TW200944500A - Bifunctional group compound containing carboxylic ester and diamide dithiolate ligand and production method thereof - Google Patents

Description

200944500 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種双官能基化合物及其製造方法，尤其係指一種含羧酸 - 酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物及其製造方法，該含羧酸酯與二氮 一硫配位子之双官能基化合物可用以鍵結含氨基之標乾物質與錯或銖，形 成核醫藥物，故能應用於身體組織造影劑、疾病的標靶治療劑或協助疾病 的正確診斷等之核醫藥物領域。 ' ^ 【先前技術】 人體細胞上有特殊的受體，可以接受某些特定的胺類、氨基酸、胜肽 或蛋白質。應用這種特殊性’若將這些含氨基之化合物予以放射性核種標 幟’則這類含氨基之化合物進人人體後，將聚集在特定器官或組織，可以 達到核醫造影§乡斷或疾病治療的目的。例如，由於細胞〉周亡(叩邮〇也)與 多種疾病的療程有__係，於是蛋白質Annexin_v的放射核種標織了 以應用於細胞壯的研究，就受到廣泛的重視4欲祕_99m來標職蛋白 質或胜肽’必須使用雙官能基化合物，方能鍵結蛋白質與錯_g9m之目的。 S-Hynic含有-俯化峨_可以用來與蛋自質或胜肽產生麵的酿胺 〇 鍵結，糾還含有阶池町1與_顧可以用來鍵結錯_99m，所以是一 個常用的雙官能基化合物。但S-Hynic之溶液係屬光敏感物質，容易見光 分解。此外S-Hynic之螯合數不足，須另加輔助螯合劑，如tricine，使用 時不是很方便’因此另尋物性穩定，且方便使用的雙官能基化合物確屬必 要。 本發明人有驗習知技術之可改善，故提供—種讀義與二氮二硫 配位子之双官化合物及其製造紐，齡旨與二氮二雜位子之 双^能基化合物-方面可_結_與麵，另―方面可峨結滅或 TcO ’可應用於蛋白質與胜肽的鍊標幟或鉻標幟，且該含羧酸醋與二氮二 硫配位子之双官能基化合物具有光穩定的性質，故易於操作及使用·再者， 200944500 該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物不須另外添加輔助螯合 劑，故能減少反應之步驟及成本。 【發明内容】 本發明之主要目的，在於提供一種該含羧酸酯與二氤二硫配位子之双 官能基化合物及其製造方法’該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化 合物一方面可以鍵結醇類與胺類’另一方面可以鍵結Re〇3+或Tc〇3+，可應 用於蛋白質與胜肽的銖標幟或鉻標幟。 本發明之次要目的，在於提供一種該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双 S能基化合物及其製造方法，該含舰自旨與二氮二硫配位子之双官能基化 故祕在具有光賴環境下操作及使用。 — At本發月之另—目的，在於提供一種該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双 二此基化合物及其製造方法’該含紐_與二氣二硫配位子之双官能基化 口物不須另外添加辅賴合劑，故誠少反應之步驟及成本。 ^發明提供一種含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物及 其製k方法，该含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物，包 括： ❹

R3S I/' 〇 II d C-O-R4

V R1 R1 其中 R1==h，ch3;r2=h，CH3R4

N

;R3=CPh3, CH2C6H4〇CH3, COC6H5 ; ’ ，； η =1 〜3 ;及 m =1〜9。 6 200944500 該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物之製造方法，其 步驟包括： ⑴將N^CR^CR^SH和保護劑反應形成; (2)將該NI^CR^CE^SR3和X(CH2)nCOX進行醯胺化反應形成 〇

<CH2)aX (3)將該< R1〆

V-(CH2>aX HN 和lS^CK^O^SR3進行取代反應生成

SR3 R2 ^(CH^

HN NH R1 . ❹ R2-y\ R2

SR3 R3S ;A： R2 O. -(CH2)a (4)將該

NH R1 和Bi<CH2>nCOOH進行取代反應，生 r2*7\ SR3 R3S〆

O (CH^ 成

-COOH R1-

V R1 R1 ;及 200944500

和 (5)將該 Ν,Ν’-雙環己基雙碳二醯胺(N，N’-dicyclohexyldicarbodiimide) 進行脫水反應得到 ❿

o OHC- -R4 其中 rLh，CH3 ; R2=H，CH3 ; R3=CPh3, CH2C6H4〇CH3, COC6H5

R4 = N>， o’

