TW200824693A - Pharmaceutical compositions of clonazepam and methods of use thereof - Google Patents

Description

200824693 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明關於調和物，包括苯並二氮呼（例如：氯硝西 泮）之組成物及劑型。此文所描述者爲可用於透黏膜遞送 (包括鼻內遞送.）且有效之組成物以及這類組成物之使用 方法及製造方法。

【先前技術】 苯並二氮呼爲一類可用來減輕憂鬱、治療恐慌症、誘 導睡眠、放鬆肌肉及解除癲癇發作和肌肉痙攣之抗憂鬱 劑、抗恐慌劑及肌肉鬆弛劑。苯並二氮呼藥物經由抑制中 樞神經系統來產生這些效果。苯並二氮呼藥物之實例有氯 硝西泮（clonazepam)、阿普嗤侖（alprazolam)、氯氮 卓（chlordiazepoxide)、二氮平（diazepam)、洛侖西泮 (lorazepam )、歐沙西泮 （oxazepam )、艾司嗤侖 (estazolam )、咪卩坐達侖 （midazolam) 及三嗤侖 (triazolam ) 〇 氯硝西泮係由 Hoffman-La Roche 在美國以 KLONOPIN® ( Hoffmann-La Roche Inc.，New Jersey)之商 標名，在加拿大、南美及歐洲以化1乂0丁化11^(11(^1'11^1111-La Roche Inc.，New Jersey)之商標名販售。氯硝西泮之 藥理學略圖與其他解憂/鎭靜之苯並二氮呼藥物之藥理學 略圖相似，且其抗痙攣特徵與其他二氮呼之特徵相似。氯 硝西泮可遏制伴隨失神發作（即，小發作）之棘徐波放 -5- 200824693 電，及減少小規模運動型癲癇發作之幅度、頻率、期間及 放電分佈。 氯硝西泮可經口良好吸收；最大血液濃度通常係出現 在1至2小時內。其係由肝臟代謝並還原成非活性代謝 物，此代謝物主要係從尿液排泄。從尿中排出之未變化的 量係少於0.5%之劑量。另外，9%至27%之氯硝西泮劑量 係從糞便中排出。氯硝西泮顯示出在約1 8小時至5 0小時 間變化之半生期。 氯硝西泮顯示出強解憂性質及欣快之副作用；因此， 其被視爲“高度有效”之苯並二氮呼。具體地說，〇·25毫 克之氯硝西泮大致等於5.0毫克之二氮平。氯硝西泮之鎭 靜效果與其抗痙攣及解憂之效果相較下相對較弱。氯硝西 泮之鎭靜效果亦較其他苯並二氮呼爲弱。如同其他苯並二 氮呼，氯硝西泮顯示出係藉由刺激中樞神經系統之GAB A 來作用。 ~ 氯硝西泮常係開立用來治療癲癇、焦慮症、恐慌發 作、歇不住腳症候群（RLS )、慢性疲勞症候群、REM行 爲障礙、夜驚及妥瑞氏症。由於焦慮之慢性本質，在治療 焦慮症時可能需要以低劑量之氯硝西泮長期治療。雖然苯 並二氮呼有些濫用之可能性，使用氯硝西泮長期治療焦慮 症爲治療性質而不應與倚賴性或成癮相混淆。氯硝西泮亦 可與諸如鋰、利培酮 （risperidone ) 或易寧優 (haloperidol )之類的藥物一起用於狂躁症之初次治療 中。另外，氯硝西泮係被開立用來治療巴金森氏症及精神 -6- 200824693 分裂症並用於顫搐及疼痛處理。氯硝西泮亦已用於減少及 處理妥瑞氏症候群動作抽筋。於另一應用中，氯硝西泮已 用來治療迷幻劑持續性知覺失常（HPPD )。氯硝西泮通 常並不用來治療失眠，因其鎭靜效果很弱。 在癲癇患者方面，氯硝西泮係單獨使用或作爲輔助療 法和作爲主要療法，以及用於難治療之患者。癲癇之疾病 特徵爲腦部功能暫時性但重複出現紊亂，其可能或可能不 與意識損傷或喪失及不正常之動作或行爲有關。照護癲癇 患者之主要目標係恢復其功能至最大極限。爲了達到此目 的，臨床醫師使用穩定之抗癲癇藥（AED )給藥法。約有 30%之患者對AED療法仍屬頑固難治且通常患有可能癲癇 連續發作之重複出現的發作。這些患者中有些亦經歷持續 之癲癇發作活動而長期無法回復意識，此狀況稱爲癲癇持 續狀態。除了危迫生命外，重複出現之癲癇發作及癲癇持 續狀態可影響認知並永久損害其他腦部功能。 患有難治之癲癇的患者（包括癲癇連續發作之發作及 癲癇持續狀態）常出現在急診室接受靜脈內注射苯並二氮 呼、癲能停（phenytoin)及巴比妥鹽（ barbiturates)。 急診室中之治療目的爲快速停止癲癇發作活動。到急診室 前，這些患者及照護者僅有極少之治療選項可用。 癲癇發作通常被分成二類：原發性泛發性癲癇發作 (涉及大腦二邊之廣泛放電的癲癇發作）及局部癲癇發作 (涉及大腦之一區的癲癇發作）。原發性泛發性癲癇發作 包括··失神性發作（亦稱爲小發作）、肌抽躍發作、失張 200824693 力發作及僵直性發作、陣攣型發作及陣攣型僵直性發作 (亦稱爲大發作）。局部癲癇發作包括單純性及複雜性發 作和次發性泛發性發作。 氯硝西泮已用於治療許多不同之癲癇症候群及不同類 型之癲癇發作，包括：Lennox-Gastaut症候群（變異型失 神發作）、運動不能發作及肌陣攣型發作。氯硝西泮亦可 用於失神性發作之患者。在歐洲，氯硝西泮（可取得IV 調和物）亦用於急診室中癲癇發作之急性治療。具癲癇連 續發作及癲癇持續狀態病史之患者常至急診室就醫。 用於門診治療正接受穩定之抗癲癇藥物攝生法之患者 所增加之發作活動的二氮平直腸凝膠調和物可自市面上購 得（Diastat® ) 。Diastat⑧係由照護者給予患者且可有效 終止發作活動，而藉此減少至急診室就醫。然而，由於投 服模式，Diastat®主要用於兒童中，家長可經由直腸途徑 給予其子女。理想上，這些癲癇患者之門診救治將快速展 開終止發作之作用並透過足夠長之作用期來防止發作活動 重複出現。治療亦可由照護者以容易達到之文化上可接受 之投藥模式很輕易地給藥。 鼻內黏膜提供口服及非經腸胃道投藥之替代途徑；鼻 內投藥爲取得許多藥物之療效的實用方式。本方法之優點 爲可容易且簡單投藥並可取得局部或系統性作用。然而’ 鼻內投藥受困於重大難題：大部分藥物分子透過鼻內黏膜 擴散緩慢且不佳。因此’無法達到藥物之治療水準或可能 無法隨著發病進展及時達到。另一種束縛爲投服量必須 -8 - 200824693 小；通常每一鼻孔1 5 0微升。若投服較大 能流入喉嚨並呑嚥。 現已硏發出不同之鼻內苯並二氮呼組成 些組成物中有些顯示出延遲達到尖峰血漿濃 或生物利用率不佳。此對於治療或預防某些 症狀而言是無法接受的。例如：某些鼻內咪 之製造pH値係在可在許多患者體內引起鼻 感。 因此，吾人需要具改良性質（諸如快速 峰濃度之時間及生物利用率）之鼻內苯並二 再者，還需要可令藥物高度溶解於其中且對 之載劑。對於改良患者之順應性的鼻內組成1 【發明內容】 於一方面中，本發明針對用於透黏膜投 之藥學組成物，其包含一種溶劑系統，此溶 硝西泮可溶解於其中之第一種溶劑（此第一 入鼻黏膜組織）及氯硝西泮在其中之溶解度 劑爲低之第二種溶劑，其中該溶劑系統包售 重量）或更少之水性緩衝溶液，先決條件爲 包含游離之聚乙二醇聚合物；及治療有效量: 於其他較佳體系中，該藥學溶劑系統可 且大致上爲均質，其大致上不含水性緩衝劑 劑可爲二乙二醇單乙醚（DEGEE )或四氫糠 量之藥物則可 物。然而，這 度、吸收不良 病症、疾病和 唑達侖調和物 內刺激及灼燒 吸收、達到尖 氮呼組成物。 鼻黏膜無損害 吻亦有需求。 藥於哺乳動物 劑系統包含氯 種溶劑能滲透 較在第一種溶 • 10% (重量/ 該溶劑系統不 匕氯硝西泮。 大致上爲單相 ，該第一種溶 醇聚乙二醇醚 200824693 (glycofurol)，第一種溶劑之存在量係介於約30重量％ 和約70重量％之間，第二種溶劑可爲三醋酸甘油酯或丙二 醇，且該氯硝西泮之存在量係介於0.1重量％和1〇重量％ 之間。 於其他較佳體系中，該第一種及第二種溶劑可以相等 之重量百分比存在，該水性緩衝溶液之PH値可介於約 PH4至約PH7之間，該組成物可進一步包含一或多種選自 下列之成分：界面活性劑、抗氧化劑、藥學上可接受之聚 合物、多元醇、脂質、黏膜滲透增強劑、著色劑、調味 劑、麻醉劑、共溶劑及調整滲透壓之作用劑，該組成物可 配製成可噴霧且該組成物可在介於-15和3 Ot：之間的溫度 噴出。 於另一方面中，本發明係針對用於透黏膜投藥於哺乳 動物之藥學組成物，其包含一種溶劑系統，此溶劑系統包 含二種溶劑：第一種溶劑，其包含一或多種選自二乙二醇 單乙醚或四氫糠醇聚乙二醇醚之成分，及第二種溶劑，其 包含一或多種選自三醋酸甘油酯或丙二醇之成分，其中該 溶劑系統包含1 〇% (重量/重量）或更少之水性緩衝溶 液，先決條件爲該溶劑系統不包含游離之聚乙二醇聚合 物；及治療有效量之氯硝西泮，其中該組成物爲單相且均 質。 於其他較佳體系中，組成物之使用量爲介於約50微 升和300微升之間或介於約25微升和150微升之間的單 位治療劑量，且氯硝西泮之治療有效量係介於每單位劑量 -10- 200824693 約0·1毫克和5毫克之間，或每單位治療劑量介於約10 毫克和4.0毫克之間。 於其他較佳體系中，本發明之藥學組成物包含用於鼻 內投藥於哺乳動物之氯硝西泮，此組成物包含乙醚溶劑及 治療有效量之氯硝西泮，其中該組成物爲單相且均質。 於另一方面中，本發明之藥學組成物包含用於透黏膜 投藥於哺乳動物之氯硝西泮，其特徵爲（i)在單次鼻內 投藥後，不超過2小時，及（ii )在單次鼻內投藥後，不 低於經口遞送之同等劑量氯硝西泮之生物利用率的3 0%。 於另一方面中，本發明之藥學組成物包含用於透黏膜 投藥於哺乳動物之氯硝西泮，其特徵爲（i )氯硝西泮之 Cmax，單次鼻內投藥後，至少爲經口遞送之同等劑量氯硝 西泮之Cmax的75%，及（ii )氯硝西泮之生物利用率，單 次鼻內投藥後，不低於經口遞送之同等劑量氯硝西泮之生 物利用率的30%。 於另一方面中，本發明之藥學組成物包含用於鼻內投 藥於哺乳動物之氯硝西泮，其特徵爲（i )在單次鼻內投 藥後，氯硝西泮之AUC ( AUCin )對經靜脈內遞送之同等 劑量氯硝西泮之AUC ( AUC。^)的比例爲至少約AUCin : AUCom =1 : 3·3，其中該ACU値係在相同期間內測定。 於其他方面中，本發明針對用於將活性劑投藥於需要 彼之哺乳動物的方法，該方法包含經由哺乳動物之鼻黏膜 將氯硝西泮遞送至哺乳動物之血流中，該氯硝西泮係於包 含如上述之組成物的劑型中遞送，本發明係針對治療患有 -11 - 200824693 癲癇發作之哺乳動物的方法，該方法包含經由哺乳動物之 鼻黏膜將氯硝西泮遞送至哺乳動物之血流中，其中該氯硝 西泮係在包含如上述之組成物的劑型中遞送。 於其他較佳體系中，活性劑係在癲癇發作症狀開始時 遞送，且可投服一或多個單位劑量。 於另一方面中，本發明係針對製造氯硝西泮組成物之 方法，該方法包含將溶劑系統與氯硝西泮混合，以提供適 合用於鼻內投服氯硝西泮之單相且均質的溶液。 於第一方面中，本發明係針對一種用於將活性劑投藥 於需要彼之哺乳動物的方法，其中如上述之組成物係投藥 於患有選自下列之焦慮發作之哺乳動物··恐慌發作、社交 恐懼症、社交焦慮及操作焦慮。 本技藝之一般技術人士鑑於此處所揭示之內容將可輕 易地了解本發明這些及其他較佳體系。 發明之詳細說明 本專利說明書中所列之所有專利案、刊物或專利申請 案倂爲此文之參考資料，就如同各個別之專利案、刊物或 專利申請案係被具體且個別指出其全文作爲用於所有目的 之參考資料。 1 ·〇·〇定義 需了解，此文所使用之專門用語僅用於描述特殊之較 佳體系，而不欲用於限制。除非另外明確指出，本專利說 -12- 200824693 明書及附屬之申請專利範圍中所使用之單數名詞“ 一”及 “該”係包括複數名詞。因此，例如：提及“溶劑”時可 包括二或多種這類溶劑之組合，提及“化合物”時可包括 一或多種化合物、化合物之混合物，等。 除非另外定義，此處所使用之所有技術及科學名詞與 本發明相關技藝之一般技術人士所普遍了解者具相同意 義。雖然可使用其他類似於或等同於此處所描述者之其他 方法和物質來執行本發明，但本發明所描述者爲較佳之物 質和方法。 在描述和主張本發明時，下列名詞將根據下列定義使 用。 此文所使用之“劑型” 一詞係指包含活性劑（諸如氯 硝西泮）及隨意地含有可用來製造及遞送活性藥學劑之非 活性成分（如：藥學上可接受之賦形劑，諸如懸浮劑、界 面活性劑、溶劑、共溶劑、滲透增強劑、結合劑、稀釋 劑、潤滑劑、安定劑、抗氧化劑、滲透劑、著色劑、塑化 劑、塗覆劑，等）之藥學組成物。 此文所使用之“凝膠”一詞係指一種半固體劑型，其 含有在，如：水性、醇性或氫醇載劑中之膠化劑且該膠化 劑賦予該載劑三次元交聯母質（“膠化的”）。此處所使 用之“半固體”一詞係指一種異質系統，其中一種固相分 散在第二種液相中。在本發明之較佳體系中，調配成用於 鼻內遞送之苯並二氮呼（如：氯硝西泮）組成物並未膠 化。 -13- 200824693 此文所描述之調和物及組成物（其中該調和物或組成 物不包含優勢之水性環境）的pH測量値更適合被描述爲 “表觀pH”値，因爲該pH値並非在優勢之水性環境中測 量。在這類情況中，例如：有機溶劑對pH測量値之影響 可造成pH値相對於真正之水性環境變動。 此文所使用之“黏膜黏附性的” 一詞係指黏附在被黏 液覆蓋之黏膜上（例如：在鼻腔中者）。 此文所使用之“載體”或“載劑”一詞係指適合投服 (例如：經由鼻腔黏膜透黏膜投服）藥學活性成分之載體 物質（除了藥學活性成分外之成分）。載劑可包含，如： 溶劑、共溶劑、滲透增強劑、pH緩衝劑、抗氧化劑、加 成劑，等，其中該載劑之成分爲非毒性且不會與總組成物 之其他成分以不利之方式交互作用。 此文所使用之“透皮”遞送一詞係指透皮（或“經 皮”）及透黏膜投藥，亦即，經由讓藥物通過皮膚或黏膜 組織表面，最終流入血流中來遞送。透黏膜投服包括但不 限於：經鼻、口、直腸及陰道投服組成物，以將活性藥物 (如：氯硝西泮）遞送至投服個體之血流中。 此文所使用之“治療有效量”一詞係指非毒性但足量 之藥物、作用劑或化合物以提供所需療效，例如：可有效 治療癲癇發作（包括癲癇連繪發作和癲癇狀態），或用方令 治療焦慮狀態，包括但不限於：恐慌發作、社交恐懼症、 社父焦慮及操作焦慮、急性狂躁症、精神病和藥物戒斷 (包括但不限於：菸鹼戒斷、鴉片戒斷和酒精戒斷）的一 -14- 200824693 或多個氯硝西泮劑量。 此文所使用之“癲癇連續發作” 一詞係指在某些癲癇 患者中密切相關之發作群。癲癇連續發作患者通常以獨特 樣式經歷此頻率增加的發作。某些這類癲癇患者在24_48 小時間經歷3或更多次之發作的情形並不尋常。 此文所使用之“苯並二氮呼”一詞係指一類具鎭靜、 安眠、解憂、抗痙攣、失憶及/或肌肉鬆驰性質之藥物。 通常，苯並二氮呼包含由稠合至7員二氮平環之苯環所組 成的構造。大部分重要之苯並二氮呼含有芳基取代基之環 及1，4 -二氮呼環。一般而言，苯並二氮呼係指芳基-1，4 -苯 並二氮呼。苯並二氮呼之作用通常係由γ-胺基丁酸 (GABA )增加受體活化來產生。苯並二氮呼一詞包括苯 並二氮呼及其藥學上可接受之鹽類。 苯並二氮呼通常根據該藥物具顯著作用之期間分成三 組：短效型苯並二氮呼通常作用少於6小時；中間效型苯 並二氮呼通常作用6至10小時；而長效苯並二氮呼具有 持續之強鎭靜效果。下表爲苯並二氮呼之部分列表，此表 係以最短效至最長效之苯並二氮呼的合適順序排列：阿普 哗侖（alprazolam) •，溴西泮（bromazepam);氯氮卓 (chi ordiaz epoxide);克洛巴侖（clobazam);氯硝西 泮；克洛西派（cl〇razePate);二氮平（diazepam);艾 司 π坐侖（estazolam ) •，氟硝西泮（flunitrazepam );氟西 泮（flurazepam );哈拉西泮（halazepam );奇他達侖 (ketazolam ):洛帕卩坐侖（loprazolam ) •，洛侖西泮 -15- 200824693 (lorazepam);洛美他西泮（lormetazepam);美達西泮 (medazepam );咪哇達侖（midazolam );硝西泮 (nitrazepam );諾達西泮（nordazepam)；歐沙西泮 (oxazepam ) ;普西泮 (prazepam ) ;夸西泮 (quazepam ) •，泰馬西泮（temazepam) •，四西泮 (tetrazepam);及三嗤命(triazolam ) 〇 苯並二氮呼通常具有下列作用，雖然某些可能爲相對 較強之解憂劑，其他爲相對較強之失億劑：解憂（減少憂 慮，如：治療恐慌發作）；抗痙攣（如：治療發作）：抗 抽筋（如：肌肉鬆弛）：鎭靜/安眠；抗憂鬱；及失憶 (產生順行性遺忘）。 此文所使用之“氯硝西泮”一詞包括氯硝西泮及其活 性之藥學上可接受之衍生物和代謝物，以及其藥學上可接 受之鹽類。氯硝西泮之藥學略圖類似於其他解憂/鎭靜苯 並二氮呼。再者，氯硝西泮之基礎抗痙攣性質類似於其他 二氮呼。氯硝西泮可遏制無發作時之棘徐波放電（小發 作）及減少小規模運動型發作之頻率、幅度、放電期間及 分佈。氯硝西泮可用於治療與癲癇相關之癲癇連續發作。 化學上，氯硝西泮爲5- ( 2-氯苯基）-1，3-二氫-7-硝基-2H-1，4-苯並二氮呼-2-酮。其爲淡黃色結晶形粉末。氯硝 西泮之分子量爲315.72並具下列分子式：C15H1GC1N303。 氯硝西泮之構造如下： -16- 200824693

