TW201638074A

TW201638074A - （２ｒ，４ｒ）－５－（５’－氯－２’－氟聯苯－４－基）－２－羥基－４－［（５－甲基噁唑－２－羰基）胺基］戊酸

Info

Publication number: TW201638074A
Application number: TW105104991A
Authority: TW
Inventors: 梅莉沙佛羅瑞; 亞當Ｄ休斯; 安瑪莉柏索里爾; 艾瑞克芬斯特; 凡凱特Ｒ泰拉狄; 麥洛史夫瑞帕達
Original assignee: 施萬生物製藥研發Ｉｐ有限責任公司
Priority date: 2015-02-19
Filing date: 2016-02-19
Publication date: 2016-11-01
Also published as: US20210401808A1; US20170196841A1; SI3259255T1; AU2016220348A1; CO2017008426A2; JP2018507207A; RU2017132430A3; US20160244416A1; RU2715241C2; KR102573351B1; SG11201706662YA; US11033533B2; US20180228774A1; CA2975269C; US10548879B2; JP6714009B2; LT3259255T; KR20170118855A; EP3259255B1; CA2975269A1

Abstract

在一態樣中，本發明係關於具有以下結構之化合物： □ 或其醫藥上可接受之鹽，及此化合物之結晶型，其具有腎胰島素殘基溶酶(neprilysin)抑制活性。在另一態樣中，本發明係關於包括此化合物之醫藥組合物、使用此化合物之方法及製備此化合物之方法。

Description

(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸

相關申請案之交叉參考

本申請案主張2015年2月19日提出申請之美國臨時申請案第62/118,067號之權益，該申請案之揭示內容之全部內容以引用方式併入本文中。

本發明係關於具有腎胰島素殘基溶酶抑制活性之新穎化合物及其結晶型。本發明亦係關於包括化合物之醫藥組合物、製備化合物之製程及使用化合物治療諸如高血壓、心力衰竭及腎病等疾病之方法。

腎胰島素殘基溶酶(中性內肽酶，EC 3.4.24.11)(NEP)係發現於許多器官及組織(包含腦、腎、肺、胃腸道、心臟及周邊血管系統)中之內皮膜結合Zn²⁺金屬肽酶。NEP降解且鈍化諸多內源性肽(例如腦啡肽、循環緩激肽、血管收縮肽及利鈉肽)，最後一者具有若干效應，包含(例如)血管舒張及鈉尿增多/利尿以及抑制心臟肥大及心室纖維化。因此，NEP在血壓穩態及心血管健康中發揮重要作用。

已研究NEP抑制劑(例如硫甲基氧代苯丙甘胺酸(thiorphan)、坎沙曲(candoxatril)及坎沙曲拉(candoxatrilat))作為潛在治療劑。亦已知抑制NEP及血管收縮肽-I轉化酶(ACE)之化合物，且包含奧馬曲拉(omapatrilat)、傑帕曲拉(gempatrilat)及山帕曲拉(sampatrilat)。此最後種類之化合物稱為血管肽酶抑制劑，其闡述於Robl等人(1999)Exp.Opin.Ther.Patents 9(12)：1665-1677中。

諸多NEP抑制劑闡述於Coppola等人之美國專利第8,263,629號及Gendron等人之美國專利第8,586,536號中。許多該等化合物具有一或多種期望性質。儘管已擁有該等化合物，然而，仍需要在所測試之所有物種中具有高口服生物利用度及低清除之強力NEP抑制劑。本發明係關於該需要。

另外，為有效地使用NEP抑制劑化合物作為治療劑，期望具有可易於製造且具有可接受之化學及物理穩定性之固態形式。舉例而言，高度期望具有在極高溫度下熱穩定、由此促進材料之處理及儲存之物理形式。對於增強所製造產物之純度及穩定性而言，結晶固體通常優於非晶型形式。然而，有機化合物之結晶型形式高度不可預測。並不存在預測何種(若存在)形式之有機化合物為結晶型之可靠方法。此外，不存在預測何種(若存在)結晶型將具有用作醫藥藥劑之期望物理性質之方法。因此，需要具有相當高熔點之穩定結晶型。

本發明提供發現擁有腎胰島素殘基溶酶(NEP)酶抑制活性之新穎化合物(1)。因此，預計此化合物可有利地用作用於治療諸如高血壓、肺高血壓、心力衰竭及腎病等病狀之治療劑。

本發明之一態樣係關於(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基-噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(1)：或其醫藥上可接受之鹽。本發明之另一態樣係關於化合物1之結晶型。在一實施例中，結晶型(1’)係非溶劑化的。

本發明之另一態樣係關於包括一或多種醫藥上可接受之載劑及化合物1或其結晶型之醫藥組合物。該等組合物可視情況含有其他治療劑，包含但不限於AT₁受體拮抗劑、血管收縮肽轉化酶抑制劑、磷酸二酯酶(PDE)抑制劑、腎素抑制劑、利尿劑或其組合。

本發明化合物1擁有NEP酶抑制活性，且由此預計可用作用於治療患有藉由抑制NEP酶或藉由增加其肽受質之含量來治療之疾病或病症之患者的治療劑。因此，本發明之一態樣係關於治療患有藉由抑制NEP酶來治療之疾病或病症之患者之方法，其包括向患者投與治療有效量之化合物1。本發明之另一態樣係關於治療高血壓、肺高血壓、心力衰竭或腎病之方法，其包括向個體投與治療有效量之化合物1。本發明之又一態樣係關於抑制個體中之NEP酶之方法，其包括向該個體投與NEP酶抑制量之化合物1。

因本發明化合物1擁有NEP抑制活性，故其亦可用作研究工具。因此，本發明之一態樣係關於使用本發明化合物1作為研究工具之方法，該方法包括使用化合物1實施生物分析。化合物1亦可用於評估新化學化合物。因此，本發明之另一態樣係關於在生物分析中評估測試化合物之方法，其包括：(a)使用測試化合物實施生物分析以提供第一分析值；(b)使用化合物1實施生物分析以提供第二分析值；其中步驟(a)係在步驟(b)之前、之後或與步驟(b)同時實施；及(c)比較來自步驟(a)之第一分析值與來自步驟(b)之第二分析值。實例性生物分析包含NEP酶抑制分析。本發明之再一態樣係關於研究包括NEP酶之生物系統或試樣之方法，該方法包括：(a)使生物系統或試樣與化合物1接觸；及(b)測定由化合物1在生物系統或試樣上引起之效應。

本發明之又一態樣係關於可用於製備化合物1或其結晶型之製程。

本發明之又一態樣係關於化合物1或其結晶型之用途，其用以製造藥劑，尤其用以製造可用於治療高血壓、心力衰竭或腎病之藥劑。本發明之另一態樣係關於化合物1或其結晶型用於抑制個體中之NEP酶之用途。本文揭示本發明之其他態樣及實施例。

參照附圖來圖解說明本發明之各個態樣。

圖1展示結晶非溶劑化(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基-噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(1’)之粉末x射線繞射(PXRD)圖案。

圖2展示結晶非溶劑化形式(1’)之差示掃描量熱法(DSC)熱分析圖。

圖3展示結晶非溶劑化形式(1’)之熱重分析特徵圖。

圖4展示結晶非溶劑化形式(1’)之動態水分吸附(DMS)等溫線。

圖5係結晶非溶劑化形式(1’)之偏振光顯微分析(PLM)影像。

在一態樣中，本發明係關於(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基-噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(1)或其醫藥上可接受之鹽。

本發明化合物1含有兩個對掌性中心且由此具有此一結構之化合物可以各種立體異構體形式存在。具體而言，碳原子可具有特定(R,R)、(S,S)、(S,R)或(R,S)構形或富含具有該構形之立體異構體形式。化合物1(如展示及命名)係呈(R,R)構形。彼等熟習此項技術者應理解，除非另外指示，否則在本發明組合物中可存在少量其他立體異構體，前提係該等其他異構體之存在不會消除該組合物作為整體之效用。個別立體異構體可藉由業內熟知之諸多方法來獲得，包含使用適宜對掌性固定相或載體之對掌性層析，或藉由以化學方式將其轉化成非對映異構體，藉由習用方式(例如層析或重結晶)分離非對映異構體，然後再生原始立體異構體。

本發明化合物1擁有腎胰島素殘基溶酶(NEP)抑制活性，亦即該化合能夠抑制酶催化活性。化合物抑制NEP活性之能力之一種量度為抑制常數(pK_i)。pK_i值係解離常數(K_i)之以10為底之負對數，其通常以莫耳單位來報告。本發明化合物針對NEP具有9.0之pK_i。可使用熟習此項技術者熟知之活體外及活體內分析(尤其包含彼等闡述於美國專利第8,586,536號中者)來證實化合物1之其他性質及用途。

化合物1以及用於其合成之彼等化合物亦可包含同位素標記之化合物，亦即其中一或多個原子富含具有不同於在自然界中主要發現之原子質量之原子質量之原子。可納入本發明中所闡述之化合物中之同位素之實例(例如)包含但不限於²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³⁵S、³⁶Cl及¹⁸F。尤其關注以下化合物：富含氚或碳-14之化合物1，其可用於(例如)組織分佈研究中；尤其在代謝位點處富含氘之化合物1，從而產生(例如)具有較大代謝穩定性之化合物；及富含正電子發射同位素(例如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O及¹³N)之化合物1，其可用於(例如)正電子發射形貌(PET)研究中。

在本文中根據IUPAC條例來命名化學結構，如在ChemDraw軟體(Perkin Elmer公司，Cambridge,MA)中所實施。

定義

在描述本發明之化合物、組合物、方法及製程時，除非另外指示，否則下列術語具有下列含義。另外，除非使用之背景明確指示其他含義，否則本文所用之單數形式「一(a、an)」及「該(the)」包含相應之複數形式。術語「包括」、「包含」及「具有」意欲具有囊括性並且意指除了所列舉要素外可能還有其他要素。除非另外指示，否則本文所用之所有表示成分數量、性質(例如分子量)、反應條件等之數字在所有情況下皆應理解為受術語「約」修飾。因此，本文所陳述之數字係近似值，其可隨本發明意欲獲得之期望性質而變。至少，並且並非試圖將等效物理論之應用限於申請專利範圍之範圍，至少應根據所報告之有效數字且藉由應用一般舍入技術來解釋每一數字。

在用於化合物1之熱行為之背景中時，術語「約」或「大約」定義為±1-3℃。在用於尿液中所分泌之化合物1之劑量%之背景中時，術語「近似」係由通常約兩倍於標準偏差之誤差界限或95%信賴區間之半寬來定義。在本發明之其他地方，術語「近似」可用於指示一組數據值之標準偏差或變化或分散量。

本文所用之術語「受控釋放」與持續釋放及延長釋放同義且係關於經延長時間段在個體中遞送一定量之藥物。通常，受控釋放之錠劑及膠囊經約8、12、16及24小時之時間段將活性物質釋放至個體中。另一態樣，術語「立即釋放」係指在較小時間段、通常小於約30分鐘內將活性物質釋放於個體中。術語「延遲釋放」係關於在設定時間段之後釋放醫藥劑量之錠劑及膠囊。通常腸溶包覆該等劑型以防止釋放於胃中，而是將其釋放於腸道中。

本文所用詞組「式」或「具有式」或「具有結構」並非意欲限制，並且使用方式與通常使用術語「包括」的方式相同。舉例而言，若繪示一種結構，則應理解，除非陳述另外，否則涵蓋所有立體異構體及互變異構體形式。

一般而言，在闡述醫藥固體時，術語「非溶劑化」暗示「不含溶劑」。因此，在將本發明結晶型闡述為「非溶劑化」時，其意指結晶顆粒基本上僅含有(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸分子；該形式不含顯著量之其他包含晶格之溶劑分子或換言之，溶劑並不顯著納入中晶格中。在水係溶劑時，術語「非溶劑化」亦意指非水合或無水。

本文所用之術語「熔點」意指針對對應於固相至液相變化之熱轉化，由差示掃描量熱法所觀察到最大吸熱熱流處之溫度。

術語「醫藥上可接受之」係指在用於本發明時在生物學上或在其他態樣可接受之材料。舉例而言，術語「醫藥上可接受之載劑」係指可納入組合物中並投與患者而不會造成不可接受之生物效應或以不可接受方式與該組合物中其他組份相互作用之材料。該等醫藥上可接受之材料通常符合毒理學及製造測試所要求之標準，且包括彼等由美國食品與藥品管理局(U.S.Food and Drug administration)確定為適宜非活性成分之材料。

術語「醫藥上可接受之鹽」意指自可接受用於投與患者(例如哺乳動物)之鹼或酸製得之鹽(例如具有用於給定劑量方案之可接受哺乳動物安全性之鹽)。然而，應理解，本發明所涵蓋之鹽無需為醫藥上可接受之鹽，例如並不意欲投與患者之中間體化合物之鹽。醫藥上可接受之鹽可衍生自醫藥上可接受之無機或有機鹼及醫藥上可接受之無機或有機酸。另外，在化合物含有鹼性部分(例如胺、吡啶或咪唑)及酸性部分(例如羧酸或四唑)時，可形成兩性離子且包含於本文所用之術語「鹽」內。衍生自醫藥上可接受之無機鹼之鹽包含銨鹽、鈣鹽、銅鹽、鐵鹽、亞鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、二價錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽及諸如此類。衍生自醫藥上可接受之有機鹼之鹽包含以下之鹽：一級、二級以及三級胺，包含經取代胺、環胺、天然胺及諸如此類，例如精胺酸、甜菜鹼、咖啡因、膽鹼、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二甲基胺基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基六氫吡啶、還原葡糖胺、葡萄糖胺、組胺酸、海巴明(hydrabamine)、異丙胺、離胺酸、甲基還原葡糖胺、嗎啉、六氫吡嗪、六氫吡啶、聚胺樹脂、普魯卡因(procaine)、嘌呤、可可鹼、三乙胺、三甲胺、三丙胺、胺丁三醇及諸如此類。衍生自醫藥上可接受之無機酸之鹽包含硼酸、碳酸、氫鹵酸(氫溴酸、鹽酸、氫氟酸或氫碘酸)、硝酸、磷酸、胺磺酸及硫酸之鹽。衍生自醫藥上可接受之有機酸之鹽包含以下酸之鹽：脂肪族羥基酸(例如檸檬酸、葡萄糖酸、乙醇酸、乳酸、乳糖醛酸、蘋果酸及酒石酸)、脂肪族單羧酸(例如乙酸、丁酸、甲酸、丙酸及三氟乙酸)、胺基酸(例如天門冬胺酸及麩胺酸)、芳香族羧酸(例如苯甲酸、對氯苯甲酸、二苯基乙酸、龍膽酸、馬尿酸及三苯基乙酸)、芳香族羥基酸(例如鄰羥基苯甲酸、對羥基苯甲酸、1-羥基萘-2-甲酸及3-羥基萘-2-甲酸)、抗壞血酸、二羧酸(例如富馬酸、馬來酸、草酸及琥珀酸)、葡糖醛酸、苦杏仁酸、黏酸、菸鹼酸、乳清酸、帕莫酸、泛酸、磺酸(例如苯磺酸、樟腦磺酸、1,2-乙二磺酸、乙烷磺酸、羥乙基磺酸、甲烷磺酸、萘磺酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2,6-二磺酸及對甲苯磺酸)、羥萘甲酸及諸如此類。

術語「治療有效量」意指在向有需要之患者投與時足以進行治療之量，亦即獲得期望治療效應所需之藥物量。舉例而言，用於治療高血壓之治療有效量係(例如)減少、阻抑、消除或預防高血壓各症狀或者治療高血壓之潛在病因所需化合物之量。在一實施例中，治療有效量係減小血壓所需之藥物量或維持正常血壓所需藥物之量。另一方面，術語「有效量」意指足以獲得期望結果之量，該期望結果可能不一定為治療結果。舉例而言，在研究包括NEP酶之系統時，「有效量」可為抑制該酶所需之量。

本文所用之術語「治療(treating或treatment)」係指諸如哺乳動物 (尤其為人類)等患者之疾病或醫學病狀(例如高血壓)之治療，其包含下列各項中之一或多者：(a)預防發生該疾病或醫學病狀，亦即預防該疾病或醫學病狀復發或預防性治療易患該疾病或醫學病狀之患者；(b)改善該疾病或醫學病狀，亦即消除患者之該疾病或醫學病狀或使其消退；(c)阻抑該疾病或醫學病狀，亦即減緩或阻止患者之該疾病或醫學病狀之發展；或(d)緩解患者之該疾病或醫學病狀之症狀。舉例而言，術語「治療高血壓」可包含防止高血壓發生、改善高血壓、阻抑高血壓及減輕高血壓之症狀(例如降低血壓)。術語「個體」或「患者」意欲包含彼等需要治療或疾病預防或當前為了特定疾病或醫學病狀之疾病預防或治療正在進行治療之哺乳動物(例如人類)，以及在分析中評估或使用結晶化合物之測試個體(例如動物模型)。

本文所用之所有其他術語皆意欲具有其彼等熟習此項技術者所理解之一般含義。

一般合成程序

本發明化合物1及其結晶非溶劑化形式可自易於獲得之起始材料來合成，如下文及實例中所闡述。應瞭解，儘管給出了典型或較佳製程條件(亦即反應溫度、時間、反應物之莫耳比、溶劑、壓力等)，但除非另外陳述，否則亦可使用其他製程條件。應瞭解，儘管給出了具體製程條件(亦即結晶溫度、時間、反應物之莫耳比、溶劑、壓力等)，但除非另外闡述，否則亦可使用其他製程條件。在一些情況下，在室溫下實施反應或結晶且不實施實際溫度量測。應理解，室溫意指在通常與實驗室環境中之環境溫度有關之範圍內之溫度，且通常在約15℃至約30℃範圍內(例如約20℃至約25℃)。在其他情況下，在室溫下實施反應或結晶且實際量測及記錄溫度。

在本發明方法中所闡述之任何莫耳比可易於藉由彼等熟習此項技術者可獲知之各種方法來測定。舉例而言，可易於藉由¹H NMR來測定該等莫耳比。另一選擇為，可使用元素分析及HPLC方法來測定莫耳比。

