TW201408667A - 取代的氮雜吲哚化合物及其鹽、組合物和用途 - Google Patents

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Abstract

本發明提供了具有式(I)結構的取代氮雜吲哚類化合物，其藥學上可接受的鹽，及其藥物製劑，用於調節蛋白激酶的活性，並調節細胞間或細胞內的信號回應。本發明同時也涉及包含本發明化合物的藥物組合物，並使用該藥物組合物治療哺乳動物，特別是人類高增殖性疾病的方法,□

Description

取代的氮雜吲哚化合物及其鹽、組合物和用途
本發明屬於藥物領域並且具體涉及用於治療癌症的取代的氮雜吲哚化合物化合物及其鹽、組合物和用途。特別地，本發明所述的化合物是可以作為蛋白激酶抑制劑的威羅菲尼(vemurafenib)的前藥、鹽及其藥物組合物。
激酶，作為蛋白中的大家族，已經成為藥物研究中的一類主要靶點。人類基因測序證實，有超過500個蛋白激酶存在於人類基因中，他們被稱為人類激酶組。這些蛋白激酶，基於結構，被分成7個家族，其中，388個絲/蘇氨酸激酶被分為5個家族，包括AGC,CAMK,CMGC,CK1和STE；90個酪氨酸激酶則分成2個家族，即TK(酪氨酸激酶)家族(58個)和TKL(酪氨酸激酶樣)家族(32個)；另外，還有40個結構差異較大的非典型激酶。許多有效的藥物靶點都來源於TK家族，例如表皮生長因數受體(EGFR)，血管內皮生長因數受體(VEGFR)，血小板衍生生長因數受體(PDGFR)。近期的臨床資料顯示，使用B-Raf抑制劑可以治療因B-RafV600E突變引起的黑素瘤，從而批准威羅菲尼(vemurafenib)治療晚期轉移黑素瘤。
激酶可以通過獨立信號通路和協同信號轉導兩種途徑調控癌細胞生長，例如，Ras/Raf/MEK/ERK絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路，可以介導各種生長信號的細胞相應，在癌細胞中，此通路常常失調。Raf家族由絲/蘇氨酸激酶A-Raf，B-Raf和C-Raf(Raf-1)組成，它們都可以磷酸化和活化MEK，但只有B-Raf在各種癌症中產生突變；且最常見的B-Raf突變發生在密碼子600位元(BRAFV600E)上-谷氨酸被纈氨酸所取代。B-Raf基因突變後，通過構成性 活化將MAPK通路放大，即使沒有任何生長信號，也可引起惡性腫瘤的生長。
2002年，一項重要的研究表明，在所有的黑素瘤患者中，超過50%存在BRAF基因的活化突變。除黑素瘤，活化的BRAF突變還存在於結直腸癌(40%出現錯配修復缺陷)，50%的甲狀腺乳頭狀癌和30%的低級的漿液性卵巢癌中。儘管其它的Raf亞結構，如A-Raf和C-Raf，也能活化某些信號通路，但只有B-Raf可以啟動MAPK通路。
黑素瘤由黑素細胞-一種專門的色素細胞，轉化而成。黑素瘤可發生在皮膚(表皮)，眼睛(葡萄膜)，或黏膜組織(黏膜)。儘管在歐洲血統人群中，黑素瘤排在皮膚癌症的第三位(緊跟鱗狀細胞癌和基底細胞癌之後)，但死亡的皮膚癌患者幾乎都是黑素瘤病人。一旦擴散到器官，黑素瘤便成為相當棘手的、發病率和死亡率都很高的臨床疾病。當下，臨床IV期的黑素瘤患者，平均生存率為6-10個月，這種情況在過去30年中，都沒有太大的變化。
威羅菲尼(vemurafenib)(商品名Zelboraf®，曾用代號PLX4032)是一種小分子B-Raf激酶抑制劑，用於治療由啟動的BRAF突變引的癌症。威羅菲尼(vemurafenib)的第一適應症是黑素瘤(>50%存在啟動的BRAF突變)，在其它實體瘤上的應用，如結直腸癌(>10%存在啟動的BRAF突變)，還在研究中。提純的激酶試驗證明威羅菲尼(vemurafenib)及其類似物可以高效抑制B-Raf活性，對V600E突變的選擇性高於野生型3倍。
在臨床前的體內和體外模型試驗中，威羅菲尼(vemurafenib)及其同系物都可以抑制B-RafV600E陽性黑素瘤細胞株的生長。臨床I期中，晚期結腸癌病人每天兩次使用口服膠囊，給藥劑量逐步從200mg增加到600mg。由於晶型製劑的釋放效果一般，因此，威羅菲尼(vemurafenib)被做成了微沉澱散裝粉(MBP)劑型，用以提高藥物的生物利用度。
威羅菲尼(vemurafenib)水溶性差，水溶速率低，生物利用度不高，尤其是口服給藥時。較差的生物利用度使患者對藥物達不到預期的吸收，從而影響預期的劑量或治療效果。此外，對於生物利用度低的藥物，食物會影響其吸收，需隨時調整劑量，可見，此藥吸收不穩定，需要一個很寬的安全劑量範圍。由於此藥必須在高劑量下，才能達到有效的系統或靶向濃度，故對某些病例並不實用，或是產生副作用(Testa et al.,Prodrugs：bridging pharmacodynamic/pharmacokineticgaps.Curr.Opin.Chem.Biol. 2009,13,1-7).
前藥是原料藥的相似物，給藥後，經過生物體內轉化或代謝變 成有活性的藥物形式。一般地，前藥通過在一個或多個方面改善原藥的藥代學性質，來提高治療效果，它可以克服原藥在劑型和代謝方面的多種困難，例如，水溶性低，穩定性差，口服生物利用度不夠，首過效應明顯和毒性。
威羅菲尼(vemurafenib)的缺陷是生物利用度低，口服劑量大(MBP劑型的批准劑量為每天2次，每次960mg)，但它對黑素瘤的顯著療效，使其成為了備受關注的藥物底物，研究者期望通過合成威羅菲尼(vemurafenib)類似物，來改善口服生物利用度。因此，為提高生物利用度，合成它的前藥是很有必要的，尤其是對氮雜吲哚和/或芳香磺醯胺基上的NH進行修飾，可以有利於胃腸道的吸收。這樣得到的類似物簡便(減小劑量和使用頻率)、高效、副作用小，此外，還可製成靜注劑型或緩釋劑型。
有鑑於此，本發明提供了一種新的取代的氮雜吲哚化合物及其消旋體，立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，氮氧化物，代謝產物或藥學上可接受的鹽，所述的各化合物為威羅菲尼(vemurafenib)前藥，對蛋白激酶具有抑制作用，可以用於製備預防和治療癌症這樣的增殖性疾病的藥物。
本發明所涉及的化合物對蛋白酪激酶活性有抑制作用，特別是對B-Raf蛋白激酶的抑制作用。
特別的，本發明還提供了所涉及的化合物藥學上可接受的組合物，所涉及的組合物可以有效預防和治療癌症這樣的細胞增殖性疾病的藥物。
一方面，本發明提供了一種如式(I)所示的化合物： 或其消旋體，立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，氮氧化物，代謝產物或藥學上可接受的鹽，其中：各X和Y獨立地為H，-C(=O)R3，-C(=O)OR4，-C(R1R2)OC(=O)R3，-C(R1R2)OC(=O)OR4或-C(R1R2)OP(=O)(OR4)(OR4a)，且當Y為H時，X不能為 H或乙醯基；各R1和R2獨立地為H，D，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C3-6環烷基，-(C1-4亞烷基)-(C3-6環烷基)，C3-6雜環基或-(C1-4亞烷基)-(C3-6雜環基)，其中，所述各R1和R2分別與碳原子相連，或R1和R2相連後與碳原子相連，或R1，R2，和與他們相連的碳原子一起，形成取代或未被取代的3-8個原子組成的碳環或雜環；各R3獨立地為H，D，C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，I，-OH，-NH2，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-6烷氧基和C1-6烷氨基的取代基所取代；各R4和R4a獨立地為H，C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，-OH，-NH2，氧代(=O)，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-6烷氧基和C1-6烷氨基的取代基所取代。
在一些實施方案中，各R1和R2獨立地為H，D或C1-3烷基。
在另外一些實施方案中，各R3獨立地為C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，OH，-OMe，-NH2，-NHMe，-NMe2和C1-3烷基的取代基所取代。
在一些實施方案中，各R4和R4a獨立地為H，C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)或C6-10芳基，其中，所述各C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)和C6-10芳基未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，OH，-OMe，-NH2，-NHMe，-NMe2，氧代(=O)和C1-3烷基的取代基所取代。
在另外一些實施方案中，各X和Y獨立地為H或-C(R1R2)OP(=O)(OH)2，且X和Y不能同時為H。
在一些實施方案中，各X和Y獨立地為H，-C(=O)R3，-C(=O)OR4，-C(R1R2)OC(=O)R3，-C(R1R2)OC(=O)OR4，且當Y為H時，X不能為H或乙醯基。
在另外一些實施方案中，醯基片段(-C(=O)R3)是α-氨基酸或其光學異構體形成的基團。
在一些實施方案中，α-氨基酸為異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，丙氨酸，天門冬醯胺，天門冬氨酸，谷氨酸，穀氨醯胺，脯氨酸，絲氨酸，對-酪氨酸，精氨酸，組氨酸，半胱氨酸，甘氨酸，肌氨酸，N,N-二甲基甘氨酸，高絲氨酸，正纈氨酸，正亮氨酸，鳥氨酸，高半胱氨酸，高苯丙氨酸，苯基甘氨酸，鄰-酪氨酸，間-酪氨酸或羥脯氨酸。
在另外一些實施方案中，所述α-氨基酸為異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，丙氨酸，天門冬醯胺，天門冬氨酸，谷氨酸，穀醯胺，脯氨酸，絲氨酸，酪氨酸，精氨酸或組氨酸，其中，所述每一種氨基酸的α-位都是S構型。
在一些實施方案中，藥學上可接受的鹽為其鹼金屬鹽，鹼土金屬鹽，銨鹽或N+C1-4烷基)4鹽。
在另外一些實施方案中，所述式(I)化合物藥學上可接受的鹽是其鈉鹽，鋰鹽，鉀鹽，鈣鹽，鎂鹽，銨鹽，季銨鹽，或其組合。
在一些實施方案中，所述式(I)化合物藥學上可接受的鹽可以是其無機鹽，有機鹽或其組合，其中，所述的無機鹽是鹽酸鹽，氫溴酸鹽，硫酸鹽，硝酸鹽，磷酸鹽或其組合，所述有機鹽是乙酸鹽，馬來酸鹽，琥珀酸鹽，扁桃酸鹽，延胡索酸鹽，丙二酸鹽，蘋果酸鹽，2-羥基丙酸鹽，丙酮酸鹽，草酸 鹽，乙醇酸鹽，水楊酸鹽，葡萄糖醛酸鹽，半乳糖醛酸鹽，檸檬酸鹽，酒石酸鹽，天冬氨酸鹽，谷氨酸鹽，苯甲酸鹽，肉桂酸鹽，對甲苯磺酸鹽，苯磺酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，三氟甲磺酸鹽或其組合。
另一方面，本發明還提供了一種藥物組合物，包含本發明化合物和藥學上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑，輔劑，媒介物，或其組合。
在一些實施方案中，本發明所述的藥物組合物，還包含附加治療劑，所述附加治療劑選自化學治療藥物，抗增殖劑，用於治療動脈粥樣硬化的藥物，用於治療肺纖維化的藥物，或其組合。
在一些實施方案中，所述的附加治療劑是苯丁酸氮芥(chlorambucil)、美法侖(melphalan)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、異環磷醯胺(ifosfamide)、白消安(busulfan)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、鏈脲佐菌素(streptozocin)、順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、達卡巴嗪(dacarbazine)、替莫唑胺(temozolomide)、丙卡巴肼(procarbazine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、阿糖胞苷(cytarabine)、吉西他濱(gemcitabine)、巰基嘌呤(mercaptopurine)、氟達拉濱(fludarabine)、長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)、長春瑞濱(vinorelbine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、拓撲替康(topotecan)、伊立替康(irinotecan)、依託泊苷(etoposide)、曲貝替定(trabectedin)、更生黴素(dactinomycin)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、道諾黴素(daunorubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、博來黴素(bleomycin)、絲裂黴素C(mitomycin)、伊沙匹隆(ixabepilone)、他莫昔芬(tamoxifen)、氟他胺(flutamide)、戈那瑞林類似物(gonadorelin analogues)、甲地孕酮(megestrol)、強的松(prednisone)、地塞米松(dexamethasone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)、沙利度胺(thalidomide)、干擾素α(interferon alfa)、亞葉酸鈣(leucovorin)、西羅莫司(sirolimus)、西羅莫司脂化物(temsirolimus)、依維莫司(everolimus)、阿法替尼(afatinib)、alisertib、amuvatinib、阿帕替尼(apatinib)、阿西替尼(axitinib)、硼替佐米(bortezomib)、波舒替尼(bosutinib)、brivanib、cabozantinib、西地尼布(cediranib)、crenolanib、克卓替尼(crizotinib)、dabrafenib、dacomitinib、danusertib、達沙替尼(dasatinib)、dovitinib、厄洛替尼(erlotinib)、foretinib、ganetespib、吉非替尼(gefitinib)、ibrutinib、埃克替尼(icotinib)、伊馬替尼(imatinib)、iniparib、拉帕替尼(lapatinib)、lenvatinib、 linifanib、linsitinib、馬賽替尼(masitinib)、momelotinib、莫替沙尼(motesanib)、來那替尼(neratinib)、尼祿替尼(nilotinib)、niraparib、oprozomib、olaparib、帕唑帕尼(pazopanib)、pictilisib、ponatinib、quizartinib、regorafenib、rigosertib、rucaparib、ruxolitinib、塞卡替尼(saracatinib)、saridegib、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、tasocitinib、telatinib、tivantinib、tivozanib、tofacitinib、trametinib、凡德他尼(vandetanib)、veliparib、威羅菲尼(vemurafenib)、vismodegib、volasertib、阿侖單抗(alemtuzumab)、貝伐單抗(bevacizumab)、brentuximab vedotin、卡妥索單抗(catumaxomab)、西妥昔單抗(cetuximab)、地諾單抗(denosumab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、伊匹單抗(ipilimumab)、尼妥珠單抗(nimotuzumab)、奧法木單抗(ofatumumab)、帕尼單抗(panitumumab)、利妥昔單抗(rituximab)、托西莫單抗(tositumomab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)或其組合。
另一方面，本發明還提供了使用本發明所述的化合物或所述藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者增殖性疾病的藥品的用途。
在一些實施方案中，本發明所述的增殖性疾病是轉移癌、結腸癌、胃腺癌、膀胱癌、乳腺癌、腎癌、肝癌、肺癌、皮膚癌、甲狀腺癌、腦癌、頸癌、前列腺癌、胰腺癌、中樞神經系統(CNS)的癌症、惡性膠質瘤、骨髓增生病、動脈粥樣硬化或肺纖維化。
另一方面，本發明還提供了使用本發明所述的化合物或藥物組合物來製備用於在生物標本內抑制或調節蛋白激酶活性的用途，所述方法包含使用本發明化合物或藥物組合物與所述的生物標本接觸。
在其中一些實施方案，本發明所述的蛋白激酶為B-Raf。
另一方面，本發明提供的一些藥物組合物，其包含本發明作為蛋白激酶抑制劑的化合物，或其立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，代謝產物，或其藥學上可接受的鹽，藥學上可接受的載體、稀釋劑，輔劑，媒介物，或其組合。
在一些實施方案中，本發明所提供的藥物組合物包含可作為B-Raf激酶信號回應抑制劑的化合物，或其立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，代謝產物，或其藥學上可接受的鹽，或藥學上可接受的載體、稀釋劑，輔劑，媒介物，或其組合。
在另外一些實施方案中，本發明所述化合物為威羅菲尼 (vemurafenib)前藥。在另外一些實施方案中，本發明藥物組合物更進一步地包含附加治療劑。
另一方面，本發明涉及抑制蛋白激酶活性的方法，該方法包含本發明的化合物或其藥物組合物與所述激酶接觸。在一些實施方案中，本發明涉及抑制B-Raf信號響應的方法，該方法包含本發明的化合物或其藥物組合物與所述受體接觸。另外一些實施方案是，在細胞或多細胞生物體中抑制蛋白激酶受體活性，特別是抑制B-Raf信號回應的活性。根據本發明所述的方法，該方法包含使用本發明化合物或其藥物組合物對所述多細胞生物體進行給藥。在一些實施方案中，所述多細胞生物體是指哺乳動物。在另外一些實施方案，所述多細胞生物體是指人類。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步地包含附加治療劑與所述激酶接觸。
另一方面，本發明涉及一種抑制細胞增殖活性的方法，所述方法包含使用本發明的化合物或其藥物組合物能抑制增殖的有效治療量與細胞接觸。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步地包含附加治療劑與細胞接觸。
另一方面，本發明涉及一種治療患者細胞增殖性疾病的方法，所述方法包含使用本發明化合物或其藥物組合物的有效治療量對患者進行給藥。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步包含附加治療劑的給藥。
另一方面，本發明涉及一種抑制患者腫瘤生長的方法，所述方法包含使用本發明化合物或其藥物組合物的有效治療量對患者進行給藥。在一些實施方案，本發明所述方法更進一步地包含附加治療劑的給藥。
另一方面，本發明涉及式(I)所包含的化合物的製備、分離和純化的方法。
前面所述內容只概述了本發明的某些方面，但並不限於這些方面。這些方面及其他的方面的內容將在下面作更加具體完整的描述。
具體實施方式
定義和一般術語
本發明將會把確定的具體化的內容所對應的文獻詳細列出，實施例都伴隨有結構式和化學式的圖解。本發明有預期地涵蓋所有的選擇餘地、變體和同等物，這些可能像申請專利範圍所定義的那樣包含在現有發明領域。所屬領域的技術人員將識別許多類似或等同於在此所描述的方法和物質，這些 可以應用於本發明的實踐中去。本發明絕非限於方法和物質的描述。有很多文獻和相似的物質與本發明申請相區別或抵觸，其中包括但絕不限於術語的定義，術語的用法，描述的技術，或像本發明申請所控制的範圍。
除非其他方面表明，本發明將應用以下定義。根據本發明的目的，化學元素根據元素週期表，CAS版本和化學藥品手冊，75，thEd，1994來定義。另外，有機化學一般原理見"Organic Chemistry," Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito：1999,and "March's Advanced Organic Chemistry," by Michael B.Smith and Jerry March,John Wiley&Sons,New York：2007，因此所有的內容都融合了參考文獻。
像本發明所描述的，本發明的化合物可以任選地被一個或多個取代基所取代，如上面的通式化合物，或者像實施例裡面特殊的例子，子類，和本發明所包含的一類化合物。應瞭解“任選取代的”這個術語與“取代的”這個術語可以交換使用。一般而言，術語“取代的”或“取代”，表示所給結構中的一個或多個氫原子被具體取代基所取代。除非其他方面表明，一個任選的取代基團可以有一個取代基在基團各個可取代的位置進行取代。當所給出的結構式中不只一個位置能被選自具體基團的一個或多個取代基所取代，那麼取代基可以相同或不同地在各個位置取代。其中所述的取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，氧代，烷基，鹵代烷基，羥基，氨基，烷氧基，烷氨基，酯基，羧基等等。
本發明使用的術語“烷基”或“烷基基團”，表示含1-20個碳原子的飽和直鏈或支鏈一價碳氫化合物原子團。其中所述烷基基團可以獨立任選地被一個或多個取代基所取代。除非另外詳細說明，烷基基團含有1-20個碳原子，其中一些實施例是，烷基基團含有1-10個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-8個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-6個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-5個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含有1-4個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含1-3個碳原子，另外一些實施例是，烷基基團含1-2個碳原子。
