CN102603734A

CN102603734A - 一种蛋白激酶抑制剂及其应用

Info

Publication number: CN102603734A
Application number: CN2012100158247A
Authority: CN
Inventors: 余强; 王彤
Original assignee: Cgenetech Suzhou China Co Ltd
Current assignee: Cgenetech Suzhou China Co Ltd
Priority date: 2012-01-19
Filing date: 2012-01-19
Publication date: 2012-07-25

Abstract

本发明公开了一种蛋白激酶抑制剂，它是如通式I所示的化合物或其药学可接受的盐、前药形式、异构体以及多晶或无定形晶体形式。本发明同时还涉及应用该蛋白激酶抑制剂制备治疗细胞过度繁增疾病的药物的方法。

Description

一种蛋白激酶抑制剂及其应用

技术领域

本发明涉及一种蛋白激酶抑制剂，及其作为制备治疗细胞过度繁殖疾病的药物的应用。

背景技术

蛋白激酶是用于调节重要信号传导通道的，其功能涵盖关键信号转导的级联，控制或参与控制生理功能过剩等，包括细胞生长和增生、细胞分化、细胞发育、细胞分裂、应激反应、转录调节、有丝分裂紊乱等等。如此，蛋白激酶的迷行再生是与不同的特殊疾病状态相联系的。和蛋白激酶失控特别相关的疾病包括，各种癌症、白血病、老年痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化、关节炎、哮喘、动脉硬化和过敏性皮炎等。在治疗上述疾病的过程中，需要额外的化合物来调节受体蛋白激酶，或者说抑制受体蛋白激酶的活性，这类化合物可称为蛋白激酶抑制剂。

现有技术中，包括蛋白激酶抑制剂在内的很多临床药都因为较差的药代属性(药物代谢属性)而限制了应用。不理想的药代已成为临床试验失败的主要原因。虽然药物配方(drug formulation)技术和前药形式(prodrug)能在一些情况下改善药代，但不能从根本上解决大部分候选药的药代问题。迅速的分解和代谢造成许多原本有效的药很快被人体清除从而失去效果。一个通常的临床对策是加大给药频率和剂量来保证在血液里的较高浓度。但是，这也会造成新问题，比如病人不适应，大剂量带来更显著的副作用以及飙升的费用。在一些特例中，代谢抑制剂可以和那些迅速代谢的药同时给药。例如对一类治疗艾滋病的抗蛋白酶药，美国药品食品管理委员会(FDA)推荐和细胞色素酶P4503A4(CYP3A4)抑制剂ritonavir同时给药。但是，ritonavir有副作用而且增加病人服药数量。同样，右美沙芬被细胞色素酶P450 2D6(CYP2D6)快速代谢，奎尼丁(quinidine)抑制细胞色素酶P4502D6(CYP2D6)而被用来和右美沙芬同时给药，但临床结果证明这样副作用太而受到使用限制(Wang，L. et.al.，Clinical Pharmacology and Therapeutics，1994，56(6 Pt 1)；and FDA label for quinidine at www.accessdata.fda.gov)。通常，为缓解药物代谢而与细胞色素酶P450抑制剂组合成药很难收到预期效果。细胞色素酶P450抑制剂也影响该酶对其它药物的代谢从而造成其它药物积累至对人体有毒害的水平。

一个可能显著提高药代属性的方法是氘代修饰，即通过将药物分子中一个或多个氢原子替换成氘原子，以期提高药代属性。氘原子是氢原子的同位素，它安全，稳定且没有放射性。理论上，C-D键比C-H键更强。一些案例告诉我们坚固的C-D键可以改善药物代谢，从而提高药物的活性，安全性和适用性。同时，由于氘原子的形状、大小和氢原子十分相似，氘代一般不会影响原药物的生物活性和选择性。

在过去的三十五年中，只有极少数文献报导相关氘取代对药物代谢速度影响方面的研究，而且研究结果各异，无规律可循(例如：Blake，M.I et.al.，J.Pharm.Sci.1975，64：367-91；Foster，A.B.，Adv.Drug Res 1985，14：1-40；Kushner，D.J.et.al.，Can.J.Physiol.Pharmacol.1999，79-88；Fisher，M.B.Curr.Opin.Drug Discov.Devel，2006，9：101-09)。有一些氘代化合物的确降低了底物在活体内的代谢速度，但有一些却没有变化，更有一些甚至加快了代谢。即使研究已澄清一个药物分子的代谢位点，针对这些位点氘代并不能保证就能提高药代属性。唯一可靠的方法是制备并检测氘代物，然后与相应的非氘代底物进行比较(例如，Fukuto et.al.J.Med.Chem.1991，34，2871-76)。由于很多药物有不止一个代谢位点，针对每个位点氘代，且研究相应代谢速度的变化才能全面了解氘代效果和发现最佳氘代物。这无疑是费时费力的事情。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种新的蛋白激酶抑制剂。

本发明的另一目的是将上述蛋白激酶抑制剂应用于制备治疗由相关蛋白激酶引起的疾病和细胞过度繁增疾病的药物。

为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案：

一种蛋白激酶抑制剂，为如下通式I的化合物或其药学可接受的盐、药学可接受的前药形式以及药学可接受的异构体；

其中：

A选自-C(O)-、-C(S)-或-CR₆R₇-；R6与R7各自独立选自H、D、卤素、-OH、 -NH₂、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-SR’、-NHR’或-NR’₂；其中，R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