在一實施例中，本發明係關於(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(1)或其醫藥上可接受之鹽。

在另一實施例中，可藉由使(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯與2-甲基噁唑-2-甲酸進行偶合以得到化合物1來製備化合物1。

在另一實施例中，可藉由以下方式來製備化合物1：(a)在N,N-二甲基甲醯胺(DMF)中組合2-甲基噁唑-2-甲酸及六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲鎓(HATU)並在室溫下攪拌；(b)添加(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯及N,N-二異丙基乙胺並在室溫下攪拌；(c)分離且然後將所得固體溶於無水乙醇及無水四氫呋喃中；(d)添加氫氧化鋰水溶液；及(e)分離所得固體以得到化合物1。亦可藉由層析純化先前步驟(c)及(e)中之所得固體。

通常在適宜惰性稀釋劑中來製備結晶型，惰性稀釋劑之實例包含但不限於丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲基乙基酮、甲醇、乙醇、異丙醇、異丁醇、二氯甲烷、甲基第三丁基醚、環戊基甲醚、己烷及諸如此類及其混合物且視情況含有水。惰性稀釋劑混合物(亦稱為溶劑系統)包含丙酮與水、乙腈與水、乙醇與乙酸乙酯、乙酸乙酯與己烷及低碳數醇(C_1-6烷基-OH)與水(例如甲醇與水及異丙醇與水)。尤其適宜溶劑系統包含乙酸乙酯及己烷。在結晶完成後，可藉由諸如沈澱、過濾、濃縮、離心、在真空中乾燥及諸如此類等任一習用方式自反應混合物分離結晶化合物。

在一實施例中，本發明係關於(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸之結晶型。在另一實施例中，結晶型係(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸之非溶劑化晶體形式(1’)。

在另一實施例中，可藉由以下方式來製備結晶型(1’)：(a)將(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(1)溶於乙酸乙酯及己烷中直至完全溶解；及(b)分離所得固體以得到結晶型(1’)。通常在室溫下實施步驟(a)。

在另一實施例中，可藉由以下方式來製備結晶型(1’)：(a)使(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯與5-甲基噁唑-2-甲酸鈉進行偶合以得到(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸；(b)使用乙酸乙酯及己烷處理(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸直至完全溶解；及(c)分離所得固體以得到結晶型(1’)。

結晶性質

如在粉末x射線繞射(PXRD)分析領域中所熟知，PXRD圖案之相對峰高度取決於與試樣製備及儀器幾何形狀有關之許多因素，而峰位置對實驗細節相對不敏感。如本文中所闡述來實施PXRD、差示掃描量熱法(DSC)、熱重分析(TGA)及動態水分吸附(DMS)評價(亦稱為水分吸附-解吸分析)。

在另一態樣中，本發明係關於呈結晶型之(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基-噁唑-2-羰基)胺基]戊酸。在另一實施例中，結晶型係非溶劑化的(1’)且其特徵在於峰位置實質上符合彼等展示於圖1中者之PXRD圖案。圖1中使用虛線之插圖展示y-放大圖案以突出顯示具有較低強度之峰。

相對強度大於面積1%之峰列示於下表中。此圖案展示在5-35° 2θ範圍內之尖銳繞射峰。可使用繞射圖中之該等及其他峰來鑑別此形式。

因此，在一實施例中，結晶型1’之特徵在於在8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、21.15±0.20及25.41±0.20之2θ值處包括繞射峰之PXRD圖案。

在另一實施例中，結晶型1’之特徵在於在7.51±0.20、8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、17.62±0.20、17.87±0.20、20.59±0.20、21.15±0.20、21.88±0.20、24.45±0.20、24.78±0.20、25.41±0.20、25.67±0.20、27.67±0.20及28.22±0.20之2θ值處包括繞射峰之PXRD圖案。

在另一實施例中，結晶型1’之特徵進一步在於在選自16.09±0.20、18.70±0.20、19.21±0.20、19.40±0.20、21.64±0.20、22.25±0.20、26.43±0.20、28.55±0.20、30.73±0.20、31.10±0.20、32.64±0.20、33.14±0.20及34.46±0.20之2θ值處具有一或多個其他繞射峰；且在又一實施例中，結晶化合物之特徵進一步在於具有三個或更多個該等其他繞射峰。

在一實施例中，結晶型1’之特徵在於實質上符合圖2中所展示之DSC熱分析圖或差示掃描量熱法跡線。結晶型1’之特徵在於在10℃/分鐘之加熱速率下記錄之差示掃描量熱法跡線，其在介於約165℃與169℃之間之溫度下展示最大吸熱熱流。DSC熱分析圖或差示掃描量熱法跡線圖解說明熔融吸熱，其在約167.1℃處具有峰，於165.2℃處開始，且具有相當於114J/g之吸熱曲線下面積。化合物之分解與熔融一致且並未確定114J/g對於熔融焓之貢獻。

在一實施例中，結晶型1’之特徵在於圖3中之TGA特徵圖。此特徵圖展示直至約150℃並無質量損失；結晶化合物在熔融之後分解，如藉由在始於大約159℃處出現之顯著重量損失所看到。

在一實施例中，結晶型1’之特徵在於圖4中之DMS等溫線。此形式係非吸濕性固體。在暴露於5-70%相對濕度時，總水分增加觀察小於0.025重量%。在暴露於5-90%相對濕度時，總水分增加小於0.235重量%。發現在兩個連續吸附-解吸循環之間並無顯著滯後。在吸附-解吸循環之後所獲得之固體展示與起始材料相同之PXRD圖案，從而指示在此實驗之後形式並無變化。

結晶型1’之特徵可在於圖5中之PLM影像，其展示此形式為結晶、雙折射且具有細針至細條型顆粒。

效用

個體中之藥物行為之活體外至活體內外推持續改良(例如參見Chiba等人，AAPS J.,2009年6月；11(2)：262-276)。在本發明中，評價活體外人類腎胰島素殘基溶酶抑制劑活性(分析1)以測定化合物1之腎胰島素殘基溶酶抑制活性。符合pK_i 9.0之臨限值。然而，另外實施其他活體內實驗以更精確地預測化合物1在個體中之行為。

就活體內行為而言，存在若干可用於評估是否將足夠量之藥物遞送至血漿以達成所需治療益處之性質，例如所測試所有物種中之低血漿清除、高口服生物利用度、環單磷酸鳥苷(cGMP)反應之有益強化及用於彼等具有受損腎功能之個體之低腎清除。

對於本發明而言，在大鼠及狗物種中實施口服及靜脈內藥物動力學研究以測定化合物1與其他腎胰島素殘基溶酶抑制劑相比之口服生物利用度(分析2)。此分析亦用於測定該等化合物之血漿清除率；據信，在並未鑑別所涉及之個體消除過程下，低清除率可預測化合物預計保留於循環中之時間(亦即其活體內穩定性及持久性)。另外，對猴物種中之口服生物利用度及血漿清除率實施分析(分析4)。

在大鼠中實施藥物動力學/藥效學研究以測定使用化合物1獲得之腎胰島素殘基溶酶抑制劑與其他腎胰島素殘基溶酶抑制劑相比之含量(分析3)。在此分析中，量測環單磷酸鳥苷(cGMP)之含量。cGMP係利鈉肽受體結合之下游效應分子且由此用作利鈉肽活性之有效活體內生物標記。與安慰劑相比，在向動物投與腎胰島素殘基溶酶抑制劑時，cGMP含量有所增加。本發明之一實施例係關於增加患有高血壓、心力衰竭或腎病之個體中之心房利鈉肽(ANP)或cGMP基礎含量之方法，其包括向個體投與治療有效量之化合物1或其結晶型。在個體中之尿液或血漿或二者中量測ANP及cGMP之含量。在另一實施例中，在投與治療有效量之化合物1或其結晶型時，個體中之ANP或cGMP之含量升高至少1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、3倍、4倍或5倍。

化合物1抑制NEP酶，且由此預計可用於治療及/或預防對NEP抑制具有反應之醫學病狀。因此，預計可藉由投與治療有效量之化合物1來治療患有藉由抑制NEP酶或藉由增加其肽受質之含量來治療之疾病或病症的患者。舉例而言，藉由抑制NEP，化合物1預計會強化由NEP代謝之內源性肽(例如利鈉肽、鈴蟾肽、緩激肽、降鈣素、內皮素、腦啡肽、神經降壓肽、P物質及血管活性腸肽)之生物效應。因此，預計此化合物具有其他生理學作用，例如對腎、中樞神經、生殖系統及胃腸道系統之作用。

藉由各種消除過程(其通常分類為分泌及生物轉變)將藥物自個體身體去除。分泌涉及主要藉由腎(renal、kidney)至膀胱至尿液路徑去除完整非揮發性藥物，而其他分泌路徑包含膽汁(肝)、汗液、唾液、乳液(經由哺乳)或其他體液。揮發性藥物(例如醇及氣態麻醉劑)係經由肺排泄至呼出氣中。另一態樣，生物轉變或藥物代謝涉及以化學方式在身體中轉化成代謝物之藥物且通常係酶過程。例外係在藥物以化學方式發生非酶變化時，例如酯水解。涉及藥物生物轉變之酶主要位於肝中。其他組織(例如腎、肺、小腸及皮膚)亦含有代謝酶。

亦可使用藥物動力學研究來探究個體中之消除路徑，例如經由隨時間變化排泄尿液中之所投與藥物來進行腎清除。實施化合物1在大鼠、狗及猴物種中之腎排泄以評價作為消除路徑之腎排泄(分析5)。此消除路徑對於腎功能受損且需要藉由腎排泄最小程度地清除之療法之個體較為重要。在一實施例中，在24小時內，化合物1或其結晶型在個體中之腎排泄大約15%、10%、5%、3%、2%、1%或0.5%之所投與劑量。

如下文之分析部分中所闡述，在活體外NEP酶分析及多個動物物種中之血漿清除、口服生物利用度及腎排泄之活體內測定中，包含化合物1以及具有類似化學結構之對比化合物。令人驚訝的是，觀察到結果之顯著差異。儘管個別對比化合物在一或多種分析中展現類似於化合物1之彼等性質之性質，但僅化合物1同時展現人類腎胰島素殘基溶酶之高抑制活性、高口服生物利用度、低血漿清除、增加之cGMP強化及低腎排泄，此預計尤其可用於治療疾病。

心血管疾病

藉由強化血管作用肽(例如利鈉肽及緩激肽)之效應，化合物1預計可用於治療及/或預防諸如心血管疾病等醫學病狀。例如參見Roques等人(1993)Pharmacol.Rev.45：87-146及Dempsey等人(2009)Amer.J.of Pathology 174(3)：782-796。尤其關注之心血管疾病包含高血壓及心力衰竭。高血壓包含(以說明的方式而非限制)：原發性高血壓，其亦稱為本質性高血壓或特發性高血壓；繼發性高血壓；具有伴隨腎病之高血壓；具有或不具有伴隨腎病之嚴重高血壓；肺高血壓，包含肺動脈高血壓；及頑固性高血壓。心力衰竭包含(以說明的方式而非限制)：鬱血性心力衰竭；急性心力衰竭；慢性心力衰竭，例如具有減小之左心室射血分數者(亦稱為收縮性心力衰竭)或具有正常左心室射血分數者(亦稱為舒張性心力衰竭)；以及急性及慢性失代償性心力衰竭。因此，本發明之一實施例係關於治療高血壓、尤其原發性高血壓或肺動脈高血壓之方法，其包括向患者投與治療有效量之化合物1。

為治療原發性高血壓，治療有效量通常係足以降低患者血壓之量。此包含輕度至中等高血壓及嚴重高血壓。在用於治療高血壓時，化合物1可與諸如以下等其他治療劑組合投與：醛固酮拮抗劑、醛固酮合酶抑制劑、血管收縮肽轉化酶抑制劑及雙重作用血管收縮肽轉化酶/腎胰島素殘基溶酶抑制劑、血管收縮肽轉化酶2(ACE2)活化劑及刺激劑、血管收縮肽-II疫苗、抗糖尿病劑、抗脂質劑、抗血栓劑、AT₁受體拮抗劑及雙重作用AT₁受體拮抗劑/腎胰島素殘基溶酶抑制劑、β₁-腎上腺素能受體拮抗劑、雙重作用β-腎上腺素能受體拮抗劑/α₁-受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑、內皮素受體拮抗劑、內皮素轉化酶抑制劑、腎胰島素殘基溶酶抑制劑、利鈉肽及其類似物、利鈉肽清除受體拮抗劑、一氧化氮供體、非類固醇抗發炎劑、磷酸二酯酶抑制劑(具體而言係PDE-V抑制劑)、前列腺素受體激動劑、腎素抑制劑、可溶性鳥苷酸環化酶刺激劑及活化劑及其組合。在本發明之一特定實施例中，將本發明化合物與AT₁受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑或其組合進行組合，且用於治療原發性高血壓。在本發明之另一特定實施例中，將本發明化合物與AT₁受體拮抗劑進行組合，且用於治療具有伴隨腎病之高血壓。在用於治療頑固性高血壓時，化合物可與其他治療劑(例如醛固酮合酶抑制劑)組合投與。

為治療肺動脈高血壓，治療有效量通常係足以降低肺血管抗性之量。療法之其他目標係改良患者之運動能力。舉例而言，在臨床設置中，治療有效量可為改良患者自由行走6分鐘時段(涵蓋大約20-40米之距離)之能力之量。在用於治療肺動脈高血壓時，化合物可與其他治療劑(例如α-腎上腺素能受體拮抗劑、β₁-腎上腺素能受體拮抗劑、β₂-腎上腺素能受體激動劑、血管收縮肽轉化酶抑制劑、抗凝劑、鈣通道阻斷劑、利尿劑、內皮素受體拮抗劑、PDE-V抑制劑、前列腺素類似物、選擇性血清素再攝取抑制劑及其組合)組合投與。在本發明之一特定實施例中，將本發明化合物與PDE-V抑制劑或選擇性血清素再攝取抑制劑進行組合且用於治療肺動脈高血壓。

本發明之另一實施例係關於治療心力衰竭、尤其鬱血性心力衰竭(包含收縮性及舒張性鬱血性心力衰竭)之方法，其包括向患者投與治療有效量之化合物1。通常，治療有效量係足以降低血壓及/或改良腎功能之量。在臨床設置中，治療有效量可為足以改良心臟血液動力學(例如減小楔壓、右心房壓、充盈壓及血管抗性)之量。在一實施例中，化合物係作為靜脈內劑型投與。在用於治療心力衰竭時，化合物1可與諸如以下等其他治療劑組合投與：腺苷受體拮抗劑、晚期糖基化終產物清除劑、醛固酮拮抗劑、AT₁受體拮抗劑、β₁-腎上腺素能受體拮抗劑、雙重作用β-腎上腺素能受體拮抗劑/α₁-受體拮抗劑、凝乳酶抑制劑、地高辛(digoxin)、利尿劑、內皮素轉化酶(ECE)抑制劑、內皮素受體拮抗劑、利鈉肽及其類似物、利鈉肽清除受體拮抗劑、一氧化氮供體、前列腺素類似物、PDE-V抑制劑、可溶性鳥苷酸環化酶活化劑及刺激劑及加壓素受體拮抗劑。在本發明之一特定實施例中，將化合物1與醛固酮拮抗劑、β₁-腎上腺素能受體拮抗劑、AT₁受體拮抗劑或利尿劑進行組合，且用於治療鬱血性心力衰竭。

腹瀉

作為NEP抑制劑，化合物1預計會抑制內源性腦啡肽之降解且由此該等化合物亦可用於治療腹瀉(包含感染性及分泌性/水樣腹瀉)。例如參見Baumer等人(1992)Gut 33：753-758；Farthing(2006)Digestive Diseases 24：47-58；及Marçais-Collado(1987)Eur.J.Pharmacol.144(2)：125-132。在用於治療腹瀉時，化合物1可與一或多種其他抗腹瀉劑進行組合。

腎病

藉由強化血管作用肽(例如利鈉肽及緩激肽)之效應，化合物1預計會增強腎功能(參見Chen等人(1999)Circulation 100：2443-2448；Lipkin等人(1997)Kidney Int.52：792-801；及Dussaule等人(1993)Clin.Sci.84：31-39)且可用於治療及/或預防腎受損個體之腎病。尤其關注之腎病包含糖尿病性腎病變、慢性腎病、蛋白尿及尤其急性腎損傷(例如由心血管手術、化學療法或在醫學成像中使用對比染料引起)或急性腎衰竭(參見Sharkovska等人(2011)Clin.Lab.57：507-515及Newaz等人(2010)腎Failure 32：384-390)。

患有慢性腎病(CKD)之腎受損個體可根據National Kidney Foundation Kidney Disease Outcomes Quality Initiative(NKF KDOQI)導則進行分類。在確立慢性腎病後(亦即腎損害或腎小球濾過率(GFR)<60mL/min/1.73m² 3個月)，可根據KDOQI CKD分類來分配疾病階段。該等階段包含階段1(具有正常或增加之GFR之腎損害)：GFR90；階段2(具有輕度降低之GFR之腎損害)：GFR 60-89；階段3(中等降低之GFR)：GFR 30-59；階段4(嚴重降低之GFR)：GFR 15-29；及階段5(腎衰竭)：GFR<15(或透析)。GFR係以mL/min/1.73m²之單位來定義。

一實施例包含治療腎受損個體之方法，其包括投與治療有效量之化合物1或其結晶型、具體而言結晶型1’。此方法進一步包含治療患有高血壓或心力衰竭之腎受損個體。在用於治療腎病時，化合物1或其結晶型、具體而言結晶型1’可與其他治療劑(例如血管收縮肽轉化酶抑制劑、AT₁受體拮抗劑及利尿劑)組合投與。

另一實施例包含治療患有估計腎小球濾過率(eGFR)介於60mL/min/1.73m²與15mL/min/1.73m²之間之慢性腎病之腎受損個體之方法，其包括向患者投與治療有效量之化合物1或其結晶型、具體而言結晶型1’。另一實施例包含治療患有估計腎小球濾過率(eGFR)90 mL/min/1.73m²(階段1)或eGFR<15mL/min/1.73m²(階段5)之慢性腎病之腎受損個體之方法，其包括向患者投與治療有效量之化合物1或其結晶型、具體而言結晶型1’。出於本發明目的，嚴重腎病可分類為eGFR<30mL/min/1.73m²。在另一實施例中，包含使用化合物1或其結晶型、具體而言結晶型1’治療患有分類為階段1、階段2、階段3、階段4、階段5或eGFR範圍涵蓋該等階段中之一或多者之慢性腎病之腎受損個體的方法。

