AKR1C3抑制劑之預測每日安全劑量可在安全性實驗之兩個不同設置中確定，例如女性臨床研究及發育毒性研究。 來源於健康女性之臨床1期研究的資料顯示大體上良好耐受高達120 mg之單次劑量及經14/28天每日兩次60 mg之重複劑量的AKR1C3抑制劑(「良好耐受」此處定義為未發生劑量限制性臨床症狀)。然而，出人意料的是，在240 mg之AKR1C3抑制劑的單次劑量(參見圖1及圖2中所展示之臨床實驗實例1的結果)下及在經14/28天每日一次60 mg及更多之重複劑量下(參見圖3至圖8中所展示之臨床實驗實例2的結果；多個劑量部分)，總血清膽紅素濃度增加超過正常值上限(ULN)，該正常值上限在用於此等研究之實驗室分析中定義為1.23 mg/dl。對於臨床使用而言，僅無膽紅素增加或低於正常值上限(1.23 mg/dL；所用分析：參考Burtis CA, Ashwood ER編，Tietz textbook of clinical chemistry. Philadelphia: WB Saunders Company, 1999;1803pp中之Painter PC, Cope JY, Smith JL; reference information for the clinical laboratory.，在Beckman Coulter AU分析儀上定量測定人類血清及血漿中之總膽紅素來定義正常限值的光度色彩測試)之微量增加的劑量視為安全的。另外，發現人類生殖或發育毒性問題增加之領域可預期在約＞15 mg之AKR1C3抑制劑的每日劑量下，且問題減少之領域在約≤3 mg之每日劑量下，其遵循動物各別毒理學研究的結果(參見實例3、實例3a、實例3b及表2)。由此結合臨床研究及生殖毒性研究之結果，可確定女性安全劑量範圍在每日0.7 mg至120 mg/70 kg女性體重之間，偏好程度有所不同。 歐洲食品安全局(The European Food Safety Authority，EFSA)建議70 kg之體重應用作計算歐洲成人群體劑量的預設值。但是，此值並不將AKR1C3抑制劑之使用限定於該體重。參與臨床研究之女性體重範圍為48.7至90 kg。 臨床研究中所進行之實驗室測試(諸如血液學、臨床化學方法，及凝血以及尿分析)揭露血清總膽紅素之單獨、無症狀的可逆增加： · 向健康女性投與每日一次高達30 mg/70 kg體重之AKR1C3抑制劑的劑量，當單次及重複給藥長達14天時未觀測到血漿膽紅素的變化(參見實例2、圖3及圖4)。 · 分別以每日一次90 mg/70 kg體重之AKR1C3抑制劑的劑量向健康女性投與(停經後女性；2週之治療，參見實例2、圖5)及每日一次60 mg投與(停經前女性；4週之治療，參見實例2、圖7)增加了血漿膽紅素，其在暴露於AKR1C3抑制劑之小部分個體內觀測到，且在2或4週之治療間隔的後半期間具有返回至基線的傾向(參見實例2，圖3至圖8)。 · 以每日兩次60 mg/70 kg體重之AKR1C3抑制劑的劑量向健康女性投與增加了血漿膽紅素，其在暴露於AKR1C3抑制劑14或28天之相當大一部分個體內觀測到(參見實例2、圖6及圖8)。 · 在投與單次劑量之240 mg/70 kg女性體重的AKR1C3抑制劑之後，在給藥後24小時之內偵測到腸胃症狀(輕度至中度噁心、嘔吐及/或腹瀉)及膽紅素增加(肝酶無變化)且在給藥後48小時返回至低於正常值上限(ULN)的濃度。此等發現為完全可逆的且可監測的(參見實例1、圖1及圖2)。 所偵測之總血清膽紅素的增加(在單次及重複劑量之後)僅為單獨的，亦即未伴隨有血清肝酶濃度(諸如血漿胺基轉移酶濃度及鹼性磷酸酶濃度)的增加，且因此尚未偵測到藥物誘發之肝損傷(DILI)的跡象。發現膽紅素之未結合及結合形式兩者皆在血清中增加。此外，尚無對於溶血的指示。 此發現與以下假設一致：其由AKR1C3抑制劑與若干個轉運體的相互作用造成，該等轉運體涉及將膽紅素自血流轉運至肝細胞及自肝細胞轉運至膽管。 充分描述了肝內膽紅素轉運體的基因變體(例如Morbus Gilbert-Meulengracht、Dubin-Johnson及Rotor syndrome)。此等基因變體之載劑一直暴露於增加濃度之血清膽紅素(通常小於3 mg/dl)中而死亡率或發病率無明顯升高。根據哈里森(Harrison)膽紅素法，含血紅素蛋白質之卟啉環的分解產物以結合及未結合兩個部分發現於血液中。未結合部分(亦稱為間接部分)不溶於水且結合於血液中之白蛋白。結合(直接)膽紅素部分可溶於水且因此可由腎臟排泄。若直接作用部分小於總量之15%，則膽紅素皆可視為間接的(Kasper D, Fauci A, Hauser S, Longo D, Jameson J, Loscalzo J.編；Harrison's Principles of Internal Medicine, 19e New York, NY: McGraw-Hill; 2014中之Pratt DS. Evaluation of Liver Function.)。 超出正常值上限之持續較高血清膽紅素含量與用於靶向適應症之AKR1C3抑制劑長期安全使用的有利益處/風險平衡不相容且因此需要避免。為進一步確定安全劑量，必須評估關於生殖及發育毒性的風險評估。在評估暴露於AKR1C3-抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸之後之大鼠及兔中胚胎發育的最新分析研究中，觀測到指向劑量依賴性發育毒性的發現： · 在各別大鼠研究中，當懷孕大鼠暴露於高劑量之化合物(60 mg/kg)時，注意到大鼠胎兒的發育毒性。