R₁、R₃和R₄各自独立选自：H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基或-OR’；其中，R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

R₂选自H、-C(O)R₈、-C(O)OR₈、-C(O)NR₈、-S(O₂)R₈、-S(O₂)NR₈、-P(O)(OR”)R₈、芳基或杂环；其中，R8和R”各自独立选自：H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；芳基或杂环可以被以下基团单取代或多取代：H、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-OH、-CN、-COOR’、-OC(O)R’、-NHR’、-N(R’)2、-NHC(O)R’或-C(O)NHR’；其中，R’选自H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

R₅选自H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、芳基或杂环；其中，芳基或杂环可以被以下基团单取代或多取代：H、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-OH、-CN、-COOR’、-OC(O)R’、-NHR’、-N(R’)2、-NHC(O)R’或-C(O)NHR’；其中，R’选自H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

优选地，所述蛋白激酶抑制剂为如下通式II的化合物或其药学可接受的盐、药学可接受的前药形式以及药学可接受的异构体；

其中，Q选自N或C-R₉；R₉选自H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-NHR’、-NR’₂；R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

Q1、Q2、Q3和Q4各自独立选自H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-NHR’或-NR’2；R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

本发明中，所述的“D”代表氘。

所述的“卤素”代表氯(Cl)、氟(F)、溴(Br)或碘(I)。

除非特别定义，所述的“低级烷基”是指含1-6个碳原子的烷烃衍生基团(alkane-derived radical)，包括直链烷基或支链烷基，且所述直链或支链烷基能够在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物。优选地，所述低级烷基是含1-4个碳原子的直链或支链烷基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基等。除非另有说明，所述的“被取代的低级烷基”(substituted lower alkyl)表示低级烷基被一个或多个取代基单独取代(independently substituted)，所述一个或多个优选为1、2、3、4或5个，更优选为1、2或3个，并在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物；所述取代基选自-F、-OH、-NH₂、-NO₂、-CN、-C(O)OH、-C(S)OH、-C(O)NH₂、-C(S)NH₂、-S(O)₂NH₂、-NHC(O)NH₂、-NHC(S)NH₂、-NHS(O)₂NH₂、-C(NH)NH₂、-OR、-SR、-OC(O)R、-OC(S)R、-C(O)R、-C(S)R、-C(O)OR、-C(S)OR、-S(O)R、-S(O)₂R、-C(O)NHR、-C(S)NHR、-C(O)NRR、-C(S)NRR、-S(O)₂NHR、-S(O)₂NRR、-C(NH)NHR、-C(NH)NRR、-NHC(O)R、-NHC(S)R、-NRC(O)R、-NRC(S)R、-NHS(O)₂R、-NRS(O)₂R、-NHC(O)NHR、-NHC(S)NHR、-NRC(O)NH₂、-NRC(S)NH₂、-NRC(O)NHR、-NRC(S)NHR、-NHC(O)NRR、-NHC(S)NRR、-NRC(O)NRR、-NRC(S)NRR、-NHS(O)₂NHR、-NRS(O)₂NH₂、-NRS(O)₂NHR、-NHS(O)₂NRR、-NRS(O)₂NRR、-NHR以及-NRR。

除非特别定义，所述的“低级烯基”是指含2-6个碳原子的直链或支链碳氢化合物，并且至少有1个碳碳双键，优选有1-2个碳碳双键，更优选为有1个碳碳双键。碳碳双键可能在直链上也可能在支链上。这些“低级烯基”包括乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基等。除非另有说明，所述“被取代的低级烯基”表示低级烯基被一个或多个取代基单独取代(independently substituted)，所述一个或多个优选1、2、3、4或5个，更优选为1、2或3个，并在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物；所述取代基选自-F、-OH、-NH₂、-NO₂、-CN、-C(O)OH、-C(S)OH、-C(O)NH₂、-C(S)NH₂、-S(O)₂NH₂、-NHC(O)NH₂、-NHC(S)NH₂、-NHS(O)₂NH₂、-C(NH)NH₂、-OR、-SR、-OC(O)R、-OC(S)R、-C(O)R、-C(S)R、-C(O)OR、-C(S)OR、-S(O)R、-S(O)₂R、-C(O)NHR、-C(S)NHR、-C(O)NRR、-C(S)NRR、-S(O)₂NHR、-S(O)₂NRR、-C(NH)NHR、-C(NH)NRR、-NHC(O)R、-NHC(S)R、-NRC(O)R、-NRC(S)R、-NHS(O)₂R、-NRS(O)₂R、-NHC(O)NHR、-NHC(S)NHR、-NRC(O)NH₂、-NRC(S)NH₂、-NRC(O)NHR、-NRC(S)NHR、-NHC(O)NRR、-NHC(S)NRR、-NRC(O)NRR、-NRC(S)NRR、-NHS(O)₂NHR、-NRS(O)₂NH₂、-NRS(O)₂NHR、-NHS(O)₂NRR、-NRS(O)₂NRR、-NHR以及-NRR。

