TW201000487A - Hydroxy substituted thieno pyrimidinones as melanin concentrating hormone receptor-1 antagonists - Google Patents

Description

201000487 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於α塞吩并。密α定酮非驗性黑色素集中荷爾蒙受 體-l(MCHRl)拮抗劑、含有MCHR 1拮抗劑之醫藥組合 物、製備該等MCHR 1拮抗劑之方法、及採用該等MCHR 1 拮抗劑治療糖尿病、肥胖症及相關疾病之方法。 【先前技術】 若干條藥理及遺傳證據支持黑色素集中荷爾蒙受體-1(下文稱作「MCHR1」）作為食物攝入及體重調節劑之作 用。中樞投與黑色素集中荷爾蒙（MCH)可在大鼠及小鼠二 者中提高食物攝入及體重。在小鼠中慢性IC V輸注MCH導 致食物攝入增加且最終導致肥胖症，而輸注MCH肽拮抗劑 可阻斷MCH誘導之食物攝入並導致體重減輕，且使膳食誘 導之肥胖小鼠減少進食。 MCH肽及受體二者之表現受營養狀況調節。MCH mRNA在攝食過度之肥胖小鼠（ob/ob)及禁食動物二者中皆 出現上調。MCH肽之基因的靶向斷裂導致食欲過剩及消 瘦。MCHR1基因之斷裂導致消瘦、代謝改變、及伴隨輕 微攝食過度之運動過多。相反，MCH肽之過度表現導致攝 食過度、肥胖症及糖尿病。已顯示小分子MCHR 1拮抗劑 在經口及腹膜腔内投與後可在齧齒動物體重及進食模型中 導致體重減輕；五wr. J. P/iarwaco/·, 438:129-135 (2002); Nat. Med., 8:825-830 (2002) ； Eur. J. Pharmacol., 497:41-47 (2004)。 140588.doc 201000487 亦已報導MCHR1在急性實驗性結腸炎及可能的人類 IBD(炎症性腸病）之發病機制中具有關鍵作用。已顯示免 疫中和係針對TNBS誘導結腸炎之有效治療。Kokkotou，E. 等人，「Melanin-concentrating hormone as a mediator of intestinal inflammation」，PAMS, 105(30):10613-10618 (2008 年7月29曰）。 '此外，亦已報導MCH及MCHR1可在對應激之内分泌及 行為反應中發揮作用。用MCHR拮抗劑治療大鼠及小鼠可 〇 產生較強抗抑鬱及抗焦慮效應。（JPET DOI:10.1124/ jpet.108.143362) 人們已揭示多種非肽MCHR 1拮抗劑。每種拮抗劑之種 類範圍反映了關於MCHR1激動劑配體識別所需標準之普 遍認識。對MCHR1專利揭示内容之最新綜述藉由以下描 述強調該等結構之共同點：「在所有MCH專利文獻中普遍 存在由中央支架及其附接有芳基或雜芳基及驗性胺基官能

團的連接體構成之分子」（T丄Kowalski，T_J.等人’五邛-KJ

Twvesi. Drwgs，13:1113-1122 (2004))。該等種類物質 之藥效團模型一直設想拮抗劑配體之鹼性胺中心與受體天 ' 冬胺酸123之間存在假定之必需靜電作用’據推測其可能 - 類似於MCH肽激動劑精胺酸14與MCHR1受體天冬胺酸123 之間之約束作用（Ulven, T_等人，·/· Med. C7zew_，48:5684_ 5697 (2005))。然而，在MCHR 1拮抗劑中納入此驗性胺可 顯著提高結合遠離靶之離子通道及生物胺受體之可能性。 於2007年4月26曰公開之美國專利第公開案第 140588.doc 201000487 2007/0093509 A1號揭示一系列式A之新穎高親和力選擇性 MCHR 1拮抗劑：

其中， A係苯基或單環雜芳基； D係CH2或直接鍵； R1獨立地選自氫、_素、低碳烷基、低碳環烷基、 CF3、OR6 或 SR6 ; R2係氫或低碳烷基； R4係羥基或G-D2-Zn ; η係1至3之整數； R5係氫、鹵素、低碳烷基、低碳環烷基、CF3、SR6、低 碳烷氧基、低碳環烷氧基、CN、CONR7R7、SOR6、 so2r6、nr7cor7、nr7co2r7、co2r6、雜芳基、 NR7S02R6或 COR6 ; G係 Ο、S 或 CR7R7 ; D2係直接鍵、低碳烷基、低碳環烷基或4至6員非鹼性雜 z係氫、經基、低碳烧氧基、低碳環炫氧基、 OCONR7R7、CN、CONR7R7、SOR6、so2r6、NR7COR7、 nr7co2r7、co2r6、雜芳基、NR6S02R6或 COR6 ; 140588.doc 201000487 R獨立地選自低礙烧基或低碳環燒基；且 R獨立地選自氫、低碳烷基或低碳環烷基，其中兩個R7 及其所連接之原子可視需要形成4至7個原子。 【發明内容】 本發明係關於MCHR 1拮抗劑，其具有極率 藥物代謝動力學及安全性特徵，例如具有下2或；:之彼 等’包括其所有立體異構體：

IA

CI

藥呈其選自 特戊酸酯、 ;或呈其選 苷組成之群 或其前藥或醫藥上可接受的鹽。式以之較佳前 由以下組成之群之前藥酯或鹽形式：乙酸酯、 甲基碳酸酯、苯甲酸酯、磷酸酯、及胺基酸酯 自由碟酉欠乙&酸（phosPhate acetal)及〇-葡萄糖 之前藥醚或鹽形式。 某些較佳前藥酯基團具有下式： 140588.doc 201000487

Ο 其中Η、院基、苄基或ho2c—(CH2>y—2-0#，其中y係1至 4且前藥醚為

其中R係烷基或氫且Ra係Η、烷基或苄基。 根據本發明之一態樣，提供具有以下結構中之一種結構 之化合物，包括其立體異構體：

140588.doc 201000487

ΙΑ5 包括任一上述結構之醫藥上可接受之鹽。 根據本發明之一態樣，提供具有以下結構ΙΒ之化合物， 包括其所有立體異構體：

或其前藥或醫藥上可接受之鹽。 140588.doc -9- 201000487 式IB化合物之輕伟爺溢口 佳刖樂王其選自由以下組成之群之酯或 鹽形式：乙酸根、牲士缺4日 知·戊馱根、甲基碳酸根、苯甲酸根、磷 &L根及月女基西夂a曰’或呈其選自由磷酸乙縮醛⑽。sphate acetal)及0-㈣糖皆組成之群之前藥謎或鹽形式。 根據本發明之一態樣 式IB之前藥酯係以下中之一種：

其中R係H、烷基、苄基或H〇2C_(CH2)广g—o#，其中丫係丄至 4且前藥醚為

其中R係烷基或氫且《^係Η、烷基或苄基。 較佳式ΙΒ化合物具有以下結構中之—種結構，包括其立 體異構體：

0 CI

旧1 140588.doc -10- 201000487

旧2

或可為任一上述結構ι醫藥上可接受之雖。 根據本發明之一態樣，提供醫藥組合物，其包含，丨、一 種本文所述式IA或IB化合物，且可視二至少一 兄而要包括至少一種選 自由以下組成之群之額外治療 ..^ 縻樂J ·抗肥胖症藥劑、抗糖 ，病樂劑、食欲抑制劑、降膽固醇/脂質藥劑、及升祖 尔诏’以及至）一種醫藥上可接受之稀釋劑或載劑。 、根據本明之一您樣，提供醫藥組合’其包含至少一種 式ία或IB化合物及至少一種選自由以下組成之群之額外治 療藥劑.抗肥胖症藥劑、抗糖尿病藥劑、食欲抑制劑、降 140588.doc -11 - 201000487 膽固醇/脂質藥劑、及升HDL藥劑。 本發明較佳醫藥組合包含式〗八或IB化合物或其前藥或其 鹽’及抗糖尿病藥劑或抗肥胖症藥劑。 本發明亦係關於具有式以或比之化合物（或其前藥）在製 造可用於治療肥胖症、糖尿病、焦慮症、抑t症或炎 腸病之藥物中之用途。 ’ 本發明另外係關於具有下式中之一者之化合物： a) sr

V° I

140588.doc -12· 201000487 d)

?、卜 NH C4H9

O

酶促還原為 實例IB項之圈同 以下結構之醇之方法

實例1C項之（R)_醇

該方法包含使酮與酮還原酶反應以將酮轉化為醇 在—較佳實施例中，酮還原酶係酮還原或 嗣還原酶（KRED)-113或自念珠菌 sonorens is) SC16117(ATCC®第565 1 1號）產生之酮還原酶。 140588.doc 根據本發明之一態樣，提供製備式〖A化合物之方法

IA -13- 201000487 其包含使用_還原酶_112或酮還原酶_113或微生物株念珠 菌山Wa 如·㈠ SC16117(ATCC® 第 565 1 1 號）來酶 促還原以下結構之化合物

以形成以下結構之（R)_醇

且使上述（R)-醇在有機溶劑存在下與以下結構之化合物 縮合

以形成式IA化合物。 【實施方式】 定義 除非另外說明，否則本文中單獨使用或作為另一基團之 一部分使用之術語「低碳烷基」包括含有丨至8個碳原子之 直鏈及具支鏈烴，且本文中單獨使用或作為另一基團之一 部分使用之術語「烷基」及「烷」包括在正鏈中含有is 20個碳原子、較佳1至ίο個碳原子、更佳1至8個碳原子之 直鏈及具支鏈烴’例如甲基、乙基、丙基、異丙某、丁 140588.doc -14- 201000487

基、第三丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、 4,4-二曱基戊基、辛基、2,2,4-三曱基戊基、壬基、癸基、 十一烷基、十二烷基、其各種具支鏈異構體、及類似基 團、以及包括1至4個例如以下之取代基之該等基團：鹵素 (例如F、Br、C1或I)或CF3、烷基、烷氧基、芳基、芳氧 基、芳基（芳基）或二芳基、芳基烷基、芳基烷氧基、烯 基、炔基、環烷基、環烯基、環烷基烷基、環烷基烷氧 基、羥基、羥基烷基、醯基、烷醯基、雜芳基、雜芳氧 基、雜環烷基、芳基雜芳基、芳基烷氧基羰基、雜芳基烷 基、雜芳基烷氧基、芳氧基烷基、芳氧基芳基、烷基醯胺 基、烧酸基胺基、芳基叛基胺基、梢基、氮基、硫醇、1¾ 代烧基、三ώ代烧基及/或烧硫基。 除非另外說明，本文中單獨使用或作為另一基團之一部 分使用之術語「環烷基」包括含有1至3個環之飽和或部分 飽和（含有1或2個雙鍵）環烴基團，該等基團中之任一個可 視需要為螺旋基取代環烷基，包括單環烷基、雙環烷基及 三環烷基，其總共含有3至20個形成環之碳，較佳3至10個 形成環且可稠合為1或2個針對芳基所述之芳香族環之碳， 該等基團包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚 基、環辛基、環癸基及環十二烷基、環己烯基、

該等基團中之任一個可視需要經1至4個例如以下之取代 140588.doc -15 - 201000487 基取代：画素、垸基、燒氧基、經基、芳基、芳氧基 基烷基、環烷基、垃其納 ^ 土 -藍私基、烧醯基胺基、側氧基、酿 基、芳基羰基胺基、石亩其 ^ 启基、氰基、硫醇及/或烧硫基及/哎 任一烷基取代基。 本文中單獨使用或 飞作為另一基團一部分使用之術語「鹵 素」或「鹵代」伤尨备 ^ 〜」你知《I、溴、氟、及碘、及CF 苴中負 或氟較佳。 八氣 術語「金屬離子 J係私堵如鈉、鉀或鋰等鹼金屬離子及 諸如鎂及料驗土金屬離子、以及辞及紹。 術。。刖藥」涵蓋術語「前藥醋」及術語「前藥醚」且 可包括其醫藥上可技总+碰 — 接又之鹽。本文所用術語「前藥酯」包 括精由^下方式形成之醋及碳酸酯：採用熟習此項技術者 二&序使本發明化合物之—或多個經基與烧基、烧氧 基或方基取代之醯化劑或磷酸化劑反應以生成乙酸醋、特 戊西夂酉曰ψ基碳酸醋、苯甲酸醋、胺基酸醋、碟酸醋及諸 如此類。 邊等前藥酯之實例包括 0 Ο

〇 0 0

ΝΗ2 0 II Ο 、Ra〇/ ~ORa ; 或 Η〇2〇 — (CH2)y — C^〇u\n (y=l 至 4) 術語 — 則藥醚」包括磷酸乙縮醛及〇-葡萄糖苷二者 等前藥醚之代表性實例包括 。該 140588.doc -16- 201000487

RaO〆

或

OH Ο

在上式中’ R係烷基或Η，且1^係η、烷基或苄基。 鹽及立體異構體

本發明化合物（包括化合物认及ΙΒ)在呈前藥形式時可以 鹽形式存在，此亦在本發明範圍内。醫藥上可接受之（即 無毒性、生理上可接受）鹽較佳。若本發明化合物具有（例 如）至少一個鹼性中心，則其可形成酸加成鹽。例如，該 等酸加成鹽係用無機強酸來形成，例如礦物酸，例如硫 酸、磷酸或氫鹵酸；係用有機羧酸來形成，例如具有丨至# 個碳原子之烷羧酸，例如未經取代或經（例如）_素取代之 乙酸（例如氣乙酸），例如飽和或不飽和二羧酸（例如草酸、 丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、鄰笨二曱酸或對苯二 甲酸）’例如羥基羧酸（例如抗壞血酸、羥基乙酸、乳酸、 顏果酸、酒石酸或擰檬酸），例如胺基酸（例如天冬胺酸或 麩胺酸或離胺酸或精胺酸）、或笨曱酸；或用有機磺酸來 形成，例如未經取代或經（例如）_素取代2(Ci_C4)烷基或 芳基磺酸’例如甲基-或對曱苯_磺酸。若期望，亦可形成 存在另一鹼性中心之相應酸加成鹽 具有至少一個酸性基 團（例如COOH)之本發明化合物亦 言，與鹼形成之適宜鹽為金屬鹽， 可與鹼形成鹽。舉例而 例如鹼金屬或鹼土金屬 鹽，例如鈉、卸或錢鹽； 嗎淋、硫嗎琳、六氫。比咬 或與氨或有機胺形成 之鹽，例如 、°比嘻啶；單-、二-、或三低碳 140588.doc 201000487 烧基胺’例如乙基-、當__ 三乙基-、三丁 q 基…二乙基_、二異丙基_、 基-或二甲基_丙胺；或單_、二_、或三羥基 低碳烧基胺，例如單 一 内鹽。本發明亦包括乙醇胺…卜可形成相應 明遊離化合物或其醫 ⑴”料 本發明化合物之含有又孤之刀離或純化之鹽。 有鹼性基團之較佳鹽包括單氫氣化 V-風现、甲燒續酸鹽、碟酸鹽、石肖酸鹽或乙酸鹽。 本發明化合物之令古& ^ 有敲性基團之較佳鹽包括鈉、鉀及鎂 鹽及醫樂上可接受之有機胺。 本發明涵蓋本發明彳卜a你々^ 士 物形式或呈純淨或其本二立體異構體’其呈混合 ^ 域本純#之形式。本發明化合物可在包 广取代基在内之任-碳原子處具有不對稱中心。因 混對映異構或非對映異構形式或以其 "子在。a備方法可採用外消旋體、對映異構體 3非對映異構體作為起始材料。在穿I # ^ ^ 1備非對映異構或對映 段、=物時’可藉由習用方法將其分離’例如層析法或分 醫藥組合物及組合 小，據本發明之某些實施例’提供醫藥組合物，其包含至 >、—種本文所述化合物及至少—種㈣上可接受 或載劑。本發明醫藥組合物 h 以T彡』 优而要包括至少一種選自由 举劑、:：：ί額外治療藥劑：抗肥胖症藥劑、㈣ ρ夂」抑#樂劑、抗焦慮藥劑、消炎劑、食欲抑制劑、 牛膽固醇/脂質藥劑、及升狐藥劑、及本文所定義=外 I40588.doc ‘18. 201000487 治療藥劑。 本發明亦係關於醫藥組合，其包含至少一種本發明化合 物、及至少—種選自由以下組成之群之額外治療藥劑：抗 肥胖症藥劑、抗糖尿病藥劑、抗㈣藥劑、抗焦慮藥劑、 消炎劑、食欲抑制劑、降膽固醇/脂質藥劑、及升狐藥 劑、及本文所定義額外治療藥劑。 根據本發明-實施例’抗糖尿病藥劑選自由以下組成之 群騰島素促刀/必劑、胰島素敏化劑、葡糖激酶抑制劑、 糖皮質激素拮抗劑、果m，6_^酸酶抑制劑、AMp激酶 活化劑、腸降金糖素調節劑、葡糖苦酶抑制劑、搭糖還原 酶抑制劑、PPAR γ激動劑、ppAR以激動劑、ppAR δ抬抗 別或激動劑、PPAR α/γ雙重激動劑、丨LpjsD]抑制劑、 二肽基肽酶IV(DP4)抑制劑、諸如達利清（dapagim〇zin)等 SGLT2抑制劑、胰島素、高血糖素樣狀-丨叫卩心）、glh 激動劑、及PTP-1B抑制劑。 根據本發明一實施例，額外治療藥劑係抗肥胖症藥劑。 與本發明化合物組合使用之適宜抗肥胖症藥劑之實例包括 黑皮I素欠體（MC4R)激動劑、大麻素受體調節劑、内源 性大麻素合成調節劑、GPR11 9激動劑、脂肪吸收抑制 劑、生長荷爾蒙促分泌劑受體（GHSR)拮抗劑、加蘭肽 (galamn)雙體調節劑、阿立新（〇rexin)拮抗劑、S(3LT2抑制 劑、DPP4抑制劑、三重單胺重攝取抑制劑、cCK激動劑' GLP-1激動劑、及其他高血糖素前原衍生肽；Νργι或 ΝΡΥ5拮抗劑、ΝΡΥ2及ΝΡΥ4調節劑、促腎上腺皮質素釋放 140588.doc -19· 201000487 因子調節劑、組胺受體-3(H3)調節劑、ap2抑制劑、ppAR 7調節劑、PPAR δ調節劑、乙醯C〇a羧化酶（ACC)抑制劑、 硬脂醯Co-A去飽和酶-USCD-i)抑制劑、η_β_Η^_Ηίρ. 劑、脂聯素受體調節劑；β3腎上腺素能激動劑、甲狀腺受 體β調節劑、脂肪酶抑制劑、金清素受體激動劑、單胺重 攝取抑制劑或釋放劑、厭食藥、CNTF(睫狀神經營養因 子）、bdnf(腦源性神經營養因子）、瘦素及瘦素受體調節 劑、大麻素-1受體反向激動劑/中性拮抗劑、DGAT抑制 劑、鴉片劑拮抗劑、及澱粉素受體調節劑。 較佳抗肥胖症藥劑包括SGLT2抑制劑，例如美國專利第 6,414，126號中所揭示之彼等。最佳抗肥胖症藥劑包括達利 清（dapaglifl〇zin)及脂肪酶抑制劑，例如奥利斯特 (odistat);或單胺重攝取抑制劑或釋放劑，例如芬氟拉明 (fenfluramine)、右芬氟拉明（dexfenfluramine)、氟伏沙明 (fluvoxamme)、氟西汀（flu〇xetine)、帕羅西汀&⑽如丨时）、 舍曲林（sertraline)、對氯苯丁胺（cM〇rphentermine)、氣福 雷司（cloforex)、氯特胺（cl〇rtermine)、匹西雷司 (PicU〇rex)、西布曲明（sibutramine)、右旋安非L命 (dexamphetamine)、芬特明（phentermine)、苯丙醇胺 (phenylpropan〇iamine)或馬 n引哚（mazind〇i)。 使用方法 根據本發明-實施例，提供在需要治療之患者中治療肥 胖症之方法，其包含單獨投與或與一或多種額外抗肥胖症 藥劑組合投與治#有效量之至少一種本發明化纟物其中 140588.doc -20· 201000487 該肥胖症藥劑係選自本文所述之彼等。 根據本發明一實施例，提供在需要治療之患者中治療糖 尿病 '尤其II型糖尿病之方法，其包含單獨投與或—或多 種額外抗糖尿病藥劑組合投與治療有效量之至少—種本發 明化合物，其中該糖尿病藥劑係如本文所述。 大 根據本發明一實施例，提供在患者中治療抑鬱症之方 法，其包含投與治療有效量之至少一種本發明化合物。 根據本發明一實施例，提供在需要治療之患者中治療焦 慮症之方法包含投與治療有效量之本發明化合物。 根據本發明—實施例’提供治療炎症性腸病之方法，装