此文所使用之院劑溶劑”一詞包括長度爲2 - 5個碳 φ 原子之院基醚’包括但不限於：1,2 -二甲氧基乙院、二 (乙二醇）甲醚、二乙二醇單乙醚及二（乙二醇）二乙 醚。 此文所使用之 渗入（permeation)增強劑”或“渗 透（p e n e t r a t i ο η )增強劑一詞係指可改良轉運藥學活性 劑（如··氯硝西泮）通過黏膜或皮膚表面之速率的作用 劑。通常，滲透增強劑增加黏膜組織或皮膚對藥學活性劑 之可滲透率。例如：滲透增強劑增加藥學活性劑滲透通過 泰 黏膜組織’進入血流之速度。透過使用滲透增強劑而增加 之滲透作用可藉由，如：依本文下列實例之描述測量藥學 活性劑通過動物或人類組織之流量來觀察。此文所使用之 滲透增強劑的“有效”量一詞意指可將鼻內黏膜組織滲透 力增加至所需水準的量’其可提供，如：所選定之化合物 的所需滲透深度、所需之化合物之投服速度及所需之化合 物遞送量。 此文所使用之“實驗對象”一詞係指任何溫血動物， 尤其是包括哺乳動物綱之成員，諸如，但不限於：人類及 -17- 200824693 非人類靈長類，諸如：黑猩猩及其他猿和猴子品種；農場 動物，諸如乳牛、綿羊、豬、山羊及馬；馴養之哺乳動 物，諸如狗及貓；實驗室動物，包括兔子和齧齒類，諸如 小鼠、大鼠及天竺鼠，等。此名詞並不指特殊之年齢或性 別、 此文所使用之“遞送速率”一詞係指每單位時間遞送 (通常係至血漿）之藥物量，例如：每小時在活體中釋出 _ 之藥物奈克數（奈克/小時）。 在活性劑之血漿血液濃度方面，此文所使用之“ c ” 一詞係指實驗對象之血漿中的藥物濃度，一般係以每單位 體積之質量表示，通常爲奈克/毫升（本文中，此濃度可 稱爲“血漿藥物濃度”或“血漿濃度”，其欲包括在任何 合適之體液或組織中測得之藥物濃度）。投服藥物後之任 何時間的血漿藥物濃度通常稱爲Ctlme，如，以clGh或 C2〇h，等表示。此文所使用之“ cmax” 一詞係指投服一個 Φ 藥物劑量後所觀察到之最大血漿藥物濃度，其通常係在投 服第一個劑量後監測及/或達到穩定遞送藥物後監測。此 文中’下列名詞係依下述使用：“ cavg”通常係指在穩定 狀態時觀察到的平均血漿濃度，此處，穩定狀態之Cavg係 稱爲“Css” ； “Cmin”係指通常在穩定狀態觀察到的最小 血漿濃度。 此文所使用之“AUC”或曲線下面積一詞係指由身體 吸收之藥物總量且爲血漿藥物濃度對時間之繪圖中的曲線 下面積，本發明中係在人類口服（AUC〇ral )、鼻內投服 -18- 200824693 (AUCin )或靜脈內投服（AUCiv )後24小時計算之。 此文所使用之“ Tmax ”一詞係指達到最大血漿濃度之 時間並代表投服調和物及最大血漿藥物濃度（即，血漿濃 度對時間圖形中之尖峰，見，如，第5圖）間經過的時 間。Tmax値可在起始期間測定（如：與投服單一劑量之藥 物相關）或可指投服劑型及穩定狀態期間觀察到最大血漿 濃度之間的期間。 此文所使用之“穩定狀態”一詞係指在預定期間內連 續投服固定劑量之活性劑後血漿濃度對時間之樣式。在 “穩定狀態”期間，各給藥期間內，血漿濃度尖峰及血漿 濃度波谷大致相同。 此文所使用之“噴霧”一詞意指在壓力下以霧狀滴、 細霧、液滴、細流或其組合之形式從裝置中出現的液態組 成物。液態組成物之確實形式係根據黏性及其他物理性 質，以及施在含有該液態組成物之裝置上以釋出該液態組 成物之力量（手工或其他）。“Guidance for Industry: Nasal Spray and Inhalation Solution, Suspension， and Spray Drug Products- Chemistry “且進一步描述 於，，Manufacturing，and Controls Documentation66 ( 2002 年 7月），及本文中下列實例中描述一些液態組成物噴霧之 特徵，包括但不限於：噴霧樣式、液滴大小及羽煙幾何。 通常，該噴霧爲均質，然而，只要該噴出之#積可被鼻黏 膜有效吸收，則異質噴霧亦可接受。 此文所使用之“先決條件爲該溶劑系統不包含游離聚 -19- 200824693 乙一醇聚合物一詞係指含有一或多種溶劑之組成物，其 溶劑系統之溶液中不包含游離之聚乙二醇（PEG)聚合 物’亦即該組成物不含有非爲較大化學實體之內生部分的 PEG聚合物。因此，游離之聚乙二醇聚合物（如： PEG200、PEG300、PEG400 )並非以分開之成分加入溶劑 系統中。然而，不包含游離聚乙二醇聚合物的組成物可包 含該含有取代基聚乙二醇聚合物作爲其內生分子構造之一 部分的分子（如：含有PEG聚合物作爲取代基之四氫糠醇 聚乙二醇醚及一-或二-甘油酯）（見，如：已出版之 P.C.T·國際申請案第 WO 03/070273，WO 03/070280 號，及 U.S·專利第 6,85 5,332 和 5,942,237 ))。 此文所使用之“不含水性緩衝劑”一詞係指大體上不 含水性緩衝劑之組成物，亦即組成物中未加入水性緩衝 劑。 此文所使用之“均質”一詞係指視覺及巨觀上大致均 勻，實質上不含微粒且在一段時間內不會下沈或分開的組 成物。 / 此文所使用之“單相”一詞係指大體上含有一種熱動 力學狀態且整體爲化學上及物理上均勻之組成物。 “生物利用率”或“ F ” 一詞係指相關之生物利用率 且在人類個體之情況中係欲指AUCirl對AUCQral之比例， 在兔子之情況中係欲指AUCin對AUCiv之比例。 此文所使用之“單位劑量”一詞係指治療上有效劑量 所需之透黏膜氯硝西泮的量。該單位劑量可在一或多次之 -20- 200824693 用於鼻內遞送的噴霧中遞送且可在一或二個鼻孔中給藥。 本技藝之一般技術人士可察知在個別個體中所取得之 血漿藥物濃度將有所不同，這是由於許多影響，如：藥物 吸收、分佈、代謝及排泄之參數中的個體間變異性。因 此，自個體群取得之平均値通常係用於比較血漿藥物濃度 之數據及分析活體外劑量分析和活體內血漿藥物濃度間之 關係。

2.0.0本發明之通述 癲癇連續發作可描述爲其中在短期（通常爲數天）內 出現數次發作之發作樣式。此發作活性期後通常接續數週 至數月之較久的無發作期。根據流行病學之硏究，約50% 之癲癇患者經歷癲癇連續發作。群集可爲每半週或每半個 月(Tauboll，E.，et al·，“Temporal distribution of seizures in epilepsy, “ Epilepsy Res. 8(2)，pages 153- 1 65 (1 99 1 ); Bauer， J:， et al” “Course of chronic focal epilepsy resistant to anticonvulsant treatment，“ Seizure 10(4)， pages 239- 246 (2001) ) 〇 癲癇連續發作之較佳治療將具有快速作用及長作用 期。再者，該治療應爲相對非鎭靜性。另外，在發作期間 通常會危及自行投藥治療之能力且可能無法口服投藥。一 種在美國普遍使用之治療爲直腸二氮平凝膠（Dreifuss， F.E·，et al.，“A comparison of rectal diazepam gel and placebo for acute repetitive seizures,u N. Engl. J. Med. 200824693 3 3 8 (26)，pages，1 8 69- 1 875 ( 1 998))。非口 服之投藥途徑 的較佳處在於通常係由家庭成員、同居之人或其他旁人察 知急性重複發作開始。口服某些苯並二氮呼已用來治療癲 癇連續發作（如：給予5毫克至10毫克劑量之二氮平、1 毫克至2毫克劑量之洛侖西泮及0.5毫克至2毫克劑量之 氯硝西泮）。現已有關於一些用於口腔（如：美國專利案 第 6,699,849 號）、透皮（如：Mur a， P ·， et al ·， “Evaluation of Transcutol® as a clonazepam Transdermal Permeation Enhancer，“ Eur. J. Pharma. S ci. 9，pages 365-372 (2000))及黏膜投藥（如：美國專利案第 6,488,953 號）之苯並二氮呼調和物的描述。還有，關於用於鼻內投 藥之一些苯並二氮呼調和物之描述見於，如：Hou，H., et al.，ccEnhanced Permeation of Diazepam through Artificial Membranes from Supersaturated Solutions, “ J. Pharma.

Sciences 95(4)，pages 896- 905 (200 1); Schols- Hendriks, M . W . G ., e t a I. ? J . Clin. P h a r m a c . 39, pages 4 4 9 - 45 1 (1 995); U.S. Patent Nos. 6，1 93,985，6,61 0,27 1, 6,627,2 1 1; U.S. Published Patent Application No. 2004/0 1 763 5 9;