除非特别定义，所述的“低级炔基”是指含2-6个碳原子的直链或支链碳氢化合物，并且至少有1个碳碳三键，优选有1-2个碳碳三键，更优选为有1个碳碳三键。这些“低级炔基”的例子包括乙炔基、丙炔基、丁炔基等。除非另有说明，所述“被取代的低级炔基”表示低级炔基被一个或多个取代基单独取代(independently substituted)，所述一个或多个优选为1、2、3、4或5个，更优选为1、2或3个，并在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物；所述取代基选自-F、-OH、-NH₂、-NO₂、-CN、-C(O)OH、-C(S)OH、-C(O)NH₂、-C(S)NH₂、-S(O)₂NH₂、-NHC(O)NH₂、-NHC(S)NH₂、-NHS(O)₂NH₂、-C(NH)NH₂、-OR、-SR、-OC(O)R、-OC(S)R、-C(O)R、-C(S)R、-C(O)OR、-C(S)OR、-S(O)R、-S(O)₂R、-C(O)NHR、-C(S)NHR、-C(O)NRR、-C(S)NRR、-S(O)₂NHR、-S(O)₂NRR、-C(NH)NHR、-NHC(O)R、-NHC(S)R、-NRC(O)R、-NRC(S)R、-NHS(O)₂R、-NRS(O)₂R、-NHC(O)NHR、-NHC(S)NHR、-NRC(O)NH₂、-NRC(S)NH₂、-NRC(O)NHR、-NRC(S)NHR、-NHC(O)NRR、-NHC(S)NRR、-NRC(O)NRR、-NRC(S)NRR、-NHS(O)₂NHR、-NRS(O)₂NH₂、-NRS(O)₂NHR、-NHS(O)₂NRR、-NRS(O)₂NRR、-NHR以及-NRR。

除非特别定义，所述的“环烷基”是指饱和或不饱和、非芳香单环、双环或三环碳环系统，每环是3-10元环烷基，优选为3-8元环烷基，更优选为3-6元环烷基，例如环丙基、环戊基、环己基、金刚烷基等。除非另有说明，所述“被取代的环烷基”是指环烷基被一个或多个取代基单独取代(independently substituted)，所述一个或多个优选为1、2、3、4或5个，更优选为1、2或3个，并在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物。其中，所述取代基选自卤素、-OH、-NH₂、-NO₂、-CN、-C(O)OH、-C(S)OH、-C(O)NH₂、-C(S)NH₂、-S(O)₂NH₂、-NHC(O)NH₂、-NHC(S)NH₂、-NHS(O)₂NH₂、-C(NH)NH₂、-OR、-SR、-OC(O)R、-OC(S)R、-C(O)R、-C(S)R、-C(O)OR、-C(S)OR、-S(O)R、-S(O)₂R、-C(O)NHR、-C(S)NHR、-C(O)NRR、-C(S)NRR、-S(O)₂NHR、-S(O)₂NRR、-C(NH)NHR、-NHC(O)R、-NHC(S)R、-NRC(O)R、-NRC(S)R、-NHS(O)₂R、-NRS(O)₂R、-NHC(O)NHR、-NHC(S)NHR、-NRC(O)NH₂、-NRC(S)NH₂、-NRC(O)NHR、-NRC(S)NHR、-NHC(O)NRR、-NHC(S)NRR、-NRC(O)NRR、-NRC(S)NRR、-NHS(O)₂NHR、-NRS(O)₂NH₂、-NRS(O)₂NHR、-NHS(O)₂NRR、-NRS(O)₂NRR、-NHR以及-NRR。

除非特别定义，所述的“杂环”是指含有O、S和/或N杂原子的饱和、不饱和或芳香环。所述杂环可以是含5或6个环原子的单环结构，也可以是含8-10个原子的双环结构，包含一个或多个选自O、S或N的杂原子，优选包含1-4个杂原子，更优选包含1-3个杂原子，最优选包含1-2个杂原子。杂芳基也包含氧化的S或N，如亚硫酰基、硫酰基和第三环氮的N-氧化(N-oxide of a tertiary ring nitrogen)。杂环结构的附着点是碳或氮原子，这样才能制备一个稳定的化合物。杂环的例子包括但不限于：四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、哒嗪基、吡嗪基、quinaoxalyl、吲嗪基、苯并[b]噻吩基、喹唑啉基、嘌呤基(purinyl)、吲哚基、喹啉基(quinolinyl)、嘧啶碱基、吡咯酮基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、噻嗯基、异噁唑基、oxathiadiazolyl、异噻唑基(isothiazolyl)、四唑基、咪唑基、三唑基、呋喃基、苯并呋喃基和吲哚基。“含氮杂芳基”是指杂芳基中任何杂原子都是N。除非另有说明，“被取代的杂芳基”是指杂芳基被一个或多个取代基单独取代(independently substituted)，所述一个或多个优选1、2、3、4或5个，更优选1、2或3个，并在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物。其中，取代基选自卤素、-OH、-NH₂、-NO₂、-CN、-C(O)OH、-C(S)OH、-C(O)NH₂、-C(S)NH₂、-S(O)₂NH₂、-NHC(O)NH₂、-NHC(S)NH₂、-NHS(O)₂NH₂、-C(NH)NH₂、-OR、-SR、-OC(O)R、-OC(S)R、-C(O)R、-C(S)R、-C(O)OR、-C(S)OR、-S(O)R、-S(O)₂R、-C(O)NHR、-C(S)NHR、-C(O)NRR、-C(S)NRR、-S(O)₂NHR、-S(O)₂NRR、-C(NH)NHR、 -C(NH)NR＜P＞R、-NHC(O)R、-NHC(S)R、-NRC(O)R、-NRC(S)R、-NHS(O)₂R、-NRS(O)₂R、-NHC(O)NHR、-NHC(S)NHR、-NRC(O)NH₂、-NRC(S)NH₂、-NRC(O)NHR、-NRC(S)NHR、-NHC(O)NRR、-NHC(S)NRR、-NRC(O)NRR、-NRC(S)NRR、-NHS(O)₂NHR、-NRS(O)₂NH₂、-NRS(O)₂NHR、-NHS(O)₂NRR、-NRS(O)₂NRR、-NHR以及-NRR。