所述化合物來增強認知增強劑之效應， 抑制劑（例如他克林（tacrine))、毒蕈鹼 米拉美林（milameline))、煙鹼激動劑、

140588.doc 201000487 麩胺酸受體（AMPA及NMDA)調節劑、及神經營養劑（例如 0比拉西坦（piracetam)、左乙拉西坦（ievetiracetam))。可與 本發明化合物組合使用之治療阿兹海默氏症（Alzheimer's disease)及認知病症之適宜治療之實例包括杜尼匹次 (donepezil)、他克林、利斯的明（rivastigmine)、5ΗΤ6,γ 分 泌酶抑制劑、β分泌酶抑制劑、SK通道阻斷劑、Maxi-K阻 斷劑、及KCNQs阻斷劑。 本發明中所述化合物可用於增強用於治療帕金森病之藥 劑之效應。用於治療帕金森病之藥劑之實例包括·具有或 不具有COMT抑制劑之左旋多巴（丨evad〇pa)、抗麩胺酸能藥 物（金剛烷胺、利魯唑（riluz〇le))、α_2腎上腺素能拮抗劑 (例如依達唑烷（idazoxan))、鴉片劑拮抗劑（例如納曲酮 (naltrexone))、其他多巴胺（d〇pamine)激動劑或轉運蛋白調 節劑（例如累匹利洛（ropinir〇le)或普拉克索 或神經營養因子（例如神經膠質衍生神經營養因子 (GDNF)) 〇 可以口服劑型投與本發明化合物。該醫藥組合物之劑型 括服d 3L，例如顆粒劑、散劑、旋劑、膠囊、糖將 二、乳：、懸浮液等；及非口服劑型，例如注射劑(例： 下、靜脈内、肌内及腹膜腔内注射劑）、點滴輸注劑、 夕部施用形式（例如鼻喷霧製劑、經皮製 及栓劑⑼如直腸及陰道栓劑)。 等)、 該等劑型可藉^詩醫藥料之本身已知的技術來製 i40588.doc •22- 201000487 4。具體製造程序如下所述。

例如’為製造口服劑塑’將賦形劑（例如乳糖、蔗糖、 /1又粉、甘露醇等）、崩解劑（例如碳酸妈、缓曱基纖維素約 等）、黏合劑（例如α_澱粉、阿拉伯樹膠、羧曱基纖維素、 聚乙烯。比咯啶酮、羥丙基纖維素等）、及潤滑劑（例如滑石 粉、硬脂酸鎮、聚乙二醇6000等）添加至活性組份中並壓 縮所得組合物。在需要時’藉由本身已知之技術塗佈經壓 縮產物，以掩蔽味道或達成腸溶解或持續釋放。可用之塗 佈材料包括（例如）乙基纖維素、經曱基纖維素、聚氡乙二 醇、乙酸鄰苯二甲酸纖維素、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維 素、及EUDRAGIT®(R〇hm & Haas，Germany，甲基丙稀 酸-丙烯酸系共聚物）。 注射劑通常可藉由以下程序來製造。使活性組份與分散 劑（例如 Tween 80 (Atlas P〇wder、u s a )、HC〇 6〇 π·

Chemicais)、聚乙二醇、羧甲基纖維素、藻酸鈉等）、防腐 劑（例如對羥基笨曱酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、苯甲 醇、氣T 、苯紛等）、等渗劑（例如氯化納、甘油、山梨 醇、葡萄糖、轉化糖等)及其他添加劑一起溶解、懸浮或 乳化於水性媒劑(例如蒸餾水、生理食鹽水、林柊容液 (Ringer’s S〇lution)等）或油性媒劑（例如植物油，例如橄欖 油、芝麻油、棉籽油、玉米油等或丙二醇)中。若期望， 亦可添加增溶劑（例如水揚酸鈉、乙㈣等）、穩定劑（例如 人血清白蛋白）、緩解劑(例如氯节院銨、鹽酸普魯卡因 (procaine hydrochloride)等）及其他添加劑。 140588.doc 23 201000487 外部施用劑型可藉由將活性組份加工為固體、半固體或 液體組合物來製造。例如，為製造固體組合物，將活性組 份以原樣或其與賦形劑（例如乳糖、甘露醇、澱粉、微晶 纖維素、蔗糖等）、增稠劑（例如天然樹膠、纖維素衍2 物、丙烯酸類聚合物等）等之混合物形式加工為散劑。液 體組合物可以與上述注射劑基本相同之方式來製造。半固 體組合物較佳以水合或油性凝膠形式或軟膏劑形式來提 供。該等組合物可視需要尤其含有pH控制劑（例如碳酸、 麟酸、捧樣酸 '鹽酸、氫氧化納等）、及防腐劑（例如封經 基苯甲酸酯、氯丁醇、氯苄烷銨等）。 栓劑可藉由將活性組份加工為固體、半固體或液體油性 或水性組合物來製造。可用油質基質包括（例如）高級脂肪 酸甘油酯[例如可可子油、Witepsols (Dinamh_N〇bei)等]、 中鏈脂肪酸[例如Migriols (Dinamit_N〇bel)等]、植物油（例 如芝麻油、豆油、棉籽油等）等，水溶性基質包括（例如）聚 乙二醇、丙二醇等。親水性基質包括（例如）天然樹膠、纖 維素衍生物、乙烯基聚合物、及丙烯酸類聚合物等。 劑量 本發明醫藥組合物之劑量可適宜地參照針對各活性組份 所推薦之劑量來確定，且適宜地尤其可根據接受者、接受 者之年齡及體重、當前臨床狀態、投藥時間、劑型、投與 方法、及各活性組份之組合來選擇。舉例而言，胰島素敏 感性增強劑用於成人之劑量可選自〇.〇1_3〇 mg/kg體重（較 佳0.05-10 mg/kg體重、更佳0.05-5 mg/kg體重）之臨床口服 140588.doc -24- 201000487 劑$範圍或〇·〇〇5_1〇 mg/kg體重（較佳〇 〇1·1〇 體重、 更佳0.01-1 mg/kg體重）之臨床非經腸劑量範圍。其他具有 同作用模式且可組合使用之活性組份亦可以參照各推薦 臨床劑量範圍選擇之劑量範圍來使用。 本發明醫藥組合物中活性組份之比例尤其可適宜地根據 . 接受者、接受者之年齡及體重、當前臨床狀態、投藥時 間劑型、投與方法、及各活性組份之組合來選擇。 f, 醫藥組合 本發月在其範圍内包括醫藥組合物，其包括治療有效量 之早獨的或與醫藥載劑或稀釋劑組合的至少一種本發明化 合物作為活性成份。視需要，本發明化合物可單獨使用、 與可用於治療上述病症之其他適宜治療藥劑組合使用，該 等’、他/σ療藥劑包括：抗肥胖症藥劑、抗糖尿病藥劑、食 1欠抑制劑、降膽固醇7脂質藥劑、升HDL藥劑、認知增強 劑、用於治療神經變性之藥劑、用於治療呼吸病況之藥 〇 劑、用於治療腸病之藥劑、消炎劑、抗焦慮藥劑、抗抑鬱 藥、抗高血壓藥、強心苷、及抗腫瘤藥劑。 可藉由將各活性組份一起或獨立地與生理上可接受之載 劑、黏合劑、稀釋劑等混合來組合或分開調配本 1明西藥組合。在獨立調配活性組份時，可使用稀釋劑或 諸如此類將各調配物臨時混合並投與，或可在同時或在交 錯時間將其彼此獨立地投與相同個體。因此，可在投與本 發明黑色素集中荷爾蒙受體（MCHR)结抗劑之前、同時、 或之後投與該等其他治療藥劑。 140588.doc -25· 201000487 可與本發明化合物組合使用之適宜抗肥胖症藥劑之實例 包括黑皮質素受體（MC4R)激動劑、大麻素受體調節劑、 生長荷爾蒙促分泌劑受體（GHSR)拮抗劑、加蘭肽受體調 節劑、阿立新拮抗劑、CCK激動劑、GLP-1激動劑、及其 他高血糖素前原衍生肽；NPY1或NPY5拮抗劑、NPY2及 NPY4調節劑、促腎上腺皮質素釋放因子激動劑、組胺受 體-3(H3)調節劑、aP2抑制劑、PPAR γ調節劑、PPAR δ調 節劑、乙醯CoA羧化酶（ACC)抑制劑、ΙΙ-β-HSD-l抑制 劑、脂聯素受體調節劑；β3腎上腺素能激動劑（例如 AJ9677(Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)、或 CP331648 (Pfizer)或美國專利第5,541,204號、第5,770,615號、第 5,491,134號、第5,776,983號及第5,488,064號中所揭示之 其他已知β3激動劑）、曱狀腺受體β調節劑（例如WO 97/21993(U. Cal SF)、WO 99/00353(KaroBio)及 WO 00/ 03 9077(KaroBio)中所揭示之曱狀腺受體配體）、脂肪酶抑 制劑（例如奥利斯特或ATL-962(Alizyme))、血清素受體激 動劑（例如 BVT-933(Biovitrum)或氣卡色林（lorcaserin) (Arena))、單胺重攝取抑制劑或釋放劑（例如芬氟拉明、右 芬氟拉明、氟1伏沙明、氟西汀、帕羅西汀、舍曲林、對氣 苯丁胺、氣福雷司、氣特胺、匹西雷司、西布曲明、右旋 安非他命、芬特明、苯丙醇胺或馬吲哚）、厭食藥（例如托 D比醋（topiramate)(Johnson & Johnson))、CNTF(睫狀神經營 養因子）/AXOKINE® (Regeneron)、BDNF(腦源性神經營養 因子）、瘦素及痩素受體調節劑、或大麻素-1受體反向激動 140588.doc -26· 201000487 劑/中性拮抗劑（例如SR-141716 (Sanofi)或SLV-319 (Solvay))及 DGAT 抑制劑（例如 WO 2006/134317 (Al)(Astra Zeneca)、WO 2006/044775 (A2)(Bayer)、WO 2006/ 06019020 (Al)(Sankyo)、WO 2006/082010 (Al)(Roche)、 WO 2004/047755 (A2)(Japan Tobacco, Tularik)、及 WO 2005/0727401 (A2)(Amgen，Japan Tobacco)中所揭示之彼 等）。 與本發明化合物組合使用之適宜抗糖尿病藥劑之實例包 括：胰島素促分泌劑或胰島素敏化劑（其可包括雙胍、磺 醯脲）、葡糖苷酶抑制劑、醛糖還原酶抑制劑、PPAR γ激 動劑（例如噻唑啶二酮）、PPAR α激動劑（例如纖維酸衍生 物）、PPAR δ拮抗劑或激動劑、PPAR α/γ雙重激動劑、11 -β-HSD-l抑制劑、二肽基肽酶IV(DP4)抑制劑（包括薩沙立 叮（saxagliptin)、維他立叮（vildagliptin)及西他立叮 (sitagliptin))、SGLT2抑制劑（包括達利清（dapagliflozin)及 絲利清（serglifozin))、糖原鱗酸化酶抑制劑、及/或美格替 耐（meglitinide)、以及胰島素、及/或高血糖素樣肽-1 (GLP-1)、GLP-1激動劑、SIRT活化劑（白藜蘆醇 (resveratrol))及/或PTP-1B抑制劑（蛋白質酪胺酸磷酸酶-1B 抑制劑）。 抗糖尿病藥劑可為口服抗高血糖藥劑，較佳為雙胍’例 如二甲雙胍或苯乙雙胍或其鹽，較佳為二曱雙胍HC1。倘 若抗糖尿病藥劑為雙胍，則所用本發明化合物與雙胍之重 量比在約0.001:1至約10:1範圍内，較佳為約〇·〇1:1至約 140588.doc -27- 201000487 抗糖尿病藥劑較佳亦可為磺醯脲，例如格列本脲 (glyburideX也稱作優降糖（gHbenclamide))、格列美脲 (ghmepmde)(揭示於美國專利第4,379,785號中）、格列吡 嗪（glipizide)、格列奇特（gliclazide)或氣磺丙脲、其他已 知磺醯脲或其他作用於P細胞Ατρ依賴性通道上之抗高血 糖藥劑，其中格列本脲及格列吡嗪較佳，且可以相同或以 分開口服劑型對其實施投與。口服抗糖尿病藥劑亦可為葡 糖苷酶抑制劑’例如阿卡波糖（acarbose)(揭示於美國專利 第4,904,769號中）或米格列醇（miglit〇1)(揭示於美國專利第 4,639,436號中），且可以相同或以分開口服劑型對其實施 投與。 本發明化合物可與PPAR γ激動劑組合使用，例如α塞唾咬 一酮口服抗糖尿病藥劑或其他胰島素敏化劑（其對NIDDM 患者具有胰島素敏化效應），例如羅格列酮（rosigHtaz〇ne) (SKB)、口比格列酮（pi〇glitazone)(Takeda)、Mitsubishi 之 MCC-555(揭示於美國專利第5,594,016號中）、Glaxo-

