TW201105322A - New 2-mercaptocyclopentanecarboxylic acid compounds, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them - Google Patents

Description

201105322 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎之2-巯環戊烷羧酸化合物、係關於其 製備方法且係關於包含彼等之醫藥組合物。 本發明化合物係TAFIa抑制劑（活化凝血酶可活化纖維蛋 白溶解抑制劑）。 【先前技術】 TAFI(亦稱為血漿羧肽酶原B、羧肽酶原R或羧肽酶原U) 係由肝臟產生之60 kDa血漿糖蛋白，其以酶原形式循環。 在血液凝固及纖維蛋白溶解期間，凝血酶及纖溶酶在 Arg92-Ala93鍵處解離TAFI前片段以使其轉化為活性酶 TAFIa，在37°C下TAFIa半衰期為8至15分鐘。血栓調節蛋 白（存於血漿中及血·管内皮細胞表面上之輔因子）可加速凝 血酶解離前片段（Bouma BN &MeijersJC,772rom6z_T?-activatable fibrinolysis inhibitor, 2003, Journal of Thrombosis and Haemostasis, 1: 1566-1574)。TAFIa藉由解離纖維蛋白 纖維之C-端離胺酸殘基來負向調節纖維蛋白溶解，該等殘 基在纖維蛋白經最初痕量纖溶酶部分降解時出現。部分降 解纖維蛋白上之此等C-端離胺酸殘基可充當循環血漿纖維 蛋白溶酶原及在血栓形成性缺血情形下由内皮細胞產生之 組織纖維蛋白溶酶原激活物（tPA)的配體。因此，其能夠 在無循環纖溶酶抑制劑cx2-抗纖溶酶或組織纖維蛋白溶酶 原激活物之循環抑制劑（PAI-1)干預之情況下藉由tPA使纖 維蛋白溶酶局部轉化為纖溶酶。因此，TAFIa解離C-端離 148958.doc 201105322 胺酸位點致使產生纖溶酶之速率降低。進而抑制内源性纖 維蛋白溶解並降低纖維蛋白性動脈及靜脈血栓形成之溶解 以及在血栓形成後急性局部缺血期患者中發生之治療性溶 栓。因此，TAFIa抑制劑具有增加内源性及治療性纖維蛋 白/谷解電位及充當抗灰栓形成劑及前纖維蛋白溶解劑之潛 力’因其在止血期間不干預血小板活化以及凝固而無重大 出血性風險。 因此，抑制TAFIa之性質使得人們能夠考慮在有風險患 者之血栓形成事件之治療及預防中使用本發明化合物。其 使用將在與動脈粥樣化血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、 糖尿病、高血脂症、高血壓、慢性靜脈疾病、與肥胖症相 關之代謝症候群、及癌症相關之血管併發症（尤其心血 管、肺部及腦血管併發症）的治療、預防及二級預防中具 有4貝值本發明化合物尤其可用於心肌梗塞、心絞痛、腦 血笞μ外、主動脈瘤、下肢動脈炎、靜脈血栓形成及肺栓 塞之治療、預防及二級預防。 血苢風險因素及血管疾病（例如高血壓、肥胖症、糖尿 病^臟病、腦血管疾病及高血脂症及由該等疾病引發之 動脈粥樣硬化）可影響諸如阿爾茨海默病（Alzheimer，s disease)及企官性癡呆等癡呆症之發生（Qiu c、De 反 FratigUoni L , The epidemi〇l〇gy 〇f the ⑽ p aie，2007，Current Opinion in Psychiatry, 20: 380-385)。 因此本發明化合物將亦可用於治療及/或預防諸如阿爾 次海默病及血管性癡呆等癡呆症。 148958.doc 201105322 TAFIa會使内源性纖維蛋白溶解電位降低。作為丁卿 抑制劑’本發明化合物因此可用作使用用於緊急情況(例 如’心肌梗塞、腦血管意外）之可注射纖維蛋白溶解劑（例 如重組tPA(例如，阿替普酶（aheplase)、替奈普酶 (tenectepUse)、瑞替普酶（reteplase))、重組 upA 或鏈激酶） 之急性治療的輔助劑。 【發明内容】 本發明化合物可增強彼等可注射纖維蛋白溶解劑之活性 且因此使得其在使用時具有較小的出血性及神經毒性風險 (其劑量降低且因此其副作用減少）。 更特定而言’本發明係關於式⑴化合物：

其中：

Ri代表氫原子或式COR4之基團，其中r4代表直鏈或具 支鍵Ci-C6烧基或芳基， 或Ri代表式（A)之基團：

R2代表式NRSR6之基團’其中尺5與尺6相同或不同，其各 自代表氫原子或直鏈或具支鏈匸广匕烷基，或&代表含氮 148958.doc 201105322 雜環基團、芳基或雜芳基， R3代表氫原子或直鏈或具支鏈Ci_C6烷基， m代表介於1與6間之整數，包括丨及6， η代表0、1或2， . 係關於其光學異構體，且亦係關於其與醫藥上可接受之 酸之加成鹽。 【實施方式】 芳基應理解為視情況經一或多個相同或不同的選自鹵 素、直鏈或具支鏈（Cl_C6)烷基、直鏈或具支鏈（Ci_C6)烷氧 基、胺基（視情況經1個或2個直鏈或具支鏈（Ci_C6)烷基取 代）及胺基烧基（胺基視情況經1個或2個直鏈或具支鏈（C1 _ CO院基取代）之基團取代之苯基。 雜芳基應理解為含有1個、2個或3個選自氧、氮及硫之 雜原子之5-至12-員單環或二環芳香族基團，應理解，雜芳 基可視情況經一或多個相同或不同的選自鹵素、直鏈或具 支鏈（CrC6)烷基、直鏈或具支鏈（Cl_c6)烷氧基、胺基（視 情況經1個或2個直鏈或具支鏈（CrCd烷基取代）及胺基烷 基（胺基視情況經1個或2個直鏈或具支鏈（Ci-CJ烷基取代） 之基團取代。 ' 在未暗示任何限制之情況下，在雜芳基中可提及之基團 為噻吩基、吡啶基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噁唑基' 異噁唑基、噻唑基 '異噻唑基、嘧啶基、吡嗪基、嗒嗪 基。 含氮雜環基團應理解為含有一或多個氮原子及視情況一 S. 148958.doc 201105322 ==自氧及硫之其他雜原子的4·至7-員飽和或不飽和 之任何限制之情況下，在含氮雜環基團中可提及 基了1^雜環丁基、対咬基、六氫⑽基及六氫吼嗓 光學異構體應理解為非對映異構體 式⑴化合物含有至少兩 m lL _ 个辑千〜（在環1位及2位）且 對映H單個對映異構體、單個非對映異構體形式或以非 對映異構體混合物形式存在。 在未暗示任何限制之情況下，在醫藥上可接受之酸中可 ^及者為鹽酸、氫漠酸、硫酸、彻、乙酸、三氟乙酸、 札酸、丙，酸、丙二酸、琥轴酸、戊二酸、富馬酸、酒石 酸、馬來酸'檸檬酸、抗壞血酸、草酸、甲續酸、苯續 酸、樟腦酸。 物 本發明之—個態樣係關於其中〜代表氫原子之式⑴化合 胺基之式（I)化合 本發明之另一態樣係關於其中&代表 物 物 本發明之另—態樣係關於其W代表Μ基之式⑴化合 〇 本發明之另—態樣係關於其中&代表氫原子之式⑴化合 物 〇 本發明之另-態樣係關於其中爪代表3之式⑴化合物。 本發明之另一態樣係關於其中η代表i之式⑴化合物。 148958.doc 201105322 本發明之另一態樣係關於式（la)化合物（式⑴化合物之特 例）：

其中η、Ri、r3、尺5及尺6係如式（I)中所定義。 本發明之另一態樣係關於以下式（I)化合物： -(1及，25)-1-(3-胺基丙基）-2-巯環戊烷甲酸、以及其光 學異構體及其與醫藥上可接受之酸之加成鹽， -‘（1尺乙醯基硫基-1-(3-胺基丙基）-環戊烷甲酸、 以及其光學異構體及其與醫藥上可接受之酸之加成 5^ 〇 本發明亦係關於製備式（I)化合物之方法，其自式（II)化 合物開始：

其中η代表0、1或2，且G代表羧基官能基之保護基團， 使式（II)化合物與式（ΙΗ)化合物反應： X~(CH2)m-R'2 (ΙΠ)， 其中X代表鹵素原子或三氟甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或甲 磺酸酯基團， 148958.doc 201105322 m代表介於丨與6間之整數，包括1及6， 且R’2代表式NR，#'6之基團，其中與可相同或不 同’其各自代表胺基官能基之保護基團或直鏈或具支鏈 Cj-C6烧基，或R’2代表視情況經胺基官能基之保護基團取 代之含氮雜環基團，或R，2代表芳基或雜芳基， 產生式（IV)化合物：

其中R'2、G、m及η係如上文所定義， 用還原劑還原式（IV)化合物之側氧基官能基， 產生式（V)化合物：

其中R'2、G、m及η係如上文所定義， 使式（V)化合物與甲磺醯氣、曱苯磺醯氯、三氟甲磺酸 酐或鹵化試劑反應，產生式（VI)化合物：

RV(cH2),. CO.G 、 (VI), 其中R'2、G、m及η係如上文所定義，且X代表甲磺酸 酯、曱苯續酸酯或三氟甲績酸酯基團或鹵素原子， 當期望獲得呈單個非對映異構體形式之式（I)化合物時， 148958.doc •10· 201105322 對式（νι)化合物之非對映異構體實施分離， 且然後使式（VI)化合物與式（VII)化合物反應： MS-(CO)-R', (VII)， 其中Μ代表鉀、鈉或鐘，且R'i代表炫基或芳基， 產生式（VIII)化合物：