預防性療法

藉由強化利鈉肽之效應，因利鈉肽之抗肥大及抗纖維變性效應(參見Potter等人(2009)Handbook of Experimental Pharmacology 191：341-366)，化合物1亦預計可用於預防性療法中，例如用於預防心肌梗塞之後之心功能不全之進展、預防血管成形術之後中之動脈再狹窄、預防血管操作之後之血管壁增厚、預防動脈粥樣硬化及預防糖尿病性血管病。

青光眼

藉由強化利鈉肽之效應，化合物1預計可用於治療青光眼。例如參見Diestelhorst等人(1989)International Ophthalmology 12：99-101。在用於治療青光眼時，化合物1可與一或多種其他抗青光眼劑進行組合。

疼痛緩解

作為NEP抑制劑，化合物1預計會抑制內源性腦啡肽之降解且由此該化合物亦可用作鎮痛劑。例如參見Roques等人(1980)Nature 288：286-288及Thanawala等人(2008)Current Drug Targets 9：887-894。在用於治療疼痛時，化合物1可與一或多種其他鎮痛藥(例如胺基肽酶N或二肽基肽酶III抑制劑、非類固醇抗發炎劑、單胺再攝取抑制劑、肌肉鬆弛劑、NMDA受體拮抗劑、類鴉片受體激動劑、5-HT_1D血清素受體激動劑及三環抗抑鬱劑)進行組合。

其他效用

因NEP抑制性質，化合物1亦預計可用作鎮咳劑且可用於治療與肝硬化有關之門靜脈高血壓(參見Sansoe等人(2005)J.Hepatol.43：791-798)、癌症(參見Vesely(2005)J.Investigative Med.53：360-365)、抑鬱症(參見Noble等人(2007)Exp.Opin.Ther.Targets 11：145-159)、月經病症、未足月產、子癎前症、子宮內膜異位症、生殖性病症(例如男性及女性不育、多囊性卵巢症候群、植入失敗)及男性及女性性功能障礙(包含男性勃起功能障礙及女性性興奮障礙)。更特定而言，化合物1預計可用於治療女性性功能障礙(參見Pryde等人(2006)J.Med.Chem.49：4409-4424)，該疾病通常定義為女性患者難以或不能在性表現中獲得滿足。此涵蓋各種各樣之女性性機能障礙，包含(以說明的方式而非限制)機能減退之性欲障礙、性喚起障礙、情欲障礙及性交疼痛障礙。在用於治療該等病症、尤其女性性功能障礙時，本發明化合物可與一或多種下列二級藥劑進行組合：PDE-V抑制劑、多巴胺激動劑、雌激素受體激動劑及/或拮抗劑、雄激素及雌激素。因NEP抑制性質，化合物1亦預計具有抗發炎性性質，且預計具有該效用，尤其在與他汀類藥物組合使用時。

最新研究表明，NEP在調控胰島素缺陷糖尿病及飲食誘導性肥胖症中之神經功能發揮一定作用。Coppey等人(2011)Neuropharmacology 60：259-266。因此，因NEP抑制性質，化合物1亦預計可用於防衛由糖尿病或飲食誘導性肥胖症引起之神經缺損。

每一劑量投與之化合物1之量或每天投與之總量可預先確定或可基於個別患者藉由考慮多個因素來確定，該等因素包含：患者病狀之性質及嚴重程度、所治療病狀、患者之年齡、體重及總體健康狀況、患者對活性劑之耐受性、投與途徑、藥理學因素(例如所投與化合物及任一二級藥劑之活性、效能、藥物代謝動力學及毒理學特徵)及諸如此類。對患有疾病或醫學病狀(例如高血壓)之患者之治療可以預定劑量或治療醫師所確定之劑量開始，且持續需要之時間段以預防、改善、阻抑或減輕該疾病或醫學病狀之症狀。通常定期監測進行該治療之患者以測定療法之有效性。舉例而言，在治療高血壓中，可利用血壓量測來測定治療之有效性。本文所闡述之其他疾病及病狀之類似指標已熟知且治療醫師可容易地得到。由醫師連續監測將確保在任一給定時間投與最佳量之化合物1以及促進治療持續時間之確定。這在亦投與二級藥劑時特別重要，因為二級藥劑之選擇、劑量及療法持續時間亦需要調整。以這種方式，可在療程期間調整治療方案及投藥計劃，從而可投與表現期望有效性之最低量之活性劑，並且另外使得投與可僅持續成功治療疾病或醫學病狀所需之時間長度。

化合物1亦可用作可用於製備化合物1之結晶型(包含(例如)結晶型1’)之中間體。

研究工具

因化合物1擁有NEP酶抑制活性，故其亦可用作研究工具來探究或研究具有NEP酶之生物系統或試樣，例如用以研究NEP酶或其肽受質發揮一定作用之疾病。具有NEP酶之任何適宜生物系統或試樣皆可用於該等可在活體外或活體內實施之研究中。適用於該等研究之代表性生物系統或試樣包含但不限於細胞、細胞提取物、質膜、組織試樣、分離之器官、哺乳動物(例如小鼠、大鼠、天竺鼠、兔、狗、豬、人類等)及諸如此類，其中哺乳動物尤其令人感興趣。在本發明之一特定實施例中，藉由投與NEP-抑制量之化合物1來抑制哺乳動物中之NEP酵活性。

在用作研究工具時，通常使包括NEP酶之生物系統或試樣與NEP酶抑制量之化合物1接觸。在將生物系統或試樣暴露於化合物之後，使用習用程序及設備(例如藉由在結合分析中量測受體結合或在功能分析中量測配體調介之變化)測定抑制NEP酶之效應。暴露涵蓋使細胞或組織與該化合物接觸、將該化合物投與哺乳動物(例如藉由腹膜腔內、經口、靜脈內或經皮下投與)等等。此測定步驟可涉及量測反應(定量分析)或可涉及觀察(定性分析)。量測反應涉及(例如)使用習用程序及設備測定該化合物對生物系統或試樣之效應(例如酶活性分析)及在功能分析中量測酶受質或產物調介之變化。可使用分析結果來確定活性程度以及達成期望結果所需化合物之量(亦即NEP酵抑制量)。通常，測定步驟涉及測定抑制NEP酶之效應。

另外，化合物1可用作用於評估其他化學化合物之研究工具，且由此亦可用於篩選分析中以尋找(例如)具有NEP抑制活性之新化合物。以此方式，化合物1可在分析中用作標樣以比較使用測試化合物及使用化合物1所獲得之結果以鑑別彼等具有大致相當或更佳活性之測試化合物(若存在)。舉例而言，比較測試化合物或測試化合物組之PK_i數據與化合物1之pK_i數據以鑑別彼等具有期望性質之測試化合物(例如pK_i值等於或優於本發明化合物之測試化合物)。本發明之此態樣包含(作為單獨實施例)產生比較數據(使用適當分析)並分析測試數據二者以鑑別出令人感興趣之測試化合物。因此，測試化合物可在生物分析中藉由包括下列步驟之方法予以評估：(a)使用測試化合物實施生物分析以提供第一分析值；(b)使用化合物1實施生物分析以提供第二分析值；其中步驟(a)係在步驟(b)之前、之後或與步驟(b)同時實施；及(c)比較來自步驟(a)之第一分析值與來自步驟(b)之第二分析值。實例性生物分析包含NEP酶抑制分析。

本發明之再一態樣係關於研究包括NEP酶之生物系統或試樣之方法，該方法包括：(a)使生物系統或試樣與化合物1接觸；及(b)測定由化合物對生物系統或試樣引起之效應。

醫藥組合物及調配物

通常化合物1係以醫藥組合物或調配物之形式投與患者。該等醫藥組合物可藉由任何可接受之投與途徑投予患者，該投與途徑包含但不限於口服、直腸、陰道、鼻、吸入、局部(包含經皮)、經眼睛及非經腸投與模式。另外，化合物1可(例如)以每天多個劑量(例如每天兩次、三次或四次)、每天單個劑量或每週單個劑量經口投與。應理解，適用於特定投與模式之任一形式之化合物1(亦即游離鹼、游離酸、醫藥上可接受之鹽、溶劑合物等)皆可用於本文所論述之醫藥組合物中。

因此，在一實施例中，本發明係關於包括醫藥上可接受之載劑及化合物1之醫藥組合物。若有需要，則該組合物可含有其他治療劑及/或調配劑。在論述組合物時，「化合物1」在本文中亦可稱為「活性劑」，以便將其與調配物中之其他組份(例如載劑)區別開。因此，應理解，術語「活性劑」包含化合物1以及其醫藥上可接受之鹽。

本發明之醫藥組合物通常含有治療有效量之化合物1。然而，熟習此項技術者將認識到，醫藥組合物可含有大於治療有效量(例如在本體組合物中)或小於治療有效量(亦即經設計用於多次投與以達成治療有效量之個別單位劑量)之化合物。通常，該組合物含有約0.01wt%至95wt%之活性劑(包含約0.01wt%至30wt%，例如約0.01wt%至10wt%)，其中實際量視調配物本身、投與途徑、投藥頻率等而定。在一實施例中，適用於口服劑型之組合物可含有(例如)約5-70wt%或約10-60wt%之活性劑。

在本發明之醫藥組合物中可使用任一習用載劑或賦形劑。特定載劑或賦形劑或載劑或賦形劑組合之選擇將取決於用於治療特定患者之投與模式或醫學病狀之類型或疾病狀態。就此而言，用於特定投與模式之適宜組合物之製備為製藥領域技術人員所熟知。另外，用於該等組合物之載劑或賦形劑市面有售。出於進一步闡釋之目的，習用調配技術闡述於Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第20版，Lippincott Williams & White,Baltimore,Maryland(2000)；及H.C.Ansel等人，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems，第7版，Lippincott Williams & White,Baltimore,Maryland(1999)中。

可用作醫藥上可接受之載劑之材料之代表性實例包含但不限於下列物質：糖，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，例如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素(例如微晶纖維素)及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；脂肪酸鹽，例如硬脂酸鎂；粉狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石粉；賦形劑，例如可可油及栓劑蠟；油，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯及月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，例如氫氧化鎂及氫氧化鋁；海藻酸；無致熱源水；等滲鹽水；林格氏溶液(Ringer's solution)；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；經壓縮之推進劑氣體，例如氯氟碳化合物及氫氟碳化合物；及其他用於醫藥組合物之無毒相容性物質。

在本發明之一實施例中，醫藥上可接受之載劑係硬脂酸鎂。舉例而言，醫藥組合物可包括化合物1或結晶型1’及硬脂酸鎂，其中化合物1或結晶型1’對硬脂酸鎂之比率為約3：1至約10：1。化合物1或結晶型1’對硬脂酸鎂之其他比率包含但不限於1：1、5：1、15：1、20：1、25：1、30：1及50：1。

醫藥組合物通常係藉由將活性劑與醫藥上可接受之載劑及一或多種可選成分徹底充分混合或摻和來製備。隨後可使用習用程序及設備將所得均勻摻和之混合物製成錠劑、膠囊、丸劑等或裝填至藥罐、藥筒、分配器及諸如此類中。

在一實施例中，醫藥組合物適於經口投與。適用於經口投與之組合物可呈以下形式：膠囊、錠劑、丸劑、菱形錠劑、扁囊劑、糖衣片、粉劑、顆粒劑；存於水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；水包油或油包水液體乳液；酏劑或糖漿；及諸如此類；其各自含有預定量之活性劑。

在意欲以固體劑型(膠囊、錠劑、丸劑及諸如此類)經口投與時，該組合物通常會包括活性劑及一或多種醫藥上可接受之載劑(例如檸檬酸鈉、磷酸二鈣或硬脂酸鎂)。固體劑型亦可包括：填充劑或增量劑，例如澱粉、微晶纖維素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及/或矽酸；黏合劑，例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯啶酮、蔗糖及/或阿拉伯膠；保濕劑，例如甘油；崩解劑，例如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸、某些矽酸鹽及/或碳酸鈉；溶液阻滯劑，例如石蠟；促吸收劑，例如四級銨化合物；潤濕劑，例如鯨蠟醇及/或甘油單硬脂酸酯；吸收劑，例如高嶺土及/或膨潤土；潤滑劑，例如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及/或其混合物；著色劑；及緩衝劑。出於本發明目的，術語「醫藥上可接受之載劑」包含諸如以下等上文所闡述之所有術語：載劑、填充劑或增量劑、黏合劑、保濕劑、緩溶劑、潤濕劑、吸收劑、潤滑劑、著色劑及緩衝劑。

醫藥組合物中亦可存在離型劑、潤濕劑、塗覆劑、甜味劑、矯味劑及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑。用於錠劑、膠囊、丸劑及諸如此類之實例性塗覆劑包含彼等用於腸溶包衣者，例如乙酸鄰苯二甲酸纖維素、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、乙酸偏苯三酸纖維素、羧甲基乙基纖維素、乙酸琥珀酸羥丙基甲基纖維素及諸如此類。醫藥上可接受之抗氧化劑之實例包含：水溶性抗氧化劑，例如抗壞血酸、氫氯酸半胱胺酸、硫酸氫鈉、偏亞硫酸鈉、亞硫酸鈉及諸如此類；油溶性抗氧化劑，例如棕櫚酸抗壞血酸酯、丁基化羥基苯甲醚、丁基化羥基甲苯、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚及諸如此類；及金屬螯合劑，例如檸檬酸、乙二胺四乙酸、山梨醇、酒石酸、磷酸及諸如此類。

組合物亦可使用(例如)各種比例之羥丙基甲基纖維素或其他聚合物基質、脂質體及/或微球體來調配，以緩慢釋放或受控釋放活性劑。另外，本發明之醫藥組合物可含有遮光劑且可經調配以使得可視情況以延遲方式僅(或優先地)在胃腸道中之某一部分釋放活性劑。可使用包埋組合物之實例包含聚合物質及蠟。活性劑亦可呈視情況具有一或多種上述賦形劑之微膠囊形式。

本發明之一實施例包含含有存於膠囊、錠劑、液體或懸浮液中之化合物1或結晶型1’之口服劑型。本發明之另一實施例係關於口服劑型，其中化合物1或結晶型1’在個體中之釋放係立即、受控或延遲釋放。若使用膠囊作為口服劑型，則另一實施例包含含有明膠、多醣或合成聚合物之膠囊。在具體實施例中，膠囊包括羥丙基甲基纖維素。

本發明之適宜膠囊材料係選自明膠、纖維素衍生物、澱粉、澱粉衍生物、幾丁聚醣及合成塑膠。若使用明膠作為膠囊材料，則其可與選自聚乙二醇(PEG)、甘油、山梨醇、聚丙二醇、PEO-PPO嵌段共聚物及其他聚醇及聚醚之其他添加劑混合使用。在使用纖維素衍生物作為膠囊材料時，羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、甲基纖維素、羥甲基纖維素及羥乙基纖維素係較佳聚合物。若使用合成塑膠作為膠囊材料，則聚乙烯、聚碳酸酯、聚酯、聚丙烯及聚對苯二甲酸乙二酯係較佳材料。尤佳者係聚乙烯、聚碳酸酯或聚對苯二甲酸乙二酯。

適用於經口投與之液體劑型包含(例如)醫藥上可接受之乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。液體劑型通常包括活性劑及惰性稀釋劑，例如水或其他溶劑、增溶劑及乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇及山梨醇酐脂肪酸酯及其混合物。懸浮液可含有懸浮劑，例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇及山梨醇酐酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂及黃蓍膠及其混合物。

在意欲用於經口投與時，本發明之醫藥組合物可以單位劑型進行包裝。術語「單位劑型」係指適用於投與患者之物理離散單位，亦即，每一單元含有經計算可單獨或與一或多種額外單元組合產生期望治療效應之預定量之活性劑。舉例而言，該等單位劑型可為膠囊、錠劑、丸劑及諸如此類。

在另一實施例中，本發明組合物適於吸入投與且通常可呈氣溶膠或粉劑形式。該等組合物通常使用諸如霧化器、乾粉吸入器或定量吸入器等熟知遞送裝置來投與。霧化裝置產生高速空氣流，其使組合物以霧氣形式噴霧輸送至患者之呼吸道中。實例性霧化調配物所包括活性劑溶於載劑中以形成溶液，或經微粉化並與載劑組合以形成具有可吸入大小之微粉化顆粒懸浮液。乾粉吸入器以自由流動性粉劑形式投與活性劑，該自由流動粉劑在吸氣期間分散於患者之氣流中。實例性乾粉調配物包括與諸如乳糖、澱粉、甘露醇、右旋糖、聚乳酸、聚丙交酯-共-乙交酯及其組合等賦形劑乾燥摻和之活性劑。定量吸入器使用壓縮推進氣體排放經量測量之活性劑。實例性定量調配物包括活性劑存於諸如氟氯化碳或氫氟烷等液化推進劑中之溶液或懸浮液。該等調配物之可選組份包含共溶劑(例如乙醇或戊烷)及表面活性劑(例如山梨醇酐三油酸酯、油酸、卵磷脂、甘油及月桂基硫酸鈉)。該等組合物通常係藉由將冷凍或加壓氫氟烷添加至含有活性劑、乙醇(若存在)及表面活性劑(若存在)之適宜容器中來製備。將活性劑微粉化並隨後與推進劑組合以製備懸浮液。另一選擇為，懸浮液調配物可藉由在活性劑之微粉化顆粒上噴霧乾燥表面活性劑塗層來製備。隨後將調配物裝填至氣溶膠藥罐中，該藥罐形成吸入器之一部分。