Published P.C.T. International Application Nos. WO 2004/1 1 0403 and WO 03/070208 )中；然而，在本發明之 前的鼻用調和物有許多缺點，例如：該調和物包含具相當 高鎭靜性質之苯並二氮呼，調和物係倚賴超飽和溶液，此 種溶液無法完善貯存且可能結晶化，投藥後之血清藥物濃 度太低而無法達到治療有效量、調和物包含在噴霧遞送時 -22- 200824693 出現困難之非均質系統，某些調和物不具可接受之耐受性 或刺激略圖，或其含有導致苯並二氮呼降解之成分。 某些治療法，例如：以口服洛侖西泮或二氮平治療常 引起嗜睡並延遲受治療對象恢復她/他正常活動的能力。 由於此文所描述之治療將很快作用且非鎭靜性，鼻內 氯硝西泮亦可被考慮用來治療其他需要快速開始作用且副 作用最少之病況。這些包括焦慮狀態（包括但不限於恐慌 發作、社交恐懼症、社交焦慮及操作焦慮）；急性狂躁 症；精神病；和藥物戒斷，包括但不限於：菸鹼戒斷、鴉 片戒斷和酒精戒斷。此治療法亦可用於無意識、半意識及 /或無法吞嚥之患者。 鼻內遞送苯並二氮呼之一些優點包括下列。鼻內投藥 爲方便、簡單、容易、非侵入性及接近無痛之方法。其既 不產生有生物危險性之廢物亦無針刺意外之風險。鼻內調 和物可遞送精確、計算過之劑量。再者，可，如：連續投 服較小之劑量，以取得所需之臨床結果，但產生較以錠劑 形式遞送之藥物爲少之副作用（如：腸方面）。其亦提供 健康照護工作者、患者及其照料者彈性。例如：單位劑量 可減少濫用之可能性。還有，鼻內投藥可避免苯並二氮呼 之首過代謝。 在詳細描述本發明前需了解本發明並不限於此文所描 述之特殊較佳體系，例如：特殊之苯並二氮呼（包括氯硝 西泮）、溶劑、共溶劑、親水性聚合物、界面活性劑（包 括離子性和非離子性界面活性劑）、多元醇、助溶劑、抗 -23- 200824693 氧化劑、滲透增強劑及/或緩衝劑，等，這類特殊項之用 途可由本技藝之一般技術人士鑑於本專利說明書之教示內 容來選擇。亦需了解，此文所使用之專有名詞僅用於描述 本發明之特殊較佳體系而不欲用於限制本發明。 2.1.0本發明之示範性調和物及其成分 2.1.1透黏膜調和物及使用方法 於一方面中，本發明包括用於透黏膜投藥於哺乳動物 之苯並二氮呼（如：氯硝西泮）的藥學組成物。實例1呈 現之數據爲初步之穩定性數據，其支持本發明，證明氯硝 西泮（其爲示範性之苯並二氮呼）滲透鼻黏膜之能力。此 實例描述氯硝西泮之飽和溶液在活體外滲透通過綿羊鼻黏 膜之作用。第1圖呈現在實例1之期間內每單位面積滲透 之氯硝西泮的平均累積量的圖式。氯硝西泮顯示出在用於 透黏膜投藥時具有可接受之穩定性及可接受之通過鼻黏膜 的滲透特徵。 測定氯硝西泮在許多純溶劑中之溶解度爲決定用於鼻 內投藥之本發明苯並二氮呼調和物的合適溶劑的一部分。 被鑑定爲好溶劑者可達到約1 〇至約20毫克/毫升之氯硝 西泮靶的溶解度。還有，評估氯硝西泮在二乙二醇單乙 醚、三醋酸精、四氫糠醇聚乙二醇醚與丙二醇之二元溶劑 混合物中的溶解度。例如：第2圖中所呈現之數據證明溶 解度和三醋酸精或丙二醇與四氫糠醇聚乙二醇醚之二元混 合物的百分比組成物間之線性關係。第2圖中所呈現之數 -24- 200824693 據證明包含二元溶劑混合物之溶劑溶液於溶解那些用於配 製鼻內藥學組成物之氯硝西泮中的用途。 實例2中所列出之溶劑系統提供系統中含最少數量之 溶劑成分的調和物實例（此可協助減少可能之交互作 用）。這些溶劑組合亦增加化學位能和系統熱動力學，協 助確保藥物（如：氯硝西泮）傾向離開溶劑系統，通過鼻 黏膜，而非被吞嚥下，尤其是當在鼻黏膜（即，黏液纖毛 清除）中與水混合時。實例2中所描述之溶劑系統亦提供 關於避開可能提供熱動力學吸收區之成分（如：聚乙二醇 聚合物及環糊精）的指導原則。 進一步檢查氯硝西泮在示範性溶劑中之穩定性（實例 3 )。數據顯示出包含聚乙二醇聚合物之調和物提供最差 之藥物（氯硝西泮）穩定性。再者，含有水而不含緩衝劑 之調和物亦顯示出發展出顏色，此表示氯硝西泮發生降 解。其他溶劑系統（例如，包括二乙二醇單乙醚、四氫糠 醇聚乙二醇醚、三醋酸甘油酯、丙二醇及緩衝之水溶液） 提供較佳之氯硝西泮溶解度。 實例3中呈現之數據亦表示在本發明之用於鼻內遞送 苯並二氮呼之調和物中加入抗氧化劑可提供這類調和物所 需之藥物保護利益。再者，數據指出當使用水性溶劑時， 藥物保護作用係來自包含pH修改劑。 爲了使苯並二氮呼（如：氯硝西泮）調和物可用於黏 膜投藥，該調和物應具有可接受之刺激性及耐受性略圖。 初步之鼻刺激性數據（實例4)及人類藥物動力學硏究之 -25- 200824693 鼻部不適報告（實例1 4 )表示本發明之氯硝西泮調和物適 合用於鼻內遞送。第3和第4圖中所示之數據顯示出在測 試動物中有輕微、暫時性之鼻部刺激。在大鼠中滴注組成 物後，刺激性通常持續少於約2分鐘。其刺激性通常較生 理食鹽水大，而類似於來自可忍受之醋酸濃度的刺激性。 從數據之獸醫學評估中可得到這些調和物對鼻部的刺激性 不顯著的結論。再者，實例4中所呈現之數據顯示出非離 子性界面活性劑可用於減少某些調和物之鼻部刺激性。 評估大量氯硝西泮調和物之藥物動力學Γ實例5， 見，如：表12A和12B )。實例中所呈現之藥物動力學數 據說明配製成用於鼻內投藥之氯硝西泮組成物可在很短之 時間內藥學上有效地遞送臨床上相關量之氯硝西泮進入血 流中_一-這使得這類鼻內調和物可用於，如：臨床治療癲 癇連續發作。不同調和物間之藥物動力學參數之數値將有 所不同，本技藝之一般技術人士依循本專利說明書之指導 原則可選擇適用於多種治療目的之調和物，例如：用於成 人中（通常需要較高之Cmax及AUC )、用於兒童中（相 對於用於成人之調和物，兒童可能需要較低之Cmax及 AUC)、不同劑型及系列投藥（如··從投服快速開始作用 之調和物（早Tmax )開始，接著第二次投服較慢開始作用 之調和物（晚Tmax)，等。 爲本發明提供證據而執行之實驗顯示出本發明之組成 物可包含由二種溶劑所組成之溶劑基質，例如：可令下列 化合物高度溶解於其中之第一種溶劑：氯硝西泮（例如： -26- 200824693 特可托®(二乙二醇單乙醚））和類似之單乙醚類，葛來 可富洛（Glycofurol)(乙氧基化糠醇或四氫糠醇聚乙二 醇醚）以及類似之乙氧基化四氫糠醇，其在施用至鼻腔黏 膜後可由鼻黏膜吸收而造成鼻腔中氯硝西泮超飽和，及第 二種溶劑（例如：三醋酸精及丙二醇，等），氯硝西泮在 此第二種溶劑中之溶解度較在第一種溶劑中爲低。 進一步詳細評估包含二元溶劑系統之四種氯硝西泮組 成物的藥物動力學和耐受性（實例5，表1 3 )。調和物之 鼻內PK略圖（第5圖）顯示出氯硝西泮被快速吸收，如 此，臨床上相關量之氯硝西泮可在短時間內到達血流。在 某些調和物中，較低之生物利用率可利用，例如：較高之 起始劑量彌補。較高劑量及低短期生物利用率之優點可能 爲未在鼻內吸收之藥物進入胃腸道的通道，這使得剩餘之 藥物可經由傳統之GI吸收而產生持續釋出之略圖。 還有，使用爲本發明提供證據而執行之實驗評估本發 明之四種氯硝西泮組成物在上及下呼吸道中之局部耐受 性。利用兔子模型評估耐受性（實例5)。第6圖中呈現 之數據摘要動物鼻腔之組織病理學結果。驗屍及組織病理 學檢查（包括嚴重性積分之比較）顯示出本發明之氯硝西 泮組成物具有於鼻黏膜組織投藥之藥學用途上的可接受的 耐受性。 在人體中之藥物動力學及耐受性被預期具有類似之滿 意程度且其顯示出在15位人類志願者中均令人滿意。實 例8、實例9及實例1 0中預測性地描述用來評估人體中之 -27- 200824693 藥物動力學及耐受性的實驗。實例1 4、實例1 5及實例1 6 中描述確實之實驗及其結果。 由於本發明調和物所欲的用途之一係供鼻內投藥，因 此，需評估本發明示範性調和物之噴霧性（包括羽煙幾何 學、噴霧角度及羽煙對稱性）及黏性（實例6、第7圖、 第8圖及第9圖）。結果證明在20-2 5 °C下，所有測試之 溶劑基質均可從手控開動之單位劑量裝置（如：自 Pfeiffer 取得，由 Pfeiffer of America，Princeton，N.J.製 造）中適當地噴出。結果亦顯示出本發明調和物之黏性爲 良好之噴霧性預測子，該調和物在4 0 °C以下及-1 5 °C和 3 〇 °C之間保有其噴霧性。 鑑於此文所討論之實驗發現，本發明之用於透黏膜投 藥於哺乳動物之苯並二氮呼（如：氯硝西泮）組成物可， 例如，包含一種溶劑系統及治療有效量之苯並二氮呼 (如：氯硝西泮）。於一較佳體系中，該溶劑系統包含可 令苯並二氮呼（如··氯硝西泮）溶解於其中之第一種溶劑 (此溶劑可滲透入鼻腔黏膜組織）及第二種溶劑，苯並二 氮呼（如：氯硝西泮）在此第二種溶劑中之溶解度較在第 一種溶劑中爲低。該溶劑系統可包含約4 0 %或更少，約 30%或更少，宜爲約20%或更少，更宜爲約1〇%或更少， 約 8%或更少，約 5%或更少，或約2%或更少之水性溶 劑。該水性溶劑宜爲緩衝之水性溶液，例如··具有介於約 pH4至約PH7，更宜爲介於約pH4至ΡΗ5·5之pH値的水 性緩衝溶液。於較佳體系中，該溶劑系統不包含游離之聚 -28- 200824693 乙二醇聚合物。較佳之組成物爲單相且均質。 於一較佳體系中，該溶劑系統大體上不含水性緩衝 劑。 於第二種較佳體系中，該溶劑系統包含單一之烷基醚 溶劑。這類溶劑可選自下列：1，2-二甲氧基乙烷、二（乙 二醇）甲醚、二乙二醇單乙醚及二（乙二醇）二乙醚。於 一特殊之較佳體系中，該單一之烷基醚溶劑爲二乙二醇單 乙醚。 該溶劑系統之第一種二元溶劑之實例包括但不限於： 二乙二醇單乙醚或四氫糠醇聚乙二醇醚。該第一種溶劑之 存在量可爲，如：介於約30%至約70%之間。該溶劑系統 之第二種溶劑的實例包括但不限於：三醋酸甘油酯或丙二 醇。該第二種溶劑之存在量可爲，如：介於約70%和約 3 0%之間。於某些較佳體系中，該第二種溶劑滲透通過鼻 黏膜之能力較該第一種溶劑爲差。 該溶劑系統可，如：大體上由第一種溶劑和第二種溶 劑所組成。於另一較佳體系中，該溶劑系統可大體上由第 一種溶劑、第二種溶劑和水性緩衝溶液（如：1 〇% (重量/ 重量）或更少）所組成且可進一步包含額外之成分（如： 抗氧化劑）。 該活性藥物（如：氯硝西泮）之存在量典型上係介於 約0.1%至約20%之間且通常係介於約0.1%和10%之間 (通常爲0.25%至6%)。 於一較佳體系中，該第一種溶劑和第二種溶劑係以相 -29- 200824693 等之重量百分比存在。 除了前文描述之成分外，本發明之用於鼻內投藥於哺 乳動物之包含苯並二氮呼（如··氯硝西泮）的藥學組成物 可進一步包含一或多種成分，包括但不限於：界面活性 劑、抗氧化劑、藥學上可接受之聚合物、多元醇、脂質、 黏膜滲透增強劑、著色劑、調味劑或嗅覺劑、麻醉劑、共 溶劑及調整滲透壓之作用劑。 於本發明之較佳體系中，苯並二氮呼（如：氯硝西 泮）之藥學組成物係配製成可在，例如：-1 5 °C及3 0 °C之 溫度間自手控開動之噴霧裝置中噴出。 於第二種觀點中，本發明包括用於鼻內投藥於哺乳動 物（例如：人類）氯硝西泮之藥學組成物。於此方面中， 該溶劑系統可包含單一之烷基醚溶劑或第一種溶劑（其包 含一或多種選自下列之成分：二乙二醇單乙醚及四氫糠醇 聚乙二醇醚）及第二種溶劑（其包含一或多種選自下列之 成分··三醋酸甘油酯或丙二醇）。該溶劑系統可進一步包 含水性緩衝溶液（如·· 1 〇% (重量/重量）或更少，其中該 水性緩衝溶液之pH値係介於約pH4至約PH7之間，更宜 爲介於約PH4至ΡΗ6·5之間）。於較佳體系中，需注意該 溶劑系統不包含游離之聚乙二醇聚合物。本發明之用於透 黏膜投服氯硝西泮之藥學組成物亦包含治療有效量之氯硝 西泮。通常，該組成物爲單相且均質。 於一較佳體系中，該溶劑系統爲二元溶劑系統，亦 即，一種大體上由二種溶劑所組成之溶劑系統。這類二元 -30- 200824693 系統可，如：大體上不含水性成分。於本發明之某些較佳 體系中，該第一種溶劑大體上係由二乙二醇單乙醚或四氫 糠醇聚乙二醇醚所組成。該第一種溶劑之存在量可爲， 如：介於約30%和約70%之間。於某些較佳體系中，該第 二種溶劑大體上係由三醋酸甘油酯或丙二醇所組成。該第 二種溶劑之存在量可爲，如：介於約70%和約30%之間。 於另一較佳體系中，該藥學組成物可包含單一之烷基醚溶 劑（諸如二乙二醇單乙醚）。該氯硝西泮之存在量通常係 介於約0.1重量°/。至約20重量％之間，更宜爲介於約0.1 重量％和10重量％之間，更宜爲介於約0.25重量％至約6 重量％之間。於另一較佳體系中，該溶劑系統大體上係由 第一種溶劑和第二種溶劑所組成。於另一較佳體系中，該 溶劑系統大體上由第一種溶劑、第二種溶劑和水性緩衝溶 劑（如：10% (重量/重量）或更少）所組成。該水性緩衝 劑可進一步包含一或多種額外之成分，如：抗氧化劑及/ 或界面活性劑。 於本發明此方面之某些較佳體系中，該第一種和第二 種溶劑係以相等之重量百分比存在。 本發明之用於鼻內投藥於哺乳動物氯硝西泮之藥學組 成物可包含其他成分，如，少於約10% (重量/重量）之 一或多種成分，包括但不限於：界面活性劑、抗氧化劑、 藥學上可接受之聚合物、多元醇、脂質、黏膜滲透增強 劑、著色劑、調味劑、麻醉劑、共溶劑及調整滲透壓之作 用劑。 -31 - 200824693 合適之藥學上可接受之聚合物之實例包括但不限於： 羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、聚乙 烯基吡咯啶酮、羧甲基纖維素、聚乙烯醇、藻酸鈉、黃原 膠、西黃蓍膠、果阿膠、金合歡膠、阿拉伯膠、聚丙烯 酸、甲基丙烯酸甲酯共聚物、羧乙烯基共聚物及其組合。 可用於執行本發明之界面活性劑通常爲（但非絕對） 非離子性。合適之界面活性劑包括但不限於··吐温 (TWEEN )(即，聚氧化乙烯山梨醇酐脂肪酸酯）、α-氫-ω-羥基聚（氧乙烯）聚（氧丙烯）聚（氧乙烯）成塊 共聚物、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯篦麻油衍生物及其組 合。 合適之多元醇的實例包括但不限於：甘油醇、丙二 醇、帶脂肪酸之甘油醇單酯類及其組合。於較佳體系中， 本發明之組成物不包含游離之聚乙二醇聚合物。 合適之助溶劑的實例包括，但不限於脂質（如：脂 肪、油類、鱲、固醇、三酸甘油酯及其組合）。 本發明之組成物可進一步包含黏膜滲透增強劑。黏膜 滲透增強劑之實例包括但不限於：Ν-甲基-2-吡略啶酮、2-吡咯啶酮、丙二醇、二甲基甲醯胺、二甲亞颯、己內醯 胺、油酸、癸取甲基亞颯、1-十二烷基氮雜環庚-2-酮、肉 豆蔻酸異丙酯、六伸甲基棕櫚醯胺、六伸甲基月桂醯胺、 脂肪酸類、酯類及其組合。 抗氧化劑通常提供組成物整體增強之穩定性及/或特 別有助於活性劑（如：氯硝西泮）之穩定性。於本發明之 -32- 200824693 . 某些較佳體系中，加入抗氧化劑可保護氯硝西泮免: 損害。因此，本發明之組成物可進一步包含抗^ (如：乙二胺四醋酸、乙二胺四醋酸鈉、丁羥基甲 食子酸丙酯、偏二亞硫酸鈉、丁羥基茴香醚、生育 組合），尤其是該抗氧化劑可爲濃度1 00-300 ppm 爲 500-2 000 ppm)之丁羥基甲苯（BHT)。 再者，可在本發明組成物中加入一或多種額外 _ 本技藝之一般技術人士鑑於本專利說明書之教示內 ~ 知這類額外成分。這類其他成分包括但不限於：著 香料及麻醉劑。 於較佳體系中，本發明之氯硝西泮組成物係配 例如：可利用手控或電動開動之噴霧裝置或由患者 動作開動之被動裝置中噴出。在欲遞送至哺乳動物 噴霧組成物方面，該組成物可以介於約5 0微升和 升之間（通常係介於約25微升和150微升之間， Φ 約100微升）之單位治療劑量使用。 本發明組成物中之氯硝西泮的治療有效量可爲 每單位劑量介於約0.1毫克和5.0毫克之間，更宜 位劑量介於約1.0毫克和約4.0毫克之間。 實例7，表20中呈現一些本發明之氯硝西泮組 示範性調和物。實例中亦描述製造組成物之方法。 本發明之第三種觀點係關於用於透黏膜投藥於 物之包含氯硝西泮的藥學組成物，其中該組成物之 單次鼻內投藥後的氯硝西泮Tmax及氯硝西泮生物利 於氧化 氧化劑 苯、沒 醇及其 (更常 成分。 容可察 色劑、 製成， 之吸入 鼻腔之 3 00微 更宜爲 ，如： 爲每單 成物的 哺乳動 特徵爲 用率。 -33- 200824693 於一較佳體系中，該組成物之特徵爲（i )氯硝西泮之 Tmax，在單次鼻內投藥後，不超過2小時，及（Π)氯硝 西泮之生物利用率，在單次鼻內投藥後，不低於經口遞送 之同等劑量氯硝西泮之生物利用率的30%。於其他較佳體 系中，該Tmax係少於或等於3 0分鐘且該生物利用率係高 於或等於經口遞送之氯硝西泮之生物利用率的5 5 %。本發 明之某些較佳體系之示範性Tmax和生物利用率數據呈現於 此文下列實例5，表12A和12B，及第5圖和實例14中， Tmax可少於或等於2小時，或少於或等於1小時，或少於 或等於3 0分鐘，或少於1 5分鐘。 本發明之第四種觀點係關於用於透黏膜投藥於哺乳動 物之包含氯硝西泮的藥學組成物，其中該組成物之特徵爲 在單次鼻內投藥後，氯硝西泮之Cmax及氯硝西泮之生物 利用率。於一較佳體系中，該組成物之特徵爲（i )氯硝 西泮之Cmax，在單次鼻內投藥後，至少爲經口遞送之同等 劑量氯硝西泮之Cmax的75%，及（ii )氯硝西泮之生物利 用率，在單次鼻內投藥後，不低於經口遞送之同等劑量氯 硝西泮之生物利用率的3 0%。本發明之某些較佳體系之示 範性Cmax和生物利用率數據呈現於此文下列實例5，表 12A和12B，及第5圖中。於其他較佳體系中，鼻內遞送 之氯硝西泮之Cmax係高於或等於經口遞送之氯硝西泮之 Cmax的75%，或高於或等於80%，或可高於或等於90%。 於其他較佳體系中，該生物利用率係高於或等於經口遞送 之氯硝西泮之生物利用率的30%，或高於或等於40%，或 -34- 200824693 高於經口遞送之氯硝西泮之55%。 本發明之第五種觀點係關於用於鼻內投藥於哺乳動物 之包含氯硝西泮的藥學組成物，其中該組成物之特徵爲單 次鼻內投藥後 24小時所計算出之氯硝西泮的 AUC (AUCin )對經口遞送之氯硝西泮之AUC ( AUC。^ )的比 例。於一較佳體系中，該組成物之特徵爲（i )在單次鼻 內投藥後，氯硝西泮之AUC ( AUCin)對經口遞送之同等 劑量氯硝西泮之AUC ( AUCQral )的比例爲至少約人11(：^: AUCoral =1 : 3.3，其中該 ACU値係在相同期間內測定 (如：在人類個體中爲24小時）。本發明之某些較佳體 系之示範性AUC數據呈現於此文下列實例5，表12A和 12B，及第5圖和實例14中。AUCin : AUCcral可爲1 : 3 _ 3，或通常爲1 : 2 · 5或1 : 1 · 8。 除了用於透黏膜投藥於哺乳動物之包含氯硝西泮的藥 學組成物外，本發明進一步包括用於將活性劑（如：氯硝 西泮）投藥於需要彼之哺乳動物的方法。於該方法中氯硝 西泮係藉由通過哺乳動物之鼻腔黏膜再進入血流中來遞送 至哺乳動物之血流中。該氯硝西泮可利用此文所描述之劑 型透黏膜遞送。氯硝西泮可投至哺乳動物以治療多種不同 之病況，包括但不限於：憂鬱症、恐慌症（包括急性恐慌 發作）、肌肉痙攣、失眠及癲癇發作（包括癲癇連續發 作）。本發明之氯硝西泮組成物可自行投服或由第二方人 馬給藥，例如：健康照護從業人員、家屬或重要他人。 於一較佳體系中，本發明之組成物係，如：經由哺乳 -35- 200824693 動物鼻黏膜將氯硝西泮遞送至哺乳動物血流中來治療罹患 癲癇連續發作之哺乳動物，其中氯硝西泮係以本發明之鼻 內劑型遞送。本發明組成物可，如：在發作症狀開始時投 藥。可將一或多個單位劑量投給哺乳動物。於較佳之體系 中，該哺乳動物爲人類。 本發明亦包括製造用於鼻內遞送氯硝西泮之氯硝西泮 組成物之方法。本文下述實例7中描述一種製造本發明之 示範性組成物的一般方法。該方法通常包含將溶劑系統與 氯硝西泮在條件下混合，以提供適合鼻內投服氯硝西泮之 單相且均質的溶液。該氯硝西泮可先溶解在具較高溶解度 之溶劑（如：第一種溶劑）中。一邊攪拌一邊加入第二種 溶劑。混合本發明之溶液組成物時可在能減少氯硝西泮暴 露在氧化情況之條件下進行，例如：在氮氣或減少氧氣之 環境下混合。 製備本發明之溶液組成物後，將溶液分配在一或多個 容器中（如：單位劑量容器或複數劑量容器）。該容器可 爲手控開動之噴霧裝置或爲一種噴霧裝置，其中係將內容 物維持在壓力下並藉由壓下促動器來將其釋出’或爲一種 由患者之吸入動作開動之裝置。 由這些用於鼻內遞送之噴霧裝置遞送之典型的單位劑 量係介於約50微升至約300微升之間’通常爲25微升至 約150微升，宜爲約100微升之體積，但某些裝置可遞送 至多約5毫升。自噴霧裝置遞送出時，組成物的噴霧樣式 及煙羽幾何學係適合用於鼻內遞送給哺乳動物（如：人 -36- 200824693 類）。與執行本發明相關之溶劑基質的噴霧力和黏性 之參數記述於實例6中。 2.1.2製造及包裝 本發明之配製成用於鼻內投服的氯硝西泮組成物 備方法可鑑於本技藝之一般技術人士所知之教示內容 照本專利說明書之教示內容執行。例如：根據本發明 硝西泮組成物大致上可依下述製備。選擇可令所選定 並二氮呼溶解於其中之溶劑，例如：氯硝西泮在二乙 單乙醚及/或四氫糠醇聚乙二醇醚中很容易溶解。一 拌一邊加入所需量之氯硝西泮，以取得大體上單相、 上均質之溶液。然後，可將第二種溶劑（例如：三醋 及/或丙二醇及/或水性緩衝溶液）加入該包含第一種 及氯硝西泮之溶液中。攪拌混合物以取得大體上單相 體上均質之溶液。通常，先將額外之成分溶解在其可 最高溶解度之溶劑中。

