TW201439091A

TW201439091A - 吡啶基吡唑并喹啉化合物

Info

Publication number: TW201439091A
Application number: TW103112618A
Authority: TW
Inventors: Yoshihiko Norimine; Nobuaki Sato; Yuki Ishihara; Kunitoshi Takeda
Original assignee: Eisai R&D Man Co Ltd
Priority date: 2013-04-05
Filing date: 2014-04-03
Publication date: 2014-10-16
Also published as: EP2982674A4; CA2904820C; ZA201507044B; EP2982674A1; IL241695B; CL2015002837A1; BR112015024075A2; US20160289225A1; AU2014250391A1; MX2015013446A; KR102234131B1; ES2654094T3; CA2904820A1; EP2982674B1; WO2014163146A1; SG11201507733YA; HK1219100A1; CN105189496A; RU2015140669A; JPWO2014163146A1

Abstract

一種由式(I)表示之化合物，或其藥學上可接受的鹽：□其中R1係由以下式表示之基團：□由以下式表示之基團：□或由以下式表示之基團：□並且R2係3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基基團或4-甲氧基環己基基團。

Description

吡啶基吡唑并喹啉化合物

本發明係關於針對磷酸二酯酶9(PDE9)具有抑制活性之吡啶基吡唑并喹啉化合物及其藥學上可接受之鹽及其藥學應用。

已知在細胞內作為第二傳訊者而發揮作用的環鳥苷單磷酸(以下稱為cGMP)對包括學習和記憶行為的各種生理功能發揮重要作用。

在腦神經迴路的突觸後部，藉由一氧化氮合酶而生物合成之一氧化氮(以下稱為NO)將作為cGMP合成酶之鳥苷酸環化酶活化。經活化的鳥苷酸環化酶從鳥苷三磷酸而生物合成cGMP。cGMP將cGMP依賴性蛋白激酶(以下稱為PKG)活化，從而將參與突觸可塑性的各種蛋白質磷酸化。已知，該NO/cGMP/PKG級聯之活化參與已知為學習和記憶行為的神經基礎的海馬迴之突觸可塑性(Long Term Potentiation(長效增益)，以下稱為LTP)之誘發(例如參見非專利文獻1)。已知活化該級聯之信號傳遞之藥物可改善海馬迴之LTP以及動物之學習行為，另一方面，已知抑制該級聯之藥物顯示出與上述改善作用相反之作用(非專利文獻2)。因此，從該等發現，可預期腦內cGMP上升會改善學習和記憶行為。

cGMP藉由磷酸二酯酶(以下稱為PDE)代謝為不具有PKG活化作用的5'-GMP。已知PDE有11種家族，並且已知PDE9特異性代謝cGMP，且在腦、脾臟、小腸等中表現(例如參照非專利文獻3)。即，藉由抑制PDE9，可預期在腦內增加cGMP。報告了實際上PDE9抑制劑使海馬迴LTP提高，並且改善了在動物中的新穎物體識別試驗/被動回避學習試驗或類似試驗中的學習和記憶行為(非專利文獻4)。在臨床上，鳥苷酸環化酶活性降低，並且指示了阿茲海默(Alzheimer)氏病患者的顳上皮質中cGMP水平下降的可能性(非專利文獻5)。因此，PDE9具有與許多神經變性疾病和精神疾病(特別是阿茲海默氏病的認知功能障礙等)的病理學密切相關的可能性，該等疾病係例如亞歷山大病(Alexander's disease)、阿皮爾斯病(Alpers' disease)、阿茲海默氏病、肌肉萎縮性側索硬化症(ALS，作為路蓋裡格氏病(Lou Gehrig disease)或運動神經元病而為人知)、毛細血管擴張性運動失調、貝敦氏症(也作為斯皮爾梅伊爾-沃格特-舍葛籣-巴騰(Spielmeyer-Vogt-Sjogren-Batten)氏症而為人知)、賓斯汪格失智症(皮質下動脈硬化性腦障礙)、躁郁症、牛海綿狀腦病(BSE)、康納丸氏病(Canavan's disease)、化學療法誘發失智症、柯凱因氏症候群(Cockayne Syndrome)、大腦皮質基底核退化症、克賈氏病、抑鬱症、唐氏綜合症、額顳葉退化症(包括額顳葉型失智症、語意性失智症及進行性非流暢型失語症)、吉斯特曼-斯召斯列綜合征(GSS)、青光眼、亨丁頓氏症(舞踏病)、HIV相關失智症、行動癖(tasikinesia)、甘迺迪氏症(Kennedy Disease)、科爾薩科夫氏症候群(Korsakoff' Syndrome)(健忘-虛談症候群)、克拉貝氏症(Krabbe disease)、路易體癡呆、進行性原髮型失語症(progressive logopenic aphasia)、馬卡多-約瑟夫氏病(Machado-Joseph disease)(第3型脊髓小腦失調)、多發性硬化症、多發性萎縮症(橄欖體橋腦小腦萎縮症)、重症肌無力症、帕金森氏病、佩梅氏病、匹克氏病(Pick disease)、初老年期失智症(輕度認知障礙)、原發性側索硬化症、原發性進行性失語症、放射性誘發失智症、雷夫蘇姆氏病症(Refsum disease)(植烷酸貯積症)、山德霍夫氏病(Sandhoff disease)、謝耳德病(Schilder disease)、精神分裂症、語意性失智症、老年失智症、希-德二氏症候群(Shy-Drager syndrome)、脊髓小腦失調、棘肌萎縮症、斯蒂爾-理查森-奧爾謝夫斯基(Steele-Richardson-Olszewski)氏病(進行性核上麻痹)、血管澱粉樣變性(vascular amyloidosis)及血管性失智症(多發梗塞性失智症)。

最近，已知有具有PDE9抑制活性，且以阿茲海默氏病的預防或治療為目的之以下化合物(專利文獻1)。

以上化合物係吡唑并嘧啶衍生物，以及一具有與吡唑并喹啉骨架完全不同結構之化合物。

另一方面，作為具有吡唑并喹啉骨架的化合物，已知專利文獻2中所描述的以下化合物。

其中，環A為苯環或類似物；並且R⁶為直接鍵或類似物。

然而，以上化合物中環B表示苯環或類似物。據述以上化合物具有針對PDE4的抑制活性並且被用於各種炎症性疾病，但關於針對PDE9的抑制活性等，既無描述也無暗示。

作為具有PDE9抑制活性的化合物，已知專利文獻3和專利文獻4中描述了以下化合物。

以上化合物中任一者均為喹喔啉衍生物，並且是具有與吡唑并喹啉骨架完全不同結構之化合物。

作為一具有吡唑并喹啉骨架並且具有PDE9抑制活性之化合物，已知專利文獻5中所描述的以下化合物。

其中，R¹與R²任一者係由下式表示的基團

由於以上化合物的結構受限於R¹與R²，因此該化合物係具有與本發明化合物完全不同結構之化合物。

[先前技術文獻]

[專利文獻]

[專利文獻1]WO 2008/139293號

[專利文獻2]WO 2007/032466號

[專利文獻3]WO 2008/072779號

[專利文獻4]WO 2010/101230號

[專利文獻5]WO 2012/033144

[非專利文獻]

[非專利文獻1]Domek-Lopacinska(多梅克-洛派克辛斯卡)等人，"Cyclic GMP metabolism and its role in brain physiology"(環狀的GMP代謝以及其在腦生理學中的作用)，J. Physiol Pharmacol.(生理學和藥理學雜誌)，56卷，增刊2：第15-34頁，2005。

[非專利文獻2]Wang X.(王X.),"Cyclic GMP-dependent protein kinase and cellular signaling in the nervous system"(環狀GMP依賴性蛋白激酶以及神經系統中的細胞信號轉導)，J. Neurocem.(神經化學雜誌)，68卷，第443-456頁，1997。

[非專利文獻3]Fisher(費舍爾)等人，"Isolation and characterization of PDE9A, a novel human cGMP-specific phosphodiesterase"(PDE9A，一種新穎的人cGMP-特異性磷酸二酯酶的分離和表徵)，J. Biol. Chem.(生物化學雜誌)，273卷：第15559-15564頁，1998。

[非專利文獻4]van der Staay(萬德爾斯德)等人，"The novel selective PDE9 inhibitor BAY 73-6691 improves learning and memory in rodents"(新穎的選擇性PDE9抑制劑BAY 73-6691提高了齧齒動物的學習和記憶)，Neuropharmacology(神經藥理學)，55卷：第908-918頁，2008。

[非專利文獻5]Bonkale(彭克來)等人，"Reduced nitric oxide responsive soluble guanylyl cyclase activity in the superior temporal cortex of patients with Alzheimer's disease"(具有阿茲海默氏病患者的顳上皮質中降低的一氧化氮回應的可溶性鳥苷醯基環化酶活性)， Neurosci. Lett.(神經科學快報)，187卷，第5-8頁，1995。

本發明的目的係提供一種具有PDE9抑制作用之新穎化合物或其藥學上可接受的鹽，以及含有該等之藥物組合物。

作為用於解決上述問題反復詳盡研究之結果，諸位發明人發現了一種具有PDE9抑制作用之新穎吡啶基吡唑并喹啉化合物或其藥學上可接受的鹽。

即，本發明涉及以下<1>至<14>。

<1>一種由式(I)表示之化合物，或其藥學上可接受的鹽：

其中R¹係由以下式表示之基團：

由以下式表示之基團：

或由以下式表示之基團：[化10]