Wellcome 之 GL-262570 、恩格歹酮（englitazone)(CP- 68722 ’ Pfizer)或達格列酮（darglitazone)(CP-86325， Pfizer)、伊格列酮（isaglitazone)(MIT/J&J)、JTT-501 (JPNT/P&U)、L-895645 (Merck)、R-1 19702 (Sankyo/WL)、 NN-2344 (Dr· Reddy/NN)、或 YM-440 (Yamanouchi)，其中 羅格列酮及吡格列酮較佳。 本發明化合物可與PP AR α/γ雙重激動劑一起使用，例如 140588.doc •28- 201000487 MK-767/KRP-297(Merck/Kyorin ;如 Yajima，Κ·等人，dm. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 284:E966-E971 (2003)中戶斤 述）、AZ-242(替賽格列他（tesaglitazar) ; Astra-Zeneca ;如 Ljung, B.等人，《/. 43 :1 855-1 863 (2002)中所 述）；莫格列他（muraglitazar);或美國專利第6,414,002號 中所述之化合物。 本發明化合物可與抗高血脂藥劑或用於治療動脈硬化之 藥劑組合使用。降血脂藥劑之實例可為HMG CoA還原酶 抑制劑，其包括（但不限於）美伐他汀（mevastatin)及美國專 利第3,983,140號中所揭示之相關化合物、洛伐他汀 (lovastatin)(膽甾醇合成抑制素（mevinolin))及美國專利第 4,231，938號中所揭示之相關化合物、普伐他汀 (pravastatin)及美國專利第4,346,227號中所揭示之相關化 合物、辛伐他灯（simvastatin)及美國專利第4,448,784號及 第4,45 0，171中所揭示之相關化合物。本文中可用之其他 HMG CoA還原酶抑制劑包括（但不限於）揭示於美國專利第 5,354,772號中之氟伐他汀（fluvastatin)、揭示於美國專利 第5,006,530號及第5,177,080號中之西立伐他汀 (cerivastatin)、揭示於美國專利第4,681,893號、第 5,273,995號、第5,385,929號及第5,686，104號中之阿托伐 他；丁（ator vast atin)、揭示於美國專利第5,011，930號中之匹 伐他汀（pitavastatin)(Nissan/Sankyo 之尼伐他、汀 (nisvastatin)(NK- 1 04)或伊伐他、;丁（itavastatin))、揭示於美 國專利第5,260,440號中之Shionogi-Astra/Zeneca羅舒伐他 140588.doc -29- 201000487 >丁（rosuvastatin)(維薩他汀（visastatin)(ZD-4522))及揭示於 美國專利第5,753,675號中之相關他汀類（statin)化合物、揭 示於美國專利第4,6 13,610號中之甲瓦龍酸内酯衍生物之吡 岭類似物、揭示於PCT申請案WO 86/03488中之甲瓦龍酸 内酯衍生物之茚類似物、揭示於美國專利第4,647,576號中 之6-[2-(取代吡咯-1 _基）-烷基）吡喃-2-酮及其衍生物、 Searle之sC-45355(3-取代戊二酸衍生物）二氣乙酸鹽、揭示 於PCT申請案W0 86/07054中之咪唑類似物曱瓦龍酸内 6旨、揭示於法國專利第2,596,393號中之3-羧基-2-羥基-两 烧-膦酸衍生物、揭示於歐洲專利申請案第〇22 1025號中之 2,3_二取代°比°各、11夫喃及°塞吩衍生物、揭示於美國專利第 4,686,237號中之曱瓦龍酸内酯之萘基衍生物、揭示於美國 專利第4,499,289號中之八氫萘、揭示於歐洲專利申請案第 0142146A2號中之膽甾醇合成抑制素（洛伐他汀）之酮基類 似物、及揭示於美國專利第5,506,219號及第5,691，322號中 之0f琳及1>比定衍生物。此外，可用於抑制Hmg CoA還原 酶之適用於本文中之次膦酸化合物揭示於GB 22〇5837中。 適用於本文中之角鯊烯合成酶抑制劑包括（但不限於）揭 示於美國專利第5,712,396號中之α-膦醯基_磺酸鹽、彼等 由 Biller 等人闡述於 j 似^ 31:1869-1871 (1998)中 者（包括類異戊二烯（膦基_甲基）膦酸鹽）、以及其他已知角 鯊烯合成酶抑制劑，例如美國專利第4,87l,72l號及第 4,924,024號及Biller，s.a·等人，Cwrr 細，2:1_4〇 (1996)中所揭示者。 140588.doc -30- 201000487 此外，適用於本文中之其他角鯊烯合成酶抑制劑包括由

Ortiz de Montellano, P.等人揭示於 J. Med. C/zem.，20.243 249 (1977)中之類萜焦磷酸鹽、由Corey等人揭示於j C/^m. Soc.，98:1291-1293 (1976)中之法呢基二磷酸鹽類似 物A及前角鯊烯焦磷酸鹽（PSQ-ΡΡ)類似物、由McCUrd R.W.等人報導於乂 C/zew. 109:5544 (1987)中之鱗 基膦酸鹽及由Capson, T.L.報導於博士論文Dept. Med Chem·，Univ. Utah之摘要、目錄頁、第 16、17、4〇_43、 48-51、概述（1987年6月）中之環丙烷。 適用於本文中之其他降血脂藥劑包括（但不限於）纖、維酸^ 衍生物，例如非諾貝特（fenoHbrate)、吉非貝激 (gemfibrozil)、氯貝丁醋（clofibrate)、笨紫貝特 (bezafibrate)、環丙貝特（ciprofibrate)、克利貝特 (clinofibrate)及類似物、普羅布考（probucol)、及美國專利 第3,674,836號中所揭示之相關化合物，普羅布考及吉非貝 齊較佳；膽汁酸螯合劑，例如考來烯胺（cholestyramine；)、 考來替泊（colestipol)及DEAE-葡聚糖凝勝 (Sephadex)(SECHOLEX®，Policexide)及考來膠（cholestagei) (Sankyo/Geltex);以及 LIPOSTABIL® (Rhone-Poulenc)、 EISAI® E-5050(N-取代乙醇胺衍生物）、伊馬昔爾 (imanixil)(HOE-402)、四氫利普他汀（tetrahydrolipstatin) (THL)、抑麻利（istigmastanyl)罐醯膽驗（SPC，Roche)、胺 基環糊精（Tanabe Seiyoku)、味之素（Ajinomoto) AJ-814(甘 菊環（azulene)衍生物）、曱亞油脂酿胺（melinamide) 140588.doc -31 - 201000487 (Sumitomo)、J哀抱素（Sandoz) 58-035、American Cyanamid (1^-277,082和(^-283,546(二取代尿素衍生物）、鹽酸（尼克 酸（niacin))、阿昔莫司（acipimox)、阿昔 α夫喃(acifran)、新 黴素（neomycin)、對胺基水楊酸、阿司匹林（aspirin)、（例 如）揭示於美國專利第4,759,923號中之聚（二烯丙基曱胺）衍 生物、四級銨聚（二烯丙基二甲基氣化銨）及（例如）揭示於 美國專利第4,027,009號中之紫羅烯（i〇nene)、及其他已知 血清降膽固醇藥劑。 其他降血脂藥劑可為AC AT抑制劑（其亦具有抗動脈粥樣 硬化活性）’例如揭示於以下文獻中者：ο/' i/je FMiwre，24:9-15 (1999)(Avasimibe) ; Nicolosi等人，「The ACAT inhibitor, Cl-1011 is effective in the prevention and regression of aortic fatty streak area in hamsters」， Atherosclerosis (Shannon, Irel.), 137(1):77-85 (1998)；

Ghiselli, G., 「The pharmacological profile of FCE 27677 : a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hepatic secretion of ApoB 100-containing lipoprotein」，Cardiovasc. Drug i?ev·，16(1):16-30 (1998); Smith，C.等人，「RP 73163: a bioavailable alky 1 sul finy 1-diphenyl imidazole ACAT inhibitor」， Bioorg. Med. Chem. Lett., 6(1):47-50 (1996) I Krause, B.R. 等人，第 6章：「ACAT inhibitors: Physiologic Mechanisms for Hypolipidemic and Anti-Atherosclerotic Activities in Experimental Animals」，Inflammation: Mediators and 140588.doc -32- 201000487 ，CRC Press 公司，publ.，Ruffolo, Jr·，R.R.等人 編輯，第 173-198 頁（1995) ; Sliskovic 等人，「ACAT inhibitors: potential anti-atherosclerotic agents」，Curr. Med. Chem., 1(3):204-225 (1994) ； Stout^/v » 「Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. 6. The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity. Inhibitors of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT). 7. Development r', '' of a series of substituted N-phenyl-N,-[( 1-phenylcyclopentyl)- methyl]ureas with enhanced hypocholesterolemic activity」， Chemtracts: Org. C/zem.，8(6):359-362 (1 995)，或 TS-962 (Taisho Pharmaceutical有限公司）；以及F-1394、CS-505、 F-12511、HL-004、K-10085 及 YIC-C8-434。 降血脂藥劑可為LDL受體活性之上調劑，例如MD-700(Taisho Pharmaceutical 有限公司）及 LY295427 (Eli (, Lilly)。降血脂藥劑可為膽固醇吸收抑制劑，較佳為

Schering-Plough 之 SCH48461 依折麥布（ezetimibe)以及彼等 揭示於1 15:45-63 (1995)及《/. Med. C/zew·， ' 41:973 (1998)中者。 - 其他脂質藥劑或脂質調節劑可為膽留醇基轉移蛋白抑制 劑（CETP)，例如Pfizer之CP-529,414以及彼等闡述於 WO/0038722 及 EP 818448 (Bayer)及 EP 992496 中者、及 Pharmacia之 SC-744及 SC-795、以及 CETi-Ι及 JTT-705。 降血脂藥劑可為回腸Na+/膽汁酸協同轉運蛋白抑制劑， 140588.doc -33- 201000487 例如 Drwgs ο/ί/ze Fw/wre, 24:425-430 (1999)中所揭示者。 可與本發明組合使用之ATP擰檬酸裂合酶抑制劑可包括（例 如）彼等揭示於美國專利第5,447,954號中者。 其他脂質藥劑亦包括植物雌激素化合物，例如WO 00/30665中所揭示者，包括分離大豆蛋白、大豆蛋白濃縮 物或大豆粉，以及異黃酮，例如染料木黃銅（genistein)、 黃豆苦原（daidzein)、大豆黃素（glycitein)或牛尿紛 (equol)，或WO 00/015 201中所揭示之植物甾醇、植物甾烷 醇或生育三烯酚；β-内醯胺膽固醇吸收抑制劑，例如EP 675714中所揭示者；HDL上調劑，例如LXR激動劑、 PPAR α-激動劑及/或FXR激動劑；LDL分解代謝促進劑， 例如EP 1 022272中所揭示者；鈉-質子交換抑制劑，例如 DE 19622222中所揭示者；LDL受體誘導劑或甾體糖苷， 例如美國專利第5,698,527號及GB 2304106中所揭示者；抗 氧化劑，例如WO 94/15592中所揭示之β-胡蘿蔔素、抗壞 血酸、α-生育酚或視黃醇，以及維生素C及抗高半胱胺酸 藥劑，例如葉酸、葉酸鹽、維生素Β6、維生素Β12及維生 素Ε ; WO 97/3 5 5 76中所揭示之異煙肼；WO 97/48701中所 揭示之膽固醇吸收抑制劑、HMG-CoA合成酶抑制劑、或 羊毛留醇去甲基酶抑制劑；治療血脂異常之PPAR δ激動 劑；或WO 2000/050574中所揭示之甾醇調節元件結合蛋 白-I (SREBP-1)，例如鞘脂，例如神經醯胺、或中性鞘磷 脂酶（N-SMase)或其片段。較佳降血脂藥劑係普伐他汀、 洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、匹伐他 140588.doc -34- 201000487 /丁、羅舒伐他汀、及依折麥布以及尼克酸及/或考來膠。 本發明化合物可與抗高血壓藥組合使用。可與本發明化 δ物、、且5使用之適宜抗咼血麼藥之實例包括β_腎上腺素能 阻斷劑、鈣通道阻斷劑（L_型及/或τ_型；例如地爾硫卓 (diltiazem)、維拉帕米（verapamil)、硝苯地平㈤如㈣狀）、 胺氣地平（amlodipine)及咪拉地爾（mibefradil))、利尿劑（例 如氣噻唑、氫氯噻唑、氟甲噻唑、氫氟甲噻唑 '苄氟噻 坐甲基氣°塞。坐、二氣°塞°秦、泊利°塞唤（polythiazide)、节 0塞嗪、依他尼酸（ethacrynic acid)、替尼酸（ticrynafen)、氯 嗟酮（chlorthalidone)、吱塞米（furosemide)、莫索利明（莫 索利明（musolimine))、布美他尼（bumetanide)、胺笨蝶。定 (triamterene)、阿米洛利（amii〇ride)、螺内酯）、腎素抑制 劑、ACE抑制劑（例如卡托普利（capt〇pr丨1)、佐芬普利 (zofenopril)、福辛普利（fosin〇pril)、依那普利（enalaprU)、 西諾普利（ceranopril)、希拉普利（cilazopril)、地拉普利 (delapril)、喷托普利（pentopril)、喹那普利（quinapril)、雷 米普利（ramipril)、賴諾普利（lisin〇pril))、AT-1受體拮抗劑 (例如氣/少坦（losartan)、厄貝沙坦（irbesartan)、顯沙坦 (valsartan))、ET受體拮抗劑（例如塞塔生坦（sitaxsentan)、 阿曲生坦（atrasentan)及美國專利第5,612,359號及第 6,043,265號中所揭示之化合物）、雙重£丁/八11拮抗劑（例如 WO 00/01389中所揭示之化合物）、中性内肽酶（NEP)抑制 劑、血管肽酶抑制劑（雙重NEP-ACE抑制劑）（例如奥馬曲拉 (omapatrilat)及真莫帕利（gern〇patrilat))、及石肖酸鹽。 140588.doc -35- 201000487 MCHR 1拮抗劑可用於治療與肥胖症相關之其他疾病， 包括睡眠病症。因&，本發明所述化合物可與治療睡眠病 症之藥物組合使用。可與本發明化合物組合使用之治療睡 眠障礙之適宜藥物的實例包括褪黑激素類似物、褪黑激素 受體拮抗劑、ML 1 B激動劑、GABA受體調節劑；nmda 受體調節劑、組胺-3(H3)受體調節劑、多巴胺激動劑及阿 立新受體調節劑。 MCHR 1拮抗劑可降低或改善物質濫用或成癮病症。因 此，大麻素受體調節劑與用於治療成癮病症之藥劑之組合 可減少劑量需要或改良現有成癮病症藥物之效力。用於治 療物質濫用或成癮病症之藥劑之實例係：選擇性血清素重 攝取抑制劑（SSRI)、美沙酮（methad〇ne)、丁丙諾。非 (buprenorphine)、尼古丁及安非他酮（bupr〇pi〇n)。 MCHR 1拮抗劑可減少焦慮症或抑鬱症；因此，本發明 所述化合物可與抗焦慮藥劑或抗抑鬱藥組合使用。可與本 發明化合物組合使用之適宜抗焦慮藥劑之實例包括苯并二 氮卓（例如地西沣（diazepam)、勞拉西泮（i〇razepam)、奥沙 西泮（oxazepam)、阿普唾侖（aipraz〇iain)、氣氮卓 (chlordiazepoxide)、氣石肖西泮（clonazepam)、二鉀氣氮卓 (chlorazepate)、哈拉西泮（halazepam)及普拉西泮 (prazepam))、5HT1A受體激動劑（例如丁螺環酮 (buspirone)、氟辛克生（flesinoxan)、吉狐隆（gepirone)及伊 沙匹隆（ipsapirone))、及促腎上腺皮質素釋放因子（CRF)拮 抗劑。 140588.doc 36- 201000487 可與本發明化合物組合使用之適宜種類抗抑鬱藥之實例 包括去甲腎上腺素重攝取抑制劑（三級及二級胺三環抗抑 鬱藥）、選擇性血清素重攝取抑制劑（SSRI)(氟西汀、氟伏 "月帕羅西>丁及舍曲林）、單胺氧化酶抑制劑（MAOI)(異 卡波肼（isocarboxazid)、苯乙肼（phenelzine)、反苯環丙胺 (tranylCypromine)、司來吉蘭（selegiline))、單胺氧化酶之 了逆抑制劑（RIMA)(嗎氣貝胺（moci〇bemjde))、血清素及去 甲腎上腺素重攝取抑制劑（SNRI)(文拉法辛（ven][afaxine))、 促腎上腺皮質素釋放因子（CRF)受體拮抗劑、α_腎上腺素 能受體拮抗劑、及非典型抗抑鬱藥（安非他酮、鋰、奈法 丄酉同（nefazodone)、曲。坐酮（traz〇(jone)及維洛沙秦 (viloxazine))。 習用抗精神病藥物與MCHR 1拮抗劑之組合亦可在精神 病或狂躁症治療中促進症狀減輕。此外，此一組合可使得 症狀快速減輕，從而降低用抗精神病藥劑實施長期治療的 需要。此一組合亦可降低有效抗精神病劑量需要，從而使 得可降低發生長期抗精神病治療通常具有的運動功能障礙 的可能性。 可與本發明化合物組合使用之適宜抗精神病藥劑之實例 包括以下種類之抗精神病藥劑：吩嗟嗓（氣丙唤、美索達 嗪（mesoridazine)、硫利噠嗪（thi〇ridazine)、醋奮乃靜 (acetophenazine)、氟奮乃靜（fluphenazine)、奮乃靜 (perphenazine)及三氟拉嗪（trifluoperazine))、9-氧硫 p山口星（氣普噻噸（chlorprothixene)、替沃噻噸（thiothixene))、 140588.doc -37· 201000487 雜ί哀二本并氣卓（氣氣平（clozapine)、奧蘭紫平 (olanzapine)及阿立呱唑（aripiprazole))、苯丁酮（氟„瓜咬醇 (haloperidol)) '二苯基丁基六氫α比啶（匹莫齊特⑻则^心）) 及吲哚酮（嗎吲哚酮（molindolone))。與本發明化合物組合 之具有潛在治療價值之其他抗精神病藥劑包括洛沙平 (loxapine)、舒必利（sulpiride)及利培酮（risperid〇ne)。 本發明化合物與習用抗精神病藥物之組合亦可為精神分 裂性卩早礙之冶療知^供增強治療效應’如上文關於狂躁病症 所述。本文所用精神分裂性障礙包括妄想彺樣、混亂型、 緊張型、未分化型及殘留型精神分裂症、精神分裂症樣精 神P早礙、感性分裂症、妄想症、短時精神障礙及未指明 精神障礙。可與本發明化合物組合之適宜抗精神病藥物之 實例包括上述抗精神病藥物，以及多巴胺受體拮抗劑、毒 簟鹼受體激動劑、5HT2A受體拮抗劑及5HT2A/多巴胺受體 枯抗劑或部分激動劑（例如奥蘭紮平、阿立呱唑、利典 _、齊拉西酮（ziprasidone))。 製備方法 如方案1中所概述，藉由式1A及1B之結構表示之本發明 化合物可用—個步驟來製備：在諸如熱EtOH或較佳熔融 苯酚等有機溶劑中藉由縮合式2化合物與式3化合物來生成 本發明化合物。 140588.doc •38· 201000487

Λ j〇c烷基 :>R2 'r3 (9)

〇2N 方案1 pH ^^O-CHz C—.- 1 J ； lR2烷基、、Y R3 5a OHh2n 以 0-院基:、、fR2 R3 3

Hal.