另一實例爲將需要量之氯硝西泮溶解在溶劑（如 乙二醇單乙醚及/或四氫糠醇聚乙二醇醚）中並攪拌 以取得大體上單相、大體上均質之溶液。第二種溶劑 如··水性緩衝溶液）可與額外之成分一起製備。這類 之成分可包括但不限於··抗氧化劑（如··偏二亞硫酸 及/或界面活性劑（如：吐溫）。該緩衝劑（或緩 統）應可將調和物之pH値維持在靶的範圍內。加入 緩衝劑後可能需要加入第二種作用劑進一步調整pH 有關 的製 ，依 ，氯 之苯 二醇 邊攪 大體 酸精 溶劑 、大 具有

之， (例 額外 鈉） 衝系 一些 値， -37- 200824693 以將調和物之pH値維持在靶的範圍內。鑑於事實，本發 明之組成物係針對藥學用途，該緩衝劑或系統大體上不應 刺激塗抹該組成物之黏膜組織。緩衝劑包括有機和非有機 緩衝劑。示範之緩衝劑包括但不限於：磷酸鹽緩衝溶液、 碳酸鹽緩衝劑、檸檬酸鹽緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑、醋酸鹽 緩衝劑、氫氧化鈉、氫氯酸、乳酸、酒石酸、二乙胺、三 乙胺、二異丙胺及胺基甲胺。最後，所使用之緩衝劑之濃 度係用來取得所需之靶的pH範圍的濃度；因此，緩衝劑 之重量百分比可由本技藝之一般技術人士鑑於本專利說明 書之教示內容決定而有所不同。 攪拌水性緩衝溶液（可能包含其他成分）以取得大體 上單相、大體上均質之溶液。可將水性溶液脫氣；但通常 脫氣並非必要。然後，將水性緩衝溶液慢慢加入可令氯硝 西泮溶解於其中之第一種溶劑中，以取得大體上單相、大 體上均質之溶液。 另一實例爲將氯硝西泮溶解於第一種溶劑（例如··二 乙二醇單乙醚及/或四氫糠醇聚乙二醇醚）中。可加入第 二種溶劑（例如：三醋酸精及/或丙二醇）並可再接著加 入，如：水性緩衝溶液，加上或不加上額外成分。 在正常條件或稍微真空及/或氮氣之覆蓋下進行混 合。 本發明之製備方法可進一步包括將本發明組成物分配 在合適之容器中。本發明組成物可包裝在，如：單位劑量 容器或複數劑量谷器中。通常，該容器界定一包含該組成 -38- 200824693 物之內表面。可使用任何合適容器。容器之內表面可進一 步包含襯裡或經過處理以保護容器表面及/或保護組成物 不受組成物與容器之內表面接觸所可能產生之不良作用的 影響。通常，襯裡或塗覆物質對組成物及組成物之個別成 分而言大體上爲不可滲透的。 本技藝已知且市面上可購得多種類型之合適容器，例 如：由 Pfeiffer of America，Princeton，N.J.(如美國專利 第 5,584,41 7，6,705,493，6,446,839，6,478，196 號），和 Valois of Americalnc.，Greenwich, CN (如，美國專利第 5,328,099, 6,742,677, 7,080,759 號）所製造者。 用於本發明組成物之容器/遞送系統可包括提供，例 如：固定或可變動之計量劑量施放的單位劑量容器或複數 劑量容器。複數劑量容器包括但不限於：計算好劑量之霧 狀滴、貯能之計算好劑量之唧筒或手控之計算好劑量之唧 筒。於較佳體系中係使用容器/遞送系統來遞送計算好劑 量之施放在個體鼻腔中的本發明組成物。計算好劑量之容 器可包含，例如：正確控制施放劑量之量及/或均勻性之 促動器噴嘴。該遞送系統可藉，如：啷筒包裝或使用推進 劑（如：烴、氫氟烴、氮、一氧化二氮或二氧化碳）推 進。可使用諸如由 Kurve®科技販售之稱爲 ViaNaseTM霧 化器的裝置，其可用於電子給藥並使鼻腔飽和。再者，諸 如由OptiNose (挪威奧斯陸）所販售之被動裝置之類的裝 置可由患者之吸入動作啓動。於本發明之較佳體系中，該 容器爲單次使用、單位劑量、手控啓動之噴霧裝置。 -39- 200824693 實例6描述評估本發明氯硝西泮調和物之噴霧力及黏 性的方法。爲本發明提供證據所進行之實驗的結果顯示出 此文所描述之氯硝西泮調和物適合用於鼻內遞送。 鼻組織包含單一表皮層且具有適合吸收經由鼻內途徑 遞送之藥物的限定面積。成人中之鼻組織面積通常爲約20 平方公分。鼻內遞送之每單位劑量組成物的體積通常係限 定爲每一鼻孔介於約25微升和約150微升之間，若遞送 至二個鼻孔則一單位劑量可爲50微升至3 00微升。約100 微升之單位劑量可適用於許多施藥中，此種劑量可遞送5 0 微升至每一鼻孔中或遞送100微升至一鼻孔中。用於鼻內 遞送之較佳液滴大小的分佈典型上係在約1 0微米至約5 0 微米之範圍內，但亦可有所變化，只要能通過鼻腔有效吸 收足量之活性藥物。 於較佳體系中係使用具良好屏障性質之無空氣包裝來 防止氯硝西泮氧化，例如：無空氣之單一劑量的手控啓動 噴霧裝置。自這類啷筒中正確給藥可確保劑量之可複製 2.1.3其他劑型 於本發明之另一方面中係利用乾燥粉末調和物將苯並 二氮呼經由鼻內途徑遞送至黏膜組織。這類乾燥粉末調和 物可包含選定之苯並二氮呼（如：氯硝西泮）的微粒化顆 粒。 鼻內遞送苯並二氮呼可，如：依此文之描述，將選定 -40- 200824693 之苯並二氮呼溶解在合適之溶劑系統中，再使用欲用於液 態形式之鼻內噴霧裝置來完成。用於這類應用之液態形式 的實例包括但不限於：乳劑、懸浮液或真正之溶液。由於 苯並二氮呼具高親脂性質，通常係使用界面活性劑、強助 溶劑及載體溶液之組合。這類液態形式之替換型爲可以乾 燥粉末或摻和物之形式經由鼻內途徑遞送之苯並二氮呼 (二氮平、洛侖西泮、咪唑達侖、氯硝西泮，等）之乾燥 粉末調和物。 由於苯並二氮呼顆粒之內生性滲透性質，鼻內遞送苯 並二氮呼顆粒可能產生可接受之苯並二氮呼遞送略圖。苯 並二氮呼傾向高度親脂性，因此可吸附在黏膜組織上並由 其吸收。大小在約5微米至約20微米範圍內之顆粒可使 用乾燥粉末之分配裝置以遞送足量之選定的苯並二氮呼， 以在短時間內產生藥理學作用。製備具合適之大小分佈之 苯並二氮呼乾燥粉末（如：微粒化粉末）的方法包括但不 限於：抗-溶劑沈澱法、流體床乾燥粉法、噴霧乾燥法、 尺寸分類法及其組合。 苯並二氮呼（如：氯硝西泮）乾燥粉末亦可與用於鼻 內投藥之合適載體摻和，以改良濕潤、黏膜黏附及滲透性 (這類載體之實例見，如：歐洲專利申請案第EP 1587514A1， EP 1652518A1，EP 0324725B1 號）。於此方面中，苯並二 氮呼可配製在有秩序之混合物中，其中該核心爲一種惰性 載體（諸如糖），而其表面爲黏膜黏附劑與藥物之組合。 此乾燥粉末藥物遞送方法之優點包括優越之穩定性及 -41 - 200824693 可能較長之鼻內停駐時間，此點可改良藥物之攝入。可使 用合適之乾燥粉末鼻內遞送系統。 本發明之乾燥粉末調和物可使用小於約15-20微米之 氯硝西泮微粒，更宜使用介於約5和約1 0微米之間的微 粒。氯硝西泮之微粒可與如上述之載體顆粒組合。較佳 地，在載體顆粒中加入黏膜黏附促進劑。該黏膜黏附促進 劑可有效使氯硝西泮黏附在鼻黏膜上。黏膜黏附促進劑通 常係存於載體顆粒之表面上，但亦可存在顆粒內。 於一較佳體系中，該載體顆粒含有約0.1重量％至約 3 0重量％ (以該乾燥組成物之總重量百分比組成計）之黏 膜黏附劑，以包含介於約1重量％至約20重量％之間的黏 膜黏附劑較佳。較佳之黏膜黏附劑通常爲聚合物質，宜具 有大於5,0 00之平均分子量（重量平均値）。黏膜黏附劑 之水合作用亦使其可作爲根據本發明之吸附增強劑。 載體顆粒大小通常係在約50微米至約800微米間， 宜在約50微米至約500微米間。示範之載體顆粒物質包 括但不限於：碳水化合物（諸如糖、甘露醇及乳糖）或藥 學上可接受之無機鹽類（諸如氯化鈉或磷酸鈣）或其混合 物。 本發明之乾燥粉末組成物可包括藥學上可接受之界面 活性劑（諸如上述者）。組成物中之界面活性劑增加之濕 潤效果可增強載體顆粒之水合作用。此增強之水合作用可 造成黏膜黏附作用較快開始。該界面活性劑通常爲精細分 散之形式並與氯硝西泮充分混合。該界面活性劑之量可 -42- 200824693 爲’如：乾燥組成物之約0.5重量％至約5重量％，宜爲約 0.5重量％至約3重量％。 多種本技藝已知之聚合物可作爲黏膜黏附劑，其實例 包含在上列之藥學上可接受之聚合物的列表中。黏膜黏附 性聚合物通常爲親水性、可分散於水中或親水性且可分散 於水中。聚合物在水中膨脹之能力有時是有需要的。物質 之黏膜黏附性可在活體外測定，例如：依S a 1 a，G ·，e t a 1 ·， Proceed· Int. Symp· Contr. Release. Bioact. Mat. 16: 420 (1 989)中之描述。 用於鼻內遞送微細、粉末狀組成物之裝置爲本技藝所 已知（例如：美國專利第 6,948,492，6,824,080，6,752,147, 6,715,485， 6,488,648，5,901，703，4,227,522，4，192,309, 4，1 05,027號）且可用於遞送本發明之包含氯硝西泮的粉 末狀組成物。 這些劑型可用於類似於上述者之使用/治療方法中。 下文中參考作爲示範性苯並二氮呼之氯硝西泮來描述 這些觀點。這些實例並不欲作爲限制。本技藝之一般技術 人士檢閱本專利說明書之教示內容及此文所描述之本發明 的較佳體系後可清楚明白本發明之其他目的。 【實施方式】 本技藝之技術熟習人士清楚明白可在不悖離本發明之 精神和本發明之範圍下製作上述較佳體系之不同修改體和 變體。這類修改體和變體係在本發明之範圍內。上述之本 -43- 200824693 發明觀點將參考作爲示範性苯並二氮呼之氯硝西泮而描述 於下文中。 下列實例係提供本技藝之一般技術人士如何製造及使 用本發明之裝置、方法及配方的完整揭示內容和說明，其 並不欲用來限制發明者對本發明觀點之範圍。本發明者盡 力求取所使用之數字（如：量、溫度，等）之準確性，但 仍應計入一些實驗錯誤及偏差。除非另外指出，所使用之 份數爲重量份數，分子量爲重量平均分子量，溫度係以攝 氏溫度計而壓力爲大氣壓或接近大氣壓。 根據本發明製造之組成物可符合對於藥學產品之內容 及純度要求的嚴格規格。 材料及方法 A.藥物及試劑：下列實例中所使用之藥物及試劑可 自商業來源取得，例如，可依下述取得：活性藥物，如： 經口遞送之氯硝西泮（來自 Lake Chemicals，India，or F.I.S. -Fab brie a Italiana Sintetici SpA? Vicenza, Italy)， 該錠劑爲 Rivotril®2毫克有截痕錠劑之一半（Hoffman-La Roche，紐澤西）；滲透增強劑及溶劑（如：二乙二醇 單乙醚，亦稱爲特可托®，來自 GattefossS Corporation， Paramus，NJ );抗氧化劑（如··丁羥基甲苯（ΒΗΤ ) 、丁 經基茴香醚（BHA)、偏二亞硫酸鈉，來自Sigma-Aldrich Corporation，St· Louis, MO);藥學上可接受之聚 合物（如：羥丙基纖維素，來自 Hercules， Inc.， -44- 200824693

