TW201637647A - 清除過氧化氫之化妝品組合物 - Google Patents

Abstract

一種清除過氧化氫之化妝品組合物，其包括：一小茴香萃取液、一乙醇溶液、一舒緩劑混合物、一保濕劑混合物、一防腐劑混合物等組合而成。此組合物利用小茴香萃取液富含過氧化氫酶的特性，催化過氧化氫分解之反應，以達到加強抗氧化之效果；且藉由其他成分的搭配，可增強此組合物的經皮吸收率與降低此組合物的刺激性，但卻又不減其清除過氧化氫之功效。

Description

清除過氧化氫之化妝品組合物

本發明係關於一種清除過氧化氫之化妝品組合物，其可讓使 用者在保養肌膚的同時，一併溫和地去除堆積在肌膚細胞內的過氧化氫。

抗氧化一直為醫藥生技，保健食品甚至是化妝品所關心的議題，而抗氧化其實就是抗自由基。自由基為外層電子軌域具有單獨不成對電子的原子、分子、或離子，而由於電子不成對，所以自由基非常活耀且極度的不穩定，必須從外部獲得電子，使自己原本不成對的電子變成對而成為較穩定的分子，至於失去電子的分子則因此變成另一個不穩定的分子，再去搶奪其他分子的電子讓自己穩定，於是引起一連串的連鎖反應。而此攻擊生物體內其他分子的過程則稱為氧化壓力。

生物體內常見的自由基為含氧的自由基，又稱為活性氧(Reactive oxygen species,ROS)，例如氫氧自由基(hydroxyl radical,OH‧)、超氧陰離子(Superoxide anion,O₂‧-)等；及其他和氧有關的自由基，如過氧化氫(H₂O₂)，而氫氧自由基(OH‧)，為最強的氧化劑，由過氧化氫與超氧自由基反應。如下反應式：H₂O₂+O₂‧- → HO‧+OH-+O₂

過氧化氫在自由基的產生中為一個關鍵的角色，並且過氧化氫和過氧化物為近年來研究的焦點，主要是因為在細胞中，過氧化物很快的轉變為過氧化氫，而過氧化氫為法國科學家Louis Jacques The'nard在1818 年所發現，並且高濃度的過氧化氫會傷害DNA及脂質，進而造成細胞傷害，同樣的，增加的ROS也會促進細胞死亡、皮膚老化甚至嚴重時還會使皮膚細胞產生癌變，造成皮膚癌。

市面上常見的抗氧化化妝品主要是利用添加抗氧化劑來達到其訴求。一般來說，抗氧化劑可分為內源性和外源性，內源性抗氧化劑指的是人體可以自行產生，主要是谷胱甘肽抗氧化酶(Selenium,glutathione peroxidase；GSH-Px)、超氧化歧化酶(Superoxide dismutase；SOD)及過氧化氫酶(Catalase)等。而外源性抗氧化劑則是人體無法自行合成的，最常見的為維他命E(Vitamin E；tocopherol)，其為最強的脂溶性抗氧化劑，可以抑制細胞膜的過氧化，還可以和自由基反應形成Radical tocopheryl，阻止細胞膜上脂質的連鎖反應(Chain reaction)，另外還有維他命C(Vitamin C)，其為水溶性的強抗氧化劑。其他常見的還有β胡蘿蔔素(β-carotene)、番茄紅素(Lycopene)及茶多酚(Tea Polyphenols)等。

因仿間並無特別針對清除或抗過氧化氫之化妝品相關產品，而本發明之化妝品組合物添加含過氧化氫酶之小茴香萃取液。過氧化氫酶為一種廣泛存在於各類生物體中的酶，其作用是催化過氧化氫轉化為水和氧氣的反應。

2 H₂O₂ → 2 H₂O+O₂

過氧化氫為人體中自然產生的物質，在正常含量下，細胞仍可維持正常生理功能，且其在自由基中也屬於活性較小的，但是一旦超過一定的含量，對人體造成的傷害也不可忽視，而大多數的人並不瞭解過氧 化氫是活性氧群中最具危害性者，因為它會以較多的方式，影響細胞生理作用。過氧化氫，能與脂質類起化學反應，而形成自體繁殖的脂質過氧化物。它會鈍化含硫氫基酶類的活性。最後，過氧化氫在與氧產生化學反應後，就會形成氫氧自由基類物質。