烷基基團的實例包含，但並不限於，甲基(Me，-CH3)，乙基(Et，-CH2CH3)，正丙基(n-Pr，-CH2CH2CH3)，異丙基(i-Pr，i-propyl，-CH(CH3)2)，正丁基(n-Bu，n-butyl，-CH2CH2CH2CH3)，異丁基(i-Bu，i-butyl，-CH2CH(CH3)2)，仲丁基(s-Bu，s-butyl，-CH(CH3)CH2CH3)，叔丁基(t-Bu， t-butyl，-C(CH3)3)，正戊基(n-pentyl，-CH2CH2CH2CH2CH3)，2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)，3-戊基(-CH(CH2CH3)2)，2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)，3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)，3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)，2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)，正己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)，2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)，3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))，2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)，3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)，4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)，3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)，2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)，2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)，3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)，正庚基，正辛基，等等。並且烷基可以是取代或非取代的，其中取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基，酯基，羧基等等。
本發明所使用的術語“烷基”和其首碼“烷”，都包含直鏈和支鏈的飽和碳鏈。
本發明使用的術語“亞烷基”，表示從直鏈或支鏈飽和碳氫化合物消去兩個氫原子得到的飽和二價烴基。除非另外詳細說明，亞烷基基團含有1-10個碳原子，其中一些實施例是，亞烷基基團含有1-6個碳原子，另外一些實施例是，亞烷基基團含有1-4個碳原子，另外一些實施例是，亞烷基基團含有1-3個碳原子，另外一些實施例是，亞烷基基團含有1-2個碳原子。亞烷基基團的實例包括，但並不限於，亞甲基(-CH2-)，亞乙基(-CH2CH2-)，次乙基(-CH(CH3)-)，次異丙基(-CH(CH3)CH2-)等等。亞烷基可被進一步取代，該取代基選自，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基，環烷基，雜環基，芳基，雜芳基等等。
術語“烯基”表示直鏈或支鏈的一價烴基，其中至少一個位置為不飽和狀態，即一個C-C為sp2雙鍵。除非另外詳細說明，烯基含有2-12個碳原子，其中一些實施例是，烯基含有2-8個碳原子；另外一些實施例是，烯基含有2-6個碳原子；另外一些實施例是，烯基含有2-4個碳原子。烯基具體的實例包括，但並不限於，乙烯基(-CH=CH2)、烯丙基(-CH2CH=CH2)等等。其中鏈烯基的基團可以獨立任選地被一個或多個本發明所描述的取代基所取代，包括基團有“反”、“正”、“E”或“Z”的定位。
術語“炔基”表示直鏈或支鏈的一價烴基，其中至少一個位置為 不飽和狀態，即一個C-C為sp三鍵。除非另外詳細說明，炔基含有2-12個碳原子；在一些實施例中，炔基含有2-8個碳原子；在另外一些實施例中，炔基含有2-6個碳原子；在另外一些實施例中，炔基含有2-4個碳原子。烴基具體的實例包括但並不限於，乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH2C≡CH)等等。其中烴基基團可以獨立任選地被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。
術語“鹵代烷基”，“鹵代鏈烯基”或“鹵代烷氧基”表示烷基、鏈烯基或烷氧基基團被一個或多個鹵素原子所取代，其中鏈烯基和烷氧基具有本發明所述的含義，這樣的實例包含，但並不限於，三氟甲基，三氟甲氧基等。鹵代烷基可被進一步取代，該取代基選自，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基等等。
術語“碳環”或“碳環基”是指一價或多價，非芳香族，飽和或部分不飽和，含3-12個碳原子的單環。除非另外詳細說明，碳環含有3-12個碳原子，另外一些實施例是，碳環含有3-8個碳原子。合適的環狀脂肪族基團包括，但並不限於，環烷基，環烯基和環炔基。環狀脂肪族基團的實例進一步包括，但絕不限於，環丙基，環丁基，環戊基，1-環戊基-1-烯基，1-環戊基-2-烯基，1-環戊基-3-烯基，環己基，1-環己基-1-烯基，1-環己基-2-烯基，1-環己基-3-烯基，環己二烯基，等等。並且所述“環烷基”是指一價或多價，飽和的，含3-12個碳原子的單環。除非另外詳細說明，環烷基含有3-12個碳原子，另外一些實施例是，環烷基含有3-8個碳原子，另外一些實施例是，環烷基含有3-6個碳原子。環烷基可被進一步取代，該取代基選自，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基等等。
術語“環烷基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個環烷基基團所取代，其中烷基和環烷基基團具有如本發明所述的含義。其中一些實施例是，環烷基亞烷基基團是指“較低級的環烷基亞烷基”基團，即環烷基基團連接到C1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，環烷基基團連接到C1-4的烷基基團上。另外一些實施例是，環烷基基團連接到C1-3的烷基基團上。這樣的實例包括，但並不限於，環丙基乙基，環戊基甲基，環己基甲基等等。環烷基亞烷基可被進一步取代，該取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基，等等。
術語“雜環”、“雜環基”或“雜環的”在此處可交換使用，都是指單環或雙環體系，其中環上一個或多個原子獨立任選地被雜原子所取代，環可 以是完全飽和的或包含一個或多個不飽和度，但絕不是芳香族類，只有一個連接點連接到其他分子上去。一個或多個環上的氫原子獨立任選地被一個或多個本發明所描述的取代基所取代。其中一些實施例是，“雜環”，“雜環基”或“雜環的”基團是3-7元環的單環(2-6個碳原子和選自N，O，P，S的1-3個雜原子，在此S或P任選地被一個或多個氧原子所取代得到像SO，SO2，PO，PO2的基團，當所述的環為三元環時，其中只有一個雜原子)，或7-10元的雙環(4-9個碳原子和選自N，O，P，S的1-3個雜原子，在此S或P任選地被一個或多個氧原子所取代得到像SO，SO2，PO，PO2的基團)。
雜環基可以是碳基或雜原子基。雜環的實例包括，但並不限於，吡咯烷基，四氫呋喃基，二氫呋喃基，四氫噻吩基，四氫吡喃基，二氫吡喃基，四氫噻喃基，呱啶基，嗎啉基，硫代嗎啉基，噻噁烷基，呱嗪基，高呱嗪基，氮雜環丁基，氧雜環丁基，硫雜環丁基，高呱啶基，環氧丙基，氮雜環庚基，氧雜環庚基，硫雜環庚基，氧氮雜卓基，二氮雜卓基，硫氮雜卓基，2-吡咯啉基，3-吡咯啉基，二氫吲哚基，2H-吡喃基，4H-吡喃基，二氧雜環己基，1,3-二氧戊基，吡唑啉基，二噻烷基，二噻茂烷基，二氫噻吩基，吡唑烷基咪唑啉基，咪唑烷基，1,2,3,4-四氫異喹啉基，5-甲基-1,3-二氧雜環戊烯-4-基，1,3-二氧雜環戊烯-2-酮-4-基。雜環基團的實例還包括，環上兩個碳原子被氧(=O)取代的嘧啶二酮基和1,1-二氧硫代嗎啉基。並且所述雜環基獨立任選地被本發明中的一個或多個取代基取代，其中取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基，等等。
術語“雜環基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個雜環基基團所取代，其中烷基和雜環基基團具有如本發明所述的含義。其中一些實施例是，雜環基亞烷基基團是指“較低級的雜環基亞烷基”基團，即雜環基基團連接到C1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，雜環基基團連接到C1-4的烷基基團上。這樣的實例包括，但並不限於，(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧雜環戊烯-4-基)甲基，(呱啶-4-基)甲基等等。雜環基亞烷基可被進一步取代，該取代基可以是，但不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基，等等。
術語“雜原子”表示一個或多個O，S，N，P和Si，包括N，S和P任何氧化態的形式；伯、仲、叔胺和季銨鹽的形式；或者雜環中氮原子上的氫被取代的形式，例如，N(像3，4-二氫-2H-吡咯基中的N)，NH(像吡咯 烷基中的NH)或NR(像N-取代的吡咯烷基中的NR)。
術語“鹵素”是指F，Cl，Br或I。
術語“H”表示單個氫原子。這樣的原子團可以與其他基團連接，譬如與氧原子相連，形成羥基基團。
術語“D”表示單個氘原子。一個這樣的原子團與一個甲基相連，形成單-氘代甲基(-CDH2)，兩個氘原子與一個甲基相連，形成雙-氘代甲基(-CD2H)，以及三個氘原子與一個甲基相連，形成三-氘代甲基(-CD3)。
術語“芳基”可以單獨使用或作為“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”的一大部分，表示共含有6-14元環的單環，雙環，和三環的碳環體系，其中，至少一個環體系是芳香族的，其中每一個環體系包含3-7元環，且只有一個附著點與分子的其餘部分相連。術語“芳基”可以和術語“芳香環”交換使用，芳香環可以包括苯基，萘基和蒽。並且所述芳基可以是取代或非取代的，其中取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基等等。
術語“芳基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個芳基基團所取代，其中烷基和芳基基團具有如本發明所述的含義，其中一些實施例是，芳基亞烷基基團是指“較低級的芳基亞烷基”基團，即芳基基團連接到C1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，芳基亞烷基基團是指含C1-4的烷基的“苯烷撐”。另外一些實施例是，芳基亞烷基基團是指含C1-2的烷基的“苯烷撐”。其中具體實例包括苄基，二苯基甲基，苯乙基等等。芳基亞烷基可被進一步取代，該取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基，等等。
術語“雜芳基”可以單獨使用或作為“雜芳烷基”的一大部分，表示含5-14個環原子的單環，雙環，和三環體系，其中至少一個環體系是芳香族的，且至少一個環體系包含一個或多個雜原子，其中每一個環體系包含5-7元環，且只有一個附著點與分子其餘部分相連。術語“雜芳基”可以與術語“芳雜環”或“雜芳族化合物”交換使用。並且所述雜芳基可以是取代或非取代的，其中取代基可以是，但並不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基等等。
另外一些實施例是，芳雜環包括以下的單環，但並不限於這些單環：2-呋喃基，3-呋喃基，N-咪唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，5-咪唑基，3-異 噁唑基，4-異噁唑基，5-異噁唑基，2-噁唑基，4-噁唑基，5-噁唑基，N-吡咯基，2-吡咯基，3-吡咯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，2-嘧啶基，4-嘧啶基，5-嘧啶基，噠嗪基(如3-噠嗪基)，2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基，四唑基(如5-四唑基)，三唑基(如2-三唑基和5-三唑基)，2-噻吩基，3-噻吩基，吡唑基(如2-吡唑基)，異噻唑基，1，2，3-噁二唑基，1，2，5-噁二唑基，1，2，4-噁二唑基，1，2，3-三唑基，1，2，3-硫代二唑基，1，3，4-硫代二唑基，1，2，5-硫代二唑基，吡嗪基，1，3，5-三嗪基；也包括以下的雙環，但絕不限於這些雙環：苯並咪唑基，苯並呋喃基，苯並噻吩基，吲哚基(如2-吲哚基)，嘌呤基，喹啉基(如2-喹啉基，3-喹啉基，4-喹啉基)，和異喹啉基(如1-異喹啉基，3-異喹啉基或4-異喹啉基)。
術語“雜芳基亞烷基”表示烷基基團可以被一個或多個雜芳基基團所取代，其中烷基和雜芳基基團具有如本發明所述的含義，其中一些實施例是，雜芳基亞烷基基團是指“較低級的雜芳基亞烷基”基團，即雜芳基基團連接到C1-6的烷基基團上。另外一些實施例是，雜芳基基團連接到C1-4的烷基基團上。其中具體實例包括2-吡啶甲基，3-呋喃乙基等等。雜芳基亞烷基可被進一步被取代，該取代基可以是，但不限於，氘，氟，氯，溴，碘，羥基，氨基，氧代，烷基，鹵代烷基，烷氧基，烷氨基等等。
術語“羧基”，無論是單獨使用還是和其他術語連用，如“羧烷基”，表示-CO2H；術語“羰基”，無論是單獨使用還是和其他術語連用，如“氨基羰基”或“醯氧基”，表示-(C=O)-；術語“醯基”表示-(C=O)R，其中，R為烷基，所述“烷基”具有本發明所述的含義。
本發明中所使用的術語“烷氧基”，涉及到烷基，像本發明所定義的，通過氧原子(“烷氧基”)連接到主要的碳鏈上，這樣的實例包括，但並不限於甲氧基，乙氧基，丙氧基，丁氧基，等等。
術語“烷氨基”或“烷基氨基”包括“N-烷基氨基”和“N,N-二烷基氨基”，其中氨基基團分別獨立地被一個或兩個烷基基團所取代。其中一些實施例是，烷基氨基是一個或兩個C1-6烷基連接到氮原子上的較低級的烷基氨基基團。另外一些實施例是，烷基氨基是C1-3的較低級的烷基氨基基團。合適的烷基氨基基團可以是單烷基氨基或二烷基氨基，這樣的實例包括，但並不限於，N-甲氨基，N-乙氨基，N,N-二甲氨基，N,N-二乙氨基等等。
在本發明中所使用的術語“不飽和的”表示部分含有一個或多個 不飽和度。
術語“包含”為開放式表達，即包括本發明所指明的內容，但並不排除其他方面的內容。
像本發明所描述的，取代基畫一個鍵連接到中心的環上形成的環體系(如下圖所示)代表取代基在環上任何可取代的位置都可以取代。例如，式a代表B環上任何可能被取代的位置，如式b所示。
除非其他方面表明，本發明所描述的結構式包括所有的同分異構形式(如對映異構，非對映異構，和幾何異構(或構象異構))：例如含有不對稱中心的R、S構型，雙鍵的(Z)、(E)異構體，和(Z)、(E)的構象異構體。因此，本發明的化合物的單個立體化學異構體或其對映異構體，非對映異構體，或幾何異構體(或構象異構體)的混合物都屬於本發明的範圍。
本發明所使用的術語“互變異構體”或“互變異構形式”表示具有不同能量的結構同分異構體可以越過低能壘，從而互相轉化。譬如，質子互變異構體(即質子移變)包括通過質子遷移進行互變，如酮-烯醇式互變和亞胺-烯胺同分異構化作用。化合價互變異構體包括通過一些成鍵電子重組而進行互變。
除非其他方面表明，本發明的化合物的所有互變異構形式都包含在本發明的範圍之內。另外，除非其他方面表明，本發明所描述的化合物的結構式包括一個或多個不同的原子的富集同位素。
本發明所使用的術語“前藥”，代表一個化合物在體內轉化為式(I)所示的化合物。這樣的轉化受前體藥物在血液中水解或在血液或組織中經酶轉化為母體結構的影響。本發明前體藥物類化合物可以是酯，在現有的發明中酯可以作為前體藥物的有苯酯類，脂肪族(C1-24)酯類，醯氧基甲基酯類，碳酸酯，氨基甲酸酯類和氨基酸酯類。例如本發明裡的一個化合物包含OH基團，即可以將其醯化得到前體藥物形式的化合物。其他的前體藥物形式包括磷酸酯，如這些磷酸酯類化合物是經母體上的羥基磷酸化得到的。關於前體藥物完整的討論可以參考以下文獻：Higuchi et al.,Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol.14,A.C.S.Symposium Series；Roche et al.,ed.,Bioreversible Carriers in Drug Design,American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987；Rautio et al.,Prodrugs：Design and Clinical Applications,Nature Reviews Drug Discovery,2008,7,255-270,and Hecker et al.,Prodrugs of Phosphates and Phosphonates,J.Med.Chem.,2008,51,2328-2345，每篇文獻通過引用包含於此。
“代謝產物”是指具體的化合物或其鹽在體內通過代謝作用所得到的產物。一個化合物的代謝產物可以通過所屬領域公知的技術來進行鑒定，其活性可以通過如本發明所描述的那樣採用試驗的方法進行表徵。這樣的產物可以是通過給藥化合物羥過氧化，還原，水解，醯氨化，脫醯氨作用，酯化，脫脂作用，酶裂解等等方法得到。相應地，本發明包括化合物的代謝產物，包括將本發明的化合物與哺乳動物充分接觸一段時間所產生的代謝產物。
本發明中立體化學的定義和慣例的使用通常參考以下文獻：Parker et al.,ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York and Eliel et al.,"Stereochemistry of Organic Compounds",John Wiley & Sons,Inc.,NewYork,1994.本發明的化合物可以包含不對稱中心或手性中心，因此存在不同的立體異構體。本發明的化合物所有的立體異構形式，包括但絕不限於，非對映體，對映異構體，阻轉異構體，和其混合物，如外消旋混合物，組成了本發明的一部分。很多有機化合物都以光學活性形式存在，即它們有能力旋轉平面偏振光的平面。在描述光學活性化合物時，首碼D、L或R、S用來表示分子手性中心的絕對構型。首碼d、l或(+)、(-)用來命名化合物平面偏振光旋轉的符號，(-)或l是指化合物是左旋的，首碼(+)或d是指化合物是右旋的。這些立體異構體的化學結構是相同的，但是其立體結構不一樣。特定的立體異構體可以是對映體，異構體的混合物通常稱為對映異構體混合物。50：50的對映體混合物被稱為外消旋混合物或外消旋體，這可能導致化學反應過程中沒有立體選擇性或立體定向性。術語“外消旋混合物”和“外消旋體”是指等摩爾的兩個對映異構體的混合物，缺乏光學活性。
本發明所使用的“藥學上可接受的鹽”是指本發明的化合物的有機鹽和無機鹽。藥學上可接受的鹽在所屬領域是為我們所熟知的，如文獻：Berge et al.,describe pharmaceutically acceptable salts in detail in J.Pharmacol Sci,1977,66,1-19，所記載的。藥學上可接受的無毒的酸形成的鹽包括，但並不限於，與氨基基團反應形成的無機酸鹽有鹽酸鹽，氫溴酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，高氯酸 鹽，和有機酸鹽如乙酸鹽，草酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，丙二酸鹽，或通過書籍文獻上所記載的其他方法如離子交換法來得到這些鹽。其他藥學上可接受的鹽包括己二酸鹽，藻酸鹽，抗壞血酸鹽，天冬氨酸鹽，苯磺酸鹽，苯甲酸鹽，重硫酸鹽，硼酸鹽，丁酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環戊基丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙磺酸鹽，甲酸鹽，反丁烯二酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，葡萄糖酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基-乙磺酸鹽，乳糖醛酸鹽，乳酸鹽，月桂酸鹽，月桂基硫酸鹽，蘋果酸鹽，丙二酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，油酸鹽，棕櫚酸鹽，撲酸鹽，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，特戊酸鹽，丙酸鹽，硬脂酸鹽，硫氰酸鹽，對甲苯磺酸鹽，十一酸鹽，戊酸鹽，等等。通過適當的鹼得到的鹽包括鹼金屬，鹼土金屬，銨和N+(C1-4烷基)4的鹽。本發明也擬構思了任何所包含N的基團的化合物所形成的季銨鹽。水溶性或油溶性或分散產物可以通過季銨化作用得到。鹼金屬或鹼土金屬鹽包括鈉，鋰，鉀，鈣，鎂，等等。藥學上可接受的鹽進一步包括適當的、無毒的銨，季銨鹽和抗平衡離子形成的胺陽離子，如鹵化物，氫氧化物，羧化物，硫酸化物，磷酸化物，硝酸化物，C1-8磺酸化物和芳香磺酸化物。
本發明的“溶劑化物”是指一個或多個溶劑分子與本發明的化合物所形成的締合物。形成溶劑化物的溶劑包括，但並不限於，水，異丙醇，乙醇，甲醇，二甲亞碸，乙酸乙酯，乙酸，氨基乙醇。術語“水合物”是指溶劑分子是水所形成的締合物。
術語“保護基團”或“PG”是指一個取代基與別的官能團起反應的時候，通常用來阻斷或保護特殊的功能性。例如，“氨基的保護基團”是指一個取代基與氨基基團相連來阻斷或保護化合物中氨基的功能性，合適的氨基保護基團包括乙醯基，三氟乙醯基，叔丁氧羰基(BOC)，苄氧羰基(CBZ)和9-芴亞甲氧羰基(Fmoc)。相似地，“羥基保護基團”是指羥基的取代基用來阻斷或保護羥基的功能性，合適的保護基團包括乙醯基和甲矽烷基。“羧基保護基團”是指羧基的取代基用來阻斷或保護羧基的功能性，一般的羧基保護基包括-CH2CH2SO2Ph，氰基乙基，2-(三甲基矽烷基)乙基，2-(三甲基矽烷基)乙氧基甲基，2-(對甲苯磺醯基)乙基，2-(對硝基苯磺醯基)乙基，2-(二苯基膦基)乙基，硝基乙基，等等。對於保護基團一般的描述可參考文獻：Greene et al.,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley & Sons,New York,1991 and Kocienski et al.,Protecting Groups,Thieme,Stuttgart,2005.