Wilmington, DE );賦形劑、助溶劑及溶劑，例如：來自 紐澤西州 Phillipsburg，Mallinckrodt Baker 公司之三精 (亦稱爲三醋酸甘油酯或1，2,3-丙三醇，三醋酸酯）；丙 二醇，來自挪威 Apotekproduksjon ; GLYCOFUROLTM (亦 稱爲乙氧基化呋喃醇或四氫糠醇聚乙二醇醚，來自義大利 Agrar );及標準藥物和化學試劑（例如：著色劑、溶劑 及界面活性劑，來自Sigma_ Aldrich公司，密蘇里州聖路 易市，英國費雪科技和德國默克公司：例如，丙二醇， PEG200 (紐澤西州 Bridgewater，ICI Americas Inc.)及吐 溫®20，來自德國默克；檸檬酸，來自德國 Riedel-de-Haen;三醋酸精，來自美國 Abitec ;及水（WFI)，來自 挪威Fresenius Kabi )。分析試劑亦可自多種商業來源取 得，如：檸檬酸（來自英國，Acros Organics ):氫氯 酸、乙腈（HPLC級）、甲醇（HPLC級）、正磷酸、氯化 鉀、酞酸氫鉀、正磷酸二氫鉀、乙醇（來自英國費雪科學 (Fisher Scientific )):及磷酸氫二鈉二水合物、磷酸二 氫鈉（來自德國默克）。 B . HPLC分析方法：用於偵測氯硝西泮之HPLC系統 如下：華特（Waters) 2487雙λ吸收偵測器（ 2487 Dual λ Absorbance Detector)、華特 600 控制器，華特 717 +自 動採樣器（Waters plus Autosampler)、華特 Millennium 色層分析圖管理軟體（Waters Millennium Chromatograph Manager Software)( 華特公司，麻州 Milford);管 柱，Chromolith Performance RP-18e 100x4.6 毫米及 Guard -45- 200824693 管柱，Chromolith Guard 匣 RP -1 8 e 5x4 · 6 毫米（德國法 蘭克福，默克 KgaA );偵測，；l =220nm ;樣本溫度， 20i：2°C ;管柱溫度，周圍溫度；流速，2.0毫升/分鐘；流 動相，等強度，流動相，在去離子水中之KH2P〇4 3 5mM (ρΗ2·1，以正磷酸調整）；乙腈-70 : 30 ;注射體積， 1〇〇微升；操作時間，10-20分鐘；及針清洗液90 : 10 (甲醇：水）。 根據方程式1及2計算偵測（LOD )及定量（LOQ ) 限制： LOD =(3.3*STEYX)/S (方程式 1) LOQ =(10*STEYX)/S (方程式 2) 其中，STEYX =自各別校正曲線取得之迴歸線之y-截距的 標準差且S =校正曲線之梯度。 藥物標準溶液之初步穩定性硏究係在含1 0%乙醇之磷 酸鹽緩衝之生理食鹽水（PBS )。同時亦檢查在不同之緩 衝劑的pH値（pH2至8 )中之藥物的穩定性。由於氯硝 西泮在水中之溶解度很差，在各緩衝系統中加入1 0%乙醇 以協助溶解。在37°C及2-8 °C下測定72小時內藥物在各緩 衝系統中之穩定性。 依下述製備緩衝液。表1中摘要pH2至4之緩衝劑的 製備方法。 -46- 200824693 表1 ρΗ2至4緩衝 丨劑之組成物 緩衝劑pH 氯化鉀 (毫升） 酞酸氫鉀 mm 氫氯酸1M mm 去離子水 («升） 記錄之確 實pH 2 50 0 7.8 142.2 2.11 3 0 50 15.7 134.3 3.17 4 0 50 0.1 149.9 3.98 將14·9克固體加入1升容量瓶中並以去離子水加至 ® 足量體積來製備氯化鉀溶液。將40 · S克固體加入1升容 量瓶中並以去離子水加至足量體積來製備酞酸氫鉀溶液。 表2中摘要ΡΗ5至7緩衝劑之製備方法。 表2 緩衝劑ρΗ5至7之組成物 緩衝劑pH 檸檬酸 (毫升） 磷酸二氫鈉 (毫升） 去離子水 (毫升） 記錄之確實pH 5 24.3 25.7 50 5.2 6 16.9 33.1 50 6.09 7 6.5 43.6 49.9 6.98

將2 1 · 0 1克固體加入1升容量瓶中並以去離子水加至 足量體積來製備檸檬酸溶液。將13.8克固體加入1升容 量瓶中並以去離子水加至足量體積來製備磷酸二氫鈉溶 液。 表3中摘要ΡΗ8緩衝劑之製備方法。 -47- 200824693 表3 緩衝劑pH8之組成物 緩衝劑pH 磷酸二氫鈉 (毫升） 磷酸氫二鈉 (毫升） 去離子水 (毫升） 記錄之確實pH 8 94.7 5.3 100 8.13 將3 5 · 6克固體加入丨升容量瓶中並以去離子水加至 足量體積來製備磷酸氫二鈉溶液。將13.8克固體加入1 升容量瓶中並以去離子水加至足量體積來製備磷酸二氫鈉 溶液。 利用方程式3計算回收藥物之百分比·· %回收藥物=(t = X時之藥物濃度/t =0時之藥物濃度）x 1〇〇 (方程式3) 其中，X =特定時間點和溫度 在穩定性硏究之後形成一合適之接受器流體，以確保 測試藥物之吸收區情況，如此，可藉由藥物在接受器流體 中之溶解度來限制藥物釋出。在3溶劑/共溶劑系統 (艮[]，pH6緩衝劑，10%乙醇在pH6緩衝劑中及20%乙醇 在PH6緩衝劑中）中取得藥物之飽和溶解度（在37°C 下）。簡單地說，將過量藥物加入不同之接受器流體系統 中並在3 7 °C下，以小磁棒攪拌2小時，以讓藥物在不同之 接受器流體系統中達到飽和。然後，利用0.2微米注射筒 過濾器過濾各飽和溶液並經由HpLC分析所產生之溶液。 -48- 200824693 C.玻管內滲透方法學：以標準方法進行玻管內滲透 作用（如：Franz，T.J.，“Percutaneous absorption: on the relevance of in vitro data，“ J. Invest Dermatol 64 : 1 90- 1 9 5 (1 9 75); Franz，T.J·，“The finite dose technique as a valid in vitro model for the study of percutaneous absorption in man，“ 在 ： Skin: Drug Application and Evaluation of Environmental Hazards，Curent Problems in Dermatology，v o 1. 7，G. Simon，Z. Paster，M Klingberg, M. Kaye (Eds)，Basel，Switzerland, S · Karger，pages 58- 68 (1978))。 使用新鮮切出之綿羊鼻黏膜並依照標準議定計劃製 備。以去離子水輕洗，以清潔切出之綿羊鼻黏膜，直接使 用此新鮮樣本或將其平置在濾紙上並冷凍貯存之，直到使 用時。 (i )藥物回收、降解及對綿羊鼻黏膜之結合作用： 測定藥物回收、降解之效果及對綿羊鼻黏膜之結合作用。 簡單地說，將已知表面積（約1平方公分）之綿羊鼻黏膜 加入含有已知濃度微克/毫升）之各藥物（在接受器 流體（1 0%乙醇在PH6緩衝劑中）中製備）的小玻璃瓶 中。在4 8小時內讓小玻璃瓶中之內含物在3 7 °C下達到平 衡。每隔24小時移出樣本並藉HPLC進行分析。利用方 程式4計算回收藥物之百分比： -49- 200824693 %回收藥物=(t = Y時之藥物濃度/t = z時之藥物濃度）χ 100 (方程式4) 其中，Y =37°c時之特定時間點（存有綿羊鼻黏膜）；Z = 37°C時之特定時間點（無綿羊鼻黏膜存在）° (Π)給藥及收集樣本…-Franz細胞之硏究：使用平 均表面積及體積分別約〇、6平方公分及2毫升之經個別校 準之Franz細胞來決定藥物之滲透特徵。將綿羊鼻黏膜固 定在二個一半之Franz細胞間，以黏膜側面向供給端隔 室。在接受端隔室中塡滿接受器流體，以由浸沒之磁攪拌 器床驅動之經PTFE塗覆的磁追蹤器持續攪拌並將其維持 在3 7 °C之水浴中。將約1毫升（無限劑量）飽和藥物溶液 置入供給端隔室並在整個硏究中以 PARAFILM® (Pechiney Plastic Packaging, Inc.，Chicago, IL )覆蓋 之。施放藥物溶液後，在採樣時間（t =1，2,3,4,5,6和7) 後，經由採樣臂從接受端隔室移出接受器流體（200微 升）並藉HPLC進行分析。以等體積之新鮮預暖（37°C ) 的接受器流體取代各移出之樣本。對藥物溶液重複進行8 次（η =8 )實驗，亦進行一次對照組實驗，其中供給端隔 室中無藥物存在。 D·神經認知試驗：認知藥物硏究（CDR )電腦化評 估系統係特別設計用來評估化合物對個體及在所有臨床進 展階段之患者的認知功能品質的效果。CDR系統廣泛用於 電腦化評估系統（見，如：Ebert U， et al.， -50- 200824693 “Pharmacokinetics and pharmacodynamics of scopolamine after subcutaneous administration/ Journal of Clinical Pharmacology 38: 720- 726 (1 9 9 8); Harrington F，et al., “Cognitive Performance in Hypertensive and Normotensive Older Subjects，“ Hypertension 36: 107 9- 1 0 8 2 (2000);

Preece AW，et al·，"Effect of a 915 MHz simulated mobile phone signal on cognitive funcition in man，‘‘ International Journal of Radiation Biology 75: 447- 456 (1999);及

Walker MP 5 e t al., “Quantifying fluctuation in Dementia with L e wy Bodies, Alzheimer’s disease and vascular dementia，“ Neurology 54: 1616- 1625 (2000))且已用於評 估藥學化合物之不同變化範圍。 E.腦電波圖（EEG )方法：以，如：5分鐘靜脈內 (i.v.)注入方法投服藥物及安慰劑。在開始投服後之15 分鐘期間記錄EEG。在30、60、90、120及180分鐘再次 記錄EEG。個體通常係在安靜之實驗室內（隔音及具電屏 障之房間）。在取得EEG測量値期間讓實驗對象斜靠在 扶手椅上。通常係使用28個EEG電極·（例如：從10-20 個系統出來；Jasper，Η·Η·，et al·，“Studies of clinical and electrical responses to deep temporal stimulation in men with some considerations of functional anatomy，“ Res Publ Assoc Res N er v Ment D i s. 36: 3 1 6- 34 (1 9 5 8); Japser， H. H., “Progress and problems in brain research，“ J Mt Sinai Hosp NY· 25(3): 244- 53 ( 1 95 8))記錄。可使用連接 -51 - 200824693 耳朵之參考電極及4個僞跡電路（偵測眼球移動、肌肉活 動及其他人爲產生之電位）。將鍍銀板電極連接實驗對象 之頭皮（例如：使用快乾膠棉）。在每一記錄期前檢查阻 抗（例如：2000-5000歐姆之阻抗）。在爲各實驗對象測 試前使用校準訊號以調整所有記錄之電極，以建立EEG 或相關項目電位（ERP )圖。在休息記錄狀態下取得EEGs (即’實驗象被要求閉眼放鬆）。一種使用數據分析之 實例爲 Dago 等人之方法（Dago，KT，et al·，“Statistical Decision Tree: a tool for studying pharmaco- EEG effects of CN S - active drugs，“ Neuropsychobiology， 2 9(2): 91-6 ( 1 994))，其涉及統計上比較在活性劑治療對安慰劑治 療期間取得之數據。通常，平均EEG參數之製圖及療效 之統計學評估係在擇定數目之健康自願者中進行。 實例1 在玻管內透過鼻黏膜吸收氯硝西泮 下列爲本發明提供證據而進行之實驗證明氯硝西泮滲 透通過鼻黏膜之能力。下文中描述氯硝西泮之飽和溶液在 玻管中滲透通過綿羊鼻黏膜之作用。 HPLC偵測氯硝西泮顯示出主要洗提出之尖峰的持留 時間爲7.5分鐘。建立0.2至10微克/毫升間之氯硝西泮 的校準曲線並適度地重複數次，以確保可重複性及直線 性。氯硝西泮在接受器溶液（10%乙醇，在PH6緩衝劑 中，見材料及方法部分）中之飽和溶解度爲29.32微克/毫 -52· 200824693 升。氯硝西泮在pH6緩衝劑中之飽和溶解度爲13.66微克 /毫升，而氯硝西泮在20%乙醇（在PH6緩衝劑中）中之 飽和溶解度爲82.28微克/毫升。 在接受器流體中製備標準（10%乙醇，在pH6緩衝劑 中）。雖然藥物在10%乙醇/PH6緩衝劑中之溶解度並非很 高，但卻選擇此而不選擇20%乙醇/PH6緩衝劑，因爲後者 被認爲可能擾亂鼻黏膜。亦應注意雖然飽和溶解度係在3 7 °C下測定，但飽和系統之浸潤作用係在室溫下進行。在室 溫下進行之浸潤作用儘可能快，以將在浸潤期間當溫度自 3 7 °C降下時任何之藥物沈澱減至最少。 結果發現校準之直線性非常優良（r2大於或等於 0.999 )。氯硝西泮之偵測（LOD).及定量（LOQ)限制爲 LOD (微克/毫升）0.269及LOQ (微克/毫升）〇.898。 初步之穩定性硏究係在1 〇%乙醇（在磷酸鹽緩衝液 (PBS )中）中進行。在綿羊鼻黏膜之存在下於2-8 °C及 3 7 °C進行之藥物穩定性硏究的數據摘要於表4中。 表4 在1 0 %乙@ 丨享/PBS中製備之標準的 f初步穩定性數據 藥物 濃度 (微克/«升) 在2-8°C回收之3 _在37°C回收之平均％ _ T=24小時 Τ=48小時 Τ=72小時 T=24小時 Τ=48小時 T=72 /]¾ 氯硝西泮 9.96 100.21 土 0.01 100.64 土 0.17 105.16 土 7.32 101.07 士 7.32 101.86 土 1.13 100.55 ± 0·77一 此數據清楚顯示出氯硝西泮在72小時內於二種溫度 -53 - 200824693 下均穩定。 在初步之穩定性硏究後，重複進行所製備之藥物在一 範圍內之緩衝劑pH値下的穩定性硏究。由藥物穩定性或 降解所產生之藥物回收％摘要於表5中。 表5 自穩定性硏究中回收之藥物的百分比（％) 藥物 緩衝劑* pH %回收2-8〇C %回收371 T=24小時 Τ=48小時 Τ=72小時 Τ=24小時 Τ=48小時 Τ=72小時 氯硝西泮 2 90.08 73.18 55.30 57.97 55.51 53.07 3 97.87 91.94 85.55 88.73 88.37 85.50 4 99.54 98.88 9937 98.72 100.09 101.91 5 99.85 99.91 99.91 100.59 100.98 103.29 6 100.41 100.32 100.43 100.34 100.59 103.14 7 100.66 99.98 100.19 99.81 100.05 100.54 8 99.59 99.30 99.40 96.76 96.42 91.47 *在10%乙醇中製備 # 所得數據確認氯硝西泮於較高之溫度下，在pH4-7間 可在72小時內維特穩定。假定計劃之滲透硏究期可能少 於24小時且鼻黏膜之生理學pH値可能在pH5至6.5間變 化，則選擇PH6緩衝劑作爲用於滲透硏究之緩衝劑。 除了對抗熱降解之穩定性外亦測定當有綿羊鼻黏膜存 在時，藥物之結合或降解作用之效果。 -54- 200824693 表6 在3 7°(j，一綿手鼻黏膜之存在下’藥物的回收百分比（％) %回收 藥物 *緩衝， 1 pH5 *緩衝劑pH6 *緩衝劑PH7 24小時 48小時 24小時 48小時 24小時 48小時 氯硝西泮 97.78 96.45 97.47 97.14 99.30 97.78 *在10%乙醇中製備 依方程式2中之描述（材料及方法）呈現之數據顯示 出任何回收損失係由於有綿羊鼻黏膜存在造成而非熱降解 所造成。一般而言，此數據顯示出在綿羊鼻黏膜之存在 下，藥物顯然有某種程度之結合作用或降解作用 (<10%)。 初步之滲透硏究係依上述材料及方法部分進行。滲透 達到穩定狀態時表示藥物之滲透作用不受藥物在接受器流 體（10%乙醇在pH6緩衝劑中）中之溶解度影響。該數據 清楚顯示出藥物在24小時內之穩定狀態流量。 最後之滲透硏究係在7小時測試期內進行。在初步硏 究中之藥物滲透特性顯示出非常類似於在最終滲透硏究中 之特性。第1圖呈現在7小時內每單位面積中滲透之氯硝 西泮的平均累積量的圖示。數據顯示出由藥物之直線形滲 透速率證明氯硝西泮之滲透作用係在穩定狀態。 HPLC方法學顯示出“符合目的”，在與藥物波峰相 同之持留時間處並無干擾峰存在。雖然溶解度硏究證明吸 收區狀況並未應用在二種滲透硏究中’然而氯硝西泮之滲 -55 - 200824693 透作用達到穩定狀態表示藥物在接受器流體（1 〇%乙醇， 在PH6緩衝劑中）中之溶解度並非速率限制。 上列之初步穩定性數據表示氯硝西泮在3 7 °C下，於接 受器流體（10%乙醇，在pH6緩衝劑中）中可在24小時 內保持穩定。另外，在3 7 °C，綿羊鼻黏膜之存在下於4 8 小時內可回收超過95%之藥物，這表示僅有小程度之結合 作用或降解作用發生。 在觀察到穩定流量之初步和最終硏究中可發現氯硝西 泮之滲透特性非常類似。總結而論，數據顯示出氯硝西泮 在用於鼻內投藥時具有可接受之穩定性以及可接受之通過 鼻黏膜的滲透特性。 實例2 在溶劑基質中之溶解度 利用標準方法測定氯硝西泮在許多純溶劑中之溶解 度。結果呈現於表7中。 表7 氯硝西泮在純溶劑中之溶解度 基質 溶解度(毫克庵升） PEG 300 37.0 PEG 200 303 丙二醇 3.4 三醋酸精 5.8 乙氧基化四氫糠醇 67.3 特可托® 38.7 水 <0.1 -56- 200824693 從表7中可見到四氫糠醇聚乙二醇醚爲氯硝西泮之良 好溶劑，因此，可用來取得，例如：10至20毫克/毫升之 靶的溶解度。再者，存有四氫糠醇聚乙二醇醚可促進在具 較低氯硝西泮溶解度之調和物溶劑（諸如：三醋酸精或丙 二醇）中的溶解度。特可托㊣及PEG (聚乙二醇）基質亦 顯示出高溶解度。 還有，評估氯硝西泮在特可托®(TC)、三醋酸精 (TA)、四氫糠醇聚乙二醇醚（葛來可富洛 (glycofurol) ) (GF)及丙二醇（PG)之二元混合物中 的溶解度。測定下列調和物之氯硝西泮的溶解度限制： 表8 二元混合物調和物