其中R'!、R'2、G、m及η係如上文所定義， 當期望獲得呈單個對映異構體形式之式（I)化合物時，藉 由對掌性層析來分離式（VIII)化合物之對映異構體， 在適當情況下’使式（VIII)化合物之硫醇、胺基及缓基 官能基去保護，產生式（I)化合物， 當期望獲得式（I)化合物與醫藥上可接受之酸之加成鹽 時’使式（I)化合物與相應酸反應。 本發明亦係關於製備式（la)化合物（其中m代表3且尺2代表 NRjR6之式（I)化合物之特例）之方法， 其自式（II)化合物開始：

其中η代表0、1或2’且G代表羧基官能基之保護基團， 使式（II)化合物與丙烯醛 在不對稱觸媒（例如觸媒Q或QD，視期望獲得（1R)或（1S) 148958.doc 201105322 構型化合物而定）存在下反應，

產生（1R)或（1S)構型之式（IX)化合物：

(IX), 其中η及G係如上文所定義， 將式（IX)化合物之醛官能基還原，產生式（X)彳匕合物： ΟΗ

其中η及G係如上文所定義， 使式（X)化合物與曱磺醯氣、曱苯磺醯氯、三氟曱磺酸 酐或鹵化試劑反應，產生式（XI)化合物： 148958.doc -12- x 201105322

其中η及G係如上文所定義，且X代表画素原子或三氟曱 石黃酸S旨、甲苯績酸醋或曱磧酸自旨基團， 借助還原劑還原式（XI)化合物之酮官能基，產生式（XII) 化合物：

X

其中η、G及X係如上文所定義， 使式（XII)化合物與式（XIII)化合物反應： NHR"5R"6 (XIII)， 其中R"5及R”6各自代表胺基官能基之保護基團或直鏈或 具支鏈烷基， 產生式（XIV)化合物： 148958.doc

S. 201105322 其中η、G、R”5及R"6係如上文所定義， 使式（XIV)化合物與甲磺醯氯、曱笨磺醯氯、三氟曱磺 酸酐或鹵化試劑反應，產生式（XV)化合物：

其中η、G、R”5及R”6係如上文所定義，且X代表甲磺酸 酯、甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯基團或鹵素原子， 且然後使式（XV)化合物與式（VII)化合物反應： MS-(CO)-R'! (VII)， 其中Μ代表鉀、鈉或鋰，且R、代表烷基或芳基， 產生式（XVI)化合物：

(XVI)， 其中η、R、、G、R”5及R”6係如上文所定義， 在適當情況下，使式（XVI)化合物之硫醇、胺基及羧基 官能基去保護，產生式（la)化合物： 148958.doc -14- 201105322