並且R²係3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基基團或4-甲氧基環己基基團。

<2>根據<1>所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物由式(II)表示：

其中R³係由以下式表示之基團：

或由以下式表示之基團：

<3>根據<1>所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物由式(III)表示：

其中R²係3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基基團或4-甲氧基環己基基團。

<4>(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)或其藥學上可接受的鹽：

<5>(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)或其藥學上可接受的鹽：

<6>(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)或其藥學上可接受的鹽：

<7>(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)或其藥學上可接受的鹽：

<8>7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(反式-4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮或其藥學上可接受的鹽：

<9>一種藥物組合物，包括根據<1>所述之化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分。

<10>根據<9>所述之藥物組合物，該組合物係PDE9抑制劑。

<11>根據<9>所述之藥物組合物，用於提高大腦內cGMP濃度。

<12>一種阿茲海默氏病中改善認知功能障礙之藥劑，包含根據<1>所述之化合物或其藥學上可接受的鹽。

<13>一種改善阿茲海默氏病中認知功能障礙之方法，包括將根據<1>所述之化合物或其藥學上可接受的鹽給予一患者。

<14>根據<1>所述之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於改善阿茲海默氏病中認知功能障礙。

如下述藥理測試實例的活性數據所示，根據本發明的式(I)所表示之吡啶基吡唑并喹啉化合物(以下稱為化合物(I))或其藥學上可接受的鹽具有PDE9抑制作用。作為PDE9抑制作用，本發明之化合物(I)幾乎均顯示1000nM或以下的IC₅₀值，較佳的是顯示100nM或以下的IC₅₀值的化合物。

根據本發明之化合物(I)具有PDE9抑制作用，這樣使得可以預料使腦內的cGMP濃度上升。PDE9抑制作用和cGMP的上升導致了學習和記憶行為之改善，並且化合物(I)具有用於阿茲海默氏病的認知功能障礙等的治療劑之潛在用途。

以下將對本發明的內容進行詳細說明。

貫穿本說明書，為方便起見，化合物的結構式僅僅表示一特定的異構物，但本發明包括化合物的結構暗示的全部異構物，例如幾何異構物、光學異構物、立體異構物和互變異構物以及其異體物混合物，並且因此該等化合物可以是該等異構物中的任一種或其處於任何所希望的比例的混合物，而並不受限於為方便起見所示的化學式。因此，例如，本發明的化合物能夠以光學活性形式或消旋體混合物存在，所有該等根據本發明均包含在內而非進行限制，並且無論消旋混合物或光學活性形式，它們可以用作以任何所希望的比率與光學活性的形式的混合物。然而，應理解的是某些異構物或異構物的消旋混合物或其他混合物可以表現地比其他的更加有活性。

還可以存在多晶形晶體，並且可以沒有任何限制地使用任何晶型或其混合物、以及非晶相形式，並且本發明的化合物還包括無水物和溶劑化物(尤其是水合物)兩者。

本發明中還包含化合物(I)的經同位素標記的化合物。經同位素標記的化合物除一個或多個原子經具有與自然界中常見的原子質量或質量數不同的原子質量或質量數的原子取代以外，與化合物(I)相同。可結合到根據本發明之化合物中的同位素係例如為氫、碳、氮、氧、氟、磷、硫、碘及氯的同位素，並且包括²H、³H、¹¹C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁸F、³²P、³⁵S、¹²³I以及¹²⁵I。

以上同位素標記的化合物，例如結合有像³H和/或¹⁴C的放射性同位素之化合物對醫藥和/或底物的組織分佈測定有用。認為³H和¹⁴C因其製備與檢測的容易性而有用。同位素¹¹C和¹⁸F被認為在PET(正電子發射斷層掃描)中是有用的；並且同位素¹²⁵I被認為在SPECT(單光子發射電腦化斷層掃描)中是有用的，並且所有的在腦成像中都是有用的。由一較重的同位素諸如²H替代，由於更高的代謝穩定性，引起某些類型的治療優勢，包括體內半衰期的延長或必須劑量的減少，並因此被認為在某些情況下是有用的。以上同位素標記化合物可類似地使用易於利用的經同位素標記的試劑代替未經同位素標記的試劑，藉由進行以下實例所揭露之程序而製備。

以下，將對本說明書中的術語、符號等的含義進行說明，並且對本發明進行詳細說明。

下面將解釋在由式(I)表示之化合物中R¹和R²之定義和較佳實例。

R¹係由以下式表示之基團：由以下式表示之基團：或由以下式表示之基團：

R²係3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基基團或4-甲氧基環己基基團。

本說明書中的「藥學上可接受的鹽」並無特別限定，只要為與根據本發明之化合物形成之鹽，並且具體實例包括無機酸鹽、有機酸鹽、無機鹼鹽、有機鹼鹽、以及酸性或鹼性胺基酸鹽。

除非有任何特別限定的說明，只要本說明書中的「藥學上可接受的鹽」係以適當的比例形成的鹽，則在形成的鹽中，相對於1分子該化合物的酸的分子數儘管無特別限定，較佳的是相對於1分子該化合物，酸為約0.1至約5分子，更佳的是相對於1分子該化合物，酸為約0.5至約2分子，並且仍然更佳的是相對於1分子該化合物，酸為約0.5、約1、或約2分子。

無機酸鹽的較佳的實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、以及磷酸鹽；並且有機酸鹽的較佳的實例包括乙酸鹽、琥珀酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、硬脂酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、以及苯磺酸鹽。

無機鹼鹽的較佳的實例包括鹼金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)，鹼土金屬鹽(例如鈣鹽和鎂鹽)，鋁鹽以及銨鹽；並且有機鹼鹽的較佳的實例包括二乙基胺鹽、二乙醇胺鹽、葡甲胺鹽和N,N'-二苄基乙二胺鹽。

酸性胺基酸鹽的較佳的實例包括天冬氨酸鹽和谷氨酸鹽，並且鹼性胺基酸鹽的較佳的實例包括精氨酸鹽、賴氨酸鹽和鳥氨酸鹽。

[藥物製備]

根據本發明式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽可以藉由一種常規方法在藥學上製備，並且劑型可以是例如口服製劑(如片劑、顆粒劑、粉劑、膠囊劑、糖漿或類似物)、注射劑(用於靜脈內給藥、肌肉內給藥、皮下給藥、腹膜內給藥及其他)、或外用製劑(如可經皮作用的製劑(包括藥膏、貼片和類似物)、滴眼劑(eyedrop)、滴鼻劑、栓劑和類似物)。

在生產一口服固體製劑情況下，向該式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽(根據需要)加入一賦形劑、黏合劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑等，並且可以藉由常規的方法生產一片劑、顆粒劑、粉劑和膠囊劑。根據需要可將片劑、顆粒劑、粉劑、膠囊劑等塗膜。

賦形劑的實例包括乳糖、玉米澱粉和結晶纖維素；黏合劑的實例包括羥丙基纖維素和羥丙基甲基纖維素；崩解劑的實例包括羧甲基纖維素鈣和交聯羧甲纖維素鈉；滑潤劑的實例包括硬脂酸鎂和硬脂酸鈣；著色劑的實例包括氧化鈦；並且塗膜劑的實例包括羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和甲基纖維素；但是該等添加劑當然不限於那些實例。

該等固體製劑，例如片劑、膠囊劑、顆粒劑和粉劑通常各自可以包含按重量計0.001%至99.5%，較佳的是按重量計0.01%至90%或類似重量百分數的式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。

在生產一注射劑(用於靜脈內給藥、肌肉內給藥、皮下給藥、腹膜內給藥及其他)的情況下，根據需要向本發明的式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽中添加pH調節劑、緩衝劑、懸浮劑、增溶劑、抗氧劑、防腐劑(防黴劑)、等滲劑等，並可藉由常規方法生產一注射劑。可以將該等製劑凍幹以製成即用的溶解型凍幹製劑。

pH值調節劑和緩衝劑的實例包括有機酸或無機酸或其鹽；懸浮劑的實例包括甲基纖維素、聚山梨醇酯80和羧甲基纖維素鈉；增溶劑的實例包括聚山梨醇酯80和聚氧化乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯；抗氧化劑的實例包括α-生育酚；防腐劑的實例包括對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸乙酯；而等滲劑的實例包括葡萄糖、氯化鈉和甘露醇；但是該等添加劑當然不限於該等實例。

該等注射劑可以各自包含按重量計0.000001%至99.5%，較佳的是按重量計0.00001%至90%或類似重量百分數的式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。

在生產一外部製劑的情況下，將一種基礎原料加入到式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽中，並且根據需要，例如加入防腐劑、安定劑、pH調節劑、抗氧化劑、著色劑等，並且例如經皮作用的製劑(軟膏、貼劑等)、滴眼劑、滴鼻劑、栓劑等可以藉由常規的方法生產。

作為要使用的基礎原料，可以使用通常用於例如藥劑(medicine)、准藥品以及化妝品的不同原料。其具體實例包括原料，例如動物油和植物油、礦物油、酯油、蠟類、乳化劑、高級醇、脂肪酸、矽油、表面活性劑、磷脂、醇、多元醇、水溶性聚合物、黏土礦物、以及淨化水。