調和物 組成物 K 70% GF+30% ΤΑ —---- R 30% GF+60% PG+10%檸檬酸鹽/TWEEN/偏二亞硫酸鹽 T 30% GF+70% PG i 30% GF+70% ΤΑ ii 50% TC+50% ΤΑ iii 50% TC+50% PG 在1.5毫升微量離心管中以約500微升之溶劑基質蓋 住過量藥物（5 0毫克），並將溶液在震盪搖動器上混合數 分鐘。之後，將溶液置於25 °C超音波浴中45分鐘。以溫 度計調控溫度並在浴中加入冰塊來控制溫度。靜置1 5分 _後，將溶液在3,000xg離心30分鐘。然後，將溶液貯 -57- 200824693 存在25 t，ICH櫃中16小時，避免光線照射。 氯硝西泮在純溶劑中之溶解度顯示於表7中。從表7 中之數據計算氯硝西泮在混合物中之理論溶解度。溶解度 試驗之結果及理論値顯示於表9中。 表9 氯硝西泮在基質之二元混合物中的溶解度 調和物 測量之溶解度 (毫克/¾升） 理論上之溶解度 (毫克/毫升） 測量備理論値 (%) V ， K-70% GF+30% TA 49.8 48.8 102.0 R-30% GF+60% PG+10% c/t/m (aq) 11.5 22.2 51.9 T-30 GF+70% PG 16.7 22.6 74.0 i-30% GF+70% TA 22.9 24.2 94.4 ii-50% TC+50% TA 27.6 22.2 123.9 iii-50% TC+50% PG 21.7 21.0 103.0 再者，第2圖中呈現之數據證明溶解度與三醋酸精和 四氫糠醇聚乙二醇醚，及丙二醇和四氫糠醇聚乙二醇醚之 二元混合物的組成物（以百分比計）間的直線關係。從圖 中之數據可推論在50: 50混合物中之溶解度爲約36.4毫 克/毫升。根據氯硝西泮在GF及PG之二元混合物中的溶 解度數據，溶解度與組成物間之關係看來並非直線形，因 其係在GF及TA之二元混合物中。 這些數據證明包含二元溶劑混合物之溶劑溶液在溶解 氯硝西泮上之用途，例如：用於鼻內藥學組成物之調和物 中〇 表8及表9中所列之溶劑系統提供系統中具最少數之 -58- 200824693 溶劑成分的調和物實例，這些溶劑系統可協助減少可能之 交互作用。這些溶劑組合亦增加化學位能及系統熱力學， 以協助確保因溶解度降低，藥物（如：氯硝西泮）傾向通 過鼻黏膜。表8及9中所列之溶劑系統亦避免可能提供熱 力吸收區之成分（如：PEG及環糊精），其中當使用非滲 透賦形劑時氯硝西泮傾向留在鼻腔內。 實例3 其他穩定性硏究 列舉1 8種用於加速之穩定性硏究之20毫克/毫升氯 硝西泮調和物：保持在6 0 °C，上方空間無遮蔽處6週。在 0、1、2、4及6週抽取樣本並稀釋20, 〇〇〇倍以分析氯硝 西泮及稀釋20倍以分析降解產物。第6週時藉目視檢查 來評估顏色。氯硝西泮發生氧化（顏色）及水解（化學） 降解。利用1 (最淡=最低降解作用）至5 (最深=最大 降解作用）之相對顏色級別計算氧化降解作用之積分。經 由採樣，利用HPLC分析樣本和氯硝西泮參考標準來評估 水解降解作用。這些分析結果呈現於表1 0中。 -59- 200824693 表10 在60°C之穩定性審查 # 調和物 化學降解剩餘之％氯硝西泮 氧化 〇週 1週 2週 4週 6週 顏色/ 6週 1 100%乙氧基化四氫糠醇 96% 101% 96% 90% 81% 1 2 95%四氫糠醇聚乙二醇醚+5% H20 94% 105% 99% 82% 68% 4 3 100%特可托® 100% 111% 103% 94% 88% 1 4 90% 特可托®+1〇%Η20 98% 100% 94% 79% 67% 4 5 80%四氫糠醇聚乙二醇醚+20%特可托㊣ 84% 99% 99% 93% 82% 2 6 70%四氫糠醇聚乙二醇醚+20%特可托 ®+10%H2O 113% 99% 93% 72% 63% 5 7 70%四氫糠醇聚乙二醇醚+30%三醋酸精 104% 108% 105% 91% 82% 2 8 30% GF+70% PEG 200 105% 93% 79% 67% 60% 4 9 50%四氫糠醇聚乙二醇醚+50%特可托⑧ 108% 107% 97% 86% 73% 3 10 50% 特可托 ®+50% PEG 200 96% 93% 79% 76% 68% 4 11 70%特可托®+30%三醋酸精 106% 110% 101% 99% 92% 1 12 60%特可托®+30%三醋酸精+10% H20 104% 108% 101% 86% 78% 3 13 60%特可托®+30%三醋酸精+10°/。10mM檸 檬酸鹽pH 4 107% 105% 104% 96% 91% 2 14 60%特可托®+30%三醋酸精+10% 10mM磷 酸鹽pH 4 102% 108% 109% 101% 92% 2 15 60%特可托®+40%丙二醇 105% 110% 104% 95% 89% 2 16 5%GF+95%PEG 200 106% 89% 74% 61% 53% 5 17 10%GF+90%PEG 200 99% 85% 77% 62% 55% 5 18 10% TC+90% PEG 200 102% 88% 77% 64% 54% 5

在60°C下培育2週後從分析結果可清楚知道含PEG 之調和物爲最不穩定之調和物。這些結果在4週及6週後 之氯硝西泮分析（剩餘之％氯硝西泮）中得到確認。2週 後，含PEG之所有調和物中的氯硝西泮百分比降至低於 -60- 200824693 80%，且在含70-95%PEG之調和物中降至50-60%’在含 50%PEG之調和物中降至68% 〇 含5 · 1 0%水之調和物亦顯示出某種程度之氯硝西泮不 穩定性。因此，在60 °C下6週後，氯硝西泮之百分比降至 63-7 8%。相對於含5-10%水之調和物，含有PH4之10%水 性緩衝液的調和物顯示出相當高之穩定性。因此’在60°C 的貯存6週後那些調和物之穩定性分析係在90%範圍內。 伴隨著氯硝西泮百分比下降可見到那些調和物中有強 烈之顏色發展出。含有水但不含緩衝劑的調和物亦顯示出 有顏色發展出並在貯存6週後記錄3 - 5之積分。此可以調 和物1及2，3及4和5及6清楚示範。這些觀察顯示出 顏色發展可能與水解有關。 當將含水調和物之降解產物的HPLC略圖與暴露於 HC1、NaOH及H202之強迫降解的樣本相比較時，其顯露 出與來自與HC1 —起培育之降解產物最相似，此點進一步 支持水解理論。相反地，緩衝在PH4之帶水調和物（# 13 和1 4 )顯示出僅有低度之顏色發展且積分爲2。此點指出 水解作用可藉由將pH保持在低水準來防止（例如：苯並 二氮呼在PH4.5至5.5之範圍內穩定性增加，見，如： P.C.T·國際刊物第 WO 91/1 6929 號；及 Pharmazie，1974 Oct-Nov，29(10-1 1)，第 700-707 頁）。 從表1 〇中呈現之結果中可知較佳之穩定性通常係在 無游離之PEG聚合物存在時取得。上列數據指出PEGs造 成氯硝西泮降解增加。類似地，水亦顯示出造成氯硝西泮 -61 - 200824693 降解增加。鑑於上列結果，無水溶劑基質對氯硝西泮而言 較佳。再者，爲了改良氯硝西泮之穩定性，不含PEG之調 和物亦顯示出爲較佳者。 在本發明之用於鼻內遞送苯並二氮呼的調和物中加入 抗氧化劑可對這類調和物提供所需之保護利益。合適之抗 氧化劑實例包括但不限於：生育醇及其衍生物、抗壞血酸 及其衍生物、丁羥基茴香醇、丁羥基甲苯、富馬酸、蘋果 酸、沒食子酸丙酯、亞硫酸鈉、偏二亞硫酸（包括偏二亞 硫酸鈉）及其衍生物和EDTA二鈉、三鈉及四鈉鹽。可溶 性之有機抗氧化劑爲較佳者，例如：丁羥基甲苯。 再者，數據指出當使用水性溶劑時，包含pH修改劑 可產生保護效果。以5種有機體（金黃葡萄球菌、綠膿桿 菌、大腸桿菌、白色念珠菌及黑曲黴）進行微生物挑戰顯 示出在28天後可觀察到對數平皿計數少於1/毫升，這表 示該液態調和物本身爲殺微生物活性，因此，非-無菌性 產物似乎是可接受的。 實例4 利用大鼠模型審查調和物之鼻部刺激可能性 在大鼠刺激模型中測試多種調和物。第一個目標係建 立特可托⑧之刺激門檻。測試在PEG 200中含有20%及 5 0 %特可托®之二種調和物。整合爲時間函數之血壓訊號 係如第3圖中所示。 第3圖中之命名如下：CLZ20 8 0…10毫克/毫升氯硝西 -62- 200824693 泮、20%特可托® ( TC ) 、80%聚乙二醇（PEG )； CLZ5 05 0-- 1 0 毫克 / 毫升氯硝西泮、50%TC、50%PEG ; CLZ70G30T--10 毫克 / 毫升氯硝西泮、70%GF、3 0%T A ; CLZ20T80P02T，10 毫克/毫升氯硝西泮、10 %T C、 90%PEG 200及 0.2%吐溫20 ;生理食鹽水（陰性對照 組）：醋酸（HOAc ) 0.3% (陽性刺激對照組）；醋酸 (HOAc ) 1.5% (陽性刺激對照組）；視特朗（Setron ) (陽性刺激對照組）。 第3圖中所示之數據證明在測試動物中出現輕微之暫 時性刺激。在大鼠中滴入組成物後，刺激通常持續少於 1.5分鐘（在0.7至2.2分鐘之範圍內）。刺激通常大於生 理食鹽水且類似於來自1.5%醋酸之刺激。獸醫之數據評 估所得到之結論爲來自這些調和物之鼻刺激並不明顯。 測試二種其他氯硝西泮調和物（7〇%PEG及30%GF; 及10%TC、90%PEG 200及0.2%吐溫20 )並取得類似結 果。使用吐溫20 (聚乙二醇山梨醇酐單月桂酸酯）作爲可 能之刺激減少劑。 一種調和物，CLZ505 0顯示出較其他調和物產生更強 之刺激性，因滴注調和物與血壓下降有關。血壓下降使繪 製基線時產生偏差，因此，亦使訊號整合產生偏差。 在第二個大鼠鼻刺激實驗中係在刺激模型中測試8種 氯硝西泮調和物及一種不含氯硝西泮之調和物基質（K : 30%TA，70%GF)並將其與使用〇·9%之醋酸所得之刺激結 果相比較。用於大鼠鼻刺激硏究之調和物及其結果呈現於 -63- 200824693 表11中。在表中，Iden一爲與調和物相關之識別符號； MBP —在刺激反應期間之綜合平均血壓；T…刺激反應期 (分鐘）；TC-- 特可托®;PEG--聚乙二醇；TA…三醋酸 精；GF--四氫糠醇聚乙二醇醚；PG—丙二醇；H20…水； Tw —吐溫20 ; w/o clz =不含氯硝西泮。將50微升含有20 毫克/毫升氯硝西泮之各調和物投給各動物。 表11 大鼠鼻刺激硏究 調和物 N MBP T(分鐘） 識別符號 TC PEG TA GF PG H20 Tw 平均値 標準差e 平均値 誤差c I 20 80 3 26 8 1.8 0.2 Η 50 50 4a 25 4 1.9 0.2 Κ 30 70 3 8 3 0.7 0.1 Μ 70 30 3 21 9 1.7 0.1 I+Tw 20 80 0.2 3 22 11 1.2 0.2 T 30 70 2b 27 (8) 1.2 (0.1) Rwa 30 60 10 3 42 10 1·8 0.5 R 30 60 10d 0.2 3 25 1 2.2 0.2 K w/o clz 30 70 3 22 4 1.3 0.2 0.9% HOAc 2 26 11 1.6 (0.3) a =必須係由強烈刺激造成之血壓下降，血壓下降使繪製基線時產生偏差，因此， 亦使訊號整合產生偏差 b =群體中第3隻對投藥反應非常強烈，接受心臟復甦術之動物。自此動物取得之 結果未包含在數據處理中。 c =當η<3時係使用括弧中之數字。 d =包含檸檬酸鹽緩衝劑ρΗ4及偏二亞硫酸鈉。 上述調和物中，偏二亞硫酸鈉及檸檬酸之存在量各少 -64- 200824693 於1% (重量/重量）基本成分。 在人類測試中發現自願者可忍受〇·9%醋酸。本實驗 之目的係提供多種調和物之初步試驗並將其相關於刺激性 進行比較。由於對抗癲癇連續發作及其他急性指徵（諸如 恐慌發作）之鼻內調和物的輕微刺激略圖是可被忍受的， 因此，主要考量爲參與臨床I階段試驗之自願者不必承受 不必要之痛苦。基於血壓測量之刺激積分呈現於第4圖及 表1 1中。第4圖中，生理食鹽水、醋酸溶液及視特朗調 和物之欄中（最右邊4欄）呈現來自先前實驗之數據並插 入其中以用於比較。表1 1亦呈現以分鐘計之刺激反應 期。結果顯示出所有測試調和物均造成相當短期之刺激反 應，其範圍係從0.7至2.2分鐘。 爲了測試特可托⑧之刺激性，測試含20%及50%特可 托®之二種調和物加上 PEG 200 (作爲共溶劑）。20% (I)或50% ( H)之特可托⑧顯示出類似之刺激積分，此 表示特可托®不比PEG更具刺激性。第三種調和物含有與 I相同之特可托⑧，但帶有〇 · 2 %吐溫。將1與帶有吐溫· 2 0 之I相比較時顯示出吐溫不會實質上降低此調和物之刺激 性。 顯示出良好之藥物動力學略圖之調和物K(30%TA， 7 0 % G F )(見實例5 )具有本實驗中所測試之調和物的最 低刺激積分。 亦測試不含氯硝西泮之調和物K ’以取得關於氯硝西 泮在刺激方面之效果的資訊。比較Κ及不含氯硝西泮之Κ -65- 200824693 的刺激積分顯示出氯硝西泮具有減少刺激性之效果。 調和物Μ及T含有相同量之四氫糠醇聚乙二醇醚， 但Μ含有70%PEG，而Τ含有丙二醇作爲共溶劑。這二種 調和物之刺激積分並無顯著差異，此表示PG及PEG具類 似程度之刺激性。 具.1 〇 %緩衡劑（檸檬酸鹽/吐溫/二亞硫酸鹽）或具 1 0 %水之調和物R爲所測試之僅有的含水調和物。含水調 和物僅顯示出明顯較含有緩衡劑/吐溫/二亞硫酸鹽之調和 物更具剌激性。帶有緩衡劑之調和物R顯示出與非水性調 和物I、Η、Μ及T具類似之刺激性略圖。 在人體試驗中已測試0.9%醋酸之刺激性並發現其雖 具刺激性但可忍受。所有測試調和物（除了含水之R外） 顯示出與此參考調和物具同等或較低之刺激性（第 4 圖），此表示其具有輕微但可忍受之刺激性。 這些鼻部刺激數據表示本發明之氯硝西泮調和物適合 用於鼻內遞送。 實例5 藥物動力學及耐受性 經由鼻內及靜脈內途徑遞送不同之氯硝西泮調和物至 兔子體內。許多投服之調和物顯示出較靜脈內調和物之 7 0 %生物利用率爲高的鼻內生物利用率。含有濃度爲2 0 -100%之特可托®的調和物顯示出特可托㊣爲有效之氯硝西 泮的吸收增強劑和溶劑。 • 66 - 200824693 另外，含有濃度範圍在2 0- 1 00%之特可托㊣的鼻內氯 硝西泮調和物可產生Tmax低於4分鐘之藥物動力學 (PK )略圖。特可托®之吸收增強效果亦可由此績效指標 證明。 一些氯硝西泮調和物之示範性藥物動力學數據呈現於 表12A中（各調和物N=l)。表中，Tw或tween爲吐溫 20，EtOH爲乙醇，Triac或TA爲三醋酸精，phosph爲磷 酸鹽緩衝劑，metabisulph爲偏二亞硫酸鈉，citr爲檸檬酸 鹽緩衝劑，AUC爲曲線下面積，Tmax爲分鐘，Cmax係以奈 克/毫升計而F%爲與靜脈內調和物相較下之鼻內調和物的 生物利用率--其他縮寫爲如上述所使用者。 -67- 200824693 • · 125% Ill8%| 111% |110%| |110%| Il02%| |109%| | 91% | 1 91% 1 I 94% I | 83% | | 84% 1 | 94% | |102%| 1 95% I 80% 105% 99% 77% 78% 73% 66% 78% 81% AUC 1048 1039 1165 1182 1130 902 1157 938 758 OS 〇〇 m 〇\ 980 〇〇 On 1105 1021 VO <N oo v〇 1185 r-HI oo 826 759 679 839 642 d Ό (N Os (N On m α\ m (N m (N cn Q\ (N 5 oo 00 r-H 00 m O <N <N (N o m m r—4 HS 寸· 1-H r—H t—H ON (N On o CO ο rn 〇 rn v〇 卜 (N m cn H m cn 00 i—H 15.6 (N <N* 寸 cn 1—Ή 寸· 寸 cn O wS 劑量 (毫克) 0.191 0.201 0.190 0.195 0.187 0.201 0.192 0.187 0,191 | 0.191 j | 0.212 | | 0.212 1 | 0.190 | 0.196 | 0.195 0,187 0.191 0.218 0.191 0.192 0.190 I 0.187 0.196 0.182 h2o 〇 〇 ο o 〇 o 〇 o o EtOH ί ϋ P-( 〇 o 〇 〇 H 〇 ON. o u H o T-H 〇 § o 〇 § § § s 沄 PEG 調和物 100%特可托® 30%三醋酸精+70%特可托® 30%Triac.+60% TC+10% H20 40% PG+60% TC 30% TA+60% TC+10%檸檬酸鹽 30%三醋酸精+70%特可托® 90% TC+10% H20 30% TA+60% TC+10%檸檬酸鹽 寸 m M _ s o r-H ώ ±1 (N 〇 U H + < H 100%特可托® 80% GF+20% TC I 80% GF+20% TC 30% Triac.+60% TC+10% H20 50% PEG 200+50% TC 40% PG+60% TC CO t o r-H 6 H ? 100%乙氧基化四氫糠醇 50% GF+50% TC 30% TA+70% GF 90% TC+10% H20 95% GF+5%吐溫-20 a Ifl t o r»H U ί o m 50% PEG 200+50% TC 10% GF+0.2%吐溫+90% -68- 200824693