其中η、R!、R3、115及R6係如上文所定義， 當期望獲得式（la)化合物與醫藥上可接受之酸之加成鹽 時’使式（la)化合物與相應酸反應。 光學純式（la)化合物係藉由使用對掌性還原劑對式 之酮實施不對稱還原或在稍後階段將其從非對映異構體混 合物中分離出來而獲得。 本發明化合物係TAFIa抑制劑。 因此，其可用於預防或治療有風險之患者之血栓形成事 件。其使用將在與動脈粥樣化血栓形成性疾，病、動脈粥樣 硬化、糖尿病、高企脂《、高血壓、慢性靜脈疾病、與肥 胖症相關之代謝症候群、或癌症相關之血管併發症（更具 體而言心血管、肺部及腦血管併發症）的治療及預防甲具 有價值。 本發明化合物尤其可用於心肌梗塞、心絞痛、任一起因 之腦血管意外（尤其動脈粥樣化血栓形成性、心因性或由 :房顫動引起之腦血管意外）、下肢主動脈瘤或動脈炎、 评脈血栓形成（尤其在插入導管的癌症患者中）及肺检塞之 治療、預防及二級預防。 血e風險因素及血官疾病(例如高血壓、肥胖症、糖尿 g. 148958.doc *15- 201105322 病、心臟病、腦血管疾病及高金脂症及由該等疾病引發之 動脈粥樣硬化）可影響諸如阿爾茨海默病及血管性癡呆等 癡呆症之發生（Qiu C·、De Ronchi D•及Fratigli〇ni l.，77ze epidemiology 〇f the dementias: an update, 2007, Current Opinion in Psychiatry，20: 380-385)。因此，本發明化合物 將亦可用於治療及/或預防諸如阿爾茨海默病及血管性癡 呆等癌呆症。 TAFIa會使内源性纖維蛋白溶解電位降低。作為TAFia 抑制劑，本發明化合物因此可用作使用用於緊急情況（例 如，心肌梗塞、腦血管意外）之可注射纖維蛋白溶解劑（例 如重組tPA(例如，阿替普酶、替奈普酶、瑞替普酶广重 組uPA或鏈激酶）之急性治療的輔助劑。 本發明化合物可增強彼等可注射纖維蛋白溶解劑之活性 且因此使得其在使科具有較小的出錄及神經毒性風險 (其劑量降低且因此其副作用減少）。 本發明亦係關於醫藥組合物，其包含式⑴化合物與一或 多種惰性、無毒、醫藥上可接受之賦形劑或載劑之組合。 在本發明醫藥組合物中 可提及者更具體而言係彼等適 用於經口、非經腸（靜脈内 '肌内或皮下）、經皮或透皮、 經鼻、經直腸、經舌、經眼或經呼吸投與者，且尤其鍵劑 或糖衣藥丸、舌下錄南丨、顿泰 、膠囊、硬明膠膠囊、栓劑、乳 膏、軟膏、皮膚用凝膠、可妳M 、π紅ω & 了主射或可飲用製劑、氣溶膠、 滴眼劑及滴鼻劑。 除式（I)化合物外， 本發明醫藥組合物亦包含一或多種賦 148958.doc -16- 201105322 形蜊或載劑，例如稀釋劑 收知彳、著色劑、甜味劑。 潤滑劑 黏結劑、崩解劑、吸 ♦ 為賦形劑或載劑之實例，可提及者為： ^切㈣.·乳糖、葡萄m甘 纖維素、甘油， 知 二氧化梦、滑石粉、硬脂酸及其及 胃'聚乙二醇， 作相、#漱.._酸紹、♦酸錤、殿粉、明膠、黃箸膠、 ♦甲基=維素、緩甲基纖維素鈉及聚乙晞基料咬i 作4费摩:瓊脂、海藻酸及其鈉鹽、泡騰合劑。 醫藥組合物中式⑴活性成份之百分此較佳為5重量％至 50重量。/〇。 可用劑量視患者年齡及體重、投與途徑、病症性質及嚴 重程度及任何相關治療之施用而有所變化且每天在0.5 mg 至1000 mg範圍内投與一或多次。 根據本發明之一個態樣，本發明醫藥組合物不含除式⑴ 化合物外的任一活性成份。 根據本發明之另一態樣，除式（I)化合物外，本發明醫藥 組合物亦包含纖維蛋白溶解劑、更具體而言可注射纖維蛋 白溶解劑，例如重組tpA(例如，阿替普酶）、重組uPA或鏈 激酶。在此情形下’組合物係呈可注射形式。 tPA劑量可在介於0 „^與1〇〇 mg間之範圍内變化。 根據本發明之另一態樣，除式⑴化合物外，本發明醫藥 組合物還包含抗凝血劑，例如，華法林（warfarin)、達比加 148958.doc -17- 201105322 群（dabigatran etexilate)、利伐沙班（rivaroxaban)。 華法林劑量可在介於1 mg與100 mg間之範圍内變化。 根據本發明之另一態樣，除式（I)化合物外，本發明醫藥 組合物還包含抗血小板劑，例如，阿司匹林（aSpirin)、氣 σ比格雷（clopidogrel)、普拉格雷（prasugrel)____ 阿司匹林劑量可在介於1 〇 mg與1 〇〇〇 mg間之範圍内變 化。 氣。比格雷劑量可在介於1 〇 mg與1 000 mg間之範圍内變 化。 下列實例對本發明加以闡釋。根據習用分光光度測定技 術（紅外、核磁共振、質譜）確定實例中所闡述化合物之結 構。 縮寫 (+)-DIPCl : (+)-二異松蒎基氣硼烷（(+)_二異松蒎基氣化硼） DMAP :二甲基胺基吼。定 DMF :二甲基甲醯胺 DMSO :二曱亞硬 eq.:莫耳當量 HMPA :六曱基磷醯胺 HPLC ·南效液相層析 NMR .核磁共振 T AFIa .〉舌化凝血酶可活， 啊』右化纖維蛋白溶解抑制劑 THF :四氫呋喃 tPA :組織纖維蛋白溶酶原激活物 148958.doc 201105322 uPa :尿激酶或尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活物 實例1: (1R，2S)-l-(3-胺基丙基广2•疏環戊烧甲酸三氣乙 酸鹽 步驟A : 2-側氧基-環戊烷甲酸节基醋 在安裝有Dean-Stark儀器及冷凝器之4升燒瓶中，將孓側 氧基-環戊烷甲酸甲基酯（380 mL; 3 m〇1)、苄醇（342 mL; 3.3 mol; 1.1 當量）及 DMAP(18.3 g; 〇 15 m〇i; 〇 〇5 當量）溶於 1 800 mL環己烷中。將反應混合物在回流下攪拌48小時（混 合物溫度：90。(：）並蒸餾掉所形成甲醇。冷卻後，濃縮反 應混合物並將其吸收於1500 mL二氣甲烷中。將有機相用i N鹽酸' 用水且然後用飽和氯化鈉溶液洗滌。然後將其乾 燥，過濾且然後蒸發。 藉由在減壓下（128°C -13〇t： /4xl(T2毫巴）分餾來純化由此 所獲得之油狀物，產生預期產物。 步驟B : 1-(4-第三丁氧基-4-側氧基丁基）-2-側氧基-環戍 烧甲酸节基酯 在周圍溫度下’將於上一步驟中所獲得之2-側氧基-環 戊炫甲酸苄基酯（1 g; 5.43 mmol)於5 mL無水丙酮中之溶液 倒入無水碳酸鉀（3 g; 21.7 mmol; 4當量）於10 mL無水丙酮 • 中之懸浮液中，同時劇烈攪拌。繼續將反應混合物劇烈攪 拌1小時且然後^快速倒入溶於2 mL丙酮中之4-溴丁酸第三 丁基醋（2.04 g; 9.16 mmol; 2當量）。將反應混合物在回流 下加熱過夜。冷卻後，將反應混合物過濾且然後吸收於20 mL二氯曱烷中。將有機相洗滌，乾燥，過濾且然後蒸發。 148958.doc -19- 201105322 粗製產物藉由在矽膠上使用庚烷/乙酸乙酯（95/5)混合物 作為洗脫液急驟層析純化。 步驟C : 4-{1-[(苄基氧基）羰基]側氧基環戊基} 丁酸 在周圍溫度’將14〇 mL三氟乙酸經20分鐘倒入上一步驟 中所獲得之第三丁基酯（200 g; 0.545 mol)於700 mL無水二 氯曱烧中之溶液中。反應混合物在周圍溫度攪拌過夜。 注意：若攪拌過夜後有任何起始材料剩餘，則再添加 100/〇三氟乙酸，並繼續授拌3小時。 將反應混合物蒸發，並吸收於甲苯（3x5〇〇 ml)中以去除 最大里的二氣乙酸。在幫浦真空下乾燥後’將所獲得之粗 製油吸收於碳酸氫鈉溶液（84 g/l L ; 2當量）中。然後鹼性 水相用醚（3x300 mL)洗，然後用4 N鹽酸溶液再酸化。用 乙酸乙酯（3 X300 mL)萃取酸性水相。將合併的有機相洗 滌，乾燥並蒸發。產物未經純化即用於下一步驟。 步驟D :卜（3-{[(苄基氧基）羰基]胺基}丙基）_2_側氧基環 戊烷甲酸苄基酯 在周圍溫度，向上一步驟之酸（123·7 g; 〇 4〇6瓜❶^於丄L 無水甲苯中之溶液中經5分鐘逐滴添加三乙胺（84 5 mL; 0.610 mol; 1.5 當量）、苄醇（75.6 mL; 0.731 mol; 1.8 當 量），及然後疊氮化填酸二苯酯（96.3 mL; 0.447 mol; 1 1當 〃量）。反應混合物在回流授拌過夜。 冷卻後’將反應混合物蒸發’並吸收於1 L乙酸乙醋 中。乙酸乙酯相用1 N鹽酸溶液（3x2〇〇 mL)、水、飽和碳 酸氫鈉溶液及然後飽和氯化鈉溶液洗。將有機相乾燥，過 148958.doc -20- 201105322 遽’然後蒸發。 粗製產物在50。(：至7(TC在4xl0·2毫巴下蒸餾移除雜質（主 要係苄醇）純化。 步轉E : [(苄基氧基）羰基]胺基}丙基）_2_羥基環戍 烧甲酸苄基醋 在-10°C下，將硼氫化鈉（11.4 g; 0.301 mol; 1.25當量）分 十份添加至來自上一步驟之酮基酯（98 g; 〇 239爪〇1)於6〇〇 mL·無水曱醇中之溶液中。使反應混合物在_1(rc下保持1小 日可且然後使其上升恢復至周圍溫度並在該溫度下檀拌2小 時。在蒸發掉甲醇後，將反應混合物吸收於1 L乙酸乙@旨 中。將有機相用1 〇〇/〇氣化銨溶液、水且然後飽和氯化鈉溶 液洗務。將有機相乾燥，過濾且然後蒸發。 步琢F : ΐ-(3·{[(苄基氧基）羰基]胺基}丙基）_2_[(甲基橫醯 基）氧基]環戊烧甲酸苄基酯（外消旋反式非對映異 構體) 在周圍溫度下’將三乙胺（49.53 mL; 0.357 mol; 1.5當 量）添加至於上一步驟中所獲得之醇（98 g; 〇 238 m〇1)於95〇 mL無水四氫呋喃中之溶液中。將反應混合物冷卻至_3〇艽 且然後逐滴倒入溶於12〇 mL無水四氫η夫读中之曱續酿氯 (27·61 mL; 0.357 mol; 1.5當量）。使混合物上升恢復至周 圍溫度並於該溫度下攪拌2小時。在蒸發掉四氫呋喃後， 將反應混合物吸收於丨L乙酸乙酯中。將有機相洗滌，乾 燥，過濾且然後蒸發。 藉由使用庚烷/乙酸乙酯（7/3至6/4)梯度作為洗脫液在矽 148958.doc -21 - 201105322 膠（5 kg)上實施急驟層析來純化粗製產物。 按洗脫順序反式非對映異構體係第一個。 步驟G : 2-(乙醯基硫基）-1-(3-{[(苄基氧基）羰基]胺基}丙 基）環戊烷曱酸苄基酯（外消旋順式非對映異構體) 硫代乙酸鉀之製備：極具吸濕性-並非無水-臨時製備並使 用。 將40 g硫代乙酸鉀於350 mL無水乙腈中之懸浮液在回流 下加熱30分鐘並過濾，然後再次重複該操作。 向來自上一步驟之（外消旋反式）曱磺酸酯（25 g; 0.051 mol)於800 ml無水乙腈中之溶液中添加預先洗條之硫代乙 酸鉀（未經抽吸過濾時為45 g-理論為：29·2 g; 0.255 mol; 5 當量）及18C6冠醚（13_5 g; 0.051 mol; 1當量），且然後將反 應混合物在回流下加熱20小時。冷卻後，將反應混合物過 濾且然後蒸發掉溶劑。 藉由使用庚烷/乙酸乙酯（8/2至5/5)梯度作為洗脫液在矽 膠（2 kg)上實施急驟層析來純化粗製產物。 注意：此第一管柱達成預純化及未反應起始材料之回 收。 藉由使用二氯甲烷/乙酸乙酯（99/1至95/5)梯度作為洗脫 液在矽膠（200 g)上實施急驟層析來純化含有預期產物（6.5 g)之部分。 步驟Η ·· (1R，2S)-2-(乙醯基硫基）-1-(3-{[(苄基氧基）羰基] 胺基}丙基）環戊烷甲酸苄基醋 藉由製備型對掌性層析在CHIRALPAK AD-H 5 μιη管柱 148958.doc -22- 201105322 上使用COVEtOH (80/20)混合物作為流動相來分離於上一 步驟中所獲得之外消旋順式化合物之對映異構體。 檢測波長為230 nm。 • 按洗脫順序"足2S)對映異構體=岸铁異構禮2係第二 個。 步驟1 : (1R，2S)-l-(3-{[(苄基氧基）羰基]胺基}丙基）_2_m 環戊烷曱酸苄基醋 在10°C下，向於上一步驟中所獲得之化合物（8 16 g; 〇·0174 mol)於150 mL無水脫氣二噁烷中之溶液中逐滴添加 1N氫氧化納溶液（35 mL; 0.0348 mol; 2當量）。將混合物在 60 C下加熱30分鐘。冷卻後，藉由添加3 5 mL 1 N鹽酸中 和反應混合物且然後凍乾。 步驟J : (1R，2S)-l-(3-胺基丙基）-2-疏環戊炫甲酸三氟乙 酸鹽 將600 mL氨壓縮於2升反應器中並在-78°C下分十份添加 鈉（10 g; 0.435 mol; 25當量）。使反應混合物在-78°C下保 持45分鐘。然後經30分鐘向其中逐滴添加於上一步驟中所 獲得之化合物於經預先脫氣之四氫呋喃/曱醇（140 rxiL/12 mL)混合物中之溶液。在_78°C下保持攪拌1小時，並使混 ' 合物上升恢復至周圍溫度並於該溫度下攪拌。在去除氨 後，將氣化銨溶液（23.3 g，存於U0 mL水中）經30分鐘添 加至反應混合物中，蒸發掉四氫呋喃且然後用6 Μ鹽酸溶 液（15 mL)實施酸化。實施過濾且然後凍乾。 藉由製備型HPLC在Kromasil管柱上使用水/乙腈/三氟乙 148958.doc •23- 201105322 酸梯度作為流動相（以100/0/0 1進行1〇分鐘，然後以 100/0/0.1至70/30/0.1進行20分鐘，隨後以70/30/0.1進行等 梯度操作）使粗製產物脫鹽。 將含有預期產物以及相應二聚體（二硫化物橋）之部分凍 乾。 向以上來乾物（4.3 g)於1〇〇 mL乙酸中之溶液中添加4 5 g 鋅（10當量）且然後將反應混合物在6(rc下邊劇烈攪拌邊加 熱直至二聚體消失（約6小時）。冷卻後，將反應混合物過濾 並用400 mL水稀釋據液且然後;東乾。 藉由製備型 HPLC 在 Kromasil 管柱（1 kg-600 mmx60 mm· 70 ml/min)上使用水/乙腈/三氟乙酸（85/1 5/〇」）混合物作為 流動相來純化粗製產物。 將含有預期產物之部分凍乾。 旋 ：溶劑：曱醇 ’ C=1，T=21°C，L = 589 nm， [a]D=+32.46。β CAD/MS/MS 譜[Μ+Η]+=204·1 ’ 與預期結構一致。 實例2. 25)-2-乙酿基硫基^气^胺基丙基）環戊烷甲 酸鹽酸鹽 在周圍溫度下’向實例1步驟Η之化合物（2.40 g ; 4 72毫 莫耳）於20 mL無水二氣甲烷中之溶液中逐滴添加4 μ HC1/ 一噁烧溶液（3 5.5 mL，141 · 6毫莫耳；3 0當量）。將反應混 合物保持在周圍溫度，同時攪拌，直至兩個官能基已去保 護（由LC/MS檢驗-大致持續時間：過夜）且然後蒸發掉溶 劑。在BIOGEL P2官柱上使用水/乙腈u N鹽酸（1〇〇〇/1〇〇〇/2) 148958.doc .24· 201105322 吨合物作為流動相來純化所獲得產物。將含有預期產物之 部分凍乾。 量分析 C Η Ν S Cl- 計算％ 46.88 7.15 4.97 11.38 12.58 貫驗％ ----- 46.82 7.2 5.23 10.828 13.13 實例3 · (1及，25)-1-(3-胺基丙基）-2-疏環戊烧甲酸鹽酸鹽 將實例2化合物（4.51 g ; 16毫莫耳）於148 mL 4 M HC1溶 液中之溶液在45°C下加熱過夜。冷卻後，用15〇 mL水稀釋 反應混合物且然後康乾。 藉由製備型 HPLC 在 Kromasil 管柱（1 kg-600 mmx60 mm- 70 ml/min)上使用水/乙腈（95/5)混合物作為流動相來純化 粗製產物。 將含有預期產物之部分凍乾。 凡京微重分析 C ~~Η^ ~~Ν~~ 計算％ 45.09 7.57 5.84 13.37 14.79 貫驗％ 44.57 7.68 5.74 12.88 16.69 CAD/MS/MS譜[Μ+ΗΓ=204.1，與預期結構一致。 實例3a : (1R，2S)-l-(3-胺基丙基）_2_疏環戊烷甲酸 步驟A ··己二酸二·第三丁基醋 在周圍皿度下，將己二驢氣（629 8 g ; 3·44莫耳）逐滴倒 入第三丁醇（3.27 1^34.4莫耳-1〇當量）及吡啶（80〇11^; 10.32莫耳-3當s)於3 L無水曱苯中之溶液中。將反應混合 物在70°C下加熱，同時攪拌，過夜。 冷部後’慮出°比咬鑌氯化物沉澱並用曱苯沖洗。將曱笨 148958.doc -25- 201105322 相用1 N鹽酸溶液（4 x 500 mL)、10%碳酸鈉溶液（j χ 500 mL)、水（1x500 mL)且然後用飽和氣化鈉溶液（iX5〇〇 mL) 洗滌。 有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且然後蒸發。 藉由在減壓下（100°C /2x 1 0·2 mmHg)分餾來純化所獲得之 粗製油狀物。 步驟B : 2-側氧基-環戊烷甲酸第三丁基醋 在周圍溫度下’將第三丁醇（5.66 mL ; 〇.〇6莫耳- 〇·〇5當 量）以及14 g己二酸二-第三丁基酯倒入NaH(l〇8.54 g 60% 物質；2.71莫耳-2.15當量）於1.1 L無水甲苯中之懸浮液 中。在回流下加熱反應混合物。在該溫度下，逐滴倒入己 二酸二-第三丁基酯（324.6 g ; 1.26莫耳）溶於50〇 mL無水曱 苯中之溶液，同時控制氣體逸出。 添加大致持續時間：3小時。 注思·在己二酸二-第三丁基醋添加過程中將觀察到反 應混合物實質上結塊，但此將向懸浮液發展。 完成添加後’使反應混合物在回流下保持5小時。 冷卻後，在0°C下使用10%乙酸溶液（1 L)將反應混合物 水解。分離出有機相，並用甲苯（300 ml)萃取水相。將合 併的曱苯相用水（2X300 ml)且然後用飽和氣化鈉溶液（3〇〇 m 1)洗蘇。 有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且然後蒸發。 藉由在減壓下（65-70°C /1x1 (Γ1 mmHg)分餾來純化橙色油 狀物。 148958.doc -26- 201105322 步驟C : (lS)-2-侧氧基-1-(3-侧氧基丙基）環戊烷甲酸第三 丁基醋 在-25°C及氬下並在缓慢攪拌下將丙烯醛（4.19 g; 74.83 毫莫耳-2.5當量）於1〇 mL無水二氯曱烷中之溶液經30分鐘 倒入2_側氧基-環戊烷甲酸第三丁基酯（5.51 g ; 29.93毫莫 耳）及觸媒Q(l.46 g; 2.99毫莫耳-0.1當量）於60 mL無水二 氣曱烷中之溶液中。

