TW201000447A - New compounds useful in pain therapy - Google Patents

Description

201000447 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎化合物、 物及该等化合物在治療中之用 等化合物之方法。 含有該等化合物之醫藥組合 途。本發明亦係關於製備該 【先前技術】 疼痛病狀之當前治療方宏4丨m 卜 縻案利用採用極有限的藥理學機制 範圍之化合物。一類化合物 .ά / W犬負鴉片（opioid)刺激内源内啡 肽糸統，§亥類別之一實例為啤αr 貝1〗马馬啡鹼（morphine)。類鴉片 化合物具有若干限制盆使用夕左t价 、 ，、便用之缺，例如嘔吐及便秘作用 及對呼吸此力之負面影響。第二大類止痛藥⑶或C〇x 2 型非類固醇消炎止痛藥亦具有以下缺點，諸如在劇痛病狀 下力效不《及在長期使用CQX_ i抑制劑時致使黏膜潰 瘍/、他目則所用樂物之止痛作用的機制尚未得到充分表 徵’且/或具有有限的治療潛力。 、 。已知阻斷神經中大多數納通道類型之局部麻醉劑適用於 緩解人體小面積之，疼痛且適用於阻斷神經自末梢神經系統 傳導至中樞神經系、统。其亦可用於藉由在脊鐽處滴注局部 麻醉劑溶液來阻斷感覺信號轉導之最後提及之方法。然 而由於其同毋性（尤其心臟毒性），其不能作為通常有用 之止痛藥用於全身性投與。因此，仍需要更多參與疼痛信 號轉導之選擇性鈉通道調節劑。 、5為止已遠殖且在功能上表現九種鈉通道亞型 (Wood JN, Baker M.. Current Opinion in Pharmacology 140346.doc 201000447 2001，1，17-21)。其在整個肌肉及神經組織中差異性表現 且展示不同生物物理學特性。所有電壓閘控鈉通道（NaV:s) 之特徵在於與其他離子相比對鈉之高度選擇性，及其電壓 依賴性閘控。藉由應用遺傳分析已展示，編碼納通道 NaV1.7之基因的突變（該突變使該蛋白喪失功能）可使人類 變得對疼痛幾乎不敏感（Cox JJ等人，TVahre 2006，444 894-898)。 已熟知，神經中電壓閘控之鈉通道在神經痛中起關鍵作 用（Baker MD 及 Wood JN. 7>⑼A k Pk則 2001，22, 27-31)。末梢神經系統損傷通常在初始 損傷消退之後引起持續很久之神經痛。神經痛之實例包括 (但不限於）疮療後神經痛、三叉神經痛、糖尿病性神經 病、慢性下背痛、擬肢痛、由癌症及化學療法所致之疼 痛、慢性骨盆疼痛、複雜區域疼痛症候群及相關神經痛。 人類患者以及神經痛之動物模型中已展示，初級傳入感覺 神經元之損傷可引起神經瘤形成及自發活動以及回應通常 無害刺激之誘發活動。NaVl .7表現於人類神經瘤中，其為 通常存在於慢性疼痛狀態下之腫脹及過敏神經及神經末梢 (Jcia 2002, 144, 803-810)。 在末梢神經損傷之大鼠模型中，損傷神經中之異位活動 對應於疼痛之行為病徵。在該等模型中，靜脈内施用納通 道阻斷劑及局部麻醉劑利多卡因（lid〇caine)可以不影響一 般行為及運動功能之濃度抑止異位活動且逆轉觸覺異常疼 痛（Mao J及 Chen LL，Pak，2000, 87, 7-17)。 140346.doc 201000447 除神經痛以外’鈉通道阻斷劑在癲癇症及心律不整之治 療中亦具有臨床用途°新近來自動物模型之證據表明，納 通道阻斷劑亦可用於由中風或神經外傷造成之缺血情況下 的神經保護及用於患有多發性硬化症（MS)之患者。 【發明内容】 根據本發明，提供一種式I化合物：

其中 R為風、Ch烷基、Cl_3烷氧基、氰基、羥基或鹵基； 且其中該c]·3烷基視情況經一或多個獨立地選自羥基、C】· 烷氧基及氟基之取代基取代；且該c〗_3烷氧基視情況經一 或多個氟基取代； m為1、2或3 ; 及R3係各自且獨立地選自氫、c"鹵烷基、函烷 氧基、函基、c“烷氧基、c丨_4烷基及C”環烷氧基； 其中該C3.7環燒氧基視情況經一或多個氣基取代； 且R2及R3不可同時為氫； 1為C!_4伸烧基、伸戊基或伸環烷基，其中該〔Μ伸 140346.doc 201000447 烷基、該伸戊基或該c3_6伸環烷基可視情況經一或多個x4 取代； X4為氟基、Cw烷基、C3.7環烷基、Cw烷基OCu烷基、 Ci-3 烷氧基、氰基、羥基、R4〇(〇〇)-、R4NR5(C=0)-、 R40(C = 0)NR5- 、R4NR5(C=0)NR5- 、r4(c=o)o-、 R4(〇o)nr5-、R4NR5(〇0)0-、r4nr5(c=o)nr5-、c5_6雜 芳基（〇〇)或c5.6雜芳基； R4為Cw烷基、Cl_4烷基OCN4烷基、c5.6環烷基、芳基或 方基-Ci_2烧基； R5為Η或甲基； 且其中該(^_3烷基、該Cl_3烷基OCw烷基、該Cw烷氧基 及C !_4烧基磺醯基視情況經一或多個氟基取代； L2為視情況經一或多個X4取代之cN3伸烷基； 以及其醫藥學上可接受之鹽或異構物或該異構物之鹽。 本發明之另一實施例為式J化合物，其中： R1為氫、Cw烷基、Cl_3烷氧基或鹵基； m為1 ; R2及R3係各自且獨立地選自氳、Cl-4鹵烷基、Cm鹵烷 氧基及CK4烷基； 乙1為伸烧基、伸戊基或c3 6伸環烷基，其中該Cl 4伸 烧基、該伸戊基或該C3_6伸環烷基可視情況經一或多個X4 取代； ^為匸…烷基；且 l2為cK3伸烷基。 140346.doc 201000447 本發明之一鲁 π知例為式ι化合物，其中h為伸乙基。 本發明之^ g ^ —貫施例為式I化合物，其中Li為亞曱基。 本發明之^ g —貫施例為式I化合物，其中L!為伸戊基。 本發明之__ h 力—貧施例為式I化合物，其中h為伸環己 基。 本Ί务明之^ α _ 力—貫施例為式I化合物，其中L!係經至少一 個X4取代。 ，其中X4為甲基。 ，其中L2為亞曱基。 ，其中L2係經至少一 本發明之另—普 力實施例為式I化合物 t發明之另—實施例為式I化合物 本發明之另—實施例為式I化合物 個X4取代。 本發明之另—實施例為式I化合物，其中X4為甲基。 本發明之另一實施例為式I化合物，其中m為1。 本發明之—實施例為式I化合物，其中R1為氫。 本毛月之另—貫施例為式I化合物’其中R1為曱氧基。 本發明之另—實施例為式I化合物，其中R1為甲基。 本發明之另—實施例為式I化合物，其中R1為氟基。 本發明之一實施例為式I化合物，其中R2為氫。 本發明之另—實施例為式I化合物，其中R2為-〇CF3。 本七月之另一實施例為式I化合物’其中R2為-CH2-CF3。 如鈿述技術方案中任一者之化合物，其中R3為氫。 本發明之一實施例為式I化合物，其中R3為-〇CF3。 本發明之另一實施例為式I化合物，其中R3為曱基。 本發明之另一實施例為選自以下任一者之化合物： 140346.doc -10- 201000447 2-(2-氰基乙基）-3-側氧基-N-(4-(三氟曱氧基）苯曱基）異 吲哚啉-1 -曱醯胺； 氰基環己基）-3-側氧基-N-(4-(三氟曱氧基）苯甲 基）異吲哚啉-1-甲醯胺； 氰基環己基）-3-側氧基-N-(4-(三氟曱氧基）苯甲 基）異吲哚啉-1-曱醯胺； 2-(2-氰基乙基）-7-曱氧基-3-側氧基-N-(4-(三氟甲氧基） 笨曱基）異吲哚啉-1-曱醯胺； 2-(2-氰基乙基）-7-甲基-3-側氧基-N-(4-(三氟甲氧基）苯 曱基）異吲哚啉-1-甲醯胺； 2-(2-氰基乙基）-3-側氧基-N-( 1-(4-(三氟曱氧基）苯基）乙 基）異吲哚啉-1-曱醯胺，異構物4 ; 2-(2-氰基乙基）-3-側氧基-N-(3-(三氟曱氧基）苯曱基）異 °弓丨°朵琳-1 -甲酸胺； 2-(2-氰基乙基）-N-(2-甲基-4-(三氟曱氧基）苯曱基）-3-側 氧基異吲哚啉-1-曱醯胺； 2-(2 -氰基乙基）-4-^-3 -側氧基-N-(4-(三氟曱氧基）笨曱 基）異吲哚啉-1-曱醯胺； 2-(2 -亂基乙基）-7 -氟-3-側氧基-N-(4-(三氣曱氧基）笨曱 基）異吲哚啉-1-甲醯胺； 2-(氰基曱基）-3-側氧基-N-(4-(三氟甲氧基）苯甲基）異吲 。朵淋-1 -曱酸胺； 2-(1-氰基丙-2-基）-3-側氧基-N-(4-(三氟曱氧基）苯曱基） 異吲哚啉-1 -曱醯胺； 140346.doc -11 - 201000447 2-(3-氰基-3-甲基丁基）側氧基_N_(4_(三氟f氧基）苯 曱基）異吲哚啉-1-甲醯胺； 2-(5-氰基戊基）_3_側氧基_N_(4_(三氟曱氧基）苯曱基）異 β引°朵琳-1 -曱醯胺；及 2-(2-氰基乙基）_3_側氧基_Ν_(4_(2,2,2、三氟乙基）苯甲基） 異吲哚琳-1 -甲醯胺。 為避免疑義’應瞭解在本說明書中，「CD」意謂具有 1、2、3、4、5或6個碳原子之含碳基團。 除非另作說明，否則在本說明書中’術語「烷基」包括 直鏈與支鏈烷基，且可為（但不限於）甲基、乙基、正丙 基、異丙I、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正 戊基、異戊基、新戊基、正己基或異己基。術語炫基 具有1至4個碳原子且可為（但不限於）甲基、乙基、正丙 基、異丙基或第三丁基。 如本文所用之術語C〗-4烷基係定義為具有1至4個碳原子 之直鏈、支鏈或環狀（其中存在至少三個碳原子之環）烷基 鏈’且可為（但不限於）甲基、乙基、正丙基、異丙基、環 丙基％ 丁基或第三丁基。如本文所用之術語烷基係 疋義為具有1至3個碳原子之直鏈、支鏈或環狀烷基鏈（存 在三個碳原子之環），亦即：甲基、乙基、正丙基、異丙 基或環丙基。 本文用於L丨之術5吾c丨_4伸烧基可為直鍵、支鍵或環狀 伸烷基，且包括（但不限於）亞甲基、伸乙基、伸正丙基、 伸異丙基、伸正丁基、伸異丁基及伸第三丁基烴鏈。該Ll 140346.doc •12· 201000447 基團可各自視情況經—或多個如整個本說明書及中請專利 範圍中所定義之X4取代。 本文用於L2之術语c丨·3伸烧基可為直鏈、支鏈或環狀 伸院基，且包括（但不限於）亞曱基、伸乙基、伸正丙基及 伸異丙基烴鏈。該L2基團可各自視情況經一或多個如整個 本說明書及申請專利範圍中所定義之X4取代。 本文中用於Ll之術語「（：3.6伸環烧基」包括伸環丙基、 伸環丁基、伸環戊基及伸環己基。該Li基團可各自視情況 經一或多個如整個本說明書及申請專利範圍中所定義之X4 取代。 除非另作說明，否則術語「烷氧基」係指通式_〇_R之基 團，其中R係選自烴基。術語r Cl_6烷氧基」可包括（但不 限於）曱氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、第 二丁氧基、異丁氧基、環丙基甲氧基、烯丙基氧基或炔丙 基氧基。 ' 如本文所用之術語「C! _3烧氧基」可包括（但不限於）甲 氧基、乙氧基或丙氧基。如本文所用之術語「C]4院氧 基」可包括（但不限於）甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧 基、丁氧基、第三丁氧基、異丁氧基。 在本發明之一實施例中’「C!·3烷氧基」可經一或多個說 原子取代，由此烷氧基中之一或多個氫原子經一或多個氣 原子置換’諸如-〇-CH2-CF3、-0-ch2-ch2-cf3、-o-ch-f2。 除非另作說明，否則術語「Cw烷基oc^烷基」係指具 有通式R-0-R之醚基，其中R係選自烴基。術語r Ci 3淀芙 140346.doc -13- 201000447 OC!·3烧基」可包括（但不限於）二甲醚、曱基乙基喊、甲基 丙基醚、乙醚'二丙醚或曱基異丙基醚。「C13烷基0C13 烧基」可包括（但不限於）二甲醚、甲基乙基醚、甲基丙基 醚、乙醚、二丙醚或曱基異丙基醚。 在本說明書中，除非另作說明，否則術語「鹵烷基」意 謂如上文所定義之烷基，其係經如上文所定義之_基取 代。術語「C,-4鹵烷基」可包括（但不限於）氟甲基、二氟 甲基、三氟甲基、a甲基、二氯甲基、三氯曱基或氟氣曱 基。 在本說明書中，除非 立 「…’， 以π州托·.囫玩氧基」 思明如上文所定義之燒氧基，其係經如上文所定義之齒基 取代。術語「c"齒烷氧基」可包括（但不限於）氣甲氧 基、二氣甲氧基、三氟甲氧基、氣乙氧基或二氧乙氧基。 在本β明書巾，除非另作說日月，否則術語「環燒基」係 經取代、部分或完全飽和之單環、雙環或橋接煙 ’、、、術6吾「C3-7環烷基」可為（但不限於）環丙基、产 丁基、環戊基或環己基。 「 衣 戊基或環己基。 H㈣基」係定義為環 :語「環烷氧基_」係指經由氧基_之〇_原 錢部分的環烧基。如本文所用之。罐氧 : 基。 衣己基、環丙基、〇·環丁基及_〇-環 單獨使用或作為 有一或多個具有芳 字尾或字首使用之術語「芳基」係指具 方矢特徵（例如4n+2個非定域電子）且包八 140346.doc -14- 201000447 5至多達約u個碳原子之多元不飽和碳環的煙基，其中該 基團係位於芳環之碳上。術語「c6 ^基」可為⑽^ 於）苯基、萘基及其類似基團。 除非另外規定，否則芳基可經—或多個包括侦、函 基、氰基n Cl.6烧基、Cl禮氧基或胺磺醯基之取代 基取代。當經取代時，芳基較佳經一個與三個之間的 基取代。 除非另作說明，否貝彳術語「R5(C=Q)」係指具有通式R 之醯基。 除非另作說明’否則術語「r40(c=0)」係指具有通式 R-0-(C=0)之烧氧羰基。 “單獨使用或作為字尾或字首使用之術語「雜芳基」係指 芳環，其中環中之至少一個原子為非碳元素，諸如n、s及 〇。各雜芳基可經由該雜芳基之碳原子或經由該雜芳基之 一個氮原子鍵結至分子之其餘部分。 如本文所用之被f·令五「P Ή· , T ° Cs-6雜方基」為具有5至6個環原子 且該5至6個環原子中之至少一者為選自n、认〇之雜原子 的芳環。該「C5-6雜芳基」之實例為。比咬基…塞吩基"米 唾基、。比唾基。 在本°兄明書中’除非另作說明，否則術語「齒基」及 「齒素」可為氟、碘、氯或溴。 .除非另作說明’否則術語「烷基磺醯基」係指通 式S02 R之基團，其中尺係選自煙基。術語「^_4炫基石黃醯 基」可包括（但不限於）甲基伽基、乙基石黃醯基、正丙基 140346.doc 201000447 磺醯基、異丙基石黃醯基、正丁基確醯基、異丁基石黃酿基或 第三丁基磺醯基。 應暸解，在整篇本說明書中，本發明之化合物中環上之 取代基的編號及性質應經選擇以避免空間上之不當組合。 為避免疑義，應瞭解，若在本說明書中基團經「上文所 定義」修飾，則該基團涵蓋最先存在且最廣泛之定義以及 對於該基團之每一特定定義及所有特定定義。 本發明係關於如上文所定義之式丨化合物以及其醫藥學 上可接文之鹽。用於樂物調配物之鹽應為醫藥學上可接受 之鹽。 本發明化合物之適用的醫藥學上可接受之鹽之實例為 (例如）酸加成鹽，諸如與無機或有機酸形成之鹽。適用鹽 之另一實例為鹼金屬鹽，諸如鹼土金屬鹽；或與有機鹼形 成之鹽。本發明之適用鹽之實例為乙酸鹽、反丁烯二酸 孤順丁稀一酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴 酸鹽、硫酸鹽及磷酸鹽。 根據本發明適用之其他醫藥學上可接受之鹽及製備該等 鹽之方法可見於（例如）Remingt〇n,s Pharmaceutical

