防止在谷胺酸挑戰後絨毛高度與隱窩深度比率(VH：CD)減小)在此研究中並無統計學顯著性，但是300mg AMG 714組與安慰劑相比存在6.4%差異(等效於11%減小)。PP1功效結果之全體(每組大約15位受試者)包括300mg q2w劑量之AMG 714與安慰劑之間在增加上皮內淋巴細胞(IEL)及臨床症狀(CeD-PRO、BSFS腹瀉)之減輕方面的統計學顯著性、以及大部分其他繼發性及探察性端點之功效信號(CeD-GSRS、抗-DGP血清學、醫師整體評定)，指示AMG 714可減輕大劑量(2至4g)每日GC之作用。因此，已建立AMG 714在乳糜瀉中之概念驗證(POC)。

在12週研究期內，AMG 714 300mg減小高劑量每日GC對炎症(IEL增加低38%，p=0.03)及症狀之影響，如藉由乳糜瀉患者報導之結果(CeD-PRO)記分(p=0.02)、乳糜瀉胃腸症狀評定量表(CeD-GSRS)記分(p=0.07)、根據布里斯托大便形狀分類表(BSFS)之腹瀉週數(p=0.0002)、及醫師整體評定(PGA,p=0.01)所測量；與安慰劑相比。大部分其他預指定結果亦顯示與安慰劑抗-DGP IgA及IgG相比有利於300mg組之一致方向性；及血清IL-15之減少。AMG 714並未改變每日GC所引發之抗-tTG IgA之產生，因此臨床上確認先前於IL-15驅動之乳糜瀉的小鼠模型中的觀察。另外，結果表明對功效端點之劑量依賴性作用，其中300mg劑量跨越大部分端點較之150mg劑量顯示對麩質挑戰之作用的更大減輕，雖然在所有情況下均未達到統計學顯著性。

PP1群體之功效結果概述於表2中：

PP2(無每日GC)之功效結果雖然部分由於樣本大小較小(每組2-5位受試者)而不具有統計學顯著性，但其顯示在受試者中AMG 714跨越大部分端點之數值益處。

所有功效端點(每組大約15位受試者)中之PP1功效結果之全體指示每兩週一次之AMG 714 300mg可以減小大劑量每日麩質(每日2至4g)的作用，因為在AMG 714 300mg與安慰劑之間在以下方面達成統計學顯著性：

˙IEL增加減少(與安慰劑相比之41%差異、麩質挑戰之作用之38%減輕)，

˙臨床症狀之改良：CeD-PRO、BSFS腹瀉

˙在第12週的PGA

另外，注意抗-DGP血清學及血清IL-15之功效信號。因此，已建立乳糜瀉中IL-15抑制之機制驗證及AMG 714治療之概念驗證。另外，結果表明劑量依賴性作用，因為300mg劑量跨越大部分端點定向地比150mg劑量更有效，儘管不是統計學上不同的。這表明更高劑量可能已達到更大作用大小。這與所有治療組中血清IL-15之完全抑制之缺乏相一致，除了PP2中之300mg AMG 714。可能PP1中更高劑量之AMG 714可導致血清IL-15之更大抑制且導致更大功效。PP2(非每日麩質挑戰)之功效結果雖然由於小樣本大小(每組2-5位受試者)而幾乎不具有統計學顯著性，但其顯示在受試者中AMG 714在大部分端點中之數值益處，該等端點包括VH：CD、IEL及CeD-PRO。

藥物動力學(PK)分析顯示藥物暴露之量為先前2a期牛皮癬研究中觀察之量之兩倍(ClinicalTrials.gov Identifier：NCT00443326)，其可能是由於體重降低且在此研究中主要為女性受試者。多至14%患者產生抗藥物抗體(ADA)，但所有ADA均為非中和的，對PK無影響，且與任何AE不相關，除了輕度注射部位反應。此結果應小心觀察，因為在10%患者中報導預先存在的ADA。