觸媒Q-合成闡述於Angew. Chem. Int. Ed.2005,44,105-108 中 在添加結束時，將反應混合物在該溫度下攪拌4小時且 然後在-5°C下過夜。 条發掉濾液’產生無色油狀物。 步琢D : —羥基丙基）_2_側氧基環戊烷甲酸第三丁 基酉旨 向來自上一步驟之酮基酯醛（6.5 g; 26.9毫莫耳）於80 mL無水四氫呋喃中之溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉 (6·84 g ; 32 3毫莫耳_12當量）。將反應混合物在回流下加 熱5小時30分鐘’同時攪拌。在恢復至周圍溫度後，蒸發 反應混合物。將殘餘物吸收於100 mL CH2C12中並用飽和 石厌酸氯納溶液（2x20 mL)洗滌《用CH2C12萃取鹼性水相。

148958.doc •27- 201105322 將合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鈉乾燥且 然後瘵發。藉由使用CHaCh/異丙醇（95/5)混合物作為洗脫 液在梦膠上實施急驟層析來純化粗製產物。 步驟E : (is)-l-(3-溴丙基）-2-侧氧基環戊烷甲酸第三丁基 酯 向來自上一步驟之醇（5.4 g ; 22·12毫莫耳）及三苯基膦 (6·7 g，25.44毫莫耳-1.15當量）於35 mL·無水二氣甲燒中之 溶液中逐份添加N-溴琥珀醯亞胺（4.53 g ; 25 44毫莫耳_ 1.15當量），同時將溫度保持在5它。在周圍溫度下攪拌 日f後，蒸發反應混合物。將殘餘物吸收於1 〇 〇 mL異丙基鱗 中並研磨以獲得三笨基氧化膦晶體。濾出固體並沖洗。濃 縮濾液，然後將其吸收於戊烷中且然後再次過濾。蒸發含 有戊烷之濾液。藉由使用庚烷/乙酸乙酯（8/2)混合物作為 洗脫液在梦勝上實施急驟層析來過濾粗製產物。 步驟F : (lS，2R)-l-(3-溴丙基)-2-羥基環戊烷甲酸第三丁基酯 在周圍溫度下，將市售於己烷（32〇 mL ; 〇 577 莫耳-1.5當量）中之1.8M溶液傾倒在於上一步驟過程中所獲 得之酮基酯（11 7_5 g ; 0.385莫耳）上，同時攪拌。將反應混 合物在55°C下攪拌，在周圍溫度下過夜。 向反應混合物中添加950 mL乙醚且然後在〇。〇下邊授掉 邊添加乙醛（35.9 mL; 0.635莫耳_9.65當量卜將反應混合 物在周圍溫度下攪拌4小時。在將反應混合物冷卻至1〇£>c 後，添加6N氫氧化鈉溶液（480 mL ; 2.88莫耳_7·5當量）。 將反應混合物在周圍溫度下攪拌丨小時。分離出有機相， 148958.doc •28· 201105322 用水（3x300 ml)、10%擰檬酸溶液（2x300 mL)且然後飽和氯 化鈉溶液（3x150 mL)洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥且然後蒸 發。藉由使用庚烷/乙酸乙酯（95/5至85/15)梯度作為洗脫液 在矽膠上實施急驟層析來純化粗製產物。 步驟G : (1S，2R)-1，-[雙（第三丁氧基羰基）胺基]丙基a 基環戊烷甲酸第三丁基酉旨 在周圍溫度下，向來自上一步驟之溴化醇（u 8 g ; 36.06毫莫耳）於11〇 mL無水DMF中之溶液中添加雙（第三丁 基氧基羰基）胺（7.83 g ; 36.06毫莫耳；1當量）且然後添加 礙酸铯（11.75 g ; 36.06毫莫耳；1當量p在周圍溫度下將 反應混合物攪拌3小時。 將反應混合物過濾。在濃縮濾液後，將油狀殘餘物吸收 於300 mL乙酸乙酯中。將乙酸乙酯相用水（3χ1〇〇 且然 後用飽和氣化鈉溶液（1〇〇 mL)洗滌。有機相經硫酸鈉乾 燥，過濾並蒸發。 藉由使用庚院/乙酸乙酯梯度作為洗脫液在 石夕膠上實施急驟層析來純化粗製產物。 步釋Η · [雙（第三丁氧基羰基）胺基]丙基卜2_ [(甲基續醯基）氧基]環戊烷甲酸第三丁基醋 在周圍溫度下，將三乙胺（4 n mL ; 29.55毫莫耳；1.5 當1)添加至來自上一步驟之醇（8·7〇 g; 197毫莫耳）於13〇 mL無水四氫呋喃中之溶液中。將反應混合物冷卻至_3〇£^ 並向其中逐滴倒入溶於丨〇 無水四氫呋喃中之甲項醯氯 (2-29!^;29.55毫莫耳；15當量）。使混合物上升恢復至 148958.doc -29- 201105322 周圍溫度並於該溫度下攪拌2小時。在蒸發掉四氫呋喃 後’將反應混合物吸收於200 mL乙酸乙醋中。將乙酸乙g旨 相用水（2x20 mL)且然後用飽和氣化鈉溶液（ix2〇 mL)洗 務。有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且然後蒸發。 藉由使用庚烷/乙酸乙酯（85/15至8/2)梯度作為洗脫液在 石夕膠上實施急驟層析來純化粗製產物。 步則· (1厌,23)-2-(乙醯基硫基）-{3-[雙（第三丁氧基幾基) 胺基]丙基}環戊烧甲酸第三丁基醋 預期產物係自於上一步驟中所獲得之化合物開始根據實 例1步驟G之程序而獲得。 步雜，.(1R，2S)-1-(3-胺基丙基）-2-酼環戊烧甲酸鹽酸鹽 後及胺官能基之去保護： 在周圍溫度下，向於上一步驟中所獲得之化合物（8 8〇 g; 17·6毫莫耳）於100 mL無水中之溶液中逐滴添加 4 M HC1/二噁烷溶液（132 mL ; 〇 53莫耳；3〇當量）。將反 應混合物保持在周圍溫度，同時攪拌’直至兩個官能基已 去保濩（由LC/MS檢驗-大致持續時間：過夜）且然後蒸發掉 ’谷所獲彳于之產物未經純化即用於下一步驟。 硫醇之去保護： 將条發產物吸收於預先經氬脫氣之200 mL 4 M HC1水溶 液中且然後在45 c下加熱過夜。冷卻後，將反應混合物用 1 〇〇 mL脫氣水稀釋且然後凍乾。 步驟K . (iR，2S)小胺基丙基）·2疏環戊烧甲酸 將上步驟之化合物（1〇 g，41 5顏〇1)溶於8〇 W水中並 H8958.doc 201105322 攪拌。溶液為澄清淺黃色（pH :約1.2)。邊挪 ’環欖拌邊添加約i丄 mL飽和碳酸氫鈉溶液。自pH=4開始觀象$|丨β “ 观祭到初次沉澱並濾 出。然後使渡液驗性升高至ρΗ=5.5 ’在形成沉澱時遽出。 • 在減壓下（熱浴=55°c)蒸發濾液。當剩餘約10 mL溶液時， 再次實施過濾、。 收集同等品質之沉澱並在真空中乾燥，產生標題產物。 NMR 譜：