該等外部製劑可以各自包含按重量計0.000001%至99.5%，較佳的是按重量計0.00001%至90%或類似重量百分數的式(I)之化合物或其藥學上可接受的鹽。

根據本發明之化合物可以製造為用於捕獲具有生理學活性的低分子量化合物的靶蛋白的化學探針。即，可藉由在J.Mass Spectrum.Soc.Jpn.(日本質譜學報)，51卷，第5期，2003，p.492-498或WO 2007/139149或類似文獻中所述的技術，藉由將標記基團、連接物或類似物引入為了發展化合物的活性必須的結構組分不同的部分中，而將根據本發明之化合物轉換成親和層析法探針、光親和探針等。

在化學探針中使用的標記基團、連接物或類似物的實例包括由以下(1)至(5)所組成的組中所示的基團：(1)蛋白質標記基團，如光親和標記基團(如苯甲醯基、二苯甲酮基、疊氮基、羰基疊氮基、二氮丙啶基、烯酮基、重氮基以及硝基)以及化學親和基團(如酮基(其中α-碳原子被鹵素原子取代)，胺基甲醯基，酯基，烷硫基，α,β-不飽和酮，酯或類似物的邁克爾受體(Michael receptor)，以及環氧乙烷基)；(2)可剪切的連接物，如-S-S-、-O-Si-O-、單糖(葡萄糖基、半乳糖基等)和二糖(乳糖等)，以及藉由酶反應可切割的寡肽連接物；(3)採捕標籤(fishing tag)基團，如生物素和3-(4,4-二氟-5,7-二甲基-4H-3a,4a-二氮雜-4-硼-s-二環戊二烯并苯-3-基)丙醯基；(4)¹²⁵I、³²P、³H、¹⁴C或類似物的放射性標記基團；螢光標記基團如螢光黃素、鹼性玫瑰精(rhodamine)、丹磺醯基、傘形酮、7-硝基呋咱基以及3-(4,4-二氟-5,7-二甲基-4H-3a,4a-二氮雜-4-硼-s-二環戊二烯并苯-3-基)丙醯基；化學發光基團如螢光素以及魯米諾；以及可檢測的標記物重金屬離子如鑭系金屬離子以及鐳離子；以及(5)有待於附接到固體載體如玻璃珠、玻璃床、微孔滴定板、瓊脂糖珠、瓊脂糖床、聚苯乙烯珠、聚苯乙烯床、尼龍珠以及尼龍床上的基團。

藉由上述文獻中所述的方法或類似方法藉由將選自上述由以上(1)至(5)組成的組的標記基團或類似物引入到根據本發明的化合物中而製備的探針，可以用作識別標記蛋白的化學探針，該標記蛋白對新藥物發現靶點的研究等是有用的。

[實例]

根據本發明之化合物(I)可以例如藉由在以下實例中描述之方法生產，並且化合物的作用可以藉由在以下測試實例中描述的方法證實。然而，這些僅是例證說明，並且本發明在任何情況下並不限於以下該等具體實例，並且可以進行變化和改變而不背離本發明的範圍。

表明了描述了其文獻名稱或類似文獻的化合物根據該等文獻或類似文獻生產。

在本說明書中使用的縮寫係熟習該項技術者熟知且常見的。以下縮寫將在本說明書中使用。

CDI：1,1'-羰基二咪唑

DCM：二氯甲烷

DIPEA：N,N-二異丙基乙胺

DMF：N,N-二甲基甲醯胺

DMF-DMA：N,N-二甲基甲醯胺二甲縮醛

DMSO：二甲亞碸

DTT：二硫蘇糖醇

EDC：1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽

EDTA：乙二胺四乙酸

EGTA：乙二醇醚二胺四乙酸

HOBT：1-羥基苯并三唑

KTB：三級丁醇鉀

MTBE：三級-丁基甲基醚

n-：正

p-：對

Pd(dppf)Cl₂．DCM錯合物：[1,1’-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯鈀(II)．DCM錯合物

Pd(PPh₃)₄：四(三苯基膦)合鈀(0)

t-：三級

TEA：三乙胺

TFA：三氟乙酸

THF：四氫呋喃

Tris：三羥甲基胺基甲烷

¹H-NMR：質子核磁共振譜

LC-MS：液相層析質譜法

在以下實例和製備實例中的「室溫」通常表示約10℃至約35℃。%表示重量百分比，除非另外說明。

質子核磁共振譜的化學位移係以來自四甲基矽烷的δ(ppm)為單位進行記錄的，並且耦合常數是以赫茲(Hz)為單位進行記錄的。裂分形式的縮寫如下：s：單重峰，d：雙重峰，t：三重峰，q：四重峰，m：多重峰；brs：寬單峰以及brd：寬雙峰。

對於一種化合物的光學拆分，使用由百奧泰德(Biotage)公司生產的Parallex Flex^R(柱：大賽璐公司(Daicel Corp.)生產的CHIRALPAK^R AD-H、IA、IB和IC之一以及由大賽璐公司生產的CHIRALCEL^R OD-H和OJ-H；柱尺寸2cm Φ x 25cm)，流速10.0mL/分。旋光度(+/-)藉由日本表面化學株式會社(JASCO)製造的OR-2090手性檢測器(Hg-Xe燈，150W)測量。

相對於層析法，在其中存在以矽膠柱層析說明的情況下使用由山善株式會社(Yamazen Corp.)製造的Parallel Prep(柱：Hi-快速(Hi-Flash)^R柱(矽膠)，由山善株式會社製造，尺寸：S(16×60mm)、M(20×75mm)、L(26×100mm)、2L(26×150mm)、以及3L(46×130mm)之一)或由富士矽化學公司製造的用於層析法的球形矽膠PSQ 60B^R，由富士矽化學公司製造的用於層析法的矽膠BW-300^R，由和光純藥公司(Wako Pure Chemical Industries,Ltd.)製造的Wakogel^R C-200或由日本默克公司(Merck Ltd.Japan)製造的矽膠(Silica Gel)60^R(70- 230篩目)。在其中存在以NH矽膠柱層析說明的情況下使用由山善株式會社製造的Parallel Prep(柱：Hi-快速^R柱(胺基)，由山善株式會社製造，尺寸S(16×60mm)、M(20×75mm)、L(26×100mm)、2L(26×150mm)、以及3L(46×130mm)之一)或由富士矽化學公司製造的NH矽膠(200-350篩目)。

(±)-表示消旋混合物，並且(+)-和(-)-分別表示一種對映異構物的(+)類型以及(-)類型。

以下化合物的名稱使用如「E-notebook」(E-手冊)12版(珀金埃爾默公司(Perkin Elmer))中指出的那些，通常使用的試劑除外。

生產實例1

3-溴-6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶之合成

(1)5-溴-4,6-二甲基吡啶-2-醇之合成

將2-胺基-5-溴-4,6-二甲基吡啶(15g)溶解於硫酸(14.2mL)和水(212mL)的混合溶液中。在0℃下，向該溶液中添加水(31mL)中的亞硝酸鈉(6.18g)溶液。將該反應混合物在室溫下攪拌1小時並用氯仿萃取。將該有機層用無水硫酸鎂乾燥並且濾出乾燥劑。將濾液在減壓下濃縮，向殘餘物中添加MTBE，並且沈積沈澱的固體並且然後將其濾出。將獲得的固體用MTBE漂洗，以獲得標題化合物(13.7g)。

ESI-MS m/z 204[M+H]⁺

(2)3-溴-6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶之合成

將5-溴-4,6-二甲基吡啶-2-醇(7g)、甲基碘(21.6mL)和碳酸銀(19.1g)在氯仿(140mL)中的混合物在室溫下攪拌36小時。將該反應混合物填充在矽膠襯墊上，並且用混合溶劑(乙酸乙酯：正庚烷=2：8)洗脫。將獲得的餾分在減壓下濃縮，以獲得該標題化合物(6.98g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：2.32-2.35(m,3H),2.56-2.58(m,3H),3.88(s,3H),6.43-6.48(m,1H).

ESI-MS m/z 216[M+H]⁺

生產實例2

3-溴-2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶之合成

(1)3-溴-2-氯-4,6-二甲基吡啶之合成

將2-氯-4,6-二甲基吡啶-3-胺(2.85g)溶解於氫溴酸(15mL，48%水溶液)中，並且冷卻至0℃。然後，向該溶液中緩慢滴加水(2mL)中的亞硝酸鈉(1.51g)溶液，並且將該混合物在0℃下攪拌15分鐘。向這一溶液中滴加在氫溴酸(5mL，48%水溶液)中的溴化銅(I)(4.18g)的懸浮液，並且在0℃下攪拌10分鐘後，將它在60℃下另外攪拌1小時。將該反應混合物冷卻至室溫，並且然後用乙酸乙酯萃取。將該有機層直接填充在NH-矽膠襯墊上並且用乙酸乙酯洗脫。將獲得的餾分在減壓下濃縮並且將該殘餘物藉由NH矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，0%至30%)進行純化，以獲得標題化合物(2.97g)。

ESI-MS m/z 220[M+H]⁺

(2)3-溴-2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶之合成

將3-溴-2-氯-4,6-二甲基吡啶(2.97g),28%甲醇鈉的甲醇溶液(11.0mL)和DMF(30mL)的混合物在80℃下攪拌36小時。向該反應混合物中添加水並用二乙醚萃取。將該有機層在減壓下濃縮並且將殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，0%至10%)進行純化，以獲得標題化合物(2.33g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：2.33-2.34(m,3H),2.36-2.38(m,3H),3.98(s,3H),6.61-6.64(m,1H).