化合物
本發明涉及威羅菲尼(vemurafenib)前藥，其藥學上可接受的鹽，及其藥物製劑，對蛋白激酶，尤其是B-Raf激酶調節的疾病或病症的治療有潛在的用途。特別是，本發明涉及一種如式(I)所示的化合物： 或其消旋體，立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，氮氧化物，代謝產物或藥學上可接受的鹽，其中X和Y的定義如下所示。
各X和Y獨立地為H，-C(=O)R3，-C(=O)OR4，-C(R1R2)OC(=O)R3，-C(R1R2)OC(=O)OR4或-C(R1R2)OP(=O)(OR4)(OR4a)，且當Y為H時，X不能為H或乙醯基；各R1和R2獨立地為H，D，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C3-6環烷基，-(C1-4亞烷基)-(C3-6環烷基)，C3-6雜環基或-(C1-4亞烷基)-(C3-6雜環基)，其中，所述各R1和R2分別與碳原子相連，或R1和R2相連後與碳原子相連，或R1，R2，和與他們相連的碳原子一起，形成取代或未被取代的3-8個原子組成的碳環或雜環，即R1，R2和與他們相連的碳原子一起，可以形成3-8個原子組成的的碳環或雜環，也可以不形成碳環或雜環，為本領域技術人員熟知的其他結構，如C-R1-R2或R1-C-R2等；各R3獨立地為H，D，C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，I，-OH，-NH2，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-6烷氧基和C1-6烷氨基的取代基所取代；各R4和R4a獨立地為H，C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞 烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，-OH，-NH2，氧代(=O)，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-6烷氧基和C1-6烷氨基的取代基所取代。
在一些實施方案中，各R1和R2獨立地為H，D或C1-3烷基。
在另外一些實施方案中，各R3獨立地為C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，OH，-OMe，-NH2，-NHMe，-NMe2和C1-3烷基的取代基所取代。
在一些實施方案中，各R4和R4a獨立地為H，C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)或C6-10芳基，其中，所述各C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)和C6-10芳基未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，OH，-OMe，-NH2，-NHMe，-NMe2，氧代(=O)和C1-3烷基的取代基所取代。
在另外一些實施方案中，各X和Y獨立地為H或-C(R1R2)OP(=O)(OH)2，且X和Y不能同時為H。
在一些實施方案中，各X和Y獨立地為H，-C(=O)R3，-C(=O)OR4，-C(R1R2)OC(=O)R3，-C(R1R2)OC(=O)OR4，且當Y為H時，X不能為H或乙醯基。
在另外一些實施方案中，醯基片段(-C(=O)R3)是α-氨基酸或其光學異構體形成的基團。
在一些實施方案中，α-氨基酸為異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，丙氨酸，天門冬醯胺，天門冬 氨酸，谷氨酸，穀氨醯胺，脯氨酸，絲氨酸，對-酪氨酸，精氨酸，組氨酸，半胱氨酸，甘氨酸，肌氨酸，N,N-二甲基甘氨酸，高絲氨酸，正纈氨酸，正亮氨酸，鳥氨酸，高半胱氨酸，高苯丙氨酸，苯基甘氨酸，鄰-酪氨酸，間-酪氨酸或羥脯氨酸，當α-氨基酸為天門冬氨酸或谷氨酸時，可以是其結構中的任意一個羰基與分子其餘部分相連。
在另外一些實施方案中，所述α-氨基酸為異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，丙氨酸，天門冬醯胺，天門冬氨酸，谷氨酸，穀醯胺，脯氨酸，絲氨酸，酪氨酸，精氨酸或組氨酸，其中，所述每一種氨基酸α-位都是S構型。
在一些實施方案中，所述式(I)化合物藥學上可接受的鹽為其鹼金屬鹽，鹼土金屬鹽，銨鹽或N+(C1-4烷基)4鹽。
在另外一些實施方案中，所述式(I)化合物藥學上可接受的鹽為其鈉鹽，鋰鹽，鉀鹽，鈣鹽，鎂鹽，銨鹽，季銨鹽，或其組合。
在一些實施方案中，所述式(I)化合物藥學上可接受的鹽可以是無機鹽，有機鹽或其組合，其中，所述無機鹽為鹽酸鹽，氫溴酸鹽，硫酸鹽，硝酸鹽，磷酸鹽或其組合，所述有機鹽為乙酸鹽，馬來酸鹽，琥珀酸鹽，扁桃酸鹽，延胡索酸鹽，丙二酸鹽，蘋果酸鹽，2-羥基丙酸鹽，丙酮酸鹽，草酸鹽，乙醇酸鹽，水楊酸鹽，葡萄糖醛酸鹽，半乳糖醛酸鹽，檸檬酸鹽，酒石酸鹽，天冬氨酸鹽，谷氨酸鹽，苯甲酸鹽，肉桂酸鹽，對甲苯磺酸鹽，苯磺酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，三氟甲磺酸鹽或其組合。
本發明所述的式(I)結構的化合物包括但不限於以下具體化合物或其消旋體、立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、藥學上可接受的鹽或它的前藥：
除非其他方面表明，本發明的化合物所有的消旋體、立體異構體、幾何異構體、互變異構體、氮氧化物、水合物、溶劑化物、代謝產物、鹽和藥學上可接受的前藥都屬於本發明的範圍。
具體地說，鹽是藥學上可接受的鹽。術語“藥學上可接受的”包括物質或組合物必須是適合化學或毒理學地，與組成製劑的其他組分和用於治療的哺乳動物有關。
本發明的化合物的鹽還包括用於製備或純化式(I)所示化合 物的中間體或式(I)所示化合物分離的對映異構體的鹽，但不一定是藥學上可接受的鹽。
如果本發明的化合物是鹼性的，則想得到的鹽可以通過文獻上提供的任何合適的方法製備得到，例如，使用無機酸，如鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸和磷酸等等。或者使用有機酸，如乙酸，馬來酸，琥珀酸，扁桃酸，富馬酸，丙二酸，丙酮酸，草酸，羥乙酸和水楊酸；吡喃糖酸，如葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸；α-羥酸，如檸檬酸和酒石酸；氨基酸，如天門冬氨酸和谷氨酸；芳香族酸，如苯甲酸和肉桂酸；磺酸，如對甲苯磺酸，乙磺酸，等等。
如果本發明的化合物是酸性的，則想得到的鹽可以通過合適的方法製備得到，如，使用無機鹼或有機鹼，如氨(伯氨，仲氨，叔氨)，鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物，等等。合適的鹽包括，但並不限於，從氨基酸得到的有機鹽，如甘氨酸和精氨酸，氨，如伯氨、仲氨和叔氨，和環狀氨，如呱啶，嗎啉和呱嗪等，和從鈉，鈣，鉀，鎂，錳，鐵，銅，鋅，鋁和鋰得到無機鹽。
本發明還包含本發明所述的化合物及其藥學上可接受的鹽的應用，即用於生產醫藥產品治療急慢性血管發生介導的疾病，包括那些本發明所描述的。本發明的化合物在生產抗癌藥物中的應用。本發明的化合物同樣用於生產一種醫藥用品來減輕，阻止，控制或治療由B-Raf所介導的疾病。本發明包含藥物組合物，該藥物組合物包括式(I)所代表的化合物與至少一個藥學上可接受的載體，輔劑或稀釋劑的結合所需的有效治療用量。
本發明同樣包含治療患者血管發生介導的疾病，或對此病症敏感的方法，該方法包含使用式(I)所代表化合物的治療有效量對患者進行治療。
組合物，製劑和給藥
根據另一方面，本發明的藥物組合物的特點包括式(I)的化合物，本發明所列出的化合物，或實施例中的化合物，和藥學上可接受的載體，輔劑，或賦形劑。本發明的組合物中化合物的量能有效地可探測地抑制生物標本或患者體內的蛋白激酶。
本發明的化合物存在自由形態，或合適的、作為藥學上可接受的衍生物。根據本發明，藥學上可接受的衍生物包括，但並不限於，藥學上可接受的前藥，鹽，酯，酯類的鹽，或能直接或間接地根據患者的需要給藥的其他任何加合物或衍生物，本發明其他方面所描述的化合物，其代謝產物或他的 殘留物。
像本發明所描述的，本發明藥學上可接受的組合物進一步包含藥學上可接受的載體，輔劑，或賦形劑，這些像本發明所應用的，包括任何溶劑，稀釋劑，或其他液體賦形劑，分散劑或懸浮劑，表面活性劑，等滲劑，增稠劑，乳化劑，防腐劑，固體黏合劑或潤滑劑，等等，適合於特有的目標劑型。如以下文獻所描述的：Troy et al.,Remington：The Science and Practice of Pharmacy,21st ed.,2005,Lippincott Williams & Wilkins,Philadelphia and Swarbrick et al.,Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,eds.1988-1999,Marcel Dekker,New York。綜合此處文獻的內容，表明不同的載體可應用於藥學上可接受的組合物的製劑和它們公知的製備方法。除了任何常規的載體媒介與本發明的化合物不相容的範圍，例如所產生的任何不良的生物效應或與藥學上可接受的組合物的任何其他組分以有害的方式產生的相互作用，其用途也是本發明所考慮的範圍。
可作為藥學上可接受載體的物質包括，但並不限於，離子交換劑，鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白，如人血清蛋白，緩衝物質如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質，如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠體矽，三矽酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，聚丙烯酸脂，蠟，聚乙烯-聚氧丙烯-阻斷聚合體，羊毛脂，糖，如乳糖，葡萄糖和蔗糖；澱粉如玉米澱粉和土豆澱粉；纖維素和它的衍生物如羧甲基纖維素鈉，乙基纖維素和乙酸纖維素；樹膠粉；麥芽；明膠；滑石粉；輔料如可哥豆脂和栓劑蠟狀物；油如花生油，棉子油，紅花油，麻油，橄欖油，玉米油和豆油；二醇類化合物，如丙二醇和聚乙二醇；酯類如乙基油酸酯和乙基月桂酸酯；瓊脂；緩衝劑如氫氧化鎂和氫氧化鋁；海藻酸；無熱原的水；等滲鹽；林格(氏)溶液；乙醇，磷酸緩衝溶液，和其他無毒的合適的潤滑劑如月桂硫酸鈉和硬脂酸鎂，著色劑，釋放劑，包衣衣料，甜味劑，調味劑和香料，防腐劑和抗氧化劑。
本發明的組合物可以是口服給藥，注射給藥，噴霧吸入法，局部給藥，經直腸給藥，經鼻給藥，含服給藥，陰道給藥或通過植入性藥盒給藥。此處所使用的術語“經注射的”包括皮下的，靜脈的，肌內的，關節內的，滑膜(腔)內的，胸骨內的，膜內的，眼內的，肝內的，病灶內的，和顱內的注射或輸注技術。優選的組合物為口服給藥，向腹膜內給藥或靜脈注射。本發明的組合物 無菌的注射方式可以是水的或油脂性的懸浮液。這些懸浮液可以根據公知技術採用合適的分散劑、濕潤劑和懸浮劑按配方製造。無菌注射劑可以是無菌注射液或懸浮液，是注射無毒的可接受的稀釋劑或溶劑，如1,3-丁二醇溶液。這些可接受的賦形劑和溶劑可以是水，林格溶液和等滲氯化鈉溶液。更進一步地，無菌的非揮發性的油按照慣例可以作為溶劑或懸浮介質。
以此為目的，任何溫和的非揮發性的油可以是合成的單或二葡基甘油二酯。脂肪酸，如油酸和它的甘油酯衍生物可用於血管注射劑的製備，作為天然的藥學上可接受的油脂，如橄欖油或蓖麻油，特別是其聚氧乙烯衍生物。這些油溶液或懸浮液可以包含長鏈醇稀釋劑或分散劑，如羧甲基纖維素或相似分散劑，一般用於藥學上可接受劑型的藥物製劑包括乳化液和懸浮液。其他常用的表面活性劑，如吐溫類，司盤類和其他乳化劑或生物藥效率的強化劑，一般用於藥學上可接受的固體，液體，或其他劑型，並可以應用於目標藥物製劑的製備。
本發明藥學上可接受的組合物可以是以任何可接受的口服劑型進行口服給藥，其中包括，但並不限於，膠囊，片劑，水製懸浮液或溶液。關於片劑口服使用，載體一般包括乳糖和玉米澱粉。潤滑劑，如硬脂酸鎂，都典型地被添加。對於膠囊口服給藥，合適的稀釋劑包括乳糖和乾的玉米澱粉。當口服給藥為水製懸浮液時，其有效成分由乳化劑和懸浮劑組成。如果想得到這些劑型，某些甜味劑、調味劑或著色劑也可以被添加。
另外，本發明藥學上可接受的組合物可以以栓劑的形式直腸給藥。這些可以通過將試劑與合適的非灌注輔藥混合製備而成，這種輔藥在室溫下為固體但在直腸的溫度下則為液體，從而在直腸中熔化並釋放藥物。這樣的物質包括可哥豆脂，蜂蠟，和聚乙二醇類。本發明藥學上可接受的組合物可以是局部給藥，特別是局部用藥時，涉及到區域或器官的治療目標容易達到，如眼、皮膚或下腸道的疾病。合適的局部用藥製劑可以製備得到並應用於這些領域或器官。
上述直腸栓劑或合適的灌腸劑可以應用於下部腸道的局部用藥。局部皮膚斑也可以這樣用藥。對於局部用藥，藥學上可接受的組合物可以按製劑方法製備成合適的軟膏，該軟膏包含活性成分懸浮於或溶解於一個或多個載體。本發明局部給藥的載體化合物包括，但並不限於礦物油，液體石蠟，白凡士林，丙二醇，聚氧乙烯，聚氧丙烯化合物，乳化蠟和水。另外，藥學上 可接受的組合物可以製備成合適的洗劑或乳劑，該洗劑或乳劑包含活性成分懸浮於或溶於一個或多個藥學上可接受的載體。合適的載體包括，但並不限於，礦物油，司盤-60(脫水山梨醇單硬脂酸酯)，吐溫60(聚山梨酯60)，十六烷基酯蠟，棕櫚醇，2-辛基十二烷醇，苯甲醇和水。
對於眼用的、藥學上可接受的組合物可以製備成製劑，如等滲的微粒化懸浮液，pH調節的無菌鹽水或其他水溶液，優選地，等滲溶液和pH調節的無菌鹽水或其他水溶液，可以添加消毒防腐劑如苯紮氯銨。另外，對於眼用的，藥學上可接受的組合物可以按製劑配方製備成軟膏如凡士林油。本發明藥學上可接受的組合物可以通過鼻的氣溶劑或吸入劑進行給藥。這樣的組合物可以根據製劑配方的公知技術製備得到，或可以製備成鹽溶液，使用苯甲醇或其他合適的防腐劑、吸收促進劑、碳氟化合物或其他常規增溶劑或分散劑來提高生物利用度。
口服給藥的液體劑型包括，但並不限於，藥學上可接受的乳劑，微乳劑，溶液，懸浮液，糖漿劑和酮劑。除活性化合物外，液體劑型可以包含公知的一般的惰性稀釋劑，例如，水或其他溶劑，增溶劑和乳化劑，如乙醇，異丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲醯胺，油脂(特別是棉籽，落花生，玉米，微生物，橄欖，蓖麻和麻油)，甘油，2-四氫呋喃甲醇，聚乙二醇，去水山梨糖醇脂肪酸酯，以及其混合物。除惰性的稀釋劑之外，口服組合物也可以包含輔劑如濕潤劑，乳化劑或懸浮劑，甜味劑，調味劑和芳香劑。
注射劑，如無菌注射液或油脂性的懸浮液可以根據公知技術採用合適的分散劑、濕潤劑和懸浮劑按製劑配方製備得到。無菌注射劑可以是無毒的經注射地可接受的稀釋劑或溶劑製成的無菌注射液、懸浮液或乳液，例如，1,3-丁二醇溶液。可接受的賦形劑和溶劑可以是水，林格(氏)溶液，U.S.P.和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌的非揮發性的油按照慣例作為溶劑或懸浮介質。以此為目的任何溫和的非揮發性的油可以包括合成的單或二葡基甘油二酯。另外，脂肪酸如油酸可以應用於注射劑。
注射劑可以是無菌的，如通過細菌防衛篩檢程式過濾，或以無菌固體組合物的形式摻入滅菌劑，在使用前滅菌劑可以溶解於或分散於消毒水或其他無菌注射介質中。為了延長本發明的化合物的效果，通常需要通過皮下注射或肌內注射來減緩化合物的吸收。這樣可以實現利用液體懸浮液解決晶體 或非晶體物質水溶性差的問題。化合物的吸收率取決於它的溶出度，依次取決於晶粒大小和晶體形狀。另外，可以通過化合物在油類賦形劑中溶解或分散來完成化合物注射給藥的延遲吸收。
注射劑儲藏形式是通過可生物降解的聚合物，如多乳酸-聚乙醇酸交酯形成化合物的微膠囊基質完成的。化合物的控釋比例取決於化合物形成聚合物的比例和特殊聚合物的性質。其他可生物降解聚合物包括聚(正酯類)和聚(酸酐)。注射劑儲藏形式也可以通過化合物嵌入與身體組織相容的脂質體或微乳劑製備得到。
其中一些實施例是，直腸或陰道給藥的組合物為栓劑，栓劑可以通過將本發明的化合物與合適的非灌注的輔料或載體混合來製備得到，如可哥豆脂，聚乙二醇，或栓劑蠟狀物，它們在室溫為固體但在體溫下則為液體，因此在陰道或鞘膜腔內便熔化釋放活性化合物。
口服給藥的固體劑型包括膠囊，片劑，丸劑，粉劑和粒劑。在這些劑型中，活性化合物與至少一種藥學上可接受的惰性賦形劑或載體混合，如檸檬酸鈉或磷酸鈣或充填劑或a)填充劑如澱粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和矽酸，b)黏合劑如羧甲基纖維素，藻酸鹽，明膠，聚乙烯吡咯酮，蔗糖和阿拉伯膠，c)保濕劑如甘油，d)崩解劑如瓊脂，碳酸鈣，土豆澱粉或木薯澱粉，海藻酸，某些矽酸鹽和碳酸鈉，e)阻滯劑溶液如石蠟，f)吸收促進劑如季胺類化合物，g)濕潤劑如十六醇和單硬脂酸甘油酯，h)吸收劑如白陶土和皂土，i)潤滑劑如滑石粉，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，固體聚乙二醇，月桂硫酸鈉，及其混合物。至於膠囊，片劑和丸劑，這些劑型可以包含緩衝劑。
相似類型的固體組合物可以是填充劑充滿於軟的或硬的膠囊，所使用的輔料有乳糖和高分子的聚乙二醇等等。固體劑型像片劑，錠劑，膠囊，丸劑和粒劑可以通過包衣、加殼如腸溶包衣和其他藥物製劑上公知的包衣方法製備得到。它們可以任選地包含遮光劑，或較佳地，在腸道的某一部分，任意地，以延遲的方法釋放組合物中的唯一活性成分。如植入組合物可以包含多聚體物質和蠟狀物。
活性化合物可以與本發明所描述的一個或多個賦形劑一起形成微膠囊劑型。固體劑型像片劑、錠劑、膠囊、丸劑和粒劑可以通過包衣或加殼，如腸溶包衣、控釋包衣和其他公知的藥物製劑方法。在這些固體劑型中，活性化合物可以與至少一種惰性稀釋劑混合，如蔗糖，乳糖或澱粉。這樣的劑 型作為一般的應用也可以包含除惰性稀釋劑之外的添加物質，如壓片潤滑劑和其他壓片助劑如硬脂酸鎂和微晶纖維素。至於膠囊，片劑和丸劑，這些劑型可以包含緩衝劑。它們可以任選地包含鎮靜劑，或較佳地，在腸道的某一部分，以任意延遲的方法釋放組合物中的唯一活性成分。可應用的植入組合物可以包括，但並不限於，多聚體和蠟狀物。
本發明的化合物通過局部的或經皮膚給藥的劑型包括軟膏，糊劑，乳劑，洗劑，凝膠劑，粉劑，溶液，噴霧劑，吸入劑，貼片。活性成分在無菌的條件下與藥學上可接受的載體和任何必需的防腐劑或必需的緩衝劑相混合。眼科的藥物製劑，滴耳劑和滴眼劑都是本發明考慮的範圍。另外，本發明還考慮透皮貼劑的應用，它在控制化合物傳遞到體內方面有著更多的優點，這樣的劑型可以通過溶解或分散化合物到合適的介質中來製備得到。吸收促進劑可以增加化合物穿過皮膚的流量，通過速率控制薄膜或將化合物分散於聚合體基質或明膠來控制其速率。
本發明的化合物優選地按製劑配方製備成劑量單位型以減輕給藥量和劑量的均勻性。術語“劑量單位型”在此處是指患者得到適當治療所需藥物的物理分散單位元元。然而，應瞭解本發明的化合物或組合物每日總的用法將通過主治醫生根據可靠的醫學範圍判斷來確定。具體的有效劑量水準對於任何一個特殊的患者或有機體將取決於許多因素包括被治療的病症和病症的嚴重性，具體化合物的活性，所用的具體組合物，患者的年齡、體重、健康狀況、性別和飲食習慣，給藥時間，給藥途徑和所用具體化合物的排泄速率，治療的持續時間，藥物應用於聯合用藥或與有特效的化合物聯用，以及其他一些藥學領域公知的因素。
可以結合載體物質產生單個劑型組合物的本發明的化合物的用量的改變取決於主治和特殊的給藥模式。其中一些實施例是，組合物可以按製劑方法製備成劑量在0.01-200mg/kg體重/天的抑制劑，通過患者接受組合物的量來進行給藥。
本發明的化合物可以以僅有的藥學試劑或結合一個或多個其他附加治療(藥學的)劑來給藥，其中聯合用藥引起可接受的不良反應，這對於高增生性疾病如癌症的治療具有特殊的意義。在這種情況下，本發明的化合物可以結合已知的細胞毒素劑，單個轉導抑制劑或其他抗癌試劑，以及其混合物和組合。像本發明所使用的，附加治療劑正常給藥治療特殊的疾病，就是已 知的“合適地治療疾病”。本發明所使用的“附加治療劑”包括化學治療藥物或其他抗增殖的藥物可以結合本發明的化合物治療增殖性疾病或癌症。
化學治療藥物或其他抗增殖藥物包括組蛋白去乙醯化酶(HDAC)抑制劑，包括但並不限於，SAHA，MS-275，MGO103，以及那些以下專利所描述的化合物：WO 2006/010264,WO 03/024448,WO 2004/069823,US 2006/0058298,US 2005/0288282,WO 00/71703,WO 01/38322,WO 01/70675,WO 03/006652,WO 2004/035525,WO2005/030705,WO 2005/092899，和脫甲基化試劑包括，但並不限於，5-雜氮-2'-去氧胞苷(5-aza-dC)、阿紮胞苷(Vidaza)、地西他濱(Decitabine)和以下文獻所描述的化合物：US 6,268137,US 5,578,716,US5,919,772,US 6,054,439,US 6,184,211，US 6,020,318,US 6,066,625,US 6,506,735,US 6,221,849,US 6,953,783,US 11/393,380。