O R1 (7)

〇2N jCC^1G览基 8

OH (hN^^O.烷基 5b R1

OH 0-CH2-C-R.1 〇·烷基'吝 R2 式2化合物可根據全文以引用方式併入本文中的

W02003/03 3476中所述藉由加熱式4化合物與二曱基甲醯 胺二甲基縮醛來製備。 式4化合物之製備闡述於w〇 1998/49899中，其係全文以 引用方式併入本文中。 式3之苯胺可藉由在諸如Et〇H、MeOH等溶劑中或在乙 酸乙醋-醇共溶劑中使用諸如Pd/C等觸媒實施催化氫化而 還原式5a或5b硝基芳香族化合物來製備（方案1)。 或者，R為環烧基環且不存在虛線及R2與R3二者之式外 化合物可藉由以下方式來製備：例如使用諸如酮還原酶 140588.doc -39- 201000487 (KRED) 112或酮還原 _(KRED) 113(Biocatalytics 公司）等 酮還原酶對酮8實施酶促還原，或例如使用念珠菌 (C^山.办j贿、）SC16U7(ATCC⑧第5651 1號）對酮8實 施微生物轉化來產生醇5b。 或者，可藉由在諸如EtOAc等溶劑中用SnCl2還原式53或 5b化合物來生成式3之苯胺。 最谷易地，R1為環烷基環且不存在虛線及尺2與R3二者之 式5b化合物可藉由依序實施烷基化及還原序列自式6化合 物來製備.其中需要在諸如DMF等溶劑中於諸如CS2C〇3或 K2C〇3等鹼存在下用適宜烷基化劑（例如繪示為式7之α_鹵 代酮）使化合物6烷基化，之後還原十間體酮8。還原可在 非對掌性條件下採用諸如NaBH4等試劑在諸如Et〇H等溶劑 I達成，之後實施解析；或可在對掌性條件下採用酶或對 旱性試劑藉由熟習此項技術者方便獲知之程序來達成。 不存在R1且藉由虛線連接經取代碳環且存在r2與R3之式 ，代化合物可藉由以下方式直接製備：在介於i.180:c 之溫度下於諸如85% MeCN/H2〇等溶劑中（其含有充足

NaH2P〇4以在反應進行期間緩衝pH)以加熱方式或藉由微 波爐來加熱式6化合物之鹼金屬鹽κ)與式9環氧化 物。 式9之環氧化物係自市場上購得或可採用熟習此項技術 易於獲知之程序來容易地製備。 應理解’儘管在本文中已根據具體描述之具體實施例闡 、’〔了本發明，但該等實施例表現為對本發明—般原理之描 140588.doc -40- 201000487 述，且本發明並不受限於該等實施例。熟習此項技術者可 容易地瞭解某些不背離本發明真實精神及範圍之對任一給 定材料、製程步驟或化學式之修改及改變，且所有該等修 改及改變皆應視為在下文申請專利範圍之範圍内。 縮寫 本文採用以下縮寫：

Ph=苯基 Bn=节基 f % t-Bu^第三丁基 Me=甲基 Et=乙基 TMS =三甲基甲石夕:¾基 TBS=第三丁基二甲基曱矽烷基 THF=四氫口夫喃 Et2〇=·^乙鍵 (^ EtOAc=乙酸乙醋 DMF =二甲基甲醯胺 MeOH=甲醇 EtOH=乙醇 i-PrOH=異丙醇 HOAc 或 AcOH=乙酸_ TFA=三氟乙酸 i-Pr2NEt=二異丙基乙胺 Et3N=三乙胺 140588.doc -41 - 201000487 DMAP=4-二曱基胺基吡啶

NaBHf蝴氫化納 n-BuLi =正丁基鋰

Pd/C=碳上！巴 KOH=氫氧化鉀

NaOH=氫氧化納

LiOH=氫氧化鋰 K 2 C Ο 3 =碳酸钟

NaHC〇3 =碳_酸氫鈉

Ar=氬 N2=氮 min=分鐘 h或hr=小時 L =升 mL=毫升 μί =微升 g=克 mg=毫克 mol=莫耳 mmol=毫莫耳 meq=毫當量 RT=室溫 sat或sat'd=飽和的 aq. =水性的 140588.doc -42 201000487 TLO薄層層析 HPLC=高效液相層析 LC/MS=高效液相層析/質譜 MS 或 Mass Spec=質譜 NMR=核磁共振 mp =溶點 實例 以下實例用於更好地闡釋而非限制本發明某些較佳實施 例。 若可能，採用模塊收斂方法來製備以下實例，其中需要 合成適宜苯胺，與曱醯胺縮合以生成生物活性噻吩并嘧啶 酮，之後進行修飾以將醇部分轉化為前藥。 實例1

A. 2-溴-1-環丙基甲酮

遵循 Calverley, .專尺在 Tetrahedron Lett., 43:4609 (1987)中闡述之程序，在0°C下經5 min將Br2(21.72 mL，422 mmol)添加至1-環丙基曱酮（35.44 g, 421 mmol)存於MeOH (250 mL)中之溶液中。在<10°C下將所得深橙色溶液攪拌 140588.doc -43- 201000487 50 min，此時發生脫色。在移除冰浴後在“它下將混合 物另外授拌0.5 h ;隨後添加30如水。另外攪拌ΐ5 “η 後，用90 ml水稀釋反應物，之後用2〇〇 mL扮2〇 實施 萃取。依序用lMNa2CO3(150ml)及鹽水（100mi)來洗滌合 併有機層，之後用無水MgS〇4進行乾燥。在使用旋轉蒸發 貝施過濾及濃縮後，獲得呈無色油形式之粗產物。隨後

在13 mm Hg下實施洛顧，從而產生40.9 g呈沸點為58-62°C 之無色油形式之2_溴_；!_環丙基甲酮。lH NMR (5〇〇 MHz， CDC13) δ ppm 0.95-1.03 (m, 2H), 1.08-1.15 (m, 2H), 2.13-2.21 (m, 1H), 4.00 (s, 2H)。 B. 1-環丙基-2-(2-甲氧基_4_硝基苯氧基）乙酮

將A項中製備之4_硝基愈創木g分鉀鹽水合物（31.7 g，I” mmol)及2-溴-1-環丙基甲酮（29 4 g，18〇 mm〇1)存於dmf (310 mL)中之橙色懸浮液在8〇t：下加熱lh。LC-MS分析揭 不其完全轉化為產物。用水（932 ml)稀釋所得黃色反應混 合物並將混合物攪拌4 hr同時使其冷卻至⑽乞。隨後實施 過遽產生黃色遽餅，在用15〇 mL HW洗滌3x後將其風乾， 產生34.6 g呈淡黃色固體形式之卜環丙基_2_(2_甲氧基·4硝 基笨氧基）乙酮。Μ.Ρ. 112-113Τ： 4 NMR (400 MHz， CDC13) ： δ ppm 0.95-1.03 (m, 2H), 1.13-1.18 (m, 2H), 2.15-2.23 (m, 1H), 3.95 (s, 3H) > 4.86 (s, 2H), 6.73 (d, J=8.7 Hz, 140588.doc -44- 201000487 1H), 7.75 (d，J=2.7 Hz, 1H), 7_82 (dd，J=8_7, 2.7 Hz, 1H)。 ,3C NMR (loo MHz, CDC13) δ ppm 205.2, 152.7, 149.1, 117.3，111.6，106.9，73.5，56.3，17.1，12_0。HPLC : 5.8 min保留時間，98.7% API ; ZORBAX® 管柱 SB Cl 8 4.6x75 mm ;流速2.5 ml/min ;梯度溶劑系統：100%A:0% B至0% A:100°/〇 B，保持8 min(溶劑 A : 10% MeOH-90% H2O=0.2% H3P04 ;溶劑 b : 90% MeOH-10% H2O+0.2% H3P04)，在 220 nm下檢測。LC/MS: m/e 252.3 (M+H) ; 4 min梯度；保 留時間2.35 min。 C. (R)-l-環丙基-2-(2-甲氧基-4-硝基苯氧基）乙醇（C項（R)-醇）

C.製備（1) 在0°C下，經15 min，向B項中製備之1-環丙基-2-(2-甲氧 基-4-硝基苯氧基）乙g同（34.6 g, 138 mmol)存於EtOH (356 mL)中之黃色懸浮液中添加NaBH4 (3」g，μ mm〇1)。在移 除冰浴後，使溫度保持不超過201：，同時再攪拌反應物35 分鐘。在此期間顏色逐漸變為更深的黃色。使用冰浴冷卻 經攪拌反應物至約1(TC，之後小心地添加H〇Ac (12 mL， 210 mmol) ’以使Η2氣之釋放速率降至最低。在氣體釋放 停止後攪拌0.5 h，之後在真空下使用旋轉蒸發器濃縮黃色 懸浮液’以移除約300 mL Et〇H。在用h2〇洗滌並風乾 140588.doc •45- 201000487 後’過濾’產生淡黃色固體（28.7 g)。隨後進一步濃縮渡 液’以移除大部分EtOH ’從而導致形成更多沉殿，其在 實施如上文所述過濾後’同樣再產生4.9 §期望產物。合併 兩部分而獲得33_6 g外消旋1-環丙基-2-(2-甲氧基_4_硝基苯 氧基）乙醇。 藉由使用 CHIRALPAK® AD-H(3x25 cm，5 μπι)管柱在對 掌性SFC條件下進行對掌性層析解析法來解析存於2/1 MeCN/i-PrOH (451 mL)中之外消旋^環丙基_2_(2甲氧基_ 4-硝基苯氧基）乙醇（45.1g, mmol)。該層析條件採用c〇2/i_ PrOH之85/15混合物作為流動溶劑，在^七下流速為ι3〇 mL/min ’ BPR壓力保持在1〇〇巴且檢測器波長為234 nM。 每0.7 mL注入物需要7 min之運行時間。在234 ηιητ，根 據SFC/ UV面積％ ’使用分析性SFC條件測定r對映異構體 之對掌性純度大於9%。在真空下使用旋轉蒸發器濃縮 所得洗脫液，產生呈黃色油形式之環丙基_2_(2_曱氧 基-4-石肖基本氧基）乙醇。隨後將其溶於wo mi EtOH中並再 濃縮，產生呈黃色油形式之標題化合物，其在高真空不乾 燥過夜後，固化形成淡黃色固體（20.9 g)。M.P. 4 NMR (400 MHz, CDC13) ： δ ppm 0.30-0.37 (m, 1H), 0.42- 0.50 (m, 1H), 0.55-0.69 (m, 2H), 0.97-1.08 (m, 1H), 2.40-2.70 (bs, 1H), 3.41 (ddd, J=8.3, 8.3, 2.7 Hz, 1H) ' 3.93 (s 3H), 4.10 (dd，J=9.3, 8.0 Hz, 1H), 4.23 (dd，J=9.3, 2.7 Hz, 1H) ' 6.95 (d, /=8.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.89 (dd，J=8.8，2.2 Hz, 1H)。13C NMR (loo MHz, CDC13) ppm 140588.doc -46· 201000487 153.7, 149.2, 141.7, 117.6, 111.5, 106.7, 74.4, 73.5, 56.2, 13.4, 2.7，2.0。HPLC : 6.26 min保留時間，98.7% API ; ZORBAX® 管柱 SB C18 4_6x75 mm ;流速2.5 ml/min ;梯度 溶劑系統：1〇〇%Α:0% B至0%A:100% B，保持8 min(溶劑 A ： 10% MeOH-90% H2O=0.2% H3P04 ;溶劑 B : 90% MeOH-10% H2O + 0.2% H3P04)，在 220 nm下檢測。LC/MS: m/e=254.3 (M+H) o 對掌性HPLC :藉由HPLC層析在35°C下使用CHIRALPAK® AD-H, 25 x4.6 mm ID ; 5 μιη管柱來分析光學純度，其中流 動相為80/20混合物CO 2/異丙醇，在100巴下，以2 mL/ min 之流速運行。在該等條件下，在第7分鐘時洗脫出期望R對 映異構體，之後在第8.5 min時洗脫出S對映異構體。 C.製備（2)

部分B酮 部分C(R>醇 (R)-1 -環丙基-2-(2-曱氧基-4-硝基 苯氧基)乙醇 採用得自Biocatalytics公司之兩種市售酮還原酶（即 KRED-112及KRED-113)來將B項之酮還原為對應的C項之 (R)-醇。反應係在30°C下於pH 7.5之100 mM磷酸鹽缓衝液 中進行，受質輸入量為4-10 mg/mL且酶輸入量為2-5 mg/mL。使用異丙醇及NADP來再生還原過程所需之輔因 子NADPH。亦使用葡萄糖脫氫酶、NADP及葡萄糖來再生 140588.doc -47- 201000487 此還原所需的輔因子N ADPH。實施逆相及對掌性HPLC兩 種方法來測定受質及產物濃度及產物之對映體過量。 兩種酮還原酶KRED 112及KRED 113達成期望C項 （R)-醇之97-99%之產率及99.5%之對映體過量。結果展示於下 表中： B項酮還原至C項（R)-醇 (ΙΡΑ-200 μί, pH 7.5, 30。〇 條目 存於DMSO中 之B項酮 (0.2 mg/pL) 酶溶液 (20 mg/mL) 緩衝液 轉化％ (C項（R)-醇之對映體過量％) 24 h 48 h 66 h KRED-113 4 mg / 20 pL 2 mg / 100 μί 700 μί 95.8 99.1 (對映體過量99.6%) 99.7 (對映體過量99.6%) KRED-113 10 mg / 50 μί 5 mg / 250 μί 550 μι 69.3 88.4 (對映體過量99.4%) 97.4 (對映體過量99.5%) KRED-112 4 mg/20 μί 2 mg/100 μί 750 pL 68 84 (99.4%) 97% (對映體過量99.6%) 採用上述程序，得自Julich Enzyme公司之兩種酮還原酶 (即ADH套組部分5/9及ADH套組部分6/9)達成（S)-醇之44-48%之產率及100%之對映體過量。 HPLC 法 測定對映體過量之逆相對掌性HPLC : 管柱：CHIRALPAK® 1C 5μΜ，250x4.6 mm 溶劑：溶劑A及B之梯度

A :存於水-曱醇（8 0:20)中之0.05% TF A

B :存於乙腈-甲醇（80:20)中之0.05% TFA 始於30% B，以55% B運行25 min，以100% B運行30 min，以 100% B運行 40 min 總時間4 0 m i η，流速：0.5 m 1 / m i η，室溫 140588.doc -48- 201000487 UV檢測 240及 340 nm。02.22 保留時間為： (S)-醇保留時間：26.74 min (R)_醇保留時間：24.9 min B項酮峰位於32.74 min處 C.製備（3):選擇性酶促還原過程 使用念珠菌（心《山⑽也)（SC161 17)來還原b項 酮·使用念珠菌（Ci?滅卿〇re㈣·asciemXATCC®第 56511號）來將B項酮還原為對應的(：項（r)_醇。在μ艺下 於含有2%葡萄糖、2%麥芽提取物、1%酵母提取物、及 〇·5%蛋白腺之培養基中使培養物生長48小時。藉由離心收 集細胞，並以l〇% (w/v)細胞濃度使細胞懸浮於pH 7〇之5〇 mM磷酸鉀緩衝液中。向細胞中補充5 mg/mL受質、5〇 mg/mL葡萄糖、5 mg/mL NADp友5單位葡萄糖脫氫酶以再 生此還原所需之NADPH。在28t：下使反應進行24小時。藉 由HPLC來測定產物濃度及產物對映體過量。 念珠菌（C⑽心心⑼⑽尸⑼❿）SC16U7(ATCC⑧第5651 1 號）以67%產率及97%對映體過量產生期望（R)_醇。自細胞 提取物將得自念珠菌（CaWWa扣㈣〜如⑷SC16U7之酮還 原酶純化至勻質。純化蛋白將B項酮還原為對應的具有 100%對映體過量之C項（R)-醇。使用葡萄糖、葡萄糖脫氫 酶及NADP來再生還原過程所需之輔因子NADpH。 D_ (R)-2-(4-胺基-2-甲氧基苯氧基）_丨_環丙基乙醇 140588.doc -49· 201000487

OH

向C項中製備之（R)_l_環丙基_2·(2曱氧基_4_硝基笨氧 基）乙醇（20.90 g，83 mmol)存於EtOH (546 ml)中之溶液中 添加5% Pd/C(乾基’ Degussa類型，50%水含量（3.0 g， 0.705 mmol))。在2〇°C下使懸浮液氫化（1大氣壓h2，氣 球）2.5 h ;之後LC/MS分析揭示反應完成。在經由 CELITE®墊過濾反應混合物且隨後用Et〇H洗滌濾餅後， 在真空中使用旋轉蒸發器濃縮濾液以產生呈棕色固體形式 之（R)-2-(4-胺基-2-曱氧基苯氧基）_ι_環丙基乙醇。m.P. 71〇C(18.34 g, 100%) 〇 'H NMR (400 MHz, CDC13) ： δ ppm 0.18-0.27 (m，1H)、0.38-0.43 (m，1H)，0.45-0.61 (m，2H)， 0.82-0.92 (m，1H)，3.21 (ddd，J=8.8, 8.8, 2·6 Hz, 1H)、3.80 (s, 3H), 3.86 (dd, J=10.1, 8.8 Hz, 1H), 4.09 (dd, /=10.1, 2.6 Hz, 1H), 6.21 (dd, J=8.3, 2.7 Hz, 1H), 6.29 (d, J=2.7 Hz, 1H)，6.78 (d, J=8.3 Hz, 1H)。13C NMR (100 MHz, CDC13) δ ppm 151.2, 142.1, 140.8, 1 1 8.7, 106.9, 100.5, 76.5, 74.4, 55.7，12.9, 2.5, 1.6。HPLC : 6.28 min保留時間，98.5% API，ZORBAX®管柱SBC18 4·6x75mm;流速2.5ml/ min ;梯度溶劑系統：100% A: 0% B至0% A: 100% B，運行8 min(溶劑 A : 10% MeOH-90% Η2Ο=0·2°/。H3P〇4 ;溶劑B : 90% MeOH-10〇/。H2O+0_2% H3P04)，在 220 nm下檢測。 LC/MS : m/e 224.5 (M+H) ; 4 min梯度。 E. (E)_5-(4-氯笨基）-3-(2-(二甲基胺基）乙烯基）噻吩-2-甲酸 140588.doc •50- 201000487 曱酯