Ot〉；n=1〜3;m=i~9及x為鹵素原子 ο 【實施方式】 茲為使貴審查委員對本發明之特徵及方法步驟有更進一步之瞭解與 認識，現將詳細之原理及本發明之較佳實施例說明如後。 本發明含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物，包括： V(CH^ HN N y \ Rl pRl 、SR3 V*R2 R2 〇 II . -C-O-R4 其中 RLh，CH3 ; R2=H，CH3 ; R3=CPh3, CH2C6H4〇CH3, COC6H5 200944500

O

Q r4= N

’ 05;n: :1〜3 ;及m =1〜9 其中.當n和m=l，且R4: ο

N

該含羧酸酯與二氮二硫配位子 之双官能基化合物為丁二醯亞胺基3,6-雙氮-5-氧-3-[2-((三苯基甲 基)硫代）乙基]-8-[(三苯基甲基)硫代]辛酸鹽(Succinimidyl 3,6-diaza-5-oxo-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl] -8-[(triphenylmethyl)thio] octanoate,簡稱 SOCTA)化合物。

本發明含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物（DFL)之製 造方法，其步驟包括（如第一圖所示）： ⑴將NI^CR^CR^SH和保護劑反應形成NH2CRl2CR22SIl3 ; (2)將該NHsCR^CR^SR3和X(CH2)aCOX進行醯胺化反應形成

NHaCR^CR^SR3進行取代反應生成 9 200944500 (4)將該Ri

sr-f\ J 〇V-(CHA HN ^V/8·1

Ri和Br(CH2)mCOOH進行取代反應，生 SR3

和 Ο N,N’-雙環己基雙碳二酿胺(N，N’-dicyclohexyldicarbodiimide) ❹ 進行脫水反應得到 〇

R

|-(CH2、/ (CH2>nrjj _〇_r4 HN N R1VRl R^^SRS R3s \r2 其中 CH3 ; R'=H，CH3 ; RJ=CPh3, CH2C6H4〇CH3, COQH5; R4= 〔今；n =1〜3 ; m =1〜9及X為鹵素原子。 ο 其中步驟（1)中該保護劑為三苯基甲醇，且步驟（1)中更包括一 溶於三氯曱烷後並加熱迴流之步驟，且該加熱迴流之步驟中更滴 入三氟化硼乙基乙醚錯合物之催化劑。步驟（2)中更包括一溶於三氣甲 烷後清洗有機相及減壓濃縮之步驟。步驟(3)中更包括一溶於二氣 10 200944500 甲烷，再加入三乙基胺加熱迴流，並用液相層析法分離純化之步 驟。步驟(4)中更包括一加入溴乙酸、三乙基胺及乙腈後，加熱迴流並 減壓濃縮及用液相層析法分離純化之步驟。步驟（5)中更包括一加 入N-氫氧琥珀醢亞胺、1,3-雙環己烷碳二醯胺及無水四氳呋喃形成 該Ν,Ν’-雙環己基雙碳二醯胺之步驟。 步驟(5)中當η和m=l，且R4= 該含羧酸酯與二氮二硫配位子