另外一些實施例是，化療藥物或其他抗增殖藥物可以結合本發明的化合物治療增殖性疾病和癌症。已知的化療藥物包括，但並不限於，可與本發明抗癌藥物聯合使用的其他療法或抗癌藥物，手術，放射療法(少許例子如γ輻射，中子束放射療法，電子束放射療法，質子療法，近距離放射療法和系統放射性同位素療法)，內分泌療法，紫杉烷類(紫杉醇(taxol)，多西紫杉醇(taxotere)等)，鉑衍生物(順鉑(cisplatin)，卡鉑(carboplatin))，生物反應調節劑(干擾素，白細胞間素)，腫瘤壞死因數(TNF，TRAIL受體靶向物)，過熱和冷凍療法，減輕任何不良反應的試劑(如止吐藥)，和其他被認可的化療藥物，包括但並不限於，烷化藥物(氮芥(mechlorethamine)，苯丁酸氮芥(chlorambucil)，環磷醯胺(cyclophosphamide)，馬法蘭(melphalan)，異環磷醯胺(ifosfamide))，抗代謝物(甲氨蝶呤(methotrexate)，培美曲塞(pemetrexed)等等)，嘌呤拮抗劑和嘧啶拮抗劑(6-巰嘌呤(6-mercaptopurine)，5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)，阿糖胞苷(cytarabile)，吉西他濱(gemcitabine))，紡錘體抑制劑(長春鹼(vinblastine)，長春新鹼(vincristine)，長春瑞濱(vinorelbine))，鬼臼毒素(依託泊苷(etoposide)，伊立替康(irinotecan)，托泊替康(topotecan))，抗生素(多柔比星(doxorubicin)，博萊黴素(bleomycin)，絲裂黴素(mitomycin))，亞硝基脲(卡莫司汀(carmustine)，洛莫司汀(lomustine))，細胞分裂週期抑制劑(KSP通過有絲分裂驅動蛋白抑制劑，CENP-E和CDK抑制劑)，酶(天門冬醯胺酶(asparaginase))，激素(它莫昔芬(tamoxifen)，亮丙瑞林(leuprolide)，氟他胺(flutamide)，甲地孕酮(megestrol)，地塞米松(dexamethasone)等等)。抗 血管生成試劑(阿瓦斯丁(avastin)等)。單抗(貝利單抗(belimumab)，brentuximab，西妥昔單抗(cetuximab)，吉妥單抗(gemtuzumab)，伊匹單抗(ipilimumab)，ofatumumab，帕尼單抗(panitumumab)，雷珠單抗(ranibizumab)，利妥昔單抗(rituximab)，托西莫單抗(tositumomab)，曲妥珠單抗(trastuzumab))。激酶抑制劑(伊馬替尼(imatinib)，舒尼替尼(sunitinib)，索拉非尼(sorafenib)，厄洛替尼(erlotinib)，吉非替尼(gefitinib)，達沙替尼(dasatinib)，尼洛替尼(nilotinib)，拉帕替尼(lapatinib)，克卓替尼(crizotinib)，ruxolitinib，vemurafenib，vandetanib，pazopanib，等等)。藥物抑制或啟動癌症的途徑如mTOR，HIF(缺氧誘導因數)途徑及其他。癌症治療較廣泛的論壇見http：//www.nci.nih.gov/，FAD認可的腫瘤學藥物清單見http：//www.fda.gov/cder/cancer/druglist-rame.htm，和默克手冊，第十八版.2006，所有的內容都是結合了參考文獻。
另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合細胞毒素抗癌劑。這樣的抗癌劑可以在第十三版默克索引(2001)裡找到。這些抗癌劑包括，但絕不限於，天門冬醯胺酶，博來黴素，卡鉑，卡莫司汀，苯丁酸氮芥，順鉑，L-天冬醯胺酶，環磷醯胺，阿糖胞苷，達卡巴嗪，放線菌素D，柔紅黴素，阿黴素(多柔比星)，表柔比星，依託泊苷，5-氟脲嘧啶，六甲基三聚氰胺，羥基脲，異環磷醯胺，伊立替康，亞葉酸，環己亞硝脲，氮芥，6-巰基嘌呤，美司鈉，甲氨蝶呤，絲裂黴素C，米托蒽醌，潑尼松龍，潑尼松，丙卡巴肼，雷洛昔芬，鏈唑黴素，他莫昔芬，硫鳥嘌呤，托泊替康，長春鹼，長春新鹼，和長春地辛。
與本發明的化合物聯合用藥的其他合適的細胞毒類藥物包括，但並不限於，這些公認地應用於腫瘤性疾病治療的化合物，如以下文獻中所描述的：Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics(Ninth Edition,1996,McGraw-Hill.)；這些抗癌劑包括，但絕不限於，氨魯米特(aminoglutethimide)，1-門冬醯胺酶，硫唑嘌呤，5-氮雜胞苷，克拉屈濱(cladribine)，白消安(busulfan)，己烯雌酚，2'，2'-二氟去氧胞二磷膽鹼，多西紫杉醇，赤羥基壬烷基腺嘌呤(erythrohydroxynonyladenine)，乙炔雌二醇，5-氟尿嘧啶去氧核苷，5-氟去氧尿苷單磷酸，磷酸氟達拉濱(fludarabine phosphate)，氟甲睾酮(fluoxymesterone)，氟他胺(flutamide)，己酸羥孕酮，伊達比星(idarubicin)，干擾素，醋酸甲羥孕酮，醋酸甲地孕酮，美法侖(melphalan)，米托坦(mitotane)，紫杉醇，噴司他丁(pentostatin)，N-磷酸乙醯 基-L-天冬氨酸(PALA)，普卡黴素(plicamycin)，甲基環己亞硝脲(semustine)，替尼泊苷(teniposide)，丙酸睾丸酮，塞替派(thiotepa)，三甲基三聚氰胺，尿核苷和長春瑞濱。
其他合適的與本發明的化合物聯合應用的細胞毒素類抗癌劑包括新發現的細胞毒素物質，其中包括，但並不限於，奧沙利鉑(oxaliplatin)，吉西他濱(gemcitabine)，卡培他濱(capecitabine)，大環內酯類抗腫瘤藥及其天然或合成的衍生物，替莫唑胺(temozolomide)(Quinn et al.,J.Clin.Oncology,2003,21(4),646-651)，托西莫單抗(bexxar)，trabedectin(Vidal et al.,Proceedings of the American Societyfor Clinical Oncology,2004,23,abstract 3181)，和驅動蛋白紡錘體蛋白抑制劑Eg5(Wood et al.,Curr.Opin.Pharmacol. 2001,1,370-377)。
另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合其他信號轉導抑制劑。有趣的是信號轉導抑制劑把EGFR家族作為目標，如EGFR，HER-2和HER-4(Raymond et al.,Drugs, 2000,60(Suppl.l),15-23；Harari et al.,Oncogene,2000,19(53),6102-6114)和它們各自的配體。這樣的試劑包括，但絕不限於，抗體療法如曲妥珠單抗(trastuzumab)，西妥昔單抗(cetuximab)，伊匹單抗(ipilimumab)和帕妥珠單抗(pertuzumab)。這樣的療法也包括，但絕不限於，小分子激酶抑制劑如伊馬替尼(imatinib)，舒尼替尼(sunitinib)，索拉非尼(sorafenib)，厄洛替尼(erlotinib)，吉非替尼(gefitinib)，達沙替尼(dasatinib)，尼洛替尼(nilotinib)，拉帕替尼(lapatinib)，克卓替尼(crizotinib)，ruxolitinib，vemurafenib，vandetanib，pazopanib，阿法替尼(afatinib)，amuvatinib，阿西替尼(axitinib)，波舒替尼(bosutinib)，brivanib，canertinib，cabozantinib，西地尼布(cediranib)，dabrafenib，dacomitinib，，danusertib，dovitinib，foretinib，ganetespib，ibrutinib，iniparib，lenvatinib，linifanib，linsitinib，馬賽替尼(masitinib)，momelotinib，莫替沙尼(motesanib)，來那替尼(neratinib)，niraparib，oprozomib，olaparib，pictilisib，ponatinib，quizartinib，regorafenib，rigosertib，rucaparib，塞卡替尼(saracatinib)，saridegib，tandutinib，tasocitinib，telatinib，tivantinib，tivozanib，tofacitinib，trametinib，vatalanib，veliparib，vismodegib，volasertib，BMS-540215，BMS777607，JNJ38877605，TKI258，GDC-0941(Folkes,et al.,J.Med.Chem. 2008,51,5522)，BZE235，等等。
另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合組蛋白脫乙醯基酶抑制劑。這樣的試劑包括，但絕不限於，辛二醯苯胺氧肟酸(SAHA)，LAQ-824 (Ottmann et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology, 2004,23,abstract 3024),LBH-589(Beck et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3025),MS-275(Ryan et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research, 2004,45,abstract 2452),FR-901228(Piekarz et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,abstract 3028)和MGCDOI 03(US 6,897,220)。
另外一些實施例是，本發明的化合物可以結合其他抗癌劑如蛋白酶體抑制劑和m-TOR抑制劑。這些包括，但絕不限於，硼替佐米(Bortezomib)(Mackay et al.,Proceedings of the American Society for Clinical Oncology,2004,23,Abstract 3109)，和CCI-779(Wu et al.,Proceedings of the American Association of Cancer Research,2004,45,abstract 3849)。本發明的化合物還可以結合其他抗癌劑如拓撲異構酶抑制劑，包括但絕不限於喜樹鹼。
那些附加治療劑可以與包含本發明的化合物的組合物分開給藥，作為多給藥方案的一部分。或者，那些治療劑可以是單劑型的一部分，與本發明的化合物混合在一起形成單個組合物。如果給藥作為多給藥方案的一部分，兩個活性劑可以同時連續地或在一段時間內互相傳遞，從而得到目標試劑活性。
可以結合載體物質產生單劑型的化合物和附加治療劑的用量(那些包含一個附加治療劑的組合物像本發明所描述的)的改變取決於主治和特殊給藥模式。正常地，本發明的組合物附加治療劑的量將不超過組合物包含治療劑作為唯一的活性劑的正常給藥的量。另一方面，現公開的組合物附加治療劑的量的範圍大約是現有組合物正常量的50%-100%，包含的試劑作為唯一活性治療劑。在那些包含附加治療劑的組合物中，附加治療劑將與本發明的化合物起協同作用。
化合物和組合物的用途
本發明提供的上述化合物和藥物組合物可用於製備用於防護、處理、治療或減輕增殖性疾病的藥品，也可以用於製備用於抑制或調節蛋白激酶活性的藥品。
具體而言，本發明的組合物中化合物的量可以有效地可探測地抑制蛋白激酶如B-Raf的活性。本發明化合物將作為抗腫瘤藥物對患者進行治療或減小B-Raf信號回應的有害作用。
本發明的化合物可以應用於，但絕不限於，使用本發明的化合物或組合物的有效量對患者給藥來預防或治療患者增殖性疾病。這樣的疾病包括癌症，尤其是轉移癌，動脈粥樣硬化和肺纖維化。
本發明的化合物可以應用於瘤的治療包括癌症和轉移癌，進一步包括但並不限於，癌症如膀胱癌，乳腺癌，結腸癌，腎癌，肝癌，肺癌(包括小細胞肺癌)，食道癌，膽囊癌，卵巢癌，胰腺癌，胃癌，宮頸癌，甲狀腺癌，前列腺癌，和皮膚癌(包括鱗狀細胞癌)；淋巴系統造血腫瘤(包括白血病，急性淋巴囊腫性白血病，急性成淋巴細胞性白血病，B細胞淋巴瘤，T細胞淋巴瘤，何傑金(氏)淋巴瘤，非何傑金(氏)淋巴瘤，多毛細胞白血病和伯基特淋巴瘤)；骨髓系統造血腫瘤(包括急慢性骨髓性粒細胞性白血病，骨髓增生異常綜合症，和前髓細胞白血病)；間充質細胞起源的腫瘤(包括纖維肉瘤和橫紋肌肉瘤，和其他肉瘤，如軟組織和軟骨)；中樞末梢神經系統瘤(包括星形細胞瘤，成神經細胞瘤，神經膠質瘤，和神經鞘瘤)；和其他腫瘤(包括黑素瘤，精原細胞瘤，畸胎癌，骨肉瘤，xeroderma pigmentosum，keratoacanthoma，甲狀腺濾泡瘤和卡波濟(氏)肉瘤)。
本發明的化合物及藥物組合物還可用於治療眼科病症例如角膜移植排斥，眼的新生血管形成，視網膜新生血管形成包括損傷或感染後的新生血管形成；糖尿病性視網膜病；晶狀體後纖維組織增生症，和新生血管性青光眼；視網膜缺血；玻璃體出血；潰瘍性疾病如胃潰瘍；病理學的但非惡性狀況如血管瘤，包括嬰兒血管內皮細胞瘤，鼻咽和無血管性骨壞死的血管纖維瘤；雌性生殖系統紊亂如子宮內膜異位。這些化合物及藥物組合物同樣也用於治療水腫和脈管通透性過高的狀況。
本發明的化合物及藥物組合物還可以用於處理與糖尿病相關的情況如糖尿病性視網膜病和微血管病。本發明的化合物及藥物組合物同樣用於癌症患者血流量減少的情況。本發明的化合物及藥物組合物對患者腫瘤轉移減少也有有益效果。
本發明的化合物及藥物組合物除了對人類治療有益以外，還可應用於獸醫治療寵物、引進品種的動物和農場的動物，包括哺乳動物，齧齒類動物等等。另外一些動物的實例包括馬、狗和貓。在此，本發明的化合物包括其藥學上可接受的衍生物。
在將複數形式應用於化合物，鹽等的情況下，其也意指單一的 化合物，鹽等。
包含本發明的化合物或組合物給藥的治療方法，進一步包括對患者附加治療劑(聯合治療)的給藥，其中附加治療劑選自：化學療法、抗增殖劑或抗炎劑，其中附加治療劑適用於所治療的疾病，且附加治療劑可以和本發明的化合物或組合物聯合給藥，本發明的化合物或組合物作為單個劑型，或分開的化合物或組合物作為多劑型的一部分。附加治療劑可以與本發明的化合物同時給藥或不同時給藥。後者的情況，給藥可以錯開進行如6小時，12小時，1天，2天，3天，1周，2周，3周，1個月或2個月進行。
本發明同樣包含對表達B-Raf的細胞生長抑制的方法，此方法包括本發明的化合物或組合物與細胞接觸，從而抑制細胞生長。能被抑制生長的細胞包括：乳腺癌細胞，結腸直腸癌細胞，肺癌細胞，乳頭狀癌細胞，前列腺癌細胞，淋巴瘤細胞，結腸癌細胞，胰腺癌細胞，卵巢癌細胞，子宮頸癌細胞，中樞神經系統癌細胞，成骨肉瘤細胞，腎癌細胞，肝細胞癌細胞，膀胱癌細胞，胃癌細胞，頭或頸鱗癌細胞，黑色素瘤細胞和白血病細胞。
本發明提供了在生物標本內抑制B-Raf激酶活性的方法，此方法包括將本發明的化合物或組合物與生物標本接觸。本發明所使用的術語“生物標本”是指活體外部的標本，包括但絕不限於，細胞培養或細胞提取；從哺乳動物或其提取物得到的活組織檢查物質；血液，唾液，尿液，糞便，精液，眼淚，或其他活組織液體物質及其提取物。抑制生物標本中激酶活性，特別是B-Raf激酶活性，可用於所屬領域技術人員公知的多種用途。這樣的用途包括，但絕不限於，輸血法，器官移植，生物標本儲藏和生物鑒定。
本發明的化合物或藥學上可接受的組合物的“有效量”或“有效劑量”是指處理或減輕一個或多個本發明所提到病症的嚴重度的有效量。根據本發明的方法，化合物和組合物可以是任何給藥量和任何給藥途徑來有效地用於處理或減輕疾病的嚴重程度。必需的準確的量將根據患者的情況而改變，這取決於種族，年齡，患者的一般條件，感染的嚴重程度，特殊的因素，給藥方式，等等。化合物或組合物可以和一個或多個其他治療劑聯合給藥，如本發明所討論的。
本發明的化合物或其藥物組合物可以應用於可植入的內科裝置的包衣，如假體，人工瓣膜，人造血管，莖和導尿管。例如，脈管莖，已經被用於克服再狹窄(損傷後血管壁的再收縮)。然而，患者使用莖或其他可植 入裝置將會有血塊形成或血小板啟動的風險。這些不利的作用可以通過使用包含本發明的化合物的藥學上可接受的組合物預塗漬裝置來阻止或減輕。
合適的包衣和可植入裝置的包衣的一般製備方法在文獻US 6,099,562；US 5,886,026；和US 5,304,121中有所描述，包衣是有代表性地生物相容的多聚體材料如水凝膠聚合體，聚甲基二矽醚，聚已酸內酯，聚乙二醇，聚乳酸，乙烯-乙酸乙烯酯，及其混合物。包衣可以任選地更進一步地被合適的包衣所覆蓋，如氟代二甲矽油，多糖酶，聚乙二醇，磷脂類，或其組合，來表現組合物控制釋放的特徵。本發明的另一方面包括使用本發明的化合物塗敷的可植入裝置。本發明的化合物也可以塗敷在可植入體內的醫療用具上，如珠狀物，或與聚合物或其他分子混合來提供“藥物儲藏所”，因此與藥物水溶液給藥方式比較，允許藥物釋放有更長的時間期限。
化合物的合成方法
為描述本發明，以下列出了實施例。但需要理解，本發明不限於這些實施例，只是提供實踐本發明的方法。
一般地，本發明的化合物可以通過本發明所描述的方法製備得到，除非有進一步的說明，其中取代基的定義如式(I)所示。下面的反應方案和實施例用於進一步舉例說明本發明的內容。
所屬領域的專業人員將認識到：本發明所描述的化學反應可以用來合適地製備許多本發明的其他化合物，且用於製備本發明的化合物的其它方法都被認為是在本發明的範圍之內。例如，根據本發明那些非例證的化合物的合成可以成功地被所屬領域的技術人員通過修飾方法完成，如適當的保護干擾基團，通過利用其他已知的試劑除了本發明所描述的，或將反應條件做一些常規的修改。另外，本發明所公開的反應或已知的反應條件也公認地適用於本發明其他化合物的製備。
下面所描述的實施例，除非其他方面表明所有的溫度定為攝氏度。試劑購買於商品供應商如Aldrich Chemical Company,Arco Chemical Company and Alfa Chemical Company，使用時都沒有經過進一步純化，除非其他方面表明。一般的試劑從汕頭西隴化工廠，廣東光華化學試劑廠，廣州化學試劑廠，天津好寓宇化學品有限公司，天津市福晨化學試劑廠，武漢鑫華遠科技發展有限公司，青島騰龍化學試劑有限公司，和青島海洋化工廠購買得到。
無水四氫呋喃，二氧六環，甲苯，乙醚是經過金屬鈉回流乾燥 得到。無水二氯甲烷和氯仿是經過氫化鈣回流乾燥得到。乙酸乙酯，石油醚，正己烷，N，N-二甲基乙醯胺和N，N-二甲基甲醯胺是經無水硫酸鈉事先乾燥使用。
以下反應一般是在氮氣或氬氣正壓下或在無水溶劑上套一乾燥管(除非其他方面表明)，反應瓶都塞上合適的橡皮塞，底物通過注射器打入。玻璃器皿都是乾燥過的。
色譜柱是使用矽膠柱。矽膠(300-400目)購於青島海洋化工廠。核磁共振光譜以CDCl3、d6-DMSO、CD3OD或d6-丙酮為溶劑(報導以ppm為單位)，用TMS(0ppm)或氯仿(7.25ppm)作為參照標準。當出現多重峰的時候，將使用下面的縮寫：s(singlet，單峰)、d(doublet，雙峰)、t(triplet，三重峰)、m(multiplet，多重峰)、br(broadened，寬峰)、dd(doublet of doublets，四重峰)、dt(doublet of triplets，雙三重峰)。偶合常數，用赫茲(Hz)表示。
低解析度質譜(MS)資料的條件是：Agilent 1200或Agilent 6120 Series LCMS(柱子型號：Zorbax SB-C18,2.1×30mm,3.5微米，6min，流速為0.6mL/min。流動相：5-95%(含0.1%甲酸的CH3CN)在(含0.1%甲酸的H2O)中的比例，在210/254nm用UV檢測，用低回應電噴模式(ESI)。
純的化合物的表徵方式為：Agilent 1100 Series高性能液相色譜(HPLC)，在210nm和254nm用UV檢測。柱子通常在40℃下操作。
下面簡寫詞的使用貫穿本發明：BOC，Boc 叔丁氧基羰基BSA 牛血清白蛋白BF3.Et2O 三氟化硼乙醚溶液CDCl3 氘代氯仿CHCl3 氯仿CH2Cl2，DCM 二氯甲烷CH3SO2Cl，MsCl 對甲苯磺醯氯Cs2CO3 碳酸銫CuI 碘化亞銅DAST 三氟化二乙氨基硫DBU 1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯DCE 1,2-二氯乙烷 DEAD 偶氮二甲酸二乙酯DEAD 偶氮二甲酸二乙酯DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯DIBAL 二異丁基氫化鋁DIEA，DIPEA 二異丙基乙基胺DMAP 4-二甲氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲醯胺DME 1,2-二甲氧基乙烷DMSO 二甲基亞碸DPPA 疊氮磷酸二苯酯EDCI 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EtOAc，EA 乙酸乙酯Et2O 乙醚Et3N，TEA 三乙胺EtOCOCl 氯甲酸乙酯FBS 胎牛血清g 克h 小時HATU O-(7-氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯HBr 氫溴酸HBTU O-苯並三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽HCl 鹽酸H2 氫氣H2O 水H2O2 過氧化氫HOAc，AcOH 乙酸HOBt 1-羥基苯並三唑K2CO3 碳酸鉀KOH 氫氧化鉀KH 氫化鉀LiHMDS 六甲基二矽基胺基鋰 NaHMDS 六甲基二矽基胺基鈉LDA 二異丙基胺基鋰MCPBA 間氯過氧苯甲酸MeCN，CH3CN 乙腈MeI 碘甲烷MeOH，CH3OH 甲醇MgsO4 硫酸鎂mL，ml 毫升min 分鐘N2 氮氣NaBH4 硼氫化鈉NaBH3CN 氰基硼氫化鈉NaCl 氯化鈉NaH 氫化鈉NaHCO3 碳酸氫鈉NaH2PO4 磷酸二氫鈉NaI 碘化鈉NaO(t-Bu) 叔丁醇鈉NaOH 氫氧化鈉Na2SO4 硫酸鈉NH3 氨NH4Cl 氯化氨NMP N-甲基吡咯烷酮PBS 磷酸鹽緩衝鹽水P(t-Bu)3 三(叔丁基)膦Pd/C 鈀/碳Pd2(dba)3 雙(二苄亞基丙酮)鈀Pd(dppf)Cl2 1,1-雙(二苯基膦基)二茂鐵二氯化鈀Pd(OAc)2 醋酸鈀Pd(PPh3)4 四(三苯基膦)鈀PE 石油醚(60-90℃) POCl3 三氯氧磷PyBop 1H-苯並三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸鹽RT，rt，r.t. 室溫Rt 保留時間SnCl4 氯化錫TBAB 四丁基溴化銨TBAHSO4 四丁基硫酸氫銨TBTU O-(1H-苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯TFA 三氟乙酸TEAC 二(四乙基銨)碳酸鹽THF 四氫呋喃μL 微升ZnCl2 氯化亞鋅