NMe2 向市售3-胺基- 5-(4 -氣苯基）嗟吩-2·甲酸曱酉旨（75 g 279 mmol)存於EtOH (450 mL)中之混合物中添加u_二甲氧基· N，N-二曱基曱胺（56 mL，420 mmol)。將經攪拌反應混合物 加熱至回流；之後懸浮液在30 min内變為澄清溶液。 LC/MS分析揭示反應在4 hr後完成。使混合物冷卻至室 溫’之後在真空中使用旋轉蒸發器將其濃縮以獲得黃綠色 油。在添加Et2〇(100 mL)後，攪拌混合物同時添加晶種。 連續攪拌導致快速形成沉澱，藉由過濾來收集沉澱。在真 空中乾燥過夜後’獲得74.9 g淡黃色固體。對濾液實施濃 縮產生另外4.5 g產物，從而使總產率為79.4 g(88%)5-(：4-氯笨基）-3-(2-(二甲基胺基）乙烯基）噻吩-2-甲酸甲醋。ιΗ NMR (400 MHz, CDC13)： δ ppm 3.06 (s, 3H) ' 3.08 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 6.98 (s, 1H), 7.33-7.38 (m, 2H), 7.51-7.56 (m, 2H)，7.68 (s，1H)。13C NMR (100 MHz, CDC13) δ ppm 163.2， 159.1， 156.0， 145.7， 134.4, 132.2， 129.1， 126.9, 122.3，112_4，51.4，40_2, 34.3。HPLC : 6_14 min保留時 間 ’ 85..1% API ; ZORBAX® 管柱 SB C18 4·6χ75 mm ;流 速 2.5 ml/min;梯度溶劑系統：100%Α:0ο/〇 B 至 0%A:100o/〇 B ’ 運行 8 min(溶劑 A : 10% MeOH-90% H2O=0.2% H3P04 ;溶劑B : 90% MeOH-10% H20 + O.20/〇 H3P04)，在 220 nm下檢測。LC/MS : m/e 323.3 (M+H) ; 4 min梯度。 140588.doc -51 - 201000487 F. (R)-6-(4-氯苯基）-3-(4-(2-環丙基-2-羥基乙氧基）_3-甲氧 基苯基）-嗔吩并[3,2-d]喷咬_4(3H)-酮

將E項令製備之5-(4-氯苯基）_3-((二甲基胺基）亞甲基胺 基）噻吩_2·曱酸甲酯（85 g，263 mmol)、D項中製備之苯胺 (52 g，233 mmol)與笨酚（23〇 g，2444 mmol)之混合物在 13 0 C下加熱3 0 min。使所得黑色黏稠糖漿劑冷卻至室溫， 之後用EtjO (300 mL)進行稀釋。在室溫下將所得混合物攪 拌20 mm ’之後實施過濾。在用Et2〇 (6〇〇 mL)洗滌濾餅 後，HPLC指示產物含有6%苯酚。此外，某些產物保留在 黑色濾液中。使濾餅溶於CH/L (2〇〇 mL)中生成橙色溶 液’其在用EhO (400 mL)稀釋並攪拌後生成沉澱。藉由過 濾收集所得固體並在烘箱中於4〇〇c下乾燥以獲得呈灰白色 固體形式之期望標題化合物（81 g ’產率74 2〇/。）。MP 178_ 179〇C ]H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 0.29-0.45 (m, 4 H)，〇.91-l.01 (m，！ h)，3.34-3.39 (m，i H)，3.79 (s, 3 H)， 3.96-4.05 (m, 2 H), 7.04 (dd, 1 H), 7.13 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 7·19 (s，1 H)，7.58 (d，J=8.8 Hz，2 H)，7.92 (d，J=8.2 Hz, 2 H)，7.97 (s，1 H)，8.40 (s，1 H)。，3c NMR (100 MHz, DMS〇~d6) δ PPm 1.33, 1.66, 14.1 1，55.79, 71·16, 73 18, Π 1.86, 1 12.81, 1 19.61, 121.71, 122.04, 127.84, 129.27, 129.68, 131.22, 134.27, 148.61, 148.99, 149.48, 149.78 140588.doc • 52- 201000487 156.09，157.40。HPLC : 8.29 min保留時間，> 99% API ; ZORBAX® 管柱 SB C18 4.6x75 mm ;流速2·5 ml/min ;梯度 溶劑系統：100%A:0% B至0%A:100% B，運行8 min(溶劑 A ： 10% MeOH-90% Η2Ο=0·2% H3P04 ;溶劑 B : 90% MeOH-10% H20 + 0.2°/〇 H3P04)，在 220 nm 下檢測。 LC/MS : m/e 469.3 (M+H) ; 4 min梯度。 對掌性HPLC :藉由在25°C下使用CHIRALCEL® OD, 25〇x4_6 mm ID 10 μπι管柱實施HPLC層析來評價光學純 度，其中流動相為60%異丙醇及40%庚烷，流速為3 mL/min。在該等條件下於第13.2分鐘洗脫出期望R對映異 構體，之後在第19.7 min洗脫出S對映異構體。 實例2 6-(4-氯苯基）-3-(4-((3,3-二氟-1-羥基環丁基）甲氧基）-3-甲氧 基苯基）噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮

A. 3,3-二氟-N，N-二曱基環丁烷曱醯胺

F F~h I 〇 在0C下將草醯氣（21.74 mL，248 mmol)逐滴添加至3,3-二氣環丁烧叛酸（26 g, 1 91 mmol ;根據以下文獻中所述來 140588.doc -53- 201000487 製備：Elend，D.等人，办《· Comm., 3 5 :657 (2005))存於 CH2C12 (500 mL)及DMF (0.5 mL)中之經攪拌溶液中。使反 應混合物達到RT並在RT下攪拌lh，之後在RT下及約50 mm Hg之真空中使用旋轉蒸發器實施濃縮。在將THF (300 mL)添加至所得殘餘物中後，使經攪拌溶液冷卻至0°C，之 後添加Me2NH (478 mL, 955 mmol)存於THF中之2 Μ溶液。 在RT下將反應混合物攪拌0.5 h後，在醚與5% Na2C03水溶 液之間分配混合物。用MgS04乾燥有機層並在真空及RT下 實施濃縮。在CH2C12與水之間分配殘餘物後，用MgS04乾 燥有機層並在真空及RT下乾燥以獲得呈棕色半固體形式之 3,3-二氟-Ν,Ν-二甲基環丁烷曱醯胺（24 g，147 mmol，產 率77%)，將其以原樣用於下一步驟中。1H NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 2.82-3.13 (9 H, m), 2.62-2.79 (2 Η, m)。 B. 1-(3,3-二氟環丁基）-队1^-二曱基甲胺

F F_h 1 l\xn、 在〇°C下將a項中製備之3,3-二氟-N,N-二甲基環丁烷甲醯 胺（24 g, 147 mmol)存於THF (5 00 mL)中之溶液添加至氫化 鋰鋁（7.5 g，198 mmol)存於500 mL THF中之經攪拌懸浮液 中。使混合物達到RT。在RT下將反應混合物攪拌1 8 h後， 藉由在5°C下緩慢攪拌添加1〇 mL 6 N NaOH及5 mL水來使 其驟冷。在RT下將混合物攪拌0.5 h，用Na2S04乾燥並過 濾。藉由使用vigreux管柱小心蒸顧大部分THF來將濾、液濃 140588.doc -54- 201000487 縮至約30 mL。在稍低壓力下（約100_20〇 mm Hg)蒸餾剩餘 材料，該部分（20 mL· ’沸點70-90°C )含有被THF污染之找 題化合物。用溫和氮氣流吹掃殘餘THF以獲得ι_(；3,3-二氣 % 丁基）-N，N- _ 曱基曱胺（12 g，80 mmol，產率54.7%)。 NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 2.46-2.94 (2 H, m), 2.38 (2 H, d, J—6.55 Hz), 2.16-2.28 (9 H, m) ° C· l-(3,3-二氟環丁基）_n，N-二甲基甲胺氧化物水合物 F F θ 參考文獻 Cope, A.C.等人，（9rg.办《· Co".，IV:612-615，Doering 等人，j_ c/ze/w. Soc., 89(17):4534 (1967)。 在5至22°C下經2 h將3 0%出〇2水溶液（18 mL)逐滴添加至 B項中製備之1-(3,3 -二氟環丁基）_n,N-二曱基甲胺（12 g，80 mmol)存於甲醇（1〇〇 mL)中之經攪拌溶液中。在rt下攪拌 20 h後，另外添加3〇% h2〇2(18 mL)。3 h後，以較小份將 Pd (150 mg)存於水（3 mL)中之黑色漿液添加至經攪拌反應 混合物中從而使得可以冷卻浴將溫度維持在5至25。(：之 間。在RT下將反應混合物攪拌1 h直至〇2釋放停止。在過 慮後在真空中？辰縮濾、液以獲得呈濃稠無色油形式之;[_ (3,3-二氣環丁基）_N，N_二曱基甲胺氧化物水合物半 固體）。4 NMR (400 MHz，CD30D) δ ppm 3.47 (2 H, d， J-5.29 Hz), 3.16 (6 H, s), 2.75-2.92 (3 H, m), 2.42-2.58 (2 140588.doc -55- 201000487 H，m)。 D. 1，1-二氟·3_亞甲基環丁烷

F F--1 為自樣品移除大部分水，在真空（l〇 mm)及i0(rc下使用 具有冷卻至-78°C之收集瓶之蒸餾裝置來加熱c項中製備之 1-(3,3-二氟環丁基兴N，N_二甲基曱胺氧化物水合物呂 91 mm〇1)。在移除水後’使溫度逐漸升高至165〇C。在約！ h後，大部分起始材料已發生熱分解（少量深棕色材料保留 在蒸館瓶中）。然後依序用5〇/〇 HC1水溶液（3χ3 mL)及飽和 NaHC〇3(5 ml)洗滌收集瓶之内容物。經由ν&28〇4過濾有機 層（烯烴）而獲得呈無色油形式之！，；[_二氟_3_亞甲基環丁燒 (5.5 g，52.8 mmol ,產率 58.2%)。A NMR (400 MHz, CDC13) 6ppm 5.10 (2 H, quin, J=2.52 Hz), 2.77-3.57 (4 H, m)。 £.5,5-二氟-1_氧雜螺[2.3]己烷 飞0 在RT下以較小份將間氣代過苯曱酸（74.6 g，303 mmol)添 加至D項中製備之I，〗·二氟-3-亞甲基環丁烷（21.0 g, 202 mmol)存於CH2Cl2(600 mL)中之經授拌溶液中。在添加期 間用水浴冷卻反應混合物。在約1 h後開始輕微放熱，因 此需使用冰水混合物進一步冷卻。經3 h使反應混合物達 140588.doc -56- 201000487 到RT。在RT下攪拌16 h後，另外添加m_cpBA (l〇 g)。在 RT下攪拌24 h，之後在冰箱中於4t：下將其儲存過夜以沉 澱出某些酸。在過濾後，用1〇%Na2C〇3洗滌濾液。乾燥有 機層（NaaSCU) ’使用Vigreux管柱將其濃縮至約17〇 。在

約10 mm下將此材料閃蒸至_78。〇存水管中（採用兩個串聯 存水管以將損失降至最低）。使用vigreux管柱將餾出液濃 縮至約50 mL之體積而獲得cj^2: 5,5_二氟_丨_氧雜螺[2·3] 己烷之3··1混合物（80 g，2〇〇 mm〇卜產率99%，藉*nmr 來量測）。此材料未經進一步純化即用於下一步驟中。咕 NMR (400 MHz, CDC13 δ ppm 2.91-3.16 (4 H，m), 2.88 (2 H, s)。 ’ F. 3,3-二氟-1-((2-甲氧基_4_硝基苯氧基）甲基）環丁醇

F F—

—0H ^0

N〇2 將E項中製備之5,5_二氟小氧雜螺[2 3]己烷+3當量 CH2C12 (22.52 g，0.〇6 m〇1)、2_ 甲氧基_4_確基苯盼鉀（12 g，0.060 m〇imNaH2P〇4_H2〇 (7.45 g，〇〇54 m〇1)存於 5〇 mL MeCN-水（85··15)中之混合物在13〇t：下於鋼彈中加熱 3.5 h。用EtOAc稀釋反應混合物，用5% Na2C〇3洗滌，乾 燥（MgSCU)並濃縮。用約15〇 mL MTBE使粗產物重結晶而 獲付呈淡貫色固體形式之3,3_二氟_丨_((2_曱氧基_4_硝基苯 140588.doc •57- 201000487 氧基）甲基）環丁醇（1 1.2 g，〇·〇39 mol，產率64.5%)。在將 母液濃縮至約50 mL後另外獲得1.2 g純度稍低之期望產 物。1H NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 7.89 (1 H, dd, J = 8.94, 2.64 Hz), 7.76 (1 H, d, J=2.77 Hz), 6.95 (1 H, d, J=9.06 Hz), 4.16 (2 H, s), 3.94 (3 H, s), 3.36 (1 H, s), 2.73-2.92 (4 H, m)。 G_ 1-((4-胺基-2-甲氧基苯氧基）曱基）_3,3_二氟環丁醇

F F--1

1--OH ότ°^ ΝΗ2 在Η?及50 psi下將F項中製備之3,3_二氟甲氧基_4_ 硝基苯氧基）甲基）環丁醇（32_0 g，in mm〇1)與1〇% pd/c (2.0 g，1.879 mmol)存於700 mL· MeOH中之混合物攪拌I」 h。在過濾後，濃縮濾液以獲得呈淡紫色固體形式之^((仁 胺基-2-甲氧基苯氧基）甲基）_3,3_二氟環丁醇（28 9 g，^ mmol’ 定量產率）。iH NMR (4〇〇 MHz，CD3〇D) § 沖瓜 6.68 (1 Η, d, J=8.56 Hz), 6.35 (1 H, d, J=2.52 Hz), 6.16 (1 H, dd, J-8.31, 2.52 Hz), 4.77 (3 H, br. s.), 3.78 (2 H, s), 3.68 (3 H, s), 2.68-2.82 (2 H, m)，2.38-2.56 (2 H，m)。 H. 6-(4-氣苯基）-3-(4-((3,3-二氟羥基環丁基）甲氧基）_3_ 曱氧基笨基）噻吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮 140588.doc -58- 201000487

☆A 將實例1Ε項中製備之⑻·5_(4_氯笨基）_3_((二甲基胺基） 亞甲基-胺基）嗟吩_2•甲酸甲西旨（33 9 g，1〇5顏〇1)及〇項中 製備之1-((4-胺基！曱氧基.苯氧基）甲基）_3,3_二氟環丁醇 (27，。2 g，105 mm〇1)與苯酚（2〇〇 g)之經攪拌混合物在135_ 140 C下加熱45 min ’同時藉由Lc來監測反應。用甲醇 (700 mL)稀釋混合物，在RT下攪拌15爪匕並在尺丁下靜置過 夜。藉由過濾分離沉澱產物，用冷凍甲醇洗滌並在真空中 乾燥以產生呈白色固體形式之6_(4_氯苯基）3_(4_((33_二 氟-1-羥基環丁基）曱氧基）_3_曱氧基笨基）噻吩并[3,2_d]嘧 咬-4(3H)-酮（37 g，73.3 mmol ’ 產率 69.8%)。用 Et20及己 烷稀釋母液沉殿出更多固體，將其與Me〇H —起研磨以產 生1.8 g第二產量之期望產物。MP 198-199。(： NMR (400

Ο

MHz, CDC13) δ ppm 8·14 (1 H, s)，7.66 (2 H，d，J=8.56 Hz), 7.54 (1 H, s), 7.45 (2 H, d, J = 8.56 Hz), 7.08 (1 H, d, J = 8.56

Hz), 6.99 (1 H, d, J=2.27 Hz), 6.95 (1 H, dd, J=8.31, 2.27 Hz), 4.14 (2 H, s), 3.89 (3 H, s)，2.72-2.93 (4 H, m)。13C NMR (126 MHz, CDC13) δ ppm 157.3, 156.7, 151.8, 150.4, 148.60 (1 C, s), 148.0, 135.7, 13 1.4, 131.4, 129.4, 127.6, 123.1, 120.8, 119.4, 1 15.7, 1 17.6 (dd, J=282, 269.Hz), 1 1 1.4, 75.5, 64.6 (dd, J=18, 8 Hz), 56.0, 46.0 (t, J=22.89 140588.doc -59- 201000487

Hz)。 實例3至11 製備實例1及2化合物之前藥以改良溶解性及暴露。採用 標準條件來生成兩種醇之胺基酸醋。諸如草酸、丙二酸、 破珀酸及戊一酸4 一元酸各自半酯之製備例示於實例7及 11中。實例3及8例示單磷酸酯之製備。 實例3 (R)-2-(4-(6-(4-氯笨基）-4-側氧基 π塞吩并[3,2_d]。密咬-3 (4H)- 基）-2-甲氧基本氧基）-1_環丙基乙基二氫填酸酯 Η I 0ν Ο

A.雙（2-(二甲基曱石夕烧基）乙基）二異丙基亞鱗驢胺

在N2下於裝備有溫度探頭及加料漏斗之2 5 〇 mL三頸燒瓶 中使二異丙基亞填醯胺二氣化物（diisopropylphosphoramidous dichloride)(10.8 g ’ 50.78 毫莫耳）存於 Et20 (53 mL)中之溶 液冷卻至0至-2°C。經27-28分鐘將2-(三甲基曱矽烷基）乙醇 (12.6g; 106.55 毫莫耳）及 Et3N(15.4g; 152.19毫莫耳）存於 140588.doc -60- 201000487