影響包括畸形(=嚴重的胎兒結構性異常)。當將大鼠在17 mg/kg (NOAEL=無明顯有害效應含量)下所達成的全身性暴露量(AUC未結合)與在每日兩次60毫克/天、每日一次30毫克/天及每日一次3毫克/天投與化合物 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸之後的預期臨床人類暴露量相比較時，分別獲得大致2倍、15倍或122倍的更高暴露量(參見表2)。 · 在相對應之兔胚胎發育研究中，未揭露化合物相關的畸形。然而，在中度劑量之AKR1C3抑制劑(20 mg/kg及更高)下一些胎兒結構性變異(=輕度胎兒結構性異常)之發病率增加。當將兔在5 mg/kg (NOAEL)下所達成的全身性暴露量(AUC未結合)與在每日兩次60毫克/天、每日一次30毫克/天及每日一次3毫克/天投與AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸之後的預期臨床人類暴露量相比較時，分別獲得大致0.3倍、2倍或17倍的更高暴露量(參見表2)。 測試物種在生殖或發育毒性的NOAEL下的全身性藥物暴露量與人類在最大建議劑量下的全身性藥物暴露量的對比為關鍵判定(參考「FDA 's Guidance for Industry Reproductive and Developmental Toxicities -Integrating Study Results to Assess Concerns, 2011年9月」)。根據該調節指南，對於＜10之相對暴露比率(動物:人類)而言，人類生殖或發育毒性的問題增加且對於＞25之暴露比率而言，問題減少。 將此等建議應用至評估在暴露於AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸之後大鼠及兔的胚胎發育的非臨床研究，在臨床方案中進一步發展之AKR1C3抑制劑的最佳目標劑量應受限於每日一次15毫克/天的上限，相當於誘導兩個測試動物物種之畸形之＞25的暴露比率(相比於人類暴露量而言)。 總之，兩個不同種類之安全性實驗(例如女性臨床研究及發育毒性研究)的結果表明良好耐受高達120 mg/70 kg女性體重之單次劑量或60 mg每日兩次的AKR1C3抑制劑。 因此，本發明之一個目標為提供低劑量口服劑型之AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸，其對於治療及/或預防疾病，尤其子宮內膜異位、多囊性卵巢症及/或異位性皮膚炎係安全且有效的。
定義
本發明係關於一種口服劑型，其包含高達120 mg N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸的劑量。AKR1C3抑制劑中間物及化合物之合成、純化以及劑量範圍及療效已揭示於申請案WO 2013/045407中，此主題特此包括於本申請案中。 如上文所論述，本發明之劑型不僅有效而且安全以供人類用於上述病況，特定言之用於預防、治療或緩解子宮內膜異位、多囊性卵巢症及/或異位性皮膚炎。因此，在一個實施例中，本發明之劑型係投與罹患以上列舉之疾病的女性。 術語「人類安全使用」定義為以有效且不伴隨有安全性問題(對於未出生嬰兒或患者之健康風險)之劑量使用AKR1C3抑制劑。 就口服而言，有可能將本發明化合物調配為此項技術中已知的快速及/或以經調節之方式遞送本發明化合物之劑型，諸如錠劑(非包衣或包衣錠劑，例如具有延遲溶解或不可溶之腸溶或控制釋放包衣)、經口崩解錠劑、薄膜/粉片、薄膜/凍乾製劑、膠囊(例如硬或軟明膠膠囊)、糖包衣錠劑、顆粒劑、丸劑、粉劑、乳液、懸浮液、氣霧劑或溶液。有可能將本發明化合物以結晶及/或非晶形及/或溶解形式併入該等劑型中。 在本文之情形下，術語「口服劑型」一般係指錠劑(僅可吞咽及可咀嚼形式兩者)、膠囊、顆粒、密封在藥囊中之顆粒及丸劑。因此，本發明之劑型可呈錠劑、膠囊、膠囊錠、顆粒、藥囊或丸劑的形式。在本發明之一較佳實施例中，劑型呈錠劑或膠囊的形式，特定言之呈錠劑的形式。此不限於達成類似暴露量之其他調配物。 基於已知用以評估可用於治療子宮內膜異位、多囊性卵巢症及/或異位性皮膚炎之化合物的標準實驗室技術，藉由標準毒性測試及用於確定哺乳動物之以上所鑑別之病況的治療的標準藥理學分析，且藉由將此等結果與用以治療此等病況之已知活性成分或藥物之結果比較，可易於確定本發明化合物用於治療各種所要適應症之有效劑量。在治療此等病況之一者時所投與之活性成份的量可根據諸如以下的考慮因素在本發明所主張之劑量範圍內變化：特定化合物及所採用之劑量單位投與模式、治療時段、所治療患者之年齡及性別，及所治療之病況的性質及程度。 表述「70 kg之體重」不意欲限制為僅對稱重為70 kg女性使用劑型。參與臨床研究之女性體重範圍為48.7至90 kg。平均每日劑量為通常標準化至暴露群體之平均體重的劑量。若評估成人暴露量，則應使用成人體重值(Exposure Factars Handbook, US EPA,2009)。平均地，美國人稱重傾向於超過歐洲人。然而，對於成人而言，當前大多所使用之男性及女性合併之70 kg的平均體重值很可能更代表歐洲人，而非80 kg之美國人平均成人體重。歐洲食品安全局(EFSA)建議70 kg之體重應用作歐洲成人群體(年齡大於18歲)的預設值。科學委員會(The Scientific Committee)承認此預設值相比於使用60 kg會在某些情形下導致更小的保守性風險評估，但考慮到70 kg為歐洲人群體平均體重之更真實的估計值。因此，本發明中70 kg之體重值視為代表性體重。臨床實驗