化合物1及其組合物亦可非經腸投與(例如藉由皮下、靜脈內、肌內或腹膜腔內注射)。在該投與中，以無菌溶液、懸浮液或乳液形式提供活性劑。用於製備該等調配物之實例性溶劑包含水、鹽水、電解質、低分子量醇(例如丙二醇及聚乙二醇)、油、胺基酸、明膠、糖、脂肪酸酯(例如油酸乙酯)及諸如此類。非經腸調配物亦可含有一或多種抗氧化劑、增溶劑、穩定劑、防腐劑、潤濕劑、乳化劑及分散劑。表面活性劑、額外穩定劑或pH-調節劑(酸、鹼或緩衝劑)及抗氧化劑尤其可用於穩定該調配物，例如最小化或避免可存在於化合物中之酯及醯胺鏈接之水解。可藉由使用無菌可注射介質、滅菌劑、過濾、輻照或加熱來使這些調配物無菌。

代表性生理學可接受之水性載劑包含(例如)無菌注射用水，USP；右旋糖注射液，USP(例如2.5、5.0、10、20%右旋糖，包含5%右旋糖注射液(D5/W))；右旋糖及氯化鈉注射液，USP(例如2.5%至10%右旋糖及0.12%(19mEq鈉)至0.9%(154mEq鈉)氯化鈉)；甘露醇注射液，USP(例如5、10、15、20及25%甘露醇)；林格氏注射液，USP(例如147mEq鈉、4mEq鉀、4.5mEq鈣及156mEq氯化物/公升)；乳酸化林格氏注射液，USP(例如2.7mEq鈣、4mEq鉀、130mEq鈉及28mEq乳酸鹽/公升)；氯化鈉注射液，USP(例如0.9%氯化鈉)及諸如此類。

在向患者投與時，通常將化合物1稀釋於約0.5mL至約10mL水性載劑/mg化合物1(例如約0.6mL/mg至約8mL/mg)中。

在一特定實施例中，該非經腸調配物包括水性環糊精溶液作為醫藥上可接受之載劑。適宜環糊精包含含有六個或更多個藉由鏈接在1,4位連接之α-D-吡喃葡萄糖單元之環狀分子，如在澱粉酶、β-環糊精或環庚直鏈澱粉中。實例性環糊精包含環糊精衍生物，例如羥丙基及磺丁基醚環糊精，例如羥丙基-β-環糊精及磺丁基醚β-環糊精。用於該等調配物之實例性緩衝劑包含基於羧酸之緩衝劑，例如檸檬酸鹽、乳酸鹽及馬來酸鹽緩衝溶液。在本發明之一實施例中，靜脈內劑型包括存於緩衝溶液中之化合物1或結晶型1’。

在一實施例中，化合物1或其醫藥組合物係凍乾粉末。通常，凍乾粉末無菌且包裝於全密封小瓶或安瓿(ampoule)或類似容器中。

化合物1亦可使用已知經皮遞送系統及賦形劑經皮投與。舉例而言，可將化合物1與滲透促進劑(例如丙二醇、聚乙二醇單月桂酸酯、氮雜環烷-2-酮及諸如此類)混合並納入至貼劑或類似遞送系統中。若期望，則可在該等經皮組合物中使用包含膠凝劑、乳化劑及緩衝劑在內之額外賦形劑。

二級藥劑

化合物1可用作疾病之唯一治療劑或可與一或多種其他治療劑進行組合以獲得期望治療效應。因此，在一實施例中，本發明之醫藥組合物含有其他與化合物1共投與之藥物。舉例而言，組合物可進一步包括一或多種藥物(亦稱為「二級藥劑」)。該等治療劑在業內已眾所周知，且包含腺苷受體拮抗劑、α-腎上腺素能受體拮抗劑、β₁-腎上腺素能受體拮抗劑、β₂-腎上腺素能受體激動劑、雙重作用β-腎上腺素能受體拮抗劑/α₁-受體拮抗劑、晚期糖基化終產物清除劑、醛固酮拮抗劑、醛固酮合酶抑制劑、膠基肽酶N抑制劑、雄激素、血管收縮肽轉化酶抑制劑及雙重作用血管收縮肽轉化酶/腎胰島素殘基溶酶抑制劑、血管收縮肽轉化酶2活化劑及刺激劑、血管收縮肽-II疫苗、抗凝劑、抗糖尿病劑、抗腹瀉劑、抗青光眼劑、抗脂質劑、鎮痛劑、抗血栓劑、AT₁受體拮抗劑及雙重作用AT₁受體拮抗劑/腎胰島素殘基溶酶抑制劑及多功能血管收縮肽受體阻斷劑、緩激肽受體拮抗劑、鈣通道阻斷劑、凝乳酶抑制劑、地高辛、利尿劑、多巴胺激動劑、內皮素轉化酶抑制劑、內皮素受體拮抗劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、雌激素、雌激素受體激動劑及/或拮抗劑、單胺再攝取抑制劑、肌肉鬆弛劑、利鈉肽及其類似物、利鈉肽清除受體拮抗劑、腎胰島素殘基溶酶抑制劑、一氧化氮供體、非類固醇抗發炎劑、N-甲基d-天冬胺酸鹽受體拮抗劑、類鴉片受體激動劑、磷酸二酯酶抑制劑、前列腺素類似物、前列腺素受體激動劑、腎素抑制劑、選擇性血清素再攝取抑制劑、鈉通道阻斷劑、可溶性鳥苷酸環化酶刺激劑及活化劑、三環抗抑鬱劑、加壓素受體拮抗劑及其組合。該等藥劑之具體實例詳述於本文中。

具體實施例包含含有化合物1或其結晶型及AT₁受體拮抗劑、血管收縮肽轉化酶抑制劑、磷酸二酯酶(PDE)抑制劑、腎素抑制劑、利尿劑或其組合及視情況一或多種醫藥上可接受之載劑之醫藥組合物。

因此，在本發明之又一態樣中，醫藥組合物包括化合物1、第二活性劑及醫藥上可接受之載劑。第三、第四等活性劑亦可納入該組合物中。在組合療法中，所投與化合物1之量以及二級藥劑之量可能小於單一療法中通常投與之量。

化合物1可與第二活性劑物理混合以形成含有兩種藥劑之組合物；或者各藥劑可存在於分開且不同之組合物中，該等組合物同時或在不同之時間投與患者。舉例而言，可使用習用程序及設備將化合物1與第二活性劑組合以形成包括化合物1及第二活性劑之活性劑組合。另外，治療劑可與醫藥上可接受之載劑組合以形成包括化合物1、第二活性劑及醫藥上可接受之載劑之醫藥組合物。在此實施例中，通常將組合物之各組份混合或摻和以產生物理混合物。然後使用本文所闡述之任一途徑以治療有效量投與物理混合物。

另一選擇為，活性劑在投與患者之前可保持分開且不同。在此實施例中，各藥劑在投與之前並未以物理方式混合在一起，而是同時或在不同時間作為分開組合物投與。該等組合物可分開包裝或可一起包裝在套組中。在以分開時間投與時，二級藥劑通常會在投與化合物1之後不足24小時時投與(在自投與化合物的同時至在投藥後約24小時之間的任意時間)。這亦可稱為依序投與。因此，可使用兩種錠劑一一種錠劑對應一種活性劑一來同時或依序經口投與化合物1與另一活性劑，其中依序可意指在投與化合物1之後立即或在一定預定時間後(例如1小時後或3小時後)投與。亦預計，二級藥劑可在投與化合物1之後超過24小時投與。另一選擇為，該組合可藉由不同投與途徑投與，亦即一種藥劑經口投與且另一藥劑藉由吸入途徑投與。

在一實施例中，套組以足以實施本發明方法之量包括含有化合物1之第一劑型及至少一種含有一或多種本文所陳述二級藥劑之額外劑型。第一劑型及第二劑型(或第三劑型等)共同包括治療有效量之活性劑以供治療或預防患者之疾病或醫學病狀。

在包含二級藥劑時，其以治療有效量存在以使得其在與化合物1共投與時通常以產生治療有益效應之量投與。第二藥劑可呈醫藥上可接受之鹽、溶劑合物、光學純立體異構體等形式。該二級藥劑亦可呈前藥形式，例如具有經酯化羧酸基團之化合物。因此，下文所列示二級藥劑意欲包含所有該等形式，且市面有售，或可使用習用程序及試劑來製備。

在一實施例中，將化合物1與腺苷受體拮抗劑(其實例包含那昔茶鹼(naxifylline)、羅咯茶鹼(rolofylline)、SLV-320、茶鹼及托那潘菲林(tonapofylline))組合投與。

在一實施例中，將化合物1與α-腎上腺素能受體拮抗劑(其實例包含多沙唑嗪(doxazosin)、哌唑嗪(prazosin)、坦洛新(tamsulosin)及特拉唑嗪(terazosin))組合投與。

化合物1亦可與β₁腎上腺素能受體拮抗劑(「β₁阻斷劑」)組合投與，β₁阻斷劑之實例包含醋丁洛爾(acebutolol)、阿普洛爾(alprenolol)、胺磺洛爾(amosulalol)、阿羅洛爾(arotinolol)、阿替洛爾(atenolol)、苯呋洛爾(befunolol)、倍他洛爾(betaxolol)、貝凡洛爾(bevantolol)、比索洛爾(bisoprolol)、波吲洛爾(bopindolol)、布新洛爾(bucindolol)、布庫洛爾(bucumolol)、布非洛爾(bufetolol)、丁呋洛爾(bufuralol)、布尼洛爾(bunitrolol)、布拉洛爾(bupranolol)、布利定(bubridine)、丁非洛爾(butofilolol)、卡拉洛爾(carazolol)、卡替洛爾(carteolol)、卡維地洛(carvedilol)、塞利洛爾(celiprolol)、塞他洛爾(cetamolol)、氯拉洛爾(cloranolol)、地來洛爾(dilevalol)、依浮洛爾(epanolol)、艾司洛爾(esmolol)、茚諾洛爾(indenolol)、拉貝洛爾(labetolol)、左布諾洛爾(levobunolol)、甲吲洛爾(mepindolol)、美替洛爾(metipranolol)、美托洛爾(metoprolol)(例如琥珀酸美托洛爾(metoprolol succinate)及酒石酸美托洛爾(metoprolol tartrate))、甲氧苯心安(moprolol)、納多洛爾(nadolol)、萘肟洛爾(nadoxolol)、奈必洛爾(nebivalol)、尼普地洛(nipradilol)、氧烯洛爾(oxprenolol)、噴布洛爾(penbutolol)、噴布洛爾(penbutolol)、吲哚洛爾(pindolol)、普拉洛爾(practolol)、丙萘洛爾(pronethalol)、普萘洛爾(propranolol)、索他洛爾(sotalol)、硫氧洛爾(sufinalol)、他林洛爾(talinolol)、特他洛爾(tertatolol)、替利洛爾(tilisolol)、噻嗎洛爾(timolol)、托利洛爾(toliprolol)、希苯洛爾(xibenolol)及其組合。在一特定實施例中，β₁拮抗劑係選自阿替洛爾、比索洛爾、美托洛爾、普萘洛爾、索他洛爾及其組合。通常，以足以提供約2-900mg/劑量之量投與β₁阻斷劑。

在一實施例中，化合物1與β₂-腎上腺素能受體激動劑(其實例包含沙丁胺醇(albuterol)、比托特羅(bitolterol)、非諾特羅(fenoterol)、福莫特羅(formoterol)、茚達特羅(indacaterol)、異他林(isoetharine)、左旋沙丁胺醇(levalbuterol)、奧西那林(metaproterenol)、吡布特羅(pirbuterol)、舒喘靈(salbutamol)、沙甲胺醇(salmefamol)、沙美特羅(salmeterol)、特布他林(terbutaline)、維蘭特羅(vilanterol)及諸如此類)組合投與。通常，以足以提供約0.05-500μg/劑量之量投與β₂-腎上腺素能受體激動劑。

在一實施例中，化合物1與晚期糖基化終產物(AGE)清除劑(其實例包含阿拉瑞姆(alagebrium)(或ALT-711)及TRC4149)組合投與。

在另一實施例中，化合物1與醛固酮拮抗劑(其實例包含依普利酮(eplerenone)、螺內酯(spironolactone)及其組合)組合投與。通常，以足以提供約5-300mg/天之量投與醛固酮拮抗劑。

在一實施例中，化合物1與胺基肽酶N或二肽基肽酶III抑制劑(其實例包含貝他定(bestatin)及PC18(2-胺基-4-甲基磺醯基丁烷硫醇、甲硫胺酸硫醇))組合投與。

化合物1亦可與血管收縮肽轉化酶(ACE)抑制劑組合投與，血管收縮肽轉化酶(ACE)抑制劑之實例包含喹那普利(accupril)、阿拉普利(alacepril)、貝那普利(benazepril)、貝那普利拉(benazeprilat)、卡托普利(captopril)、西那普利(ceranapril)、西拉普利(cilazapril)、地拉普利(delapril)、依那普利(enalapril)、依那普利拉(enalaprilat)、福辛普利(fosinopril)、福辛普利拉(fosinoprilat)、咪達普利(imidapril)、賴諾普利(lisinopril)、莫昔普利(moexipril)、蒙諾普利(monopril)、莫維普利(moveltipril)、噴托普利(pentopril)、培哚普利(perindopril)、喹那普利(quinapril)、喹普利拉(quinaprilat)、雷米普利(ramipril)、雷米普利拉(ramiprilat)、乙酸沙拉新(saralasin acetate)、螺普利(spirapril)、替莫普利(temocapril)、群多普利(trandolapril)、佐芬普利(zofenopril)及其組合。在一特定實施例中，ACE抑制劑係選自貝那普利、卡托普利、依那普利、賴諾普利、雷米普利及其組合。通常，以足以提供約1-150mg/天之量投與ACE抑制劑。

在另一實施例中，化合物1與雙重血管緊張素轉化酶/腎胰島素殘基溶酶(ACE/NEP)抑制劑組合投與，雙重血管緊張素轉化酶/腎胰島素殘基溶酶(ACE/NEP)抑制劑之實例包含：AVE-0848((4S,7S,12bR)-7-[3-甲基-2(S)-硫烷基丁醯胺基]-6-側氧基-1,2,3,4,6,7,8,12b-八氫吡啶并[2,1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；AVE-7688(伊利帕曲(ilepatril))及其母體化合物；BMS-182657(2-[2-側氧基-3(S)-[3-苯基-2(S)-硫烷基丙醯胺基]-2,3,4,5-四氫-1H-1-苯并氮呯-1-基]乙酸)；CGS-35601(N-[1-[4-甲基-2(S)-硫烷基戊醯胺基]環戊基羰基]-L-色胺酸)；法西多曲(fasidotril)；法西多曲拉(fasidotrilate)；依那普利拉；ER-32935((3R,6S,9aR)-6-[3(S)-甲基-2(S)-硫烷基戊醯胺基]-5-側氧基全氫噻唑并[3,2-a]氮呯-3-甲酸)；傑帕曲拉；MDL-101264((4S,7S,12bR)-7-[2(S)-(2-嗎啉基乙醯基硫基)-3-苯基丙醯胺基]-6-側氧基-1,2,3,4,6,7,8,12b-八氫吡啶并[2,1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；奧馬曲拉；RB-105(N-[2(S)-(巰基甲基)-3(R)-苯基丁基]-L-丙胺酸)；山帕曲拉；SA-898((2R,4R)-N-[2-(2-羥基苯基)-3-(3-巰基丙醯基)噻唑啶-4-基羰基]-L-苯丙胺酸)；Sch-50690(N-[1(S)-羧基-2-[N2-(甲烷磺醯基)-L-賴胺醯基胺基]乙基]-L-纈胺醯基-L-酪胺酸)；且亦可包含其組合。在一特定實施例中，該ACE/NEP抑制劑係選自：AVE-7688、依那普利拉、法西多曲、法西多曲拉、奧馬曲拉、山帕曲拉及其組合。

在一實施例中，化合物1與血管收縮肽轉化酶2(ACE2)活化劑或刺激劑組合投與。

在一實施例中，化合物1與血管收縮肽-II疫苗(其實例包含 ATR12181及CYT006-AngQb)組合投與。

在一實施例中，化合物1與抗凝劑(其實例包含：香豆素，例如殺鼠靈(warfarin)；肝素；及直接凝血酶抑制劑，例如阿加曲班(argatroban)、比伐盧定(bivalirudin)、達比加群(dabigatran)及來匹盧定(lepirudin))組合投與。

在另一實施例中，化合物1與抗糖尿病劑(其實例包含可注射藥物以及口服有效藥物及其組合)組合投與。可注射藥物之實例包含胰島素及胰島素衍生物。口服有效藥物之實例包含：雙胍例如二甲雙胍(metformin)；升糖素拮抗劑；α-葡萄糖苷酶抑制劑，例如阿卡波糖(acarbose)及米格列醇(miglitol)；二肽基肽酶IV抑制劑(DPP-IV抑制劑)，例如阿洛利停(alogliptin)、地格列汀(denagliptin)、利拉利汀(linagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、西他列汀(sitagliptin)及維格列汀(vildagliptin)；美格替耐(meglitinide)，例如瑞格列奈(repaglinide)；噁二唑啶二酮；磺醯脲，例如氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列美脲(glimepiride)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲(glyburide)及妥拉磺脲(tolazamide)；噻唑啶二酮，例如吡格列酮(pioglitazone)及羅格列酮(rosiglitazone)；及其組合。

在另一實施例中，化合物1與抗腹瀉治療劑組合投與。代表性治療選擇包含口服補水溶液(ORS)、洛哌丁胺(loperamide)、地芬諾酯(diphenoxylate)及次水楊酸鉍。

在又一實施例中，化合物1與抗青光眼劑組合投與，抗青光眼劑之實例包含：α-腎上腺素能激動劑，例如溴莫尼定(brimonidine)；β₁-腎上腺素能受體拮抗劑；局部β₁阻斷劑，例如倍他洛爾(betaxolol)、左布諾洛爾(levobunolol)及噻嗎洛爾(timolol)；碳酸酐酶抑制劑，例如乙醯唑胺(acetazolamide)、布林唑胺(brinzolamide)或多佐胺(dorzolamide)；膽鹼能激動劑，例如西維美林(cevimeline)及DMXB- 假木賊鹼(DMXB-anabaseine)；腎上腺素化合物；縮瞳藥，例如匹魯卡品(pilocarpine)；及前列腺素類似物。