Sciences(第 18版，Mack Publishing Co.)中。 本發明之化合物可展現互變異構現象。所有互變異構形 式及其混合物均包括於本發明之範疇内。詞語「互變異構 現象」係指酮型與稀醇型之間的化學平衡，其中稀醇型與 酮型彼此為互變異構物。 本發明之化合物亦可含有一或多個不對稱碳原子且因此 140346.doc 16 201000447 可展現光學異構現象，諸如一或多種對映異構物及/或非 對映異構物。非對映異構物可使用習知技術（例如層析或 分步結晶）進行分離。各種立體異構物可藉由使用習知技 術（例如分步結晶或飢0技術）分離該等化合物之外消旋或 其他混合物而分離。或者’可藉由使適當光學活性起始材 料在不會引起外消旋或差向異構化之條件下反應或藉由 (例如）用W對掌性酸進行衍生，繼而藉由習知方法（例如 HPLC、一氧化石夕層析）分離非對映異構醋來製備所需光學 一構物。所有立體異構物肖包括於本發明之範嘴内。 醫藥組合物 、艮據本發明之—實施例，提供_種醫藥组合物，其包含 ⑺療有效$之作為活性成份的本發明化合物或其醫藥學上 可接受之鹽以及一或多種醫藥學上可接受之稀釋齊卜、職形 劑及/或惰性载劑。 醫藥组合物可為適於經口投藥之形式，例如旋劑 =内糖^散劑、顆粒或膠囊；適於非經腸注射（包括靜 ' 肌肉内、血管内或輸注)之形式，如益箇溶 液、懸洋液或乳液；適於局部 又樂之形式例如軟膏劑、 貝占片劑；或適於經直腸投藥之形式，例如检劑。 -般而言，以上組合物可以習知方式使 賦形劑、鑿蕴興μ可分— 人夕種白知 備。 ，、子了接受之稀釋劑及/或惰性載劑來製 :治療哺乳動物(包括人類)時，本發明化合物 劑里在經口投藥時為約5至1〇〇 g/kg體重且在非經腸投藥 140346.doc 201000447 時為約0.01至250 mg/kg體重。 *活性成份之典型日劑量在寬範圍内變化且應取決於各種 素°者如相關適應症、所治療疾病之嚴重性、投藥途 徑、患者年齡、體重矣性別及所用之特定化合物，且可由 醫師確定。 醫藥用途 本發明之化合物預期適用於治療。與其他必須鈉通道相 比，如本文中所述且主張之式I化合物或其醫藥學上可接 及其相應活性代謝物在納通道祕17處展現高度 效能且亦展現對該通道之高度選擇性。因此，本發明之化 »物預期適用於治療與NaV1/^ca<維中所存在之其他納 通道的上調相關之病狀。 本發明之化合物可用於對哺乳動物（包括人類）之鈉通道 產生抑制作用。 本發明之一實施例係關於如上文所定義之式I化合物用 於製造治療Navi.7介導的病症之藥物之用途。 本發明之式I化合物預期適用於治療疼痛病症，諸如： 急：疼痛；慢性疼痛；神經痛，諸如糖尿病性神經病丨與 關郎炎及類風濕性疾病相關之發炎疼痛；下背痛；術後疼 痛；與包括癌症、絞痛、腎絞痛或膽絞痛、月經、肌肉纖 維疼痛、下背痛、術後疼痛、癌症疼痛、内臟疼痛（諸如 慢性骨盆疼痛、膀胱炎、㈣、胰腺炎）、局部缺血性疼痛 或痛風的多種病狀相關之疼痛。 本發明之另一態樣為式I化合物用於治療血管性頭痛（諸 140346.doc -18- 201000447 如偏頭痛）之用途。 本發明之另一態樣為式I化合物用於治療與紅斑性肢 痛、牛皮癖、嘔吐、尿失禁及膀胱過度活動（hyperactive bladder)相關之疼痛病狀之用途。 本發明之另一實施例為式〗化合物用於治療癲癇症之用 途。 本發明之一實施例係關於如上文所定義之式^匕合物用 於治療與關節炎、肌肉纖維疼痛、下背痛、術後疼痛、癌 症疼痛、内臟疼痛（諸如慢性骨盆疼痛、膀胱炎、IBS、胰 腺炎）或局部缺血性疼痛相關的疼痛病狀之用途。 本發明之一實施例係關於如上文所定義之式〗化合物在 治療中之用途。 本發明之另一實施例係關於如上文所定義之式j化合物 用於製造治療以下疼痛病症的藥物之用途：諸如急性疼 痛，k性疼痛；神經痛，諸如糖尿病性神經病；與關節炎 及類風濕性疾病相關之發炎疼痛：下㈣；術祕,痛；與 包括癌症、絞痛、冑絞痛或膽絞痛、月經、肌肉纖維疼 痛下月痛、術後疼痛、癌症疼痛、内臟疼痛（諸如慢性 骨盆疼痛、膀胱炎、、眭B令火、α 人1BS胰腺炎）、局部缺血性疼痛或痛 風的多種病狀相關之疼痛。 本發明之另—態樣為式1化合物詩製造用於治療i管 性頭痛（諸如偏頭痛）之藥物之用途。 本發月之另態樣為式合物用於製造用於治療與紅 斑性肢痛、牛皮癬、嘔吐、尿失禁及膀胱過度活動相關的 140346.doc -19- 201000447 疼痛病狀之藥物之用途。 本發明之另-實施例為式工化合物用於製造用於 癎症之藥物之用途。 ~;… 本發明之另一實施例係關於一種治療以下任—疼痛病： 之方法：諸如急性疼痛；慢性疼痛；神經痛，諸如糖：工 性神經病；與關節炎及類風濕性疾病相關之發炎疼痛；= 背痛；術後疼痛；與包括癌症、絞痛、腎絞痛或膽絞痛了 月經、肌肉纖維疼痛、下背痛、術後疼痛、癌症疼痛、内 臟疼痛（諸如慢性骨盆疼痛、膀胱炎、IBS、胰腺炎）、局 部缺血性疼痛或痛風的多種病狀相關之疼痛；由此對需要 *亥治療之個體投與如上文所定義之式〖化合物。 本發明之另一態樣為一種治療血管性頭痛（諸如偏頭痛） 之方法，由此對需要該治療之個體投與如上文所定義之式 I化合物。 本發明之另一態樣為一種治療與紅斑性肢痛、牛皮癬、 嘔吐、尿失禁及膀胱過度活動相關的疼痛病狀之方法，由 此對需要該治療之個體投與如上文所定義之式〗化合物。 本發明之另一實施例為一種治療癲癇症之方法，由此對 需要該治療之個體投與如上文所定義之式〖化合物。 本發明之另一實施例為如上文所定義之用於治療以下疼 痛病症之式I化合物：諸如急性疼痛；慢性疼痛；神經 痛’諸如糖尿病性神經病；與關節炎及類風濕性疾病相關 之發炎疼痛；下背痛；術後疼痛；與包括癌症、絞痛、腎 絞痛或膽絞痛、月經、肌肉纖維疼痛、下背痛、術後疼 140346.doc -20- 201000447 2、癌症疼痛、内臟疼痛(諸如慢性骨盆疼痛、膀胱炎、 BS胰腺火）、局部缺血性疼痛或痛風的多種病狀相關之 疼痛。 七月之另態樣為如上文所定義之用於治療血管性頭 - 痛（諸如偏頭痛）之式I化合物。 t發明之另—態樣為如上文所定義之用於治療與紅斑性 肢痛、牛皮癬"區吐、尿失禁及膀胱過度活動相關的疼痛 病狀之式I化合物。 、 本發明之另-實施例為如上文所定義之用於治療癲癎症 之式I化合物。 ’ 組合 如本文所定義之疼痛治療可作為唯一治療來應用，或除 本發明化合物以外亦可包括投與其他止痛藥或佐劑治療。 該治療可（例如）包括與本發明化合物組合之以下類別之緩 解疼痛成份中的一或多者： ^ a)類鵪片止痛藥，例如嗎啡鹼、凱托米鲖 (ketobemidone)或芬太尼（fentanyl); b)NSAID或COX-1/2類止痛藥，例如布洛芬 (ibuprofene)、萘普生（naproxene)、塞來昔布 (celecoxib)或阿司匹林（acetyisaiicyiic acid)，及其人 有一氧化氮供給基團之類似物； C)止痛佐劑’諸如阿米替林（amitriptyline)、丙味嗅 (imipramine)、度洛西；;丁（dui〇xetine)或美西律 (mexiletine)； 140346.doc -21 - 201000447 d) NMDA拮抗劑’例如氯胺酮（ketamine)或德米托番 (dextrometorfan)； e) 鈉通道阻斷劑，例如利多卡因； f) 抗^厥樂’例如痛痙寧（carbarnazepine)、托。比g旨 (topiramate)或拉莫三嗪（iam〇trigine); g) 抗驚厥/止痛胺基酸，諸如加巴喷丁（gabapentin)或普 瑞巴林（pregabalin); h) 大麻驗（cannabinoid)。 該組合之各活性化合物可同時、分別或依次投與。 製備方法 本發明之一態樣提供一種製備式][化合物或其鹽之方 法。 在整個該等方法之以下說明中，應瞭解，適當時將以熟 習有機合成技術者易於瞭解之方式向各反應物及中間物添 加合適保護基且後期自各反應物及中間物移除該等保護 基使用s亥寻保5蒦基之習知程序以及合適保護基之實例 (例如）描述於「Green’s Protective Groups in Organic Synthesis」P.G.M· Wuts, T.W. Green, Wiley, New York, 2007中。其他合適反應之參考文獻及說明描述於有機化學 之教科書（例如「Advanced Organic Chemistry」，March， 第 4版，McGraw Hill(1992)或「Organic Synthesis」， Smith，McGraw Hill，（1994))中。雜環化學之代表性實例參 看（例如）「Heterocyclic Chemistry」，J. A. Joule，K. Mills, G_ F. Smith ’ 第 3版 ’ Chapman and Hall (1995)，第 189-224 140346.doc •22- 201000447 頁及「Heterocyclic Chemistry」，T. L. Gilchrist，第 2版’