下表1給出利用AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸所進行之相關臨床研究的概述，且包括關於群體、投與路徑及測試劑量範圍的資料。 表1：相關臨床研究
以下將詳細描述上述臨床研究中之每一者的所用方法及所得結果： 單次劑量研究1：健康停經後女性接受單次投與的含有0 mg(對照)、1 mg、3 mg、10 mg或30 mg之AKR1C3抑制劑的飲用溶液(液體調配物)或含有30 mg、60 mg、90 mg、120 mg、240 mg之AKR1C3抑制劑的錠劑。在給藥之前及藥物投與之後1天、2天、6天及14天評估血漿膽紅素含量。在每日接受240 mg/70 kg體重之單次劑量之AKR1C3抑制劑的6名個體中，5名偵測到超過正常值上限的血漿膽紅素濃度(參見圖1及圖2)。 多次劑量研究2部分A：健康停經後女性接受含有每70 kg體重3 mg (每日一次)、30 mg (每日一次)、90 mg (每日一次)或60 mg (每日兩次)之AKR1C3抑制劑的錠劑，歷時14天。在給藥之前及藥物投與之後1天、2天、6天、10天、13天、15天、19天及最終檢查時評估血漿膽紅素含量。在接受每日一次90 mg之7名個體中之1名及接受每日兩次60 mg之7名個體中之5名中偵測到超過正常值上限的血漿膽紅素濃度(參見圖3至圖6)。 多次劑量研究2部分B：健康停經前女性接受每日一次含有60 mg之AKR1C3抑制劑的錠劑或每日兩次含有60 mg之AKR1C3抑制劑的錠劑，歷時28天。在給藥之前及藥物投與開始之後的週期第8天、第12天、第15天、第22天、第29天、第33天及後續檢驗時評估血漿膽紅素含量。在接受每日一次60 mg之9名個體中之1名及接受每日兩次60 mg之9名個體中之2名中偵測到超過正常值上限的血漿膽紅素濃度(參見圖7及圖8)。 在所有上述研究中，所觀測到的膽紅素增加係可逆的。因此，在治療停止之後，血漿膽紅素濃度返回至與彼等治療前所偵測之濃度範圍類似的濃度範圍。 總之，上列發現指示在暴露於AKR1C3抑制劑後，血漿膽紅素的劑量依賴性增加，以及以下觀測結果： · 在單次及重複給藥長達14天後，未觀測到每日一次高達30 mg/70 kg體重(女性)之AKR1C3抑制劑的劑量對血漿膽紅素有改變。 · 在每日一次90 mg/70 kg體重(停經後女性；2週之治療)之AKR1C3抑制劑的劑量下及在每日一次60 mg/70 kg體重(停經前女性；4週之治療)之AKR1C3抑制劑的劑量下，分別在暴露於AKR1C3抑制劑之小部分個體內觀測到血漿膽紅素增加，且在2或4週之治療間隔的後半期具有返回至基線的傾向。 · 在每日兩次60 mg/70 kg體重之AKR1C3抑制劑的劑量下，在暴露於AKR1C3抑制劑14或28天之相當大一部分個體內觀測到血漿膽紅素增加。 · 在投與單次劑量之240 mg/70 kg體重的AKR1C3抑制劑之後，在給藥後24小時之內偵測到腸胃症狀(輕度至中度噁心、嘔吐及/或腹瀉)及膽紅素增加(肝酶無變化)，且在給藥後48小時返回至低於正常值上限的濃度。此等發現為完全可逆的且可監測的(參見實例1、圖1及圖2)。生殖毒性研究 ：
利用AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸評估潛在發育毒性的生殖毒性研究在大鼠及兔中進行且概括在下文中。無明顯有害效應含量(NOAEL)之安全性界限(=多次暴露量，MoE)在表2中給出。實驗細節描述於實例3中。 在評估大鼠及兔之胚胎發育的研究中，觀測到指向發育毒性的發現。在各別施用5、17及60 mg/kg/天之劑量AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸的大鼠研究中，在懷孕大鼠暴露於高劑量之AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸(60 mg/kg)時，注意到大鼠胎兒的發育毒性。影響包括以低發病率發生之畸形(=嚴重的胎兒結構性異常)及以較高發病率受注意之變異(相比於同時發生及病史對照)。因此，針對大鼠發育毒性的NOAEL為17 mg/kg之中度劑量。當將大鼠在17 mg/kg下所達成的全身性暴露量(AUC未結合)與在每日兩次60毫克/天、每日一次30毫克/天及每日一次3毫克/天投與之後的預期臨床暴露量相比較時，在17 mg/kg之發育毒性的NOAEL下懷孕大鼠分別獲得大致2倍、15倍或122倍之更高暴露量。 在相對應之投與5、20及70 mg/kg之劑量的AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸的兔胚胎發育研究中，未揭露化合物相關之畸形。然而，一些胎兒結構性變異(=輕度胎兒結構性異常)之發病率在20 mg/kg及更高之中度劑量下增加。因此，關於兔發育毒性的NOAEL為5 mg/kg之低劑量的AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸。當將兔在5 mg/kg之AKR1C3抑制劑下所達成的全身性暴露量(AUC未結合)與在每日兩次60毫克/天、每日一次30毫克/天及每日一次3毫克/天投與AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸之後的預期臨床暴露量相比較時，分別獲得大致0.3倍、2倍或17倍的更高暴露量。 表2：臨床前安全性界限