PK/PD相關性之初步分析指示300mg劑量中之暴露/反應相關性。這表明更高劑量可達到更大作用大小。

AMG 714之安全性及耐受性於此研究中係有利的。不存在嚴重不良事件(SAE)，且不良事件(AE)之頻率在各AMG 714劑量組與安慰劑組之間大體類似。具有注射部位反應之受試者之比例在AMG 714組中稍微大於在安慰劑組中，其中150mg與300mg之間存在劑量依賴性增加。大部分這些AE係輕度的且在治療後消退。62位受試者中之兩位由於AE而中斷治療(一位服用150mg且一位服用300mg)。多至14%患者產生抗藥物抗體(ADA)，但所有ADA均為非中和的，對PK不具有影響，且與任何AE不相關，除了輕度注射部位反應。在10%患者中報導預先存在的ADA。

考慮到所有結果，該研究證實AMG 714在乳糜瀉治療中之POC。這是具有同時組織學(IEL)及臨床益處之乳糜瀉第一研究。VH：CD益處似乎滯後此患者群體中之IEL及臨床改良，此患者群體在基線時病情較重(即，免疫學初免的(primed))且暴露於比患有乳糜瀉之患者之其他類似執行之試驗中更大的每日麩質劑量。

總之，在NRCD患者中AMG 714的此第一研究中，AMG 714證實跨越多個端點(例如，症狀、腸炎性細胞、醫師評定)之一致功效信號。另外，高達300mg劑量之AMG 714耐受良好，在此患者群體中無嚴重或意外的安全性問題。明確的劑量反應表明超過300mg之增加之劑量水準可引起更大功效。

該研究建立與乳糜瀉相關之IL-15抑制且支持繼續探索AMG 714以指示GFD之輔助治療。

在一些實施例中，AMG 714作為「GFD之輔助治療」可為有利的。

下一個研究(2b期GFD研究)應探索更廣泛範圍劑量之AMG 714，包括用於更高作用大小之較高劑量，以及建立最小有效劑量之較低劑量。

研究設計

方案經設計為2a期、隨機化、雙盲、安慰劑對照、平行組研究，以評估AMG 714用於在麩質挑戰期間減輕患有乳糜瀉之成人患者中之麩質暴露之作用的功效及安全性。此研究之主要目標係評定AMG 714在減輕患有CD之成人中之麩質暴露之作用方面的功效。次要目標係評定AMG 714當向患有乳糜瀉且暴露於麩質挑戰之成人患者投與時的安全性及耐受性。探索性目標係評定AMG 714之藥物動力學(PK)、藥效動力學(PD)、及PK/PD相關性。

將所有受試者以1：1：1比率隨機分組，以每兩週一次接受150mg或300mg AMG 714或安慰劑，持續10週。隨機化係根據部位及性別分層。研究藥物(AMG 714或安慰劑)在臨床場所係以雙盲方式藉由皮下(SC)注射來投與。

除了接受研究藥物或安慰劑之外，PP1群體中之所有受試者均需要消耗以單盲方式投與之安慰劑麩質(前2週)及活性麩質(每天2-4公克，在第3週至第12週期間)。具有基線黏膜萎縮或極高麩質敏感之受試者免於麩質挑戰且包含PP2群體。

使用對糞便及尿樣品進行之iVYLISA麩質免疫原性肽(GIP)測試定期評定受試者對GFD之堅持及對經資助人提供之麩質之消耗。勸告已知或懷疑違反GFD或懷疑不順應於研究提供之麩質消耗之患者，但允許其繼續研究。

滿足所有其他研究允入標準(entry criteria)之所有研究受試者在基線之前(第1次訪視，第0週/第0天)、及同時仍進行麩質挑戰的第12週研究期結束時、以及在第7次訪視(第12週/第84天)之前5天內經歷上胃腸道內窺鏡檢查及活檢，以便評定VH：CD比率、IEL、及Marsh記分之與基線相比的變化。