Longman Scientific and Technical (1992)，第 248-282 頁。 除非另外規定’否則術語「室溫」及「環境溫度」應意 謂與25°C之間的溫度。 縮寫： DMF N，N-二甲 NaOH 氫氧化納 HC1 鹽酸 Μ 莫耳濃度 PG 保護基

本發明之一實施例係關於根據方法A及b製備式j化合物 之方法’其中除非另外規定，否則Ri、r2、R3、k、^及 m係如式I中所定義β 方法A 可藉由 3 組份 Ugi 反應（J〇urnal 〇f 〇rganic

(1999)，64(3)，1〇74_1〇76)使用經適當取代之2甲酿基笨甲 酸、胺及異腈在環境溫度下在質子性溶劑(例如甲醇)中反 應來製備式I化合物。

140346.doc 23· 201000447

方法B 可藉由醒胺偶合反應使用經適當取代之σ弓丨α朵酮叛酸Π及 胺III及合適活化劑（例如，但不限於六氟鱗酸氟_ν，ν，ν'，ν’-四甲基甲脒鏽、六氟磷酸〇_笨并三唑_卜基_N，N，isr，N'-®T 基錁或六氟磷酸0-(7-氮雜苯并三唑_丨_基ρΝ,Ν,Ν’,Ν'-θΤ 基錫)在0-45°C下在有機驗（諸如三乙胺、ν，Ν-二異丙胺或 4_(二甲基胺基）°比咬）存在下在非質子性溶劑（諸如DMF、 乙腈、四氫呋喃或二噁烷）中反應來製備式“匕合物。

羧酸II可經由文獻（例如〇thman, M.及Decroix, B.,

Synthetic communications 1996，26 (15)，2803-2809 ;及 Othman，M_等人，Tetrahedron 1998, 54 (30)，8737-8744)中 所述之程序獲得，其中如下所示在四氣化碳中由（例如）N_ 溴丁二醯亞胺（NBS)使高鄰苯二甲酸酯溴化，且隨後在〇_25〇c 下在有機驗（堵如二乙胺、N，N -二異丙胺或4-(二曱基胺其） °比啶）存在下在溶劑（諸如乙腈）中用胺使環閉合。