總之，臨床研究資料顯示，每日兩次高達60 mg之劑量的AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸可良好耐受。此外，發現人類生殖或發育毒性問題增加的領域預期在約＞15 mg之每日劑量下，且人類生殖或發育毒性問題減少的領域在約≤3 mg之每日劑量下。因此，結合臨床研究及生殖毒性研究之結果，女性安全劑量範圍可確定在每日0.7 mg至120 mg/70 kg女性體重之間，偏好程度有所不同。 因此，本發明之一個目標為包含高達120 mg N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸的口服劑型。本發明之另一目標為劑量為120 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑量在30與120 mg之間範圍內的該口服劑型。本發明之另一目標為劑量在1與10 mg之間範圍內的該口服劑型。本發明之另一目標為劑量為90 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑量為60 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑量為30 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑量為15 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑量為3 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑量為1 mg之該口服劑型。本發明之另一目標為劑型為錠劑之該劑型。錠劑可經膜包覆。劑型亦可為液體。如申請案WO 2013045407中所揭示，化合物 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸為有效AKR1C3抑制劑。如上文所論述，AKR1C3抑制視為消炎方法與局部抗激素概念之非常新穎的組合。因此，該劑型作為藥劑之用途亦為本發明之目標。子宮內 膜異位
子宮內膜異位定義為子宮內膜外存在類似子宮內膜的組織(『子宮內膜異位病變』)，其誘發慢性炎症反應(Dunselman, GA, N Vermeulen等人，ESHRE guideline: management of women with endometriosis. Hum Reprod. 2014;29:400-12)。在近似5至10%之女性群體的發病率下，經估計子宮內膜異位影響176百萬世界範圍內的女性(Adamson, GD, S Kennedy等人，Creating solutions in endometriosis: global collaboration through the World Endometriosis Research Foundation. Journal of Endometriosis 2010;2:3-6)。在主要市場中，估計有一千零十萬患有該疾病的患者(Bernuit, D, AD Ebert等人，Female perspectives on endometriosis: findings from the uterine bleeding and pain women's research study. Journal of Endometriosis 2011;3:73-85)。子宮內膜異位會嚴重影響女性生命。對於很多人而言，症狀極為嚴重，其一年平均有18天臥床不起(Kjerulff, KH, BA Erickson等人，Chronic gynecological conditions reported by US women: findings from the National Health Interview Survey, 1984 to 1992. Am J Public Health. 1996;86:195-9)。症狀發作與診斷之間常常存在相當大的延遲(Nnoaham, KE, L Hummelshoj等人，Impact of endometriosis on quality of life and work productivity: a multicenter study across ten countries. Fertil Steril. 2011;96:366-373)且決定性診斷需要腹腔鏡觀測骨盆之內部結構，理想性下需要具有組織學證實。甚至在腹腔鏡檢查廣泛可用之諸如德國及奧地利的發達國家中，診斷延遲甚至超過10年(Hudelist, G, N Fritzer等人，Diagnostic delay for endometriosis in Austria and Germany: causes and possible consequences.Hum Reprod .