NMR, D2〇, 600 MHz) 5=3.08 ppm (1H, dd); 2.91 (2H t); 2.18 (1H，m); 2.11 (1H，m); 1.79 (1H，m); 1.69-1.56 (4H，m); 1_52 (1H，m); 1.45 (1H，m); 1.37 (1H, m)。 實例3b : (1及，25)-1-(3-胺基丙基）-2-疏環戊燒甲酸填酸鹽 使實例3a化合物與85%存於水中之磷酸反應且然後凍 乾。 NMR 譜： (*H NMR, D2〇, 600 MHz) 6=3.09 ppm (1H, t); 2.93 (2H, t); 2.18 (2H, m); 1.82 (1H, m); 1.79 (1H, dt); 1.72-1.50 (5H, m); 1.41 (1H, dt)。 實例3c : (li?，25)-1-(3-胺基丙基）-2-巯環戊烷甲酸苯磺酸鹽 ' 使實例3a化合物與苯磺酸在水中反應且然後凍乾。 NMR 譜： (!Η NMR, DMSO-D6, 600 MHz) 5=12.38 ppm (1H, si); 7.64 (3H, si); 7.59 (2H, m); 7.32 (2H, m); 7.29 (1H, m); 3.02 (1H, tl); 2.76 (2H, m); 2.33 (1H, si); 2.13 (2H, m); 1.84- 1.65 (3H，m); 1.61 (1H，m); 1.52 (3H, m); 1.32 (1H，m)。 148958.doc •31- 201105322 實例4: (15，2i?)-l-(3-胺基丙基）-2·巯環戊烷甲酸三氟乙 酸鹽 預期產物係根據實例1步驟I及J中所述程序自於實例i步 驟Η中所獲得之另一對映異構體（即（is，2R)-2-(乙酿基硫 基）-1-( 3-{[(节基氧基）幾基]胺基}丙基）環戊烧甲酸节基自旨） 開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=204_l，與預期結構一致。 實例5. (1$，2Λ)-2-乙酿基硫基-1-(3-胺基丙基）·環戊烧甲 酸鹽酸鹽 預期產物係根據針對實例2所述之程序自於實例1步驟H 中所獲得之另一對映異構體（即苄基（1S，2R)_2_(乙醯基硫 而獲得。 基）-1-(3-{[(苄基氧基）羰基]胺基}丙基）環戊烷甲酸酯）開始 元素微量分析 C Η Ν S Cl- 計算％ 46.88 7.15 4.97 11.38 12.58 實驗％ 46.90 7.25 5.02 11.09 12.78 實例6: 1(3-胺基丙基）_2_疏環錢甲酸三氣乙❹（外消 旋順式非對映異構體） 預期產物係根據實例〗步驟丨及】中所述程序自於實例1步 驟G中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=204.1 ’ 與預期結構一致。 實例7: W4·胺基丁基）.2·疏環錢甲H乙酸鹽（外消 旋反式非對映異構體） 148958.doc •32· 201105322 步辣A : 1-(4-溴丁基）-2-側氧基-環戊烷甲酸苄基醋 在裝配有磁性摱拌器及冷凝器之5〇〇 mL三頸燒瓶中，在 惰性氮氣氛下使氫化鈉95%(2.2 g; 87.1 mmol; 1·25當量）懸 浮於無水THF(115 mL)與HMPA(14.6 mL)之混合物中。逐 滴添加·2-侧氧基環戊烷曱酸苄基酯（丨5 3 g; 7〇 3 mmol)於45 mL無水THF中之溶液以保持溫度低於45〇c。將反應混合物 在周圍溫度下攪拌1小時。將1，4_二溴丁烷（12.6 mL; 105.4 mmol; 1.5當量）添加至澄清黃色溶液中◎再次將反應混合 物在回流下攪拌14小時。在恢復至周圍溫度後，添加8〇 mL飽和氣化叙水溶液。將混合物倒入5 〇 〇 mL醚中並將有 機相用100 mL水洗滌5次，且然後用100 mL飽和氯化鈉水 溶液洗滌。有機相經MgS〇4乾燥，過濾並濃縮。 使用環己烷/乙酸乙酯（梯度95/5至8〇/2〇)混合物作為洗脫 液在矽膠上純化產物，產生呈黃色油狀物形式之預期產 物。 步驟B : 1-(4-溴丁基）-2-羥基-環戊烷甲酸苄基醋 預期產物係根據實例1步驟E中所述程序自上一步驟中所 獲得之化合物開始而獲得。 步驟C . 1-(4-疊氮基丁基）_2_羥基-環戊烷甲酸苄基醋 在燒瓶中，在惰性氮氣氛下，將上一步驟中所獲得之化 合物（4.41 g; 16·6 mmol)、疊氮化納（5 5 g; 84 6 咖吨 # 量）及碘化鈉（0.2 g)懸浮於60 mL乙醇中。反應混合物在回 流擾拌24小時’然後濃縮至乾燥。將油狀殘餘物溶於15〇 mL醚及80 mL水中。用80 mL水及4〇 mL飽和氯化鈉水溶液 148958.doc -33- 201105322 洗有機相。有機相經MgS〇4乾燥，過濾並濃縮。 所形成之（外消旋）-反式及（外消旋）_順式叠氮化物混合物 直接用於下一反應。 步驟D : 1-(4-胺基丁基）-2-羥基-環戊烷甲酸苄基西旨 在燒瓶中，將（外消旋）-反式及（外消旋）_順式疊氮化物混 合物（20.64 g; 62.3 mmol)及三苯基膦（24 4 g; 93 mm〇1; 15 當量）溶於500 mL THF中、溶液在50eC攪拌！小時。添加水 (10 mL，556 mmol; 9當量）。反應混合物在5〇。〇搜拌4小 時’然後濃縮至乾燥。將油狀殘餘物溶於25〇 mL謎中，有 機相用120 mL 1 N鹽酸水溶液萃取2次。用1〇〇 mL醚洗水 相。藉由添加固體氫氧化鉀使水相之pH達到12_13。水相 用250 mL乙酸乙醋萃取3次。合併的有機相用1〇〇 水及 然後用100 mL飽和氯化鈉水溶液洗。有機相經MgS〇4乾 燥，過濾並濃縮。 所獲得呈順式/反式混合物形式之預期產物直接用於下 一反應。 步驟E : 1-(4-{[(苄基氧基）羰基]胺基} 丁基）_2_羥基-環戊 燒曱酸苄基輯 在燒瓶中，將上一步驟中所獲得之產物（62.3 mmol)溶於 160 mL二噁烷中。添加碳酸鈉（13.16 g; 124 mmol; 2當量） 於160 mL水中之水溶液。在〇ec，緩慢添加氯甲酸苄基酯 (12 mL; 84.4 mmol; 1.35當量）於30 mL二噁院中之溶液。 反應混合物在周圍溫度攪拌12小時，然後部分濃縮。水相 用250 mL醚萃取2次。將合併的有機相洗滌，乾燥，過據 148958.doc •34- 201105322 並濃縮。 在矽膠上純化產物（石油醚/乙酸乙酯：梯度為9八至 2/8)產生王貝色油狀物形式之預期產物。 步錄F ·· 1-(4-{[(节基氧基）幾基]胺基} 丁基）_2·[(甲基石黃酿 基）氧基-環戊烷甲酸苄基酯（外消旋順式非對映異 構體) 預期產物係根據實例丨步驟F中所述程序自於上一步驟中 所獲仟之化合物開始而獲得。 按洗脫順序順式非對映異構體係第一個。 步驛G : 2-(乙醯基硫基）小(4·{[(节基氧基）幾基]胺基} 丁 基h 戍烧甲酸苄基酯（外消旋反式非對映異構 體) 預期產物係根據實例丨步驟G中所述程序自於上一步驟中 所獲得之順式化合物開始而獲得。 步驟Η · 1-(4-胺基丁基）_2_巯環戊烷曱酸三氟乙酸鹽（外消 旋反式非對映異構體) 預期產物係根據實例丨步驟丨及j中所述程序自於上一步 驟中所獲得之化合物開始而獲得。