Ο

140346.doc •24- 201000447 實例 通用方法 在以下一種儀器上記錄質譜·· A) LC_MS 系統係由 Waters Alliance 2795 HPLC、Waters 卩0八2996二極體陣列偵測器、8以以85队8偵測器及2卩單 一四極質譜儀組成。該質譜儀配備有以陽離子或陰離子模 式運作之電噴霧離子源（ES)。分別將毛細管電壓設為3.2 kV且將錐孔電壓設為30 v。在所/2 100-700之間，以〇.3 s之 掃描時間進行質譜儀掃描。自200-400 nm進行二極體陣列 偵測器掃描。將ELS偵測器之溫度調整為40°C且將壓力設 為1.9巴。在於1 ml/min之流動速率下運行之X-Terra MS Cs(3 ·0 mm><5 0 mm，3.5 pm(Waters))上進行分離。使用線 性梯度，始於100% A(A :於5%乙腈中之l〇 mM乙酸銨， 或於5%乙腈中之8 mM甲酸），終止於1〇〇°/〇 B(B :乙腈）。 將管柱烘箱溫度設為40°C。 B) LC-MS系統係由Waters樣品管理器2777C、Waters 1525 μ二元泵、Waters 1500管柱烘箱、Waters ZQ單一四 極質譜儀、Waters PDA 2996二極體陣列偵測器及Sedex 85 ELS偵測器組成。該質譜儀之組態為大氣壓化學電離 (APCI)離子源，該質譜儀另外配備有大氣壓光致電離 (APPI)裝置。質譜儀以陽離子模式進行掃描，其中在APCI 與APPI模式之間轉換。將質量範圍設為阳A 120-800 ’使用 0.3 s之掃描時間。分別將APPI反射極及APCI電暈設為〇·86 kV及0.80 μΑ。此外，針對APCI與APP1模式，去溶劑彳匕溢 140346.doc -25- 201000447 度（300°C)、去溶劑化氣體（400 L/Hr)及錐孔氣體（5 L/Hr)均 保持恆定。使用 Gemini 管柱 C18(3.0 mm><50 mm，3 μηι (Phenomenex))且以1 ml/min之流動速率操作，進行分離。 使用線性梯度，始於1〇〇% A(A :於5%曱醇中之10 mM乙 酸銨）且終止於100% B(曱醇）。將管柱烘箱溫度設為40°C。 C)由 Waters Alliance 2795 HPLC 及在 120°C 下運作之 Waters Micromass ZQ偵測器組成之LC-MS系統。該質譜儀 配備有以陽離子或陰離子模式運作之電噴霧離子源（ES)。 在w/z 100-1000之間以0.3 s之掃描時間進行質譜儀掃描。 所用LC系統為75%乙腈及25%於水中之0.1 %曱酸溶液。 在以下一種儀器上進行製備性層析： A) 具有與自動取樣器組合之自動溶離份收集器（Waters 2767)、梯度泵（Waters 2525)、管柱轉換閥（Column Switch) (Waters CFO)及 PDA(Waters 2996)之 Waters FractionLynx 系 統。管柱：XTerra® Prep MS C8 10 μηι OBDTM 19x3〇〇 mm 或 XTerra® Prep MS C8 10 μηι OBD™ 30x 150 mm，二者均 具有前導管柱XTerra® Prep MS C8 10 μιη 19x10 。將 100% A(於MilliQ水及5%乙腈中之95% 0.1 M乙酸鍵）至 100% B(100%乙腈）之梯度用於20 ml/min流動速率下之LC 分離。自210-3 50 nm進行PDA掃描。UV觸發決定溶離份收 集。 B) 具有與自動取樣器組合之自動溶離份收集器（Waters 2767)、梯度泵（Waters 2525)、再生泵（Waters 6〇〇)、補給 泵（Waters 515)、Waters Active Splitter、管柱轉換開 140346.doc -26- 201000447 (Waters CFO) ' PDA(Waters 2996)及 Waters ZQ 質譜儀之 Waters Fracti〇nLynx系統。管柱：XBridge™ Prep C8 5 μιη OBD™ 19xl〇〇 mm，具有前導管柱：XTerra® Prep MS C8 10 μηι 19xl〇 mm柱。將100% A(於MmiQ水及5%乙腈中之 95°/。0.1 Μ乙酸銨）至ι〇0% b(100%乙腈）之梯度用於25 ml/min流動迷率下之Lc分離。自210-350 nm進行PDA掃 描。以陽離子模式之ESI運行ZQ質譜儀。毛細管電壓為3 kV且錐孔電壓為3〇 V。混合觸發（UV及MS信號）決定溶離 份收集。 在以下儀器中之一者上執行純度分析： A) 由G1379A微真空除氣器、G1312A二元泵、G1367孔 板自動取樣器、G1316A恆溫管柱室及G1315C二極體陣列 偵測器組成之Agilent HP 11 00系統。所用管柱為在1.0 ml/min之流動速率下運行之Gemini C18(3.〇x50，3 pm(Phenomenex))。純度方法由三部分組成：首先進行3分 鐘管柱洗滌，其次執行空白運行且最後分析樣品。對於空 白與樣品均使用線性梯度，始於100% A(A :於5%乙腈中 之10 mM乙酸銨）且在3.5分鐘之後終止於1〇〇% B(B:乙 腈）。自波長220 nm、254 nm及290 nm下之樣品運行中減 去空白運行。 B) 具有 PDA( Waters 2996)及 Waters ZQ質譜儀之 Water Acquity 系統。管柱：Acquity UPLCTM BEH C8 1.7 μηι 2.1x50 mm。將管柱溫度設為65°C。將100% Α(Α :於 MilliQ水及5%乙腈中之95% 〇.〇1 Μ乙酸銨）至100% B(於 140346.doc -27- 201000447

MilliQ水及95%乙腈中之5% 0·01 Μ乙酸銨）之線性2分15秒 梯度用於1·〇 ml/min流動速率下之LC分離。自210-350 nm 進行PDA掃描且於2 5 4 nm下進行提取以用於純度測定。以 pos/neg轉換模式之ESI運行ZQ質譜儀。毛細管電壓為3 kV 且錐孔電壓為30V。 C)具有Waters 717 Plus自動取樣器及Waters 2996光電二 極體陣列偵測器之Waters 600控制系統。所用管柱為ACE CI8，5 μπι，60x150 mm。使用線性梯度，始於 95% A(A : 於水中之0· 1% H3P〇4)且在20 min運行中終止於55% B(B : 乙腈）。管柱係在環境溫度下，其中流動速率為1.0 mL/min。自200-400 nm進行二極體陣列偵測器掃描。 在於400 MHz下運作且配備有Varian 400 ATB PFG探頭 之Varian Mercury Plus 400 NMR光譜儀上記錄NMR光譜； 或在於400 MHz(質子）及100 MHz(碳13)下運作且配備有5 mm Z梯度BBO探頭之Varian Unity+ 400 NMR光譜儀上記 錄NMR光譜；或在於400 MHz(質子）及1〇〇 MHz(碳13)下運 作且配備有3 mm Z梯度流動注射SEI 探頭，使用 BEST 215液體處理器進行樣品注射之Bruker av400 NMR光 譜儀上記錄NMR光譜；或在於400 MHz(質子）及100 MHz(碳13)下運行且配備有Z梯度4-核探頭之Bruker DPX400 NMR光譜儀上記錄NMR光譜。使用以下參考信 號：（除非另外指示’否則）TMS δ 〇·〇〇，或DMSO-A之殘 餘溶劑信號δ 2.49 ’ CD3OD δ 3_3 1或CDC13 δ 7.25。分別將 單♦、雙重蜂、三重峰、四重♦、多重蜂及寬蜂之共振多 140346.doc • 28· 201000447 重性表示為s、d、t、q、m及br。 視光譜說明之簡易性而定，光譜中可能表示或可能不表 示出非對映異構物。除非另有說明，否則以溶劑作為内標 以ppm形式給出化學位移。 使用 Merck 石夕膠 60(0.040-0.063 mm)，或使用 Combi Flash® Companion™系統使用RediSep™正相急驟管柱執行 管柱層析。 已使用來自 Cambridgesoft, www.cambridgesoft.com, 2008之ELN 2.1版軟體對化合物命名。 【實施方式】 中間物之製備 現將由以下非限制性實例來說明本發明。 實例1-1 (及）-4-胺曱醯基環己基胺基甲酸第三丁酯

在氬氣氣氛下將〈及>4-(第三丁氧基羰基胺基）環己烷曱 酸（31 4 mg，1.29 mmol)溶解於THF(4 mL)中，且添加三乙 胺（0.233 mL，1.68 mmol)。將所得混合物冷卻至-1 5°C且 添加氯曱酸乙酯（0.148 mL，1.55 mmol)。將所得白色懸浮 液在-15°C下攪拌一小時，隨後整份添加氫氧化銨（8 mL， 67.80 mmol)。使反應混合物達到室溫且繼續攪拌1 h。使 140346.doc •29· 201000447 THF蒸發且藉由過濾收集所得沈澱物且在真空中乾燥以生 成240 mg(77%)標題化合物。 MS (ESI) m/z 241 [M-Η]。 實例1-2 Γ及>4-氰基環己基胺基甲酸第三丁酯

將Γ及>4-胺甲醯基環己基胺基甲酸第三丁酯（230 mg， 0.95 mmol)溶解於D比σ定（4 mL)中且冷卻至0°C。逐滴添加氧 氯化磷（0.444 mL，4.75 mmol)，且將所得黃色漿液攪拌30 分鐘，隨後傾於冰與水之混合物上。將所得混合物用乙酸 乙酯萃取兩次，且將經組合之有機萃取物用水及鹽水洗 務，且經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮以生成146 mg(68.6%) 標題化合物。 MS (El) m/z 224[M+]。 實例1-3 (及）-4-胺基環己烷甲腈

將Γ及厂4-氰基環己基胺基曱酸第三丁酯（140 mg，0.62 mmol)溶解於二氣曱烧（4 mL)中且添加三氟乙酸（1 _5 mL， 19.54 mmol)。將所得混合物在環境溫度下攪拌隔夜。在真 140346.doc -30- 201000447 空中蒸發溶劑及過量TFA以生成219 mg(147%)呈TFA鹽形 式之標題化合物。 MS (El) m/z 124 [M+]。 實例1-4 胺甲醯基環己基胺基甲酸第三丁酯

a=相對絕對構型 根據關於中間物1所述之方法使用（V#>4-(第三丁氧基羰 基胺基）環己烧甲酸（500 mg，2.06 mmol)、三乙胺（0.37 mL，2.67 mmol)、氯曱酸乙酉旨（0_24 mL，2.47 mmol)及氫 氧化銨（12.8 mL，108.30 mmol)製備標題化合物。白色固 體，405 mg(81〇/〇)。 JH NMR (500 MHz, DMSO-t/6) δ (ppm) 3.43 (br.s·, 1Η) 2.08-2.14 (m, 1H) 1.70-1.80 (m, 2H) 1.52-1.60 (m, 2H) 1.37-1.48 (m, 4H) 1.37 (s，9H)。MS (ESI) m/z 243 [M+H]。 實例1-5 氰基環己基胺基甲酸第三丁酯

a =相對絕對構型 140346.doc -31 - 201000447 根據關於中間物2所述之方法使用胺甲醯基環己 基胺基甲酸第三丁 S旨（323 mg’丨33 _〇1)及氧氯化磷 (0.623 mL ’ 6.66 mmol)製備標題化合物以生成3〇〇 mg( 100%)標題化合物。 4 NMR (500 MHz, DMSO-W δ (ppm) 3 23_3 3〇 (m，ih) 3.〇〇(t，1H) UO-UWmJH) 175 + 85(% 2H) i 53 i 63 (m，2H) 1.37-1.43 (m，2H) 1.37 (s，9H)。MS (EI) m 历 [M+H]。 實例1-6 胺基環己烷甲腈

H0N

:相對絕對構型 中間物6 根據關於中間物3所述之方法使用「廢）_4_氰基環己基胺 基曱酸第二丁醋（298 mg’ 1_33 mm〇i)及三氟乙酸（3 mL， 38.94 mmol)製備標題化合物，從而提供2〇〇 mg(1〇7%)呈 TFA鹽形式之標題化合物。 MS (El) m/z 125 [M+H]。 實例1-7 N-(l-(4-(三氟甲氧基）苯基）乙基）甲醯胺

中間物7 140346.doc •32- 201000447 將1-(4-(三氟甲氧基）苯基）乙胺（0.352 g，1.72 mmol)溶 解於二氣甲烷（4 mL)中，置於N2氣氛下且冷卻至0°C。逐 滴添加甲酸苯酯（0.187 mL，1.72 mmol)且將混合物在室溫 下攪拌16小時。在真空中移除溶劑且在二氧化矽管柱上使 用庚烧：乙酸乙酯=100:0至0:100作為梯度來純化殘餘物。 無色油狀物，284 mg(71%)。 !H NMR (500 MHz, CDC13) δ (ppm) 8.20 (s, 1H) 7.36 (d, 2H) 7.17-7.22 (m, 2H) 5.77 (br. s., 1H) 5.24 (t, 1H) 1.53 (d, ί 3H)。MS (ESI) w/z 234 [M+H]。 實例1-8 1-(1-異氰基乙基）-4-(三氟甲氧基）苯

中間物8

"T N III.