下列合成方案描述了製備本發明公開化合物的步驟。其中，各R1獨立地為H或烷基，各R2獨立地為H、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，M為鹼金屬或鹼土金屬，具體可以是Na、Li、K、Ca、Mg,n為0，1，2。
如通式結構(4a)和(4b)所示的酯類衍生物可以通過合成方案1製備得到：醯氯(1)與醛(2)在合適的路易士酸如：氯化鋅、氯化錫、三氟化硼-乙醚溶液作用下，生成氯烷基酯(3)。反應在無溶劑條件下或在二氯甲烷，氯仿，1,2-二氯乙烷等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-40℃到40℃之間。接著，在鹼性條件下，氯代烷基酯(3)與威羅菲尼(vemurafenib) 反應，得到取代的氮雜吲哚化合物(4a)，(4b)或(4a)和(4b)，即式(I)定義的化合物。適合的鹼包括三乙胺、氫氧化鉀、氫氧化鈉、氫化鈉、氫化鉀、雙(三甲基矽基)氨基鈉、雙(三甲基矽基)氨基鉀、二異丙基氨基鋰(LDA)、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯等等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，二甲亞碸，四氫呋喃，二氧六環，1,2-二甲氧基乙烷等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-20℃到60℃之間。
如通式結構(8)所示的碳酸酯類衍生物可以通過合成方案2製備得到：氯烷基取代的氯甲酸酯(5)與醇(6)在合適的鹼如：吡啶，三乙胺，二異丙基乙基胺，2,6-二甲基吡啶的作用下，生成氯烷基碳酸酯(7)。反應在二氯甲烷，氯仿，1,2-二氯乙烷等惰性溶劑中進行，溫度範圍在-15℃到40℃之間。接著，在適合的鹼如：三乙胺，氫氧化鉀，氫氧化鈉，氫化鈉，氫化鉀，雙(三甲基矽基)氨基鈉，雙(三甲基矽基)氨基鉀，二異丙基氨基鋰(LDA)，1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)的協助下，碳酸酯(7)與威羅菲尼(vemurafenib)反應，得到目標化合物(8)，即式(I)定義的化合物。反應在N,N-二甲基甲醯胺，二甲亞碸，四氫呋喃，二氧六環或1,2-二甲氧基乙烷(DME)等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-20℃到40℃之間。 合成方案3
如通式結構(12)所示的氨基酯類衍生物可以通過合成方案3製備得到：氯烷基氯磺酸酯(13)與氨基保護的氨基酸(9)在合適的鹼如：碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸銫，三乙胺，二異丙基乙基胺，2,6-二甲基吡啶以及催化劑，如TBAHSO4的作用下，生成氯烷基酯(10)。反應在二氯甲烷，氯仿，水，1,2-二氯乙烷等溶劑中進行，溫度範圍在-20℃到40℃之間。接著，在鹼性條件下，將氯烷基酯(10)加到威羅菲尼(vemurafenib)上，得到化合物(11)。反應適合的鹼包括氫氧化鉀，氫氧化鈉，氫化鈉或1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)等等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，二氯甲烷，二甲亞碸，四氫呋喃，二氧六環或1,2-二甲氧基乙烷等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-10℃到40℃之間。氨基保護基包括，但不限於，叔丁氧羰基(Boc)，酸性條件下，可去除化合物(11)中的Boc保護，例如，用三氟乙酸(TFA)的二氯甲烷溶液或氯化氫的乙酸乙酯溶液處理，得到化合物(12)，即式(I)定義的化合物。
合成方案4
如通式結構(18)所示的磷酸和磷酸鹽類衍生物可以通過合成方案4製備得到：氯烷基氯磺酸酯(13)與適當保護的磷酸二酯的鹽，如磷酸二叔丁酯鉀鹽(14)，在鹼和催化劑，如TBAHSO4的作用下，生成氯烷基磷酸二叔丁酯(15)。合適的鹼包括碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸銫，三乙胺，二異丙基乙基胺，2,6-二甲基吡啶等等。反應在二氯甲烷，水，三氯甲烷或1,2-二氯乙烷等溶劑中進行，溫度範圍在-20℃到40℃之間。接著，在鹼性條件下，將氯烷基磷酸二叔丁酯(15)加到威羅菲尼(vemurafenib)上，得到磷酸二叔丁酯衍生物(16)。適合的鹼包括氫氧化鉀，氫氧化鈉，氫化鈉或1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)等等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，二甲亞碸，四氫呋喃，二氧六環或1,2-二甲氧基乙烷等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-10℃到40℃之間。化合物(16)中的叔丁基(保護基)，可以在酸性條件下去除，例如，使用三氟乙酸的二氯甲烷溶液或氯化氫的乙酸乙酯溶液處理，得到磷酸化合物(17)。所得的化合物(17)用適當的鹼，如氫氧化鈉或氫氧化鉀的水溶液，處理即可得到磷酸鹽(18)，化合物(17)和化合物(18)均為式(I)定義的化合物。
如通式結構(19)所示的醯氨類衍生物可以通過合成方案5製備得到：在鹼性條件下，醯氯(1)與威羅菲尼(vemurafenib)反應，得到目標化合物(19)，即式(I)定義的化合物。適合的鹼包括氫氧化鉀，氫氧化鈉，三乙胺，等等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，氯仿，二氯甲烷，1,4-二氧六環等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-20℃到40℃之間。
如通式結構(21)所示的醯氨酯類衍生物可以通過合成方案6製備得到：在鹼性條件下，氯甲酸酯(20)與威羅菲尼(vemurafenib)反應，得到目標化合物(21)，即式(I)定義的化合物。適合的鹼包括氫氧化鉀，氫氧化鈉，三乙胺，等等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，氯仿，二氯甲烷，1,4-二氧六環等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-20℃到40℃之間。
如通式結構(24)所示的氨基醯氨類衍生物可以通過合成方案7製備得到：在合適的鹼和催化劑如EDCI的作用下，氨基保護的氨基酸(22)與威羅菲尼(vemurafenib)反應，得到Boc保護的氮雜吲哚化合物(23)。適合的鹼包括三乙胺，4-苯基嘧啶等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，二氯甲烷，二氧六環或1,2-二甲氧基乙烷等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在 -10℃到40℃之間。氨基的保護基包括，但不限於，叔丁氧羰基(Boc)，反應在N,N-二甲基甲醯胺等惰性溶劑中進行。化合物(23)中的保護基(Boc)，可以在酸性條件下去除，例如，使用三氟乙酸的二氯甲烷溶液或氯化氫的乙酸乙酯溶液，得到目標化合物(24)，即式(I)定義的化合物。
如通式結構(28)所示的環氨基酯類衍生物可以通過合成方案8製備得到：氯烷基氯磺酸酯(13)與氨基保護的酸(25)在鹼如：碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸銫，三乙胺，二異丙基乙基胺，2,6-二甲基吡啶以及催化劑，如TBAHSO4的作用下，生成氯烷基酯(26)。反應在二氯甲烷，氯仿，1,2-二氯乙烷等惰性溶劑中進行，溫度範圍在-20℃到40℃之間。接著，在鹼性條件下，將氯烷基酯(26)加到威羅菲尼(vemurafenib)上，得到取代的氮雜吲哚化合物(27)，即式(I)定義的化合物。反應適合的鹼包括氫氧化鉀，氫氧化鈉，氫化鈉或1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)等等。反應在N,N-二甲基甲醯胺，二甲亞碸，四氫呋喃，二氧六環或1,2-二甲氧基乙烷等惰性溶劑中進行，適合的反應時間為0.5~24小時，溫度範圍在-10℃到40℃之間。氨基保護基包括，但不限於，叔丁氧羰基(Boc)，酸性條件下，可去除取代的氮雜吲哚化合物(27)中的Boc保護，例如，用三氟乙酸(TFA)的二氯甲烷溶液或氯化氫的乙酸乙酯溶液處理，得到目標化合物(28)，即式(I)定義的化合物。
本發明採用以下方法對式(I)所示的化合物進行生物試驗：
1、生物分析方法
採用LC/MS/MS系統進行分析，包括Agilent 1200系列真空脫氣爐，二元注射泵，孔板自動採樣器，柱恒溫箱，帶電噴霧電離(ESI)源的Agilent G6430三級四級杆質譜儀。定量分析在MRM模式下進行，MRM轉換的參數如表A所示：
分析使用Agilent XDB-C18,2.1 x 30mm,3.5μM柱，注入5μL樣品。分析條件：流動相為0.1%的甲酸水溶液(A)和0.1%的甲酸甲醇溶液(B)。流速為0.4mL/min。流動相梯度如表B所示：
此外，用於分析的還有Agilent 6330系列LC/MS/MS光譜儀，配備有G1312A二元注射泵，G1367A自動採樣器和G1314C UV檢測器；LC/MS/MS光譜儀採用ESI放射源。使用標準液對每一個分析物進行合適的陽離子模型處理和MRM轉換進行最佳的分析。在分析期間使用Capcell MP-C18柱，規格為：100 x 4.6mm I.D.,5μM(Phenomenex,Torrance,California,USA)。流動相是5mM醋酸銨，0.1%甲醇水溶液(A)：5mM醋酸銨，0.1%甲醇乙腈溶液(B)(70：30，v/v)；流速為0.6mL/min；柱溫保持在室溫；注入20μL樣品。
2、化合物在人和大鼠肝微粒中的穩定性分析
(1)將人或大鼠肝微粒體置於聚丙烯試管中孵育，並引導其複製。典型的孵育混合液包括人或大鼠肝微粒體(0.5mg蛋白質/mL)，待分析化 合物(5μM)和總體積為200μL的NADPH(1.0mM)磷酸鉀緩衝液(PBS，100mM，pH值為7.4)，將待分析化合物溶解在DMSO中，並使用PBS將其稀釋，使其最終的DMSO溶液的濃度為0.05%。並在37℃下與空氣相通的水浴中進行孵育，預孵育3分鐘後向混合液中加入蛋白並開始反應。在不同的時間點(0，5，10，15，30和60min)，加入同體積冰冷乙腈終止反應。樣品於-80℃下保存直到進行LC/MS/MS分析。
化合物在人或大鼠肝微粒體孵育混合物中的濃度是通過LC/MS/MS的方法來測定的。濃度範圍的線性範圍是通過每一個受試化合物來確定的。
平行孵育試驗使用變性的微粒體作為陰性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0,15和60分鐘)終止。
右美沙芬(70μM)作為陽性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0，5，10，15，30和60分鐘)終止。每一種測定方法中都包括陽性和陰性對照樣品，以保證微粒體孵化體系的完整性。
(2)本發明所述化合物在人或大鼠肝微粒體中的穩定性資料也可由以下試驗得到：將人或大鼠肝微粒體置於聚丙烯試管中孵育，並引導其複製。典型的孵育混合物包括人或大鼠肝微粒體(最終濃度：0.5mg蛋白/mL)，待分析化合物(最終濃度：1.5μM)和總體積為30μL的K-緩衝溶液(含1.0mMEDTA,100mM,pH 7.4)。將待分析化合物溶解在DMSO中，並用K-緩衝溶液稀釋，使DMSO的最終濃度為0.2%。預孵育10分鐘後，加入15μL NADPH(最終濃度：2mM)進行酶促反應，整個試驗在37℃的孵育管中進行。在不同的時間點(0，15，30和60分鐘)，加入135μL乙腈(含IS)終止反應。以4000rpm離心10分鐘，除去蛋白，收集上層清液，用LC-MS/MS分析。
在上述試驗中，酮色林(1μM)被選作陽性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0，15，30和60分鐘)終止。每一種測定方法中都包括陽性對照樣品，以保證微粒體孵化體系的完整性。
本發明採用以下方法進行資料分析，以獲得穩定性分析結果：
對於每一個反應，將化合物在人或大鼠肝微粒體孵育中的濃度(以百分比表示)按相對零時間點的百分比作圖，以此來推斷體內肝固有清除率CLint(ref.：Naritomi Y,Terashita S,Kimura S,Suzuki A,Kagayama A,Sugiyama Y.Prediction of human hepatic clearance from in vivo animal experiments and in vitro metabolic studies with liver microsomes from animals and humans.Drug Metabolism and Disposition 2001,29：1316-1324.)
3、本發明化合物在動物體內的藥代動力學(Pharmacokinetics)評價
本發明採用以下方法對本發明化合物在小鼠、大鼠、犬或猴子體內的藥代動力學研究進行評估：
本發明化合物以水溶液或2% HPMC+1%土溫-80的水溶液，5% DMSO+5%的鹽水溶液，4% MC或膠囊形式進行給藥。對於靜脈注射給藥，動物給予1或2mg/kg的劑量。對於口服劑量(p.o.)，大鼠和小鼠是5或10mg/kg，犬和猴子是7-100mg/kg。在時間點為0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12和24小時取血(0.3mL)，並在3,000或4,000rpm下離心10分鐘。收集血漿溶液，並於-20℃或-70℃下保存直到進行上述的LC/MS/MS分析。
4、異種移植腫瘤模型
本發明化合物的藥效是通過移植腫瘤的標準鼠類模型來進行評價的，方法如下：
人腫瘤細胞(例如，Colo-205人結腸癌細胞株)培養、收集後，於後腹側皮下接種於6-7周齡的雌性裸小鼠體內(BALB/cA nu/nu，上海SLAC動物實驗室)(對於溶劑組n=10，對於每一個劑量組n=8)。當腫瘤體積達到100-250mm3時，動物隨機地分為溶劑對照組(2% HPMC+1%土溫-80的水溶液)和化合物組。後續採用化合物對動物進行灌胃給藥(3-50mpk/dose，溶解在2% HPMC+1%土溫-80的水溶液中)，從腫瘤細胞接種後的0到15天中的任何地方開始，並且通常在試驗中每天進行一次。
4.1腫瘤生長抑制(TGI)分析
腫瘤的演化生長是通過腫瘤體積與時間的關係來進行評價的。皮下腫瘤的長軸(L)和短軸(W)通過測徑器每週測定兩次，腫瘤的體積(TV)通過公式(L×W2)/2)進行計算。TGI由溶劑組小鼠腫瘤體積的中值和藥物組小鼠腫瘤體積中值的差值來進行計算，以溶劑對照組腫瘤體積中值的百分比來表示，通過下述公式進行計算：
原始統計分析是通過重複方差測定分析(RMANOVA)來完成 的。接下來通過Scheffe psot hoc試驗方法進行多重比較。單獨溶劑(2% HPMC+1%土溫-80，等等)為陰性對照。
結果表明，本發明提供的化合物表現出良好的半衰期、清除率和良好的藥代動力學性質，對腫瘤的增長也具有良好的抑制作用。
以下結合實施例對本發明提供的化合物、藥物組合物及其應用進行進一步說明。
實施例1：3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基(丙磺醯基)氨基甲酸乙酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.41mmol)懸浮於1,4-二氧六環(15mL)中，並向其中依次加入氯甲酸乙酯(EtOCOCl,44mg,0.41mmol)和三乙胺(0.14g,1.38mmol)。反應液在室溫下攪拌1.5小時後，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，得到標題化合物為白色固體(0.12g,50%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 562.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.08(t,J=7.2Hz,3H),1.29(t,J=7.2Hz,3H),1.92-2.05(m,2H),3.61(br,1H),3.70(br,1H),4.27-4.32(q,J=7.2Hz,2H),7.08-7.13(m,1H),7.45-7.51(m,3H),7.78(d,J=8.4Hz,2H),7.98(d,J=2.0Hz,1H),8.65(d,J=1.9Hz,1H),8.89(d,J=2.0Hz,1H),10.81(s,1H)。
實施例2：N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-N-(丙磺醯基)苯甲醯胺
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.41mmol)懸浮於二氧六環(15mL)中，並向其中加入苯甲醯氯(57mg,0.41mmol)和三乙胺(0.14g,1.38mmol)。反應液在室溫攪拌1小時後，減壓濃縮。殘留物經矽膠柱層析(正己烷/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，得到標題化合物為白色固體(0.14g,55%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 594.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.92-2.05(m,2H),3.74(t,J=7.6Hz,2H),6.27-6.32(q,J=7.2Hz,2H),7.06-7.10(m,1H),7.39(t,J=7.6Hz,2H),7.46-7.63(m,6H),8.16(d,J=7.0Hz,1H),8.65(d,J=2.1Hz,1H),8.84(d,J=2.0Hz,1H),10.08(s,1H)。
實施例3：N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-N-(丙磺醯基)異丁醯胺
室溫下，將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.41mmol)和三乙胺(2mL)懸浮於氯仿中(10mL)，並向其中加入異丁醯氯(173μL,1.64mmol)。反應液在室溫攪拌16小時後，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=1/1到1/2)純化，得到標題化合物為白色固體(2mg,0.8%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 560.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.15(t,J=7.4Hz,3H),1.12(s,3H),1.13(s,3H),1.88-1.99(m,2H),2.46-2.54(m,1H),3.55-3.80(m,2H),7.14-7.20(m,1H),7.46-7.55(m,3H),7.60-7.45(d,J=8.4Hz,2H),7.77(s,1H),8.64-8.68(d,J=2.0Hz,1H),8.86-8.90(m,1H),10.20(s,1H)。
實施例4：N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-N-(丙磺醯基)乙酸胺
本步驟標題化合物參照實施例3所描述的方法製備得到，即使用N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.41mmol)，三乙胺(1mL)和乙醯氯(116μL,1.64mmol)的1,4-二氧六環(10mL)溶液，製備得到標題化合物為白色固體(69mg,31.8%).