元素微量分析 吕十具％ C Η Ν S

實例8 : 1-(4-胺基丁基）_2_巯環戊烷甲酸三氟乙酸鹽（外消 旋順式非對映異構體） 步驟A ·· 1-(4-{[(苄基氧基）羰基]胺基} 丁基）_2 [(甲基磺醯 148958.doc -35- 201105322 基）氧基-環戊烷甲酸苄基酯（外消旋反式非對映異 構體) 預期產物係於實例7步驟F中所獲得之另一非對映異構體 (反式非對映異構體）。 步驟B : 1-(4-胺基丁基）_2_巯環戊烷甲酸三氟乙酸鹽（外消 旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟G、I及J中所述程序自於上一 元素微量分析 …口 W WJ y.1 C 3叩役忖 〇 Η Ν S 計算％ 43.5 6.08 4.23 9.68 實驗％ 43.56 6.26 4.13 9.36 實例9 : 1-(4-胺基丁基）-2-巯環戊烷甲酸三氟乙酸鹽（順式 非對映異構體，對映異構體工） 步驟A : 2-(乙醯基硫基卜丨-^气[(苄基氧基）羰基]胺基}丁 基）-戊烧甲酸苄基酯（順式非對映異構體，對映 異構體1) 預期產物係根據實例i步驟G&H中所述程序自於實例8 步驟A中所獲得之化合物開始而獲得。 按洗脫順序對映異構體1係第一個。 步琢B : 1-(4-胺基丁基）-2-赌環成搶甲舱一 * /说衣戍沉甲酸二氟乙酸鹽（順式 非對映異構體，對映異構體1) 預期產物係根據實例1步驟中所述程序自於上一步 驟中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=218，與預期結構—致。 148958.doc -36 - 201105322 實例10 : 1-(4-胺基丁基）_2_酼環戊烷甲睃三氟乙酸鹽（順式 非對映異構體，對映異構體2) 步驟A : 2-(乙醯基硫基[苄基氧基）羰基]胺基}丁 基）-環戊燒甲酸苄基酯（順式非對映異構體，對映 異構體2) 預期產物係於實例9步驟A中所獲得之另一對映異構體。 步驟B . 1-(4-胺基丁基）-2-巯環戍烷曱酸三氟乙酸鹽（順式 非對映異構體，對映異構體2) 預期產物係根據實例1步驟I及J中所述程序自於上一步 驟中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=218 ’ 與預期結構一致。 實例: 1-[(4-胺基甲基）苄基】-2-巯環戊烷甲酸三氟乙酸 鹽（外消旋順式非對映異構體） 步驟A : 1-[(4-溴甲基）苄基]-2-側氧基-環戊烷甲酸苄基醋 預期產物係根據貫例7步驟A中所述程序自2 _側氧其_環 戊烷曱酸苄基酯及1，4-二溴曱基苯開始而獲得。 步驟B . 1-[(4-溴甲基）苄基]-2-經基-環戊燒甲酸苄基醋 (外消旋反式非對映異構體) 根據實例1步驟E中所述程序，隨後藉由使用環己烧/乙 ▼ 酸乙醋混合物（梯度為90/10至65/35)作為洗脫液在石夕膠上 貫施急驟層析以對由此獲得之化合物實施非對映異構體分 離而獲得預期產物。 按洗脫順序反式非對映異構體係第一個。 步驟C : 1-[(4-胺基甲基）苄基]-2-巯環戊烷甲酸三氟乙酸 148958.doc -37- 201105322 鹽（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例7步驟0至11_所述程序自於上一步 驟中所獲得之化合物開始而獲得。 乂 CAD/MS/MS譜[M+H]+=266.1 ’ 與預期結構一致。 實例12 : 2-H_(六氳吼咬_4_基甲基）環戊烷甲酸三氣乙 酸鹽（外消旋反式非對映異構體） 步驟A ’ 4·({1-[(节基氧基）羰基卜2羥基環戊基丨尹基）十 六氫吡啶甲酸苄基酯（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例7步驟八及Β甲所述程序自2_側氧基、 環戊炫甲料基醋及4_溴甲基小六氫ett咬甲酸f 而獲得。 ° 按洗脫順序順式非對映異構體係第二個。 步琢B ·· 4-({1-[(节基氧基）羰基]_2_[(甲基磺醯基）氧基]環 戍基}甲基）-1-六氫吼啶曱酸苄基酯（外消旋順式 非對映異構體) 預期產物係根據實例i步驟F中所述程序自於上一步驟中 所獲得之化合物開始而獲得。 步琢C · 2-m-l-(六氫吡啶_4•基甲基）_環戊烷甲酸三氟乙 酸鹽（外消旋反式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟〇、I及j中所述程序自於上一 步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 元素微量分析 ~Q~~~ Η Ν S 計算％ ~~47Ό5~~~ 6.2 3.92 8.97 實驗°/〇 ~~47Λ2~~~ 6.52 4.03 7.6 148958.doc •38- 201105322 實例13 : 2-酼-1_(六氫吡啶_4_基甲基）_環戊烷曱酸三氟乙 酸鹽（外消旋順式非對映異構體） 步驟A : 4-({1-[(苄基氧基）羰基]_2_[(甲基磺醯基）氣基]環 戊基}甲基）-1-六氫吡啶甲酸苄基酯（外消旋反式 非對映異構體) 預期產物係於實例12步驟B中所獲得之另一非對映異構 體（反式非對映異構體）。 步驟B : 2-M-1·(六氫吡啶_4_基甲基）環戊烷甲酸三氟乙 酸鹽（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟G '丨及j中所述程序自於上一 步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 元素微里分析 C Η Ν S 計算％ 47.05 6.2 3.92 8.97 實驗％ 46.58 6.24 4.02 7.78 實例14 . 1-(5-胺基戊基）_2_毓環戊烷甲酸三氟乙酸鹽（外消 旋反式非對映異構體） 步驟A ·· 1-(5-{[(苄基氧基）羰基]胺基}戊基）_}羥基-環戊 炫甲酸苄基酉旨 預期產物係根據貫例7步驟a至E中所述程序自2-側氧基_ 環戍烧甲酸f基醋及1，5_二溴戊烷開始而獲得。 步驟B : 1-(5-{[(节基氧基）羰基]胺基}戊基）_2 [(甲基磺酿 基）氧基-環戊燒甲酸苄基酯（外消旋順式非對映異 構體) 預期產物係根據實例i步驟F中所述程序自於上一步驟中 148958.doc •39· 201105322 所獲得之化合物開始而獲得。 按洗脫順序順式非對映異構體係第二個。 步驟c:叫胺基戊基m環戊烧甲酸三氣乙酸鹽（外消 旋反式非對映異構體) 預期產物係根據實例㊇則、⑷中所述程序自於上— 步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=232 1，與預期結構一致。 實例15 : 1-(5·胺基戊基)_2•巯環戊⑦甲酸三氟乙酸鹽(外消 旋順式非對映異構體） 步驟A 1 (5 {[(φ基氧基）幾基]胺基}戊基)_2_[(甲基續釀 基）氧基-環戊烷甲酸苄基酯（外消旋反式非對映異 構體) 預期產物係於實例14步驟Β中所獲得之另一非對映異構 體（反式非對映異構體）。 步称Β. 1 (5-胺基戊基）_2_疏環戊虎曱酸三敗乙酸鹽（外消 旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例丨步驟G、〗及j中所述程序自於上一 步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 元素微量分析 C Η Ν S ~~Ί 計算％ 45.21 6.42 4.06 9.28 實驗°/〇 45.41 6.76 1 4.1 9.75 實例16 : 2-巯六氫吡啶_4_基乙基）-環戊烷甲酸三氟 己酸鹽（外消旋順式非對映異構體） 步顆A : 4-(2-{1_[(苄基氧基）羰基]_2_羥基-環戍基}乙基）_ I48958.doc 201105322 1-六氫吼啶甲酸苄基醋 預期產物係根據實例7步驟八及3中所述程序自2_側氧基_ 環戊烧甲酸f基自旨及4_㈤臭乙基）小六氫㈣甲暖节㈣ 開始而獲得。 按洗脫順序反式非對映異構體係第一個。 步驟B · 4-(2-{1-[(节基氧基）羰基]_2_[(甲基磺醯基）氧基] 壤戊基}乙基）-1-六氫吼啶曱酸苄基酯（外消旋反 式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟F中所述程序自於上—步驟中 所獲得之化合物開始而獲得。 步驟C : 2-Μ-1-(2-六氫咣啶基乙基）_環戊烷f酸三獻 乙酸鹽（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟G、I及j中所述程序自於上一 步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=258，與預期結構一致。 實例17 : 2-巯-1-(吡啶_3_基甲基）_環戊烷曱酸三氟乙酸鹽 (外消旋順式非對映異構體） 步驟Λ : 2-侧氧基-1-(3-吡啶基甲基）環戊烷甲酸苄基醋 在裝配有磁性攪拌器及冷凝器之1升三頸燒瓶中，在惰 性氮氣氛下，將氫化鉀32%(25 g ; 200毫莫耳；1.1當量）懸 浮於無水THF(200 mL)中。將反應混合物冷卻至-78°C且然 後逐滴添加2-側氧基環戊烷甲酸苄基酯（39.7 g; 182毫莫 耳）’同時保持溫度低於-78°C。將反應混合物在周圍溫度 下攪拌1小時。將3-(氯曱基）-吡啶鹼（38.7 g ; 226毫莫耳； irk 3· 148958.doc -41 - 201105322 1.24當量）於100 mL無水THF中之溶液添加至澄清黃色溶液 中。將反應混合物在回流下攪拌12小時。在恢復至周圍溫 度後’將反應混合物蒸發至乾燥並將其吸收於8〇 mL水及 500 mL乙酸乙酯中。將水相用50 mL乙酸乙酯萃取3次。將 合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗蘇且然後經MgS〇4乾 燥，過濾並濃縮。 使用二氣甲烷/乙醇混合物（梯度為98/2至95/5)作為洗脫 液在碎膠上純化產物’產生呈黃色油狀物形式之預期產 物。 步驟β : 2-羥基-1-(3-吼啶基甲基）環戊烷甲酸苄基酯（外消 旋反式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟E中所述程序而獲得。 使用二氯曱烷/乙酸乙酯混合物（梯度為7/3至5/5)作為洗 脫液在石夕膠上純化產物’產生呈無色油狀物形式之預期產 物。 按洗脫順序反式非對映異構體係第二個。 步驟C ·· 2-窥-1-(。比啶_3_基曱基）_環戍烷甲酸三氟乙酸鹽 (外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟F、〇、I及J中所述程序自於 上一步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 元素微Ϊ分析 C Η Ν S 計算％ 47.86 4.59 3.99 9.13 實驗％ 45.85 4.93 3.85 7.26 CAD/MS/MS譜[M+H]+=238卜與預期結構一致。 148958.doc -42- 201105322 實例18: 2-疏-1-(2-吼咬-2-基乙其、炉々认 丞乙基）-環戊烷甲酸三氟乙酸 鹽（外消旋順式非對映異構體） 步釋人：2-侧氧基-1-(2-。比咬_2_某『其、班丄、 疋z丞乙基）裱戊烷甲酸苄基輯 預期產物係根據實例17步驟A十所述程序自2_側氧基-環 戊烷f酸节基醋及甲磺酸2_吡啶·2_基乙烷基醋開始而獲 得。 