從基線(第1次訪視，第0週/第0天)至最後一次研究訪視(第8週，第16週/第112天)，所有受試者均在每次排便時完成布里斯托大便形狀分類表(BSFS)。從基線至最後一次研究訪視，受試者完成每日乳糜瀉患者報導之結果(CeD PRO)評定。受試者亦在篩選時及從基線至研究最後一次研究訪視每週完成胃腸症狀評定量表(GSRS)。使用手持電子日記在程序排程中指定之時間測量BSFS、GSRS、及CeD PRO記分。

在進行中之基礎上監測安全性參數且受試者可出於安全性原因而經歷未經安排之訪視(若需要)。安全性評定包括臨床實驗室測試、身體檢查、生命徵象、及AE監測。

登記總計64位患者。受試者納入標準：

˙在篩選前至少12個月藉由腸活檢診斷乳糜瀉

˙進行無麩質飲食持續至少12個月

˙陰性乳糜瀉血清學

˙避免妊娠

排除標準：

˙嚴重的乳糜瀉併發症，諸如難治性乳糜瀉

˙乳糜瀉症狀

˙其他伴發性自體免疫疾病

˙慢性、活動性GI疾病

˙感染、伴發性疾病

˙禁止藥物

在一個實施例中，用於乳糜瀉研究之給藥水準之選擇係150、或300、或450mg，經由皮下注射(SC)每2週一次(q2w)。在另一實施例中，給藥可係450mg，每4週一次(q4w)。雖然沒有先前使用AMG 714於乳糜瀉中之經歷亦沒有對此疾病中之潛在PK/PD關係之任何理解，但是迄今為止毒理學及人類研究支持針對此研究選擇之給藥方案。在先前臨床試驗中研究之AMG 714之最高劑量為700mg之單次SC劑量及300mg每兩週一次持續12週之多次SC劑量，迄今為止未鑒定出安全信號。

預期給藥方案提供超過活體外使用之AMG 714濃度(10μg/mL)之谷水準，以在患有活動性乳糜瀉之患者之活檢物中誘導活化IEL之細胞凋亡(Malamut等人，2010)。

使用頻繁PK取樣監測血清暴露。使用整個研究中獲得之活檢物中測量之實驗生物標誌物監測組織作用。

評估標準：

功效：

˙收集小腸活檢物以用於組織學評定，包括VH：CD比率、CD3-陽性IEL之密度、Marsh-Oberhuber記分、mRNA分析、及視情況研究評定。

˙抗-tTG自體抗體、抗去醯胺麥膠蛋白肽(DGP)抗體(抗-DGP、IgA及IgG)

˙BSFS

˙GSRS、CeD GSRS

˙CeD PRO

安全性：

˙治療突發AE、SAE、AE嚴重性、及與研究藥物之關係

˙臨床實驗室

˙生命徵象

˙身體檢查

探索：

˙PK、PD、及PK/PD相關性

˙iVYLISA GIP測試

˙醫師整體評定(PGA)

˙疾病活動性之生物標誌物

˙AMG 714之免疫原性

分析資料集：分析群體係根據方案群體(PP)及意向治療群體(ITT)。PP群體定義為：所有隨機受試者及接受至少一個劑量之研究藥物之群體，排除無價值受試者。接受麩質挑戰(GC)之群體呈PP1進行分析且由於基線時萎縮及/或對麩質之敏感性高而未接受GC(或僅接受幾天)之群體包括在PP2中。ITT群體定義為：接受至少一個劑量之研究藥物的所有隨機受試者。分析受試者經隨機化所至的治療組中之受試者。對於定義為與基線相比之變化的任何端點，從ITT群體排除具有僅一個可用測量值之受試者。安全性群體與ITT群體相同。

功效分析：主要功效終點係在兩個AMG 714劑量組與安慰劑組之間比較的從基線至第12週之VH：CD比率減小之百分比之差異。測量絨毛高度及隱窩深度並計算其於每個時間點之比率(VH：CD比率)。將AMG 714 150mg及300mg劑量組之結果單獨與安慰劑之結果相比較。