C %, 將N-(1-(4-(二氟甲氧基）苯基）乙基）曱醯胺（0.275 g， 1.18 mmol)冷解於二氣甲烷中且在a氣氛下冷卻 至_15°C °添加N，N-二異丙基乙胺（0.780 mL，4.72 mmol)，繼而添力口 g# μ 乳乳化碌（0.132 mL，1.42 mmol)，且使 所得混合物緩慢逵至,丨会. 這J至〉皿（3小時）。隨後添加甲醇（1.5 mL) 以中止反應。將混人机 ^ 吧D物用二氯曱烷稀釋且用飽和NaHC03 溶液洗務兩次。將么·5人 二組合之有機萃取物用鹽水洗滌，經無 水硫酸納乾燥，過濾且蒸發以生成呈掠色油狀之產物， 284 mg(112/。) ’該產物無需進一步純化即使用。 140346.doc •33· 201000447 NMR (500 MHz，CDC13) δ (ppm) 7·41 (d，2H) 7.24-7.29 (m，2H) 4.85 (q，1H) 1.70 (d, 2H)。MS (ESI) m/z 216 [M+H] o 實例1-9 N-(3-(三氟甲氧基）苯曱基）甲醢胺

中間物9 根據關於實例7所述之方法使用三氟曱氧基）苯基）曱 胺（0.2 g，1·05 mmol)及甲酸苯酯（〇 117 mL，1.05 mmol)製 備標題化合物。無色油狀物，120 mg(5 2%)。 JH NMR (500 MHz, CDC13) δ (ppm) 8.31 (s, 1H) 7.35-7.40 (m，1H) 7.22-7.26 (m，1H) 7.15 (br· s.，2H) 5.92 (br. s.，1H) 4.53 (d, 2H)。MS (ESI) w/z 220 [M+H]。 實例1-10 1-(異氰基甲基）-3-(三氟甲氧基）苯

140346.doc -34. 201000447 mL，2·19 mmol)及氧氯化填（0.061 mL，0.66 mmol)製備標 題化合物。 棕色油狀物’ 110 mg(100%)，其無需進一步純化即使 用。 ]H NMR (500 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.43-7.49 (m, 1H) 7.31 (d，1H) 7.2卜7.25 (m，2H) 4.69 (s, 2H)。MS (ESI) m/2 202 [M+H]。 實例1-11 N-(2-甲基-4-(三氟甲氧基）苯甲基）曱醯胺

根據關於實例7所述之方法使用（2-曱基-4-(三氟甲氧基） 苯基）曱胺（〇_35g’ 1.71 mmol)及甲酸苯酯（0.191 mL，1.71 mmol)製備標題化合物。在二氧化矽管柱上使用二氡甲 烷：（二氯曱烷/曱醇/氨90:10:1) = 1〇〇:〇至30:70作為梯度 來純化粗產物。白色固體，252 mg(63%)。 !H NMR (500 MHz, CDC13) δ (ppm) 8.28 (s, 1H) 7.27 (t 1H) 7.06 (br. s·，2H) 5.68 (br. s., 1H) 4.49 (d, 2H) 2.36 “ VS5 3H)。MS (ESI) m/z 232 [M-H]。 實例1-12 1-(異氰基甲基）-2·甲基-4-(三氟甲氧基）苯 140346.doc -35· 201000447

中間物12 根據關於實例8所述之方法使用N-(2-曱基-4-(三氟甲氧 基）苯曱基）曱醯胺（0.250 g，1.07 mmol)、Ν,Ν-二異丙基乙 胺（0.742 mL，4.29 mmol)及氧氯化磷（0.120 mL，1.29 mmol)製備標題化合物。棕色油狀物，300 mgCUO%)，其 無需進一步純化即使用。 MS (ES) w/z 216 [M+H]。 實例1-13 2,2,2-二氣乙酸氮基丙-2-錢

將1-氰基丙-2-基胺基甲酸第三丁醋（1〇〇 mg，〇5 4 mmol) 溶解於二氣甲烷（2 mL)中且添加三氟乙酸（0.209 mL，2.71 mmol)。將混合物在室溫下授拌μ小時，隨後在真空中濃 縮，從而提供無需進一步純化即使用之黃色油狀物（1 1 0 mg ， 100%)。 !H NMR (400 MHz, CD3OD) δ (ppm) 2.78-2.96 (m, 2H) 2.35-2.52 (m，1H) 1.43 (d, 3H)。 實例I-l4 4-胺基-3,3-二甲基_4_側氧基丁基胺基甲酸第三丁酯 140346.doc -36- 201000447

中間物14 根據關於中間物i所述之方法使用4_(第三丁氧基羰基胺 基）_2,2'二曱基丁酸（〇.5 g，2.16 mmol)、三乙胺（〇·391 1 mmol)、氯甲酸乙醋（〇 紅，2·59 mmol)及氫 氧銨（10 mL 64.20 mmol)製備標題化合物。白色固體， 290 mg(58°/〇) 〇 !H NMR (500 MHz, OUS〇-d6) δ (ppm) y.04 (br. s., 1H) 6.81 (br. s.，1H) 6.73 (t，1H) 2.84 (m, 2H) 1.53 (m，2H) 1.36 (s，9H) 1.04 (s，6H)。 實例1-15 3- 氰基-3-甲基丁基胺基甲酸第三丁酯 0 人人中間物15 根據關於中間物2所述之方法使用4_胺基_3,3_二曱基_4_ 側氧基丁基胺基曱酸第三丁酯（〇 29〇 g，丨％ mm〇1)及氧氯 化磷（0.589 mL , 6.30 mm〇l)製備標題化合物。白色固體， 212 mg(79%)。 H NMR (50G MHz，DMSO〇 δ (ppm) 6.93 (t, 1H) 3.05 (m, 2H) 1.63 (m，2H) 1.37 (s，9H) l,29(s 6H)。 實例1-16 4- 胺基-2,2-二甲基丁腈 140346.doc -37- 201000447 中間物16

根據關於中間物3所述之古、+ ^万法使用3-氰基-3-甲基丁基胺 基甲酸第三丁酯（70 mg，〇 w ·33 mmol)及三氟乙酸（0.75 mL，9.7 mmol)製備標題化人 π儿0物。獲得呈TFA鹽形式之產 物，95 mg(127%)。 ]H NMR (500 MHz, DMS〇2.82-2.98 (m，2H) 1.75-1.85 實例1-17 .A) δ (ppm) 7.85 (br. s·，3H) (m，2Η) 1.33 (s，6Η)。 4_(2,2,2-三氟乙基）苯甲腈

F 中間物17 向 1-漠-4-(2,2,2-三氟乙基）苯（2 15 g，9 〇〇 mm〇1)之 DMF(25 mL)溶液中添加氰化鋅（2 n g，18 〇 mm〇1)，隨後 添加Pd(PPh3)4(0.828 g，0.720 mmol)。將混合物在 1〇〇。匚 下加熱18小時’隨後冷卻至室溫’用乙酸乙酯（5〇 mL)稀 釋且經由短矽藻土床過濾。在減壓下濃縮濾液。藉由矽膠 管柱層析使用己烧：乙酸乙酯=9 0:1 0作為溶離劑來純化粗 殘餘物以生成呈白色固體狀之標題化合物，800 mg(48%) ° ]H NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.67 (d, 2H) 7.43 (d, 2H) 3.44 (q, 2H)。19F NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 140346.doc •38· 201000447 -65.85 > 65.85 65.88及-65.91。MS (ESI) m/z 186 [M+H]。 實例1-18 (4-(2,2,2-三氟乙基）苯基）甲胺

中間物18 將於四氫吱喃（9.40 mL ’ 9.40 mmol)中之1 Μ硼烷添加至 4-(2,2,2-三氟乙基）苯甲腈（〇 58〇 g，3 13爪爪〇1)之四氫呋 喃（15 mL)溶液中。將混合物在6(Γ(：下加熱18小時，冷卻 至室溫且在減壓下濃縮。將殘餘物再溶解於甲醇（15 mL) 中，回流2小時且在減壓下濃縮。將粗殘餘物溶解於二氣 曱烷（5 0 mL)中’用 2 M NaOH溶液（20 mL)、鹽水（20 mL) 洗滌’經無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下濃縮濾液以生 成呈淺貫色油狀之標題化合物，600 mg(100%)。 *Η NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.27-7.34 (m, 4H) 3.88 (s, 2H) 3.36 (q，2H) (NH2未展示）。19p NMR (400 MHz, 〇〇(：13)5(?卩111)-66.42、-66.45及-66.48。]^8(丑81)所/2 190 [M+H]。 實例1-19 N-(4-(2,2,2-三氟乙基）苯曱基）甲醯胺

140346.doc -39- 201000447 將（4-(2,2,2-三氟乙基）苯基）曱胺⑶65〇 g，3 4〇 mm〇1)於 曱酸乙酯（5 mL)中之溶液回流丨8小時。在減壓下濃縮反應 混合物且藉由；5夕膠管柱層析使用己烧：乙酸乙酯=1 〇〇 : 〇至 5 0:5 0作為溶離劑來純化粗殘餘物以提供呈白色固體狀之 所需化合物，620 mg(84%)。 ^ NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 8.30 (s, 1H) 7.29 (s, 4H) 5.77 (m, 1H) 4.51 (d, 2H) 3.36 (q, 2H) 〇 19F NMR (400 MHz,CDCl3)5(ppm)-66.36、-66.39&-66.41°MS(ESI) m/z [M+H]。 實例1-20 1-異氰基甲基-4-(2,2,2-三氟乙基）苯 。今Ν中間物20 在-20 C下將氧氣化鱗（0.320 mL，3_43 mm〇i)逐滴添加 至N-(4-(2,2,2-二氟乙基）苯曱基）甲酸胺（〇62〇 g，286 mmol)及Ν,Ν-二異丙基乙胺（1.97 mL，U.4 mm〇1)於二氯甲 烷（20 mL)中之溶液中。將混合物缓慢溫至室溫且攪拌16 小時。其後濃縮反應混合物’將殘餘物溶解於〒醇（3爪1) 中且添加二乙胺（2.5 mL)。將反應混合物攪拌5分鐘且在減 壓下濃縮。藉由矽膠管柱層析使用己烷：乙酸乙酿=1〇〇:〇 至80:20作為溶離劑來純化粗化合物，從而產生呈白色固 體狀之標題化合物，442 mg(78%)。 Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.36 (s, 4H) 4.66 (s, 140346.doc -40- 201000447 2H) 3.39 (q，2H)。19p NMR (400 MHz，CDC13) δ (ppm) -66.31、-66.34&-66.37 〇MS(ESI)m/z 200 [M+H]。 實例1(通用程序1) 2-(2-氰基乙基）-3-侧氧基_N_(4_(三氟曱氧基）苯甲基）異吲 哚啉-1-甲醯胺

f

在氬氣氣氛下將2-綾基苯甲醛（112 mg，〇 75 mm〇1)&3_ 胺基丙腈（0_055 mL，〇,75 mm〇1)溶解於曱醇（6叫中且添 加1-(異氛基甲基）-4-(三氟曱氧基）苯（〇15〇 ^，0.75 _°υ°將所得混合物在環境溫度下授拌隔夜。對溶劑進 行汽提，且藉由謂管㈣析使用於㈣中之㈣〇%乙酸 乙醋作為溶離劑來純化殘餘物以生成標題化合物(183 mg，60.8%) 〇 lHNMR(5〇° MH^ DMS〇-^) δ ppm 9.21 (t, 1H) 7.74 (d, )7.6〇 (m，2H) 7.56 (t，1H) 7.38 (d，2H) 7.32 (d, 2H) 5.42 (s，1H) 4.42-7.31 (m, 2H) 413_7 〇5 (m，m) 3 37_ (m, 1H) 2.94-2.80 (m? 2H) ； MS (ESI) m/z 404 [M+H]。 實例2 -Ν-(4-(三氟曱氧基）笨曱 2-σ及>4-氰基環己基卜3側氧基 基）異吲哚啉-1-甲醯胺 140346.doc •41 · 201000447