除非特别定义，所述的“芳基”是指单独或组合的含芳香族烃(如苯基或萘基)的单环或双环系统，所述芳香族烃可选地与环烷基融合，优选与5-7元环烷基融合，更优选与5-6元环烷基融合。除非另有说明，“被取代的芳基”是指芳基被一个或多个取代基单独取代(independently substituted)，所述一个或多个优选为1、2、3、4或5个，更优选为1、2或3个，并在任何可用点(available point)上被连接(attached)以形成稳定的化合物。其中，取代基选自卤素、-OH、-NH₂、-NO₂、-CN、-C(O)OH、-C(S)OH、-C(O)NH₂、-C(S)NH₂、-S(O)₂NH₂、-NHC(O)NH₂、-NHC(S)NH₂、-NHS(O)₂NH₂、-C(NH)NH₂、-OR、-SR、-OC(O)R、-OC(S)R、-C(O)R、-C(S)R、-C(O)OR、-C(S)OR、-S(O)R、-S(O)₂R、-C(O)NHR、-C(S)NHR、-C(O)NRR、-C(S)NRR、-S(O)₂NHR、-S(O)₂NRR、-C(NH)NHR、-NHC(O)R、-NHC(S)R、-NRC(O)R、-NRC(S)R、-NHS(O)₂R、-NRS(O)₂R、-NHC(O)NHR、-NHC(S)NHR、-NRC(O)NH₂、-NRC(S)NH₂、-NRC(O)NHR、-NRC(S)NHR、-NHC(O)NRR、-NHC(S)NRR、-NRC(O)NRR、-NRC(S)NRR、-NHS(O)₂NHR、-NRS(O)₂NH₂、-NRS(O)₂NHR、-NHS(O)₂NRR、-NRS(O)₂NRR、-NHR以及-NRR。

在上述的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基中的可选取代基中所提到的变量R选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

本发明中所提及的含有氘原子的蛋白激酶抑制剂，在其氘代位点的氘同位素含量应大于天然氘同位素含量(天然氘同位素含量约为0.015％)，优选大于50％，更优选大于75％，更优选大于95％，最优选的大于99.8％。

本发明蛋白激酶抑制剂是对蛋白激酶有活性的化合物，这些蛋白激酶包括Ab1、Akt1、Akt2、Akt3、ALK、Alk5、A-Raf、B-Raf、Brk、Btk、Cdk2、CDK4、CDK5、CDK6、CHK1、c-Raf-1、Csk、EGFR、EphA1、EphA2、EphB2、EphB4、Erk2、Fak、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、Flt1、Flt3、Flt4、Fms、Frk、Fyn、Gsk3.alpha.、Gsk3.beta.、HCK、Her2/Erbb2、Her4/Erbb4、IGF1R、IKK beta、Irak4、Itk、Jak1、Jak2、Jak3、Jnk1、Jnk2、Jnk3、Kdr、Kit、LCK、MAP2K1、 MAP2K2、MAP4K4、MAPKAPK2、Met、Mnk1、MLK1、p38、PDGFRA、PDGFRB、PDPK1、Pim1、Pim2、Pim3、PKC alpha、PKC beta、PKC theta、Plk1、Pyk2、Ret、ROCK1、ROCK2、Ron、Src、Stk6、Syk、TEC、Tie2、TrkA、TrkB、Yes和/或Zap70，以及它们的变异体。

本发明同时还可以将上述所提供的蛋白激酶抑制剂制成药物，用于治疗与蛋白激酶失控相关的疾病，这些疾病包括急性髓性白血病、非霍奇金淋巴癌、老年痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化、关节炎、哮喘、动脉硬化、过敏性皮炎、自我免疫疾病、病菌感染、膀胱癌、乳腺癌、中枢神经系统癌、直肠癌、宫颈癌、胃癌、卵巢癌、心脏病、慢性髓性白血病、慢性肺阻塞疾病、Crouzon Syndrone、糖尿病、emphysema、子宫内膜异位症、epidermoid cancer、fibrotic disorders、胃肠间质瘤、肝癌、脑癌、非小细胞肺癌、免疫缺乏性疾病、皮肤癌、代谢性疾病、神经退化疾病、肾炎、多发性硬化、帕金森症、骨质疏松、前列腺癌、疼痛、风湿性关节炎、银屑病、睾丸癌以及慢性淋巴性白血病等。