ESI-MS m/z 216[M+H]⁺

生產實例3

(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)硼酸之合成

(1)2-氟-3-碘-5-甲基吡啶之合成

在-18℃下，在氮氣氛下，向二異丙胺(92mL)和THF(1.2L)的混合物中滴加2.69M正丁基鋰的己烷溶液(224mL)。當滴加完成時，將該混合物進行攪拌同時經20分鐘的時間將溫度升高至-5℃。將該反應混合物冷卻至-73℃，並且然後向其中滴加在THF(240mL)中的2-氟-5-甲基吡啶(61g)溶液。將該反應混合物在-75℃下攪拌3.5小時。將碘(139g)在THF(24mL)中的溶液滴加到該反應混合物中。將該反應混合物在-75℃下攪拌1小時55分鐘。當反應完成時，在相同的溫度下向該反應混合物中添加水(220mL)。將該混合物在相同的溫度下攪拌5分鐘。將該反應混合物加溫至室溫，並且然後添加水(1.2L)。向該混合物中添加硫代硫酸鈉五水合物(136g)水溶液(300mL)和水(300mL)，並且將生成物攪拌10分鐘。將該混合物用MTBE(1.2L)萃取。將有機層用鹽水(500mL)進行洗滌。用MTBE(1L)萃取合併的水層。用無水硫酸鎂乾燥合併的有機層。濾出乾燥劑，並且在減壓下濃縮濾液。在向殘餘物中添加正庚烷以後，將該混合物冷卻。濾出沈澱的固體，並且然後用正庚烷漂洗。將濾液冷卻並且濾出沈澱的固體。重複這一程序5次，以獲得標題化合物(109.69g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：2.29-2.31(m,3H),7.93-8.14(m,2H).

ESI-MS m/z 238[M+H]⁺

(2)2-氟-4-碘-3,5-二甲基吡啶之合成

在-18℃下，在氮氣氛下，向二異丙胺(88mL)和THF(1.2L)的混合物中滴加2.69M正丁基鋰的己烷溶液(215mL)。當滴加完成時，將該混合物進行攪拌同時經30分鐘的時間將溫度升高至-5℃。將該反應混合物冷卻至-72℃，並且然後向其中滴加在THF(240mL)中的2-氟-3-碘-5-甲基吡啶(109.69g)的溶液。將該反應混合物在-74℃下攪拌1.5小時。將甲基碘(36ml)在THF(160mL)中的溶液滴加到該反應混合物中。將該反應混合物在-70℃至-74℃下攪拌2小時。當反應完成時，在相同的溫度下向該反應混合物中添加水(200mL)。將該混合物在相同的溫度下攪拌2分鐘。將該反應混合物加溫至室溫，並且然後添加水(1.2L)。將獲得的混合物攪拌3分鐘，進一步向其中添加水(300mL)。將該混合物用MTBE(1.2L)萃取。將有機層用鹽水(500mL)進行洗滌。用MTBE(1L)萃取合併的水層。用無水硫酸鎂乾燥合併的有機層。濾出乾燥劑，並且在減壓下濃縮濾液。在向殘餘物中添加正庚烷(100mL)以後，將該混合物冷卻。濾出沈澱的固體，並且然後用正庚烷漂洗。將濾液冷卻並且濾出沈澱的固體。重複這一程序2次，以獲得標題化合物(86.9g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：2.39-2.40(m,6H),7.80-7.82(m,1H).

ESI-MS m/z 252[M+H]⁺

(3)4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶之合成

在20℃下，向在THF(954mL)中的2-氟-4-碘-3,5-二甲基吡啶(97.4g)溶液中添加28%甲醇鈉的甲醇溶液(185mL)。將該混合物在55℃至65℃下攪拌2小時。在將該反應混合物冷卻之後，添加MTBE(1L)和水(1L)，用於分離。將有機層用鹽水進行洗滌。用MTBE(500mL×2)萃取合併的水層。用無水硫酸鎂乾燥合併的有機層。濾出乾燥劑，並且在減壓下濃縮濾液。在向殘餘物中添加正庚烷(50mL)以後，將該混合物在0℃下攪拌1小時。濾出沈澱的固體。將固體用冷正庚烷(10mL)漂洗，以獲得標題化合物(42.6g)。將該濾液在減壓下濃縮。在向殘餘物中添加正庚烷(5mL)以後，將該混合物在0℃下攪拌30分鐘。濾出沈澱的固體。將固體用冷正庚烷(2mL)漂洗，以獲得標題化合物(20.2g)。將該濾液在減壓下濃縮。在向殘餘物中添加正庚烷(5mL)以後，將該混合物在0℃下攪拌30分鐘。濾出沈澱的固體。將固體用冷正庚烷(2mL)漂洗，以獲得標題化合物(10.7g)。將其合併，以獲得標題化合物(73.5g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：2.33-2.34(m,3H),2.36-2.38(m,3H),3.92(s,3H),7.76(s,1H).

ESI-MS m/z 264[M+H]⁺

(4)(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)硼酸之合成

在-78℃下，經10分鐘的時間向4-碘-2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶(2.0g)和THF(40mL)的混合物中滴加2.69M正丁基鋰的己烷溶液(6.5mL)。將該混合物在-78℃下攪拌20分鐘。經5分鐘的時間向該混合物中滴加硼酸三異丙酯(5.26mL)。攪拌該混合物同時將其經1.5小時的時間加溫至20℃。向該反應混合物中添加水並且用乙酸乙酯萃取生成物。將獲得的水層用檸檬酸中和，並用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鎂乾燥合併的有機層。濾出乾燥劑，並且在減壓下濃縮濾液。向該殘餘物中添加MTBE，用於研磨。濾出沈澱的固體。將這一固體用作第一晶體。將該濾液在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加MTBE，用於研磨。濾出沈澱的標題化合物(551mg)。將第一晶體懸浮於乙酸乙酯中。添加少量的MTBE，用於研磨。濾出沈澱的標題化合物(553.3mg)。將該濾液在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加MTBE，用於研磨。濾出沈澱的標題化合物(121.1mg)。將其合併，以獲得標題化合物(1.23g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：2.19-2.20(m,3H),2.23-2.24(m,3H),3.91(s,3H),4.94(brs,2H),7.74(s,1H).

ESI-MS m/z 182[M+H]⁺

生產實例4

1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-5-[2-硝基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基]-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

(1)5-(4-溴-2-硝基苯基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

向4-溴-2-硝基苯甲酸(6g)和乙腈(60mL)的混合物中添加亞硫醯氯(1.9mL)，並且將該混合物在50℃下攪拌2小時。在冰冷卻下，向該反應混合物中滴加三乙胺(6.8mL)和3-二甲基胺基丙烯酸乙酯(3.9mL)。在室溫下攪拌2小時以後，將該反應混合物過濾。將該濾液在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加乙酸乙酯，將獲得的懸浮液過濾並且將濾液在減壓下濃縮。將這一程序再重複兩次。將獲得的濾液在減壓下濃縮，以獲得作為粗產物的2-(4-溴-2-硝基苯甲醯基)-3-(二甲胺基) 丙烯酸乙酯(11g)。將該2-(4-溴-2-硝基苯甲醯基)-3-(二甲胺基)丙烯酸乙酯(2.95g)溶解於乙腈(20mL)中。向這一溶液中添加(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)鹽酸肼(1.3g)(根據Giovannini,Riccardo(焦萬尼尼，理查)等人，PCT國際申請(2009),WO 2009121919，實例8CA,8CB合成)和水(2mL)。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜並且然後在90℃下攪拌2小時。將反應混合物冷卻到室溫，並且然後在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加乙酸乙酯和水，並且將有機層分離。用乙酸乙酯萃取水層。將合併的有機層用無水硫酸鎂乾燥並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，10%-100%)進行純化，以獲得標題化合物(0.66g)。

ESI-MS m/z 460[M+Na]⁺

(2)1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-5-[2-硝基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基]-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

向1,4-二噁烷(10mL)中添加5-(4-溴-2-硝基苯基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(398mg)、雙(頻那醇酯)二硼(bis(pinacolato)biboron)(277mg)、乙酸鉀(267mg)和Pd(dppf)Cl₂．DCM錯合物(37.1mg)。在氮氣氛下，將該混合物在90℃下攪拌2小時。將該反應混合物冷卻至室溫並且然後用矽藻土過濾。向濾液中添加乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，並將有機層和水層分離。用乙酸乙酯萃取水層(50mL)。將合併的有機層用鹽水(50mL)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，10%-80%)進行純化，以獲得作為粗產物的標題化合物(441.0mg)。

ESI-MS m/z 405[M-C₆H₁₀+H]⁺

分解標題化合物的4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷的結構並且檢測硼酸(B(OH)₂)化合物的分子量。

生產實例5

(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)鹽酸肼之合成

(1)2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)肼羧酸苄基酯之合成

向在甲醇(100mL)中的1,4-環己二酮單亞乙基縮酮(CAS No.4746-97-8，5.0g)溶液中添加肼基甲酸苄酯(CAS No.5331-43-1，5.32g)並且將該混合物在室溫下攪拌1小時。然後將該反應混合物濃縮。將獲得的殘餘物溶解於THF中並且再次濃縮。在室溫下，向在THF(80mL)中的所獲得的殘餘物的溶液中添加硼氫化鈉(2.42g)，並且然後將該反應混合物在相同的溫度下攪拌15分鐘。在將該反應混合物用冰冷卻後，經30分鐘的時間向該反應混合物中滴加甲醇(10mL)，將該反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。接下來，經15分鐘的時間向該反應混合物中滴加水(15mL)，並且將該反應混合物在室溫下攪拌5分鐘。向該反應混合物中進一步添加水(15mL)，並且將該反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。在減壓下，將THF從該反應混合物中蒸餾出。向獲得的殘餘物中添加乙酸乙酯，並且在將該混合物攪拌15分鐘以後，分離有機層。用鹽水洗滌獲得的有機層，用無水硫酸鎂乾燥。濾出乾燥劑並且在減壓下濃縮濾液。將獲得的殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，50%)進行純化並且用MTBE和己烷(1：1)的混合溶劑研磨。將獲得的粉末過濾並且在減壓下乾燥，以獲得標題化合物(7.52g)。

¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ(ppm)：1.40-1.55(m,4H),1.70-1.85 (m,4H),2.84(brs,1H),3.90(s,4H),5.10(s,2H),7.24-7.40(m,5H).