之双官能基化合物為丁二醯亞J3 0^,6-雙氮-5-氧-3-[2·((三苯基甲 基)硫代）乙基]-8-[(三苯基曱基)硫代]辛酸鹽(Succinimidyl 3,6-diaza-5-oxo-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl] -8-[(triphenylmethyl)thio] octanoate,簡稱 SOCTA)化合物 以下舉一種代表性双官能基化合物8110(^11丨111丨<^13,6-(1丨&23-5-0乂0-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl]-8-[(triphenylmethyl)thio] octanoate (簡稱S0CTA)為例，詳細說明S0CTA的合成方法（如第二圖所 示）及其與胺類的醯胺化反應及其後的錯合反應： ⑴1，2-[(三苯基甲基)硫代]乙胺（1，2-[(Triphenylmethyl)thio]ethylamine) 9之合成 取 2-硫乙胺鹽酸化物(2-thioethylamine hydrochloride) (10 g，88.4 mmol)， 三苯基甲醇(triphenylmethanol) (22 g，85 mmol)及三乙基胺(triethylamine；) (14mL，99.7mmol) ’共溶於三氣曱院(lOOmL)中。加熱（75°C)迴流後慢 慢滴入催化劑三氟化删乙基乙喊錯合物（borontrifluoride ethyl ether complex) (30 mL，239 mmol)，繼續加熱迴流4小時。減壓濃縮，加入甲 醇溶解，再濃縮。加入碳酸氮鈉水溶液攪拌之，立刻有白色固體析出。 抽氣過濾，取其固體，用水清洗及乾燥後獲得固體產物9(27.9g，99%)。 IR (neat) v 3381 (NH2) cm·1. ]H NMR (CDC13) δ 7.42 (m, 3 H, Ph), 7.3〇 (m, 12 H, Ph), 2.58 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2N), 2.32 (t, J = 6.6 Hz, 2Ή, CH2S), 1.45(br,2H,NH2). 13C NMR (CDC13) δ 144.80, 192.52,127.81 200944500 and 126.60 (Ph), 66.51 (CPh), 40.94 (CH2N), 36.09 (CH2S). MS m/z 319 (]νΤ), 243 (NT - C6H5 + 1). (2) N-[2-((二苯基甲基硫代）乙基]氯乙醯胺 N-[2-((Triphenylmethyl)thio) ethyl]chloroacetamide) 10 之合成 取化合物9 (10.63 g，33.3 mmol)與三乙基胺triethylamine (5.6 mL, 39.9 mmol)共溶於三氯甲烧(80mL)。在冰浴冷卻下，慢慢滴入氣乙醯氣化 物（chloroacetyl chloride) (3.18 mL，39.9 mmol)溶於三氯甲烷(1〇 mL)之溶 液。滴完後’在室溫下攪拌2小時，再分別依序使用下列清洗有機相： 1NHC1水溶液(120mL) ’飽和碳酸納水溶液(l〇〇mL)及水(100mL)。有 © 機相經Na2S04除水後減壓濃縮，得黃色油狀產物1〇 (i2.67g，96%)。 IR (neat) v 3413 and 3306 (NH), 1662 (CO) cm'1. *H NMR (CDC13) δ 7.41 (m, 3 H, Ph), 7.24 (m, 12 H, Ph), 6.48 (br, 1 Η, NH), 3.97 (s, 2 H, CH2C1), 3.12 (q, J = 6.3 Hz, 2 H, CH2N), 2.43 (t, J = 6.3 Hz, 2 H, CH2S). 13C NMR (CDC13) δ 165.63 (CO), 144.47, 129.48, 127.97 and 126.81 (Ph), 66.52 (CPh), 42.54 (CH2C1), 38.35 (CH2N), 31.67 (CH2S). MS m/z397, and 395 (M"), 243 ((CPh3)+). ⑶N-[2-((三苯基甲基)硫代）乙基][2-((三苯基甲基)硫代）乙胺基] 乙醯胺(N-[2-((Triphenylmethyl)1hio)ethyl] [2-((triphenylmethyl)thio)ethyl-amino]acetamide) 11 之合成 取化合物10 (12.7 g, 32 mmol)與化合物9 (10.2 g, 32 mmol)共溶於二氣 甲院(60 mL)，再加入三乙基胺triethyamine(6.7 mL，48 mmol)，加熱迴 流兩天。