g 58% 55% 67% 52% 77% 84% 72% 46% 49% 79% ! 56% 64% 73% 58% 76% 69% 53% I 60% 71% AUC 682 647 707 414 650 1332 1133 00 C4 m VO in as 00 m 00 VO 482 640 750 o z tT) ON (N (N s OO o r—H 00 t-H m cn (N in VO t-H οι 卜 τ-Η m t-H Ό r-H m (N m r-H 卜 t-H in <N 00 (N 寸 cn v〇 寸 卜 rn o\ Os 15.6 cn O cn rn 20.9 m rn 〇 cn v〇 to t-H 46.4 O rn OO cn 卜 15.1 劑量 (毫克) 0.212 0.212 0.191 0.182 0.193 0.200 0.200 0.200 0.200 0.201 0.195 0.211 0.211 0.191 0.193 0.198 0.200 0.200 0.200 H20 o o 〇 τ 1 4 o O 〇 EtOH H 〇 Ph 〇 [Xt ΰ 〇 r-H o r—1 〇 o T—t 〇 O ，_ 4 o 1—< o m in u H o O ί PEG ο Η O § 0's 調和物 PEG 200 100% GF 100% GF 30% TA+70% GF 10% GF+0.2%吐溫+90% PEG 200 10% TC+0.2%吐溫+90% PEG 200 50% PG+20% TC+20% EtOH+10%citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 50% PG+20% TC+20% EtOH+10%citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 30% GF+60% PEG 200+10%citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 30% GF+60% PEG 200+10%citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 100% PEG 300 100% PEG 200 10% GF+90% PEG 200 10% GF+90% PEG 200 30% TA+60% TC+0.2% 吐溫+10% 檸檬酸鹽 pH 4 10% TC+0.2%吐溫+90% PEG 200 80% PEG 200+20% TC 10% GF+80°/〇 PEG+10% citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 30% GF+70% PG 5% GF+95% PEG 200 -69- 200824693 • · g 容 in (N in m v〇 卜 m H (M On (N 卜 ?； Os 容 ο m (N AUC 00 ON (N »r> v〇 5 m in Ό 〇〇 00 (N m m OS jrj 00 oo to o 寸 m ON in 卜 (Ν oo m V£> o (M 〇 y—< 另 ON 寸 t-H in (N 寸 tn t-H CO (N 卜 t-H ON (N 〇\ Ο o t-H 寸 t-H o cn m m· 00 O *n T-H 寸 cn (N 寸 rn cn m cn rn CN 寸 o f—H 寸 ο m 寸 oo 寸 o CO o mW β ® W 0.218 0.214 0.189 0.189 0.200 0.200 0.200 0.200 0.200 0.195 I 0.198 0.201 0.200 0.190 0.200 0.214 o a o 〇 〇 t-H o T—H 〇 l—H o t-H EtOH 〇 Ph 〇 O S o 〇 m 〇 m o o m o m o V < o y—< in o r-H o u H < H 〇 m 〇 〇 o g 〇 t-H ο 1—Η Os § 調和物 50% GF+50% TC 70% GF+20% TC+10% H2〇 30% GF+70% PEG 200 30% GF+70% PEG 200 10% GF+50% PEG+30% PG+10% citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 30%GF+70%PG 30% GF+70% PG 10% GF+80% PEG+10% dtr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 10% GF+50% PEG+30% PG+10% citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 100% PEG 200 80% PEG 200+20% TC 100% PEG 300 5% GF+95% PEG 200 95% GF+5%吐溫-20 10% GF+80% PEG+10% citr/吐溫/偏二亞硫酸鈉 70% GF+20% TC+10% H20 。尔怪件«(__/__)％1鍫令#_坩他^_||1:趑霾鍫渥商：：：擊乐髮显1|错^ -70- 200824693 一些不含特可托®之氯硝西泮調和物亦使鼻內給藥後 之血中水準快速上升（包括，例如：95%GF、5%吐溫· 20、100%GF、10%GF、90%PEG、100%PEG 及 30%TA、 70%GF )。 上列藥物動力學數據說明配製成供鼻內投服之氯硝西 泮組成物可藥學上有效地在短時間內遞送臨床上相關量之 氯硝西泮進入血流中--這使得這類鼻內調和物可臨床上用 來，如：治療癲癇連續發作。這類氯硝西泮組成物包含， 如：一或多種選自下列之溶劑，包括但不限於：特可托® (二乙二醇單乙醚）及類似之烷基醚、丙二醇、三醋酸 精、Glycofurol (乙氧基化四氫糠醇或四氫糠醇聚乙二醇 醚）及類似之乙氧基化四氫糠醇和聚乙二醇（如：PEG 200、PEG 300，等）。然而，如上述指出，游離之PEG 聚合物導致氯硝西泮調和物之穩定性降低。 重新分析上述表12中所示之數據。在二組之十隻動 物（JC01 (第1組）和JC02 (第2組））中執行兔子初 步PK實驗。JC01實驗係在較JC02兔子組來得老且重之 兔子中進行。各兔子組具有其本身之靜脈內氯硝西泮PK 數據組，以用於計算生物利用率。 鼻內調和物爲4毫克/毫升。以Eppendorf給藥微量分 注器在動物之各鼻孔中給予25微升調和物，共50微升。 在給藥時及給藥後約1 0秒讓動物保持平躺姿勢。在3 0秒 內將500微升靜脈內調和物Riv〇tril®注射液注入在採血耳 朵相對位置處之前緣耳靜脈中。所有兔子均接受0.2毫克 -71 - 200824693 氯硝西泮。 在各硏究日測試5種調和物，其中將各調和物投給二 隻兔子。在決定將調和物之組成物投給下一組動物前先分 析數據。 由於二組兔子的體重不同，來自此二組之Cmax及60 分鐘AUC不能直接比較。根據靜脈內投藥給各組之結果 來爲二組間之體重差異校正其相對生物利用率。二組間並 不直接比較Cmax，其在表中之數値爲各組內之相對指示峰 値。

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表1 2B :示範之氯硝西泮調和物及藥物動力學數據 第1組兔子 ID 調和物 兔子 編號 劑量 (毫克) t-max C-max 相對BA IV 靜脈內 21-25 0.214 100% 1 100% PEG 300 21 0.201 20.9 27.3 62% 26 0.201 30.4 14.5 38% 2 100% PEG 200 22 0.195 3.3 26.0 44% 27 0.195 21.3 14.6 37% 3 100%四氫糠醇聚乙二醇醚 23 0.191 晒 • 28 0.191 15.6 30.4 83% 4 100%特可托 24 0.191 1.4 44.6 99% 29 0.191 1.6 64.9 74% 5 30%三醋酸精+70%特可托 25 0.201 3.0 64.6 81% 30 0.201 1.1 81.5 93% 6 10% GF+90% PEG 200 21 0.211 5.6 27.4 61% 26 0.211 3.0 25.8 58% 7 5%GF+95%PEG 200 22 0.200 5.4 20.2 32% 27 0.200 15.1 27.1 65% 8 10% GF+0.2% 吐溫+90% PEG 200 23 0.182 3.7 23.9 59% 28 0.182 5.7 20.1 55% 9 30% TA+60%TC+0.2% 吐溫+10% 檸檬 酸鹽緩衝劑pH 4 24 0.191 3.0 48.5 90% 29 0.191 1.4 43.5 53% 10 10%11>0.2吐溫+90%?丑0 200 25 0.193 46.4 24.0 67% 30 0.193 9.9 32.8 66% -73- 200824693

第2組兔子 ID 調和物 兔子 編號 劑量 (毫克） t-max C-max 相對BA A IV 33+35 0.214 100% B 100% GF 31 0.212 3.1 19.9 53% 32 0.212 1.6 23.2 54% C 80% GF+20% TC 34 0.212 2.7 31.2 73% 36 0.212 3.3 39.7 78% D 50% GF+50% TC 37 0.218 2.2 41.1 79% 38 0.218 3.0 14.4 25% E 70% GF+20% TC+10% H20 39 0.214 5.3 25.2 51% 40 0.214 3.2 9.5 20% F 90% TC+10% H20 31 0.192 3.0 43.5 105% 32 0.192 1.5 24.6 76% G 30% Triac.+60% TC+10% H20 33 0.190 1.5 30.5 84% 34 0.190 1.1 31.1 103% H 50% PEG 200+50% TC 35 0.196 1.6 47.2 94% 36 0.196 3.4 34.6 78% I 80% PEG 200+20% TC 37 0.198 3.0 17.9 59% 38 0.198 10.4 14.1 53% J 95% GF+50% 吐溫-20 39 0.190 44.8 10.9 47% 40 0.190 1.4 29.6 73% K 30%三醋酸精+70%四氫糠醇 聚乙二醇醚 31 0.191 5.4 17.0 69% 36 0.191 3.4 24.9 84% L 40% PG+60% TC 32 0.195 2.9 51.3 111% 37 0.195 3.3 24.2 85% M 30% GF+70% PEG 200 33 0.189 15.0 17.3 69% 38 0.189 5.8 12.0 48% N 30%TA+60%TC+1()%檸檬酸鹽緩衝劑 34 0.187 1,9 33.7 105% 39 0.187 3.0 30.9 94% 0 30%TA+60%TC+10%磷酸鹽緩衝劑 35 0.187 1.8 19.8 76% 40 0.187 1.4 27.9 72% -74- 200824693 10% GF+80% PEG 200+10% 檸檬酸鹽 緩衝劑/吐溫/偏二亞硫酸鈉 36 0.200 3.8 25 25% Ρ 32 0.200 3.1 23 37% 31 0.200 30.4 14 49% Q 10% GF+50% PEG 200+30% PG+10% 檸 37 0.200 3.4 25 39% 檬酸鹽緩衝劑/吐溫/偏二亞硫酸鈉 33 0.200 3.3 17 39% R 30% GF+60% PG+10%檸檬酸鹽緩衝劑/ 34 0.200 3.0 16 51% 吐溫/偏二亞硫酸鈉 38 0.200 3.5 42 43% 35 0.200 4.7 28 49% Τ 30% GF+70% PG 39 0.200 2.9 14 35% 40 0.200 3.4 15 22% U 50% PG+20% EtOH+20% TC+10%檸檬 32 0.200 15.6 33 69% 酸鹽緩衝劑/吐溫/偏二亞硫酸鈉 0.200 1.3 52 72% 注意·· Tw或tween爲吐溫20，EtOH爲乙醇，Triac或ΤΑ爲三醋酸精，phosph爲 磷酸鹽緩衝齊J > metabisulph爲偏ϋ亞硫酸鈉爲檸檬酸鹽緩衝劑。 如上列表12A及表12B所示範者，該組成物可包含由 二種溶劑組成之溶劑基質，例如：第一種溶劑提供氯硝西 泮（例如：TC或GF )高溶解度，其在施用至鼻黏膜後， 其由鼻黏膜吸收，造成氯硝西泮超飽和，及第二種溶劑， 氯硝西泮在此第二種溶劑（例如：TA或PG )中之溶解度 較在第一種溶劑中爲差。於較佳體系中，該組成物大體上 爲非水性或無水的；然而，該組成物可進一步包含水性成 分（例如：少於約10%之水液含量，宜爲少於約5%之水 液含量，更宜爲少於約2%之水液含量，其中該水液含量 宜以生理學上可接受之緩衝劑緩衝，以取得約pH4至約 pH7之pH範圍，宜爲介於約PH4至約ΡΗ6·5 )。本發明 之氯硝西泮組成物亦可包含其他成分，例如：抗氧化劑 -75- 200824693 (例如：偏二亞硫酸鈉或丁羥基甲苯（ΒΗΤ ))。較佳之 體系通常不包含聚乙二醇聚合物作爲溶劑，但可包含像四 氫糠醇聚乙二醇醚（Glycofurol )之類的溶劑，其中該溶 劑分子含有聚乙二醇聚合物作爲其分子構造之內生性部 分’亦即，聚乙二醇聚合物作爲較大化學構造之取代基 (亦見，例如：已出版之P.C.T.國際專利申請案第 WO 03/070273 及 WO 03/070280 號）。 進一步評估包含二元溶劑系統之四種氯硝西泮組成物 的藥物動力學及耐受性。該四種氯硝西泮組成物爲如下列 表13中者。 表13 具二元溶劑系統之組成物（10毫克/毫升氯硝西泮） 組成物 溶劑系統 I 50%二乙二醇單乙醚+50%三醋酸精 II 50%二乙二醇單乙醚+50%丙二醇 III 50%四氫糠醇聚乙二醇醚+50%三醋酸精 IV 50%四氫糠醇聚乙二醇醚+50%丙二醇