另外，本发明还提供将上述蛋白激酶抑制剂制成用于治疗癌症的药物，这些蛋白激酶抑制剂可以单独使用，也可以与其它具有抗癌性的化合物或药物组合使用。所述“具有抗癌性的化合物或药物”主要有烷化剂类、抗生素类、抗代谢类、免疫疗法类、激素、抗激素类、紫杉醇类、类维生素A类、生物碱类、抗血管新生类、a拓扑异构酶抑制剂类、其他蛋白激酶抑制剂类、靶向信号转导抑制剂类、生物响应修饰剂类以及其它化疗药物类。

其中烷化剂类包括阿多来新(adozelesin)、六甲蜜胺(altretamine)、比折来新(bizelesin)、白消安(busulfan)、卡波铂(carboplatin)、卡波醌(carboquone)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、顺铂(cisplatin)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、氮烯唑胺(dacarbazine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、hepsulfam、异环磷酰胺(ifosfamide)、英丙舒凡(improsulfan)、伊洛福芬(irofulven)、洛莫司汀(lomustine)、盐酸氮芥(mechlorethamine)、苯丙氨酸氮芥(melphalan)、奥沙利铂(oxaliplatin)、哌泊舒凡(piposulfan)、司莫司汀(semustine)、链佐星(streptozocin)、蒂清(temozolomide)、塞替哌(thiotepa)、和曲奥舒凡(treosulfan)；抗生素类包括博来霉素(bleomycin)、放线菌素(Ddactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、阿霉素(doxorubicin)、表阿霉素 (epirubicin)、伊达比星(idarubicin)、美诺立尔(menogaril)、丝裂霉素(mitomycin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、neocarzinostatin、喷司他丁(pentostatin)和光神霉素(plicamycin)；抗代谢类包括阿扎胞苷(azacitidine)、卡培他滨(capecitabine)、克拉屈滨(cladribine)、氯法拉滨(clofarabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、地西他滨(decitabine)、氟尿苷(floxuridine)、氟达拉滨(fludarabine)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、喃氟啶(ftorafur)、吉西他滨(gemcitabine)、羟基脲(hydroxyurea)、巯嘌呤(mercaptopurine)、氨甲蝶呤(methotrexate)、奈拉滨(nelarabine)、pemetrexed、雷替曲塞(raltitrexed)、thioguaninie和三甲曲沙(trimetrexate)；免疫疗法类包括alemtuzumab、bevacizumab、爱必要(cetuximab)、galiximab、gemtuzumab、帕尼单抗(panitumumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单抗(tositumomab)、trastuzumab和90Y替伊莫单抗(90Y ibritumomab tiuxetan)；激素、抗激素类包括阿那曲唑(anastrozole)、雄激素(androgens)、布舍瑞林(buserelin)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)、依西美坦(exemestane)、氟他胺(flutamide)、氟维司群(fulvestrant)、戈舍瑞林(goserelin)、艾多昔芬(idoxifene)、来曲唑(letrozole)、亮丙瑞林(leuprolide)、magestrol、雷洛昔芬(raloxifene)、他莫昔芬(tamoxifen)和托瑞米芬(toremifene)；紫杉醇类包括DJ-927、多烯紫杉醇(docetaxel)、TPI 287、紫杉醇和DHA-紫杉醇(DHA-paclitaxel)；类维生素A类包括9-顺式视黄酸(alitretinoin)、贝沙罗汀(bexarotene)、维甲酰酚胺(fenretinide)、异维甲酸(isotretinoin)和维甲酸(tretinoin)；生物碱类包括依托泊苷(etoposide)、高三尖杉酯碱(homoharringtonine)、替尼泊甙(teniposide)、长春花碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春地辛(vindesine)和长春瑞滨(vinorelbine)；抗血管新生类包括AE-941(GW786034，Neovastat)、ABT-510、2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol)、来那度胺和萨立多胺(thalidomide)；a拓扑异构酶抑制剂类包括安吖啶(amsacrine)、艾特咔林(edotecarin)、依喜替康(exatecan)、伊立替康(irinotecan)【包括代谢物SN-38(7-ethyl-10-hydroxy-camptothecin)】、鲁比特康(rubitecan)、拓扑替康(topotecan)和9-氨基喜树碱(9-aminocamptothecin)；其他蛋白激酶抑制剂类包括埃罗替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、夫拉平度(flavopiridol)、甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)、拉帕替尼(lapatinib)、索拉非尼(sorafenib)、苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate)、AEE-788、AG-013736、AMG706、AMN107、BMS-354825、BMS-599626、UCN-01(7-hydroxystaurosporine)和瓦他拉尼(vatalanib)；靶向信号转导抑制剂类包括硼替佐米(bortezomib)、格尔德霉素(geldanamycin)和雷帕霉素(rapamycin)；生物响应修饰剂包括咪喹莫特(imiquimod)、干扰素-a(interferon-.alpha.)和白细胞间介素-2(interleukin-2)；其它化疗药物类包括3-AP(3-amino-2-carboxyaldehyde thiosemicarbazone)、氨鲁米特(aminoglutethimide)、门冬酰胺酶(asparaginase)、苔藓抑素(bryostatin-1)、西仑吉肽(cilengitide)、E7389、伊沙匹隆(ixabepilone)、丙卡巴肼(procarbazine)、舒林酸(sulindac)、西罗莫司脂化物(temsirolimus)和替吡法尼(tipifamib).