一般來說，皮膚主要所受到的氧化壓力來自於暴露於UV照射下。UVB輻射(290-320nm)會被一些表皮層上的發色基團所吸收，像是黑色素(Melanin)和尿刊酸(Urocanic acid)，其會藉由產生自由基，造成許多細胞傷害。而在過氧化氫的存在下，UVB輻射會導致氫氧自由基的形成，造成DNA傷害。而UVA則會穿透至真皮層，增加ROS的產生，而造成長期的傷害。UVA和UVB都會引發皮膚細胞轉錄因子的活化，像是NF-κb，接著會造成基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases；MMPs)增加，而其則會降解皮膚中的膠原蛋白(Collagen)和彈性素(Elastin)。

2009年，英國布萊佛德大學發現，物質氧化分解過程產生的過氧化氫，會由人體生成之過氧化氫酶分解成水和氧，但隨著年紀增長，過氧化氫酶的製造趨緩，使得過多的過氧化氫堆積，因而干擾黑色素生成使得頭髮變白。

在黑色素生成的過程中，體內所產生的過氧化氫最終會導致頭髮毛囊黑色素細胞的細胞凋亡及DNA傷害。低濃度(<0.3x10^-3M)的過氧化氫可以活化許多相關於毛髮中黑色素形成的酵素之蛋白質轉錄，包括過氧化氫酶、酪胺酸脢(Tyrosinase)、甲硫胺酸硫氧化物還原酶A及B(Methionine sulfoxide reductases A及B；MSRA and MSRB)。然而高濃度(>0.3x10^-3M)的過氧化氫卻會造成蛋白質序列上三個胺基酸，甲硫胺酸 (Methionine；Met)、半胱胺酸(Cysteine；Cys)及色胺酸(Tryptophan；Trp)的氧化，改變其三級結構，進而影響其酵素活性，尤其是Met374的氧化，其為酪胺酸脢活化位上的一個關鍵胺基酸，而這些將會進而干擾頭髮顏色的形成。

小茴香(Foeniculum vulgare)為傳統中藥中常使用之，常使用來治療消化、內分泌、生殖及呼吸系通相關之疾病，亦可用做於催乳劑，其能刺激雌激素受體而出名。

就如同所有具代謝活性的植物組織一樣，小茴香含有大量的抗氧化物，亦有文獻紀載其種子萃取成分中含有抗氧化物(Assessment of Free Radical Scavenging Potential and Oxidative DNA Damage Preventive Activity of Trachyspermum ammi L.(Carom)and Foeniculum vulgare Mill.(Fennel)Seed Extracts,BioMed Research International,Volume 2014,8 pages)。而此所使用之小茴香萃取液中更含有氧化物酶類：如超氧化歧化酶、觸媒、及非特異性過氧化物酶類。不同於傳統的抗氧化物類，酶促抗氧化物類，在中和活性氧群的過程中，是不會被消耗掉的。

本發明提供一種含小茴香萃取液之化妝品組合物，在經過多重試驗及測試後，小茴香萃取液之用量範圍須介於重量百分比1%至20%之間最為理想，及10%至20%效果更佳。

如上所述，小茴香萃取液必須能均勻地溶解於本創作係清除過氧化氫化粧品組合物中，才可發揮其功效，並維持小茴香萃取液在本創作組合物中的穩定性。因此，本創作組合物中另含有一乙醇溶液，其主要功能除了增強在本創作係清除過氧化氫化粧品組合物的經皮吸收率外，也 增強其他成分在本創作係清除過氧化氫化粧品組合物中的溶解度。