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 532.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.11(t,J=7.4Hz,3H),1.89-2.00(m,2H),2.12(s,3H),3.50-3.75(m,2H),7.15-7.21(m,1H),7.47-7.51(m,2H),7.50-7.55(m,1H),7.61-7.65(m,2H),7.79(s,1H),8.65-8.80(d,J=2.1Hz,1H),8.85-8.92(m,1H),10.93(s,1H)。
實施例5：N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-N-(丙磺醯基)煙醯胺
本步驟標題化合物參照實施例3所描述的方法製備得到，即使用N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)，三乙胺(228μL,1.6mmol)和煙鹼醯氯鹽酸鹽(146mg,0.2mmol)的氯仿(10mL)溶液製備，粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=2/1)純化，得到標題化合物為白色固體(35mg,28.9%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 595.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 1.02-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.83-1.93(m,2H),3.86-3.93(m,2H),7.37-7.44(m,1H),7.44-7.50(m,1H),7.55-7.60(m,2H),7.74-7.82(m,2H),7.96-8.04(m,1H),8.25-8.29(m,1H),8.59(s,1H),8.64-8.67(m,1H),8.72-8.75(m,1H),8.77-8.80(m,1H),9.06-9.09(m,1H),13.11(s,1H)。
實施例6：(S)-2-氨基-N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-3-甲基-N-(丙磺醯基)丁醯胺 鹽酸鹽
步驟1)(S)-1-(N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙磺醯胺基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol),Boc保護的L-纈氨酸(0.28g,1.29mmol)和4-苯基嘧啶(9mg,0.06mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中，並向其中加入EDCI(234mg,1.23mmol)。反應液在室溫攪拌16小時後，加入乙酸乙酯(30mL)稀釋，所得的混合物用水(30mL x 3)洗。有機相用Na2SO4乾燥，並減壓濃縮。殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=3/1到2/1)純化，得到標題化合物為白色固體(41mg,29.1%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 686.6[M-H]-。
步驟2)(S)-2-氨基-N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-3-甲基-N-(丙磺醯基)丁醯胺 鹽酸鹽
將(S)-1-(N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙磺醯胺基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基-氨基甲酸叔丁酯(50mg,0.07mmol)懸浮於飽和的HCl乙酸乙酯溶液(2mL)中，反應液在室溫攪拌2小時後，減壓濃縮，得到標題化合物為白色固體(49mg,99%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 589.2[M+H]+。
實施例7：7a(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基特戊酸酯 7b(N-(3-(5-(4-氯苯基)-1-((特戊醯氧)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氯苯基)丙磺醯胺基)甲基特戊酸酯
室溫下，將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰 基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.20mmol)和Et3N(57μL,0.41mmol)溶解在DMF(1mL)中，並向其中加入氯甲基特戊酸酯(35μL,0.25mmol)。反應在室溫攪拌24小時後，減壓濃縮。殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到1/1)純化，得到(5-(4氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基特戊酸酯(30mg,23%)和(N-(3-(5-(4-氯苯基)-1-((特戊醯氧)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氯苯基)丙磺醯胺基)甲基特戊酸酯(20mg,13.3%)，均為白色固體。
7a(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基特戊酸酯
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 604.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.16(s,9H),1.86-1.96(m,2H),3.10-3.16(m,2H),6.27(s,2H),6.58-6.65(br,1H),7.04-7.10(m,1H),7.46-7.51(m,2H),7.59-7.63(m,2H),7.69-7.77(m,1H),7.84(s,1H),8.67-8.70(d,J=2.2Hz,1H),8.84-8.87(d,J=2.2Hz,1H)。
7b(N-(3-(5-(4-氯苯基)-1-((特戊醯氧)甲基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氯苯基)丙磺醯胺基)甲基特戊酸酯
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 718.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.02-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.15(s,9H),1.18(s,9H),1.87-1.97(m,2H),3.13-3.19(m,2H),5.65(s,2H),6.28(s,2H),7.06-7.12(m,1H),7.45-7.50(m,2H),7.54-7.60(m,1H),7.59-7.64(m,2H),7.92(s,1H),8.66-8.69(d,J=2.2Hz,1H),8.84-8.87(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例8：(N-(3-(1-(乙醯氧甲基)-5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙磺醯胺基)甲基乙酸酯
步驟1)乙酸氯甲酯
向乙醯氯(10mL,94.6mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中加入多聚甲醛(2.84g,94.6mmol)。反應液在室溫攪拌40分鐘後，升 至60℃，繼續攪拌16小時。反應畢，冷卻至室溫，將混合物用短矽膠柱過濾(100% PE)。濾液在30℃減壓濃縮，所得的殘液於60℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(2.34g,15.3%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.18-1.23(d,J=7.0Hz,6H),2.56-2.68(m,1H),5.72(s,2H)。
步驟2)(N-(3-(1-(乙醯氧甲基)-5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙磺醯胺基)甲基乙酸酯
室溫下，將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)和三乙胺(57μL,0.4mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中，並向其中加入乙酸氯甲酯(23μL,0.3mmol)。反應液在室溫攪拌16小時後，減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=2/1到1/1)純化，得到標題化合物為白色固體(52mg,40.3%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 634.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.03-1.09(t,J=7.4Hz,3H),2.07-2.12(d,J=4.9Hz,2H),3.13-3.17(m,2H),5.64(s,2H),6.28(s,2H),7.07-7.13(m,1H),7.46-7.51(m,2H),7.56-7.64(m,3H),7.93(s,1H),8.67-8.70(d,J=2.2Hz,1H),8.85-8.88(d,J=2.2Hz,1H)。
實施例9：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基異丁酸酯
步驟1)異丁酸氯甲酯
本步驟標題化合物參照實施例8步驟1的方法製備得到，即使用異丁醯氯(10mL,94.6mmol)，氯化鋅(25mg,186mmol)和多聚甲醛(2.84g,94.6mmol)製備，得到標題化合物為無色油狀物(5.52g,42.9%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.18-1.23(d,J=7.0Hz,6H),2.56-2.68(m,1H),5.72(s,2H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基異丁酸酯
室溫下，將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)和三乙胺(57μL,0.40mmol)溶解在DMF(1mL)中，並向其中加入異丁酸氯甲酯(34mg,0.25mmol)。反應液在室溫攪拌16小時後，減壓濃縮。殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為白色固體(45mg,37.5%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 590.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.85-1.96(m,2H),2.54-2.62(m,1H),3.09-3.15(m,2H),6.27(s,2H),6.51(s,1H),7.04-7.10(m,1H),7.46-7.51(m,2H),7.58-7.63(m,2H),7.70-7.77(m,1H),7.84(s,1H),8.67-8.70(d,J=2.2Hz,1H),8.85-8.88(d,J=2.2Hz,1H)。
實施例10：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基丙酸酯
步驟1)1-氯乙基丙酸酯
0℃下，向丙醯氯(10mL,114.56mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中，加入多聚甲醛(7.76mL,137.48mmol)。反應液在室溫攪拌16小時後，用短矽膠柱(100%石油醚)過濾。濾液在20℃減壓濃縮，所得的殘液於25~27℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(4.7g,30%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.14-1.20(t,J=7.6Hz,3H),1.77-1.80(d,J=5.8Hz,3H),2.41(q,J=7.6Hz,2H),6.51-6.60(q,J=5.8Hz,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基丙酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.41mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中，並其中加入三乙胺(165mg,1.64mmol)，混合物在10℃攪拌10分鐘後，於30分 鐘內，依次向體系內滴加四丁基溴化銨(264mg,1.64mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液和1-氯乙基丙酸酯(67mg,0.41mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液。反應液在10℃攪拌3小時後，用乙酸乙酯(40mL)稀釋，並過濾。濾液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，得到標題化合物為白色固體(141mg,58%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 588.3[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.00-1.17(m,6H),1.85-2.00(m,5H)，2.26-2.41(m,2H),3.08-3.17(m,2H),6.50-6.80(br,1H),7.03-7.12(m,1H),7.35-7.42(m,1H),7.42-7.51(d,J=8.2Hz,2H),7.56-7.64(d,J=8.4Hz,2H),7.65-7.76(m,1H),7.77(s,1H),8.63-8.70(m,1H),8.77-8.83(m,1H)。
實施例11：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)-2-甲基丙基丙酸酯
步驟1)1-氯-2-甲基丙基丙酸酯
-20℃，向丙醯氯(10mL,115mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中加入異丁醛(12.5mL,138mmol)。反應液在0℃攪拌2小時後，恢復至室溫，繼續攪拌16小時。反應畢，混合物用短矽膠柱(100%石油醚)過濾。濾液在40℃減壓濃縮，所得的殘液於90℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(0.52g,2.7%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.03-1.08(m,6H),1.15-1.20(t,J=7.5Hz,3H),2.10-2.20(m,1H),2.35-2.45(q,J=7.6Hz,1H),6.30-6.32(d,J=4.7Hz,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)-2-甲基丙基丙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例10步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.4mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中，並向其中依次加入氫氧化鉀(46mg,0.8mmol)，四丁基溴化銨(264mg,0.81mmol)的N,N-二甲 基甲醯胺(0.5mL)溶液，以及1-氯-2-甲基丙基丙酸酯(81mg,0.49mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應製得標題化合物為白色固體(114mg,45.0%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 616.3[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.77-0.85(d,J=6.8Hz,3H),1.03-1.20(m,9H),2.30-2.48(m,2H),2.68-2.80(m,1H),3.09-3.17(m,2H),4.12-4.27(m,2H),6.66(br,1H),6.87-6.83(d,J=9.2Hz,1H),7.03-7.10(m,1H),7.44-7.50(d,J=8.4Hz,2H),7.57-7.63(d,J=8.4Hz,2H),7.68-7.77(m,2H),8.65-8.70(d,J=2.0Hz,1H),8.78-8.83(m,1H)。
實施例12：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基戊酸酯
步驟1)1-氯乙基戊酸酯
-20℃下，向戊醯氯(5mL,41.5mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中加入乙醛(2mL,49.5mmol)，反應液在0℃攪拌1小時後，恢復至室溫，繼續攪拌2小時。反應畢，混合物用短矽膠柱(100% PE)過濾，濾液在40℃減壓濃縮，所得的殘液於60℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(5.5g,81%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.90-0.94(t,J=7.3Hz,3H),1.32-1.40(m,2H),1.58-1.65(m,2H),1.77-1.79(d,J=5.8Hz,3H),2.33-2.37(t,J=7.5Hz,2H),6.52-6.57(q,J=5.8Hz,1H)；13C NMR(400MHz,CDCl3)δ 13.7,22.2,25.2,26.7,33.9 80.6,171.5。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基戊酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(69mg,1.23mmol)，混合物在10℃攪拌0.5小時 後，於30分鐘內，向體系內滴加1-氯乙基戊酸酯(0.1g,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液。反應液在10℃攪拌16小時後，用乙酸乙酯稀釋，並過濾。將濾液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=7/1)純化得到粗產品。粗產品於石油醚/乙酸乙酯(10/1)中重結晶，得到標題化合物為白色固體(0.14g,37.8%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 615.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.83-0.87(t,J=7.3Hz,3H),1.04-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.24-1.30(m,2H),1.53-1.59(m,2H),1.86-1.92(m,2H),1.92-1.94(d,J=6.3Hz,3H),2.29-2.34(m,2H),3.10-3.14(m,2H),6.53(br,1H),7.05-7.10(m,1H),7.35-7.40(q,J=6.3Hz,1H),7.46-7.48(d,J=8.5Hz,2H),7.58-7.60(d,J=8.5Hz,2H),7.68-7.74(td,J=8.9,5.5Hz,1H),7.76(s,1H),8.66-8.67(d,J=2.1Hz,1H),8.80-8.81(d,J=2.0Hz,1H)。
實施例13：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基環戊烷羧酸酯
步驟1)1-氯乙基環戊烷甲酸酯
將環戊烷甲醯氯(5g,37.7mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物降溫至-20℃，並向其中加入乙醛(1.83g,41.5mmol)。反應液在0℃攪拌1小時後，恢復至室溫，繼續攪拌2小時。反應畢，混合物用短矽膠柱(100% DCM)過濾。濾液在40℃濃縮，所得的殘液於55℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(5.6g,85%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.57-1.62(m,2H),1.68-1.72(m,2H),1.78-1.79(d,J=5.8Hz,3H),1.80-1.93(m,4H),2.69-2.80(m,1H),6.52-6.57(q,J=5.8Hz,1H)；13C NMR(400MHz,CDCl3)δ 25.2,25.9,25.9,29.9,30.0,43.8,80.8,183.5。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基環戊烷羧酸酯
本步驟標題化合物參照實施例12步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在無水N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)溶液中，並向其中加入氫氧化鉀(69mg,1.23mmol)和1-氯乙基環戊烷甲酸酯(108mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=5/1)純化，並用石油醚重結晶，得到標題化合物為白色固體(147mg,38%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 627.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.23-1.29(m,2H),1.29-1.33(m,2H),1.61-1.66(m,2H),1.77-1.81(m,2H),1.86-1.89(m,2H),1.90-1.92(d,J=6.2Hz,3H),2.71-2.75(m,1H),3.10-3.14(m,2H),6.47(br,1H),7.05-7.10(m,1H),7.35-7.40(q,J=6.3Hz,1H),7.46-7.48(d,J=8.5Hz,2H),7.58-7.60(d,J=8.4Hz,2H),7.70-7.74(td,J=9.0Hz,5.5Hz,1H),7.75(s,1H),8.66-8.67(d,J=2.1Hz,1H),8.80-8.81(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例14：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基異丁酸酯
步驟1)1-異丁酸氯甲酯
-20℃下，向異丁醯氯(10mL,94.7mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中加入乙醛(5g,113.6mmol)。反應液在0℃攪拌16小時後，恢復至室溫，繼續攪拌2小時。混合物用短矽膠柱(100% PE)過濾，濾液在30℃濃縮，所得的殘液於65℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(2.64g,18.5%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.15-1.25(m,6H),1.77-1.82(d,J=5.8Hz,3H),2.50-2.63(m,1H),6.50-6.60(q,J=5.8Hz,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基異丁酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.5g,1.02mmol)和氫氧化鉀(115mg,2.04mmol)懸浮於乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(4mL)中，降溫至10℃，並於0.5小時內，向其中滴加1-異丁酸氯甲酯(37mg,0.25mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(1mL)溶液。反應液在10℃攪拌3小時後，加入乙酸乙酯(40mL)稀釋，並過濾。濾液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=5/1到4/1)純化，得到標題化合物為白色固體(0.39g,63.3%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 626.0[M+Na]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.03-1.12(m,6H),1.13-1.20(d,J=7.0Hz,3H),1.85-1.97(m,5H),2.50-2.60(m,1H),3.09-3.17(m,2H),6.55(s,1H),7.04-7.10(m,1H),7.35-7.42(m,1H),7.46-7.51(d,J=8.4Hz,2H),7.57-7.63(d,J=8.4Hz,2H),7.68-7.75(m,1H),7.76(s,1H),8.67-8.70(d,J=2.1Hz,1H),8.78-8.84(d,J=1.8Hz,1H)。
實施例15：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]-1-基)甲基丙酸酯
步驟1)氯甲基丙酸酯
向多聚甲醛(3.37g,112.3mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中，加入丙醯氯(10mL,112.3mmol)。反應液在室溫攪拌40分鐘後，加熱至60℃，繼續攪拌16小時。反應畢，冷卻至室溫，混合物用短矽膠柱過濾(100%石油醚)。濾液在20℃減壓濃縮，殘液於40℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(9.8g,70%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.16-1.19(d,J=7.56Hz,3H),2.39-2.45(dd,J=7.56Hz,2H),5.71(s,2H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]-1-基)甲基丙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2描述的方法製備得 到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在無水N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)溶液中，並向其中加入氫氧化鉀(69mg,1.23mmol)和氯甲基丙酸酯(75mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，並用甲醇重結晶，得到標題化合物為白色固體(145mg,41.4%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 574.1[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.09-1.13(t,J=7.5Hz,3H),1.87-1.93(m,2H),2.34-2.40(d,J=7.5Hz,2H),3.09-3.13(m,2H),6.27(s,2H),6.63(br,1H),7.04-7.09(m,1H),7.45-7.49(m,2H),7.58-7.61(m,2H),7.70-7.75(td,J=5.5Hz,9.0Hz,1H),7.85(s,1H),8.67-8.68(d,J=2.2Hz,1H),8.84-8.85(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例16：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)-2-甲基丙基異丁酸酯
步驟1)1-氯-2-甲基丙基異丁酸酯
-20℃下，向異丁醯氯(10mL,94.7mmol)和氯化鋅(25mg,186mmol)的混合物中，加入異丁醛(10.4mL,113.6mmol)。反應液在0℃攪拌1小時後，恢復至室溫，繼續攪拌2小時。反應畢，混合物用短矽膠柱(100%石油醚)過濾。濾液在40℃減壓濃縮，所得的殘液於75℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(13.48g,79.3%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.08(dd,J=3.68,3.08Hz,6H),1.19-1.22(d,J=7.04Hz,6H),2.12-2.21(m,1H),2.57-2.65(m,J=7.04Hz,1H),6.29-6.31(d,J=4.72Hz,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)-2-甲基丙基異丁酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷 -1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中，向其中依次加入KOH(69mg,1.23mmol)，1-氯-2-甲基丙基異丁酸酯(108mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液。粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，並於甲醇中重結晶，得到標題化合物為白色固體(47mg,13.4%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 629.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.08-1.12(m,6H),1.86-1.95(m,2H)，2.54-2.61(m,1H),3.09-3.14(m,2H),6.27(s,2H),6.67(br,1H),7.04-7.09(m,1H),7.46-7.49(m,2H),7.59-7.61(m,2H),7.70-7.75(td,J=5.5,9.0Hz,1H),7.85(s,1H),8.67-8.68(d,J=2.1Hz,1H),8.84-8.85(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例17：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-(呱啶-4-基)乙酸酯 鹽酸鹽
步驟1)4-(2-(氯甲基)-2-氧代乙基)呱啶-1-羧酸叔丁酯
將2-(1-(叔丁氧羰基)呱啶-4-基)乙酸(1g,4.1mmol)溶解在DCM(25mL)和H2O(25mL)中，並向其中加入碳酸氫鈉(1.38g,16.4mmol)和四丁基硫酸氫銨(0.14g,0.41mmol)。混合物在0℃攪拌10分鐘後，向體系內加入氯甲基氯磺酸酯(499μL,5.5mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。反應液室溫攪拌20小時，反應畢，混合物用鹽水(25mL)洗，無水Na2SO4乾燥，並減壓濃縮。殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=10/1)純化，得到標題化合物為無色油狀物(826mg,69.1%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.11-1.24(m,2H),1.65-1.74(m,2H),1.90-2.03(m,1H),2.30-2.35(d,J=7.1Hz,2H),2.66-2.70(m,2H),4.00-4.16(m,2H),5.71(s,2H)。
步驟2)4-(2-((5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲氧基)-2-氧代乙基)呱啶-1-羧酸叔丁酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得 到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(0.9mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(23mg,0.4mmol)，和4-(2-(氯甲基)-2-氧代乙基)呱啶-1-羧酸叔丁酯(60mg,0.2mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.1mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=3/1到2/1)純化，得到標題化合物為白色固體(86mg,56.6%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 742.4[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.02-1.15(m,5H),1.43(s,9H),1.52-1.60(m,2H),1.70-1.87(m,3H),2.26-2.30(d,J=7.0Hz,2H),2.58-2.70(m,2H),3.10-3.15(m,2H),3.96-4.06(m,2H),6.28(s,2H),7.03-7.10(m,1H),7.46-7.50(m,2H),7.58-7.64(m,2H),7.69-7.77(m,1H),7.83(s,1H),8.66-8.70(d,J=2.2Hz,1H),8.84-8.87(d,J=2.2Hz,1H)。
步驟3)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-(呱啶-4-基)乙酸酯 鹽酸鹽
將4-(2-((5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲氧基)-2-氧代乙基)呱啶-1-羧酸叔丁酯(78mg,0.1mmol)懸浮於飽和的HCl乙酸乙酯溶液(2mL)中，反應液在室溫下攪拌2小時後，減壓濃縮，得到標題化合物為白色固體(75mg,100%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 645.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.96-1.00(t,J=7.4Hz,3H),1.30-1.40(m,2H)，1.71-1.80(m,4H),1.87-1.97(m,1H),2.30-2.35(d,J=7.0Hz,2H),2.75-2.87(m,2H),3.13-3.22(m,4H),6.31(s,2H),7.31-7.38(m,1H),7.58-7.70(m,3H),7.79-7.85(m,2H),8.48(s,1H),8.67-8.70(m,2H),8.80-8.82(d,J=2.2Hz,1H),9.84(s,1H)。
實施例18：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-3-甲基丁酸酯 鹽酸鹽
步驟1)氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1所描述的方法製備得到，即將2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸(1g,4.6mmol)溶解在DCM(25mL)和H2O(25。mL)中，並向其中依次加入碳酸氫鈉(1.55g,18.4mmol)，四丁基硫酸氫銨(156mg,0.46mmol)，以及氯甲基氯磺酸酯(559μL,5.5mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，反應製得標題化合物為無色油狀物(877mg,71.8%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.92-0.94(d,J=6.9Hz,3H),0.99-1.01(d,J=6.9Hz,3H),1.45(s,9H),2.17-2.23(m,1H),4.25-4.29(m,1H),5.02-5.04(d,J=8.3Hz,1H),5.62-5.64(d,J=6.0,2H),5.87-5.89(d,J=6.0Hz,1H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(0.9mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(23mg,0.4mmol)和氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸酯(54mg,0.2mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.1mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為白色固體(82mg,55.8%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 716.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.70-0.77(d,J=6.7Hz,3H),0.81-0.85(d,J=6.5Hz,3H),1.03-1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.39(s,9H),1.85-1.96(m,2H),1.98-2.10(m,1H),3.09-3.15(m,2H),4.17-4.23(m,1H),4.89-4.95(m,1H),6.26-6.40(dd,J=10.6,35.8Hz,2H),6.75(br,1H),7.03-7.10(m,1H),7.46-7.51(m,2H),7.58-7.64(m,2H),7.70-7.77(m,1H),7.83(s,1H),8.66-8.70(d,J=2.2Hz,1H),8.84-8.87(d,J=2.1Hz,1H)。
步驟3)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-3-甲基丁酸酯 鹽酸鹽
本步驟標題化合物參照實施例17步驟3所描述的方法製備得到，即使用(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸酯(78mg,0.11mmol)和飽和的HCl乙酸乙酯溶液(2mL)，反應製得標題化合物為白色固體(40mg,54%)。 LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 619.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.80-0.90(t,J=6.9Hz,6H),0.95-1.01(d,J=7.4Hz,3H),1.71-1.82(m,2H),2.05-2.15(m,1H),3.12-3.20(m,2H),3.94-3.98(d,J=4.5Hz,1H),6.40-6.57(dd,J=10.6,35.4Hz,2H),7.30-7.39(m,1H),7.58-7.70(m,3H),7.78-7.87(d,J=8.5Hz,2H),8.53(s,2H),8.68(s,1H),8.79-8.85(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例19：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基乙酸酯 鹽酸鹽
步驟1)氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)乙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1所描述的方法製備得到，即將2-((叔丁氧羰基)氨基)乙酸(1g,5.7mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)和水(25mL)中，並向其中依次加入碳酸氫鈉(1.92g,22.8mmol)，四丁基硫酸氫銨(194mg,0.57mmol)和氯甲基氯磺酸酯(693μL，6.8mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，反應製得標題化合物為無色油狀物(911mg,71.3%)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)乙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(0.9mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(23mg,0.4mmol)和氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)乙酸酯(46mg,0.2mmol)的DMF(0.1mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(乙酸乙酯/石油醚(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為白色固體(46mg,33.3%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z：677.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 1.00-1.06(t,J=7.4Hz,3H),1.34(s,9H),1.77-1.87(m,2H),3.17-3.24(m,2H),3.72-3.77(d,J=6.1Hz,2H),6.38(s,2H),7.26-7.32(t,J=6.1Hz,1H),7.35-7.42(m,1H),7.63-7.73(m,3H),7.85-7.90(d,J= 8.6Hz,2H),8.55(s,1H),8.73(s,1H),8.85-8.88(d,J=2.2Hz,1H),9.85-9.90(br,1H)。
步驟3)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基乙酸酯 鹽酸鹽
本步驟標題化合物參照實施例17步驟3所描述的方法製備得到，即使用(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)乙酸酯(46mg,0.07mmol)和飽和的HCl乙酸乙酯溶液(2mL)，反應製得標題化合物為白色固體(36mg,83.7%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 577.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.95-1.00(d,J=7.4Hz,3H),1.70-1.80(m,2H),3.12-3.18(m,2H),3.85(s,1H),6.44(s,2H),7.30-7.37(m,1H),7.58-7.72(m,3H),7.79-7.84(m,2H),8.50-8.82(m,2H),8.51(s,1H),8.66(s,1H),8.80-8.82(d,J=2.2Hz,1H),9.84(s,1H)。
實施例20：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-(甲基氨基)乙酸乙酯 鹽酸鹽
步驟1)氯甲基2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1所描述的方法製備得到，即將2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙酸(1g,5.29mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)和水(25mL)中，並向其中依次加入碳酸氫鈉(1.78g,21.2mmol)，四丁基硫酸氫銨(0.18g,0.53mmol)，以及氯甲基氯磺酸酯(638μL，6.35mmol)的DCM(5mL)溶液，製備得到標題化合物為無色油狀物(0.87g,69.4%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.43(s,9H),2.94-2.96(d,J=5.0Hz,1H),3.97-4.05(d,J=33.9Hz,2H),5.74-5.75(d,J=4.0Hz,1H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得 到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在DMF(2.5mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(69mg,1.23mmol)，和氯甲基2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙酸酯(145mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=2/1)純化，得到標題化合物為無色油狀物(0.33g,77.9%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 689.4[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.88-0.94(t,J=7.1Hz,3H),1.43(s,9H),1.89-1.91(m,2H),2.89(s,3H),3.08-3.13(m,2H),3.91-4.00(d,J=32.7Hz,2H),6.33(s,2H),6.78(br,1H),7.03-7.10(m,1H),7.47-7.50(m,2H),7.59-7.62(m,2H),7.70-7.75(m,1H),7.82-7.86(m,1H),8.66-8.68(d,J=1.6Hz,1H),8.85-8.87(d,J=1.6Hz,1H)。
步驟3)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-(甲基氨基)乙酸乙酯 鹽酸鹽