次要端點包括如下：

˙IEL：作為黏膜炎症之指示物，計算每100個上皮細胞之CD3-陽性IEL之密度。

˙Marsh-Oberhuber分類，Marsh 0、1、2、3a-c。藉由將形態測量結果轉換為Marsh分類(Mäki-Jilab轉換器)來分組。

˙按週計之GSRS及CeD-GSRS記分

˙按天及週計之BSFS記分及排便次數

˙血清學：抗-tTG IgA及抗-DGP IgA及IgG水準

探索性端點包括：PGA、CeD-PRO、血清IL-15。

使用PP群體分析功效端點。

安全性分析：使用MedDRA編碼所有AE且藉由系統器官分類(SOC)及較佳術語(PT)概述，且單獨地藉由因果關係及嚴重性概述。所評定之其他安全性變量係：臨床實驗室測試、身體檢查、及生命徵象。對於免疫原性之評定，概述產生結合抗體之受試者及產生中和抗體之受試者之數目及百分比。根據治療組概述所有安全性變量。一些變量可根據治療組且根據訪視列表。

受試者安排

受試者分配之概要係如下。

PP1包括經歷麩質挑戰之49位受試者。PP2包括未經歷麩質挑戰或僅經歷幾天之11位受試者。PP1群體中之3個治療組中受試者數目係良好平衡的。PP2群體包含基線時萎縮的患者，表明其在其GFD中食用一些麩質，且其未接受GC(n=8)；以及開始GC但由於急性敏感性高而僅接受幾天挑戰(n=3)之患者。

此等患者已從其他GC試驗中排除。因此，PP2充當另一組資料，以幫助獲得關於進一步研究之更多理解。PP2群體對於研究中之任何端點並不十分有力，亦未分層。因此，PP2中11位患者中之僅2位接受300mg AMG 714，其使得與安慰劑之統計學比較不可行。

ITT群體中之所有62位受試者中，74.2%為女性，其與一般患者群體相一致。平均年齡係51.1歲；中值年齡係55.0歲(範圍係19至72歲)。所有受試者均係白種人。平均身體質量指數(BMI)係25.7kg/m²。總之，人口統計學及基線特徵跨3個治療組係良好平衡的。

功效結果

主要功效分析

主要功效端點係各AMG 714劑量與安慰劑之間VH：CD比率從基線至第12週之相對(%)變化的比較。

在PP1群體(即，經歷GC之受試者)中，與基線相比之VH：CD之相對減小在安慰劑組中係~61%，在150mg組中係~62%(p=0.7，與安慰劑相比)，且在300mg組中係~55%(p=0.34，與安慰劑相比之6.4%差異)。實驗值概述於表3及圖6A與圖6B中。

SE：標準誤差。 CL：信賴界限。

在PP2群體中，分別地，安慰劑組(n=4)具有16%之VH：CD平均減小，150mg組(n=5)具有6%之減小，且300mg組(n=2)具有3%之減小。

次要功效分析

使用IEL密度測量之麩質誘導之小腸黏膜炎症之減輕

如圖7A所示，IEL密度之分析顯示IEL之與基線相比之相對增加在安慰劑組中係109%，在150mg AMG 714組中係95%(與安慰劑相比之14%差異，p=0.5)，且在300mg組中係68%(與安慰劑相比之41%差異，p=0.03)。安慰劑與300mg AMG 714之間的差異具有統計學顯著性。

專門分析顯示IEL至與基線具有小於50%增加之患者之比例在安慰劑組中係13%，在150mg組中係27%，且在300mg組中係50%。

在PP2中，安慰劑組(n=4)具有25%之IEL平均增加，150mg組(n=5)具有4%之減小，且300mg組(n=2)具有30.6%之增加。在300mg組中，2位患者具有與基線相比之IEL變化之顯著變化：1位患者具有2.2%增加且另一位患者具有59%增加。