EhO (84 mL)中之溶液逐滴添加至經攪拌二異丙基亞磷醯 胺二氣化物溶液中。溫和放熱（+1 -2。(〕）伴隨有濃稍白色懸 浮液之形成。在20°C下攪拌過夜後，過濾混合物。用扮2〇 將所得遽餅洗滌兩次（每次30 mL)。用2χ 1〇〇 mL飽和 NaHC03水溶液洗蘇經合併滤液，之後用4〇社鹽水洗蘇。 在用MgS〇4乾燥並在真空及室溫下濃縮至無水後，獲得呈 透明無色液體形式之雙（2-(三甲基甲矽烷基）乙基）二異丙 基亞磷醯胺（18.12§;49.56毫莫耳；產率976〇%)。111 NMR δ (400 MHz，CDC13): 3.90-3.78 (m，4H)，3.77-3.68 (m，2H)，1.31 (d，《7=6.6 Hz，12H)，1.17-1.12 (m，4H)，0.15 (s，18H)。13〇ΝΜΙΙδ(100ΜΗΖ，€〇α3):60.7(2，（1，·/(：- ^=19.1 Hz, 2C), 42.7 (1, d, JC-P=\2J Hz, 2C), 24.6 (3, d, JC-P=7.6 Hz, 4C), 20.1 (2, d, JC-P^7.6 Hz, 2C), -1-4 (3, 6C) 〇 31P NMR δ (162 MHz, CDC13): 143.5 (s) 〇 LC/MS ： m/e (M+H) ; 4 min梯度；min保留時間。 B_ (R)-2-(4-(6-(4-氯苯基）-4 -側氧基。塞吩并[3,2_(1]>»密咬-3(4H)-基）-2-甲氧基苯氧基）_ι·環丙基乙基雙（2_(三甲基甲 石夕烧基）乙基）填酸醋

在20 C下向裝備有回流冷凝器及溫度探頭且用a沖洗之 140588.doc -61- 201000487 250 mL三頸圓底燒瓶中添加（R)-6-(4-氯苯基）-3-(4-(2-環丙 基-2-羥基乙氧基）_3_甲氧基苯基噻吩并[3,2 d]嘧啶_ 4(3H)-酮（6.33 g ; 13.50毫莫耳）（在實例1中製備）、m_ 1,2,4-二唑（1.89 g ; 27.02 毫莫耳）、及無水 CH2Ci2(65 mL)。向所得濃稠白色懸浮液中添加A項中製備之雙（2-(三 甲基甲矽燒基）乙基）二異丙基亞磷醯胺（98 g; 268〇毫莫 耳）。在回流（40°C内部溫度）及N2下將經攪拌反應物加熱i 8 hr。在18.25 hr(HPLC顯示在17.5 hr後完全轉化）後，使反 應混合物冷卻至-3至-4°C。隨後逐滴添加h2〇2(8.8 mL ; 1 00.1 4毫莫耳）導致高放熱，其僅在停止添加時減弱。應注 思放熱僅發生在添加最初1.3 -1 · 5 mL期間；經1 5分鐘添加 剩餘Ηζ〇2期間根本不放熱。在添加完成後，在〇_5。〇下將 反應物攪拌2 hr，之後HPLC分析揭示反應完成且反應相當 徹底（約92.9-93八？）。藉由經12_15分鐘逐滴添加6〇„^1^^ NaA2。5來使反應物驟冷。應注意由於最初添加15_2〇 驟冷物時放熱導致溫度升高至l7_18t：，因此需要冷卻 冷’剩餘添加係吸熱性的。在10_丨5艺下將混合物攪拌2〇 分鐘’之後分離各相。（在有機層中未檢測到過氧化物）。 依序用70 mL IN Ηα、65 mL H20及50 mL鹽水洗滌有機 層，之後用4.5 g MgS〇4乾燥。在藉由過濾移除乾燥劑 後，在25托及低於30°C之浴下使用旋轉蒸發器將體積降低 至約30 mL。使殘餘物重溶解於65 mL MTBE中；將其再次 濃縮至約30-35 mL而產生輕度混濁之殘餘物。另外用35 mL MTBE及45 mL己烷以15 mL/份加以稀釋而生成固體。 140588.doc -62- 201000487 在濃縮至40 mL期間轉動促進白色半透明顆粒之形成。進 一步濃縮殘餘物至無水從而產生24 5 &gMTBE污染之白色 固體。在40 mL己烷中滴定該固體從而產生表面上相當均 勻之懸浮液，在用40 mL己烷+ 5 mL MTBE進一步稀釋後藉 由過濾來收集該懸浮液。用95:5己烷/MTBE將濾餅洗滌兩 次（每次21 mL)並在具有真空抽吸之濾紙上風乾i在 及真空下乾燥後’獲得具有96 64 AP且呈純淨白色晶體產 物形式之（R)-2-(4-(6-(4-氣苯基）-4-側氧基噻吩并[3,2_d]嘧 。定-3(411)-基）-2 -曱氧基苯氧基）_ι_環丙基乙基雙（2_(三曱基 曱石夕院基）乙基）碟酸酯（9.64 g; 12.86毫莫耳；產率 95.30%)。A NMR δ (400 MHz，CDC13): 8.10 (s, 1H), 7_64 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.42 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.05 (d, /=8.8 Hz, 1H), 6.94 (d, J=2.7 Hz, 1H), 6.90 (dd, ^=8.8, 2.7 Hz, 1H), 4.31-4.20 (m, 2H), 4.21-4.08 (m, 4H), 4.08-4.00 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 1.30-1.18 (m, 1H), 1.13-1.04 (m, 4H), 0.70-0.60 (m, 3H), 0.47-0.38 (m, 1H), 0.02 (2s, 18 H) 0 13C NMR δ (C100 MHz, DC13): 157.4, 156.8, 151.7, 150.3, 149.1, 148.2, 135.7, 131.6, 130.5, 129.5, 127.7, 123.2, 120.1, 1 19.2, 1 14.3, 1 1 1.4, 81.1 (d, JC-P=5A Hz), 71.8 (d, JC-P-5.1 Hz), 66.1 (d, JC-P^6A Hz, 2C), 56.2, 19.6 (2d, JC-P=6A Hz), 13.1 (d, JC-P=5A Hz), 3.6, 3.0, -1.5 = 31P NMR δ (162 MHz, CDC13)： -l.H (m, JP-//=7.4 Hz)。HPLC : 96.64% API。MS(電喷霧，+離子） m/z 749，75 1 0 140588.doc -63- 201000487 C· (R)-2-(4-(6-(4-氣笨基）_4_側氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶_ 3(4H)_基）_2_曱氧基苯氧基）-1-環丙基乙基二氫磷酸酯 Η I Ο. Ο

在裝備有機械攪拌器、溫度入口、氮/真空轉換入0、 加料漏斗及回流冷凝器之5〇〇 mL CHEMGLASS®夾套式反 應器（二醇）内將B項中製備之（R)_2_(4_(6_(4_氣苯基側 氧基噻吩并[3,2_d]嘧啶-3(4H)-基）-2-曱氧基苯氧基）-1 -環丙 基-乙基雙（2·(三曱基甲矽烷基）乙基）磷酸酯（35.27 g， 47·06*莫耳）與無水CHzCIWl5 mL)之混合物在2〇t：下授 掉至完全溶解；之後使内部溫度降低至_2〇c。在溫度穩定 後，將TFA(30.2 mL· ; 399.40毫莫耳）逐滴添加至經攪拌溶 液中而導致溫度上升16°c。使反應溫度維持在_〇乃它與广^ 之間（内部溫度），同時定時取出等份以藉由HpLC分析來監 測反應進程。在TFA添加完成後，HPLC分析立即揭示組 成為9.29%起始雙酯'4冬78%單去保護物、42 2%期望產 物、1.21% (R)_6_(4_氯苯基）_3_(心(2_環丙基_2_羥基乙氧 基）-3-甲氧基苯基）_噻吩并[3,2_d]嘧啶_4(3H)_酮及丨25%主 要副產物。在64 min後，組成為〇〇%起始酯、〇 62%單去 -2-羥基乙氧基）-3_甲氧基苯基）_噻吩并[^…嘧 保護物、94.36%期望產物、 (2-環丙基-2-經基乙氣某 1.52% (R)冬（4-氯苯基）-3-(4- 140588.doc -64 - 201000487 咬-4(3H)-酮及2.69%主要副產物。在95分鐘後，使反應物 冷卻至-3°C，之後經5 min添加MeOH(28.5 mL)。在授拌3〇 min後，在50 mm Hg及15t：下將反應物濃縮至約134 mL之 剩餘體積。使溶液溫度升高至19。(：，之後緩慢添加12〇 mL MTBE(經約12 min)。儘管在添加約30 mL· MTBE後即可開 始引晶，但在開始形成白色沉澱之前添加約42_45 mL MTBE。在19-20°C下攪拌2小時後，藉由過濾收集固體。 用120 mL MTBE/CH2C12 2.5:1 v/v將反應器及濾餅二者洗 知、兩次。以真空抽吸將高砂紙白色/灰白色材料風乾1 $ min ’之後在真空烘箱中於45°c下乾燥過夜以獲得25 58 § 粗產物。藉由在CHEMGLASS®夾套式反應器中於2〇〇 m[ THF及16 mL水中將24.3 g粗產物加熱至55-57°C來使此藉 由F NMR測定含有部分TFA之材料重結晶，同時攪拌以達 成完全溶解。在60°C下將溶液另外加熱15 min，經1〇 min 冷卻至45 °C ;之後經約5 min添加50 mL丙酮同時在整個添 加過程中使溫度保持在44°C以上。在添加完成後用先前結 晶產物對略微混濁之溶液實施引晶。在快速結晶開始後， 立即經30分鐘添加另外245 mL丙酮，且在整個添加過程中 使溫度維持在42.5°C以上。經約60分鐘使所得濃稠漿液冷 卻至22°C(夾套），且在20-2TC下將其攪拌90 min，之後藉 由過濾收集固體。首先用120 mL丙酮/THF 3:1 v/v洗滌反 應器及濾餅，之後用丙酮（110 mL)洗滌。在以真空抽吸風 乾40 min後，在真空烘箱中於5〇t下將固體乾燥18 ^以產 生 1 8.96 g (R)-2-(4-(6-(4-氣苯基）-4-側氧基 塞吩并[3,2-d]嘲 140588.doc -65- 201000487 ^-3(4H)-基）-2 -曱氧基苯氧基）-1-環丙基乙基二氫碟酸酯

(對映體過量99.2%，純度99_4%，產率73%)。M.P. 166°C H NMR (500 MHz, DMSO-dg) δ ppm 0.41 (m, 2H), 0.52 (m, 2H), 1.26 (m, 1H), 3.82 (m, 1H), 4.20 (d, 2H, J=4.29 Hz), 3.80 (s, 3H),7.06 (dd, 1H, J=8,57, J=2.34 Hz), 7.15 (d, 1H, J = 8.57Hz), 7.22 (d, 1H, J=2.34 Hz) ' 7.58 (d, 2H, J = 8.57 Hz), 7.93 (2H, J = 8.57 Hz), 7.98 (s, 1H), 8.40 (s, 1H)。13H NMR (126 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.4, 3.1, 13.1， 56.0, 71.0, 77.9, 112.2, 113.1, 119.8, 121.9, 122.1, 128.0, 129.4, 130.1, 131.3, 134.4, 148.4, 149.1, 149.6, 149.9, 156.2，157.5。31P NMR δ (162 MHz, DMSO-d6): -0.75。 HPLC · 95.4% API ; 0.69%。LC/MS : m/e 549.1 (M+H) ; 4 1^11梯度。111解析度質譜.匚241^23〇7仏(111?8計算值549.〇6522; 實驗值 549.06531。 對掌性 HPLC :在 20°C 下使用 CHIRALCEL® OJ-RH， 15〇x4_6mmID5 μηι管柱藉由HPLC層析來評價光學純度， 其中流動相為1〇〇〇/。曱醇及0·1〇/〇磷酸且流速為0.5 mL/min。 在該等條件下在第8分鐘洗脫出S對映異構體，之後在第10 min洗脫出期望r對映異構體。 實例4 (S)-((R)-2-(4-(6-(4 -氣苯基）-4-側氧基嗟吩并[3，2_d] 密咬· 3(4Η)-基）-2-曱氧基苯氧基）_ι_環丙基乙基）2_胺基_3_甲基丁 酸西旨 140588.doc -66 - 201000487

將貝例1中所述之（R)_6_(4_氣苯基）-3_(4-(2-環丙基-2-羥 基乙氧基）3曱氧基苯基）-逢吩并[3,2-d]嘴咬_4(3H)-酮（1.3 g，2·3 3 mmol)、二異丙基碳二亞胺（〇 88 6% 爪瓜“）、4_ 一曱基胺基吡啶（142 mg, 1.16 mmol)與N-(第三丁氧基羰 基）-L-纈胺酸（1.52g，6·99 mmol)存於 ch2C12(i〇 mL)中之混 合物在rt下攪拌19 h。藉由LCMS分析確定’無起始酵殘 留。用CHWl2稀釋懸浮液並用NaHC〇3水溶液洗務。在用 萃取水性層後，依序用水及鹽水洗務經合併有機 層’經NajO4乾燥’過濾並在低壓下濃縮濾液。藉由快速 層析法（矽膠，EtOAC/己烷0-40%梯度）純化殘餘物以提供 呈白色固體形式之標題化合物（1.1 2 g)。NMR δ 0.41-0.46 (m, 1H), 0.49-0.53 (m, 1H), 0.58-0.63 (m, 1H), 0.64-0.68 (m, 1H), 0.925 (d, J-7Hz), 3H), 0.99 (d, J=7Hz), 1.16-1.19 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 2.19-2.23 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 4.23-4.32 (m, 3H), 4.67-4.71 (m, 1H), 5.06 (d, J=2Hz, 1H), 6.92-6.95 (m, 2H), 7.04 (d, J=2Hz, 1H), 7.26 (s, 2H), 140588.doc -67- 201000487 7.45 (d, J=2Hz), 7.54 (s, 1H), 7.66 (d, J=2Hz, 2H), 8.16 (s, 1H)。LCMS (ES): m/z = 669 [M+H]。

將A項之BOC纈胺酸酯（1.12g, 1.67 mmol)溶於TFA/ CH2C12之1:2混合物中（17 mL)。1 hr後，藉由在20°C下之 HPLC分析確定反應已完成，之後在真空下移除揮發性物 質。在將殘餘物溶於CH2C12中後，用NaHC03/Na2C03水溶 液洗滌2x，之後用鹽水洗滌，隨後經Na2S04乾燥。在濃縮 後，獲得900 mg (94%)標題化合物。藉由快速層析法（石夕 膠’ MeOH/ CH2C12，0-10%梯度）達成進一步純化以提供呈 白色固體形式之標題化合物（0.87 g)。NMR (CDC13) δ 0.41-0.45 (m, 1H), 0.50-0.54 (m, 1H), 0.58-0.63 (m, 1H), 0.64-0.67 (m5 1H), 0.94 (d, J=7Hz), 3H), 1.01 (d, J=7Hz), 1.16-1.19 (m, 1H), 2.07-2.10 (m, 1H), 3.36 (d, J=lHz, 1H), 3.87 (s, 3H), 4.24-4.31 (m, 2H), 4.68-4.72 (m, 1H), 6.92-6.95 (m, 2H), 7.03 (d, J=2Hz, 1H), 7.26 (s, 2H), 7.44 (d, J=2Hz), 7.53 (s, 1H), 7.66 (d, J=2Hz, 2H), 8.14 (s, 1H) 〇 LCMS (ES): m/z 569 [M+H]+。 實例5 (R)-2-(4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基噻吩并[3,2-d] 140588.doc -68- 201000487 嘧啶-3(4H)-基）-2-甲氧基-苯氧基）-1-環丙基乙基 2-胺基乙酸酯，鹽酸鹽

• 在25°C下向實例1中所述之（R)-6-(4-氯苯基）-3-(4-(2-環 丙基-2-羥基乙氧基）-3-甲氧基苯基）-噻吩并[3,24]嘧啶-(' 4(3H)-酮（300 mg, 0.640 mmol)、2-(第三丁 氧基羰基胺基） 乙酸（168 mg, 0.960 mmol)、與 DMAP(65 mg, 0.532 mmol) 存於CH2C12 (20 mL)中之混合物中逐滴添加二異丙基碳二 亞胺（150 pL，0.963 mmol)。在25°C下將所得混合物攪拌2 h。將其蒸發之後實施快速層析法（120 g，0%-100% EtOAc-己烷）從而產生呈無色固體形式之期望N-Boc甘胺酸 酯（477 mg，0.762 mmol，產率 1 19%)，其含有 15莫耳％二 異丙基脲。HPLC方法：梯度溶劑系統1 00% A:0°/。B至0% A: 100% B (A=90% H20/10°/〇 MeOH+O.2% H3PO4 ； B-90% MeOH/10% H2O + 0.2% H3P04)，運行 4 min ;在 220 nm 下檢 - 測。YMC S3 ODS 4·6><50 mm Ballistic 管柱；保留時間 = 3.61 min, 100%。 不經進一步純化即將N-Boc甘胺酸酯（379 mg, 0.605 mmol)添加至存於二σ惡烧中之4 N HC1(10 mL, 40.0 mmol) 中。在攪拌3 h後，用MeOH(5 mL)稀釋混合物並將其過 濾。用Et20 (50 mL)洗滌濾餅以產生呈灰白色固體形式之 140588.doc -69- 201000487 標題化合物之HC1鹽（291 mg，0.52 mmol，產率85%)。 M.P. 218-220〇C NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 0.38-0.48 (m, 1H), 0.49-0.64 (m, 3H), 1.18-1.30 (m, 1H), 3.3-3.42 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.78-4.0 (m, 2H), 4.2-4.32 (m, 2H), 4.65-4.74 (m, 1H), 7.06 (dd, J=8.85, 2.64 Hz, 1H), 7.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.22 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J=8.35 Hz, 2H), 7.93 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.99 (s, 1H)。LC-MS: 526.1 [M+H]+。HPLC : SunFire C18 3.5 μΜ，4.6x150 mm，以 10%-100%運行10 min且隨後以l〇〇_l〇〇%運行5 min;流速 =1 mL/min ;溶劑 A=存於 H20:CH3CN (95:5)中之 0.05% TFA，溶劑 B=存於 H20:CH3CN (5:95)中之 0.05% TFA。 Rt=7.46 min，純度>99%。 實例6 (S)-((R)-2-(4-(6-(4-氣苯基）-4-側氧基噻吩并[3,2_d] 鳴咬-3(4H)-基）-2-曱氧基苯氧基）-1-環丙基乙基） 2-胺丙酸酯，鹽酸鹽