ESI-MS m/z 329[M+Na]⁺

(2)(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)鹽酸肼之合成

向在乙醇(40mL)-氯仿(3.16mL)中的2-(1,4-二氧雜螺[4,5]癸烷-8-基)肼羧酸苄基酯(4.0g)的懸浮液中添加10%鈀碳(含水量：50%，400mg)，並且將該混合物在室溫下、在氫氣氛下攪拌23.5小時。將鈀碳從該反應混合物中濾出。濾液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物(3.06g)。

¹H-NMR(400MHz,CD₃OD)δ(ppm)：1.57-1.90(m,8H),3.06(brs,1H),3.91(s,4H).

實例1a

(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)

實例1b

(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)

實例1c

(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)

實例1d

(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)之合成

[化28]

(1)5-[4-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-2-硝基苯基]-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

在20℃下，向1,4-二噁烷(3.9mL)和水(0.8mL)的液體混合物中添加在生產實例4中獲得的1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-5-[2-硝基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基]-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(220mg)、在生產實例1中獲得的3-溴-6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶(196mg)以及碳酸鈉(144mg)。在向該液體混合物中添加Pd(PPh₃)₄(52.4mg)以後，將它在110℃下攪拌2小時。將該反應混合物冷卻至室溫，並且然後向該反應混合物中添加乙酸乙酯。將有機層和水層分離。用乙酸乙酯(10mL×2)萃取水層。將合併的有機層用鹽水(10mL)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥並過濾。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，30%-70%)進行純化，以獲得標題化合物(137mg)。

ESI-MS m/z 495[M+H]⁺

(2)7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

將5-[4-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-2-硝基苯基]-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(135mg)溶解於乙酸(1.6mL)中。在20℃下，向該溶液中添加鐵粉(45.7mg)。將該反應混合物在90℃下攪拌4小時。向該反應混合物中添加乙酸乙酯(10mL)用於稀釋，並且添加碳酸氫鈉水溶液用於中和。將有機層和水層分離。用乙酸乙酯(25mL×2)萃取水層。將合併的有機層用鹽水(10mL)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，50%-100%)進行純化，以獲得標題化合物(76mg)。

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

(3)(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮、(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮、(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮和(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

將7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(12mg)溶解於乙醇(10mL)中。將該溶液藉由手性HPLC條件(柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IA，流動相：乙醇)進行純化。獲得作為第一餾分的(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(反式)和(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(反式)的混合物(8mg)。獲得作為第二餾分的(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)(3mg)。獲得作為第三餾分的(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)(3mg)。在手性HPLC條件(柱：大賽璐公司的CHIRALCEL^R OD-H，流動相：乙醇)下，將反式異構物 (8mg)的混合物分離。獲得作為第一餾分的(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)(1mg)，並且獲得作為第二餾分的(+)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)(1mg)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.93(d,J=6.6Hz,3H),2.01-2.09(m,4H),2.21-2.23(m,3H),2.45-2.54(m,1H),2.93-3.07(m,1H),3.63-3.73(m,1H),3.82-3.89(m,1H),3.97(s,3H),3.98-4.03(m,1H),4.23-4.31(m,1H),5.18-5.26(m,1H),6.55(s,1H),7.12(dd,J=8.2Hz,1.6Hz,1H),7.18-7.31(m,1H),8.01(d,J=8.2Hz,1H),8.30(s,1H),10.15(brs,1H).

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IA，流動相：乙醇，保留時間：17.1分鐘。

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IA，流動相：乙醇，保留時間：20.4分鐘。

(-)-順式異構物的¹H-NMR數據與對應的(+)-順式異構物的¹H-NMR數據一致。

(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.76(d,J=6.6Hz,3H),2.02-2.05(m,3H),2.10-2.18(m,1H),2.21-2.24(m,3H),2.34-2.48(m,1H), 2.79-2.92(m,1H),3.31(t,J=11.5Hz,1H),3.66-3.75(m,1H),3.97(s,3H),4.13(dd,J=11.9Hz,4.5Hz,1H),4.18-4.26(m,1H),4.68(td,J=10.9Hz,4.3Hz,1H),6.55(s,1H),7.12(dd,J=8.2Hz,1.6Hz,1H),7.26(d,J=1.6Hz,1H),8.08(d,J=8.2Hz,1H),8.36(s,1H),10.57(brs,1H).

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

柱：大賽璐公司的CHIRALCEL^R OD-H，流動相：乙醇，保留時間：13.3分鐘。

柱：大賽璐公司的CHIRALCEL^R OD-H，流動相：乙醇，保留時間：19.7分鐘。

(+)-反式異構物的¹H-NMR數據與對應的(-)-反式異構物的¹H-NMR數據一致。

實例2a

(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)

實例2b

(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)

實例2c

(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)

實例2d

(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)之合成

(1)5-[4-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-2-硝基苯基]-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

在20℃下，向1,4-二噁烷(3.9mL)和水(0.8mL)的液體混合物中添加在生產實例4中獲得的1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-5-[2-硝基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)苯基]-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(220mg)、在生產實例2中獲得的3-溴-2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶(196mg)以及碳酸鈉(144mg)。在向該液體混合物中添加Pd(PPh₃)₄(52.4mg)以後，將它在110℃下攪拌2小時。將該反應混合物冷卻至室溫，並且然後向該反應混合物中添加乙酸乙酯。將有機層和水層分離。用乙酸乙酯(10mL×2)萃取水層。將合併的有機層用鹽水(10mL)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，30%-70%)進行純化，以獲得標題化合物(133mg)。

ESI-MS m/z 495[M+H]⁺

(2)7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

將5-[4-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-2-硝基苯基]-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(133mg)溶解於乙酸(1.5mL)中。在20℃下，向該溶液中添加鐵粉(45.1mg)。將該反應混合物在 90℃下攪拌4小時。向該反應混合物中添加乙酸乙酯(10mL)用於稀釋，並且添加碳酸氫鈉水溶液用於中和。將有機層和水層分離。用乙酸乙酯(25mL×2)萃取水層。將合併的有機層用鹽水(10mL)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，50%-100%)進行純化，以獲得標題化合物(73mg)。

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

(3)(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)、(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)、(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)和(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)之合成

將7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(30mg)溶解於乙醇(5mL)中。將該溶液藉由手性HPLC條件(柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R AD-H，流動相：乙醇)進行純化。獲得作為第一餾分的(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(順式)和(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(反式)的混合物(14mg)。獲得作為第二餾分的(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)(3mg)。獲得作為第三餾分的(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)- 1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)(3mg)。在手性HPLC條件(柱：大賽璐公司的CHIRALCEL^R OD-H，流動相：乙醇/正己烷(70%))下，將上述混合物(14mg)分離。獲得作為第一餾分的(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)(5mg)，並且獲得作為第二餾分的(+)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)(5mg)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.75(d,J=6.6Hz,3H),2.11(s,3H),2.11-2.19(m,1H),2.29-2.49(m,1H),2.48(s,3H),2.78-2.89(m,1H),3.29(t,J=11.3Hz,1H),3.64-3.71(m,1H),3.86(s,3H),4.08-4.15(m,1H),4.17-4.25(m,1H),4.62-4.71(m,1H),6.74(s,1H),7.18(d,J=8.0Hz,1H),7.27(s,1H),8.06(d,J=8.0Hz,1H),8.34(s,1H),10.03(brs,1H).

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R AD-H，流動相：乙醇，保留時間：23.8分鐘。

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R AD-H，流動相：乙醇，保留時間：31.4分鐘。

(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫- 2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)

柱：大賽璐公司的CHIRALCEL^R OD-H，流動相：乙醇/正己烷(70%)，保留時間：13分鐘。

(-)-反式異構物的¹H-NMR數據與對應的(+)-反式異構物的¹H-NMR數據一致。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.90(d,J=7.2Hz,3H),2.00-2.09(m,1H),2.10(s,3H),2.49(s,3H),2.48-2.55(m,1H),2.94-3.05(m,1H),3.64-3.71(m,1H),3.77-3.89(m,1H),3.86(s,3H),3.96-4.00(m,1H),4.24-4.30(m,1H),5.19-5.24(m,1H),6.74(s,1H),7.19(dd,J=8.4Hz,1.6Hz,1H),7.31(d,J=1.6Hz,1H),7.98(d,J=8.4Hz,1H),8.29(s,1H),10.43(brs,1H).