步驟3:2-經基-1-(2-〇比咳_2~其7发\與丄、1^·^ (疋疋卜基乙基）環戊烷甲酸苄基_ (外消旋反式非對映異構體) 預期產物係根據實例/ 7步驟5中所述程序而獲得。 按洗脫順序反式非對映異構體係第二個。 步驟C: 基乙基）_環戊烧f酸三氣乙酸 鹽（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例丨步驟F、G、J中所述程序自於 上一步驟中所獲得之化合物開始而獲得 > 兀京微重分析 ^ 計算％ ' -—- C ~49.31 ~ Η ~~497~~ Ν ~183 實驗°/〇 45.54 5.11 3.48 實例19 : 1-[(6-胺基吡啶_3_基甲基）】_2_巯環戊烷甲酸三氟 乙酸鹽（外消旋順式非對映異構體） 步驟A . 2 -側氧基-環戊燒甲酸第三丁基醋 1)己二酸二-第三丁基酯： 在周圍溫度下，將己二醯氣（629.8 g ; 3.44莫耳）逐滴倒 入第三丁醇（3.27 L; 34.4莫耳-10當量）及吡啶（800 mL; 148958.doc -43 - 201105322 10.32莫耳-3當董）於3 L無水曱苯中之溶液中。將反應混合 物在70°C下加熱，同時攪拌，過夜。 冷卻後，濾出吡啶鑌氯化物沉澱並用子苯沖洗。將甲苯 相用1 N鹽酸溶液（4X500 mL)、10%碳酸鈉溶液（1 χ5〇〇 1111〇、水（1父50〇1111〇且然後用飽和氣化鈉溶液（1)<5〇〇1111^ 洗條。 將有機相乾燥，過濾且然後蒸發。 藉由在減壓下（1〇〇勺/2χΐ〇·2 mmHg)分餾來純化所獲得之 粗製油狀物。 2) 2-側氧基-環戊烧甲酸第三丁基酯 在周圍/皿度下’將第三丁醇（566 mL; 〇.〇6莫耳- 0.05當 畺）以及14 g己一酸二_第三丁基酯倒入NaH(1〇8 54经 物質；2.71莫耳-2.15當量）於i.i l無水曱苯中之懸浮液 中。在回流下加熱反應混合物。在該溫度下，逐滴倒入己 二酸二-第三丁基酯（324.6 g ; i 26莫耳）溶於5〇〇 mL無水曱 苯中之溶液，同時控制氣體逸出。 添加大致持續時間：3小時。 注思.在己二酸二_第三丁基酯添加過程中將觀察到反 應混合物實質上結塊’但此將向懸浮液發展。 完成添加後，使反應混合物在回流下保持5小時。 冷卻後’在0°C下使用10%乙酸溶液（1 L)將反應混合物 水解。分離出有機相’並用甲苯（3〇〇 ml)萃取水相。將合 併的甲苯相用水（2x300 ml)且然後用飽和氣化鈉溶液（300 ml)洗滌》 148958.doc -44- 201105322 有機相經硫酸鈉乾燥，過濾且然後蒸發。 藉由在減壓下（65-7(TC Π X Π)" mmHg)分餾來純化橙色油 狀物。 步驟B : 1-({6-[(第三丁氧基羰基）胺基]_3吡啶基}甲基）_ 2-側氧基環戊烧甲酸第三丁基酷 預期產物係根據實例17步驟A十所述程序自2_側氧基-環 戊烷甲酸第三丁基酯及[5_(氯曱基）吼咬_2基]胺基甲酸第 二丁基S旨開始而獲得。 步驟C . 1-({6-[(第二丁氧基幾基）胺基]比咬基}甲基）_ 2-經基-環戊烷甲酸第三丁基酯 預期產物係根據實例17步驟Β中所述程序而獲得。 使用二氣甲烷/乙醇混合物（梯度為98/2至95/5)在矽膠上 純化產物，產生呈無色油狀物形式之預期產物。 按洗脫順序反式非對映異構體係第二個。 步驟D : 1-({6_[(第三丁氧基幾基）胺基]_3_〇比〇定基}甲基卜 2-[(甲基石黃醮基）氧基]環戊烷甲酸第三丁基酯（外 消奴反式非對映異構體) 預期產物係根據實例1步驟F中所述程序自於上一步驟中 所獲得之化合物開始而獲得。 步驟Ε . 1-[(6-胺基0比〇定基甲基(乙醯基硫基卜環戍 烧甲酸（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例i步驟G中所述程序自於上一步驟中 所獲得之化合物開始而獲得。 步驟F . 1-[(6-胺基。基甲基）]_2M環戊烧甲酸三氣 148958.doc -45- 201105322 乙酸鹽（外消旋順式非對映異構體) 酸及胺官能基之去保護： 在周圍溫度下，向於上一步驟中所獲得之化合物（2.40 吕；4.72毫莫耳）於2〇1111^無水(：112(：12中之溶液中逐滴添加4 ]^11〇1/二噁烷溶液（35_5 11^;141.6毫莫耳；30當量）。將 反應混合物保持在周圍溫度，同時攪拌，直至該兩個（胺 及酸）官能基已去保護（由LC/MS檢驗-大致持續時間：過 夜）且然後蒸發掉溶劑。 硫醇之去保護： 將蒸發產物吸收於4 M HC1水溶液中且然後在45°C下加 熱過夜。將反應混合物用水稀釋且然後凍乾。 使用水/乙腈（1/1)混合物作為洗脫液在BIOGEL P2上純 化產物。將含有預期產物之部分凍乾。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=253.1，與預期結構一致。 實例 20: (1R，2S，l’R，2’8)-2,2’-二硫烷二基雙[1-(3-胺基 丙基）環戊烷甲酸]二鹽酸鹽 將實例1步驟J中所述化合物（0.44 g ; 1.39毫莫耳）於3 mL IN氫氧化鈉中之溶液在65°C下加熱過夜。冷卻後，將反應 混合物用3 mL 1 N鹽酸溶液中和。 使用水/乙腈（1/1)混合物作為洗脫液在BIOGEL P2上純 化產物。將含有預期產物之部分凍乾。 元素微量分析 C Η Ν S Cl- 計算％ 45.28 7.18 5.87 13.43 14.85 實驗％ 45.31 6.83 5.94 13.32 14.54 148958.doc -46· 201105322 實例21: (1R，2S)-l-[3-(二甲基胺基）丙基】_2巯環戊烷曱 酸三氟乙酸鹽 步驟 A : (1R, 2S，VR’ 2'S)-2,2，-二硫貌二基雙 km二甲基 胺基）丙基）環戊烷曱酸 在周圍溫度下’向於實例20中所獲得之化合物（ο」？ g ; 〇·70毫莫耳）於4.5 mL甲酸中之溶液中逐滴添加〇 2 m；L 37〇/〇 曱酸水溶液。將反應混合物在回流下加熱1小時，同時授 拌。冷卻後，將反應混合物用10 mL水稀釋且然後蒸發掉 溶劑。產物未經純化即用於下一步驟。 步驟B : (1R，2S)-l-[3-(二甲基胺基）丙基]_2_巯環戊烷甲酸 三氟乙酸鹽 在周圍溫度下，向於上一步驟中所獲得之化合物於35 mL水/THF(1/1)混合物中之溶液中逐滴添加2 mL三丁基 料。將反應混合物在50 C下加熱過夜，同時搜拌。冷卻 後，用100 mL水稀釋反應混合物且然後用趟（3χ25 mL)洗 滌水相。蒸發掉水相。 藉由製備型 HPLC 在 Kromasil 管柱（1 kg-600 mmx60 mm- 70 ml/min)上使用水/乙腈/三氟乙酸（85/15/〇丨）混合物作為 流動相來純化粗製產物。 將含有預期產物之部分凍乾。 CAD/MS/MS 譜[Μ+Η]+=232·1，與預期結構一致。 實例22 · 1-[3-(甲基胺基）丙基]-2·巯環戊燒曱酸三敗乙酸 鹽（外消旋順式非對映異構體） 步驟A : 2-[(甲基續醯基）氧基]吼咬基甲基）環戍焼 148958.doc -47· 201105322 曱酸苄基酯（外消旋反式非對映異構體) 預期產物係根據實例17步驟A、B&c所述程序自2_側氧 基-環戊烷甲酸苄基酯及甲磺酸3_[[(苄基氧基）羰基](甲基） 胺基]丙基酯開始而獲得。 按洗脫順序反式非對映異構體係第二個。 步驟B : 1-[3-(甲基胺基）丙基]_2_巯環戍烷曱酸三氟乙酸 鹽（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據貫例1步驟G、I及j中所述程序自於上一 步驟中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=218.1，與預期結構一致。 實例23 : 2-疏·1·(氮雜環丁 _3_基甲基）_環戊烷罕酸三氟乙 酸鹽（外消旋順式非對映異構體） 步驟A . 3-({1-(第三丁基氧基羰基）_2羥基環戊基丨甲基）_ 1-氮雜環丁烷甲酸苄基醋 預期產物係根據實例7步驟八及8中所述程序自2_側氧基_ 環戊烷曱酸苄基酯及3-{[(曱基磺醯基）氧基]甲基}氮雜環 丁坑-1 -胺基曱酸第三丁基酯開始而獲得。 步驟B . 3-({1-(第二丁基氧基羰基）_2_[(〒基磺醯基）氧基] 環戊基}甲基）-1-氮雜環丁烷甲酸苄基酯（外消旋 反式非對映異構體) 預期產物係根據貫例19步驟D中所述程序自於上一步驟 中所獲得之化合物開始而獲得。 使用二氯甲烷/乙酸乙酯混合物（梯度為9/1至8/2)作為洗 脫液在矽膠上純化產物，產生呈無色油狀物形式之預期產 148958.doc •48· 201105322 物。 按洗脫順序反式非對映異構體係第二個。 步驟C : 羱環T -3-基曱基）-環戊烷甲酸三氟乙 酸鹽（外消旋順式非對映異構體) 預期產物係根據實例19步驟F中所述程序自於上一步驟 中所獲得之化合物開始而獲得。 CAD/MS/MS譜[M+H]+=216.1，與預期結構一致。 藥理學研究 實例24 : TAFIa之抑制 藉由在氣化鈣存在下添加凝血酶-血栓調節蛋白複合物 來活化純化人類TAFI(25 ng)。在20°C下培育20分鐘後，藉 由添加不可逆凝灰酶抑制劑PPACK(TAFI活性套組， American Diagnostica)終止反應。 將所測試化合物添加至（3.2 nM) TAFIa溶液中並在20°C 下培育5分鐘。添加顯色TAFIa基質且然後在37°C下培育30 分鐘。藉由添加硫酸（TAFI活性套組，American Diagnostica) 終止酶反應。借助分光光度計（Spectramax，Molecular Devices)在490 nm下量測溶液之光學密度（OD)。所量測之 每一 OD值均扣除含有無TAFI之試劑之孔的OD值。使用下 .式測定在所測試化合物給定濃度下TAFIa之抑制百分比： %抑制=100-[(化合物ODxlOO)/載劑OD] 自對增加濃度之所測試化合物量測之OD值之抑制百分 比使用非線性回歸根據S形四參數方程（效應-劑量）來計算 抑制50%的TAFIa酶活性之本發明化合物之濃度（IC5〇)。由 i- 148958.doc •49- 201105322 本發明代表性化合物獲得之IC5()值以nM記錄於下表中： 化合物 IC5〇 (nM) 實例1 6.7 ±0.6 實例2 22 ±6 實例3 7.4± 1·1 實例6 14 士 2 實例8 178± 11 實例10 81 ± 16 實例13 184 ±22 實例20 186 ±26 實例25 :醫藥組合物-錠劑 製備1000個鍵劑之配方，每一鍵劑皆含有10 mg活性成 份： 實例1至23中一者之化合物.................................1〇 g 羥基丙基纖維素..................................................2 g 小麥殿粉...........................................................1〇 g 乳糖................................................................100 g 硬脂酸鎂............................................................3 g 滑石粉...............................................................3 g 實例26:醫藥組合物-與華法林聯合之錠劑 製備1000個錠劑之配方，每一錠劑皆含有10 mg活性成 份：