將(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)乙酸酯(0.33g,0.48mmol)懸浮於飽和的HCl乙酸乙酯溶液(3mL)中，反應液在室溫攪拌3小時後，過濾，得到標題化合物為白色固體(168mg,56%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 591.1[M+H]+；LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 588.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.96-1.00(t,J=7.4Hz,3H),1.73-1.79(m,2H),2.49-2.51(m,3H),3.13-3.17(m,2H),4.02(s,2H),6.45(s,2H),7.32-7.36(m,1H),7.59-7.62(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.62-7.67(m,1H),7.80-7.83(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),8.51(s,1H),8.67(br,1H),8.80-8.81(d,J=2.2Hz,1H),8.99(br,1H)。
實施例21：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-2-甲基丙酸酯 鹽酸鹽
步驟1)氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1所描述的方法製備得到，即將2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸(1.07g,5.29mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)和水(25mL)中，並向其中依次加入碳酸氫鈉(1.78g,21.2mmol)，四丁基硫酸氫銨(0.18g,0.53mmol)，和氯甲基氯磺酸酯(638μL,6.35mmol)的DCM(5mL)溶液，反應製得標題化合物為白色固體(1.16g,87.7%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.43(s,9H),1.51(s,6H),4.90(m,1H),5.74-5.75(d,J=4.0Hz,1H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在二氯甲烷(2.5mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(69mg,0.4mmol)，和氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯(158mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為白色固體(339mg,78.7%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 705.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.02-1.06(t,J=7.4Hz,3H),1.21(s,9H),1.41(s,6H),1.85-1.92(m,2H),2.89(s,3H),3.07-3.12(m,2H),4.93(br,1H),6.31(s,2H),7.01-7.05(m,1H),7.45-7.49(m,2H),7.57-7.61(m,2H),7.67-7.73(m,1H),7.87(s,1H),8.64-8.65(d,J=2.2Hz,1H),8.83-8.84(d,J=2.2Hz,1H)。
步驟3)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-2-甲基丙酸酯 鹽酸鹽
將(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-2-甲基丙酸酯(339mg,0.48mmol)懸浮於飽和的HCl乙酸乙酯溶液(3mL)中，反應液在室溫攪拌5小時後，過濾，得到標題化合物為白色固體(224mg,72.6%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 605.2[M+H]+；LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 603.3[M-H]-；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.95-0.99(t,J=7.4Hz,3H),1.40(s,6H), 1.73-1.79(m,2H),3.12-3.16(m,2H),6.44(s,2H),7.32-7.36(m,1H),7.59-7.61(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.62-7.67(m,1H),7.80-7.83(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),8.48(br,2H),8.52(s,1H),8.67(br,1H),8.79-8.80(d,J=2.2Hz,1H)。
實施例22：(2S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-3-甲基戊酸酯 鹽酸鹽
步驟1)(2S)-氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基戊酸酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1所描述的方法製備得到，即將L-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基戊酸(1g,4.31mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)和水(25mL)中，並向其中加入碳酸氫鈉(1.55g,18.4mmol)，四丁基硫酸氫銨(156mg,0.46mmol)，和氯甲基氯磺酸酯(559μL,5.5mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，反應製得標題化合物為無色油狀物(0.91g,76.1%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.91-0.95(t,J=7.4Hz,3H),0.96-0.98(d,J=6.9Hz,3H),1.24-1.29(m,2H),1.44(s,9H),1.87-1.93(m,1H),4.29-4.33(m,1H),4.97-5.00(m,1H),5.61-5.63(d,J=6.0Hz,1H),5.87-5.89(d,J=6.0Hz,1H)。
步驟2)(2S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基戊酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中，並向其中依次加入氫氧化鉀(69mg,1.22mmol)，和(2S)-氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基戊酸酯(171mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為白色固體(288mg,64%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 733.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.69-0.72(t,J=7.3Hz,3H),0.77-0.79(d,J=7.3Hz,3H),0.84-0.91(m,2H),1.04-1.09(t,J=7.4Hz,3H),1.39(s,9H),1.72-1.79 (m,1H),1.87-1.94(m,2H),3.09-3.14(m,2H),4.25-4.27(m,1H),4.89(br,1H),6.26-6.29(d,J=10.6Hz,1H),6.36-6.40(d,J=10.6Hz,1H),6.63(br,1H),7.04-7.09(m,1H),7.47-7.50(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.59-7.62(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.71-7.79(td,J=5.5,9.0Hz,1H),7.83(s,1H),8.67-8.68(d,J=2.1Hz,1H),8.85-8.86(d,J=2.1Hz,1H)。
步驟3)(2S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-3-甲基戊酸酯 鹽酸鹽
將(2S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基戊酸酯(285mg,0.45mmol)懸浮於飽和的HCl乙酸乙酯溶液(3mL)中，反應液在0℃攪拌10小時後，過濾，得到標題化合物為白色固體(0.21g,80.8%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 633.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.69-0.72(t,J=7.0Hz,3H),0.75-0.78(d,J=6.1Hz,3H),0.95-1.00(t,J=7.4Hz,3H),1.03-1.07(m,2H),1.72-1.79(m,2H),1.79-1.84(m,1H),3.12-3.16(m,2H),3.95-3.97(m,1H),6.37-6.41(d,J=10.6Hz,1H),6.51-6.55(d,J=10.6Hz,1H),7.31-7.36(m,1H),7.58-7.61(d,J=8.2Hz,2H),7.62-7.67(m,1H),7.80-7.83(d,J=8.4Hz,2H),8.52(s,1H),8.55-8.63(m,2H),8.67(s,1H),8.80-8.82(d,J=2.2Hz,1H),9.88(br,1H)。
實施例23：(S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-4-甲基戊酸酯 鹽酸鹽
步驟1)(S)-氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-甲基戊酸酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1所描述的方法製備得到，即將L-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-甲基戊酸(1g,4.31mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)和水(25mL)中，向其中加入碳酸氫鈉(1.55g,18.4mmol)，四丁基硫酸氫銨(156mg,0.46mmol)，以及氯甲基氯磺酸酯(559μL,5.5mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，反應製得標題化合物為無色油狀物(0.98g,81.1%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.94-0.97(dd,J=1.2,6.5Hz,6H),1.44(s,9H),1.50-1.54(m,1H),1.70-1.76(m,1H),4.33-4.35(m,1H),4.83-4.86(m,1H),5.61-5.63(d,J=6.0Hz,1H),5.85-5.87(d,J=6.0Hz,1H)。
步驟2)(S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-甲基丙酸酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法製備得到，即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(69mg,1.22mmol)，和(S)-氯甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-甲基戊酸酯(179mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為白色固體(287mg,62.8%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z：733.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.82-0.85(d,J=6.2Hz,6H),0.89-0.93(m,1H),1.04-1.09(t,J=7.4Hz,3H),1.24-1.27(m,2H),1.36(s,9H),1.87-1.94(m,2H),3.09-3.14(m,2H),4.25-4.27(m,1H),4.79(br,1H),6.26-6.29(d,J=10.6Hz,2H),6.35-6.38(d,J=10.6Hz,2H),6.68(br,1H),7.04-7.09(m,1H),7.47-7.50(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.59-7.62(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.70-7.77(td,J=5.5,9.0Hz,1H),7.83(s,1H),8.67-8.68(d,J=2.1Hz,1H),8.85-8.86(d,J=2.1Hz,1H)。
步驟3)(S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-氨基-4-甲基戊酸酯 鹽酸鹽
將(S)-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-甲基丙酸酯(284mg,0.39mmol)懸浮在飽和的HCl乙酸乙酯溶液(3mL)中，反應液在0℃攪拌10小時後，減壓濃縮，殘留物用石油醚/乙酸乙酯(1/1)混合液洗，得到標題化合物為白色固體(204mg,78.7%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 633.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.73-0.76(t,J=5.4Hz,6H),0.84-0.85(m,1H),0.95-1.00(t,J=7.4Hz,3H),1.16-1.18(m,2H),1.72-1.79(m,2H),3.12-3.17(m,2H),3.99-4.03(m,1H),6.41-6.49(dd,J=10.5,19.5Hz,2H),7.31-7.35(m,1H),7.58-7.61(dd,J=2.0,6.6Hz,2H),7.61-7.66(m,1H),7.80-7.83(dd,J=2.0,6.6Hz, 2H),8.47(br,2H),8.51(s,1H),8.67(br,1H),8.80-8.81(d,J=2.2Hz,1H),9.84(s,1H)。
實施例24：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基2-氨基-3-甲基丁酯 鹽酸鹽
步驟1)1-氯甲基磺醯氯
將1-氯乙基氯甲酸酯(10g,69.94mmol)冷卻至0℃，並向其中滴加氯磺酸(8.96g,76.94mmol)。反應液在0℃攪拌16小時後，用二氯甲烷(15mL)和水(15mL)淬滅。有機相依次用Na2CO3水溶液(20mL)和食鹽水(20mL)洗，無水Na2SO4乾燥，並減壓濃縮。殘液於54℃減壓蒸餾，得到標題化合物為無色油狀物(4.5g,36%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.98-1.99(d,J=5.8Hz,3H),6.46-6.50(q,J=5.8Hz,1H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 26.3,91.1。
步驟2)2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸1-氯乙酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1的方法合成得到，即將2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸(3g,13.81mmol)溶解在二氯甲烷(75mL)和水(75mL)中，並向其中加入碳酸氫鈉(4.64g,55.23mmol)，四丁基硫酸氫銨(469mg,1.38mmol)，和1-氯乙基氯磺酸酯(2.97g,16.57mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=100/1到50/1)純化，得到標題化合物為白色固體(3g,78%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.90-0.92(m,3H),0.97-0.99(m,3H),1.45(s,9H),1.79-1.81(m,3H),2.14-2.19(m,1H),4.22-4.25(m,1H),4.99-5.01(m,1H),6.53-6.57(dd,J=5.7,11Hz,1H)。
步驟3)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酯
本步驟標題化合物參照實施例14步驟2所描述的方法合成得 到。即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)溶解在無水N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中，並向其中依次加入氫氧化鉀(69mg,1.22mmol)，和1-氯乙基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸酯(172mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，反應所得的粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1到3/1)純化，得到標題化合物為橙色油狀物(0.29g,65%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.82-0.92(m,6H),0.92-0.94(t,J=7.4Hz,3H),1.25(s,9H),1.89-1.96(m,5H),2.10-2.13(m,1H),3.11-3.12(m,2H),4.17-4.21(m,1H),6.95-7.13(m,2H),7.40-7.47(m,2H),7.58-7.60(m,2H),7.80-7.82(m,1H),8.01(s,1H),8.63-8.65(m,1H),8.80-8.83(m,1H)。
步驟4)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基2-氨基-3-甲基丁酯 鹽酸鹽
將1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-甲基丁酸酯(0.29g,0.39mmol)懸浮於飽和的HCl乙酸乙酯溶液(4mL)中，反應液在室溫攪拌2小時後，過濾，得到標題化合物為白色固體(0.15g,57%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 634.1[(M+H)+-HCl]；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.85-0.89(m,6H),0.98-0.99(t,J=7.4Hz,3H),1.76-1.89(m,3H),1.92-2.03(m,3H),3.00-3.13(m,2H),4.00-4.05(m,1H),6.95-7.13(m,2H),7.40-7.47(m,2H),7.58-7.60(m,2H),7.80-7.82(m,1H),8.01(s,1H),8.63-8.65(m,1H),8.80-8.83(m,1H)。
實施例25(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基磷酸鈉
步驟1)磷酸二叔丁基氯甲基酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1的方法製備得到，即將磷酸二叔丁酯鉀鹽(1g,4.03mmol)溶解在二氯甲烷(20mL)和水(20mL)中，並向其中加入碳酸氫鈉(1.34g,16.1mmol)，四丁基硫酸氫銨(136mg,0.40 mmol)，和氯甲基磺醯氯(452μl,4.41mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，反應製得標題化合物為無色油狀物(1.02g,95.3%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.51(s,18H),5.62-5.66(d,J=14.9Hz,2H)；13C NMR(100MHz,CDCl3)δ 29.9,73.3,84.1。
步驟2)((5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基)磷酸二叔丁基酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.4g,0.82mmol)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(3.5mL)中，並向其中加入KOH(91mg,1.63mmol)，混合物在10℃攪拌20分鐘後，於30分鐘內，向體系內滴加磷酸二叔丁基氯甲基酯(0.21g,0.82mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(1mL)。反應液在10℃攪拌16小時後，用乙酸乙酯(100mL)稀釋。混合物用H2O(100mL)洗，並用二氯甲烷(100mL x 2)萃取。將合併的有機相減壓濃縮，所得的殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=3/1)純化，得到標題化合物為無色油狀物(0.28g,47.2%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 712.2[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.03-1.07(t,J=7.4Hz,3H),1.35(s,18H),1.84-1.94(m,2H),3.07-3.11(m,2H),6.13-6.17(d,J=13.0Hz,2H),7.01-7.06(m,1H),7.46-7.49(d,J=8.4Hz,2H),7.58-7.60(d,J=8.4Hz,2H),7.67-7.74(td,J=8.9Hz,5.6Hz,1H),7.96(s,1H),8.67-8.68(d,J=2.1Hz,1H),8.87-8.88(d,J=2.0Hz,1H)。
步驟3)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基磷酸二氫酯
將((5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基)磷酸二叔丁基酯(1g,1.4mmol)溶解在二氯甲烷(25mL)中，並向其中加入三氟乙酸(1.6mL,2.4g,21mmol)。反應液在室溫攪拌2小時後，減壓濃縮。所得的殘留物經乙酸乙酯(20mL)洗，得到標題化合物為白色固體(0.56g,66.5%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 600.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,d 6-DMSO)δ 0.94-0.98(t,J=7.4Hz,3H),1.70-1.77(m,2H),3.10-3.14(m,2H),6.03-6.06(d,J=9.6Hz,2H),7.29-7.33(m,1H),7.57-7.60(d,J=8.5Hz,2H),7.60-7.65(m,1H),7.80-7.82(d,J=8.5Hz,2H),8.42-8.43(m, 1H),8.65(s,1H),8.79-8.80(d,J=2.1Hz,1H),9.82(br,1H)。
步驟4)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基磷酸鈉
室溫下，將(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基磷酸二氫酯(396mg,0.66mmol)溶解在四氫呋喃(20mL)中，並向其中滴加NaOH(58mg,1.45mmol)的水(0.3mL)和四氫呋喃(4mL)溶液。反應液在室溫攪拌4小時後，過濾，得到標題化合物為白色固體(401mg,94.4%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 600.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,D2O)δ 0.82-0.86(t,J=7.4Hz,3H),1.62-1.68(m,2H),2.88-2.92(m,2H),5.79-5.82(d,J=9.6Hz,2H),6.96-7.01(m,1H),7.27-7.30(d,J=8.5Hz,2H),7.31-7.37(td,J=9.3Hz,6.0Hz,1H),7.41-7.43(d,J=8.5Hz,2H),8.34-8.35(m,2H),8.46-8.47(d,J=2.0Hz,1H)。
實施例26：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基乙基碳酸酯
步驟1)碳酸乙基氯甲基酯
將氯甲酸氯甲酯(10g,78.2mmol)溶解在二氯甲烷(200mL)中，降溫至-20℃，並向其中加入乙醇(5mL,85.9mmol)和吡啶(7.5mL,93.2mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液。反應液在0℃攪拌1小時後，恢復至室溫，繼續攪拌2小時。混合物依次用1N HCl水溶液(300mL)和食鹽水(200mL)洗，無水Na2SO4乾燥，並減壓濃縮，得到標題化合物為無色油狀物(8.75g,81.1%)。化合物不經純化，直接用於下一步反應。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.32-1.36(t,J=7.2Hz,3H),4.26-4.31(m,J=7.2Hz,2H),5.72(s,2H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基乙基碳酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)和三乙胺(114μL,0.8mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(0.6mL)中，並向其中加入四丁基溴化銨(132mg,0.4mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.2mL)溶液，混合液在10℃攪拌0.5小時後，向體系內滴加氯甲基乙基碳酸酯(34mg,0.25mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.2mL)溶液。反應液在10℃攪拌3小時。反應畢，混合物用乙酸乙酯(40mL)稀釋，並過濾。濾液減壓濃縮，殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=2/1)純化，得到標題化合物為白色固體(85mg,73%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 592.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.05-1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.25-1.32(t,J=7.2Hz,3H),1.85-1.97(m,2H),3.09-3.16(m,2H),4.18-4.25(q,J=7.1Hz,2H),6.29(s,2H),6.51(s,1H),7.04-7.10(m,1H),7.46-7.51(d,J=8.5Hz,2H),7.57-7.63(d,J=8.5Hz,2H),7.70-7.77(m,1H),7.86(s,1H),8.67-8.70(d,J=2.1Hz,1H),8.83-8.85(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例27：(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基異丙基碳酸酯
步驟1)氯甲基異丙基碳酸酯
本步驟標題化合物參照實施例26步驟1所描述的方法製備得到，即將氯甲基氯磺酸酯(10g,78.2mmol)溶解於二氯甲烷(200mL)中，並向其中加入異丙醇(6.6mL,86.2mmol)和吡啶(7.5mL,93.2mmol)的二氯甲烷(50mL)混合液，反應製得標題化合物為無色油狀物(9.63g,81%)。化合物不經提純，直接用於下一步。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.33(s,3H),1.34(s,3H),4.92-4.99(m,J=6.3Hz,1H),5.72(s,3H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基異丙基碳酸
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.2g,0.41mmol)和氫氧化鉀(46mg,0.82mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(1.5mL)中，並於30分鐘內，向體系中加入氯甲基異丙基碳酸酯(62mg,0.41mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液。反應液在10℃反應3小時後，用乙酸乙酯(40mL)稀釋。將混合物過濾，濾液減壓濃縮，所得的殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=2/1)純化，得到標題化合物為白色固體(105mg,43%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 606.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.20-1.35(m,6H),1.85-1.95(m,2H),3.09-3.15(m,2H),4.84-4.92(m,1H),6.28(s,2H),6.56(s,1H),7.03-7.10(m,1H),7.46-7.51(d,J=8.5Hz,2H),7.57-7.63(d,J=8.5Hz,2H),7.69-7.77(m,1H),7.87(s,1H),8.66-8.70(d,J=2.1Hz,1H),8.83-8.87(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例28：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基乙基碳酸酯
步驟1)1-氯乙基乙基碳酸酯
本步驟標題化合物參照實施例26步驟1所描述的方法製備得到，即將1-氯乙基氯甲酸酯(10g,69.9mmol)溶解在二氯甲烷(200mL)中，並向其中加入乙醇(4.5mL,77.2mmol)和吡啶(6.8mL,84.5mmol)的二氯甲烷(50mL)混合液，反應製得標題化合物為無色油狀物(9.32g,87.7%)。產品不經純化，直接用於下一步反應。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.32-1.36(t,J=7.1Hz,3H),1.82-1.84(d,J=5.8Hz,3H),4.24-4.30(q,J=7.1Hz,2H),6.41-6.46(q,J=5.8Hz,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基乙基碳酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟 苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中，並向其中加入碳酸鉀(85mg,0.6mmol)，混合物在室溫攪拌10分鐘後，依次加入四丁基溴化銨(132mg,0.4mmol)，和1-氯乙基乙基碳酸酯(35mg,0.25mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.1mL)溶液。反應液在室溫攪拌16小時，反應畢，將混合物用乙酸乙酯(40mL)稀釋，並過濾。濾液減壓濃縮，所得的殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，得到標題化合物為白色固體(61mg,50%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 603.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.10(t,J=7.4Hz,3H),1.25-1.33(t,J=7.1Hz,3H)，1.85-1.93(m,2H),1.93-2.00(d,J=6.3Hz,3H),3.09-3.17(m,2H),4.12-4.27(m,2H),6.55(br,1H),7.04-7.10(m,1H),7.29-7.36(q,J=6.3Hz,1H),7.45-7.50(m,2H),7.57-7.63(m,2H),7.68-7.77(m,1H),7.79(s,1H),8.67-8.70(d,J=2.2Hz,1H),8.80-8.84(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例29：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基環己基碳酸酯
步驟1)1-氯甲基環己基碳酸酯
本步驟標題化合物參照實施例26步驟1所述的方法製備得到，即將1-氯乙基碳酸醯氯(5g,35mmol)溶解在二氯甲烷(100mL)中，並向其中加入環己醇(3.9g,38.5mmol)和吡啶(3.3g,42mmol)的混合物，反應製得標題化合物為無色液體(7g,96.9%)。所得的產物不經純化，直接用於下一步反應。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.28-1.25(m,1H)，1.30-1.42(m,2H),1.48-1.58(m,3H),1.74-1.78(m,2H)1.82-1.83(d,J=5.8Hz,3H)，1.91-1.96(m,2H),4.66-4.72(m,1H),6.41-6.45(m,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基環己基碳酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(5g,10.2mmol)溶解在四氫呋喃(36mL)中，並向其中加入氫氧化鉀(1.1g,20.4mmol)。反應液在室溫攪拌0.5小時後，向體系內加入1-氯甲基環己基碳酸酯(2.3g,11.2mmol)的四氫呋喃(9mL)溶液。反應液回流16小時，反應畢，將混合物冷卻至室溫，並用四氫呋喃(50mL)稀釋。過濾，濾液減壓濃縮，所得的殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=8/1)純化，得到標題化合物為白色固體(3.49g,51.9%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z 657.5[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.05-1.08(t,J=7.4Hz,3H)，1.20-1.58(m,8H),1.72(m,2H),1.89-1.94(m,5H),3.10-3.14(m,2H),4.59(m,1H),6.40-6.50(d,J=1.7Hz,1H),7.04-7.09(m,1H),7.30-7.33(m,1H),7.46-7.48(m,1H),7.58-7.60(m,1H),7.71-7.74(m,1H),7.79(s,1H),8.67(d,J=2.2Hz,1H),8.81-8.82(d,J=2.0Hz,1H)。
實施例30：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基異丙基碳酸酯
步驟1)1-氯乙基異丙基碳酸酯
將1-氯乙基碳酸醯氯(10g,69.9mmol)溶解在二氯甲烷(200mL)中，降溫至-20℃，向其中加入異丙醇(5.9mL,76.9mmol)和吡啶(6.75mL,83.9mmol)的DCM(50mL)溶液。反應液在0℃反應2小時後，恢復至室溫，繼續攪拌2小時。反應畢，混合物依次用1N HCl水溶液(250mL x 2)和食鹽水(250mL)洗，無水Na2SO4乾燥，並減壓濃縮，得到標題化合物為無色油狀物(9.6g,82.4%)。化合物不經純化，直接用於下一步反應。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.31-1.34(m,6H),1.81-1.82(d,J=5.84Hz,3H),4.88-4.98(m,1H),6.41-6.45(dd,J=5.84Hz,1H)。
步驟2)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基異丙基碳酸酯
本步驟標題化合物參照實施例26步驟2描述的方法製備得到。即將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.3g,0.61mmol)，氫氧化鉀(69mg,1.23mmol)溶解在乾燥的N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中，並向其中加入四丁基溴化銨(396mg,1.23mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，和1-氯甲基異丙基碳酸酯(102mg,0.61mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)溶液，粗產品經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=1/5)純化，並於甲醇中重結晶，得到標題化合物為白色固體(42mg,11.1%)。
LC-MS(ESI,neg.ion)m/z：617.4[M-H]-；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.04-1.08(t,J=7.4Hz,3H),1.22-1.29(m,6H),1.87-1.94(m,5H),3.10-3.14(m,2H),4.84-4.87(m,1H),6.59(br,1H),7.04-7.09(m,1H),7.30-7.34(dd,J=6.2Hz,1H),7.46-7.48(d,J=8.5Hz,2H),7.58-7.60(d,J=8.5Hz,2H),7.69-7.75(td,J=5.5,9.0Hz,1H),7.79(s,1H),8.67-8.68(d,J=2.2Hz,1H),8.81-8.82(d,J=2.0Hz,1H)。
實施例31(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基苯基碳酸酯
步驟1)氯甲基苯基碳酸酯
將氯甲基氯甲酸酯(1g,7.8mmol)溶解在二氯甲烷(40mL)中，降溫至-20℃，於20分鐘內，向其中加入苯酚(730mg,7.8mmol)和吡啶(750μL,9.3mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液。反應液在0℃攪拌4小時後，恢復至室溫，繼續攪拌1小時。反應畢，混合物依次用1N HCl水溶液(50mL)和食鹽水(50mL)洗，無水Na2SO4乾燥，並減壓濃縮。所得的殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=100/1)純化，得到標題化合物為無色油狀物(847mg,58.2%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.84(s,2H),7.22-7.27(d,J=8.2Hz,2H),7.28-7.34(t,J=7.4Hz,1H),7.40-7.49(t,J=7.8Hz,2H)。
步驟2)(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)甲基苯基碳酸酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(0.1g,0.2mmol)，四丁基溴化銨(132mg,0.4mmol)和三乙胺(114μL,0.80mmol)溶解在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中，並向其中加入氯甲基苯基碳酸酯(46mg,0.25mmol)。反應液在室溫攪拌12小時後，用乙酸乙酯(40mL)稀釋，並過濾。濾液減壓濃縮，所得的殘留物經矽膠柱層析(石油醚/乙酸乙酯(v/v)=4/1)純化，得到標題化合物為白色固體(10mg,7.7%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z 640.0[M+H]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 0.98-1.12(t,J=7.4Hz,3H),1.80-1.90(m,2H),3.02-3.09(m,2H),6.40(s,2H),6.51(s,1H),7.02-7.08(m,1H),7.11-7.16(d,J=7.6Hz,2H),7.25-7.30(m,1H),7.37-7.42(m,2H),7.46-7.52(d,J=8.4Hz,2H),7.57-7.64(d,J=8.4Hz,2H),7.67-7.75(m,1H),7.88(s,1H),8.70-8.73(d,J=2.1Hz,1H),8.87-8.90(d,J=2.1Hz,1H)。
實施例32：1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基磷酸鈉
步驟1)1-氯乙基磺醯氯
0℃下，於40分鐘內向1-氯乙基氯甲酸酯(54.4mL,504mmol)中加入氯磺酸(49.0mL,729mmol)，加完後體系在0℃攪拌2小時。將反應液升溫至5℃攪拌10分鐘後，慢慢向其中加入DCM(500mL)和碎冰(20g)，淬滅反應，接著依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(400mL)和飽和食鹽水洗滌(400mL)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥後，減壓濃縮得到標題化合物為淡黃色固體(54.2g,60%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 1.98-2.00(d,J=5.8Hz,3H),6.46-6.51(q,J=5.8Hz,1H)。
步驟2)磷酸二叔丁基-1-氯乙基酯
本步驟標題化合物參照實施例17步驟1的方法製備得到，即將磷酸二叔丁酯鉀鹽(33g,133mmol)溶解在二氯甲烷(600mL)和水(600mL)中，並向其中加入碳酸氫鈉(44.6g,531mmol)，四丁基硫酸氫銨(4.52g,13.3mmol)，和1-氯乙基磺醯氯(26g,146mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液，反應製得標題化合物為無色油狀物(14.3g,40%)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 1.52(s,18H),1.81(d,J=5.6Hz,3H),6.17-6.24(m,1H)。
步驟3)1-((5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基)磷酸二叔丁基酯
將N-(3-(5-(4-氯苯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)-丙烷-1-磺胺(9.8g,20mmol)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(120mL)中，並向其中加入KOH(4.48g,80mmol)，碘化鉀(0.33g,2mmol)，常溫下氮氣保護中，於5分鐘內向體系內滴加磷酸二叔丁基-1-氯-乙基酯(10.9g,40mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(20mL)。反應液在50℃攪拌6小時後，用乙酸乙酯(700mL)稀釋。混合物依次用H2O(400mL x 3)和飽和食鹽水(400mL)洗，有機相減壓濃縮後加入二氯甲烷(20mL)，有固體出現，減壓過濾，濾液濃縮後得到標題化合物粗品為棕色固體(31g,106%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z：724.2[M-1]。
步驟4)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基磷酸二氫酯
將1-((5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基)磷酸二叔丁基酯(20g，粗品)溶解在乙酸乙酯(30mL)中，並向其中加入磷酸(85%,90mL)。反應液在室溫攪拌2分鐘後，加水(200mL)淬滅反應。所得的混合物經乙酸乙酯(300mL x 3)萃取，合併有機相，乾燥後加壓濃縮得到標題化合物為棕色固體(19.5g,74%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z：612.1[M-1]；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ 0.95(t,J=7.4Hz,3H),1.65-1.81(m,5H),3.11(t,J=7.4Hz,2H),6.75-6.87(m,1H),7.28(t,J=8.8Hz,1H),7.57(d,J=8.3Hz,2H),7.51-7.72(m,1H),7.77(d,J=8.3Hz,2H),8.31-8.35(m,1H),8.57-8.61(m,1H),8.69-8.74(m,1H),9.85(br,1H).