本发明化学激酶抑制剂除包括上述通式I和通式II的化合物外，还包括这些化合物如下可能存在的物理化学和立体化学形态：

1)互变异构体、立体异构体、区位异构体和水合物；

2)载体前药形式和活性代谢物；

3)制药学可接受盐；

4)多晶体和无定形体；

载体前药是含有传导部分的药物化合物，如能改善摄取和(或)提高局部传递至活动网络。理想的载体前药，药物部分和传导部分是共价键键合，所述前药是不活跃的或比药物化合物不活跃，所述前药和任何释放的传导部分是无毒的。对于前药，传导部分的目的是改善吸收，通常传到部分的释放应迅速。在其他情况下，利用缓慢释放的传导部分也是可取的，例如，一些聚合物或其一部分，如环糊精(请参见Cheng等的美国专利，公开号为20040077595、App.No.10/656,838)。这种载体前药往往在口服药物上是有利的。载体前药能改善一个或多个下列特性：提高亲油性、提高药物作用的持续性、提高位点专一性(site-specificity)、降低毒副作用、和(或)改善药物结构(如稳定性、水溶性、抑制不良感官或物理性质)。例如，通过用羧酸对羟基进行酯化，或用醇(如脂肪醇、)对羧酸基进行酯化对来提高亲油性。Wermuth、supra.前药会在一步内由前药形态转成激活态，或会有一种或多种具有活性或不具活性的中间形式。

代谢产物(如活性代谢产物)与上述前药(如生物前药)重叠。因此，代谢产物是药理活性化合物或其进一步代谢产生药理活性化合物的化合物，是对象体内的代谢过程产生的衍生物。其中，活性代谢产物是药理活性化合物(Of these、active metabolites are such pharmacologically active derivative compounds)。对于前药，前药化合物通常是不活泼的或比代谢产物活性低。对于代谢产物，其根源化合物可能是一活性药物或一低活性前药。前药和活性代谢产物可以通过本领域的常规技术来鉴定。(请参见“Bertolini等，1997、J Med Chern 40：2011-2016”、“Shan等，JPharm Sd 86：756-757”、“Bagshawe、1995、Drug Dev Res 34：220-230”)。

化合物可以被写成通式或形成制药学可接受盐(Compounds can be formulated as or be in the form of pharmaceutically acceptable salts)。制药学可接受盐在其被许可的剂量和浓度内是没有毒性的。该种盐类的制备可以通过改变化合物的物理性质而不防止其发挥生物作用来促进化合物的药理学使用。物理特性的有效的改变包括降低熔点来简化转化粘液质管理，通过提高溶解度来简化药物的高浓度管理。

制药学可接受盐包括酸加成盐，如硫酸盐、氯化物、盐酸盐、延胡索酸盐、马来酸盐、磷酸盐、氨基磺酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐(p-toluenesulfonate)、环已基氨基磺酸盐和奎尼酸盐(quinate)。制药学可接受盐可以由酸获得，如盐酸、顺丁烯二酸、硫酸、磷酸、氨基磺酸、乙酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、甲磺酸、乙二酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己氨基磺酸、延胡索酸和奎尼酸。

当酸官能团(如羧酸或苯酚)存在时，制药学可接受盐还包括碱加成盐(basic addition salts)，如那些含苯乍生(benzathine)、氯普鲁卡因(chloroprocaine)、胆碱(choline)、二乙醇胺、乙醇胺、叔丁乙酸盐、氨茶碱、葡甲胺、普鲁卡因、铝、钙、锂、镁、钾、钠、铵、烷基胺和锌的盐。例如，请参见Remington′s Pharmaceutical Sciences、19* ed.、Mack Publishing Co.、Easton、PA、Vol.2、p.1457、1995.这些盐可以由相应的碱制得。

制药学可接受盐可以用标准技术制备。例如，一化合物的自由基可以被一合适的溶剂溶解，如含有适当的酸的水溶液或水-醇溶液，然后蒸发溶液分离得到化合物。在另一例子中，通过自由基和酸在有机溶剂中反应得到盐。

这样，如果所述化合物是碱，那预期的制药学可接受盐可以通过任何本领域合适的方式制得，如用无机酸处理自由基，所述无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或用有机酸处理自由基，所述有机酸如乙酸、马来酸、琥珀酸、苦杏仁酸、富马酸、丙二酸、乙酰甲酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)(如醛酸或半乳糖醛酸)、α-羟基酸(如柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(如天门冬氨酸或谷氨酸)、芳香族酸(如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(如对甲苯磺酸(p-toluenesulfonic acid)或甲磺酸)等。