在另一實施例中，化合物1與抗脂質劑組合投與，抗脂質劑之實例包含：膽固醇基酯轉移蛋白抑制劑(CETP)，例如安塞曲匹(anacetrapib)、達塞曲匹(dalcetrapib)及托塞曲匹(torcetrapib)；他汀類藥物，例如阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、普伐他汀(pravastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)及斯伐他汀(simvastatin)；及其組合。

在一實施例中，化合物1與抗血栓劑組合投與，抗血栓劑之實例包含：阿斯匹林(aspirin)；抗血小板劑，例如氯吡格雷(clopidogrel)、普拉格雷(prasugrel)及噻氯匹定(ticlopidine)；肝素及其組合。

在一實施例中，化合物1與AT₁受體拮抗劑(亦稱為血管緊張素II 1受體阻斷劑(ARB))組合投與。代表性ARB包含阿比沙坦(abitesartan)、阿齊沙坦(azilsartan)(例如阿齊沙坦酯(azilsartan medoxomil))、苄基氯沙坦(benzyllosartan)、坎地沙坦(candesartan)、坎地沙坦西酯(candesartan cilexetil)、依利沙坦(elisartan)、恩布沙坦(embusartan)、烯醇他索沙坦(enoltasosartan)、依普羅沙坦(eprosartan)、EXP3174、福沙坦(fonsartan)、福拉沙坦(forasartan)、甘胺醯洛沙坦(glycyllosartan)、厄貝沙坦(irbesartan)、抑特靈(isoteoline)、氯沙坦(losartan)、美得希莫(medoximil)、米法沙坦(milfasartan)、奧美沙坦(olmesartan)(例如奧美沙坦酯(olmesartan medoxomil))、奧普米沙坦(opomisartan)、普拉沙坦(pratosartan)、利匹沙坦(ripisartan)、沙普立沙坦(saprisartan)、沙拉新(saralasin)、薩美辛(sarmesin)、TAK-591、他索沙坦(tasosartan)、替米沙坦(telmisartan)、纈沙坦(valsartan)、佐拉沙坦(zolasartan)及其組合。在一特定實施例中，ARB係選自阿齊沙坦酯、坎地沙坦西酯、依普羅沙坦、厄貝沙坦、氯沙坦、奧美沙坦酯、沙普立沙坦、他索沙坦、替米沙坦、纈沙坦及其組合。實例性鹽及/或前藥包含坎地沙坦西酯、甲磺酸依普羅沙坦、氯沙坦鉀鹽及奧美沙坦酯。通常，以足以提供約4-600mg/劑量之量投與ARB，其中實例性日劑量介於20-320mg/天之間。

化合物1亦可與雙重作用劑(例如AT₁受體拮抗劑/腎胰島素殘基溶酶抑制劑(ARB/NEP)抑制劑，其實例包含闡述於Allegretti等人之美國專利第7,879,896號及第8,013,005號中之化合物，例如化合物4'-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巰基-4-甲基戊醯基胺基)-甲基]咪唑-1-基甲基}-3'-氟聯苯-2-甲酸)組合投與。

化合物1亦可與多功能血管收縮肽受體阻斷劑組合投與，如Kurtz & Klein(2009)Hypertension Research 32：826-834中所闡述。

在一實施例中，化合物1與緩激肽受體拮抗劑(例如艾替班特(icatibant)(HOE-140))組合投與。預計此組合療法可呈現預防血管性水腫或升高之緩激肽含量之其他不期望後果之優點。

在一實施例中，化合物1與鈣通道阻斷劑組合投與，鈣通道阻斷劑之實例包含胺氯地平(amlodipine)、阿尼帕米(anipamil)、阿雷地平(aranidipine)、巴尼地平(barnidipine)、苄環烷(bencyclane)、貝尼地平(benidipine)、苄普地爾(bepridil)、克侖硫卓(clentiazem)、西尼地平(cilnidipine)、桂利嗪(cinnarizine)、地爾硫卓(diltiazem)、依福地平(efonidipine)、依高地平(elgodipine)、依他苯酮(etafenone)、非洛地平(felodipine)、芬地林(fendiline)、氟桂利嗪(flunarizine)、戈洛帕米(gallopamil)、伊拉地平(isradipine)、拉西地平(lacidipine)、樂卡地平(lercanidipine)、利多氟嗪(lidoflazine)、洛美利嗪(lomerizine)、馬尼地平(manidipine)、米貝拉地爾(mibefradil)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼古地平(niguldipine)、尼魯地平 (niludipine)、尼伐地平(nilvadipine)、尼莫地平(nimodipine)、尼索地平(nisoldipine)、尼群地平(nitrendipine)、尼伐地平(nivaldipine)、哌克昔林(perhexiline)、普尼拉明(prenylamine)、柳的平(ryosidine)、司莫地爾(semotiadil)、特羅地林(terodiline)、噻帕米(tiapamil)、維拉帕米(verapamil)及其組合。在一特定實施例中，鈣通道阻斷劑係選自胺氯地平、苄普地爾、地爾硫卓、非洛地平、伊拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼魯地平、尼莫地平、尼索地平、柳的平、維拉帕米及其組合。通常，以足以提供約2-500mg/劑量之量投與鈣通道阻斷劑。

在一實施例中，化合物1與凝乳酶抑制劑(例如TPC-806及2-(5-甲醯基胺基-6-側氧基-2-苯基-1,6-二氫嘧啶-1-基)-N-[{3,4-二側氧基-1-苯基-7-(2-吡啶基氧基)}-2-庚基]乙醯胺(NK3201))組合投與。

在一實施例中，化合物1與利尿劑組合投與，利尿劑之實例包含：碳酸酐酶抑制劑，例如乙醯唑胺(acetazolamide)及雙氯非那胺(dichlorphenamide)；拌利尿劑，其包含磺醯胺衍生物，例如乙醯唑胺、安布賽特(ambuside)、阿佐塞米(azosemide)、布美他尼(bumetanide)、布他唑胺(butazolamide)、氯米非那胺(chloraminophenamide)、氯非那胺(clofenamide)、氯帕胺(clopamide)、氯索隆(clorexolone)、二磺法胺(disulfamide)、依索唑胺(ethoxzolamide)、呋塞米(furosemide)、美夫西特(mefruside)、醋甲唑胺(methazolamide)、吡咯他尼(piretanide)、托拉塞米(torsemide)、曲帕胺(tripamide)及希帕胺(xipamide)，以及非磺醯胺利尿劑，例如依他尼酸(ethacrynic acid)及其他苯氧基乙酸化合物，例如替尼酸(tienilic acid)、茚達立酮(indacrinone)及喹卡酯(quincarbate)；滲透壓性利尿劑，例如甘露醇；保鉀利尿劑，其包含醛固酮拮抗劑，例如螺內酯(spironolactone)及Na⁺通道抑制劑，例如阿米洛利(amiloride)及胺苯蝶啶(triamterene)；噻嗪及噻嗪樣利尿劑，例如阿爾噻嗪(althiazide)、苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)、苄氫氯噻嗪(benzylhydrochlorothiazide)、苄噻嗪(benzthiazide)、布噻嗪(buthiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、氯噻嗪(chlorothiazide)、環戊噻嗪(cyclopenthiazide)、環噻嗪(cyclothiazide)、依匹噻嗪(epithiazide)、乙噻嗪(ethiazide)、芬喹唑(fenquizone)、氟甲噻嗪(flumethiazide)、氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氫氟噻嗪(hydroflumethiazide)、吲達帕胺(indapamide)、甲氯噻嗪(methylclothiazide)、美替克侖(meticrane)、美托拉宗(metolazone)、對氟噻嗪(paraflutizide)、泊利噻嗪(polythiazide)、喹乙宗(quinethazone)、四氯噻嗪(teclothiazide)及三氯噻嗪(trichloromethiazide)；及其組合。在一特定實施例中，利尿劑係選自阿米洛利、布美他尼、氯噻嗪、氯噻酮、雙氯非那胺、依他尼酸、呋塞米、氫氯噻嗪、氫氟噻嗪、吲達帕胺、甲氯噻嗪、美托拉宗、托拉塞米、胺苯蝶啶及其組合。以足以提供約5-50mg/天(更為通常地6-25mg/天)之量投與利尿劑，其中常用劑量為6.25mg、12.5mg或25mg/天。

化合物1亦可與內皮素轉化酶(ECE)抑制劑(其實例包含磷醯二肽(phosphoramidon)、CGS 26303及其組合)組合投與。

在一特定實施例中，化合物1與內皮素受體拮抗劑組合投與，內皮素受體拮抗劑之實例包含：影響內皮素A受體之選擇性內皮素受體拮抗劑，例如阿伏生坦(avosentan)、安貝生坦(ambrisentan)、阿曲生坦(atrasentan)、BQ-123、克拉生坦(clazosentan)、達盧生坦(darusentan)、達盧生坦(sitaxentan)及齊泊騰坦(zibotentan)；及影響內皮素A及B受體之雙重內皮素受體拮抗劑，例如波生坦(bosentan)、馬西替坦(macitentan)及替唑生坦(tezosentan)。

在另一實施例中，化合物1與一或多種HMG-CoA還原酶抑制劑(其亦稱為他汀類藥物)組合投與。代表性他汀類藥物包含阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)及斯伐他汀(simvastatin)。

在一實施例中，化合物1與單胺再攝取抑制劑組合投與，單胺再攝取抑制劑之實例包含去甲腎上腺素再攝取抑制劑，例如阿托莫西汀(atomoxetine)、安非他酮(buproprion)及安非他酮代謝物羥基安非他酮(hydroxybuproprion)、馬普替林(maprotiline)、瑞波西汀(reboxetine)及維洛沙秦(viloxazine)；選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)，例如西酞普蘭(citalopram)及西酞普蘭代謝物去甲基西酞普蘭(desmethylcitalopram)、達泊西汀(dapoxetine)、依地普侖(escitalopram)(例如草酸依地普侖(escitalopram oxalate))、氟西汀(fluoxetine)及氟西汀去甲基代謝物諾氟西汀(norfluoxetine)、氟伏沙明(fluvoxamine)(例如馬來酸氟伏沙明(fluvoxamine maleate))、帕羅西汀(paroxetine)、舍曲林(sertraline)及舍曲林代謝物去甲基舍曲林(demethylsertraline)；雙重血清素-去甲腎上腺素再攝取抑制劑(SNRI)，例如比西發定(bicifadine)、度洛西汀(duloxetine)、米那普侖(milnacipran)、奈法唑酮(nefazodone)及萬拉法辛(venlafaxine)；及其組合。

在另一實施例中，化合物1與肌肉鬆弛劑組合投與，肌肉鬆弛劑之實例包含：肌安寧(carisoprodol)、氯唑沙宗(chlorzoxazone)、環苯紮林(cyclobenzaprine)、二氟尼柳(diflunisal)、美他沙酮(metaxalone)、美索巴莫(methocarbamol)及其組合。

在一實施例中，化合物1與利鈉肽或類似物(其實例包含：卡培立肽(carperitide)、CD-NP(Nile Therapeutics)、CU-NP、奈西立肽 (nesiritide)、PL-3994(Palatin Technologies公司)、烏拉立肽(ularitide)、蛇毒肽(cenderitide)及闡述於Ogawa等人(2004)J.Biol.Chem.279：28625-31中之化合物)組合投與。該等化合物亦稱為利鈉肽受體-A(NPR-A)激動劑。在另一實施例中，化合物1與利鈉肽清除受體(NPR-C)拮抗劑(例如SC-46542、cANF(4-23)及AP-811)組合投與(Veale(2000)Bioorg Med Chem Lett 10：1949-52)。舉例而言，AP-811在與NEP抑制劑硫甲基氧代苯丙甘胺酸(thiorphan)進行組合時展示協同作用(Wegner(1995)Clin.Exper.Hypert.17：861-876)。

在另一實施例中，化合物1與腎胰島素殘基溶酶(NEP)抑制劑組合投與，腎胰島素殘基溶酶(NEP)抑制劑之實例包含：AHU-377；坎沙曲(candoxatril)；坎沙曲拉(candoxatrilat)；右卡多曲(dexecadotril)((+)-N-[2(R)-(乙醯基硫甲基)-3-苯基丙醯基]甘胺酸苄基酯)；CGS-24128(3-[3-(聯苯-4-基)-2-(膦醯基甲基胺基)丙醯胺基]丙酸)；CGS-24592((S)-3-[3-(聯苯-4-基)-2-(膦醯基甲基胺基)丙醯胺基]丙酸)；CGS-25155(N-[9(R)-(乙醯基硫甲基)-10-側氧基-1-氮雜環癸烷-2(S)-基羰基]-4(R)-羥基-L-脯胺酸苄基酯)；3-(1-胺基甲醯基環己基)丙酸衍生物，其闡述於頒予Hepworth等人(Pfizer公司)之WO 2006/027680中；JMV-390-1(2(R)苄基-3-(N-羥基胺基甲醯基)丙醯基-L-異白胺醯基-L-白胺酸)；埃卡多曲(ecadotril)；磷酸阿米酮(phosphoramidon)；反-硫甲基氧代苯丙甘胺酸(retrothiorphan)；RU-42827(2-(巰基甲基)-N-(4-吡啶基)苯丙醯胺)；RU-44004(N-(4-嗎啉基)-3-苯基-2-(硫烷基甲基)丙醯胺)；SCH-32615((S)-N-[N-(1-羧基-2-苯基乙基)-L-苯基丙胺醯基]-β-丙胺酸)及其前藥SCH-34826((S)-N-[N-[1-[[(2,2-二甲基-1,3-二氧戊環-4-基)甲氧基]羰基]-2-苯基乙基]-L-苯基丙胺醯基]-β-丙胺酸)；希樂吩(sialorphin)；SCH-42495(N-[2(S)-(乙醯基硫烷基甲基)-3-(2-甲基苯基)丙醯基]-L-甲硫胺酸乙酯)；斯平吩(spinorphin)；SQ-28132 (N-[2-(巰基甲基)-1-側氧基-3-苯基丙基]白胺酸)；SQ-28603(N-[2-(巰基甲基)-1-側氧基-3-苯基丙基]-β-丙胺酸)；SQ-29072(7-[[2-(巰基甲基)-1-側氧基-3-苯基丙基]胺基]庚酸)；硫甲基氧代苯丙甘胺酸及其前藥消旋卡多曲(racecadotril)；UK-69578(順式-4-[[[1-[2-羧基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]環戊基]羰基]胺基]環己烷甲酸)；UK-447,841(2-{1-[3-(4-氯苯基)丙基胺基甲醯基]-環戊基甲基}-4-甲氧基丁酸)；UK-505,749((R)2-甲基-3-{1-[3-(2-甲基苯并噻唑-6-基)丙基胺基甲醯基]環戊基}丙酸)；5-聯苯-4-基-4-(3-羧基丙醯基胺基)-2-甲基戊酸及5-聯苯-4-基-4-(3-羧基丙醯基胺基)-2-甲基戊酸乙酯(WO 2007/056546)；達格魯多曲(daglutril)[(3S,2'R)-3-{1-[2'-(乙氧基羰基)-4'-苯基丁基]-環戊烷-1-羰基胺基}-2,3,4,5-四氫-2-側氧基-1H-1-苯并氮呯-1-乙酸]，其闡述於頒予Khder等人(Novartis AG)之WO 2007/106708中；及其組合。在一特定實施例中，NEP抑制劑係選自AHU-377、坎沙曲、坎沙曲拉、CGS-24128、磷酸阿米酮、SCH-32615、SCH-34826、SQ-28603、硫甲基氧代苯丙甘胺酸及其組合。在一特定實施例中，NEP抑制劑係諸如達格魯多曲或CGS-26303([N-[2-(聯苯-4-基)-1(S)-(1H-四唑-5-基)乙基]胺基]甲基膦酸)等化合物，其具有作為內皮素轉化酶(ECE)及NEP之抑制劑之活性。亦可使用其他雙重作用ECE/NEP化合物。以足以提供約20-800mg/天之量投與NEP抑制劑，其中典型日劑量係在50-700mg/天範圍內，更通常地，100-600或100-300mg/天。

在一實施例中，化合物1與一氧化氮供體(其實例包含：尼可地爾(nicorandil)；有機硝酸酯，例如(新戊四醇四硝酸酯)；及斯德酮亞胺(sydnonimine)，例如林西多明(linsidomine)及嗎多明(molsidomine))組合投與。

在又一實施例中，化合物1與非類固醇抗發炎劑(NSAID)組合投與，非類固醇抗發炎劑(NSAID)之實例包含：阿西美辛(acemetacin)、乙醯基水楊酸、阿氯芬酸(alclofenac)、阿明洛芬(alminoprofen)、胺芬酸(amfenac)、胺普立糖(amiprilose)、阿洛普令(aloxiprin)、阿尼羅酸(anirolac)、阿紮丙宗(apazone)、阿紮丙宗(azapropazone)、貝諾酯(benorilate)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、苯哌立酮(bezpiperylon)、溴哌莫(broperamole)、布氯酸(bucloxic酸)、卡洛芬(carprofen)、環氯茚酸(clidanac)、雙氯芬酸(diclofenac)、二氟尼柳(diflunisal)、地弗他酮(diftalone)、依諾利康(enolicam)、依託度酸(etodolac)、依託考昔(etoricoxib)、芬布芬(fenbufen)、芬氯酸(fenclofenac)、芬克洛酸(fenclozic acid)、非諾洛芬(fenoprofen)、芬替酸(fentiazac)、非普拉宗(feprazone)、氟芬那酸(flufenamic acid)、氟苯柳(flufenisal)、氟洛芬(fluprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、呋羅芬酸(furofenac)、異丁芬酸(ibufenac)、布洛芬(ibuprofen)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚洛芬(indoprofen)、伊索克酸(isoxepac)、伊索昔康(isoxicam)、酮洛芬(ketoprofen)、酮咯酸(ketorolac)、洛非咪唑(lofemizole)、氯諾昔康(lornoxicam)、甲氯滅酸的結合鹼(meclofenamate)、甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)、美洛昔康(meloxicam)、美沙拉秦(mesalamine)、咪洛芬(miroprofen)、莫非布宗(mofebutazone)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、尼氟酸(niflumic acid)、奧沙普秦(oxaprozin)、歐平納(oxpinac)、羥布宗(oxyphenbutazone)、保泰松(phenylbutazone)、吡羅昔康(piroxicam)、吡洛芬(pirprofen)、普拉洛芬(pranoprofen)、雙水楊酯(salsalate)、舒多昔康(sudoxicam)、柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、舒林酸(sulindac)、舒洛芬(suprofen)、替諾昔康(tenoxicam)、硫平酸(tiopinac)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、硫噁洛芬(tioxaprofen)、托芬那酸(tolfenamic acid)、托美丁(tolmetin)、三氟米酯(triflumidate)、齊多美辛(zidometacin)、佐美酸(zomepirac)及其組合。在一特定實施例中， NSAID係選自依託度酸、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、美洛昔康、萘普生、奧沙普秦、吡羅昔康及其組合。