適用於本創作係清除過氧化氫化粧品組合物作為乙醇溶液之實例，其乙醇之來源可分為化學合成或植物發酵，其中化學合成之乙醇包含(但不限於此)：甘蔗(Sugar Cane)、葡萄(Grape)、甘藷(Sweet Potato)、玉米(Corn)、馬鈴薯(Potato)、稻米(Rice)、小米(Millet)、小麥(Wheat)、大麥(Barley)及高粱(Sorghum)。

為降低本創作係清除過氧化氫化粧品組合物的整體刺激性，在本創作組合物中添加舒緩抗敏劑，此舒緩抗敏劑包括(但不限於此)：尿素(Urea)、菸鹼醯酸及其衍生物(Niacinamide and its derivatives)、維生素B7(Biotin)、尿囊素(Allantoin)、黃酮素(Flavanoids)、酯化維他命C(Ascorbyl Pamitate)、薄荷腦(Menthol)、甜沒藥(Bisabolol)、甘菊藍(Azulene)、生物鹼(Boldine)、甘草酸二鉀(Dipotassium Glycyrrhizate)、蘆薈萃取物(Aloe Vera Extract)、金盞花萃取物(Calendula Extract)、山金車萃取物(Arnica Extract)、洋甘菊萃取物(Chamomile Extract)、矢車菊萃取物(Cornflower Extract)、天竺葵萃取物(Geranium Extract)、金縷梅萃取物(Hamanelis Extract)、甘草萃取物(Licorice Extract)、小黃瓜萃取物(Cucumber Extract)及其組合而成。

為提升本創作係清除過氧化氫化粧品組合物的整體保濕性，在本創作組合物中添加保濕劑，此保濕劑包括(但不限於此)：維他命原B5(Panthenol)、尿素(Urea)、硫酸鹽軟骨素(Chondroitin Sulfate)、甜菜鹼(Betaine)、玻尿酸(Hyaluronic acid)、天然保濕因子(Sodium PCA)、維他命B6(Pyridoxine)、山梨糖醇(Sorbitol)、生化醣醛酸(Sodium Hyaluronate)、銀杏萃取液(Ginkgo Extract)、甘草酸胺(Ammonium Glycyrrhizate)、小黃瓜萃取物(Cucumber Extract)、蘆薈萃取物(Aloe Vera Extract)、醣基海藻糖(Glycosyl Trehalose)、多元醇類及其組合而成。

本發明藉由以下實施例進一步描述小茴香萃取液具有清除過氧化氫之能力。

分光光度法測定過氧化氫之含量

過氧化氫在酸性條件下會和鈦離子生成穩定的黃橙色化合物，反應式如下：Ti⁺⁴+H₂O₂→H₂TiO₄+4H⁺。利用分光光度計檢測其吸光值，且其吸光值和過氧化氫在一定範圍內會形成線性曲線，並利用此作為標準曲線則可計算出樣品中的過氧化氫濃度。

測量儀器：ChromTech CT-2800 Spectrophotometer

儀器商：GREAT TIDE INSTRUMENT CO.LTD

簡介：紫外可見分光光度法是根據被測物質分子對紫外可見波段範圍單色輻射的吸收或反射強度來進行物質的定性、定量或結構分析的一種方法。

朗伯-比爾定律(Lambert-Beer)是幾乎所有的光學分析儀器的基本工作原理，它由朗伯定律和比爾定律合併而成。朗伯定律表明，如果體積的濃度一定，則光對物質的吸收程度與它通過的溶液厚度成正比。比爾定律表明：如果吸光物質溶於不吸光的溶劑中，則吸光度和吸光物質的濃 度成正比。兩者合成後的數學表達式如下：

T=I/I₀

A=KCL=-log I/I_O

其中 T=透光率

A=吸光度

C=溶液體積

K=溶液的吸光係數

L=液層在光路中的長度

I=光透過被測式樣後照射到光電轉換器上的強度

I₀=光透過參比式樣後照射到光電轉換器上強度

試劑製備：

1.鈦溶液：稱取二氧化鈦(TiO₂)1.0g及硫酸銨((NH₄)₂SO₄)4.0g於250ml的三角錐形瓶中，加入硫酸(H₂SO₄)100ml，置於加熱板上，控溫在150℃下加熱15個小時，冷卻至室溫後加入400ml的水，存放於血清瓶中待用。