冷卻後先以碳酸氫鈉(NaHC03)水溶液(60 mL)清洗，再用水(60 mL)清洗一次，取其有機層。有機相經硫酸鈉(Na2S04)乾燥及濃縮後使 用液相層析分離純化(Si〇2，ethyl acetate : hexane = 1 : 1)，得淡黃色油 狀產物 11 (12.9 g，59.9%)。 IR (neat) v 3330 (NH), 1670 (CO) cm'1. ]H NMR (CDC13) δ 7.42 (m, 4 H, HNCO and Ph), 7.20 (m, 12 H, Ph), 3.07 (m, 4 H, CH2NCO and CH2CO), 12 200944500 2.38 (m, 6 H, CH2NHCH2CO and CH2S), 1.94 (br, 1 H, NHCH2CO). 13C NMR(CDC13) δ 170.84 (CO), 144.61, 129.47, 127.88 and 126.69 (Ph), 66.72 and 66.65 (CPh3), 51.62 (CH2CO), 48.19 (CH2NHCH2CO), 37.70 (CH2NHCO), 32.12 and 31.97 (CH2S). MS m/z 243 ((CPH3)+). (4) 3,6-二氮-5-氧-3-[2-((三苯基曱基)硫代）乙基]-8-[(三苯基-曱基） 硫代]辛酸3,6-Diaza_5-oxo-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl]-8-[(triphnyl-methyl) thio]octanoic acid) 12之合成 取化合物 11 (10.1 g, 14.9 mmol)，演乙酸(bromacetic acid) (2.2 g, 15.8 mmol)及三乙基胺（triethyl amine) (3.13 mL, 22.3 mmol)及乙腈(30 mL)後 ❹ 加熱迴流(85°C)隔夜。冷卻後減壓濃縮，將殘留物溶於二氣甲烧(80mL)， 用水(80mL)清洗，棄水相。有機相用Na2S04除水，濃縮後使用液相層析 法(Si〇2，ethylacetate : hexane = 1: 1)分離純化，得淡黃色油狀產物12 (6.5 g，56.1%)。 IR (neat) v 3327 (NH), 1726 and 1634 (CO) cm'1. !H NMR (CD3OD) δ 7.40 (m, 3 H, Ph), 7.25 (m, 12 H, Ph), 3.21 (s, 2 H, CH2), 3.11 (s, 2 H, CH2), 2.30 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2NH), 2.52 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2N), 2.34 (t, J =6.6 Hz, 4, H, CH2S). 13C NMR (CD3OD) δ 173.89 and 172.97 (CO), 146.11,130.72,128.96, 127.87 and 127.81 (Ph), 68.09 and 67.84 (CPh3), ❿ 59.0, 55.86 and 55.13 (CH2), 39.12 (CH2NH), 32.70 and 31.01 (CH2S). MS m/z 243 ((CPh3)+). (5) 丁二醯亞胺基3,6-雙氮-5-氧-3-[2-((三苯基曱基)硫代）乙 基]-8-[(三苯基甲基）硫代]辛酸鹽(ΒικχΰΰπΰίΙγΒ,ό-ώαζα-^-οχο-Β-Ι^-αίήρΙ^ηγΙηιεΊΐιγίχΐιίο^ΙιγΙ] -8-[(triphenylmethyl)thio]octanoate, SOCTA)之合成 取化合物12 (1.65 g，2.1 mmol)加入N-氫氧破珀醯亞胺 (N-hydroxysuccinimide) (0,3 g，2.52 mmol), 1，3-雙環己烷碳二醯胺 (1，3-dicyclohexylcarbodiimide) (0.7 g，31.5 mmol)及無水四氫吱喃 13 200944500 (tetrahydrofiiran) (30 mL)，在室溫下授拌隔夜。抽氣過遽以除去析出之 固體，將溶液減壓濃縮。使用液相層析(Si02，ethyl acetate)分離純化， - 得油狀產物 SOCTA (1.79 g, 60.2%)。