在一實施例中，化合物1與N-甲基d-天冬胺酸鹽(NMDA)受體拮抗劑(其實例包含金剛烷胺(amantadine)、右旋美沙芬(dextromethorphan)、右丙氧芬(dextropropoxyphene)、氯胺酮(ketamine)、凱托米酮(ketobemidone)、美金剛(memantine)、美沙酮(methadone)等)組合投與。

在另一實施例中，化合物1與類鴉片受體激動劑(亦稱為類鴉片止痛藥)組合投與。代表性類鴉片受體激動劑包含：丁丙諾啡(buprenorphine)、布托啡諾(butorphanol)、可待因(codeine)、雙氫可待因(dihydrocodeine)、芬太尼(fentanyl)、氫可酮(hydrocodone)、氫嗎啡酮(hydromorphone)、左洛啡烷(levallorphan)、左啡諾(levorphanol)、哌替啶(meperidine)、美沙酮、嗎啡(morphine)、納布啡(nalbuphine)、納美芬(nalmefene)、納洛芬(nalorphine)、納洛酮(naloxone)、納曲酮(naltrexone)、納洛芬(nalorphine)、羥考酮(oxycodone)、羥嗎啡酮(oxymorphone)、噴他佐辛(pentazocine)、丙氧芬(propoxyphene)、曲馬朵(tramadol)及其組合。在某些實施例中，類鴉片受體激動劑係選自可待因、雙氫可待因、氫可酮、氫嗎啡酮、嗎啡、羥考酮、羥嗎啡酮、曲馬朵及其組合。

在一特定實施例中，化合物1與磷酸二酯酶(PDE)抑制劑、尤其PDE-V抑制劑組合投與。代表性PDE-V抑制劑包含阿伐那非(avanafil)、羅地那非(lodenafil)、米羅那非(mirodenafil)、西地那非(sildenafil)(Revatio^®)、他達拉非(tadalafil)(Adcirca^®)、伐地那非(vardenafil)(Levitra^®)及烏地那非(udenafil)。

在另一實施例中，化合物1與前列腺素類似物(亦稱為類前列腺素或前列腺環素類似物)組合投與。代表性前列腺素類似物包含貝前列素鈉(beraprost sodium)、比馬前列素(bimatoprost)、依前列醇(epoprostenol)、伊洛前列素(iloprost)、拉坦前列素(latanoprost)、他氟前列素(tafluprost)、曲伏前列素(travoprost)及曲前列環素(treprostinil)，其中尤其關注比馬前列素、拉坦前列素及他氟前列素。

在另一實施例中，化合物1與前列腺素受體激動劑(其實例包含比馬前列素、拉坦前列素、曲伏前列素等)組合投與。

化合物1亦可與腎素抑制劑(其實例包含阿利吉侖(aliskiren)、依那吉侖(enalkiren)、瑞米吉侖(remikiren)及其組合)組合投與。

在另一實施例中，化合物1與選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)組合投與，選擇性血清素再攝取抑制劑(SSRI)之實例包含：西酞普蘭及西酞普蘭代謝物去甲基西酞普蘭、達泊西汀、依地普侖(例如草酸依地普侖)、氟西汀及氟西汀去甲基代謝物諾氟西汀、氟伏沙明(例如馬來酸氟伏沙明)、帕羅西汀、舍曲林及舍曲林代謝物去甲基舍曲林及其組合。

在一實施例中，化合物1與5-HT_1D血清素受體激動劑(其實例包含曲坦類，例如阿莫曲普坦(almotriptan)、阿維曲普坦(avitriptan)、依來曲普坦(eletriptan)、夫羅曲普坦(frovatriptan)、那拉曲坦(naratriptan)、利紮曲普坦(rizatriptan)、舒馬曲坦(sumatriptan)及佐米曲普坦(zolmitriptan))組合投與。

在一實施例中，化合物1與鈉通道阻斷劑(其實例包含卡巴馬平(carbamazepine)、磷苯妥英(fosphenytoin)、樂命達錠(lamotrigine)、利多卡因(lidocaine)、墨西律定(mexiletine)、奧卡西平(oxcarbazepine)、苯妥英(phenytoin)及其組合)組合投與。

在一實施例中，化合物1與可溶性鳥苷酸環化酶刺激劑或活化劑(其實例包含阿塔西哌(ataciguat)、利奧西哌(riociguat)及其組合)組合投與。

在一實施例中，化合物1與三環抗抑鬱劑(TCA)組合投與，三環抗抑鬱劑(TCA)之實例包含阿米替林(amitriptyline)、氧阿米替林(amitriptylinoxide)、布替林(butriptyline)、氯米帕明(clomipramine)、地美替林(demexiptiline)、地昔帕明(desipramine)、二苯西平(dibenzepin)、二甲他林(dimetacrine)、多蘇列平(dosulepin)、氧雜環庚三烯(doxepin)、伊米帕明(imipramine)、氧米帕明(imipraminoxide)、洛非帕明(lofepramine)、美利曲辛(melitracen)、美他帕明(metapramine)、硝沙西平(nitroxazepine)、去甲替林(nortriptyline)、諾昔替林(noxiptiline)、哌泊非嗪(pipofezine)、丙吡西平(propizepine)、普羅替林(protriptyline)、奎紐帕明(quinupramine)及其組合。

在一實施例中，化合物1與加壓素受體拮抗劑(其實例包含考尼伐坦(conivaptan)及托伐普坦(tolvaptan))組合投與。

組合之二級治療劑亦可有助於本發明化合物之其他組合療法。舉例而言，本發明化合物可與利尿劑及ARB或鈣通道阻斷劑及ARB或利尿劑及ACE抑制劑或鈣通道阻斷劑及他汀類藥物進行組合。具體實例包含ACE抑制劑依那普利(呈馬來酸鹽形式)與利尿劑氫氯噻嗪之以商標Vaseretic^®出售之組合或鈣通道阻斷劑胺氯地平(呈苯磺酸鹽形式)與ARB奧美沙坦(呈奧美沙坦酯前藥形式)之組合或鈣通道阻斷劑與他汀類藥物之組合，其皆亦可與化合物1一起使用。其他治療劑(例如α₂-腎上腺素能受體激動劑及加壓素受體拮抗劑)亦可有助於組合療法。實例性α₂-腎上腺素能受體激動劑包含可樂定(clonidine)、右美托咪定(dexmedetomidine)及胍法辛(guanfacine)。

下列調配物可闡釋本發明之代表性醫藥組合物。

用於經口投與之實例性硬明膠膠囊

將本發明化合物(50g)、440g經噴霧乾燥乳糖及10g硬脂酸充分摻和。隨後將所得組合物裝填至硬明膠膠囊中(500mg組合物/膠囊)。另一選擇為，將化合物1(20mg)與澱粉(89mg)、微晶纖維素(89mg)及硬脂酸鎂(2mg)充分摻和。隨後使混合物通過45號網目美國篩並裝填至硬明膠膠囊中(200mg組合物/膠囊)。

流星雨作為，另一選擇為，將化合物1(30g)、二級藥劑(20g)、440g經噴霧乾燥乳糖及10g硬脂酸鎂充分摻和，且如上文所闡述進行處理。

用於經口投與之實例性明膠膠囊調配物

將化合物1(100mg)與聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯(50mg)及澱粉粉末(250mg)充分摻和。隨後將混合物裝填至明膠膠囊中(400mg組合物/膠囊)。另一選擇為，將化合物1(70mg)及二級藥劑(30mg)與聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯(50mg)及澱粉粉末(250mg)充分摻和，且將所得混合物裝載至明膠膠囊中(400mg組合物/膠囊)。

另一選擇為，將化合物1(40mg)與微晶纖維素(Avicel PH 103；259.2mg)及硬脂酸鎂(0.8mg)充分摻和。隨後將混合物裝填至明膠膠囊(1號大小，白色，不透明)中(300mg組合物/膠囊)。

用於經口投與之實例性羥丙基甲基纖維素(HPMC)膠囊

將化合物1(50mg或100mg)直接裝載至HPMC膠囊中。

用於經口投與之實例性錠劑調配物

使化合物1(10mg)、澱粉(45mg)及微晶纖維素(35mg)通過20號網目美國篩並充分混合。將由此產生之粒劑在50-60℃下乾燥且通過16號網目美國篩。將聚乙烯基吡咯啶酮溶液(4mg，存於無菌水中之10%溶液)與羧甲基澱粉鈉(4.5mg)、硬脂酸鎂(0.5mg)及滑石粉(1mg)混合，且然後使此混合物通過16號網目美國篩。然後向粒劑中添加羧甲基澱粉鈉、硬脂酸鎂及滑石粉。在混合之後，在壓片機上壓製混合物以提供重100mg之錠劑。

另一選擇為，將化合物1(250mg)與微晶纖維素(400mg)、發煙二氧化矽(10mg)及硬脂酸(5mg)充分摻和。隨後壓縮混合物以形成錠劑(665mg組合物/錠劑)。

另一選擇為，將化合物1(400mg)與玉米澱粉(50mg)、交聯羧甲基纖維素鈉(25mg)、乳糖(120mg)及硬脂酸鎂(5mg)充分摻和。然後壓縮該混合物以形成單痕錠劑(600mg組合物/錠劑)。

另一選擇為，將化合物1(100mg)與玉米澱粉(100mg)及明膠水溶液(20mg)充分摻和。乾燥混合物且研磨成精細粉末。然後將微晶纖維素(50mg)及硬脂酸鎂(5mg)與明膠調配物混合，粒化且壓縮所得混合物以形成錠劑(100mg本發明化合物/錠劑)。

用於經口投與之實例性懸浮液調配物

混合下列成分以形成每10mL懸浮液含有100mg化合物1之懸浮液：

用於經口投與之實例性液體調配物

適宜液體調配物係一種具有基於羧酸之緩衝液(例如檸檬酸、乳酸鹽及馬來酸鹽緩衝溶液)之調配物。舉例而言，將化合物1(其可與DMSO預混合)與100mM檸檬酸銨緩衝液摻和且將pH調節至pH 5，或與100mM檸檬酸溶液摻和且將pH調節至pH 2。該等溶液亦可包含增溶賦形劑(例如環糊精)，舉例而言，溶液可包含10wt%羥丙基-β-環糊精。

其他適宜調配物包含5% NaHCO₃溶液，其含有或不含環糊精。

用於藉由注射投與之實例性非經腸IV調配物

將化合物1(0.2g)與0.4M檸檬酸鈉緩衝溶液(2.0mL)摻和。根據需要使用0.5N鹽酸水溶液或0.5N氫氧化鈉水溶液將所得溶液之pH調節至pH 4，且然後添加足夠注射用水以提供20mL之總體積。然後藉由無菌過濾器(0.22微米)過濾混合物以提供適於藉由注射投與之無菌溶液。

下列調配物闡釋本發明之代表性醫藥組合物。

調配物實例A

如下所述來製備適於製備可注射溶液之冷凍溶液：

代表性程序：將賦形劑(若存在)溶於約80%注射用水中且添加活性化合物1或1’並溶解。使用1M氫氧化鈉將pH調節至3至4.5且然後使用注射用水將體積調節至最終體積之95%。檢查pH且視需要進行調節，且使用注射用水將體積調節至最終體積。然後經由0.22微米過濾器無菌過濾調配物且在無菌條件下置於無菌小瓶中。封蓋小瓶，標記且冷凍儲存。

調配物實例B

如下所述來製備適於製備可注射溶液之凍乾粉末或結晶固體：

代表性程序：將賦形劑及/或緩衝劑(若存在)溶於約60%注射用水中。添加活性化合物1或1’並溶解且使用1M氫氧化鈉將pH調節至3至4.5，且使用注射用水將體積調節至最終體積之95%。檢查pH且視需要進行調節，且使用注射用水將體積調節至最終體積。然後經由0.22微米過濾器無菌過濾調配物且在無菌條件下置於無菌小瓶中。然後使用適當凍乾循環凍乾調配物。封蓋小瓶(視情況在部分真空或乾燥氮下)，標記且在冷凍下儲存。

調配物實例C

如下所述自上述調配物實例B來製備用於經靜脈內投與患者之可注射溶液：

代表性程序：使用20mL無菌水重構調配物實例B之凍乾粉末(例如含有10至1000mg活性化合物1或1’)且使用80mL無菌鹽水在100mL液袋中進一步稀釋所得溶液。然後經30分鐘至120分鐘將所稀釋溶液經靜脈內投與患者。

用於藉由吸入投與之實例性組合物

將化合物1(0.2mg)微粉化且然後與乳糖(25mg)摻和。然後將此經摻和混合物裝載至明膠吸入藥筒中。使用(例如)乾粉吸入器投與藥筒內容物。

另一選擇為，使微粉化化合物1(10g)分散於藉由將卵磷脂(0.2g)溶於去礦質水(200mL)中所製得之溶液中。將所得懸浮液噴霧乾燥且隨後將其微粉化以形成包括平均直徑小於約1.5μm之顆粒之微粉化組合物。然後將微粉化組合物裝載至含有經加壓1,1,1,2-四氟乙烷之定量式吸入器藥筒中，在藉由該吸入器投與時裝載量足以提供每劑量約10μg至約500μg之本發明化合物。

另一選擇為，將化合物1(25mg)溶於檸檬酸鹽緩衝(pH 5)等滲鹽水(125mL)中。攪拌混合物並實施超音波處理直至化合物溶解為止。檢查溶液之pH且視需要藉由緩慢添加1N氫氧化鈉水溶液來調節至pH 5。使用每一劑量提供約10μg至約500μg化合物1之噴霧器裝置投與溶液。

實例

提供下列製備及實例來闡釋本發明之具體實施例。然而，除非明確指示，否則該等具體實施例並不意欲以任何方式限制本發明範圍。

除非另外指示，否則下列縮寫具有下列含義且本文使用且未定義之任何其他縮寫具有其公認之標準含義：

除非另外註明，否則所有諸如試劑、起始材料及溶劑等材料皆購自商業供應商(例如Sigma-Alarich、Fluka Riedel-de Haën及諸如此類)，且未經進一步純化即使用。

除非另外註明，否則反應皆係在氮氣氛下實施。藉由薄層層析(TLC)、分析型高效液相層析(分析型HPLC)及質譜來監測反應進程，其細節在具體實例中給出。通常，分析型HPLC中所用溶劑如下：溶劑A係98% H₂O/2% MeCN/1.0mL/L TFA；溶劑B係90% MeCN/10% H₂O/1.0mL/L TFA。

如每一實例製備中具體所闡述來處理反應液；通常，藉由萃取及其他純化方法(例如溫度-及溶劑-依賴性結晶及沈澱)純化反應混合物。另外，通常藉由藉由製備型HPLC且通常使用Microsorb C18及Microsorb BDS管柱填充物及習用洗脫劑來純化反應混合物。通常藉由液相層析質譜(LCMS)量測反應進程。藉由核奧佛豪瑟效應光譜(Nuclear Overhauser effect spectroscopy)(NOE)來表徵異構體。通常藉由質譜及¹H-NMR光譜來表徵反應產物。對於NMR量測而言，將試樣溶於氘代溶劑(CD₃OD、CDCl₃或DMSO-d ₆)中並利用Varian Gemini 2000儀器(400MHz)在標準觀察條件下獲得¹H-NMR光譜。化合物之質譜鑑別係使用電噴射電離法(ESMS)利用API 150 EX型Applied Biosystems(Foster City,CA)儀器或1200 LC/MSD型Agilent(Palo Alto,CA)儀器來實施。

量測技術

粉末X射線繞射

使用Bruker D8-Advancex射線繞射儀實施粉末X射線繞射分析。X射線源係輸出電壓為40kV且電流為40mA之Cu-Kα輻射。在Bragg-Brentano幾何結構中操作儀器且使用Goebel鏡獲得平行X射線束。束中之任何發散皆由光源處之0.2°垂直發散狹縫及光源與檢測器處之索勒狹縫(Soller slit)(2.5°)限制。為進行量測，將少量粉末(5-25mg)輕壓於零背景矽試樣座上以形成平滑表面且實施X射線暴露。以耦合θ-2θ模式自2°至35° 2θ使用0.02°之步長及0.3秒/步之掃描速度來掃描試樣。藉由Bruker DiffracSuite軟體控制數據獲取且藉由Jade軟體(7.5.1)進行分析。使用剛玉標準物(corundum standard)在±0.02° 2θ角內校正儀器。

應注意，用於數據蒐集之Bragg-Brentano幾何結構會有優先方位的傾向。在該等條件下，繞射峰之相對強度可能並不代表自球形顆粒之理想化分佈或自模擬自單晶數據之繞射圖獲得的真實相對強度。因廣泛的優先方位，某些峰亦可能不能見於一些繞射圖中。

差示掃描量熱法

使用具有Thermal Analyst控制器之TA Instruments Q-100型模組實施DSC量測。蒐集數據並使用TA Instruments Universal Analysis軟體來分析。將試樣精確稱重至有蓋鋁盤中。在5℃下經5分鐘等溫平衡時段之後，使用10℃/min之線性加熱斜坡自0℃至200℃加熱試樣。

熱重分析

使用配備有高解析度之TA Instruments Q-500型模組實施熱重分析量測。使用TA Instruments Thermal Analyst控制器收集數據且使用TA Instruments Universal Analysis軟體進行分析。將稱重試樣置於鉑盤上且以10℃/min之加熱速率自環境溫度至200℃進行掃描。在使用期間使用氮流吹掃平衡室及爐室。