使用Marsh記分之分組分類的麩質誘導之小腸黏膜形態學損傷之減輕

在各組間Marsh記分不存在差異。

麩質誘導之臨床症狀之減輕：CeD-PRO

CeD-PRO係唯一完全驗證之乳糜瀉患者報導之結果。

在PP1中，兩個AMG 714劑量組顯示與安慰劑相比之劑量相關性減少。CeD-PRO記分變化基線在安慰劑組中係0.81，在300mg組中係0.5(p=0.02)，且在150mg組中係0.64(p=0.3)。

如圖8所示，AMG 714 300mg似乎已隨時間推移減弱由麩質引起之症狀惡化。一些中間時間點具有統計學顯著性。

麩質誘導之臨床症狀之減輕：CeD-GSRS

在PP1中，兩個AMG 714劑量組顯示與安慰劑相比之症狀減少。服用300mg之受試者之平均CeD-GSRS記分(平均記分=0.46)與服用安慰劑(平均記分=2.97)之受試者相比具有大約84%減小，其不具有顯著性(p=0.07)。安慰劑(平均記分=2.97)與150mg(平均記分=0.96)之間的平均CeD-GSRS記分之差異不具有統計學顯著性(p=0.17)，但在數值上有利於積極治療組。如圖9示，300mg似乎已隨時間推移減弱麩質暴露引起之症狀惡化。

在具有很少或不具有GC之PP2中，CeD-GSRS之差異較之安慰劑亦有利於150mg，其中150mg組未顯示CeD-GSRS(平均記分=-0.6) 之增加，即使與安慰劑(平均記分=5.96)相比之差異在考慮樣品大小之情況下亦不具有顯著性(p=0.17)。該等差異在第5週與第10週之間更大。對於300mg組，考慮到此組中兩位受試者之反應之間之差異，不存在作用。

在PP1 300mg組中，GSRS結果(未示出)按預期緊密追蹤CeD-GSRS，其中與基線相比之絕對變化及相對變化之p值分別係0.11-0.17。

麩質誘導之臨床症狀之減輕：BSFS

在150mg及300mg AMG 714組中之受試者與安慰劑相比，稀便BSFS(5型、6型、及7型)之報導較少。在AMG 714組中與安慰劑相比無腹瀉(定義為BSFS 6型或7型)週數之平均數目較低(圖10及圖11)。

麩質誘導之血清抗-DGP IgA及IgG之減輕

抗-DGP IgA及IgG在PP1中之許多受試者中產生(圖12)，而在PP2中之任何受試者中不產生，考慮到PP1經歷麩質挑戰而PP2未經歷麩質挑戰，去係預期結果。

AMG 714 300mg具有抑制抗-DGP IgA反應之趨勢且在PP1中在研究結束時減輕抗-DGP IgG反應(較IgA更慢)。

麩質誘導之血清抗-tTG IgA之減輕

與顯示僅抗-DGP抗體而非抗-tTG依賴於IL-15的IL-15-驅動型乳糜瀉小鼠模型(人源化HLA-DQ8-基因轉殖小鼠，其過度表現IL-15至乳糜瀉患者之相同水準，且進食麩質)相一致，AMG 714並不改變由每日GC引發之抗-tTG IgA之產生，且在150mg組中，效價比在安慰劑組中顯著更高(p=0.0037)，其中在300mg與安慰劑之間未觀察到差異(圖13)。

藥物動力學

此患者群體中AMG 714之PK曲線係有利的(圖14及圖15；表4)。在此試驗中患者之AMG 714暴露係在先前牛皮廯研究中所觀察到之暴露的兩倍(ClinicalTrials.gov Identifier：NCT00443326)，其中使用相同的給藥方案。與主要為男性且平均體重大約95kg的經登記牛皮癬患者相比，此增加之暴露可藉由經登記乳糜瀉患者中更高比例之女性受試者及正常體重(大約70kg)來解釋。除體重差異外，男性中單株抗體之清除率比女性中高大約20%。