2.過氧化氫標準溶液：利用35%之過氧化氫溶液配置0.1mg/ml的過氧化氫標準溶液500ml。

實驗流程：

一、標準曲線繪製：在不同的定量瓶中分別加入過氧化氫標準溶液0、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml，加水至10ml，各加入鈦溶液5ml，再加水10ml，於室溫下放置30min。在分光光度計410nm下，用1公分比色管，分別測其吸光度(如表1)。利用Excel以吸光度對 過氧化氫的含量，繪製標準曲線(如圖一)，由圖上可見，相關係數R²=0.9998，其相當趨近1，表示其迴歸資料非常接近直線。

二、萃取液樣品測定：

1.配製小茴香萃取液溶液10mg/ml，至於攪拌機上放入磁石攪拌20分鐘至30分鐘。：在不同的定量瓶中分別加入小茴香萃取液溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0及10ml，各加入過氧化氫溶液3ml，於室溫下放置所需時間(此所測試時間分別為10分鐘、30分鐘、1小時及1.5小時)，之後分別加入鈦溶液5ml，再加水定量至25ml，於室溫下放置30分鐘。在分光光度計410nm下，用1公分比色管，分別測其吸光度。

2.結果：將所測得吸光值之平均值帶入標準曲線計算得結果 如表2，再將小茴香萃取液溶液對於過氧化氫之清除效果計算其百分率(過氧化氫清除率計算公式如下)如表3，並將其繪製折線圖如圖二。當僅反應10分鐘，其萃取液溶液加到8ml以上時，清除率已達到50%，反應至1小時後，此溶液僅加到4ml時，清除率即可達到90%以上，而當反應1.5小時時，加入6ml的萃取液溶液取液，其清除過氧化氫的效果幾乎接近於100%，充分顯示出該萃取液清除過氧化氫的優越效果。

過氧化氫清除率計算公式

H₂O_2control=未加萃取液之3ml過氧化氫溶液其吸光值帶入檢量線計算所得之值

H₂O_2sample=加入萃取液溶液及3ml過氧化氫溶液吸光值帶入檢量線計算所得之值

三、將小茴香萃取液製作成化妝品配方進行測定：

1.所使用之測試配方為表4，所使用之酒精量分別為0%、10%、20%及40%，以測試小茴香萃取液中之酵素是否會被酒精所影響，或是其若會被酒精所影響，不同酒精濃度下其效果會如何變化。

2.結果：將無酒精、10%酒精、20%酒精及40%酒精配方樣品在不同使用量下(0.25、0.5、1.0及2.0ml)加入3ml過氧化氫溶液且不同反應時間點下(10分鐘、0.5小時、1小時及8小時)所測得吸光值之平均值帶入標準曲線計算得結果如表5至表9，對於過氧化氫之清除效果計算其百分率如表10至表13，並將其繪製直條圖如圖三至圖六。

表5所紀錄為無萃取液及無酒精之配方加入3ml之過氧化氫溶液反應1小時後其吸光值變化帶入檢量線計算後所得之值，結果可看出配方中除了小茴香萃取液之外，其他的成分均不會影響過氧化氫的清除效果。而在無酒精配方下，當樣品加入0.25、0.5、1.0及2.0ml時，使其反應1小後，其過氧化氫清除率為91.5%、98.1%、98.7%及99.0%，幾乎已達到完 全清除的效果，效果如同萃取液樣品測試結果一般優越。

但若是使用於化妝品噴霧配方中勢必加入酒精，在此發明中分別進行10%、20%及40%酒精之測試，而以10%酒精配方來看，當配方使用0.25ml、0.5ml、1.0ml及2.0ml時，樣品僅反應10分鐘，其過氧化氫清除率為16.8%、20.5%、27.3%及39.2%，而8小時後，其過氧化氫清除率為28.9%、37.6%、59.4%及100%，可明顯看出其清除過氧化氫之效果隨著使用量的增加而增加，效果也隨著時間的增加而增加，而其他酒精濃度的配方也有此現象。另外將10%、20%及40%酒精配方樣品反應8小時後之結果整理於圖七，清楚顯示出其過氧化氫清除率隨著使用量增加而增加，並且也隨著酒精濃度的增加而降低，而在其他的時間點下也有此現象，可以得知酒精濃度的多寡會影響其萃取液的作用。