實例1至23中一者之化合物.................................10 S 華法林...............................................................2 § 羥基丙基纖維素..................................................2 §

小麥澱粉...........................................................10 S 乳糖................................................................100 g

硬脂酸鎂............................................................3 S

滑石粉...............................................................^ S 148958.doc 50· 201105322 實例27:醫藥組合物-與阿司匹林聯合之鍵劑 製備1000個键劑之配方’每一鍵劑皆含有1 〇 mg活性成 份： ..........1〇 g .........1〇〇 g ............2 g ...........10 g *‘**•*•*100 g ............3 g 實例1至2 3中一者之化合物.............. 阿司匹林.......................................... 羥基丙基纖維素................................. 小麥澱粉...................................... 导"唐........................................... 硬脂酸鎮............................... 滑石粉........................................ 實例28:舆阿替普酶聯合之可注射溶液 製備10 ml溶液之配方： ................20 mg .................10 mg ..................350 g ..................1' mg .........試藥級pH7 ..................10 ml 實例1至23中一者之化合物 阿替普酶......................... L-精胺酸......................... 聚山梨醇酯80.................. Μ酉楚................................ 注射用水......................... 148958.doc -51 -

Claims (1)

1. 201105322 七、申請專利範圍： 1. 一種式（I)化合物 R,s^ - 其中： R1代表II原子或式c〇R42基團#仏代表直鏈或呈 支鏈〇丨-〇:6烷基或芳基， ” 或R1代表式（A)之基團：

   (A), 、R2代表式NRSR6之基團，其中Rs與相同或不同，各 代表氫原子或直鏈或具支鏈Ci_C6烧基，或&代表含氣雜 環基團、芳基或雜芳基， I代表氫原子或直鏈或具支鏈Ci_C6烷基， m代表介於包括1與6間之整數， η代表0、1或2， 其光學異構體’以及其與醫藥上可接受酸之加成鹽。 2. 如請求項〗之式⑴化合物，其中心代表氫原子。 3. 如請求項之式（I)化合物，苴中 /、T R2代表胺基或°比啶 基。 4. 如請求項J或2之式（I)化合物，复中兑#全* 代表氫原子。 5. 如請求項I或2之式⑴化合物，其代表3。 148958.doc i· 201105322 6. 如請求項1或2之式⑴化合物，其中η代表i。 7. 如請求項1之式（la)化合物：

   其中η、Ri、R_3、Rs及I係如請求項j中所定義。 8. 如請求項1之式（I)化合物，其選自： (li?, 2«S)-l-(3-胺基丙基）_2_魏環戊燒曱酸、其光學異 構體及其與醫藥上可接受酸之加成鹽，及 (li?，2*S)-2-乙酿基硫基_1_(3_胺基丙基）環戊院曱酸、 其光學異構體及其與醫藥上可接受酸之加成鹽。 9. 一種合成如請求項1之式（I)化合物之方法，其自式（11)化 合物開始： co2g

   其中η代表〇、1或2，〇代表羧基官能基之保護基團 使該式（II)化合物與式（111)化合物反應： X-(CH2)m-R'2 (HI)， 其中X代表鹵素原子或三氟甲磺酸酯、曱苯磺酸酯或 曱磺酸酯基團， m代表介於包括1與6間之整數， 148958.doc 201105322 R'2代表式NR，5R，6之基團，其中11，5與11，6可相同或不 同’各代表胺基官能基之保護基團或直鏈或具支鏈CrC6 炫*基’或R，2代表視情況經胺基官能基之保護基團取代之 含氮雜環基團，或R，2代表芳基或雜芳基， 產生式（IV)化合物：

   其中R'2、G、m及η係如上文所定義， 用還原劑還原該式（IV)化合物之側氧基（οχο)官能基， 產生式（V)化合物：

   其中R’2、G、m及η係如上文所定義， (V), 使δ玄式（V)化合物與曱續醯氯、曱苯績酸氣、三氟甲 磺酸酐或鹵化試劑反應，產生式（VI)化合物：

   其中R’2、G、m及η係如上文所定義，χ代表曱磺酸 酯、曱苯磺酸酯或三氟曱磺酸酯基團或鹵素原子， 當期望獲得呈單一非對映異構體形式之式⑴化合物 時’分離該式（VI)化合物之非對映異構體， 148958.doc 201105322 然後使該式（VI)化合物與式（VII)化合物反應： MS-(CO)-R'! (VII)， 其中Μ代表鉀、鈉或鋰，R、代表烷基或芳基， 產生式（VIII)化合物： R'2-(CH2) co2G R-r(CO)-S^X\ (γπΐ), 其中R、、R'2、G、m及n係如上文所定義， 當期望獲得呈單一對映異構體形式之式（I)化合物時， 藉由對掌性層析分離該式（VIII)化合物之對映異構體， 在適當情況下，使該式（VIII)化合物之硫醇、胺基及 羧基官能基去保護，產生該式（I)化合物， 當期望獲得該式（I)化合物與醫藥上可接受酸之加成鹽 時，使該式（I)化合物與相應酸反應。 10. —種製備如請求項7之式（la)化合物之方法， 其自式（II)化合物開始：

   其中η代表0、1或2，G代表羧基官能基之保護基團， 使該式（II)化合物與丙烯醛在不對稱觸媒存在下反 應， 產生（1R)或（1S)構型之式（IX)化合物： 148958.doc 201105322

   其中η及G係如上文所定義， 將該式（IX)化合物之醛官能基還原，產生式（X)化合 物： OH

   其中η及G係如上文所定義， 使該式（X)化合物與曱磺醯氯、曱苯磺醯氯、三氟曱 磺酸酐或鹵化試劑反應，產生式（XI)化合物： X

   其中η及G係如上文所定義，X代表鹵素原子或三氟曱 項酸@旨、曱苯磺酸酷或曱石黃酸醋基團， 藉助還原劑還原該式（XI)化合物之酮官能基，產生式 148958.doc X 201105322 (XII)化合物：

   (ΧΠ), 其中η、G及X係如上文所定義， 使該式（XII)化合物與式（XIII)化合物反應： NHR"5R"6 (XIII)， 其中R"5及R”6各代表胺基官能基之保護基團或直鏈或 具支鏈Ci-G烷基， 產生式（XIV)化合物：

   其中η、G、R"5及R"6係如上文所定義， 使該式（XIV)化合物與甲磺醯氣、甲苯磺醯氯、三氟 甲磺酸酐或鹵化試劑反應，產生式（XV)化合物： 148958.doc 201105322

   其中η、G、R1’5及R"6係如上文所定義，X代表甲續酸 酯、甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯基團或鹵素原子， 然後使該式（XV)化合物與式（VII)化合物反應： MS-CCO)^1! (VII)， 其中Μ代表鉀、鈉或鋰，RS代表烷基或芳基， 產生式（XVI)化合物：

   其中η、R、、G、R”5及尺"6係如上文所定義， 在適當情況下’使該式（XVI)化合物之硫醇、胺基及 羧基官能基去保護’產生該等式（la)化合物， 當期望獲得該式（la)化合物與醫藥上可接受酸之加成 鹽時’使該式（la)化合物與相應酸反應。 11·種醫藥組合物’其包含如請求項1至8中任一項之式⑴ 化合物與一或多種惰性、無毒、醫藥上可接受之賦形劑 或載劑組合。 148958.doc 為: 201105322 12. 13. 如請求項1】々4 ^ 、之醤π組合物’其特徵在於另外包含纖維蛋 白'合解齊'丨、抗凝血劑或抗企小板劑。 另夕勺項11之醫藥組合物，呈可注射形式，其特徵在於 s L自重組tp A、重組uPA及鏈激酶之纖維蛋白溶 14. 15. .土種如π求項1至8中任一項之化合物之用途，其用以製 用於預防、一級預防或治療以下疾病之藥劑：心肌梗 ^ 痛下肢動脈炎、靜脈血栓形成、肺栓塞、腦 血€思外、糖尿病血管併恭e - ^ 併^症、主動脈瘤或癡呆症。 如請求項1 4之化合物之用、入 之用通，其用於與纖維蛋白溶解 劑、抗凝血劑或抗灰小板劑聯合。 148958.doc -8- 201105322 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： ί

   148958.doc