. IR (neat) v 3360 (NH), 1815, 1786, 1741 and 1674 (CO) cm'1. ^NMR (CDC13) δ 7.37 (m, 4 Η, NH and Ph), 7.21 (m, 12 H, Ph), 3.49 (s, 2 H, CH2), 3.31 (s, 2 H, CH2), 3.02 (q, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2NH), 2.75 (s, 4 H, CH2CH2CO), 2.58 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2N), 2.36 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2S), 2.31 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2S). 13C NMR (CDC13) δ 169.68, 168.56 and 165.63 (CO), 144.68,144.50 129.52, 129.47,127.96,127.88, © 126.78 and 126.65 (Ph), 66.94 and 66.68 (CPh3), 57.96, 53.31 and 52.41 (CH2), 38.07 (CH2NH), 31.89 and 29.93 (CH2S), 25.50 (CH2CH2CO). MSm/z243 ((CPh3)+). SOCTA和胺基及放射性核種鍵結之實驗(如第二圖所示） (1) Ν,Ν-Dimethyl 3,6-diaza-5-oxo-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl] -8_[(triphenylmethyl)thio]octanamide 13 之合成 取化合物 SOCTA(1.67g,2.0mmol)及二甲胺(10mL，18.2mmol)共溶 於三氯甲烧(30mL)，在室溫下攪拌隔夜，減壓蒸乾後以乙醚溶出， 用液相層析法(Si〇2，chloroform)分離純化’得油狀產物13 (1.22 g， w 80%)。 IR(neat) v3341 (NH), 1673 and 1651 (CO)^1. ^NMR(CDC13)δ 7.87 (t, J = 6.6 Hz, 1, NH), 7.21-7.06 (m, 30 H, Ph), 3.19 (s, 2 H, CH2CO), 3.09 (s, 2 H, CH2CO), 3.04 (q, J = 6.6 Hz, 2 H, CHbNHCO), 2.82 (s, 3 H, NCH3), 2.77 (s, 3, H, NCH3), 2.64 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2 CH2NCH2CO), 2.39 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2CH2NHCO), 2.26 (t, J = 6.6 Hz, 2 H, CH2CH2NCH2CO). 13C NMR (CDC13) δ 171.17 and 169.67 (CO), 144.74, 144.70, 129.52, 129.49, 127.83, 126.63 and 126.60 (Ph), 66.69 and 66.54 (CPh), 58.39, 54.58, 53.97 and 37.98 (CH2), 36.16 and 200944500 35.38 (NCH3), 31.88 and 30.23 (CH2). MS m/z 243 ((CPh3)+). (2)[N-(2-thioethyl)-N-(2-thioethyl)-N-(N,N-dimethy carbamoylmethyl) aminoacetimido] oxorhenium(V) 14 之合成 取化合物 13 (0.63 g，0.83 mmol)，ReO(PPh3)2Cl3 (0.87 g，1.0 mmol)及 三乙胺（0.4 mL, 2.9 mmol)共溶於甲醇（50 mL)，在55°C加熱16小時， 過濾後將反應液減壓蒸乾，用三氣甲烷溶解殘留物，水洗進行液相層析 法(Si02，chloroform : methanol = 100 : 5 )分離純化，得紅棕色黏滯性產 物 14 (0.18 g，45%)。 IR (neat) v 1639 and 1614 (CO), 961 (ReO) cm'1. !H NMR (CDC13) δ 5.62 © (d, J = 15.0 Hz, 1 H, NCOCH2N), 4.83 (dd, J = 12.0 and 4.8 Hz, 1 H, CONCH2CH2), 4.66 (dd, J = 15.0 and 2.4 Hz, 1 H, NCOCH2N), 4.32 (m, 1 H, COCH2NCH2CH2)，3.76 (m, 1 H，COCH2NCH2CH2), 3.60 - 3.30 (m，3 H, CONCH2CH2), 3.26 - 3.05 (m, 3 H, COCH2NCH2CH2), 2.89 (s, 3 H, CH3), 2.72 (s, 3 H, CH3), 2.42 (d, J = 17.1 Hz, 1 H, NCOCH2N). 13C NMR (CDCI3) δ 184.88 and 163.64 (CO), 68.29, 63.58, 54.28, 53.40, 47.98 and 40.69 (CH2), 36.65 and 35.67 (CH3). MS m/z 479 and 477 (ivT). SOCTA和胺基及放射性核種鍵結之實驗證明本發明含羧酸酯與二氮二 ❹ 硫配位子之双官能基化合物中之SOCTA化合物能和氨基酸、胜肽或蛋白質 之胜肽鍵結，且能和Re03+或Tc03+等放射性核種鍵結，故可應用於蛋白質 與胜肽的銶標幟、鉻標幟或應用於治療疾病，且該含羧酸酯與二氮二硫配 位子之双官能基化合物具光穩定性，故易在具有光源的環境下操作及使 用’又’該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物不須另外添加輔 助螯合劑，故能減少反應之步驟及成本。 惟以上所述者，僅為本發明之較佳實施例而已，並非用來限定本發明 實施之範圍，舉凡依本發明申請專利範圍所述之構造、特徵及精神所為之 均等變化與修飾，均應包括於本發明之申請專利範圍内。 15 200944500 【圖式簡單說明】 第一圖為本發明含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物之製 - 造步驟示意圖。 第二圖為本發明含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物之 SOCTA化合物、SOCTA化合物和胺基及放射性核種鍵結 之製造步驟示意圖。 【主要元件符號說明】 無