柱：大賽璐公司的CHIRALCEL^R OD-H，流動相：乙醇/正己烷(70%)，保留時間：14.9分鐘。

實例3a

(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)

實例3b

(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)

實例4a

(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)

實例4b

(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫- 2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)之合成

將4-溴-2-硝基苯甲酸(6g)溶解於乙腈(60mL)中。向該溶液中添加亞硫醯氯(1.9mL)，並且將該混合物在50℃下攪拌2小時。在冰冷卻下，向該反應混合物中滴加三乙胺(6.8mL)。還向該反應混合物中滴加3-二甲基胺基丙烯酸乙酯(3.9mL)。在室溫下攪拌2小時以後，將該反應混合物過濾。將該濾液在減壓下濃縮。向殘餘物中添加乙酸乙酯，並且濾出產生的懸浮液。將該濾液在減壓下濃縮。向殘餘物中添加乙酸乙酯，濾出產生的懸浮液。將該濾液在減壓下濃縮。向殘餘物中添加乙酸乙酯，濾出產生的懸浮液。將濾液在減壓下濃縮，以獲得作為粗產物的2-(4-溴-2-硝基苯甲醯基)-3-(二甲胺基)丙烯酸乙酯(11g)。將獲得的2-(4-溴-2-硝基苯甲醯基)-3-(二甲胺基)丙烯酸乙酯(2.95g)溶解於乙腈(20mL)中。向該溶液中添加(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)鹽酸肼(1.3g)(根據Giovannini,Riccardo(焦萬尼尼，理查)等人，PCT國際申請(2009),WO 2009121919，實例8CA,8CB合成)和水(2mL)。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜並且然後在90℃下攪拌2小時。將反應混合物冷卻到室溫，並且然後在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加乙酸乙酯和水。分離有機層。用乙酸乙酯萃取水層。將合併的有機層用無水硫酸鎂乾燥並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，10%-100%)進行純化，以獲得標題化合物(0.66g)。

ESI-MS m/z 460[M+Na]⁺

(2)5-[4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-2-硝基苯基]-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

在向5-(4-溴-2-硝基苯基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(320.8mg)、1,4-二噁烷(5mL)和水(1.5mL)的液體混合物中添加在生產實例3中產生的(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)硼酸(265mg)、Pd(PPh₃)₄(85mg)和碳酸銫(715mg)以後，將該反應混合物在110℃下、在氮氣氛下攪拌2小時。在將該反應混合物冷卻至室溫後，將它在減壓下濃縮。用乙酸乙酯稀釋該殘餘物並用水洗滌。將該有機層用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，10%-100%)部分地進行純化，以獲得作為粗產物的標題化合物(382.8mg)。

ESI-MS m/z 495[M+H]⁺

(3)7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

在將5-[4-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-2-硝基苯基]-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(112.3mg)溶解於乙酸(2.5mL)和水(0.25mL)中以後，將該混合物在80℃下、在氮氣氛下攪拌15分鐘。立刻向該反應混合物中添加鐵粉(76mg)，並且在將該反應混合物在80℃下、在氮氣氛下攪拌2小時以後，將它在90℃下、在氮氣氛下攪拌過夜。在將該反應混合物冷卻至室溫後，將它用乙酸乙酯稀釋並且在減壓下濃縮。將該殘餘物用氯仿稀釋並用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌。將該有機層用無水硫酸鎂乾燥並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由短矽膠柱層析法(乙酸乙酯)進行純化，以獲得標題化合物(91.2mg)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.75-0.94(m,3H),1.93-2.00(m,6H),2.05-2.23(m,1H),2.30-2.55(m,1H),2.80-3.08(m,1H),3.32(t,J=12Hz,0.33H),3.65-3.75(m,1H),3.83-3.90(m,0.66H),3.97-4.00(m,0.66H),4.01(s,3H),4.10-4.15(m,0.33H),4.17-4.32(m,1H),4.63-4.73(m,0.33H),5.20-5.27(m,0.66H),7.07-7.10(m,1H),7.38(s,1H),7.95(s,1H),8.03-8.13(m,1H),8.31(s,0.66H),8.36(s,0.33H),11.92-11.96(m,1H).

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

(4)(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)、(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4R ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)、(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)和(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)之合成

將7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(91.2mg)溶解於5%氯仿/乙醇(10.5mL)中。將該溶液藉由手性HPLC條件(柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IA，流動相：乙醇/正己烷(50%))進行純化。獲得作為第一餾分的(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮和(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((±)-反式)的混合物(17.7mg)。獲得作為第二餾分的(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-順式)(25.9mg)。獲得作為第三餾分的(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)(25.9mg)。

在手性HPLC條件(柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IB，流動相：乙醇/正己烷(15%))下，將(±)-反式異構物的混合物(17.7mg)分離。獲得作為第一餾分的(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)(3.7mg)，並且獲得作為第二餾分的(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)(3.6mg)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.88-0.95(m,3H),1.91-2.00(m,6H),2.03-2.13(m,1H),2.45-2.55(m,1H),2.95-3.07(m,1H),3.65-3.73(m,1H),3.83-3.89(m,1H),3.97-4.00(m,1H),4.01(s,3H),4.24-4.32(m,1H),5.20-5.27(m,1H),7.07-7.10(m,1H),7.33(s,1H),7.95(s,1H),8.04(d,J=8.4Hz,1H),8.31(s,1H),11.47(brs,1H).

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IA，流動相：乙醇/正己烷(20%)，保留時間：15分鐘。

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IA，流動相：乙醇/正己烷 (20%)，保留時間：12.5分鐘。

(+)-順式異構物的¹H-NMR數據與對應的(-)-順式異構物的¹H-NMR數據一致。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：0.75-0.77(m,3H),1.93-1.98(m,6H),2.09-2.18(m,1H),2.34-2.48(m,1H),2.78-2.92(m,1H),3.31(t,J=11.4Hz,1H),3.60-3.75(m,1H),4.00(s,3H),4.08-4.17(m,1H),4.20-4.25(m,1H),4.63-4.70(m,1H),7.06-7.08(m,1H),7.16-7.18(m,1H),7.95(s,1H),8.11(d,J=11.4Hz,1H),8.36(s,1H),10.12(brs,1H).

ESI-MS m/z 419[M+H]⁺

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IB，流動相：乙醇/正己烷(10%)，保留時間：6.3分鐘。

(+)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R ^* ,4S ^* )-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((+)-反式)

柱：大賽璐公司的CHIRALPAK^R IB，流動相：乙醇/正己烷(10%)，保留時間：7.8分鐘。

實例5a

7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(順式-4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

實例5b

7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(反式-4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

(1)3-(4-溴-2-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯之合成

在向在DCM(97mL)中的4-溴-2-氟苯甲酸(CAS No.112704-79-7)(10g)的懸浮液中添加CDI(8.88g)以後，將該混合物在室溫下攪拌3.5小時。將這一溶液用作「溶液1」。

向在單獨的燒瓶中的乙腈(303mL)中的乙基丙二酸鉀(15.5g)的懸浮液中順序地添加TEA(15.9mL)和氯化鎂(10.9g)，並且將獲得的混合物在室溫下攪拌3小時10分鐘。經25分鐘的時間向該反應混合物中滴加先前製備的「溶液1」，並且然後將該反應混合物在室溫下攪拌過夜。將該反應混合物在減壓下濃縮至量的一半。將獲得的殘餘物用乙酸乙酯(500mL)進行稀釋並且在冰冷卻下添加5N鹽酸(250mL)，並且然後將該混合物在室溫下攪拌1小時。分離有機層。將該有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將獲得的殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，5%- 20%)進行純化，以獲得標題化合物(12.8g)。

ESI-MS m/z 291[M+H]⁺

(2)5-(4-溴-2-氟苯基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯之合成

在50℃下，將在DMF-DMA(6.89mL)中的3-(4-溴-2-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯(1.5g)溶液攪拌2.5小時。將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物溶解於甲苯(7mL)中，將獲得的溶液在減壓下濃縮，並且重複這一程序。向在乙醇(30mL)中的、生產實例5中獲得的(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)鹽酸肼(3.06g)和TEA(3mL)的溶液中添加在乙醇(10mL)中的該殘餘物的溶液。在將該反應混合物在80℃下攪拌2.5小時以後，將它冷卻至室溫。將反應混合物在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加乙酸乙酯和水，並且分散有機層。用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水按該順序洗滌有機層，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，15%)進行純化，以獲得標題化合物(2.10g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.18(t,J=6.8Hz,3H),1.49-1.60(m,2H),1.73-1.94(m,4H),2.30-2.45(m,2H),3.79-3.89(m,1H),3.90-4.00(m,4H),4.15(q,J=6.8Hz,2H),7.19(t,J=8.0Hz,1H),7.40-7.46(m,2H),8.03(s,1H).