2012;27:3412-6)。 子宮內膜異位可以腹膜上可變大小之病變、卵巢上之子宮內膜異位囊腫(子宮內膜瘤)形式出現，且可在器官之間形成黏著。病變可為淺表或深部浸潤的(穿透5 mm或超過5 mm)且常常浸潤直腸陰道空間。子宮內膜異位亦可在骨盆內之其他結構(諸如膀胱、輸尿管或輸卵管)上出現。此外，子宮內膜異位可發生在子宮之子宮肌層中，所謂的子宮腺肌症。罕見地，涉及骨盆外之器官，例如心包、胸膜、腦等。 病變為激素反應，且可在月經期間出血。患有子宮內膜異位之女性可罹患慢性、週期性骨盆疼痛(痛經)及/或非週期性骨盆疼痛，在性交期間削弱繁殖力及經受疼痛(性交困難)。此等疼痛中，痛經常常作為最常見的症狀而報導(Sinaii, N, K Plumb等人，Differences in characteristics among 1,000 women with endometriosis based on extent of disease. Fertil Steril. 2008;89:538-45)。其他症狀可包括腸胃紊亂、泌尿問題及疲乏。對於子宮內膜異位如何產生之最公認的理論為，在行經期間，子宮內膜組織經由輸卵管流出(所謂的『倒經』且植入腹膜表面上(Giudice, LC. Clinical practice. Endometriosis. N Engl J Med. 2010;362:2389-98)。然而，此理論並未解釋初經前子宮內膜異位之表現，或骨盆外病變之出現，且其他過程可歸結於子宮內膜異位之病因。 根據美國生殖醫學學會(the American Society for Reproductive Medicine，ASRM)之指南，「子宮內膜異位應視為需要終身管理計劃，從而最大化使用醫藥治療且避免反覆手術程序之慢性疾病」(Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. Treatment of pelvic pain associated with endometriosis: a committee opinion. Fertil Steril. 2014;101:927-35)。在接受腹腔鏡診斷之前，患有子宮內膜異位之女性通常用非類固醇消炎藥(NSAID)、類鴉片及/或憑經驗用結合口服避孕藥(COC)或孕激素來治療(Cea-Soriano, LGR, L. A., R Schulze-Rath等人，Treatment patterns of endometriosis in the health improvement network primary care database. 'Presented at' Reproductive Sciences 2015;22:115A. Presented at the 62nd Annual Scientific Meeting of the Society for Gynecologic Investigation (SGI 2014), 2014年3月25-28日, San Francisco, CA, USA)。COC之使用為標示外使用，然而一些國家已核准少數孕激素用於此適應症。Visanne®為針對此疾病之治療特定研發之唯一孕激素，且為自1989年引入促性腺激素釋放激素(GnRH)類似物以來歐盟核准用於子宮內膜異位之第一醫藥療法。 儘管投與COC降低內源性雌二醇含量，但外源性雌激素對疾病進展之長期影響鮮為人知。已表明使用COC可便於異位子宮內膜細胞植入及生長，從而增加子宮內膜異位之風險(Parazzini, F, M Ferraroni等人，Contraceptive methods and risk of pelvic endometriosis. Contraception, 1994;49:47-55)。因此，使用COC可使得疾病進展同時掩蓋疾病之症狀。此外，患有子宮內膜異位之女性頻繁地發現COC或孕激素由於副作用或無效而不適合，但極少資料可用於估計此等藥劑之失效率(Kappou, D, M Matalliotakis等人，Medical treatments for endometriosis. Minerva Ginecol. 2010;62:415-32及Seracchioli, R, M Mabrouk等人， Post-operative use of oral contraceptive pills for prevention of anatomical relapse or symptom-recurrence after conservative surgery for endometriosis. Hum Reprod. 2009;24:2729-35)。然而，尚無可供使用的替代長期醫藥療法。GnRH類似物由於低雌激素副作用而限於短期利用，且很少處方達那唑(danazol)(雄激素)及孕三烯酮(抗孕激素)。治療子宮內膜異位之手術程序可能為無效的。已報導5年40至50%之復發率，其中多個患者採取反覆手術(Guo, SW. Recurrence of endometriosis and its control. Hum Reprod Update. 2009;15:441-61)。甚至移除兩個卵巢之子宮切除術未必為對此疾病之決定性治療；已報導進行此程序之10%女性的子宮內膜異位症狀復發(Namnoum, AB, TN Hickman等人，Incidence of symptom recurrence after hysterectomy for endometriosis. Fertil Steril. 1995;64:898-902)。 由於AKR1C3抑制之特有作用機制靶向子宮內膜異位中之炎症、疼痛及增殖，所以使用該劑型預防、治療或緩解子宮內膜異位為本發明之一個目標。多囊性卵巢症