PK/PD相關性

在藥物暴露與功效之間似乎存在相關性。

PK/PD相關性之初步探索表明300mg劑量水準下之暴露/反應相關性(圖16及圖17)。此相關性藉由重疊150mg及300mg治療組之暴露來驅動，其中300mg暴露大於150mg組中觀察到之範圍，在多個端點顯示更大反應。這表明更高劑量可達到更大作用大小。

安全性分析

不良事件之概述

在治療投與之前(即，在篩選期間)發生的不良事件發生於46.8%之所有患者中。在治療之前沒有AE係SAE或導致中斷。

治療突發AE(即，在研究治療開始後發生之AE)發生於接受至少1個劑量之研究藥物的所有受試者中，其AE概述於以下表5中。

96.8% ITT受試者報導在治療投與之後發生不良事件。沒有TEAE係嚴重的。兩位受試者由於AE而中斷治療(一位服用150mg且一位服用300mg)。在治療期期間，150mg AMG 714、300mg AMG 714、及安慰劑組中分別有95.5%、95.2%、及100.0%受試者報導至少1次TEAE。在AMG 714與安慰劑治療之間未觀察到總體不良事件報導之差異。

探索性分析

醫師整體評定(PGA)

PGA係對分端點，其中PGA記分

2視為治療成功且PGA記分>2視為治療失敗。效應估值係視為成功及失敗之受試者之比例。

PGA>2之受試者之比例在安慰劑組中係33%，相比之下在AMG 714 150mg組中係13.3%(p=0.390，經估計之治療差異[95% CI]：-20%[-56%,16%])且在300mg組中係0%(p=0.013，經估計之治療差異[95% CI]：-33%[-63%,-3%])。

PP2中未觀察到明確趨勢，雖然在研究結束時300mg組中的兩位受試者分為1級(無疾病活動)，且150mg及安慰劑組中各自的1位患者亦為1級。

血清IL-15水準

血清IL-15在PP1中未藉由300mg AMG 714完全清除但在PP2中則完全清除，這表明更高劑量之AMG 714可為抵消GC之效應所需要的。在IL-15之血清水準與VH：CD減小之間存在相關性。

實例2：評估患有II型難治性乳糜瀉之成人患者中AMG 714之功效及安全性之2a期研究

在一個例示性臨床試驗中，可在患有II型難治性乳糜瀉之成人患者中研究AMG 714之功效及安全性。此研究之主要目標將係評定AMG 714在治療成人患者之RCD-II的功效。此研究之次要目標將係評定AMG 714當向患有RCD-II之成人患者投與時的安全性及耐受性。此研究之探索性目標將係評定AMG 714之藥物動力學(PK)、藥效動力學(PD)、及PK/PD相關性。

主要結果/端點測量包括免疫學反應，例如，異常小腸腸上皮內淋巴細胞(表面CD3-細胞內CD3+)之%之與基線相比之減小。時段：基線及 12週。異常腸上皮內淋巴細胞之%之與基線相比之減小可在小腸活檢物收集之後藉由例如流式細胞術進行測量。

次要結果/端點測量：

(1)組織學反應：小腸形態學之與基線相比之改良，如藉由小腸活檢物質中絨毛高度與隱窩深度(VH：CD)比率所測量。時段：基線及12週。

(2)臨床反應：臨床症狀之與基線相比之變化，如藉由胃腸症狀評定量表(GSRS)所測量。時段：基線及12週。

其他結果/端點測量包括安全性及耐受性：具有治療相關性不良事件之參與者數目，如藉由不良事件通用術語標準(Common Terminology Criteria for Adverse Events,CTCAE)評定。時段：12週。可收集並分析不良事件之頻率及性質。

研究設計

方案經設計為2a期、隨機化、雙盲、安慰劑對照、平行組研究，以評估AMG 714用於治療患有RCD-II之成人患者的功效及安全性。

滿足研究允入標準之所有受試者可以2：1比率隨機化以接受8mg/kg AMG 714或安慰劑，在10週內每2週一次持續總計7次，其中在第12週評估主要端點。AMG 714或安慰劑可在臨床場所以雙盲方式在120分鐘內藉由靜脈內(IV)輸注投與。