以與實例5中所述類似之方式製備標題化合物，但使用 Boc-L-丙胺酸來代替如卜甘胺酸。lH NMR(甲醇_d4，4〇〇 MHz)： δ 0.45-0.58 (m, 2H), 0.6-0.75 (m, 2H), 1.22-1.34 (m, 1H), 1.58 (d, /=7.5 Hz, 3H), 3.87 (s, 3H), 4.07 (br q, 140588.doc -70- 201000487 /=7.0 Hz, 2H), 4.35-4.42 (m, 2H), 4.72-4.80 (m, 1H), 7.04 (dd, J=8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.14-7.20 (m, 2H), 7.52 (d, 7=8.35 Hz, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.83 (d, J=8.35 Hz, 2H), 8.39 (s, 1H)。LC-MS : 540.4 [M+H]+。HPLC : SunFire C18 3.5 μΜ, 4.6x150 mm,以 1〇%-1〇0%運行 10 min且隨後以 i〇〇_ 100%運行5 min ;流速=1 mL/min ;溶劑A=存於H20: CH3CN (95:5)中之 0.05% TFA，溶劑 B=存於 H2〇:CH3CN (5:95)中之 0.05% TFA。Rt=7_62 min，純度=98.7% (檢測器 實例7 (R)-5-(2-(4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基。塞吩并[3,2-d] 嘧啶-3(4H)-基）-2-甲氧基苯氧基） •卜環丙基乙氧基）-5-側氧基戊酸

將戊—酸Sf (73.0 mg, 0.640 mmol)、實例1中製備之（R)-6-(4-氯苯基）_3_(4_(2_環丙基_2_羥基乙氧基）_3_甲氧基苯 基）π塞吩并[3,2-d]鳴咬-4(3H)-酮（60 mg，0.128 mmol)與 4-0 比 口各。定°比咬（18.96 111呂，0.128 111111〇1)存於(3112(1：12(4 1111^)中之混 合物在40。(：下攪拌25小時。LC-MS指示轉化約35%。另外 添加數份戊二酸酐（13〇 mg)及4-吡咯啶吡啶（20 mg)。在 4〇°C下另外攪拌丨6 h後，根據HpLC確定轉化完成。使混合 140588.doc -71 - 201000487 物冷卻至RT，用CH2C12(10 mL)稀釋，用IN HCl、鹽水洗 滌，乾燥（Na2S04)，過濾，並蒸發以產生白色固體，藉由 製備型HPLC(PHENOMENEX® Luna Axia 5μ C18 3〇χ1〇〇 mm ; 10 min梯度 40% A: 60% Β 至 0% Α:100°/。Β(Α=90% Η2〇/1〇°/〇 MeOH+O.l% TFA) ； (Β=90% MeOH/ΙΟ% Η20+ 0.1% TFA);在220 nm下檢測）對其實施純化以產生呈白色 固體形式之不純淨標題化合物（58 mg, 78%)。藉由製備型 HPLC 使用 CH3CN-系統（PHENOMENEX® Luna Axia 5μ C18 30x 100 mm ; 10 min梯度 40% A: 60% Β至 0% A: 100% B (A=90% H2〇/l〇% CH3CN+0.1o/〇 TFA) ； (B=90°/〇 CH3CN/ 10% H2O+0.1% TFA);在220 nm下檢測）對產物實施進一 步純化以產生呈白色固體形式之標題化合物（40 mg，0.069 mmol，產率53·60/。）。1HNMR(CDCl3，400 MHz):δ0.33-0.43 (m, 1H), 0.45-0.55 (m, 1H), 0.55-0.68 (m, 2H), 1.06-1.18 (m, 1H), 1.85-1.95 (m, 2H), 2.30-2.45 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 4.23-4.35 (m, 2H), 4.64-4.73 (m, 1H), 6.87-6.96 (m, 2H), 7.03 (d, /=7.9 Hz, 2H), 7.44 (d, J=8.35 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H)，7.65 (d, /=8.35 Hz, 2H)，8.24 (s, 1H)。LC-MS, [M+H]+=583.5。HPLC 方法：梯度溶劑系統 100% A:0% B 至 0% A:100% B (A=900/。H2〇/l〇% MeOH+O.2% H3P〇4 ; B=90% MeOH/lO% H2O+0.2% H3P〇4)，運行 4 min ;在 220 nm下檢測。YMC S3 ODS 4.6x50 mm Ballistic 管柱；保留時間=4.35 min。 140588.doc -72· 201000487 實例8 1-((4-(6-(4-氯苯基）_4-側氧基噻吩并[3，2_d]嘧啶_3(4H)_基）_ 2-甲氧基苯氧基）曱基）-3,3-二氟環丁基二氫磷酸酯

A_ 1-((4-(6-(4-氯笨基）-4-側氧基噻吩并[3，2_d]嘧啶_3(4H)_ 基）-2-曱氧基苯氧基）甲基）_3,3-二氟環丁基磷酸二苯基酯

在回流溫度下加熱實例2中所述之6-(4-氣苯基）_3_(4_ ((3,3-二氟-丨_羥基環丁基）曱氧基）_3_曱氧基苯基）噻吩并 [3,2-d]嘧啶·4(3Η)_ 酮（1.01 g，2.000 mmol)、二笨基二異丙 基亞磷醯胺（2.073 g, 6.00 mmol)與 1H-1,2,4-三唑（〇·4ΐ4 g, 6.00 mmol)存於l，2-二氣乙烷（30 mL)中之混合物。在1 h 後’使混合物冷卻至RT ;之後添加2 mL 50% H2〇2。在RT 下授摔1 5分鐘後’用CH2C12稀釋混合物，依序用水、5% 硫代硫酸鈉及水洗滌。經MgS〇4乾燥有機層，將其濃縮並 對粗產物實施快速層析法（石夕膠/己烷_Et0Ac 1〇〇:〇至〇:1〇〇 梯度）以提供1-((4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基噻吩并[3，2_d]嘧 。定-3(4H)-基）_2-曱氧基苯氧基）甲基）·3,3_二氟環丁基填酸 140588.doc -73- 201000487 二苯基酯（1.3 g，1.699 mmol，產率85%) D iH NMR (4〇〇 MHz,氣仿-d) δ ppm 8_10 (1 H, s), 7·66 (2 H, d，J=8.56

Hz), 7.54 (1 H, s), 7.45 (2 H, d, J=8.56 Hz), 7.28-7.40 (10 H, m)，6.95 (1 H，d，J-8.56 Hz), 6.92 (1 H，d, J=2 27 Hz) 6.87 (1 H, dd, J = 8.31, 2.27 Hz), 5.08 (4 H, dd, J=7 81, 1.26

Hz), 4.32 (2 H，s), 3.76 (3 H, S)，2.89-3.30 (4 H, m)。 Β· 1-((4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基噻吩并[3,2_d]嘧啶_3(4H)_ 基）-2-曱氡基苯氧基）甲基）-3,3-二氟環丁基二氫磷酸酯

將A項中製備之卜（（4-(6-(4-氣苯基）_4-側氧基^塞吩并 [3,2-d]嘧啶-3(4H)-基）-2-甲氧基苯氧基）甲基）-3,3_二氟環 丁基破酸二苯基酯（1.3 g，1.699 mmol)溶於5 mL純TFA中。 在RT下保持3 h後’濃縮反應物並使用旋轉蒸發器自Me〇H (3x)進行再次濃縮。自EtOH研磨殘餘物以提供白色固體卜 ((4-(6-(4-氣苯基）-4-側氧基售吩并_[3,2-d] «密。定- 3(4H) -基）- 2 -曱氧基本氧基）甲基）-3,3 - 一氣環丁基二氮鱗酸g旨（0.985 g，1.684 mmol ’ 產率 9%)。M.P. 219°C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.40 (1 H, s), 7.98 (1 Η, s), 7.92 (2 Η, d, J = 8.3 Hz), 7.57 (2 H, d, J=8.3 Hz), 7.23 (1 H, d, J = 1.8 Hz), 7.15 (1 H, d, J=8.8 Hz), 7.07 (1 H, d, J=8.1 Hz), 4.27 (2 H, s), 3.79 (3 H, s), 3.21 (2 H, q, J=14.4 Hz), 2.94-3.10 (2 H, 140588.doc -74· 201000487 m)。13C NMR (126 MHz, CDC13) δ ppm 157.41，156.05, 149.81，149.42，149.30, 148.08，131.2，130.63，129.27, 127.83, 122.0, 121.72, 1 19.73, 1 18.21 (t, J=270.9 Hz), 1 14.1, 1 12.28, 72.2 (m), 69.32 (ddd, J=18.5, 12.0, 6.9 Hz), 56.0, 44.32 (m)LCMS: 585 (M+H)。 實例9 1-((4-(6-(4-氣苯基）-4-侧氧基噻吩并[3，2-d] °密咬-3 (4H)-基）-2-曱氧基苯氧基）甲基）-3,3-二氟環丁基 产. 2-胺基乙酸酯

將1-(3-二甲基胺基丙基）·3_乙基碳二亞胺鹽酸鹽（3 8〇 g， 19.8〇 mmol)添加至實例2中製備之6_(4_氯苯基 二氟-1-羥基環丁基）-甲氧基）_3-曱氧基苯基）噻吩并[3,2_d] 哺0定-4(3H)-酮（2.0 g，3.96 mmol)、Boc-甘胺酸（3.47 g, 19.80 mmol)與 4-(吡咯啶-i_ 基）吡啶（2 94 g，19 8〇 mm〇1)存 於CH2C12(5 0 mL)中之混合物中。將混合物攪拌回流加熱 15 min，用CH2C12稀釋，依序用冷1〇% H2S〇4水溶液及飽 和NaHCCh洗滌。乾燥有機層（MgS〇4)並將其濃縮以獲得白 色固體（3.8 g)。在將其溶於CH2C12(3〇 mL)中並添加tfa (15 mL)後，在RT下將溶液保持15 min。然後濃縮反應混 合物，將其在CHzCl2與5% NaWO3水溶液之間分配。乾燥 140588.doc -75- 201000487 有機層（MgSQ4)並在真空下濃縮。對粗產物實施快速層析 ⑼膠/ CH2Cl2-iPr〇H _〇至 80:20梯度）以提供 W(4-(6_(4· 氯苯基）-4-側氧基噻吩并[3,2_d]嘧啶_3(4Η)_基）_2_曱氧基苯 氧基）甲基）-3,3-二氟環丁基2_胺基乙酸酯（2.2 g)。巾 (400 MHz，氣仿-d) δ ppm 8·13 (1 η，s), 7 66 (2 H, d, J=8.56 Hz), 7.53 (1 H, s), 7.45 (2 H, d, J=8.56 Hz), 7.03 (1 H, d, J=8.56 Hz), 6.97 (1 H, d, J=2.52 Hz), 6.92 (1 H, dd, J=8.31, 2.27 Hz), 4.44 (2 H, s), 3.88 (3 H, s), 3.43 (2 H, s), 3.06-3.36 (2 H，m)，2 85_3 〇7 (2 H,叫。lc廳如 (M+H)。 實例10 (S)· 1-((4-(6-(4-氯苯基）_4_側氧基噻吩并[3,2_d] 嘧啶-3(4H)-基）-2-甲氧基苯氧基）甲基）_3,3_二氟環 2 -胺丙酸g旨，鹽酸鹽

A· (SM_((4_(6_(4_氣苯基）_4_側氧基嗟吩并小密啶 3(4H)-基）_2_甲氧基苯氧基）甲基）_33_二氟環丁基2_(第三 丁氧基羰基胺基）-丙酸酯 140588.doc •76· 201000487

在费封管中將B〇c-丙胺酸（94 mg，0.495 mmol)、得自實 例2之6-(4-氣苯基）_3_(4_((3,3_二氟_丨_羥基環丁基）甲氧基）_ 3-甲氧基苯基）噻吩并[3,2_d]嘧啶_4(3H)_酮（50 mg, 0.099 mmol)、4-d 比 σ各咬 0 比咬（μ 68 mg, 0.099 mmol)與 Ν,Ν'-二異 丙基碳二亞胺（0.077 mL, 0.495 mmol)存於 CH2C12 (4 mL)中 之混合物在40 C下授拌1 8小時。在冷卻至RT並在真空下移 除揮發性物質後，對粗產物實施梯度層析（矽膠/ Et〇Ac/己 烷0-3 0%)以提供呈灰白色固體形式之氣苯 基）-4-側氧基噻吩并[3,2_d]嘧啶_3(4H)-基）-2-曱氧基笨氧 基）甲基）-3,3-二氟環丁基2-(第三丁氧基羰基胺基）丙酸酯 (59 mg ’ 0.087 mmol，產率 88%)。4 NMR (400 MHz, CDC13) δ ppm 8.13 (1 H, s), 7.66 (2 Η, d), 7.54 (1 Η, s), 7.46 (2 Η, d), 6.87-7.06 (3 Η, m), 4.96 (1 Η, br. s.), 4.34-4.48 (2 H, m), 4.20-4.34 (1 H, m), 3.87 (3 H, s), 3.09-3.24 (2 H, m)，2.97 (2 H，寬 s.)，1.45 (9 H, s), 1.38 (3 H, d， J=7.30 Hz)。LC-MS : 2.72 min 677 (M+H)。Luna 5u C18 30x4.6mm ID,流速=4 ml/min.，梯度=〇〇/〇 A至 i〇〇〇/0 b運行 2 min. > A=90% H2O/10% MeOH/0.1% TFA, B = 10% H20/ 90% MeOH/0.1% TFA)。 B (S)-l-((4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基α塞吩并[3,2_d]鳴。定- 140588.doc -77- 201000487 3(4H)-基）-2-曱氧基苯氧基）曱基）-3,3-二氟環丁基2-胺丙 酸酯，鹽酸鹽

將來自A項之（S)-l-((4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基噻吩并 [3,2-d]嘧啶-3(4H)-基）-2-曱氧基苯氧基）甲基）-3,3-二氟環 丁基2-(第三丁氧基羰基胺基）-丙酸酯（59 mg，0.087 mmol) 存於25% TFA/CH2C12(4 mL)中之混合物在RT下攪拌30 min。在真空下移除揮發性物質後，藉由製備型HPLC (PHENOMENEX® Axia, Luna 5 micron 30x 100 mm，流速 =40 ml/min.，梯度=0% A至 100% B，運行 10 min.，A=90% H2〇/l〇% MeOH/O.l% TFA, B=10% H2O/90°/〇 MeOH/O.l% TFA)對粗產物實施純化。濃縮期望流份並在高真空下乾 燥，之後添加飽和NaHC03水溶液（6 ml)並用CH2C12(2x10 ml)萃取。經Na2S04乾燥經合併CH2C12層並將其濃縮，之 後藉由在-30°C下將其溶於CH2C12(2 ml)中並添加1.0 M HC1 (0.079 mL，0.079 mmol)/ MeOH(2 ml)來將遊離鹼（42 mg， 0.073 mmol)轉化為HC1鹽。然後濃縮HC1鹽並在高真空下 乾燥以產生呈白色固體形式之（S)-1-((4-(6-(4-氯苯基）-4-側 氧基噻吩并[3,2-d]嘧啶-3(4H)-基）-2-甲氧基苯氧基）曱基）-3,3-二氟環丁基2-胺丙酸醋（41.94 mg，0.073 mmol，產率 83%)。4 NMR (400 MHz，MeOD) δ ppm 8.27 (1 H, s), I40588.doc -78- 201000487 7.73 (2 H, d), 7.63 (1 Η, s), 7.43 (2 Η, d)5 7.02-7.15 (2 Η, m), 6.94 (1 Η, dd, 7=8.56, 2.52 Hz), 4.41 (2 H, d, /=3.02 Hz), 3.91-4.02 (1 H, m), 3.78 (3 H, s), 2.87-3.18 (4 H, m), 1.44 (3 H，d, /=7.30 Hz)。LC-MS : 2.33 min 576 (M+H)。 Luna 5u C18 30x4.6mm ID，流速=4 ml/min.，梯度=〇% A 至 100% B ’ 運行 2 min.，A=90% H2O/10% MeOH/O.l% TFA，B = l〇% H2O/90% MeOH/O.l% TFA。 實例11 5-(1-((4-(6-(4-氯苯基）-4-側氧基噻吩并[3，2-d]嘧啶-3 (4ίί)-基）-2-甲氧基苯氧基）甲基）-3,3-二氟環丁氧基） -5 -側氧基戊酸，納鹽