多囊性卵巢症(PCOS)為生殖年齡女性當中常見的內分泌系統失調。患有PCOS之女性可具有增大之卵巢，其含有少量被稱作濾泡之流體收集物(定位於各卵巢中)，如在超音波檢查期間所見。月經期稀少或延長、過量毛髮生長、痤瘡及肥胖可皆發生在患有多囊性卵巢症的女性中。在青少年中，月經稀少或閉經可引起對病況的懷疑。多囊性卵巢症之準確病因係未知的。提早診斷及治療連同體重減輕可減少長期併發症(諸如2型糖尿病及心臟病)之風險(http://www.mayoclinic.org/diseases-conditions/pcos/basics/definition/ con-20028841)。近期研究亦顯示顯著增加非酒精性脂肪肝病之風險。因此，PCOS代表重要的健康護理負擔。 雄激素過量為不利代謝風險的主要驅動者。已顯示隨著雄激素過量嚴重度增加，胰島素抗性流行率亦增加(O'Reilly M等人，JCEM 2014)。此已藉由其他人證實(Pasquali R, JCEM 2016)。AKR1C3在患有單純性肥胖症及PCOS之女性的脂肪組織中過度表現，其中其可使雄烯二酮活化成睪固酮(Quinkler等人，J Endocrinol 2004；Wang L等人, JSBMB 2012)。因此抑制AKR1C3預期對治療PCOS有利。 因此，使用該劑型預防、治療或緩解PCOS為本發明之一個目標。異位性皮膚炎
異位性皮膚炎(AD)為病因未知的慢性、瘙癢的發炎性皮膚疾病，其通常在嬰兒早期開始且亦影響很多成人。如上文已論述，已顯示AKR1C3調節性激素及前列腺素D2 (PGD2)的代謝。Mantel等人(J Invest Dermatol. 2012年4月; 132(4): 1103-1110)將AKR1C3描述為在異位性皮膚炎(AD)中促進皮膚炎症的脂質介體。在皮膚功能及病理血方面皆起作用。作者描述AKR1C3經發現相比於非病變皮膚上調AD而非牛皮癬病變，且證明AKR1C3在分化相關的基因調節中的功能，且亦表明在支持AD中之炎症的作用。 因此，使用該劑型預防、治療或緩解異位性皮膚炎為本發明之一個目標。 本發明之一個目標亦為用於預防、治療及緩解子宮內膜異位、多囊性卵巢症及/或異位性皮膚炎之方法，其包含向有需要之女性投與本發明之劑型。 本發明之一個目標亦為用於預防、治療及緩解子宮內膜異位、多囊性卵巢症及/或異位性皮膚炎之方法，其中該方法包含投與本發明之劑型。劑型可每日給與一次且若劑型至多僅60 mg，則亦可每日給與兩次。實例 實例 1 - 單次劑量研究
單中心、隨機化、安慰劑對照、雙盲及平行組研究： 對於僅30 mg組而言，應用一種順序交叉設計以估計液體與固體調配物之相對生物可用性。在此研究中測試以下單次劑量投與： · 液體劑型：1 mg、3 mg、10 mg、30 mg之AKR1C3抑制劑 · 固體劑型：30 mg、60 mg、90 mg、120 mg、240 mg之AKR1C3抑制劑 在此研究中，AKR1C3抑制劑以單次口服劑量形式投與。每一治療組包括8名志願者。每一治療組之2名志願者以隨機化、雙盲方式分配安慰劑以便評定安全性評估中之非藥物相關因素。為確保治療8名個體，在給藥前期，至少一名候補個體須進行所有必需量測以抵消女性在即將給藥之前由於安全性問題而必須排除的風險。 在篩檢的115名個體(健康停經後女性)中，將60名平均年齡為57.6歲(標準差為4.7歲)之個體隨機化且用單次劑量之AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸或安慰劑來治療。60名治療個體中之46名(46，76.7%)用AKR1C3抑制劑治療(每組6名個體在1 mg、3 mg、10 mg、30 mg、120 mg、240 mg之劑量下；每組5名個體在60 mg及90 mg之劑量下)，且14名個體(23.3%)接受安慰劑(在1 mg、3 mg、30 mg、60 mg、120 mg及240 mg組中各2名個體，及在10 mg及90 mg組中各1名個體)。所有60名治療個體(100%)完成研究且包括於安全性統計分析中(SAF：N=60)。60名治療個體中之1名由於在兩個時間tmax之前嘔吐而對藥效學之分析無效(PDS：N=59)。此同一個體亦自46名真實治療之個體的藥物動力學(PK)分析排除，且14名安慰劑治療之個體全部對PK分析無效(PKS：N=45)。 高達120 mg之單次劑量的AKR1C3抑制劑為良好耐受的，包括240 mg之最高單次劑量的所有測試劑量具有可接受的安全型態。基於240 mg之耐受性型態，120 mg之單次劑量視為最大耐受劑量。 採用標準實驗室套組量測膽紅素。測試根據由製造商(Beckman coulter kit AU680)所提供之說明書來進行。實例 2 - 多次劑量研究
研究係在27名年齡為45至68歲的健康停經後(PM)女性(部分A)及18名年齡為18至48歲的健康輸卵管結紮(TL)女性(部分B)中，在AKR1C3抑制劑或安慰劑之多次口服劑量之後以遞增劑量研究形式來進行。此外，在9名健康停經後女性中評估較低劑量(3 mg或安慰劑)，主要用以表徵AKR1C3抑制劑在用於患者研究中之前的藥物動力學特性。 研究由兩個部分組成：部分A在健康停經後女性(隨機分佈在各劑量內且用安慰劑對照)中進行，部分B在輸卵管結紮之健康停經前女性中進行(開放標籤；個體內與治療前週期之對比)，持續28天治療(亦即約一個月經週期)。在使停經前女性經28天暴露於60 mg每日一次、60 mg每日兩次之對應劑量之前，在停經後女性中評估經14天給與30 mg每日一次、90 mg每日一次、60 mg每日兩次之AKR1C3抑制劑的安全性。部分A及部分B進一步分成不同時段： 部分A：篩檢、給藥前、單次劑量投與之治療時段1，在14個連續日多次劑量投與之治療時段2及隨訪。