從隨機化前6個月至最後一次研究訪視(第9次訪視，第16週/第112天)，受試者將預期維持對嚴格無麩質飲食(GFD)之完全堅持。

最後一次研究劑量將在第7次訪視(第10週/第70天)時投與。研究結束時的功效訪視將在第8次訪視(第12週/第84天)時進行。最後一次研究訪視將在第9次訪視(第16週/第112天)時在上一次給藥研究藥物之後6週進行。

所有研究受試者可在基線之前(即，第1次訪視，第0週/第0天之前)及第8次訪視(第12週/第84天)之7天內經歷使用黏膜活檢物之上胃腸道內窺鏡檢查，以評定異常及不正常IEL、VH：CD比率、TCR無性系形成能力、Marsh記分、及總IEL計數之與基線相比的變化。

可在進行中之基礎上監測安全性且受試者可出於安全性原因而經歷未經安排之訪視(若需要)。安全性將在整個研究中藉由臨床實驗室測試、身體檢查、生命徵象、及AE監測來評定。

受試者納入標準：

˙確認診斷2型難治性乳糜瀉(RCD-II)

˙如藉由流式細胞術所評定之大於20%異常上皮內淋巴細胞(IEL)

˙進行無麩質飲食持續至少6個月

˙避免妊娠

排除標準：

˙腸病相關性T細胞淋巴瘤(EATL)

˙感染

˙免疫抑制

˙臨床上顯著的共病

建議劑量8mg/kg IV持續10週每2週一次(q2w)及在第1週時之額外劑量可應對RCD-II所特有之假定蛋白質損失腸病(基於RCD-II患者中之白蛋白水準可預期多達40%蛋白質損失)且可應對較大靶器官區域(如與更多局部關節相比之小腸)。

關於AMG 714濃度之評述，已經由第4週對經隨機化之前10位受試者給藥完成藥物動力學中期分析，以確保達成並維持最小穩態閾值暴露

10μg/mL。

如圖17所示，在第4週時穀水準預劑量係平均130ug/ml，稍微高於所預測之90ug/ml。所有患者(包括患有嚴重低白蛋白血症之若干患者)高於目標10ug/ml。因此，AMG 714之濃度接近於基於健康受試者所預期之濃度(吾等對於IV製劑之PK參考)。

本揭露之各種態樣可單獨使用、組合使用、或以前文所述之實施例中未具體討論的多種配置使用，且因此其應用不限於前文描述中所闡明或附圖所繪示之細節及組件配置。例如，在一個實施例中所述之態樣可以任何方式與其他實施例中所述之態樣組合。又，本文中使用之措辭及術語係用於描述目的且不應視為具有限制性。

申請專利範圍中使用改變申請專利範圍元素之序數術語諸如「第一」、「第二」、「第三」等自身並不暗示任何優先權、優先級、或一個申請專利範圍元素優於另一申請專利範圍元素之順序或者執行方法之動作的臨時順序，但僅用作區分具有某一名稱之一個申請專利範圍元素與具有相同名稱之另一元素(但係對於使用序數術語而言)以區分該等申請專利範圍元素。

又，本文中使用之措辭及術語係用於描述目的且不應視為具有限制性。在本文中使用「包括」、「包含或「具有」、「含有」、「涉及」、及其變化形式意指涵蓋其後所列之條目及其等效物、以及額外條目。「基本上由...組成」意指包括其後所列之條目且其對於並未實質性影響本發明之基本及新穎特性之未列出條目而言係開放性的。

以引用方式之併入

ASCII文本文件經由EFS-Web與本發明一起提交，其題為「A2082PCT.txt」，於2016年6月15日創建，具有4,623個位元組大小，該文本文件據此以引用方式整體併入本文。