16

Claims (1)

1. 200944500 十、申請專利範圍： 1. 一種含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物，包括：

   (CH2^ / (CH^-C -〇-R4 Nv R1 其中 R1 =H，CH3 ; R2=h，CH3 ; R3=CPh3, CH2C6H4〇CH3, COC6H5 ;

   2.如申請專利範圍第1項所述之含叛酸酯與二氮二硫配位子之双官能

   基化合物’其中當η和m=l，且R4= ，該含叛酸酿與二氮 二硫配位子之双官能基化合物為丁二酿亞胺基3,6-雙氮-5-氧 -3-[2-((三苯基甲基）硫代）乙基]_8-[(三苯基甲基)硫代]辛酸鹽 (Succinimidyl 3,6-diaza-5-oxo-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl] _8-[(triphenylmethyl)thio]octanoate，簡稱 SOCTA)化合物。 3. —種含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物之製造方法， 其步驟包括： (1) 將N^CK^CR^SH和保護劑反應形成ni^CR^CR^SR3 ; (2) 將該Ni^CR^CR^SR3和X(CH2)aCOX進行醯胺化反應形成

   17 200944500 (3)將該 V(CH2)aX

   R2*y\ R2 和NH^CR^CR^SR3進行取代反應生成 SR3 R1 R2

   〇、 VCCH^ ψ pRl-4 Ο (4)將該

   EH N 和Bi<C：H2>mGCK)H進行取代反應’生 成

   κ2-γ\ R2 V(CH2)n HH K COOH ;及 飞1 ❹ SR3 R3S •R2

   N，N’-雙環己基雙碳二醢胺(Ν,Ν’-dicyclohexyldicarbodiimide) 進行脫水反應得到

   one !r tR 2r -R4 °- 18 200944500 其中 R1 =H，CH3 ; R2=H，CH3 ; R3 =CPh3, CH2C6H4〇CH3, C〇C6H5 ; O 、 r4=i0，;n=1〜3;m=1〜9及X為鹵素原子。 o’ 4. 如申請專利範圍第3項所述之含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中步驟（1)中該保護劑為三苯基甲醇。 5. 如申請專利範圍第3項所述之含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中步驟（1)中更包括一溶於三氯甲烷後 並加熱迴流之步驟。 〇 6.如申請專利範圍第5項所述之含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中該加熱迴流之步驟中更滴入三氟化 硼乙基乙醚錯合物之催化劑。 7·如申請專利範圍第3項所述之含叛酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中步驟(2)中更包括一溶於三氣甲烷後 清洗有機相及減壓濃縮之步驟。 8.如申請專利範圍第3項所述之含叛酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中步驟(3)中更包括一溶於二氯甲烷， 再加入三乙基胺加熱迴流’並用液相層析法分離純化之步驟。 〇 9.如申請專利範圍第3項所述之含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中步驟(4)中更包括一加入溴乙酸、三 乙基胺及乙腈後，加熱迴流並減壓濃縮及用液相層析法分離純化 之步驟。 10. 如申請專利範圍第3項所述之含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能 基化合物之製造方法，其中步驟(5)中更包括一加入N-氫氧琥 珀醯亞胺、1，3-雙環己烷碳二醯胺及無水四氫呋喃形成該N，N’-雙環己基雙碳二醯胺之步驟。 11. 如申請專利範圍第3項所述之含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能 200944500 基化合物之製造方法，其中步驟（5)中當η和m=l，且R4 〇

   =〇 ，該含羧酸酯與二氮二硫配位子之双官能基化合物為丁 二醯亞胺基3,6-雙氮-5-氧-3-[2-((三苯基甲基）硫代）乙 基]-8-[(三苯基甲基)硫代]辛酸鹽(Succinimidyl 3,6-diaza-5-oxo-3-[2-((triphenylmethyl)thio)ethyl]-8-[(triphenylmethyl)thio]octanoate，簡稱 SOCTA)化合物。