类似地，如果化合物是酸，那预期的制药学可接受盐可以通过任何合适的方式制得，比如，用无机碱或有机碱处理自由基，所述无机碱或有机碱如胺(伯胺、仲胺或叔胺)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等。合适盐的举例说明包括，来源于氨基酸的有机盐，所述氨基酸如L-甘氨酸、L-赖氨酸和L-精氨酸、氨水、伯胺、仲胺、叔胺和环胺(如羟乙基吡咯酮烷、哌啶、吗啉和哌嗪)，来源于钠、钙、钾，镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。进一步地，通式I化合物的制药学可接受盐的包括，但不限于，该化合物的单钠盐(mono-sodium salts)和对钾盐(bis-potassium salts)。不同化合物的制药学可接受盐可以以络合物的形式存在。所述络合物的例子包括，8-氯茶碱络合物(类似于，如茶苯海明8-氯茶碱(1∶1)络合物；茶苯海明)和不同的含环糊精络合物(cyclodextrin inclusion complexes)。

除非另有规定，本发明中提供的通式I和通式II的化合物说明都包括该化合物的制药学可接受盐。

多晶体和无定形体没有可辨别的晶格，因此无有序结构单元。许多药物和有生物活性的化合物都存在多晶体和无定形体。本领域技术人员可以知道化合物和盐可以以不同的晶形或多晶型形态存在，所有这些形态的化合物均在本发明和规定公式(specified formulae)的范围内。

由于以上技术方案的实施，本发明与现有技术相比具有以下优点：

本发明蛋白激酶抑制剂制备方法简单，副作用小，能够制成对于绝大多数由相关蛋白激酶引起的疾病和细胞过度繁增疾病有疗效的药物。

具体实施方式

运用已知的有机合成技术能便捷地制备出本发明的化合物。许多具体制备方法发表在本领域技术人员熟知的参考文献中。其中一个代表文献是 March 1994，Advanced Organic Chemistry，Reactions，Mechanism and Structure，N.Y，McGraw Hill.

与本发明有关的实施例描述如下。在大多数情况下，这些实施例中化合物的合成方法大同小异，未给出具体合成步骤的化合物实施例，熟知有机合成领域的技术人员应能合理推测合成方法。实施例旨在说明本发明，而不是限定或约束被发明的范围。在一些实施例中，表征一化合物的质谱分析结果可能有多于一个值，这是由于分子中原子的同位素分布造成的，如含有溴代或氯代基的化合物。

实施例1

本实施例合成的蛋白激酶抑制剂的化学结构式如下：

[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基][2，6-二氟-3-(嘧啶碱-2-基氨基)苯基]甲酮

(5-(4-chlorophenyl)-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridin-3-yl)(2，6-difluoro-3-(pyrimidin-2-ylamino)phe nyl)methanone

本实施例蛋白激酶抑制剂的合成过程示意如下：

具体合成步骤为：

1)、将18.7克(1)溶解在200毫升二氧六环中，加入9.6克叔丁醇钠，室温搅拌半小时，然后加入15.9克(2)及1克PdCl₂(dppf)并在氮气保护下回流8小时，冷却，旋干后柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2∶1)，得到15.11克产物，收率57％。

2)将5.3克(3)溶于50毫升乙醇后，加入40毫升质量分数为15％的氢氧化钠溶液，回流2小时，冷却，旋蒸去除大部分溶剂，冷却后用质量分数为5％的盐酸调节旋蒸剩余溶液的pH值至2。然后过滤、水洗、真空干燥，得到米黄色固体4.77克，收率95％。

3)将2.51克(4)溶解在50毫升二氯甲烷中，加入10毫升草酰氯，滴入5滴DMF，室温下搅拌24小时，旋干后得到油状物直接用于下一步。

4)将步骤3)得到的油状物溶于50毫升二氯乙烷，加入2.28克(6)以及2.26克三氯化铝，回流反应24小时，冷却，倒入100毫升稀盐酸中，再用二氯甲烷100毫升提取三次，合并有机相，再经水洗、饱和食盐水洗和无水硫酸钠干燥，再过滤、旋干、柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1∶2)得到本实施例化合物(a)1.06克，收率23％。

下述实施例2到实施例57的制备过程是应用与例1相似的合成步骤完成的，本领域技术人员应能够知道通过改变起始原料和反应条件合成出下列化合物。

实施例2

本实施例合成的蛋白激酶抑制剂的化学结构式如下：

[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-基][2，6-二氟-3-(噻唑-2-基氨基)苯基]甲酮

(5-(4-chlorophenyl)-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridin-3-yl)(2，6-difluoro-3-(thiaz ol-2-ylamino)phenyl)methanone

实施例3

N-3-[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯[2，3-b]吡啶-3-基)氘代(羰基)甲基]-2，4-二氟苯基]-丙-1-磺酸氨

N-3-((5-(4-chlorophenyl)-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridin-3-yl)deutero(hydroxy)methyl)-2，4-difluorophenyl)propane-1-sulfonamide

实施例4

N-3-[5-(4-氯-2，3，5，6-四氘代苯基)-1H-吡咯[2，3-b]吡啶-3-酰基]-2，4-二氟苯基]-丙-1-磺酸氨

N-(3-(5-(4-chloro-2，3，5，6-tetradeuterophenyl)-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridine-3-carbonyl)-2，4-difluorophenyl)propane-1-sulfonamide

实施例5

N-{3-[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-3-酰基]-2，4-二氟-苯基}-P-丙基酰胺基磷酸

N-(3-(5-(4-chlorophenyl)-1H-pyrrolo[2，3-b]pyridine-3-carbonyl)-2，4-difl uorophenyl)-P-propylphosphonamidic acid