本文中提及之所有公開案、專利、及序列資料庫條目皆據此以引用方式整體併入本文中，該引用的程度就如同已明確且個別地指示將各個別公開案或專利以引用方式併入本文中一般。

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<130> A-2082-WO-PCT

<160> 10

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 390

<212> DNA

<213> 智人

<400> 1

<210> 2

<211> 130

<212> PRT

<213> 智人

<400> 2

<210> 3

<211> 357

<212> DNA

<213> 智人

<400> 3

<210> 4

<211> 119

<212> PRT

<213> 智人

<400> 4

<210> 5

<211> 5

<212> PRT

<213> 智人

<400> 5

<210> 6

<211> 16

<212> PRT

<213> 智人

<400> 6

<210> 7

<211> 8

<212> PRT

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<400> 7

<210> 8

<211> 12

<212> PRT

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<400> 8

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> 智人

<400> 9

<210> 10

<211> 8

<212> PRT

<213> 智人

<400> 10

Claims

治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段在製造用於治療有需要之受試者之乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之藥物中之用途，其中該治療有效量包含各自以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約50-1000mg、較佳地75-600mg、更佳地約75mg、約150mg、約300mg、或約450mg、或約600mg之該抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。
如申請專利範圍第1項之用途，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第1項或第2項之用途，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第1項或第2項之用途，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第3項之用途，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第1項之用途，其中該治療有效量包含以約2週間隔投與之6個單位劑量。
如申請專利範圍第1項或第6項之用途，其中各單位劑量係用於皮下注射或靜脈內注射。
一種用於治療乳糜瀉或非乳糜瀉麩質敏感之醫藥組成物，其包含治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段，其中該治療有效量包含各自欲以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約50-1000mg、較佳地75-600mg、更佳地約75mg、約150mg、約300mg、或約450mg、或約600mg之該抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。
如申請專利範圍第8項之醫藥組成物，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第8項或第9項之醫藥組成物，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第8項或第9項之醫藥組成物，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第10項之醫藥組成物，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第8項之醫藥組成物，其中該治療有效量包含欲以2週間隔投與之6個單位劑量。
如申請專利範圍第8項或第13項之醫藥組成物，其中各單位劑量係藉由皮下注射或靜脈內注射投與。
治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段在製造用於治療有需要之受試者之難治性乳糜瀉之藥物中之用途，其中該治療有效量包含各自以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約1-50mg/kg、較佳地約4-16mg/kg、更佳地約4mg/kg、約8mg/kg、約12mg/kg、或約16mg/kg之該抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。
如申請專利範圍第15項之用途，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第15項或第16項之用途，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第15項或第16項之用途，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第17項之用途，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第15項之用途，其中該治療有效量包含以2週間隔投與之6個單位劑量、及在第1週視情況之額外速效劑量。
如申請專利範圍第15項或第20項之用途，其中各單位劑量係用於皮下注射或靜脈內注射。
如申請專利範圍第15項之用途，其中該難治性乳糜瀉係I型或II型。
一種用於治療難治性乳糜瀉之醫藥組成物，其包含治療有效量之抗-IL-15抗體或其抗原結合片段，其中該治療有效量包含各自以約1-12週間隔投與之1-20個單位劑量，各單位劑量獨立地包含約1-50mg/kg、較佳地約4-16mg/kg、更佳地約4mg/kg、約8mg/kg、約12mg/kg、或約16mg/kg之該抗-IL-15抗體或其抗原結合片段。
如申請專利範圍第23項之醫藥組成物，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：5-7之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第23項或第24項之醫藥組成物，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：8-10之一或多個互補決定區、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第23項或第24項之醫藥組成物，其中該抗體具有重鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第25項之醫藥組成物，其中該抗體具有輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列、或與其具有至少80%序列一致性之序列。
如申請專利範圍第23項之醫藥組成物，其中該治療有效量包含欲以2週間隔投與之6個單位劑量、及欲在第1週投與之視情況之額外速效劑量。
如申請專利範圍第23項或第28項之醫藥組成物，其中各單位劑量係藉由皮下注射或靜脈內注射投與。
如申請專利範圍第23項之醫藥組成物，其中該難治性乳糜瀉係I型或II型。