總結實驗結果，可知道過氧化氫清除效果會隨著配方所加入量及反應時間的增加而增加，但是會隨著酒精的濃度增加而減少，故配方所使用之酒精含量需顧慮到其對過氧化氫清除率之影響性、配方類型、使用情境及使用量等。

Claims (5)

1. 一種清除過氧化氫化粧品組合物，其包括：一小茴香萃取液取重量百分比1%-15%；一乙醇溶液取重量百分比0%-40%；一舒緩抗敏劑混合物取重量百分比0.2%-6%；及一保濕劑混合物取重量百分比1%-10%。
2. 如申請專利範圍第1項所述之清除過氧化氫化粧品組合物，其中乙醇溶液其原料來源係選自合成工業酒精、合成藥品級酒精、或是經由甘蔗(Sugar Cane)、葡萄(Grape)、甘藷(Sweet Potato)、玉米(Corn)、馬鈴薯(Potato)、稻米(Rice)、小米(Millet)、小麥(Wheat)、大麥(Barley)及高粱(Sorghum)等天然植物發酵所製得。
3. 如申請專利範圍第1項所述之清除過氧化氫化粧品組合物，其中舒緩抗敏劑混合物係選自尿素(Urea)、菸鹼醯酸及其衍生物(Niacinamide and its derivatives)、維生素B7(Biotin)、尿囊素(Allantoin)、黃酮素(Flavanoids)、酯性維他命C(Ascorbyl Pamitate)、薄荷腦(Menthol)、甜沒藥(Bisabolol)、甘菊藍(Azulene)、生物鹼(Boldine)、甘草酸二鉀(Dipotassium Glycyrrhizate)、蘆薈萃取物(Aloe Vera Extract)、金盞花萃取物(Calendula Extract)、山金車萃取物(Arnica Extract)、洋甘菊萃取物(Chamomile Extract)、矢車菊萃取物(Cornflower Extract)、天竺葵萃取物(Geranium Extract)、金縷梅萃取物(Hamanelis Extract)、甘草萃取物(Licorice Extract)、小黃瓜萃取物(Cucumber Extract)等組合而成。
4. 如申請專利範圍第1項所述之清除過氧化氫化粧品組合物，其中保濕劑混合物係選自維他命原B5(Panthenol)、尿素(Urea)、硫酸鹽軟骨素(Chondroitin Sulfate)、甜菜鹼(Betaine)、玻尿酸(Hyaluronic acid)、天然保濕因子(Sodium PCA)、維他命B6(Pyridoxine)、山梨糖醇(Sorbitol)、生化醣醛酸(Sodium Hyaluronate)、銀杏萃取液(Ginkgo Extract)、甘草酸胺(Ammonium Glycyrrhizate)、小黃瓜萃取物(Cucumber Extract)、蘆薈萃取物(Aloe Vera Extract)、醣基海藻糖(Glycosyl Trehalose)及多元醇類等組合而成。
5. 如申請專利範圍第1項所述之清除過氧化氫化粧品組合物，其中防腐劑混合物係選自苯氧乙醇(Phenoxyethanol)、苯甲酸鈉(Sodium Benzoate)、苯甲酸(Benzoic acid)、己二稀酸鉀(Potassium Sorbate)、己二烯酸(Sorbic Acid)、甲基異噻唑啉酮(Methylisothiazolinone)、碘丙炔醇丁基氨甲酸酯(Iodopropynyl Butylcarbamate)、對羥基苯甲酸異丁酯(Isobutylparaben)、對羥基苯甲酸丁酯(Butylparaben)、對羥基苯甲酸甲酯(Methylparaben)、對羥基苯甲酸異丙酯(Isopropylparaben)及對羥基苯甲酸丙酯(Propylparaben)等組合而成。