在氬氣氣氛下將「及入4-胺基環己烷甲腈（0.077 g，0.62 mmol)溶解於甲醇（4 mL)中且添加2_羧基笨甲醛（〇〇93吕，

0.62 mmol)。藉由添加三乙胺（〇_〇86 mL，0.62 mmol)將pH 值調節至約6。在攪拌5分鐘之後，添加4-(三氟f氧基）苯 甲基異氰化物（0.125 mL，0.62 mmol)，且將所得混合物在 環境溫度下攪拌隔夜。藉由製備型HPLC進行純化，從而 產生87.5 mg(30.9%)標題化合物。 NMR (500 MHz，DMSO‘）δ ppm 9.11 (t，1H) 7.68 (d 1H) 7.61-7.56 (m，1H) 7.54-7.45 (m, 2H) 7.39-7.32 (m, 4H) 5.25 (s, 1H) 4.31 (d, 2H) 3.89-3.80 (m, 1H) 2.09-2.02 (m 1H) 2.01-1.94 (m, 1H) 1.86-1.77 (m, 2H) 1.69-1.53 (m 3h) 1.49-1.38 (m, 1H) ; MS (ESI) w/2 458 [M+H]。 實例3 2-((膺>4-氰基環己基）-3-側氧基-N-(4-( 三 氟甲氧基）苯甲 基）異吲哚琳-1-甲醯胺

根據實例2中所述之方法自（賓J-4-胺基環己烷曱腈（165 140346.doc •42· 201000447 mg，1,33 mmol)、三乙胺（〇 555 mL，3 99 mm〇1)、2 曱醯 基苯甲酸（200 mg，丨.33 (異氰基甲基）4_(三氟 甲氧基）苯（0.2 19 mL，1.33 mmol)製備標題化合物。藉由 矽膠官柱層析使用庚烷：乙酸乙酯=7〇:3〇至1〇:9〇作為梯度 來純化殘餘物。白色固體，403 mg(66。/。）。 JH NMR (500 MHz, DMSO-^6) δ (ppm) 9.25 (t, 1H) 7.70 (d, 1H) 7.60 (t, 1H) 7.52 (t, 1H) 7.48 (d, 1H) 7.40 (d, 2H), 7.33 (d, 2H) 5.35 (s, 1H) 4.32-4.40 (m, 2H) 3.90-4.00 (m, iH) 3.15 (br.s., 1H) 1.89-1.96 (d, 1H) 1.83-1.88 (m, 2H) 1.82 (d，2H) 1.62-1.75 (m，3H)。MS (ESI) m/z 458 [M+H]。 實例4 2-(2-氰基乙基）_7_甲氧基_3_側氧基_N(4_(三氟曱氧基）苯 甲基）異吲哚啉-1-甲醯胺

根據實例1中所述之通用程序丨自3_羥基_4_曱氧基異笨并 咬喊-l(3H)-_ (45 mg，〇·25 匪〇1，根據 j罐似，〇/ (9—— CTzemWr 少 2007, 72, 3419 製備）、3-胺基丙腈（0.018 mL，0.25 mmol)及1-(異氰基曱基）_4_(三氟甲氧基）苯 (0.050 mL，0.25 mmol)製備標題化合物。白色固體，43 mg(40%)。 Ή NMR (500 MHz, DMSO-^6) δ (ppm) 9.22 (t, lH) 7.52 (t, 140346.doc -43* 201000447 1H) 7.39 (m, 4H) 7.30 (dj 1H) 7 24 (d, 1H) 5.30 (s, 1H) 4.52 (dd5 1H) 4.25 (dd, ih) 4.03 (ddd, 1H) 3.80 (s, 3H) 3.10-3.24 (m, 1H) 2.75-2.94 (m, 2H) 〇 MS (ESI) m/z 434 [M+H]。 實例5 2-(2-氰基乙基）_7·甲基3側氧基_N_(4(三氟甲氧基）苯甲 基）異11 弓丨味琳-1 -甲醜胺

根據貫例1中所述之通用程序丨自3_經基_4_甲基異苯并咬 南1(3H)酮（30 mg ’ 0.18 mm〇i，根據2^?/^心办⑽[以化以 2002，43，7315中關於未經取代之類似物所述之程序製 備）、3-胺基丙腈（12·8 mg，0.18 mmol)及1-(異氰基甲基）_ 4-(三氟甲氧基）苯（36.8 mg，0.18 mmol)製備標題化合物。 在室溫下攪拌24小時之後，將混合物加熱至5〇。(：且授拌24 小時。白色固體，19 mg(25%)。 'H NMR (500 MHz, DMSO-^) δ (ppm) 9.31 (t, 1H) 7.55 (d, 1H) 7.44 (t, 1H) 7.41 (d, 3H) 7.32-7.37 (m, 2H) 5.34 (s, 1H) 4.30-4.42 (m, 2H) 4.07 (dt, 1H) 3.13-3.21 (m, 1H) 2.78-2.93 (m, 2H) 2.24 (s，3H)。MS (ESI) m/z 418 [M+H]。 實例6 -44- 140346.doc 201000447 2-(2-氰基乙基）-3-側氧基-N-(l-(4-(三氟甲氧基）苯基）6基） 異吲哚啉-1-曱醢胺’異構物4

^未知絕對構型 異構物4 根據實例1中所述之通用程序1自2-甲醯基苯甲酸（〇. 105 g，0.70 mmol)、3-胺基丙腈（0.051 mL，0.70 mmol)及 1-(1-異氰基乙基）-4-(三氟曱氧基）苯（0.151 g，0.70 mmol)製備 標題化合物。白色固體，144 mg(49〇/〇)。藉由在LaPrep系 統1上執行之對掌性層析來分離非對映異構混合物（0.14〇 g，0.34 mmol)。管柱：chiralpak AD，50x300 mm，1〇 μηι，移動相：〇_2〇分鐘：5/5/90甲醇：乙醇：庚烷，2〇_4〇分 鐘：10/10/80甲醇：乙醇：庚烷；流動速率：12〇毫升/分鐘。 在12分鐘（異構物丨）、17分鐘（異構物2)、26分鐘（異構物3) 及31分鐘（異構物4)時溶離分離之異構物。收集、濃縮且分 另J處理D亥等異構物。藉由HPLC使用gils〇n 系統（管 柱：Rep⑽U-AM(AD)，4.6x25〇 醜，5 _ ;移動相： 7/3/90甲醇：乙醇：庚烧；流動速率：u毫升/分鐘）來分析 樣^異構物4(24分鐘），14 mg，對映異構純度：91%。 在至皿下在24小時内使該化合物在溶解狀態下差向異構 140346.doc -45- 201000447 化為異構物3與異構物4之1:1混合物。 *H NMR (500 MHz, DMSO-i/e) δ (ppm) 9.09 (t, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.64 (m, 2H), 7.56 (t, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.10 (m, 1H), 3.30 (m，1H), 2.87 (m，2H), 2.29 (s，3H)。MS (ESI) m/z 416 [M-H]。 實例7 2-(2-氰基乙基）-3-侧氧基-N-(3-(三氟曱氧基）苯甲基）異°弓丨 哚啉-1-甲醯胺

根據實例1中所述之通用程序1自2_甲醯基苯甲酸（0.060 g，0_40 mmol)、3-胺基丙腈（0.029 mL，〇_40 mmol)及卜 (異氰基甲基）-3-(三氟甲氧基）苯（0·080 §，〇.40 mmo1)製備 標題化合物。白色固體，37.9 mg(23%) ° !H NMR (500 MHz, DMSO-J6) δ (PPm) 9·24 (t, lH) 7.74 (d, 1H) 7.66-7.61 (m，2H) 7.59-7.54 (m, 1H) 7.45 (t，1H) 7.28 (d, 1H) 7.24 (d, 1H) 7.18 (ss 1H) 5.44 (s, 1H) 4.44-4.34 (m,

2H) 4.10 (m，1H) 3.34-3.28 (m，1H) 2.93-2.81 (m, 2H) ° MS (ESI) m/z 404 [M+H]。 實例8 140346.doc -46- 201000447 2-(2-氰基乙基）-N-(2-甲基-4-(三氟甲氧基）苯甲基）-3-側氧 基異吲哚啉-1-甲酿胺

根據實例1中所述之通用程序1自2-甲醯基苯曱酸（37_5 mg，0.25 mmol)、3-胺基丙腈（〇·〇 1 8 mL，0_25 mmol)及 1 -(異氰基甲基）-2-甲基_4-(三氟甲氧基）苯（53.8 mg，0.25 mmol)製備標題化合物。白色固體，11 mg( 10.5%)。 NMR (500 MHz，DMSO〇 δ (ppm) 9.09 (t，1H)，7.74 (d，1H)，7.64 (m，2H)，7.56 (t, 1H)，7.31 (d，1H)，7.21 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.10 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 2.87 (m, 2H), 2.29 (s, 3H) 〇 MS (ESI) m/z 416 [M-H]。 , 實例9 2-(2-氰基乙基）-4-氟-3-側氧基_N_(4_(三氟甲氧基）苯曱基） 異吲哚啉-1-甲醢胺