实施例6～57

实施例58

本实施例提供了上述实施例1至实施例57所合成化合物的质谱数据，见表1。

表1实施例1～实施例57所合成化合物的质谱数据表

实施例59

本实施例对上述实施例1～57中所合成化合物的抗癌细胞活性进行了测定，具体测定方法和结果如下：

上述化合物抑制癌细胞的效果是根据该化合物在不同浓度下对细胞存活能力的影响来鉴别的。细胞在培养液中孵化24小时，加入样品后继续孵化72小时，在72小时后，分离剩余样品及培养液，细胞在37摄氏度CellTiter-Blue(从Promega，WI，USA购买)试剂和培养液中继续孵化1到4小时。然后使用 Beckman-Coulter DTX-880微板读数器测量535/590nM的荧光值。

IC50(和空白对照相比，抑制50％细胞生长所须浓度)由下述方法计算：

％细胞生长＝(F测量值/F空白对照)×100

其中F测量值是样品的荧光值，F空白对照是空白对照(培养液)的荧光值.

剂量反应图和IC50值由Prism4软件计算得出.

表2列出了所述化合物在细胞株A375中的IC50值。其中，IC50＞10M的定义为A；10M＞IC50＞1M的定义为B；1M＞IC50＞500nM的定义为C；500nM＞IC50的定义为D。

(说明：IC50值越小，则化合物抑制癌细胞的效果就越好、越明显。)

表2、实施例1～57所合成的化合物在细胞株A375中的活性

以上对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims

1.一种蛋白激酶抑制剂，其特征在于：所述蛋白激酶抑制剂为如下通式I的化合物或其药学可接受的盐、药学可接受的前药形式以及药学可接受的异构体；

其中：

A选自-C(O)-、-C(S)-或-CR₆R7-；R6与R7各自独立选自H、D、卤素、-OH、-NH₂、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-SR’、-NHR’或-NR’2；其中，R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

R1、R3和R4各自独立选自：H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基或-OR’；其中，R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

R₂选自H、-C(O)R₈、-C(O)OR₈、-C(O)NR₈、-S(O₂)R₈、-S(O₂)NR₈、-P(O)(OR”)R₈、芳基或杂环；其中，R8和R”各自独立选自：H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；芳基或杂环可以被以下基团单取代或多取代：H、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-OH、-CN、-COOR’、-OC(O)R’、-NHR’、-N(R’)₂、-NHC(O)R’或-C(O)NHR’；其中，R’选自H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基；

R₅选自H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、芳基或杂环；其中，芳基或杂环可以被以下基团单取代或多取代：H、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-OH、-CN、-COOR’、-OC(O)R’、-NHR’、-N(R’)₂、-NHC(O)R’或-C(O)NHR’；其中，R’选自H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

2.根据权利要求1所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：A为羰基或氘代(羟基)亚甲基。

3.根据权利要求1所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：R₂为嘧啶碱基或-P(O)(OR”)R₈，且R₈和R”各自独立选自：H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

4.根据权利要求1所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：所述蛋白激酶抑制剂为如下通式II的化合物或其药学可接受的盐、药学可接受的前药形式以及药学可接受的异构体；

Q₁、Q₂、Q₃和Q₄各自独立选自H、D、卤素、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基、被任选取代的环烷基、-OR’、-NHR’或-NR’₂；R’选自被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

5.根据权利要求4所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：A为羰基或氘代(羟基)亚甲基。

6.根据权利要求4所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：R₂为嘧啶碱基或-P(O)(OR”)R₈，且R₈和R”各自独立选自：H、被任选取代的低级烷基、被任选取代的低级烯基、被任选取代的炔基或被任选取代的环烷基。

7.根据权利要求4所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：Q是C-Cl。

8.根据权利要求4所述的蛋白激酶抑制剂，其特征在于：Q₁、Q₂、Q₃和Q₄为D。

9.权利要求1～8中任一项所述的蛋白激酶抑制剂作为制备治疗由以下蛋白激酶引起的疾病药物的应用，这些蛋白激酶包括：Ab1、Akt1、Akt2、Akt3、ALK、Alk5、A-Raf、B-Raf、Brk、Btk、Cdk2、CDK4、CDK5、CDK6、CHK1、C-Raf-1、Csk、EGFR、EphA1、EphA2、EphB2、EphB4、Erk2、Fak、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、Flt1、Flt3、Flt4、Fms、Frk、Fyn、Gsk3.alpha.、Gsk3.beta.、HCK、Her2/Erbb2、Her4/Erbb4、IGF1R、IKK.beta、Irak4、Itk、Jak1、Jak2、Jak3、Jnk1、Jnk2、Jnk3、Kdr、Kit、LCK、MAP2K1、MAP2K2、MAP4K4、MAPKAPK2、Met、Mnk1、MLK1、p38、PDGFRA、PDGFRB、PDPK1、Pim1、Pim2、Pim3、PKC.alpha、PKC.beta、PKC.theta、Plk1、Pyk2、Ret、ROCK1、ROCK2、Ron、Src、Stk6、Syk、TEC、Tie2、TrkA、TrkB、Yes和/或Zap70，以及它们的变异体。

10.权利要求1～8中任一项所述的蛋白激酶抑制剂作为制备治疗细胞过度繁增疾病的药物的应用。