偏光顯微術

對於偏振光顯微分析(PLM)研究而言，在具有交叉偏振濾光器之光學顯微鏡(Olympus BX51)下檢驗試樣。使用藉由PaxIt成像軟體(6.4版)控制之PaxCam照相機收集影像。在載玻片上使用輕質礦物油作為浸漬介質來製備試樣。端視顆粒大小，使用4×、10×或20×物鏡進行放大。

動態水分吸附評價

使用VTI常壓微量天平SGA-100系統(VTI公司，Hialeah,FL 33016)實施DMS量測。使用稱重試樣且在分析開始時濕度係最低可能值(接近0%相對濕度)。DMS分析由在5-90%之整個濕度範圍內5%相對濕度/步之掃描速率組成。在25℃下等溫實施DMS試驗。

合成程序及對比實例

合成下列化合物且評估NEP酶物制活性：

製備1：(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯(化合物7)

在室溫及氮下，向存於1,4-二噁烷(500mL)中之(S)-2-(4-溴苄基)-5-側氧基吡咯啶-1-甲酸第三丁基酯(25g,70.6mmol)之溶液中添加5-氯-2-氟苯基酸(24.6g,141mmol)、Pd(PPh₃)₄(4.1g,3.5mmol)及存於水(90mL)中之K₂CO₃溶液(17.8g,141mmol)。將混合物加熱至60 ℃並攪拌過夜。添加水(500mL)並蒸發溶劑。使用EtOAc(200mL×3)萃取混合物。使用NaCl飽和水溶液(300mL)洗滌合併之有機層並過濾。濃縮濾液以得到粗製殘餘物，藉由層析純化以得到淺黃色固體化合物2(22.7g)。LC-MS：829.2[2M+Na⁺]。

在0℃及氮下，向存於DCM(100mL)中之化合物2(4.9g,12.1mol)之溶液中添加TFA(4.5mL,60.7mmol)，並攪拌1小時。將混合物升溫至室溫保持1.5小時。在蒸發溶劑之後，使用EtOAc(100mL)稀釋殘餘物，然後使用NaHCO₃飽和水溶液(100mL×3)、水(100mL×2)、NaCl飽和水溶液(100mL)洗滌，且然後藉由Na₂SO₄乾燥。過濾混合物且濃縮濾液以得到粗製化合物3。LC-MS：304[M+H]⁺。

在0℃及氮下，向存於THF(200mL)中之NaH(2.4g,695mmol)之溶液中逐滴添加存於THF(50mL)中之化合物3(8.5g,278mmol)之溶液。將混合物升溫至室溫並攪拌2小時。在冷卻至0℃之後，經30分鐘逐滴添加特戊醯氯(5g,41.7mmol)。將混合物升溫至室溫並攪拌9.5小時。使用NH₄Cl飽和水溶液(250mL)終止反應並使用EtOAc(400mL×3)萃取。藉由Na₂SO₄乾燥合併之有機層並濃縮以得到粗製殘餘物，藉由層析純化以得到黃色固體化合物4(18g)。LC-MS：388[M+H⁺]。

在-78℃及氮下，向存於THF(200mL)中之化合物4(9g,23.2mmol)之溶液中逐滴添加NaHMDS(20.9mL,41.8mmol)。在-78℃下攪拌1小時之後，逐滴添加存於THF(50mL)中之(+)-(8,8-二氯樟腦醯基磺醯基)氧氮丙啶(10.4g,34.8mmol)之溶液。在-78℃下攪拌1小時之後，使用NH₄Cl飽和水溶液(50mL)終止反應並使用EtOAc(400mL×3)萃取。使用1M HCl水溶液(400mL)、NaHCO₃飽和水溶液(400mL)及NaCl飽和水溶液(400mL)洗滌合併之有機層，藉由Na₂SO₄乾燥，並濃縮以得到粗製殘餘物，藉由層析純化以得到白色半固體化合物5(8.8g)。LC-MS：426.1[M+Na⁺]。

將存於EtOH(12mL)中之化合物5(8.8g,21.8mmol)之溶液添加至濃HCl(200mL)中且在100℃下加熱並攪拌過夜。然後濃縮混合物以得到粗製殘餘物，藉由使用Et₂O(100mL)洗滌來純化以得到固體HCl鹽形式之化合物6(7.5g)。LC-MS：338[M+H⁺]。

將存於1：1 EtOH/HCl(100mL)中之化合物6(7.5g,20.1mmol)之溶液在50℃下加熱過夜。濃縮混合物且藉由使用Et₂O(200mL)洗滌來純化粗製殘餘物以得到白色固體HCl鹽形式之化合物7(6.5g)。LC-MS：366.1[M+H⁺]。

實例1：(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(化合物1)

將5-甲基噁唑-2-甲酸(182mg,1.4mmol)及HATU(546mg,1.4mmol)與DMF(3mL)合併並在室溫下攪拌15分鐘。然後添加化合物7(500mg,1.4mmol)及DIPEA(716μL,4.1mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌15分鐘，此時LC/MS展示反應已完成。在真空中去除溶劑且藉由正相急驟層析(己烷：EtOAC 20-95%)純化粗製殘餘物以得到固體(590mg,1.2mmol)，將其溶於無水EtOH(5mL)及無水THF(5mL)中。然後添加存於水中之1N LiOH溶液(9.9mL,9.9mmol)。將所得溶液在室溫下攪拌1小時，此時LC/MS展示反應已完成。在真空中去除溶劑且藉由反相層析純化粗製殘餘物以得到白色粉末形式之化合物1(490mg)。C₂₂H₂₀ClFN₂O₅之MS m/z[M+H]⁺計算值：447.10；實驗值：447.2。

結晶非溶劑化(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸(化合物1’)

將化合物7(HCl；190.0g,472mmol)溶於DMF(2L)中且將所得混合物冷卻至0℃。添加5-甲基噁唑-2-甲酸鈉(73.9g,496mmol)，隨後一次性添加DIPEA(124mL,708mmol)。經20分鐘逐份添加PyBOP (320g,614mmol)，同時維持內部溫度低於10℃(最高6.5℃)，且將所得混合物在0℃下攪拌1小時且然後在20℃下攪拌1小時，同時監測反應。在>99%轉化時，然後將混合物在室溫下再攪拌30分鐘。添加EtOAc(6L)及水(5L)且將所得混合物攪拌20分鐘。分離各相且使用0.5M HCl(5L)、5% NaHCO₃水溶液(5L)及5%NaCl飽和水溶液(5L)洗滌有機層。藉由Na₂SO₄將有機層在室溫下乾燥24小時，然後藉由旋轉蒸發濃縮。添加THF(500mL)且濃縮所得混合物以得到稠油狀物形式之化合物8。

將粗製化合物8(224g,472mmol)溶於THF(2L)中。添加溶於水(400mL)中之單水合LiOH(39.6g,944mmol)且在室溫下攪拌所得混合物，同時監測反應。在2小時之後觀察到完全轉化。然後使用1M HCl水溶液(1180mL,1180mmol)終止反應。添加EtOAc(2L)及NaCl飽和水溶液(2L)且將所得混合物攪拌15分鐘。分離各相且使用10% NaCl水溶液(3L)洗滌有機層並藉由Na₂SO₄(500g)乾燥過夜，隨後去除溶劑。向所得油狀物中添加EtOAc(2L)且體積減小至約500mL。將所得漿液在室溫下攪拌30分鐘，從而得到難以攪拌之稠漿液(在10分鐘內出現)。緩慢添加(經10分鐘)己烷(500mL)且將所得自由流動之漿液在室溫下攪拌20分鐘。過濾並乾燥以得到固體化合物1’(170g；99.2%純材料)。藉由PXRD、DSC及熱重分析(如本文中所闡述)分析此產物，且皆測定為非溶劑化結晶材料。此數據呈現於圖1-3中。

實例2：(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(3-甲氧基異噁唑- 5-羰基)胺基]戊酸(對比化合物C2)

將DIPEA(227μL,1.3mmol)添加至存於DMF(2mL)中之3-甲氧基異噁唑-5-甲酸(74.7mg,522μmol)、化合物7(175mg,435μmol)及HATU(248mg,653μmol)之溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌10分鐘，此時LC/MS展示反應已完成。添加5.0M LiOH水溶液(696μL,3.5mmol)且將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加濃HCl(約0.4mL)直至反應混合物變成酸性為止，且藉由反相層析(30-90% MeCN，存於水中且含有0.05% TFA)純化粗製混合物以得到白色固體形式之對比化合物C2(132mg)。C₂₂H₂₀ClFN₂O₆之MS m/z[M+H]⁺計算值：463.10；實驗值：463.2。

對比化合物C2闡述於頒予Gendron等人之美國專利第8,586,536號之實例19-9中。

製備2：(2R,4S)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-甲基戊酸乙酯(化合物11)

在室溫及氮下於二噁烷(900mL)及水(300mL)中合併(S)-2-(4-溴苄基)-5-側氧基吡咯啶-1-甲酸第三丁基酯(90g,254mmol)、5-氯-2-氟苯基酸(48.7g,279.4mmol)、Pd(dppf)₂Cl₂(5.6g,7.6mmol)、KF (29.5g,508mmol)。將所得溶液加熱至85℃且攪拌4小時。添加水(500mL)，且使用EtOAc(500mL×2)萃取混合物。使用NaCl飽和水溶液(500mL)洗滌合併之有機層，乾燥，濃縮並藉由層析(PE/EtOAc=6：1至3：1)純化以得到黃色固體化合物2(96g)。LC-MS：m/z=348[(M-56)⁺+1]。

在0℃及氮下，向存於DCM(200mL)中之化合物2(20g,49.5mmol)之溶液中添加TFA(30mL)。將混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌2小時。在蒸發溶劑之後，使用EtOAc(200mL)稀釋殘餘物，然後使用NaHCO₃飽和水溶液(200mL×3)及NaCl飽和水溶液(200mL×2)洗滌。乾燥有機層並濃縮以得到黃色油狀物形式之化合物3(14g，粗製物)。LC-MS：m/z=304[(M⁺+1)],m/z=607[(2M⁺+1)]。

在-78℃及氮下，向存於無水THF(150mL)中之化合物3(14g,46mmol)之溶液中逐滴添加存於己烷中之正丁基鋰之2.5M溶液(21mL,52.9mmol)。將所得混合物在-78℃下攪拌1小時。然後在-78℃下逐滴添加特戊醯氯(7.2g,59.8mmol)，且將混合物在-78℃下再攪拌2小時。使用水(200mL)終止反應並使用EtOAc(200mL×2)萃取。使用NaCl飽和水溶液(200mL)洗滌合併之有機層，藉由Na₂SO₄乾燥，濃縮，並藉由管柱層析(PE/EtOAc=50：1)純化以得到淺黃色油狀物形式之化合物4(14.6g)。LC-MS：m/z=388[(M⁺+1)]。

在-78℃及氮下，向存於甲苯(200mL)中之化合物4(14.6g,37.4mmol)之溶液中逐滴添加KHMDS(82mL,41.1mmol)。在-78℃下攪拌 2小時之後，逐滴添加Me₂SO₄(4.3mL,44.9mmol)。在-78℃下攪拌2小時之後，使用NH₄Cl飽和水溶液(100mL)終止反應並使用EtOAc(100mL×2)萃取。使用NaCl飽和水溶液(200mL)洗滌合併之有機層，藉由Na₂SO₄乾燥，過濾，並濃縮以得到粗產物，藉由層析(PE/EtOAc=100：1)純化以得到無色油狀物形式之化合物9(3.4g)。LC-MS：m/z=402[(M⁺+1)]。

將存於濃HCl(50mL)中之化合物9(3.4g,8.5mmol)之溶液回流2天。然後在減壓下濃縮混合物且藉由使用EtOAc(20mL)洗滌來純化殘餘物以得到灰白色固體HCl鹽形式之化合物10(2.2g)。LC-MS：m/z=336[(M⁺+1)]。

將存於4M HCl(存於EtOH中，15mL)中之化合物10(2.2g,5.9mmol)之溶液在室溫下攪拌2小時。然後在減壓下濃縮混合物且藉由使用EtOAc(20mL)洗滌來純化殘餘物以得到灰白色固體形式之化合物11(2.3g)。LC-MS：m/z=364[(M⁺+1)]¹H NMR(300MHz,DMSO)δ 7,61-7.52(m,3H),7.47(ddd,J=8.7,4.3,2.7Hz,1H),7.38(dd,J=13.5,5.5Hz,3H),3.98(q,J=7.1Hz,2H),3.37(d,J=11.1Hz,1H),3.11(dd,J=13.7,5.1Hz,1H),2.90-2.67(m,2H),1.85(ddd,J=14.0, 9.3,4.8Hz,1H),1.68-1.54(m,1H),1.13-0.99(m,6H)。

實例3：(2R,4S)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-4-[(2-乙基噁唑-5-羰基)胺基]-2-甲基戊酸(對比化合物C3)

將DIPEA(228μL,1.3mmol)添加至存於DMF(2.0mL)中之2-乙基噁唑-5-甲酸(67.9mg,481μmol)、化合物11(175mg,437μmol)及HATU(249mg,656μmol)之溶液中，並在室溫下攪拌15分鐘。添加5.0M LiOH水溶液(699μL,3.5mmol)且將混合物在室溫下攪拌1.5小時。添加濃HCl(約0.5mL)直至混合物變成酸性為止且藉由製備型HPLC(20-80% MeCN，存於水中且含有0.05% TFA)純化粗製混合物以得到白色固體形式之對比化合物C3(170mg)。C₂₄H₂₄ClFN₂O₄之MS m/z[M+H]⁺計算值：459.14；實驗值：459.05。

對比化合物C3闡述於頒予Coppola等人之美國專利第8,263,629號之實例71-1中。

實例4：(2R,4S)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-甲基-4-[(噁唑-5-羰基)胺基]戊酸(對比化合物C4)

將DIPEA(228μL,1.3mmol)添加至存於DMF(2mL)中之噁唑-5- 甲酸(49.4mg,437μmol)、化合物11(HCl；175mg,437μmol)及HATU(249mg,656μmol)之溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌10分鐘，此時LC/MS展示反應已完成。添加5.0M LiOH水溶液(699μL,3.5mmol)且將混合物在室溫下攪拌1小時。添加濃HCl(約0.5mL)直至反應混合物變成酸性為止且藉由製備型HPLC(20-80% MeCN，存於水中且含有0.05% TFA)純化粗製混合物以得到白色固體形式之對比化合物C4(103mg)。C₂₂H₂₀ClFN₂O₄之MS m/z[M+H]⁺計算值：431.11；實驗值：431.1。

對比化合物C4闡述於頒予Coppola等人之美國專利第8,263,629號之實例68-1中。

分析

在下文所闡述之分析中評估化合物1及對比化合物C2、C3及C4。

分析1：量化對人類NEP之抑制劑功效之活體外分析

如下所述來測定對人類腎胰島素殘基溶酶(EC 3.4.24.11；NEP)之抑制活性。

在商業上獲得重組人類NEP(R&D Systems,Minneapolis,MN，目錄編號：1182-ZN)。使用螢光肽受質Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap-(Dnp)-OH(Medeiros等人(1997)Braz.J.Med.Biol.Res.30：1157-62；Anaspec,San Jose,CA)。

在37℃下於384孔白色不透明板中使用螢光肽受質以10μM之濃度於分析緩衝液(50mM pH 7.5 HEPES、100mM NaCl、0.01%聚二醇去水山梨醇單月桂酸酯(Tween-20)、10μM ZnSO₄)中實施分析。以使得1μM受質在37℃下於20分鐘之後發生定量蛋白分解之濃度使用酶。

在10μM至20pM之濃度範圍內分析測試化合物。將測試化合物添加至酶中且在37℃下培育30分鐘，然後藉由添加受質來引發反應。在37℃下於培育20分鐘之後藉由添加冰乙酸直至最終濃度為3.6%(v/v)來終止反應。

在螢光計上使用設定於320nm之激發及發射波長來讀取板。藉由數據之非線性回歸使用以下方程式(GraphPad Software公司，San Diego,CA)來獲得抑制常數：v=v ₀/[1+(I/K')]

其中v係反應速率，v ₀係未抑制反應速率，I係抑制劑濃度且K'係表觀抑制常數。

在此分析中測試化合物且發現對人類NEP之pK_i值如下。

分析2：大鼠及狗中之IV/PO藥物動力學研究

使用測試化合物之調配物開始每一大鼠或狗PK研究。將適當質量之每一測試化合物添加至一定體積之媒劑(例如存於H₂O中之5%碳酸氫鈉、5%右旋糖)中，從而每一化合物之最終濃度適於以2mL/kg投用。儘管均質懸浮液可接受用於口服投藥，但在投藥之前無菌過濾靜脈內投藥溶液(0.2μm)以確保並不投與微粒。

在大鼠研究中，自Harlan實驗室(Indianapolis,IN)獲得8至10週齡之預插套管雄性斯普拉-道來(Sprague-Dawley)大鼠(3隻/途徑)。大鼠接受單一口服胃管灌食或單一靜脈內(經由側尾靜脈)劑量之投藥溶液。最終劑量通常為0.5-3mg/kg。經由植入頸靜脈中之套管在投藥後3分鐘、15分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、6小時及24小時收穫連續血樣。人工或使用自動化採樣儀實施採樣。將試樣收集至含有EDTA作為抗凝劑之微量採血管(microtainer tube)中且藉由冷凍離心處理成血漿。

在狗研究中，使安置於Agilux實驗室(Worcester,MA)且重7-12kg之雄性比格狗(3隻/途徑)接受單一口服胃管灌食或單一靜脈內(經由留置導管)劑量之投藥溶液。最終劑量通常為0.1-2mg/kg。經由直接靜脈穿刺在投藥後3分鐘、15分鐘、30分鐘、1小時、2小時、4小時、6小時、8小時、12小時及24小時收穫連續血樣。將所有試樣人工收集至含有EDTA作為抗凝劑之微量採血管中且藉由冷凍離心處理成血漿。

使用3體積含有適宜內標準品之MeCN提取血樣。將提取物重構至3體積含有1%甲酸之水中，且經由HPLC耦聯MS/MS分析。使用Phoenix軟體(Pharsight公司，St.Louis,MO)分析血漿濃度-時間數據以計算藥物動力學參數。