根據實例1中所述之通用程序1自 喃-1(3H)-酮（56 mg，0.33 1 mL， 王序1自7-氟-3-羥基異苯并呋 mmol)、3-胺基丙猜（〇 〇23 140346.doc •47· 201000447 0.33 mmol)及1-(異氰基曱基）-4-(三氟甲氧基）苯（〇〇67 mL，0.33 mmol)製備標題化合物。白色固體， mg(28%)。 NMR (400 MHz，CDC13) δ (ppm) 7.62 (m，1H) 7 42 (d 1H) 7.14-7.22 (m, 5H) 6.54 (t, 1H) 5.29 (s, iH) 4.40-4.48 (m，2H) 4.07-4.13 (dt，1H) 3.50-3.57 (dt，1H) 2.82 (t 2H)。 MS (ESI) m/z 422 [M+H]。 實例10 2-(2-氰基乙基）-7-氟-3-侧氧基_N-(4-(三氟甲氧基）苯甲基） 異吲哚啉-1-甲醯胺

根據實例1中所述之通用程序1自4-氟-3-羥基異笨并咳 喃-1(3H)-酮（56 mg，0.33 mmol)、3-胺基丙腈（〇 〇23 m]L， 0.33 mmol)及1-(異氰基甲基）-4-(三氟甲氧基）苯（〇 〇67 mL，0.33 mmol)製備標題化合物。白色固體，3〇 mg(21%)。 !H NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm) 7.72 (d, 1H) 7.56 (m, 1H) 7.30 (m，3H) 7.21 (d，2H) 6·39 (br· s·，1H) 5.43 (s，1H) 4.48-4.58 (m, 2H) 4.17-4.24 (dt，1H) 3.54-3.61 (m, 1H) 2.85-2.92 (dt, 1H) 2.73-2.79 (dt, 1H)。MS (ESI) m/z 422 140346.doc -48- 201000447 [M+H]。 實例11 2-(氰基甲基）-3-側氧基-N-(4_(三氟甲氧基）苯甲基）異吲哚 啉-1-甲酿胺

Ο N 根據實例1中所述之通用程序1自2-甲醯基苯甲酸（5〇 mg，0.33 mmol)、2-胺基乙腈（18.7 mg，0.33 mmol)及 1-(異氰基曱基）-4-(三氟甲氧基）苯（0.067 mL ’ 0.33 mmol)製 備標題化合物。白色固體，25 mg( 19%)。 *H NMR (500 MHz, DMSO-cf6) 5 (ppm) 9.27 (t, 1H) 7.77 (d, 1H) 7.71-7.62 (m, 2H) 7.58 (t, 1H) 7.40 (m, 2H) 7.32 (m, 2H) 5.40 (s, 1H) 4.80 (d, 1H) 4.44 (d, 1H) 4.38 (d, 2H) ° MS (ESI) m/z 390 [M+H]。 實例12 2-(1-氰基丙-2-基）-3_側氧基-N-(4-(三氣甲氧基）苯甲基）異 吲哚啉-1-甲醯胺

根據實例1中所述之通用程序1自2,2,2-二氟乙酸1 _氣基 -49- 140346.doc 201000447 丙-2-銨（79 mg，0.40 mmol)、三乙胺（〇·112 mL，0.80 mmol)、2-曱醯基苯曱酸（60.1 mg，〇·4〇 異氰基 曱基）-4-(三氟甲氧基）苯（80 mg，0.40 mm〇i)製備標題化合 物。無色油狀物，21 mg(12%)，非對映異構物之ι:1混合 物。 異構物 1 : NMR (400 MHz，CDC13) δ (ppm) 7.71 (d， 1H) 7.45-7.66 (m, 3H) 7.03-7.24 (m, 4H) 6.87 (t, 1H) 5.15 (s, 1H) 4.41-4.51 (m, 2H) 2.98 (dd, 1H) 2.71-2.85 (m, 2H) 1.46 (d，3H) ° 異構物 2 : 4 NMR (400 MHz, CDC13) δ (PPm) 7.71 (d， 1H) 7.46-7.66 (m, 3H) 7.07-7.21 (m, 4H) 6.44 (t, 1H) 5.22 (s, 1H) 4.31-4.39 (m, 1H) 4.13 (ddd, 1H) 3.52 (dd, 1H) 2.71-2.84 (m, 2H) 1.55 (d, 3H)。 MS (ESI) w/z 418[M+H] ° 實例13 2-(3-氰基-3·甲基丁基）-3_侧氧基-N-(4-(三氟甲氧基）苯甲 基）異吲哚啉-1-甲

根據實例1中所述之通用裎序1自2_曱醯基苯甲酸（0·050 g，0.33 mmol)、心胺基-2,2_二曱基丁腈（0.075 g，0·33 140346.doc -50- 201000447 mm〇l)及丨·（異氰基曱基）-4-(三氟曱氧基）苯（〇,〇66 g，0.33 mmo1)製備標題化合物。白色固體，61 mg(41 %)。 'H NMR (5〇〇 MHz, DUSO-d6) δ (ppm) 9.22 (t, 1H) 7.71 (d, 1H) 7·62 (m，ih) 7.55 (m，2H) 7.39 (m，2H) 7_32 (m, 2H) 5-35 (s, 1H) 4.37 (d, 2H) 3.99 (m5 1H) 3.14 (m, 1H) 1.86 (m，2H) 1.31 (d，6H)。MS (ESI) m/z 446 [M+H]。 實例14 2-(5-氰基戊基）_3_側氧基_N-(4-(三氟甲氧基）苯甲基）異吲 哚蛛-l-甲酿胺

根據實例1中所述之通用程序1自2-曱醯基苯曱酸（65 mg ’ 0.43 mmol)、6_胺基己腈（48.6 mg，0_43 mmol)及 1-(異氰基甲基）-4-(三氟曱氧基）苯（0.087 mL，0.43 mmol)製 備標題化合物。 白色固體，110 mg(57%)。 'H NMR (500 MHz, DMSO-J6) δ (ppm) 9.17 (t5 1H) 7.70 (d, 1H) 7.61 (d，1H) 7.51-7.57 (m，2H) 7.35 (q，4H) 5.27 (s， IH) 4.35 (dd, 2H) 3.81 (ddd, 1H) 3.01 (ddd, 1H) 2.46 (t, 2H) 1.55 (dd，3H) 1-49-1.63 (m，1H) 1-32 (t，2H)。MS (ESI) m/z 446 [M+H]。 140346.doc -51 - 201000447 實例15 2-(2-氰基乙基）-3-側氧基-N-(4-(2,2,2-三氟乙基）苯甲基）異 吲哚啉-1-曱醢胺

根據實例1中所述之通用程序1自2-曱醯基苯曱酸（54 mg ’ 0.36 mmol)、3-胺基丙腈（25.3 mg，0.36 mmol)及 1-異 亂基甲基- 4-(2,2,2-二氟乙基）苯（72 mg，0.36 mmol)製備標 題化合物。藉由矽膠管柱層析使用二氯甲烷：甲醇=1〇〇:〇 至9 5 · 5作為溶離劑來純化粗產物以生成呈黃色固體狀之標 題化合物，37mg(26%)。 NMR (400 MHz，CDC13) δ (Ppm) 7.71 (d，1H) 7.61 (d， 2H) 7.46-7.52 (m，1H) 7.22 (d，2H) 7.15 (d，2H) 6.41 (m， 1H) 5.28 (s, 1H) 4.38-4.50 (m, 2H) 4.09-4.18 (m, iH) 3.52. 3.62 (m，1H) 3.28-3.38 (m, 2H) 2.73-2.83 (m，2H)。、 NMR (400 MHz, CDC13) δ (ppm)-66.27、-66.30及-66 33。 MS (ESI) m/z 402 [M+H]。 生物測試 如此項技術中所熟知，所需之電壓閘控鈉通道之全長蛋 白的編碼基因在合適啟動子下選殖且於合適細胞系中表 現。使用如此建構之穩定細胞系來篩選檢定，以鑑別對電 壓閘控鈉通道有活性之合適化合物。合適篩選檢定如下^ 140346.doc -52- 201000447

Li+流入量檢定 將表現所需之電壓閘控鈉通道之細胞系以合適細胞密度 塗於習知96或384孔組織培養盤中（細胞密度為例如在外孔 培養盤中40000個細胞/孔或在384孔培養盤中2〇〇〇〇個細胞/ 孔）。隨後，使用合適的市售洗滌器（例如EL_4〇5洗滌器）用 合適無Na緩衝液反覆洗滌細胞，直至所有組織培養基均自 孔中移除。合適之無鈉緩衝液可具有以下組成（mM):氯 化膽鹼 137、KC1 5.4、MgS〇4 0.81、CaCl2 〇.95、葡萄糖 5_55及HEPES 25(PH 7.4) ’但其亦可具有其他合適組成。 在完成所有洗滌步驟之後，將細胞在合適之無鈉緩衝液中 培育15 min。隨後，將無鈉緩衝液移除且將細胞在37七下 用富含uC1之緩衝液培育6G min。Licl緩衝液亦富含_ 子’從而對細胞產生去極化刺激。該緩衝液可具有以下组 成（福）：LiCHOO、KC1 50、MgS〇4 〇 81、〇 %、 葡萄糖5.55及HEPES 25(pH 7.4)，但其亦可具有其他合適 組成。為增強信號雜訊比’可向培養基中添加有效濃产 (例如1 〇〇 _之電塵間控納通道開放劑藜蘆定（ve崎 或任何其他合適的電㈣控納通道開_ 1 測。此外，且亦為增強信號雜女 〇 U貞 〜社，亦可向料基中添加 有效濃度⑼如Η) μ㈣之合適椒子毒以延緩通道失活。 為發現所需電壓間控納通道之調節劍，可向檢定補充來自 :合物庫之化合物。將所需化合物添加至富含U之溶液 中，母孔一種化合物。在培育期 φ, σ束時，用無鈉緩衝液反 覆洗滌細胞，直至移除所有細胞外。 、.至由使細胞與曲 140346.doc •53· 201000447 拉通（triton)(1 %) —起培育1 5 min或任何其他合適方法獲得 溶胞物。隨後，將所得溶胞物引入原子吸收分光光度計 中，由此定量上述程序期間之Li流入量。 所述檢定可採用任何原子吸收分光光度計，使用96孔形 式、3 84孔形式之培養盤或任何其他習知培養盤形式來進 行。所述檢定可用於表現任何指定的一或多個電壓閘控鈉 通道α亞單位以及一個電壓閘控α亞單位與任何一或多個β 亞單位之任何指定組合的細胞系。 若需要，則藉由短暫性共轉染或經由建立穩定共轉染細 胞系來表現合適鉀漏離子通道（例如TREK-1 )，從而可另外 使所選細胞系過度極化。可在全細胞膜片鉗、穿孔膜片鉗 或習知兩電極電壓甜中使用傳統細胞内電生理學來證實漏 K電流之成功表現。如上所述，隨後可使用經改良以成功 表現所需電壓閘控鈉通道以及所轉染之合適鉀漏離子通道 的所選細胞系，以使用原子吸收光譜法進行篩選。 全細胞電壓鉗電生理學檢定 穩定表現所需電壓閘控鈉通道之細胞中鈉電流的電生理 學記錄證實其活性，且提供特異性影響該等通道之化合物 效能之功能量度。 電生理學研究可使用自動化膜片鉗電生理學平台（如 IonWorks HT、IonWorks Quattro、PatchXpress)或任何其 他合適平台來執行。將表現所需電壓閘控鈉通道之細胞系 塗佈於如自動膜片鉗平台之製造商所提供的適當孔組織培 養盤中。根據自動化膜片鉗平台之製造商所提供之說明來 140346.doc -54- 201000447 使用S亥荨貫驗之合適細胞外及細胞内緩衝液。經由整合於 平台中之微量分注系統（pipetting system)，將表現所需電 壓閘控鈉通道蛋白之細胞暴露於藥物中。使用合適電壓刺 激法來活化所需之電壓閘控鈉通道蛋白。合適刺激法可由 八個電壓脈衝組成，該八個電壓脈衝各自達_2〇 mV且長度 為50 ms，且在_9〇爪卩或_65 mV之電勢下彼此間隔33〇 ms ’但其亦可具有其他合適參數。 電生理學研究亦可如文獻中所述使用標準膜片鉗技術之 全細胞構型來執行。在該檢定中，藉由習知微灌注系統， 將表現所需人類電壓閘控鈉通道蛋白之細胞暴露於藥物 中’且使用合適電壓刺激法來活化電壓閘控鈉通道。 活體内實驗 當藉由全身性注射將本發明化合物給予小鼠或大鼠時， 該化合物可特異性減少福馬林（f〇rmalin)測試中之疼痛行 為。該測試為人類臨床疼痛之已接受模型，包括疼痛感受 器活化、發炎、末梢致敏及中樞致敏之成員（A Tj0lsen等 人，尸山_« i外2, 51，5)。因此，可推斷本發明化合物適用 作緩解各種來源之疼痛的治療劑。 式I化合物可在大鼠關節内FCA(佛氏完全佐劑（Freundis complete adjuvant))測試（發炎疼痛模型等人， ^ 205_72)及大鼠Chung神經損傷測 試（神經痛模型）(尤〜及户⑴·" /pp2 J55)中展示止 痛活性。在給藥後可在動物模型中獲得止痛作用，其並不 產生阻斷神經纖維中之傳導之組織濃度。因此，κ〇ΓηΜ及 140346.doc -55* 201000447