在治療時段1 (投與日)與至少14天且不超過28天的治療時段2 (初次投與)之間需要洗脫期。 女性在空腹狀態下在時段1中接受研究藥物(單次劑量)以及在時段2之第14天接受研究藥物(多次劑量)。在時段2之第1天，在早餐之後給與研究藥物以評估食物效應。 測試AKR1C3抑制劑之3個遞增劑量：30 mg每日一次、90 mg每日一次及60 mg每日兩次。此外，評估3 mg每日一次之較低劑量。研究中每個劑量包括9名志願者；其中，n=7名女性隨機分配至用相應劑量治療，且n=2名女性用安慰劑治療。研究藥物在一個劑量中以雙盲方式投與，亦即該劑量之所有志願者皆接受外觀相同之相同數目個錠劑。 部分B：篩檢、給藥前(治療前週期)、在28個連續日多次劑量投與之治療時段及隨訪。在給藥前時段，評估在月經週期期間包括排卵跡象的激素變化。研究藥物投與在治療前週期結束之後月經出血的第4天開始，隨後在28個連續日服用研究藥物，與進一步月經出血無關。治療前週期可由超過2個月經週期與治療時段分隔開。 在治療前週期以及治療時段中，進行常規經陰道超音波及激素量測以判定卵巢活性。此外，每日在LH峰值附近分析一組所選激素。為偵測此峰值，女性每日須進行分析LH及雌酮-3-葡萄糖苷酸(E3G)之家用尿測試(Clearblue Fertility Monitor或類似裝置)。 每日將子宮流血及血斑記錄在日記中，在治療前週期開始直至隨訪。在單天之兩個時刻採集月經流出物(經血)：a)在治療之前及b)在治療時段期間或之後下一次月經出血發生時，視個別週期長度而定(治療始終為28天)。 在此臨床研究中，未報導嚴重治療出現的不良事件(TEAE)。在AKR1C3抑制劑之最高測試劑量(240 mg)下，藥物相關TEAE的發生率為100%。用AKR1C3抑制劑治療之個體組中以與安慰劑相比之較大比率發生之最常見的藥物相關TEAE為頭痛(21.7%對比0.0%)、噁心(15.2%對比0.0%)、嘔吐(13.0%對比0.0%)、乏力(13.0%對比0.0%)及血液膽紅素增加(13.0%對比0.0%)。藥物相關乏力及血液膽紅素增加之所有情形皆發生在用240 mg之單次劑量的AKR1C3抑制劑治療的個體中。實驗室測試(諸如血液學、臨床化學作用、凝血及尿分析)揭露與時間無關之異常個別發現的增加及所測試之單次劑量的AKR1C3抑制劑的非劑量依賴性效應,除了血清膽紅素在30至240 mg組中暫時增加，但僅240 mg組平均膽紅素值在給藥後24小時內增加超過正常範圍上限(ULN)且在給藥之後48小時時返回至低於ULN之濃度。較高劑量之AKR1C3抑制劑與血清孕酮(主要在90、120及240 mg之後)、去氧皮質酮(主要在240 mg之後)及孕烯醇酮(主要在240 mg之後)之臨床顯著升高有關(在停經後女性中超過ULN＞1.5倍)。 監測整個此研究中的總膽紅素濃度。採用標準實驗室套組量測膽紅素。測試根據由製造商(Beckman coulter kit AU680)所提供之說明書來進行。 所有分析物之濃度-時程由治療列表分隔開。計算各取樣點之以下統計資料：幾何平均值、幾何標準差(再轉換之對數標準差)及幾何變化係數(CV)、算術平均值、標準差及CV、最小值、中位值、最大值及量測次數。若至少2/3之個別資料經量測且超過定量之下限(LLOQ)，則僅計算任何時間之平均值。為計算平均值，低於LLOQ之資料點由此限值之二分之一取代。在展示平均值之表中，平均值計算包括低於LLOQ之值，標記此等平均值。使用線性及半對數標度藉由研究部分及治療標繪所有分析物之個別及幾何平均值濃度與時間曲線(對於個別曲線而言使用實際取樣時間，及對於平均曲線而言使用計劃取樣時間)。 由於固體及液體調配物兩者皆給與女性，所以本發明之劑型可為液體調配物或固體調配物(例如可經膜包覆之錠劑)。實例 3 - 臨床實驗生殖毒性、描述及資料
下表給出利用AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸所進行之相關生殖毒性研究的概述，且包括關於物種、投與路徑及測試劑量範圍的資料。估計以AUC未結合形式計算之全身性暴露量。 表3：相關生殖毒性研究：
以下將詳細描述各上文所提及之毒性研究的所用方法及所得結果：實例 3a ： 大鼠中胚胎發育研究
懷孕大鼠自妊娠之第6天至第17天由管飼法口服接受每日一次0、5、17及60 mg/kg之AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸。對照組以同樣方式接受媒劑。所有F0-雌性在妊娠之第21天處死，且在移除及檢查卵巢以及子宮之後記錄以下參數：黃體數目、植入部位之數目及狀態(亦即，活胎、早期及晚期子宮內死亡、死胎)。早期子宮內死亡歸類為僅展示蛻膜或胎盤組織的子宮內死亡。晚期子宮內死亡除胎盤組織之外展示胚胎或胎兒組織。死胎歸類為似乎在屍檢之前不久死亡的胎兒。活胎藉由皮下注入戊巴比妥鈉(sodium pentobarbitone)進行安樂死。記錄個別胎兒及胎盤重量，檢查胎兒外部異常且藉由外部觀測區分性別。然後,藉由顯微剖檢法檢查各窩中大致二分之一胎兒的內臟異常。其隨後摘除內臟及處理胎體且用Alizarin Red S染色以用於骨骼檢查。其餘胎兒固定在布英液體(Bouin's fluid)中且藉由威爾遜剖切方法(Wilson sectioning method)檢測內臟異常。胎兒異常歸類為畸形(罕見及/或潛在致死性缺陷)及變異(常發生的非致死性異常)。 在子宮內暴露至AKR1C3抑制劑 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸之胎兒中所注意到之最相關發現為，在較高劑量之化合物 N
-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N