將戊二酸酐（56.5 mg, 0.495 mmol)、來自實例2之6-(4-氣 苯基）-3-(4-((3,3-二氟-1-羥基環丁基）曱氧基）_3_甲氧基苯 基）°塞吩并[3,2-d]嘧啶-4(3H)-酮（50 mg，0.099 mmol)與 4-吡 咯啶吡啶（14.68 1^，0_099 〇1111〇1)存於(：出(：12(4 1111〇中之混 合物在4 0 C下攪拌1 8小時。在冷卻並在真空下移除揮發性 物質後’藉由製備型HPLC(PHENOMENEX® Axia, Luna 5 micron 3〇xl〇〇 mm,流速=40 ml/min·，梯度=〇% A至 100% B，運行 10 min.，溶劑 A=90% H2O/10% MeCN.l% TFA， 溶劑B = 10% H2O/90% MeCN.l% TFA)對粗產物實施純化。 140588.doc •79- 201000487 - 1 ^ ’辰並在南真空下乾燥以產生純淨遊離酸 (37 mg，〇.6〇 mm〇1)。 若期望’可藉由將〇.5M NaHC03水溶液（0.131 mL, 〇.065 mm〇l)添加至含有該酸（37 mg, 0.60 mmol)之THF溶液（2 mL)中來生成對應鈉鹽。然後濃縮溶液並在高真空下乾燥 以產生王灰白色固體形式之5-0-((4-(6-(4-氣苯基）-4-側氧 基噻吩并[3,2-d]嘧啶-3(4H)-基）_2-甲氧基苯氧基）甲基）_ 3,3 一氟環丁氧基）-5-側氧基戊酸鈉（37.59 mg，0.061 mmo卜產率 61·3%) 0 巾 NMR (4〇〇 MHz, Me〇D) δ 叩以 8-28 (1 H, s), 7.67-7.81 (2 Η, m), 7.62 (1 Η, s), 7.37-7.47 (2 Η, m), 7.01-7.11 (2 Η, m), 6.92 (1 Η, dd, J=8.44, 2.39 Hz), 4.33 (2 H, s), 3.78 (3 H, s), 2.94-3.11 (2 H, m), 2.78-2.95 (2 H, m), 2.27 (2 H, t, /=7.55 Hz), 2.13 (2 H, t, 7=7.43

Hz)，1.68-1.84 (2 H，m)。LC-MS : 2.59 min 619 (M+H)。

Luna 5u C18 30x4.6mm ID,流速=4 ml/min·，替代=〇〇/0 a 至 100% B ’ 運行 2 min·，A=90% H2O/10% MeOH/O.l% TFA，B = 10o/〇 H2O/90% MeOH/0.10/〇 TFA。 分析及生物學評估 首先在真空結合分析中對本發明化合物（即本發明化合 物IA及IB)及化合物达至f(如2007年4月26日公開之美國專利 公開案第2007/0093509 A1號中所述來製備）進行定性以測 定其I或拮抗肽激動劑與人類黑色素集中荷爾蒙受體 (MCHR1)結合之能力。 評價MCHR1活性之放射性配體結合分析 140588.doc -80- 201000487 藉由dounce勻漿及差速離心自表現突變（E4q，A5T) hMCHRl受體之穩定轉染HEK-293細胞來製備膜。用0.5-1.0 pg在總計 0.2 ml含有 1〇 mM MgCl2、2 mM EGTA及 0·1°/〇 BSA(結合緩衝液）之25 mM HEPES(pH 7.4)中培養90 min之膜蛋白來實施結合實驗。對於競爭結合分析，在 〇_〇6-0·1 nM [Phe13、[125l]Tyr19]-MCH及濃度遞增之未標記 測試分子存在下實施反應。藉由在預塗佈有〇 〇75 ml含有 1 % BSA之結合缓衝液之96孔-GFC Unifilter板上實施快速 真空過濾來終止反應，並用0.4 mi含有〇.〇1 % TX-1〇〇之填 酸緩衝鹽水（pH 7.4)將其洗滌3次。乾燥濾板，將〇 〇5 ml MicroScint 20添加至各孔中，且隨後用丁〇1>(：〇11财⑧微孔 板閃爍計數器（Packard)藉由閃爍計數對放射性活性實施定 里。藉由非線性最小二乘分析使用四參數邏輯計算方程來 確定抑制常數。 選擇所表現Ki值為20 nM或更低之化合物來進一步測定 針對由細胞色素P450酶介導之大鼠微粒體氧化降解之代謝 穩定性。在大鼠PK模型中進一步評估表現小於1〇%降解之 化合物以評價其口服生物利用度及進入CNS之能力。對於 本發明化合物IA及IB及化合物生至f而言，除非以前藥形式 (在此評估中前藥為胺基酸酯，即分別為纈胺酸及甘胺酸） 投與化合物（IA及IB及生至£)，否則溶解度限制吸收會顯著 降低口服暴露。採用L_纈胺酸酯前藥來實施與含有认、 c、d及e之亞組的比較性體内研究；使用甘胺酸酯前藥來 實施與含有IB、a、b&f之亞組的比較性研究。在向大鼠 140588.doc 201000487 經口投與10 mg/kg劑量之前藥酯後，進一步評估之標準係 大腦與血漿濃度比為〇·2至3，且8 hr AUC大於生物活性物 貝之3微莫耳*hr。隨後在四天之效力模型中評估符合此標 準之化5物亞組，其中需要每天向生長中的年輕雄性大鼠 投與酯前藥。使用自大鼠、犬、靈長類及人類獲得之肝細 胞對在以30 mg/kg或更低劑量投與時可產生超過5%體重減 輕之劑量依賴性體重減輕之化合物實施進一步定性，以確 疋相對清除率並確定何種物種可最佳地預測人類清除。在 確疋犬對人類PK具有最佳預測性後，使用在犬中之半衰期 來推斷活性化合物之臨床半衰期。 所測試化合物

140588.doc -82- 201000487

140588.doc

a

OCH3 b

Cl

OH

OCH3 c

d

e -83· 201000487

OH

對MCHR 1拮抗劑實施定性之流程圖 式IA及IB化合物 及化合物生至f

Ki < 20 nM

Kj < 20 nM 大鼠微粒體穩定性 <5%降解 在10 mg/kg下之大鼠粗PK值 大腦/血漿 > 〇_2 AUC > 3 pmol*hr 體外效力 >5%損失 肝細胞清除 預測人類 t-i/2 < 50 hr 儘管與化合物ΙΑ及IB(本發明化合物）具有結構類似性， 140588.doc -84- 201000487 但上述化合物a至f仍不能滿足所有標準。 僅本發明化合物认及汨可滿足該等分析各自的選擇栌 準。對於化合物❿言，犬及人類之肝細胞清除率極低。不 隨後在犬中實施之全面PK研究揭示，在犬中之半衰期超過 200 hr。假定預期在人類中之半衰期等長（若並非更長）， 則£系列化合物被視為不期望者，此乃因在臨床研究期間

半哀期超過一週之化合物可使情況顯著變複雜並大大增加 開支’且會引發安全性問題。 此外，隨後以30 mg/kg經一個月向大鼠投與化合物£之研 究揭示’動物會發生阻塞性肝膽損傷。其他調查證實，毒 性藥劑係源自含有化合物£中三級原醇部分之烷基鏈之體 内氧化羥基化的代謝產物。當以高達3〇〇 mg/kg之劑量經 一個月投與大鼠時，化合物以及化合物汨二者皆未誘導膽 道損傷形成，此乃因未發生相當之代謝轉化。 140588.doc -85· 201000487 形成膽道 損傷 所預測之人類半 衰期 35 hr 18-30 hr > 200 hr 犬半衰期 (hr) 32 hr 16 hr > 200 hr 在30 mg/kg下之效力 (成長中之年輕大鼠之 體重損失） ! 6.4% 7.9% ◦ t—H CN CO 寸· OO 大鼠PK AUC (10 mg/kg) 24.5 〇〇 ΓΟ rn m 14.5 宕 大腦： 血漿 〇\ 〇 CN CN cn 0.09 (N 大鼠微粒 體穩定性 92% 95% 20% 40% 1 60% 100% 100% 98% 人類 Ki (nM) 00 o 〇\ (N OO CN 化合物 編號 < s cdl Xi\ Ol T3I ωι 140588.doc -86- 201000487 化合物ΙΑ及IB亦表現與犬類似之人類肝細胞清除率；然 而，在犬中之半衰期在20 hr以下。因此，預測所推斷該兩 種化合物在人類中之半衰期為20-40 hr。因此，化合物IA 及IB表現極佳藥效、藥物代謝動力學及安全性特徵。 前藥之評估 在使用插套管 SPRAGUE DAWLEY® (CD, Charles River Breeding Laboratory)大鼠進行八小時PK研究中評價前藥增 強暴露（生物利用度）之相對能力。化合物（母體及前藥酯） 當於0.5 %曱基纖維素水溶液中形成懸浮液時，依2. 〇 mi/kg 口服投與’當於0 1 % Tween 80水溶液形成懸浮液時，依 10 mg/kg 口服投與。在第1、2、4及8 hr取血樣。在測定母 體濃度後，計算八小時研究之AUC。 _所投與化合物 母體之AUC 〇iM*hr) IA 之 AUC 實例3 24.5 實例4 24.5 實例5 55 實例6 52 實例7 17 IB 之 AUC 實例8 36 實例9 38 實例10 19 實例11 2.5 在成長中之年輕大鼠中評價MCHR體内活性 將重約 240克之雄性 SPRAGUE DAWLEY® (CD，Charles River Breeding Laboratory)大鼠置於具有ADRI⑧寢具之單 獨塑料籠中。使室内維持在72°F及50°/〇濕度，且實施12/12 140588.doc -87- 201000487 光暗循環，在16:00熄燈。使大鼠適應5天，之後開始研究 以選擇食物。正常混合飼料（HARLAN TEKLAD®, 20 18)含 有18%蛋白質、5%脂肪及73%碳水化合物，而高脂肪高糖 飲食（Research Diets (D2327))含有20%蛋白質、40%脂肪及 40%碳水化合物，其中碳水化合物全部為蔗糖並且脂肪為 豆油及椰子油。研究已揭示，大鼠對高脂肪椰子油表現出 較高偏好。研究已揭示，大鼠對高脂肪/高蔗糖飲食表現 出較高偏好（80%偏好）。每天量測體重及兩種食物之消耗 以及水攝入量。在整個研究期間水可任意獲得。食物消耗 表示為每日卡路里消耗，其係混合飼料克數與千卡/克 (3.5)之乘積加上高脂肪高糖食物克數與千卡/克（4.59)之乘 積之和。 在研究之第〇天實施藥物治療之前量測基線體重。基線 食物消耗係初次藥物治療之前3天之平均值。自第0天開始 每天在1 5 :00 口服投與藥物且每天一次連續實施至第4天， 當作為存於0.5%曱基纖維素水溶液中之懸浮液時以2.0 ml/kg口服投與，當作為存於0.1 % Tween 80水溶液中之懸 浮液時以3.0、10及30 mg/kg口服投與。所有數據皆係使用 ANOVA及FishersPLSD統計學來評估。 生物學數據 實例 劑量(mg/kg)相對於媒劑之體重減輕 1A(根據實例4投藥） 3 2.6% 10 3.5% 30 6.4% 1B(根據實例9投藥） 1 2.9% 3 4.5% 140588.doc -88- 201000487 實例 劑量(mg/kg)相對於媒劑之體重減輕 10 6.4% 30 7.9% 在成年肥胖大鼠中評價MCHR體内活性 將得自 Charles River Laboratories且體重為 250-300 g 之 雄性大鼠單獨飼養於塑料籠中，且實施在1 pm熄燈之12小 ' 時光/12小時暗循環。使動物房維持在72°F及50%濕度。藉 • 由使大鼠同時獲得兩種不同飲食HARLAN TEKLAD®大鼠 混合飼料（標準混合飼料）及研究性飲食D1 2327(高脂肪高 ( ' 碳水化合物高適口性飲食）來使大鼠變肥胖。研究性飲食 混合飼料包括40%植物脂肪、40%碳水化合物（蔗糖）及20% 蛋白質。Harlan飲食包括5%脂肪（豆油）、67%碳水化合物 (澱粉）及22%蛋白質。所用正常Harlan大鼠飲食含有3.4千 卡/克之飲食，且研究性飲食第12327號含有4.59千卡/克。 以飲食選擇計劃將大鼠飼養1 0週以誘導肥胖症。在開始飲 食選擇計劃後，在研究持續期間根據該計劃來飼養大鼠。 收集基線進食及體重且使用其來將動物分為多個治療組。 () 在飲食選擇計劃開始時平均大鼠體重為250克。在慢性投 藥開始時大鼠之平均體重為661.7±6.3(平均值土平均標準偏 • 差）克。 在暗循環開始前一小時對大鼠實施經口投藥。每天在投 藥時量測體重及食物消耗。將食物消耗轉換為千卡消耗。 藉由使每種飲食之千卡消耗相加來確定總千卡消耗，且此 可藉由使每種飲食消耗之克數乘以千卡/克來確定。 在研究第 2天使用得自 Columbus Instruments, Columbus, 140588.doc -89- 201000487

Ohio之Opto-M3系統來測定動物之運動活性。此量測係在 第2天貫施間接量熱評價後立即加以實施。在晚上監測、、舌 性’此始於3 pm並持續1 6小時。將一段時間内之光束中斷 分為若干個60分鐘之區段。 藉由間接里熱法使用知自Columbus Instruments

Columbus，Ohio之Oxymax系統來量測呼吸商數（Rq)及耗氧 量（v〇2)。在研究第2天及第15天實施量測。對大鼠實施投 藥且將其置於單獨室中。對大鼠實施六次量測，各量測之 間間隔45分鐘。在1 〇:〇〇 AM開始量測，在} pM開始暗循 環。將數據標準化為體表面積（kgG·75) ^使用重複量測 ANOVA之後貫施簡單效應分析來分析耗氧量及呼吸商數 之統計顯著性。使用得自Echo Medical Systems, H〇uston，

Texas之回波MRI來測定身體組成。在研究第μ天量測身體 脂肪％。測定身體脂肪％變化；使用AN〇va且經由 Fischers PLSD實施事後比較來確定統計顯著性。 生物學數據 實例 •' 劑量(mg/kg) 劑之體重減輕 1A(根據實例3投藥） 媒劑 0.3 --__2.09% 1.0 3.90% 3.0 3.57% 10 r M，0/〇 1 30 10 16% 媒劑1 1B(根據實例9投藥） 0.03 ——__1.7% 0.1 -__3.2% 0.3 1 6 6% 3 ____7.8% 140588.doc -90-

Claims (1)

1. 201000487 七、申請專利範園： 種下式IA之化合物，包括其所有立體異構體：

   或其前藥或醫藥上可接受之鹽。 2.如叫求項丨之化合物，其呈其選自由以下組成之群之前 某酉曰或鹽形式.乙酸酯、特戊酸酯、曱基碳酸酯、苯曱 酸酯、磷酸酯、及胺基酸酯；或呈其選自由磷酸乙縮醛 (Phosphate acetal)及〇-葡萄糖苷組成之群之前藥醚或鹽 形式。 3 ·如請求項1之化合物，其中該前藥酯係

   其中m Η、烷基、苄基；或H02C-(CH2)y—， ’ /、甲 y 為1至4， 且該前藥醚係

   其中R係烷基或氫且Ra係Η、烷基或苄基。 包括 4.如請求項1之化合物，其具有以下結構中之一種 140588.doc 201000487

   140588.doc -2 - 201000487 Cl

   0、 OCH3 IA5 或具有任一上述結構之醫藥上可接受之鹽。 5. 一種具有以下結構IB之化合物，包括其所有立體異構

   6·如凊求項5之化合物，其呈其選自由以下組成之群之前 藥S日或鹽形式：乙酸酯、特戊酸酯、甲基碳酸酯、苯甲 酸酯、磷酸酯、及胺基酸酯；或呈其選自由磷酸乙縮醛 及〇-葡萄糖苷組成之群之前藥醚或鹽形式。 7_如請求項6之化合物，其中該前藥酯係

   或 HO2C — (CH2>y—C-Ον/χο ’ 其中 y 其中Ra為Η、烷基、苄基 為1至4， 140588.doc 201000487 且該前藥醚為

   其中R係烷基或氫且Ra係Η、烷基或苄基。 8.如請求項5之化合物，其具有以下結構中之一者，包括 其所有立體異構體：

   旧3 、或 140588.doc -4- 201000487 F F

   O IB4 9. 或具有任—上述結構之醫藥上可接受之鹽。 -種醫藥組合物，其包含至少一種如請求項b 之化合物及視需要選用之至少 永項5 夕銘aL ,, 裡k目由以下組成夕*V ⑺療樂#j :抗肥胖症藥劑、抗糖尿病藥劑、人,、 ⑽劑、降膽固醇/脂質藥劑、 艮欲 —種嫛蘊μ -Γ β - 浪W ’以及至少 -藥上了接党之稀釋劑或載劑。 10. —種醫藥袓人， 化合物及至；—種二至由少—種如請求項1或請求項5之 種選自由以下組成 劑：抗肥胖症藥劑、抗糖尿 ：H療藥 固轉質藥劑、及升HDL筚劑7 抑制劑、降膽 -種如請求項!或5之化合物之 治療肥胖症、糖尿病、焦慮症、抑以:於製造可用於 藥物。 卩费症或炎症性腸病之 13· —種具有以下結構之化合物 140588.doc 201000487

   14 _ 一種將以下結構之酮 o2n

   實例1B項之酮 140588.doc -6- 201000487 經酶促還原為以下結構之醇之方法 OH

   實例1C項之（R)-醇 其包含使該酮與酮還原酶反應，以將該酮轉化為該醇。 15·如請求項14之方法，其中該酮還原酶係_還原酶 (KRED)-m或酮還原酶（KRED)_113或自念珠菌γ⑽山▲ re似⑷^^"^八丁^⑧第5651 1號）產生之酮還原 酶。 16· —種製備式IA化合物之方法

   其包含採用酮還原酶-112或酮還原酶-113、或該微生物 株念珠菌SC16117(ATCC® 第 565 1 1 號）酶促還原具有以下結構之化合物

   以形成該具有以下結構之（R)-醇 140588.doc 201000487

   及在有機溶劑存在下，使該上述（R)-醇與具有以下結構 之化合物縮合 CO,CH, Hal

   N=\ N(CH3)2 以形成該式IA化合物。 140588.doc 201000487 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式··

   140588.doc