ESI-MS m/z 475[M+Na]⁺

(3)5-(4-溴-2-氟苯基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑-4-羧酸之合成

向在乙醇(20mL)中的5-(4-溴-2-氟苯基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑-4-羧酸乙基酯(2.1g)的懸浮液中添加5N氫氧化鈉水溶液(2.78mL)並且將該混合物在50℃下攪拌6小時。在將該反應混合物冷卻至室溫後，將該反應混合物在減壓下濃縮。向獲得的水性殘餘物中添加水和MTBE，並且分離水層。將獲得的水層用5N鹽酸酸化並用乙酸乙酯萃取(兩次)。將合併的乙酸乙酯萃取層用水和鹽水按該順序洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將濾液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物(2.03g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.48-1.60(m,2H),1.72-1.94(m,4H),2.28-2.45(m,2H),3.77-3.88(m,1H),3.90-3.99(m,4H),7.18(t,J=8.0Hz,1H),7.39-7.45(m,2H),8.07(s,1H).

ESI-MS m/z 449[M+Na]⁺

(4)5-(4-溴-2-氟苯基)-N-(2,4-二甲氧苄基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑-4-甲醯胺之合成

向在DMF(40mL)中的5-(4-溴-2-氟苯基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑-4-羧酸(1.90g)溶液中按該順序添加2,4-二甲氧基苄胺(747mg)、DIPEA(1.56mL)、HOBT(724mg)以及EDC(1.03g)以後，將該反應混合物攪拌過夜。將該反應混合物在減壓下濃縮至約1/3的量。向獲得的殘餘物中添加乙酸乙酯、水和飽和的碳酸氫鈉水溶液，並且分離有機層。將有機層用水和鹽水按該順序洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將濾液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物(2.51g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.45-1.60(m,2H),1.65-1.94(m,4H),2.23-2.45(m,2H),3.70-3.80(m,1H),3.75(s,3H),3.80(s,3H),3.90-3.99(m,4H),4.36(t,J=6.4Hz,2H),5.86(t,J=6.4Hz,1H),6.38-6.44(m,2H),7.10(d,J=8.4Hz,1H),7.18(t,J=8.0Hz,1H),7.34-7.41(m,2H),7.87(s,1H).

ESI-MS m/z 574[M+H]⁺

(5)7-溴-5-(2,4-二甲氧苄基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

在冰冷卻下，向在THF(30mL)中的5-(4-溴-2-氟苯基)-N-(2,4-二甲氧苄基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑-4-甲醯胺(2.51g)溶液中添加KTB(735mg)以後，將該混合物在相同溫度下攪拌5分鐘並且然後在室溫下攪拌2小時。向該反應混合物中進一步添加KTB(400mg)並且將該混合物攪拌40分鐘。向該反應混合物中按該順序添加飽和的氯化銨水溶液、乙酸乙酯和水，並且分離有機層。再次用乙酸乙酯萃取水層。用鹽水洗滌合併的有機層，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑並將濾液在減壓下濃縮。向獲得的殘餘物中添加乙酸乙酯(3mL)和MTBE(9mL)。將獲得的固體過濾並且在減壓下乾燥，以獲得標題化合物(2.04g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.81(td,J=14.0,4.0Hz,2H),1.97-2.06(m,2H),2.15-2.24(m,2H),2.43-2.55(m,2H),3.76(s,3H),4.01(s,7H),4.73-4.83(m,1H),5.50(brs,2H),6.34(dd,J=8.4,2.4Hz,1H),6.52(d,J=2.4Hz,1H),6.99(d,J=8.4Hz,1H),7.39(dd,J=8.8,1.6Hz,1H),7.80(d,J=1.6Hz,1H),7.82(d,J=8.8Hz,1H),8.29(s,1H).

ESI-MS m/z 576[M+Na]⁺

(6)5-(2,4-二甲氧苄基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

向在1,4-二噁烷(10mL)中的、生產實例1中獲得的(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶)硼酸(783mg)和7-溴-5-(2,4-二甲氧苄基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(1.50g)的溶液中添加水(2.5mL)、Pd(PPh₃)₄(313mg)和碳酸銫(2.64g)。使用微波反應器，將該反應混合物在130℃下攪拌3小時。將該反應混合物冷卻至室溫，並且然後向該反應混合物中添加乙酸乙酯和水並且分離有機層。將該有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將該殘餘物藉由矽膠柱層析法(乙酸乙酯/正庚烷，40%)進行純化。向濃縮的殘餘物中添加乙酸乙酯和MTBE。將獲得的固體過濾並且在減壓下乾燥，以獲得標題化合物(1.52g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.73(s,3H),1.76(s,3H),1.87(td,J=14.0,4.0Hz,2H),2.00-2.08(m,2H),2.22-2.32(m,2H),2.49-2.62(m,2H),3.68(s,3H),3.73(s,3H),3.97(s,3H),4.02(s,4H),4.85-4.95(m,1H),5.40-5.60(m,2H),6.29(dd,J=8.4,2.4Hz,1H),6.42(d,J=2.4Hz,1H),6.83(d,J=8.4Hz,1H),7.05(d,J=8.4Hz,1H),7.24(s,1H),7.87(s,1H),8.07(d,J=8.4Hz,1H),8.33(s,1H).

ESI-MS m/z 611[M+H]⁺

(7)5-(2,4-二甲氧苄基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

向在THF(20mL)中的5-(2,4-二甲氧苄基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(1.30g)溶液中添加2N鹽酸(20mL)以後，將該反應混合物在室溫下攪拌19.5小時。在將該反應混合物傾倒進飽和的碳酸氫鈉水溶液(60mL)中後，將它用乙酸乙酯萃取。將獲得的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將濾液在減壓下濃縮，以獲得標題化合物(1.12g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.73(s,3H),1.76(s,3H),2.52-2.87(m,8H),3.68(s,3H),3.74(s,3H),3.97(s,3H),5.27-5.37(m,1H),5.37-5.62(m,2H),6.29(dd,J=8.8,2.4Hz,1H),6.42(d,J=2.4Hz,1H),6.84(d,J=8.8Hz,1H),7.06(d,J=8.4Hz,1H),7.28(s,1H),7.88(s,1H),8.10(d,J=8.4Hz,1H),8.35(s,1H).

ESI-MS m/z 567[M+H]⁺

(8)5-(2,4-二甲氧苄基)-1-(4-羥基環己基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基 吡啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

在冰冷卻下，向在THF(20mL)-甲醇(10mL)中的5-(2,4-二甲氧苄基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(570mg)溶液中添加硼氫化鈉(57.1mg)，並且將該混合物在相同溫度下攪拌5分鐘並且然後在室溫下攪拌1小時。將該反應混合物在冰上進行冷卻，並且向該反應混合物中添加1N鹽酸(2mL)。在將該反應混合物濃縮至約1/4的量後，向殘餘物中添加乙酸乙酯和水並分離有機層。用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水按該順序洗滌有機層，用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。使濾液經受短矽膠柱層析法(乙酸乙酯)，以獲得標題化合物(597mg)。

ESI-MS m/z 569[M+H]⁺

(9)5-(2,4-二甲氧苄基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

在0℃下，向在THF(5mL)中的5-(2,4-二甲氧苄基)-1-(4-羥基環己基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(300mg)溶液中添加60%氫化鈉(油中的分散體，31.7mg)以後，將該混合物在室溫下攪拌10分鐘。向該反應混合物中添加碘代甲烷(0.1mL)，並且將該混合物在室溫下攪拌1.5小時並且在50℃下攪拌2小時。接下來，向該反應混合物中添加碘代甲烷(0.1mL)並且將它在50℃下攪拌過夜。向該反應混合物中添加水和乙酸乙酯，並分離有機層。再次用乙酸乙酯萃取水層。將合併的有機層用鹽水洗滌並用無水硫酸鎂乾燥，濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將獲得的殘餘物藉由矽膠柱層析法(甲醇/氯仿，2%)進行純化，以獲得標題化合物(110mg)。

ESI-MS m/z 583[M+H]⁺

(10)7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(順式-4-甲氧基環己 基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮和7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(反式-4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮之合成

向在TFA(1.5mL)中的5-(2,4-二甲氧苄基)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮(109mg)溶液中添加三乙基矽烷(0.09mL)，並且將該反應混合物在60℃下攪拌4.25小時。將反應混合物在減壓下濃縮。向該殘餘物中添加氯仿和飽和的碳酸氫鈉水溶液，並且分離有機層。用氯仿再次萃取水層。將合併的有機層用無水硫酸鎂乾燥，並且濾出乾燥劑。將該濾液在減壓下濃縮。將獲得的殘餘物藉由矽膠柱層析法(氯仿隨後是乙酸乙酯)進行純化，以獲得作為順式異構物和反式異構物的混合物的標題化合物(68mg)。

將該混合物溶解於氯仿(1.1mL)-乙醇(4.4mL)中並用微孔(Millipore)過濾器過濾。在100%乙醇、10mL/min的條件下，藉由大賽璐公司的CHIRALCEL^R IB(20mmΦ×250mm)純化濾液，以獲得順式異構物的標題化合物(10.1mg)和反式異構物的標題化合物(47.0mg)。

順式異構物

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.63-1.74(m,2H),1.94(s,3H),1.97(s,3H),2.00-2.09(m,2H),2.22-2.30(m,2H),2.47-2.60(m,2H),3.39(s,3H),3.60(brs,1H),4.00(s,3H),4.80-4.89(m,1H),7.06(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.20(d,J=1.6Hz,1H),7.94(s,1H),8.06(d,J=8.4Hz,1H),8.30(s,1H),10.42(brs,1H).