自靜脈內研究組測定血漿清除率，且代表血漿清除藥物之速率。其等於劑量除以血漿濃度-時間曲線下面積。除血漿清除外，經口投與之藥物在口服遞送後達成有效全身性含量亦較為重要。口服生物利用度係在經口投與後相對於靜脈內投與後之暴露之血漿暴露之量度。

大鼠藥物動力學數據

^a AUC_最後係自時間0至在投藥後觀察到最後可量化濃度之時間之血漿濃度對時間曲線下面積，其係藉由線性梯形方法來估計

^b CL_最後係劑量除以AUC_最後

^c口服生物利用度計算為經口投與後之AUC_最後除以靜脈內投與後之AUC_最後，出於所投與劑量之任一差異將其正規化且表示為百分比形式

此大鼠數據展示，本發明化合物(化合物1)具有高口服生物利用度(67%)。對比化合物C3及C4展現類似口服生物利用度(分別為60%及60%)。然而，對比化合物C2具有較低口服生物利用度(20%)。此大鼠數據亦展示，化合物1與對比化合物C3及C4相比具有類似之較低清除率(分別為0.83、0.60及0.67)。然而，對比化合物C2可極其快速地清除(平均CL_最後為1.7)。

為獲得化合物在人類中之行為方式(例如安全性及效能)之更具預測性測定，在第二動物物種中實施評估。

狗藥物動力學數據

*大約100%之生物利用度可涉及吸收、分佈及/或消除過程。

此狗數據展示，本發明化合物(化合物1)具有高口服生物利用度(>100%)及低血漿清除。儘管對比化合物C2展現類似口服生物利用度(99%)，但對比化合物C3及C4展現極低之口服生物利用度(分別為64%及42%)。另外，此狗數據亦展示，化合物1之清除率(0.29)低於所有三種對比化合物C2、C3及C4(分別為0.65、0.59及1.54)。

總而言之，化合物1在大鼠及狗中始終展現高口服生物利用度及低血漿清除。與之相比，對比化合物C2在大鼠中展現低於化合物1之生物利用度且在大鼠及狗中展現高於化合物1之血漿清除。對比化合物C3及C4儘管在大鼠中之口服生物利用度及清除與化合物1相當，但在狗中較化合物1展現較低口服生物利用度及較高清除。

分析3：清醒正常斯普拉-道來大鼠中之NEP活性之藥物動力學/藥效學(PK-PD)分析

將適當質量之每一測試化合物添加至一定體積之媒劑(例如存於H₂O中之5%碳酸氫鈉、5%右旋糖)中，從而每-化合物之最終濃度適於以2mL/kg投用。應注意，均質懸浮液可視為可接受用於口服投藥。

自Harlan實驗室(Indianapolis,IN)獲得8至10週齡之預插套管雄性斯普拉-道來大鼠(3隻/所評估化合物)。大鼠接受投藥溶液之單一口服胃管灌食。最終劑量通常在3-30mg/kg範圍內。經由植入頸靜脈中之套管在投藥後3分鐘、15分鐘、35分鐘、45分鐘、1小時、2小時、4小時、6小時及24小時收穫連續血樣。將試樣收集至含有EDTA作為抗凝劑之微量採血管中且藉由冷凍離心處理成血漿。在45分鐘、2小時、4小時、6小時及24小時試樣之前15分鐘，投與心房利鈉肽(ANP)之靜脈內濃注(30μg/kg)。若測試化合物成功地抑制腎胰島素殘基溶酶(ANP清除之一種關鍵媒介)，則所投與ANP將增加ANP之基礎含量，由此強化下游信號傳導。若測試化合物並不成功地抑制腎胰島素殘基溶酶，則循環ANP及下游信號傳導級聯之含量將在投與ANP濃注與獲取血樣之時間點之間的15分鐘期間返回其基礎狀態。因ANP與其受體之結合使得鳥苷酸環化酶發生活化且隨後產生環單磷酸鳥苷(cGMP)，故在經靜脈內投與ANP濃注之後15分鐘在血漿中觀察到升高之cGMP含量(>20nM)可詮釋為進行性腎胰島素殘基溶酶抑制之證據。在投藥之後24小時升高之血漿cGMP含量可指示持續時間藥理學效應，此類似於使用血漿清除值作為藥物動力學持續性之指示。

使用3體積含有適宜內標準品之MeCN提取血樣。將提取物重構至3體積含有1%甲酸之水中。藉由HPLC耦聯質譜檢測量化血樣中之血漿cGMP及測試化合物濃度。

^a三個測定之平均值

因此，與針對先前技術化合物C2、C3及C4所觀察相比，本發明化合物(化合物1)展現在投藥之後24hr cGMP之強化大2倍以上。

分析4：化合物1在猴中之IV/PO藥物動力學研究

使用適當質量存於一定體積媒劑(例如，對於口服途徑而言，存於H₂O中之5%碳酸氫鈉、5%右旋糖，pH 7.4；且對於靜脈內途徑而言，PEG200：EtOH：水(40：10：50)，pH 7.0，經由0.22μM PDVF注射器過濾)中之化合物1實施猴PK研究，從而以0.5mL/kg(靜脈內)或2.0mL/kg(口服)投用最終濃度。

使安置於Xenometrics(Stilwell,KS)之雄性食蟹猴(3隻/途徑)以1mg/kg接受靜脈內或口服劑量之化合物1。使投與靜脈內劑量之動物隨意進食且使彼等投與口服劑量者禁食過夜且在劑量投與之後大約4小時接受食物。在每一時間點(投藥前、0.083小時、0.25小時、0.5小時、1小時、2小時、4小時、6小時、8小時、12小時及24小時)經由頭靜脈、股靜脈或大隱靜脈在48小時內自每一動物收集血樣。將所有試樣收集至K₂EDTA管中且置於冰上。藉由離心(3200rpm，10分鐘，5℃)將試樣處理成血漿，且使用最終濃度為2%之乙酸酸化。將血漿等分試樣轉移至96孔板管中且在生物分析之前冷凍(-70℃)儲存。

藉由LC/MS/MS測定化合物1之血漿濃度。對血漿研究試樣實施渦旋且置於96孔板中。使用200μL存於乙腈中且含有內標準品之0.2%甲酸提取試樣。將提取物在3700RPM下離心10分鐘且將上清液與存於水中之0.2%甲酸混合。將試樣(15μL)注入至流速為0.3mL/min之Thermo(C18 50×2.1mm)管柱中。流動相A係由存於水中之0.2%甲酸組成且流動相B係由存於乙腈中之0.2%甲酸組成。梯度洗脫始於自0.5min.至1.5min.0%至95% B，自1.5min.至1.85min.保持於95% B，隨後自1.85min.至1.86min.係95%至0% B之梯度且止於2.6min。化合物1分析範圍為0.0005μg/mL至5μg/mL。藉由非分室分析(靜脈內及經口投與分別係模型201及模型200)使用Phoenix WinNonlin 6.3版(Certara,Sunnyvale,CA)且使用來自3隻動物之個別血漿濃度時間特徵來測定化合物1之藥物動力學參數。

猴藥物動力學數據

此數據展示，本發明化合物(化合物1)在雄性食蟹猴中具有高口服生物利用度(大約60%)及低血漿清除率(大約0.36)。此與自大鼠及狗物種所生成之生物利用度及清除率數據一致且類似。

分析5：化合物1在大鼠、狗及猴物種中之腎排泄

用於確保患者中之適當長期藥物投藥及正確穩態藥物濃度之重要因素係藥物清除率。一般而言，較低藥物清除率產生較高藥物濃度及較大藥物效應。為理解化合物1之腎清除率，在三種動物物種中評價在單一靜脈內劑量後在尿液中回收之所投與劑量之百分比。分別在雄性斯普拉-道來大鼠、雄性比格狗及雄性食蟹猴中實施三個單獨研究且程序及實驗結果闡述於下文中。

使體重為0.348kg至0.362kg之雄性斯普拉-道來大鼠(N=3)接受0.5mg/kg靜脈內劑量之化合物1作為投藥盒之一部分。將化合物1溶於存於D5W(存於水中之5%右旋糖中，pH 7.4)中之5% NaHCO₃中並經由0.22μM聚二氟乙烯(PVDF)注射器過濾器過濾，然後投與。使大鼠在投與化合物1之前及之後隨意進食。在代謝籠中收集尿樣且在收集期間維持於冷凍乾冰上。將試樣解凍且及記錄尿液體積。將尿樣之等分試樣轉移至聚丙烯儲存管中，冷凍且儲存(-80℃)，然後進行生物分析。

藉由LC/MS/MS測定化合物1之大鼠尿液濃度。將尿樣解凍且在大鼠K₂EDTA血漿中稀釋5倍。將經稀釋尿液之50μL等分試樣轉移至 96孔板中並使用200μL體積存於乙腈中且含有內標準品之2%甲酸提取。將96孔板在3700RPM下離心10分鐘且將上清液轉移至新96孔板中。在存於水中之0.2%甲酸中稀釋上清液(4倍稀釋)。將10或20μL體積注入Xbridge phenyl(21×50mm；5μ)管柱中。流動相A係由存於水中之0.2%甲酸組成且流動相B係由存於乙腈中之0.2%甲酸組成。梯度洗脫始於自0.5min至2.0min之20%至95% B，自2.0min.至2.2min.保持於95% B，隨後自2.2min.至2.3min.係95%至20% B之梯度且止於3.3min。化合物1分析範圍為0.00125μg/mL至25μg/mL。

使體重為9.04-10.2kg及10.8-11.5kg之雄性比格狗(N=6，兩組，每組3隻)以0.1mg/kg(組I)及1.255mg/kg(組II)接受化合物1之靜脈內劑量作為投藥盒之一部分。將化合物1溶於PEG-200：乙醇：水(40：10：50)中並經由0.22mM聚二氟乙烯(PVDF)注射器過濾器過濾，然後投與。使狗在投與化合物1之前及之後隨意進食。將尿樣收集於預填充0.5mL冰乙酸之預稱重容器中之冷裝中。將試樣再次稱重且視需要添加額外冰乙酸直至最終濃度為2%。將試樣冷凍且儲存(-80℃)，然後進行生物分析。

藉由LC/MS/MS測定化合物1之狗尿液濃度。對尿液研究試樣(稀釋於血漿K₂EDTA中(1：9))實施渦旋且將25μL置於96孔板中。使用100μL具有內標準品格列本脲(Glyburide)之乙腈提取試樣。將提取物在3100RPM下離心5分鐘且轉移75μL上清液並與150μL水混合。將試樣(12μL)注入流速為0.9mL/min之Waters Acquity UPLC BEH C18(50×2.1mm,1.7μm)管柱中。流動相A係由95：5：0.1(v：v：v)水：乙腈：甲酸組成且流動相B係由50：50：0.1(v：v：v)甲醇：乙腈：甲酸組成。梯度洗脫始於自0.2min至1.6min之35%至90% B，自1.7至2.2min.保持於95%，隨後自2.20min至2.30min係95%至35% B之步驟。化合物1分析範圍為0.000100μg/mL至1.00μg/mL。

使體重為4.42-5.81kg之雄性食蟹猴(N=3)接受1mg/kg靜脈內劑量之化合物1。將化合物1溶於PEG-200：乙醇：水(40：10：50)中並經由0.22mM聚二氟乙烯(PVDF)注射器過濾器過濾，然後投與。使猴在投與化合物1之前及之後隨意進食。在收集間隔時段期間將尿樣收集於無水冰上，記錄試樣體積，且使用乙酸將尿液酸化至最終乙酸濃度為大約2%。獲得等分試樣且冷凍(-70℃)，然後進行生物分析。

藉由LC/MS/MS測定化合物1之猴尿液濃度。將尿樣解凍且稀釋於血漿K₂EDTA中(1：4)。使用200μL存於乙腈中且含有內標準品之0.2%甲酸提取試樣。將提取物在3700RPM下離心10分鐘且將上清液與存於水中之0.2%甲酸混合。將試樣(15μL)注入流速為0.3mL/min之Thermo(C1850×2.1mm)管柱中。流動相A係由存於水中之0.2%甲酸組成且流動相B係由存於乙腈中之0.2%甲酸組成。梯度洗脫始於自0.5min至1.5min之0%至95% B，自1.5min至1.85min保持於95%，隨後自1.85min.至1.86min.係95%至0% B之梯度且止於2.6min。化合物1分析範圍為0.0025至25μg/mL。

在24hr收集時段中排泄之尿液之平均量及在尿液中排泄之所投與劑量之近似%報告於下表中。

^a三個測定之平均值

化合物1在大鼠中之腎排泄大約為所投與劑量之0.03%，在狗中大約為所投與劑量之1%至1.5%且在猴中大約為所投與劑量之3%。該等數據指示，化合物1在所測試之三種物種中具有低腎排泄。

儘管已參照本發明之具體態樣或實施例來闡述本發明，但彼等熟習此項技術者應理解，在不背離本發明之真實精神及範圍之情況下可作出各種改變或可取代等效內容。另外，根據適用專利法及條例所容許之程度，本文所引用之所有出版物、專利及專利申請案之全部內容皆以引用方式併入本文中，其併入程度如同每一文件皆單獨以引用方式併入本文中一般。

Claims

一種化合物，其具有以下結構：或其醫藥上可接受之鹽。
一種(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基-噁唑-2-羰基)胺基]戊酸。
一種(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基-噁唑-2-羰基)胺基]戊酸之結晶型。
如請求項3之結晶型，其中該結晶型之特徵在於在以下2θ值處包括繞射峰之粉末x射線繞射圖：8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、21.15±0.20及25.41±0.20。
如請求項3之結晶型，其中該結晶型之特徵在於在以下2θ值處包括繞射峰之粉末x射線繞射圖：7.51±0.20、8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、17.62±0.20、17.87±0.20、20.59±0.20、21.15±0.20、21.88±0.20、24.45±0.20、24.78±0.20、25.41±0.20、25.67±0.20、27.67±0.20及28.22±0.20。
如請求項5之結晶型，其中該結晶型之特徵進一步在於在選自以下之2θ值處具有一或多個其他繞射峰：16.09±0.20、18.70±0.20、19.21±0.20、19.40±0.20、21.64±0.20、22.25±0.20、26.43±0.20、28.55±0.20、30.73±0.20、 31.10±0.20、32.64±0.20、33.14±0.20及34.46±0.20。
如請求項3之結晶型，其中該結晶型之特徵在於峰位置實質上與在圖1中所展示圖案之峰位置一致之粉末x射線繞射圖。
如請求項3之結晶型，其中該結晶型之特徵在於以10℃/分鐘之加熱速率記錄之差示掃描量熱法跡線，其在介於約165℃與169℃之間之溫度下展示最大吸熱熱流。
如請求項3之結晶型，其中該結晶型之特徵在於實質上與在圖2中所展示者一致之差示掃描量熱法跡線。
一種醫藥組合物，其包括如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型及一或多種醫藥上可接受之載劑。
如請求項10之醫藥組合物，其中該醫藥上可接受之載劑係硬脂酸鎂。
一種醫藥組合物，其包括如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型及AT₁受體拮抗劑、血管收縮肽轉化酶抑制劑、磷酸二酯酶(PDE)抑制劑、腎素抑制劑、利尿劑或其組合及視情況一或多種醫藥上可接受之載劑。
一種口服劑型，其包括存於膠囊、錠劑、液體或懸浮液中之如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型。
如請求項13之口服劑型，其中如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型在個體中之釋放係立即、受控或延遲釋放。
如請求項13之口服劑型，其中該膠囊材料係明膠、多醣、幾丁聚醣(chitosan)或合成聚合物。
如請求項13之口服劑型，其中該硬質膠囊包括明膠、多醣或合成聚合物。
如請求項13之口服劑型，其中該膠囊包括羥丙基甲基纖維素。
一種靜脈內劑型，其包括存於經緩衝溶液中之如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型。
一種如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型之用途，其用以製造用於治療高血壓、心力衰竭或腎病之藥劑。
一種如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型之用途，其用以製造用於治療腎受損個體之藥劑。
如請求項20之用途，其中該腎受損個體患有估計腎小球濾過率(eGFR)介於60mL/min/1.73m²與15mL/min/1.73m²之間之慢性腎病。
一種如請求項1之化合物或如請求項3之結晶型之用途，其用以製造用於增加患有高血壓、心力衰竭或腎病之個體中之心房利鈉肽(ANP)或環單磷酸鳥苷(cGMP)含量之藥劑。
如請求項22之用途，其中ANP及cGMP之含量係在個體之尿液或血漿或二者中量測。
一種製備如請求項1之化合物之方法，該方法包括使(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯與2-甲基噁唑-2-甲酸進行偶合以得到如請求項1之化合物。
一種製備如請求項1之化合物之方法，該方法包括：(a)在N,N-二甲基甲醯胺(DMF)中組合2-甲基噁唑-2-甲酸及六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)脲鎓(HATU)，且在室溫下攪拌；(b)添加(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯及N,N-二異丙基乙胺，且在室溫下攪拌；(c)分離所得固體，且然後溶於無水乙醇及無水四氫呋喃中；(d)添加氫氧化鋰水溶液；及(e)分離該等所得固體以得到如請求項1之化合物。
如請求項25之方法，其中步驟(c)及(e)中之該等所得固體係藉由層析純化。
一種製備如請求項3之結晶型之方法，該方法包括：(a)將(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸溶於乙酸乙酯及己烷中，直至完全溶解；及(b)分離所得固體以得到該結晶型。
一種製備如請求項3之結晶型之方法，該方法包括：(a)使(2R,4R)-4-胺基-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基戊酸乙酯與5-甲基噁唑-2-甲酸鈉進行偶合以得到(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸；(b)使用乙酸乙酯及己烷處理(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟聯苯-4-基)-2-羥基-4-[(5-甲基噁唑-2-羰基)胺基]戊酸，直至完全溶解；及(c)分離所得固體以得到該結晶型。
如請求項1之化合物，其用於療法中。
如請求項29之化合物，其用於治療高血壓、肺高血壓、心力衰竭或腎病。
如請求項3之結晶型，其用於療法中。
如請求項3之結晶型，其用於治療高血壓、肺高血壓、心力衰竭或腎病。