Thu>之公開案中所提及之該等化合物 說明止痛作用。全身 …辑特性不能 府醉作“纟Hi、之後的止痛功效並非具有局部 麻醉作用之樂物的-般特性⑼⑽等人，細

Anaesthesia 1988, 61, 165-8) ° -般而言’本發明之化合物在以上全細胞電壓鉗電生理 :檢定中有活性’其中IC5。值小於1〇 在本發明之一 態樣中’ IC50值小於1 μΜ。 在上述全細胞電壓钳電生理學檢定中測試以上實例之標 題化合物。1C”值表示50%抑制所需之化合物濃度。試樣 結果在下表中以PIC”值（亦即-log(IC5〇))之形式展示。因 此，pICw值愈大，化合物愈有效。舉例而言，65之 值表明ΙΟ·6·5 Μ之IC5〇值。 實例 NaV1.7 實例 NaVl.7 編號 pIC5〇 編號 PIC50 1 6.5 9 5.2 2 6.2 10 6·6 3 5.9 11 5.9 4 5.5 12 6.2~^ 5 5.9 13 5.9 6 6.2 14 5.9 7 6.4 15 —- 5.5 8 5.3 140346.doc •56-

Claims (1)

1. 201000447 七、申請專利範圍： 1. 一種式I化合物： R3

   其中 R1為氫、C!·3烷基、C!·3烷氧基、氰基、羥基或鹵基； 且其中該C ! _3烷基視情況經一或多個獨立地選自經基、 c〗·3烷氧基及氟基之取代基取代；且該Ci 3烷氧基視情況 經一或多個氟基取代； m為1、2或3 ; R及R係各自且獨立地選自氫、鹵烷基、Ci 4鹵烷 氧基、齒基' Cw烷氧基、Cn4烷基及c3_7環烷氧基；其 中》亥Cs_7%燒氧基視情況經一或多個氟基取代；且&及 R3不可同時為氫； L1為伸燒基、伸戊基或c36伸環烷基，其中該C14 伸燒基、該彳由# #、 1甲戊基或該c3_6伸環烷基可視情況經一或多 個X4取代； X4為氤篇：、p 烷基、C3.7環烷基、Cw烷基OCw烷 基 C,-3烧氧基、氰基、羥基、r4〇(c = 〇)_、r4nr5(c=〇)_ 140346.doc 201000447 ' r4〇(C=0)NR5- > R4NR5(C=0)NR5- ' R4(C=0)0- > R4(C=0)NR5-、R4nr5(c=o)〇-、R4NR5(〇0)NR5-、C5-6雜芳基（〇〇) 或c5-6雜芳基，· 烷基、Cm烷基oCm烷基、c5_6環烷基、芳基 或方基-C 1 _2院基； R5為H或甲基； 且其中該C!·3烧基、該Ci·3烧基OC!·3烧基、該C〗_3烧氧 基及Cw烷基磺醯基視情況經一或多個氟基取代； L2為視情況經一或多個χ4取代之C!_3伸烷基； 以及其醫藥學上可接受之鹽或異構物或該異構物之 轉0 2 ·如請求項1之化合物，其中： R1為氫、cN3烷基、Cw烷氧基或鹵基； m為1 ; R2及R3係各自且獨立地選自氫、Gw鹵烷基、C〗_4lS烧 氧基及Cw烷基； Li為C!_4伸烧基、伸戊基或C3_6伸環院基，其中該^ 4 伸烧基、該伸戊基或該CM伸環烷基可視情況經一或多 個X4取代； χ4為cK3烷基；且 1^2為〇1_3伸烧基。 3. 如請求項1或2之化合物，其中Ll為伸乙基。 4. 如請求項i或2之化合物，其中Ll為亞甲基。 5. 如請求項1或2之化合物，其中Li為伸戊基。 140346.doc 201000447 6. 如請求項1或2之化合物，其中^為伸環己基。 7. 如請求項1至6中任一項之化合物，其中^係經至少—個 X4取代。 8·如請求項7之化合物，其中X4為曱基。 9·如岫述請求項中任一項之化合物，其中^為亞曱基。 10. 如請求項9之化合物，其中l2係經χ4取代。 11. 如請求項1〇之化合物，其中X4為曱基。 12. 如前述請求項中任一項之化合物，其中阳為1。 13·如前述請求項中任一項之化合物，其中R1為氯。 14. 如請求項【至^中任一項之化合物，其中Rl為曱氧基。 15. 如請求項！至12中任一項之化合物，其中…為曱基。 16. 如請求項！至12中任一項之化合物，其中…為氟基。 17. 如前述請求項中任一項之化合物，其中R2為氫。 18. 如請求項1至16中任一項之化合物，其中R2為。 19. 如請求項1至16中任一項之化合物，其中R2為_cH2_CF3。 20. 如前述請求項中任一項之化合物，其中R3為氫。 21. 如請求項1至19中任一項之化合物’其中R3為_〇cF3。 22·如請求項1至丨9中任一項之化合物，其中R3為甲基。 23.如前述請求項中任一項之化合物，該化合物為以下任— 者： 2-(2-氰基乙基）_3_側氧基-N-(4-(三氟曱氧基）苯曱基） 異吲哚啉-1 -甲醯胺； 2_(Γ及X氰基環己基）_3-侧氧基-N-(4-(三氟甲氧基）苯 曱基）異吲哚啉-1 —曱醯胺； 140346.doc 201000447 氰基環己基）-3-侧氧基-N-(4-(三氣甲氧基）苯 甲基）異吲哚啉_ 1 -曱醯胺； 2_(2 -乱基乙基）-7 -甲氧基-3-側氧基-Ν-(4-(三氟甲氧基) 苯甲基）異吲η朵淋_ 1 —曱醯胺； 2_(2 -乱基乙基）-7 -甲基-3-侧氧基-Ν-(4-(三氟甲氧基）苯 甲基）異吲哚啉-1 -曱醯胺； 2 (2 -氰基乙基）-3-側氧基-N-( 1-(4-(三氟曱氧基）苯基） 乙基）異吲哚啉_ 1 -曱醯胺，異構物4 ; 2-(2-氰基乙基）_3_側氧基-N-(3-(三氟甲氧基）苯甲基） 異吲哚淋-1 -甲醯胺； 2-(2-氰基乙基）-N-(2-甲基-4-(三氟曱氧基）苯甲基）_3_ 側氧基異吲哚啉-丨-曱醯胺； 2-(2-氰基乙基）-4-氟-3-側氧基_N_(4_(三氟甲氧基）苯甲 基）異吲哚琳-1 -甲醯胺； 2-(2-氰基乙基）_7_氟_3_側氧基_N_(4_(三氟甲氧基）苯甲 基）異吲哚琳-1 -甲醯胺； 2-(氰基甲基）-3-側氧基_N_(4_(三氟甲氧基）苯甲基）異 吲哚啉-1 -曱醯胺； 2-(1-氰基丙-2-基）-3_側氧基_义（4_(三氟甲氧基）苯曱 基）異吲哚啉-1 -甲醯胺； 2~(3_氰基-3-甲基丁基）_3_側氧基_N_(4_(三氣甲氧基）苯 甲基）異吲哚啉-1 -曱醯胺； 2-(5-氰基戊基）-3_側氧基_N_(4_(三氟甲氧基）苯▼基） 異吲哚淋-1 -甲醯胺；及 140346.doc -4- 201000447 2 (h基乙基）_3_側氧基_N例2,2义三氟乙基）苯甲 土 h、吲哚啉-1-甲醯胺。 24. 如前述請求項中任-項之化合物，其係用於治療。 25. 一種如請求項！至^任—項之化合物之用途，其係用 於製造用於治療疼痛病症之藥物。 26. 種冶療疼痛病症之方法，由此對需要該疼痛治療之個 體投與如請求項丨至^中任一項之化合物。 27·如叫求項1至23中任一項之化合物，其係用於治療疼痛 病症。 28. —種醫藥組合物，其包含與醫藥學上及藥理學上可接受 之職形劑混合的如請求項丨至23中任一項之化合物。 140346.doc 201000447 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   140346.doc