ESI-MS m/z 433[M+H]⁺

反式異構物

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ(ppm)：1.48-1.60(m,2H),1.94(s,3H),1.97(s,3H),2.17-2.40(m,6H),3.32-3.42(m,1H),3.43(s,3H), 4.01(s,3H),4.79-4.89(m,1H),7.08(d,J=8.4Hz,1H),7.25(s,1H),7.94(s,1H),8.04(d,J=8.4Hz,1H),8.29(s,1H),10.95(brs,1H).

ESI-MS m/z 433[M+H]⁺

[藥理學測試實例]

PDE9抑制活性測試實例

1)製備人重組體PDE9蛋白

將hsPDE9A 1cDNA片段藉由基於基因庫數據庫(GenBank data base)上註冊的hsPDE9A1的鹼性序列(登錄號：AF048837)，並且藉由使用以下序列(北海道系統科技有限公司(Hokkaido System Science Co.,Ltd.))作為引子以及使用人海馬迴cDNA文庫(Clontech實驗室公司(Clontech Laboratories,Inc.))作為模板DNA，並且使用Pfu50 DNA聚合酶(英傑公司(Invitrogen Corp.))，並且藉由以下條件下的聚合酶鏈式反應(PCR)進行擴增。

hPDE9-1引子：AGGATGGGATCCGGCTCCTCCA(序列編號1)

hPDE9A-3引子：CAGGCACAGTCTCCTTCACTG(序列編號2)

PCR條件：[96℃,5分鐘]×1個循環，[(96℃,10秒)、(57℃,5秒)、(72℃,2分鐘)]×30個循環。

將得到的hsPDE9A 1cDNA片段結合到TOPO-TA克隆載體(英傑公司)中並且檢查該鹼基序列；並且此後，將所得物轉染到pcDNA 3.1/myc His-標籤載體(英傑公司)中，由此得到用於哺乳動物細胞的人PDE9表現載體。將該用於哺乳動物細胞的人PDE9表現載體藉由暫態表現，使用LIPOFETAMINE 2000試劑(吉博科公司(Gibco))而轉染到HEK293細胞中。藉由西方墨點法(Western blot)證實了PDE9A在HEK293細胞中的表現，並且然後人PDE9A 1cDNA片段在pYNG載體(片倉工業株式會社(Katakura Industries Co.,Ltd.))中轉染，由此得到一種用於昆蟲細胞的表現載體。將其中表現大量的PDE9的均勻化的蠶(silk worm)的上清液藉由使用平衡的Ni柱、使用緩衝液A(20mmol/L Tris-HCl，pH：8.0，1mmol/L DTT，10mmol/L咪唑)進行純化。將上清液與該Ni柱混合1小時之後，使用緩衝液B(20mmol/L Tris-HCl，pH：8.0，1mmol/L DTT)進行清洗並且使用緩衝液C(20mmol/L Tris-HCl，pH：8.0，1mmol/L DTT，100mmol/L咪唑)進行洗脫。準備性地收集一洗脫部分以由此獲得PDE9酶溶液。

2)PDE9抑制作用之測量

在冰冷卻下，向100μL包含[³H]-cGMP(1mCi/mL)以0.5μCi/mL的濃度的緩衝液D(40mmol/L Tris-HCl,pH：7.4,10mmol/L MgCl₂,1mM DTT,2μM cGMP)溶液中)添加10μL的用於評估的化合物溶液(一種溶液，其中將一種化合物溶解在DMSO中並且稀釋由此使得DMSO濃度變成5%)以及90μL藉由用緩衝液E(40mmol/L Tris-HCl,pH：7.4,10mmol/L MgCl₂,1mM DTT,1mmol/L EGTA)稀釋以上製備的PDE9酶溶液而製備的溶液。將生成物的混合溶液在30℃下孵育10min，並且此後在沸水(boiled water)中加熱2min，以停止該PDE9的酶反應。然後，使生成物回復至室溫；向其中添加50μL的5'-核苷酸酶(比科摩公司(Biomol GmbH)，10單位/mL)；並且將生成物在30℃下孵育10min，以由此將前述反應中形成的[³H]-5'-GMP轉化為[³H]-鳥苷。將500μL的陰離子交換樹脂(伯樂公司(Bio-Rad)AG1-X2樹脂，篩目尺寸：200-400，H₂O：樹脂=2：1)加入到生成物反應液中，並且允許靜置10min，並且此後離心(2,000rpm，10min)；並且將其中存在[³H]-鳥苷的上清液轉移至LumaPlate(珀金埃爾默公司((PerkinElmer,Inc.))，並且藉由TopCount NXT微板閃爍和發光計數器(珀金埃爾默公司)測量放射活性。

評估化合物的抑制百分比使用以下運算式計算，視不含評估化合物的對照物的放射活性為(A)，不含酶的空白的放射活性為(B)，並且視評估化合物的放射活性為(C)。

抑制百分比=100-{[(C)-(B)]/[(A)-(B)]}×100(%)

評估化合物的PDE9的IC₅₀值從不同濃度的抑制百分比確定。每種評價化合物的IC₅₀值示於下表1中。

3)對齧齒動物腦脊液cGMP之作用

將該測試化合物給予ICR雄性小鼠(日本查理斯河實驗室公司(Charles River Laboratories Japan,Inc.))、斯普拉-道來(Sprague-Dawley)雄性大鼠(SD)(日本查理斯河實驗室公司)或隆-埃文斯(Long-Evans)雄性大鼠(LE)(動物繁殖研究所(Institute for Animal Reproduction))，並且隨後在戊巴比妥麻醉下收集腦脊液並且將其在-20℃下存儲。腦脊液中的cGMP根據cGMP EIA套組(GE醫療保健公司(GE Healthcare))的乙醯化EIA程序或cGMP EIA套組(開曼公司 (Cayman))的非乙醯化程序進行測量。結果係給予測試化合物的組(B)的cGMP量相對於給予載體組(A)之cGMP量增加(C)，並且使用下式計算。

cGMP增加(C)=[(B)-(A)]/(A)×100(%)

結果示於下表2中。

4)對齧齒動物海馬cGMP之作用

將測試化合物給予斯普拉-道來雄性大鼠(日本查理斯河實驗室公司)或隆-埃文斯雄性大鼠(動物繁殖研究所)並且然後將該等動物用微波在戊巴比妥麻醉劑下處死，並且提取海馬迴。在測量濕重量後，將海馬迴用液氮冷凍並在-80℃下存儲。在海馬迴中的cGMP測量中，基於濕重量以5%(w/v)加入0.5M高氯酸/1mM EDTA溶液，並且將該混合物均勻化。在均勻化之後，將該勻漿離心(10000rpm，15min)，並且收集上清液。收集的上清液使用2M碳酸氫鉀溶液中和並且離心(13000rpm，10min)。上清液中的cGMP濃度根據cGMP EIA套組(GE 醫療保健公司)的非乙醯化EIA程序測量。結果係給予測試化合物的組(B)的cGMP量相對於給予載體組(A)的cGMP量增加(C)，並且使用下式計算。

cGMP增加(C)=[(B)-(A)]/(A)×100(%)

結果示於下表3中。

<110> 日商衛材R&D企管股份有限公司

<120> 吡啶基吡唑并喹啉化合物

<130> FP14-0049

<150> US 61/809,095

<151> 2013-04-05

<150> US 61/809,118

<151> 2013-04-05

<160> 2

<170> PatentIn version 3.1

<210> 1

<211> 22

<212> DNA

<213> Artificial

<220>

<223> hPDE9-1

<400> 1

<210> 2

<211> 21

<212> DNA

<213> Artificial

<220>

<223> hPDE9A-3

<400> 2

Claims

一種由式(I)表示的化合物，或其藥學上可接受的鹽：其中R¹係由以下式表示之基團：由以下式表示之基團：或由以下式表示之基團：並且R²係3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基基團或4-甲氧基環己基基團。
如請求項1之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物由式(II)表示：[化5] 其中R³係由以下式表示之基團：或由以下式表示之基團：
如請求項1之化合物或其藥學上可接受的鹽，其中該化合物由式(III)表示：其中R²係3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基基團或4-甲氧基環己基基團。
一種(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)或其藥學上可接受的鹽：[化9]
一種(-)-7-(6-甲氧基-2,4-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)或其藥學上可接受的鹽：
一種(-)-7-(2-甲氧基-4,6-二甲基吡啶-3-基)-1-((3R^*,4S^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-反式)或其藥學上可接受的鹽：
一種(-)-7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-((3R^*,4R^*)-3-甲基四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮((-)-順式)或其藥學上可接受的鹽：[化12]
一種7-(2-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-4-基)-1-(反式-4-甲氧基環己基)-1H-吡唑并[4,3-c]喹啉-4(5H)-酮或其藥學上可接受的鹽：
一種藥物組合物，包含如請求項1之化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分。
如請求項9之藥物組合物，係PDE9抑制劑。
如請求項9之藥物組合物，用於提高大腦內cGMP濃度。
一種在阿茲海默氏病中改善認知功能障礙之藥劑，包含如請求項1之化合物或其藥學上可接受的鹽。
一種在阿茲海默氏病中改善認知功能障礙之方法，包括將如請求項1之化合物或其藥學上可接受的鹽給予一患者。
如請求項1之化合物或其藥學上可接受的鹽，用於在阿茲海默氏病中改善認知功能障礙。