-甲基-β
-丙胺酸(60 mg/kg)下，相比於對照組(211個胎兒中之1個)，出現更高的畸形發生率(總共198個胎兒中來自8個母獸之12個胎兒)。此等畸形中之一些(不包括於病史對照中)在高劑量組中以低發生率出現，此時涉及一個或兩個胎兒。此等畸形與骨骼形成、主動脈弧有關，或侷限於具有多個異常的一個胎兒。此外，相比於同時發生或病史對照，在60 mg/kg下觀測到某些胚胎內臟及骨骼變異之較高發生率。因此，總之，母體毒性之NOAEL視為60 mg/kg。發育毒性之NOAEL視為17 mg/kg，因為歸類為變異或畸形之胎兒結構性發現在60 mg/kg之高劑量下誘發。實例 3b ： 兔中胚胎發育研究
懷孕兔自妊娠之第6天至第19天由管飼法每日一次口服0、5、20及70 mg/kg之AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸來處理。對照組以同樣方式接受媒劑。所有F0-雌性在妊娠之第29天處死，且在移除及檢查卵巢以及子宮之後記錄以下參數：黃體數目、植入部位之數目及狀態(亦即，活胎、早期及晚期子宮內死亡、死胎)。早期子宮內死亡歸類為僅展示蛻膜或胎盤組織的子宮內死亡。晚期子宮內死亡除胎盤組織之外展示胚胎或胎兒組織。死胎歸類為似乎在驗屍之前不久死亡的胎兒。活胎藉由腹膜內注入戊巴比妥鈉進行安樂死。記錄個別胎兒及胎盤重量，檢查胎兒外部異常且藉由外部觀測區分性別。藉由由顯微剖檢法檢查各窩中之所有胎兒的內臟異常，摘除內臟及處理胎體且用Alizarin Red S染色以用於骨骼檢查。在殺死胎兒之後，移除各窩中約二分之一胎兒的無破損頭部，且在布英液體中處理。隨後，藉由威爾遜剖切方法檢查頭部。胎兒異常歸類為畸形(罕見及/或潛在致死性缺陷)及變異(常發生的非致死性異常)。在子宮內暴露至AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸之兔胎兒中所注意到之最相關發現為，在20 mg/kg及更高之中度劑量下，出現歸類為變異的胎兒骨骼發現的發生。此等變異與胸骨節有關。其包括在相比於同時發生及病史對照之較高發生率下所記錄之具有額外骨化部位的胸骨節，以及在接受AKR1C3抑制劑N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸之所有組中觀測到出現骨化增加的胸骨節，但在5 mg/kg下發生率極低。此發現未出現於背景資料中。另外，相比於病史對照資料，在70 mg/kg下在胎兒中觀測到變色胸腺的發生率略微較高。因此，總之，母體毒性之NOAEL視為70 mg/kg。發育毒性之NOAEL視為5 mg/kg，因為在20 mg/kg及更高之劑量下出現歸類為變異的胎兒發現。實例 4 ： AKR1C3 抑制劑 N -{[ 17 -( 5 - 氟吡啶 - 3 - 基 ) 雌甾 - 1 , 3 , 5 ( 10 ), 16 - 四烯 - 3 - 基 ] 羰 基 }- N - 甲基 - β - 丙胺酸之合成
合成： 中間物及化合物之合成、純化以及AKR1C3抑制劑之劑量範圍及療效已揭示於申請案2013/045407 (實例2)中，此主題特此包括於本申請案中。 步驟A：將1.62 g (1.0當量)之1-羥基-1H-苯并三唑水合物、4.06 g (2.0當量)之1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)及4.4 ml之三乙胺添加至4.00 g (10.6 mmol)之17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-甲酸及3.38 g (2當量)之N-甲基-β-丙胺酸第三丁酯於100 ml之THF及5 ml之DMF中之混合物中，且在室溫下攪拌混合物18 h。混合物用水稀釋且用乙酸乙酯萃取三次，萃取物用氯化鈉溶液洗滌且濃縮。用矽膠(己烷/乙酸乙酯)純化殘餘物得到5.1 g呈固體狀之N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸第三丁酯(理論上93%)。 步驟B：首先將1.00 g (1.93 mmol)之N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸第三丁酯饋入15 ml之二氯甲烷中，添加1.5 ml之三氟乙酸且在40℃下攪拌混合物隔夜，倒入冰水中，簡單攪拌且用二氯甲烷萃取3次。將合併之有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經由拒水過濾器過濾且濃縮。將乙醚添加至粗產物中，攪拌混合物並藉由抽吸過濾，用乙醚洗滌產物且乾燥。由此得到0.79 g (理論上89%)之N-{[17-(5-氟吡啶-3-基)雌甾-1,3,5(10),16-四烯-3-基]羰基}-N-甲基-β-丙胺酸。 C28H31FN2O3 (462.6). MS-ES+ 質量實驗值: 462.23。 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1.00 (s, 3H)、1.33 - 1.79 (m, 5H)、1.82 - 1.99 (m, 1H)、2.08 - 2.21 (m, 2H)、2.21 - 2.43 (m, 3H)、2.50 (s)、2.74 - 2.88 (5H, 在2.88 ppm處含有s), 3.36 - 3.71 (m)、6.27 (s., 1H)、6.99 - 7.16 (m, 2H)、7.28 (d, 1H)、7.68 (dt, 1H)、8.43 (d, 1H)、8.49 (s, 1H)、8.48 - 8.56 (m, 1H)、12.28 (br. s.)。