步驟5)1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並 [2,3-b]吡啶-1-基)乙基磷酸鈉
室溫下，將1-(5-(4-氯苯基)-3-(2,6-二氟-3-(丙磺醯胺基)苯甲醯基)-1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-1-基)乙基磷酸二氫酯(4g,6.5mmol)溶解在乙酸乙酯(20mL)和四氫呋喃(10mL)的混合溶液中，並在常溫下向其中滴加NaOH(0.57g,14.3mmol)的水(1mL)溶液。反應液在室溫攪拌過夜後，過濾，所得的固體在45℃下減壓乾燥10小時後，得到標題化合物為白色固體(4.0g,93%)。
LC-MS(ESI,pos.ion)m/z：612.1[M-1]；1H NMR(400MHz,D2O)：δ 0.88(t,J=7.4Hz,3H),1.65-1.75(m,2H),1.74(d,J=5.9Hz,3H),2.93(t,J=7.5Hz,2H),6.55-6.62(m,1H),7.04(t,J=8.8Hz,1H),7.40(d,J=8.4Hz,2H),7.37-7.44(m,1H),7.55(d,J=8.2Hz,2H),8.32(br,1H),8.41-8.47(m,1H),8.55(d,J=1.8Hz,1H)。
生物試驗
採用上文所述的方法及設備對本發明實施例製備的化合物進行生物分析。
實施例A在人和大鼠肝微粒體中的穩定性
將人或大鼠肝微粒體置於聚丙烯試管中孵育，並引導其複製。典型的孵育混合液包括人或大鼠肝微粒體(0.5mg蛋白質/mL)，目標化合物(5μM)和總體積為200μL的NADPH(1.0mM)磷酸鉀緩衝液(PBS，100mM，pH值為7.4)，將化合物溶解在DMSO中，並使用PBS將其稀釋，使其最終的DMSO溶液的濃度為0.05%。並在37℃下與空氣相通的水浴中進行孵育，預孵育3分鐘後向混合液中加入蛋白並開始反應。在不同的時間點(0，5，10，15，30和60min)，加入同體積冰冷乙腈終止反應。樣品於-80℃下保存直到進行LC/MS/MS分析。
化合物在人或大鼠肝微粒體孵育混合物中的濃度是通過LC/MS/MS的方法來測定的。濃度範圍的線性範圍是通過每一個受試化合物來確定的。
平行孵育試驗使用變性的微粒體作為陰性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0,15和60分鐘)終止。
右美沙芬(70μM)作為陽性對照，在37℃下孵化，反應在不同的時間點(0，5，10，15，30和60分鐘)終止。每一種測定方法中都包括陽 性和陰性對照樣品，以保證微粒體孵化體系的完整性。
對於每一個反應，將化合物在人或大鼠肝微粒體孵育中的濃度(以百分比表示)按相對零時間點的百分比作圖，以此來推斷體內肝固有清除率CLint(ref.：Naritomi Y,Terashita S,Kimura S,Suzuki A,Kagayama A,Sugiyama Y.Prediction of human hepatic clearance from in vivo animal experiments and in vitro metabolic studies with liver microsomes from animals and humans.Drug Metabolism and Disposition 2001,29：1316-1324.)。結果參見表1，表1為本發明部分實施例提供的化合物在人和大鼠肝微粒體中穩定性的實驗結果。
由表1可知，將本發明化合物孵育在人和大鼠肝微粒體中時， 本發明所述化合物表現出良好的半衰期(T1/2)和清除率(CLint)。
同樣地，本發明部分實施例所提供的化合物在人和大鼠血漿中的穩定性也被評估。實驗結果參見表2，表2為本發明部分實施例提供的化合物在人和大鼠血漿中穩定性的實驗結果。
由表2可知，本發明所述的化合物在人和大鼠血漿中表現出良好的半衰期(T1/2)。
實施例B本發明化合物在動物體內的藥代動力學評價
本發明對本發明化合物在小鼠、大鼠、犬或猴子體內的藥代動力學研究進行了評估。
將Vemurafenib和本發明化合物以溶液形式進行給藥。在時間點為0.25，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0，12和24小時取血(0.3mL)，並在3,000或4,000rpm下離心10分鐘。收集血漿溶液，並於-20℃或-70℃下保 存直到進行上述的LC/MS/MS分析。結果參見表3到表7。
結果表明，將本發明提供的化合物口服給藥時，本發明所述化合物表現出良好的藥代動力學性質，包括理想的半衰期(T1/2)和好的生物利用度。
實施例C異種移植腫瘤模型
採用上文所述的方法建立Colo-205移植瘤模型，並採用上文所述的方法進行分析。在Colo-205移植瘤模型中，將實施例化合物每天一次(qd)或每天兩次(bid)口服給藥(p.o.)，並持續15天，結果參見表8，表8為本發明實施例提供的化合物的移植瘤研究結果。
由表8可知，在20mg/kg劑量下，本發明化合物具有統計學上的意義，可抑制裸鼠皮下腫瘤的生長。
最後，需要注意的是，還有其他方式用來實施本發明。相應地，本發明的實施例是將作為例證進行說明，但並不限於本發明所描述的內容，還可能是在本發明範圍內所作的修改或在權利要求中所添加的等同內容。本發明所引用的所有出版物或專利都將作為本發明的參考文獻。

Claims (20)

  1. 一種如式(I)所示的化合物： 或其消旋體，立體異構體，幾何異構體，互變異構體，溶劑化物，氮氧化物，代謝產物或藥學上可接受的鹽，其中：各X和Y獨立地為H，-C(=O)R3，-C(=O)OR4，-C(R1R2)OC(=O)R3，-C(R1R2)OC(=O)OR4或-C(R1R2)OP(=O)(OR4)(OR4a)，且當Y為H時，X不能為H或乙醯基；各R1和R2獨立地為H，D，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C3-6環烷基，-(C1-4亞烷基)-(C3-6環烷基)，C3-6雜環基或-(C1-4亞烷基)-(C3-6雜環基)，其中，所述各R1和R2分別與碳原子相連，或R1和R2相連後與碳原子相連，或R1，R2，和與他們相連的碳原子一起，形成取代或未被取代的3-8個原子組成的碳環或雜環；各R3獨立地為H，D，C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，Br，I，-OH，-NH2，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-6烷氧基和C1-6烷氨基的取代基所取代；各R4和R4a獨立地為H，C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C1-10鹵代烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，Cl，-OH，-NH2， 氧代(=O)，C1-6烷基，C1-6鹵代烷基，C1-6烷氧基和C1-6烷氨基的取代基所取代。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，各R1和R2獨立地為H，D或C1-3烷基。
  3. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，各R3獨立地為C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基或-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)，其中，所述各C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)，C6-10芳基，-(C1-6亞烷基)-(C6-10芳基)，5-10個原子組成的雜芳基和-(C1-6亞烷基)-(5-10個原子組成的雜芳基)未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，OH，-OMe，-NH2，-NHMe，-NMe2和C1-3烷基的取代基所取代。
  4. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，各R4和R4a獨立地為H，C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)或C6-10芳基，其中，所述各C1-10烷基，C3-8環烷基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8環烷基)，C3-8雜環基，-(C1-6亞烷基)-(C3-8雜環基)和C6-10芳基未被取代或任選地被1，2，3或4個獨立選自D，F，OH，-OMe，-NH2，-NHMe，-NMe2，氧代(=O)和C1-3烷基的取代基所取代。
  5. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，各X和Y獨立地為H或-C(R1R2)OP(=O)(OH)2，且X和Y不能同時為H。
  6. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，各X和Y獨立地為H，-C(=O)R3，-C(=O)OR4，-C(R1R2)OC(=O)R3，-C(R1R2)OC(=O)OR4，且當Y為H時，X不能為H或乙醯基。
  7. 如申請專利範圍第6項所述的化合物，其中，醯基片段(-C(=O)R3)是α-氨基酸或其光學異構體形成的基團。
  8. 如申請專利範圍第7項所述的化合物，其中，α-氨基酸為異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，丙氨酸，天門冬醯胺，天門冬氨酸，谷氨酸，穀氨醯胺，脯氨酸，絲氨酸，對-酪氨酸，精氨酸，組氨酸，半胱氨酸，甘氨酸，肌氨酸，N,N-二甲基甘氨酸，高絲氨酸，正纈氨酸，正亮氨酸，鳥氨酸，高半胱氨酸，高苯丙氨酸，苯基甘氨酸，鄰-酪氨酸， 間-酪氨酸或羥脯氨酸。
  9. 如申請專利範圍第8項所述的化合物，其中，α-氨基酸為異亮氨酸，亮氨酸，賴氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，蘇氨酸，色氨酸，纈氨酸，丙氨酸，天門冬醯胺，天門冬氨酸，谷氨酸，穀醯胺，脯氨酸，絲氨酸，酪氨酸，精氨酸或組氨酸，其中，所述每一種氨基酸的α-位都是S構型。
  10. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，所述藥學上可接受的鹽為鹼金屬鹽，鹼土金屬鹽，銨鹽或N+(C1-4烷基)4鹽。
  11. 如申請專利範圍第10項所述的化合物，其中，所述藥學上可接受的鹽為鈉鹽，鋰鹽，鉀鹽，鈣鹽，鎂鹽，銨鹽，季銨鹽，或其組合。
  12. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，其中，所述藥學上可接受的鹽為無機鹽，有機鹽或其組合，所述的無機鹽是鹽酸鹽，氫溴酸鹽，硫酸鹽，硝酸鹽，磷酸鹽或其組合，所述有機鹽是乙酸鹽，馬來酸鹽，琥珀酸鹽，扁桃酸鹽，延胡索酸鹽，丙二酸鹽，蘋果酸鹽，2-羥基丙酸鹽，丙酮酸鹽，草酸鹽，乙醇酸鹽，水楊酸鹽，葡萄糖醛酸鹽，半乳糖醛酸鹽，檸檬酸鹽，酒石酸鹽，天冬氨酸鹽，谷氨酸鹽，苯甲酸鹽，肉桂酸鹽，對甲苯磺酸鹽，苯磺酸鹽，甲磺酸鹽，乙磺酸鹽，三氟甲磺酸鹽或其組合。
  13. 如申請專利範圍第1項所述的化合物，具有以下其中之一的結構：
  14. 一種藥物組合物，包含如申請專利範圍第1項至第13項中任意一項所述的化合物和藥學上可接受的載體，賦形劑，稀釋劑，輔劑，媒介物或其組合。
  15. 如申請專利範圍第14項所述的藥物組合物，其中更進一步地還包含附加治療劑，所述附加治療劑選自化學治療藥物，抗增殖劑，用於治療動脈粥樣硬化的藥物，用於治療肺纖維化的藥物或其組合。
  16. 如申請專利範圍第15項所述的藥物組合物，其中所述的附加治療劑是苯丁酸氮芥(chlorambucil)，美法侖(melphalan)，環磷醯胺(cyclophosphamide)，異環磷醯胺(ifosfamide)，白消安(busulfan)，卡莫司汀(carmustine)，洛莫司汀(lomustine)，鏈脲佐菌素(streptozocin)，順鉑(cisplatin)，卡鉑(carboplatin)，奧沙利鉑(oxaliplatin)，達卡巴嗪(dacarbazine)，替莫唑胺(temozolomide)，丙卡巴肼(procarbazine)，甲氨蝶呤(methotrexate)，氟尿嘧啶(fluorouracil)，阿糖胞苷(cytarabine)，吉西他濱(gemcitabine)，巰基嘌呤(mercaptopurine)，氟達拉濱(fludarabine)，長春鹼(vinblastine)，長春新鹼(vincristine)，長春瑞濱(vinorelbine)，紫杉醇(paclitaxel)，多西紫杉醇(docetaxel)，拓撲替康(topotecan)，伊立替康(irinotecan)，依託泊苷(etoposide)，曲貝替定(trabectedin)，更生黴素(dactinomycin)，多柔比星(doxorubicin)，表柔比星(epirubicin)，道諾黴素(daunorubicin)，米托蒽醌(mitoxantrone)，博來黴素(bleomycin)，絲裂黴素C(mitomycin)，伊沙匹隆(ixabepilone)，他莫昔芬 (tamoxifen)，氟他胺(flutamide)，戈那瑞林類似物(gonadorelin analogues)，甲地孕酮(megestrol)，強的松(prednisone)，地塞米松(dexamethasone)，甲潑尼龍(methylprednisolone)，沙利度胺(thalidomide)，干擾素α(interferon alfa)，亞葉酸鈣(leucovorin)，西羅莫司(sirolimus)，西羅莫司脂化物(temsirolimus)，依維莫司(everolimus)，阿法替尼(afatinib)，alisertib，amuvatinib，阿帕替尼(apatinib)，阿西替尼(axitinib)，硼替佐米(bortezomib)，波舒替尼(bosutinib)，brivanib，cabozantinib，西地尼布(cediranib)，crenolanib，克卓替尼(crizotinib)，dabrafenib，dacomitinib，danusertib，達沙替尼(dasatinib)，dovitinib，厄洛替尼(erlotinib)，foretinib，ganetespib，吉非替尼(gefitinib)，ibrutinib，埃克替尼(icotinib)，伊馬替尼(imatinib)，iniparib，拉帕替尼(lapatinib)，lenvatinib，linifanib，linsitinib，馬賽替尼(masitinib)，momelotinib，莫替沙尼(motesanib)，來那替尼(neratinib)，尼祿替尼(nilotinib)，niraparib，oprozomib，olaparib，帕唑帕尼(pazopanib)，pictilisib，ponatinib，quizartinib，regorafenib，rigosertib，rucaparib，ruxolitinib，塞卡替尼(saracatinib)，saridegib，索拉非尼(sorafenib)，舒尼替尼(sunitinib)，tasocitinib，telatinib，tivantinib，tivozanib，tofacitinib，trametinib，凡德他尼(vandetanib)，veliparib，威羅菲尼(vemurafenib)，vismodegib，volasertib，阿侖單抗(alemtuzumab)，貝伐單抗(bevacizumab)，brentuximab vedotin，卡妥索單抗(catumaxomab)，西妥昔單抗(cetuximab)，地諾單抗(denosumab)，吉妥珠單抗(gemtuzumab)，伊匹單抗(ipilimumab)，尼妥珠單抗(nimotuzumab)，奧法木單抗(ofatumumab)，帕尼單抗(panitumumab)，利妥昔單抗(rituximab)，托西莫單抗(tositumomab)，曲妥珠單抗(trastuzumab)，或其組合。
  17. 一種使用如申請專利範圍第1項至第13項中任一項所述化合物或如申請專利範圍第14項至第16項中任意一項所述的藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者增殖性疾病的藥品的用途。
  18. 如申請專利範圍第17項所述的用途，其中所述的增殖性疾病是轉移癌、結腸癌，胃腺癌，膀胱癌，乳腺癌，腎癌，肝癌，肺癌，皮膚癌，甲狀腺癌，腦瘤，頸癌，前列腺癌，胰腺癌，中樞神經系統的癌症，惡性膠質瘤，骨髓增生病，動脈粥樣硬化或肺纖維化。
  19. 一種使用如申請專利範圍第1項至第13項中任一項所述的化合物或如 申請專利範圍第14項至第16項中任一項所述的藥物組合物來製備用於在生物標本內抑制或調節蛋白激酶活性的用途，所述用途包含使用如申請專利範圍第1項至第13項中任一項所述化合物或使用如申請專利範圍第14項至第16項中任一項所述的藥物組合物與所述的生物標本接觸。
  20. 如申請專利範圍第19項所述的用途，其中所述蛋白激酶為B-Raf。
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