經由鼻內投給兔子表1 3中之調和物，以評估其藥物 動力學並將其與在兔子中經由靜脈內（i.v·)途徑投服氯 硝西泮相比較。各調和物之樣本大小爲N = 1 〇，根據體重 調整，滴注1 0毫克/毫升氯硝西泮劑量。數據摘要呈現於 第5圖中。 該數據進一步摘要於表14中。 -76- 200824693 表1 4 選定之調和物的PK數據 調和物 劑量(毫克） Tmax Cmax AUC 生物利用率 I 50% TC+50% TA 0.214 20.3 9.02 462 43% Π 50%TC+50%PG 0.214 3.51 24.31 704 66% III 50%GF+50%TA 0.214 3.24 10.14 454 43% IV 50% GF+50% PG 0.214 3.26 19.34 604 57% 靜脈內 注射之Rivotril 0.214 1.70 49.70 1061 100% Φ 呈現於上之調和物的鼻內ΡΚ略圖證明氯硝西泮之快 速吸收，如此，氯硝西泮之臨床相關量可在短時間內到達 血流中。短期生物利用率不一定需要高；血中水準儘可能 在短時間內變高較重要。較低之生物利用率可以較高劑量 來平衡。較高劑量及低短期生物利用率之優點爲未在鼻內 吸收之藥物通過胃腸道，使得剩餘之藥物經由傳統GI吸 收，產生持續釋出略圖。 從兔子之ΡΚ數據可知配製成供鼻內遞送之本發明氯 • 硝西泮組成物的特徵爲，例如：在單次鼻內投藥（在一或 二個鼻孔內）後，氯硝西泮之Tmax爲2小時，通常爲少於 1小時，較可能少於3 0分鐘或少於1 5分鐘。再者，如此 文所描述之用於鼻內遞送之氯硝西泮藥學組成物的特徵 爲，例如：提供至少一種至少約3.0奈克/毫升之氯硝西泮 平均最大血漿濃度（Cmax)或至少約爲該經靜脈內遞送之 劑量濃度的15%，通常爲經靜脈內遞送之劑量的30%或經 靜脈內遞送之劑量的50%，及在單次鼻內投藥以遞送至少 約0.2毫克氯硝西泮劑量後，在60分鐘內之氯硝西泮曲 -77- 200824693 . 線下平均血漿面積（AUC)値爲至少約400奈克-小時/毫 升。再者，在鼻內投服後，本發明之氯硝西泮組成物的生 物利用率通常係高於經靜脈內投服者之3 〇%，通常爲高於 4 0 %，更常爲高於5 0 %。 除了上述之PK參數外，爲本發明提供證據而進行之 實驗係評估含有氯硝西泮作爲活性藥物之調和物I-IV在 上及下呼吸道中之局部耐受性。在兔子模型中評估此耐受 _ 性。在組織病理評估選定之組織前的連續7天期間進行治 療。 用於這些實驗中之兔子如下··品種，紐西蘭白兔子； 性別，3 0隻雄兔、3 0隻雌兔·，重量，平均體重：雄兔 2.466：ΐ：0·093 ( SD)公斤，雌兔 2·465±0·114 ( SD)公斤。 將治療時顯示出任何現有病況之動物排除。兔子係自法國 L’Arbresie Cedex，Charles River 實驗室取得。 在配置適應期、治療前3天及就在屠宰前爲動物稱 φ 重。選擇1 0毫克/毫升之劑量水準（在1 0 0微升中之1毫 克氯硝西泮），以與投給人類之預期劑量相當。 治療組之內容詳細說明於表1 5中。調和物5爲載劑 對照組--5 0 %四氫糠醇聚乙二醇醚；5 〇 % - _丙二醇（無氯硝 西泮）。調和物6爲生理食鹽水對照組（在水中之 0.9%NaCl )。 -78- 200824693 表15 治療組之配置 組別 治療 動物數目 氯硝西泮之濃度 (毫克/毫升） 治療數目 1 調和物I TC/TA+ 5讎 5隻雌 10 7 2 調和物π TC/PG+ 5讎 5隻雌 10 7 3 調和物III GF/TA+ 5讎 5隻雌 10 7 4 調和物IV GF/PG+ 5讎 5隻雌 10 7 5 調和物5 GF/PG- 5讎 5隻雌 0 7 6 調和物6 S- 5讎 5隻雌 0 7 選擇之投服途徑爲最終產物之投服途徑。 不論是那種調和物，在連續之7天中每日經由鼻部滴 注給予動物0.1毫升之調和物。 所有投藥均係利用配上塑膠錐形物之1毫升移液吸管 (B13，來自 Gilson之可調整之移液吸管 Pipetman P200 )投在右鼻孔內。以移液吸管測量品項之所需體積並 置於動物之鼻孔內。 治療細節以原始數據記錄，包括：調和物識別、投藥 曰期及時間。 在第8天時每組殺死6隻動物（3隻雄及3隻雌）， 經過7天恢復期後在第i 5天殺死剩餘之動物，宰殺時係 以異氟院將動物麻醉，以斷頭放血法自腹動脈開始。 -79- 200824693 . 在安樂死後，巨觀檢查喉嚨、氣管、支氣管、肺及食 道。 在驗屍時取得動物之頭與喉嚨，以及氣管、支氣管、 肺及食道之樣本並固定在甲醛中，以供組織病理學檢查。 在特殊之準備工作後，自頭、鼻黏膜、鼻甲（喉矓及 氣管除外）採取樣本並檢查之。亦採取任何巨觀檢查到之 異常或損害之樣本加上周圍組織之邊緣並固定之，以供組 織病理學檢查。 ~ 在三個相當於鼻腔近端、鼻腔鼻甲及鼻腔嗅覺器官之 頭部切片上檢查鼻腔內之鼻黏膜及鼻甲。 執行組織病理學檢查並由病理醫師評估結果。將每組 之所有結果列表，計算各器官之平均値和標準差。利用 ANOVA在各組間進行統計學比較。各組間之生長並無明 顯差具。 由病理醫師依下述爲組織學製品中所觀察到之最終變 φ 型的嚴重性計分：〇，無損害；1，輕微；2，中度；及3， 嚴重。 第6圖摘要動物鼻腔之組織病理學結果。第3組之嚴 重性計分爲統計上高於第 4、5及 6組之計分（p = 〇·〇〇3 )。刺激變型（像鼻甲狹窄中之腐飩及纖維素-白血 性物質）主要係在第3組（2/3雌性及1 /3雄性）中觀察 到，第1組（1/3雌性）及第5組（2/3雄性）中亦可觀察 到，但其他治療或對照組則未觀察到。第1 5天驗屍時未 觀察到這些變型。第8天驗屍及第1 5天驗屍時主要可在 -80- 200824693 治療之第1組中注意到鼻甲上輕微之上皮細胞肥大’其他 治療組則更輕微。對照組第6組顯示出無上皮肥大。在治 療及對照組中有時可在喉嚨氣腔（aerian lumen)及鼻腔 二者中觀察到血液，其可能來自外傷。治療之第2組及第 4組可觀察到最佳之局部耐受性。這些結果指出測試調和 物通常具有良好之鼻部耐受性。 在驗屍期.間可在15隻動物（2隻來自第1組、4隻來 自第2組、3隻來自第3組、2隻來自第4組、4隻來自第 5組），及組織病理學檢查可在6隻動物（1隻來自第2 組、2隻來自第4組、3隻來自第5組）之喉嚨中發現血 液或出血點。表1 6呈現各組之平均及SD嚴重性計分。 表1 6 各組弓 =ί喉嚨之平均及s D嚴重性計分 第1組 第2組 第3組 第4組 第5組 第6組 平均計分 0.0 0.1 0.0 0.2 0.3 0.0 SD 0.0 0.3 0.0 0.4 0.5 0.0

在來自第4組之2隻動物的食道上可觀察到輕微之上 皮細胞剝落。表1 7中呈現各組之平均及SD嚴重性計分。 表17 各組Μ 3食道之平均及SD嚴重性計分 第1組 第2組 第3組 第4組 第5組 第6組 平均計分 0.0 0.0 0.0 0.2 0.0 0.0 SD 0.0 0.0 0.0 0.4 0.0 0.0 -81 - 200824693 在驗屍期間可在17隻動物（4隻來自第1組、3隻來 自第2組、5隻來自第3組、1隻來自第4組、4隻來自第 5組）中發現血液或出血點。在支氣管及氣管中未觀察組 織病理學損害。 在驗屍期間可在17隻動物（1隻來自第1組、3隻來 自第2組、3隻來自第3組、1隻來自第6組）中觀察到 肺變型。第15天時可從2隻來自第2組之動物發現組織 上之充血跡。表1 8呈現各組之平均及SD嚴重性計分。 表18 各組Θ 3肺部之平均及SD嚴重性計分 第1組 第2組 第3組 第4組 第5組 第6組 平均計分 0.0 0.2 0.0 0.0 0.0 0.0 SD 0.0 0.4 0.0 0.0 0.0 0.0 考量整個呼吸道，微觀損害主要係在非常高（鼻腔） φ 之部分觀察到。由於對照組中未記錄損害，所有損害可能 與治療有關。驗屍時記錄之出血點及組織病理學檢查時所 觀察到之出血可能係由治療所引起之外傷。在大部分動物 中（26隻中有20隻在驗屍時呈現出血點或出血）’驗屍 時所記錄之損害與組織病理學之發現有關。就在治療後可 觀察到刺激損害，且其在一週恢復期後未觀察到。在一週 恢復期後觀察到輕微之上皮細胞肥大。考量嚴重性計分’ 調和物3明顯誘導出最嚴重之損害。其地調和物之局部耐 受性幾乎類似。 -82- 200824693 結論，驗屍及組織病理學檢查之結果（包括嚴重性# 分之比較）表示包含供鼻內遞送之調和物的本發明氯 泮組成物具有製藥用之可接受的耐受性。 實例6 溶劑基質之噴霧性及黏性 測試用於氯硝西泮調和物之1 4種代表性溶劑基質之 噴霧樣式並與水相比較。製作溶劑基質，攙入少量考馬斯 (Coomassie)亮藍染料，接著將100微升塡入Pfeiffer單 位劑量裝置（紐澤西州普林斯敦市Pfeiffer of America) 中。爲了測量噴霧樣式，在一張位於噴霧噴嘴上方3公分 之紙的下方開動裝置。所有測量係在周圍室溫（20-25 °C ) 下進行。測量在紙張上形成之藍色圖案的最小（Dmin )及 最大（Dmax)直徑，並使用該結果來計算Dmax/Dmin比、 圖案面積及平均噴霧角度。利用方程式計算3公分處之煙 羽面積，此方程式係使用二個直徑之一半作爲煙羽半徑計 算煙羽面積。利用 Brookfield DV-I黏度計（Brookfield Engineering Laboratories， Inc. 5 Middleboro,

Massachusetts )測量所有調和物之黏性。這些測量結果顯 示於表19中。表19呈現與用於氯硝西泮調和物之溶劑混 合物之噴霧性及黏性相關之數據。黏性、3公分處之煙羽 面積、噴霧角度及反映噴霧煙羽之對稱性的Dmax/Dmin比 呈現於表中。 -83- 200824693 表19 噴霧性及黏性 組成物 平均黏性 (cP) 在3公分處之煙羽 面積(平方細 噴霧角 度0 比例 Dmax/Dmie 80%四氫糠醇聚乙二醇醚+20%特 可托㊣ 11.5 5.93 49.2 1.07 50%四氫糠醇聚乙二醇醚+50%特 可托® 7.4 8.45 57.3 1.04 95%四氫糠醇聚乙二醇醚+5% h2o 16.7 5.73 48.6 1.22 70%四氫糠醇聚乙二醇醚+30%三 醋酸精 14.6 5.78 48.7 1.12 60%特可托®+30%三醋酸精+10% h2o 5.8 8.71 58.1 1.03 60%特可托®+40%丙二醇 8.8 6.42 51.0 1.11 70% PEG 200+30% H20 20.6 4.07 41.6 1.14 80% PEG 200+20% H20 30.0 4.10 43.3 2.04 90% PEG 200+10% H20 41.7 2.46 33.6 1.79 80% PEG 200+10% GF+10% H20 42.8 3.21 39.2 2.07 50% PEG 200+30% PG+10% GF +10% H20 35.4 4.55 44.9 1.54 60% PG+30% GF+10% H20 23.3 4.92 46.3 1.79 70% PG+30% GF 31.7 432 43.1 1.22 水 1.0 15.52 73.1 1.10

雖然水之黏性爲1 .OcP，該溶劑混合物之測試範圍係 在 5·8 ( 60%特可托® + 30%三醋酸精+10%水）至 42.8cP (80%PEG200+ 1 0%GF + 10%H2〇 )。如第 7 圖、第 8 圖和 第9圖所示，溶劑混合物之黏性與煙羽面積及噴霧角度和 煙羽對稱性具負相關性。 從表19、第7圖及第8圖中所示之數據中，顯然可見 84- 200824693 隨著標準Pfeiffer單位劑量裝置中之溶劑基質之黏性增 加，噴霧角度變得較小。第9圖顯示出在至多約20χΡ之 溶液黏性下，煙羽對稱性保持在1.0至1.2之內，超過 2 OcP後，煙羽形狀之不規則性增加。目視檢查三種黏性範 圍在5.8至41.7之溶液的噴霧煙羽外觀時透露出煙羽形成 且其中無一爲“射出”。 這些結果顯示出在20-25°C時所有測試之溶劑基質均 可自Pfeiffer單位劑量裝置良好噴出。這些結果亦表示黏 性爲本發明調和物之噴霧性的良好預測値。由於天氣可能 實質上支配所使用之不同狀況，測定溫度對黏性之效果。 在Gilmont落球黏度計中塡入二乙二醇單乙醚並在各溫度 下校正數小時。在-1 7 °C、8 °C、2 3 °C及4 0 °C下測量到之黏 性分別爲6·6χΡ、5·4 cP、3.8 cP及3·1 cP。因此，黏性之 溫度倚賴性相當低，可預期1 〇 0 %之特可托調和物可在低 於40°C以下及至少約-15°C至30°C之廣大溫度範圍內展現 良好之噴霧特性。 實例7 組成物、調和物實例及製造方法 於一方面中，本發明關於配製成用於鼻內投藥之氯硝 西泮組成物。單位劑量通常具有介於約2 5微升至約1 5 0 微升（宜爲約100微升）之體積。例如：用於治療癲癇連 續發作之氯硝西泮單位劑量係介於約〇 . 1毫克至約5毫 克，宜爲約1毫克至約4毫克。表20呈現用於鼻內投服 -85 - 200824693 劑型之調和物實例。這些調和物實例提供1 〇毫克/毫升之 氯硝西泮。 表20 溶液調和物之組成（％重量/重量） -般成分 特殊成分 調和物I 調和物Π 調和物ΙΠ 調和物IV 溶劑1 (高度溶解 氯硝西泮） 二乙二醇單乙醚 49.5 49.5 __ 四氫糠醇聚乙二 醇醚 — — 49.5 49.5 溶劑2 (低氯硝西 泮溶解度） 丙二醇 — 49.5 — 49.5 三醋酸精 49.5 _署 49.5 — 藥物 氯硝西泮 1.0 1.0 1.0 1.0 全部 100 100 100 100 下列製造本發明組成物實例之方法係大致說明且可由 本技藝之一般技術人士鑑於本專利說明書之教示內容加以 修改。示範之劑型及製造方法係大致說明。 • 在周圍溫度下將所需量之氯硝西泮溶解在溶劑1中並 一邊攪拌直到溶液透明且均勻。然後，加入溶劑2並攪拌 溶液直至均勻。 本發明之示範性調和物包括但不限於：介於約1重量 /重量％至約20重量/重量％氯硝西泮之最終濃度，介於約 30重量/重量％至約70重量/重量％之溶劑1及介於約70 重量/重量％和約3 〇重量/重量％之溶劑2。其他成分可依 上述所討論者加入，並根據此修改成分之重量/重量％組 成。 -86 - 200824693 鼻內氯硝西泮之典型靶的劑量爲每單位劑量1至2毫 克。通常，急性癲癇發作時係由健康照護專家經由靜脈內 途徑投給1耄克氯硝西泮（Rivotril i.v·)。此可經由鼻內 途徑投服來達成，例如：1 0 0微升具1 0 0 %生物利用率之 10毫克/毫升溶液，具75%生物利用率之13.3毫克/毫升溶 液或具50%生物利用率之20毫克/毫升溶液。 單位或複數劑量可分配入合適之遞送裝置，例如：固 定體積之計量劑量裝置。用於鼻內遞送藥物之裝置爲本技 藝所已知（例如··由 Pfeiffer of America，Princeton，N.J. and Valois of America Inc·，Greenwich，CN 製造）。可固 定遞送本發明之藥學組成物的裝置爲較佳者。這類裝置可 由患者或他人，如：醫事人員。再者，這些裝置實際上不 會在使用後遺留殘餘之氯硝西泮在裝置中。因此，該裝置 可輕易丟棄。 鼻內遞送裝置可經過修改（例如：增加塗藥器套蓋中 排出孔的大小）以取得合適之噴霧煙羽及鼻內滲透。例 如：可使用約 0.07毫米之排出孔來提供較高黏性組成 物。鼻內遞送裝置組件可藉本技藝之已知方法滅菌。然 而，由於本發明組成物爲無水的·，因此可能需要乾熱、無 菌過濾或熱滅菌。然而，若調和物爲經過微生物滅殺性， 則可能不需要滅菌或無菌充塡（見上述實例3)。 鼻內遞送裝置可塡入單一或複數劑量之氯硝西泮。具 單一或複數劑量之裝置可利用本技藝已知之方法及技術滅 菌。含有本發明氯硝西泮組成物之鼻內遞送裝置可進一步 -87- 200824693 以防止損害之密封墊密封。另外，亦可將合適之防止兒童 拿取的控制工具加入裝置中。 本發明之氯硝西泮組成物可在氮氣下包裝以減少襯氯 硝西泮或賦形劑之氧化傷害。類似地，可在限制氧氣之條 件下進行包裝過程。 實例8 人類藥物動力學硏究 利用標準臨床程序評估配製成用於鼻內遞送以供治療 應用之氯硝西泮組成物的人類藥物動力學、安全性及耐受 性。配製成用於鼻內遞送之氯硝西泮組成物可由參與者施 用於鼻黏膜來提供。 在人類中進行之初步硏究的主要目的係決定並比較單 次投服三種氯硝西泮劑型後之藥物動力學略圖：口服、i. v. 及鼻內。這類在人體中進行之硏究的一種實例爲在12位 健康男性自願者中進行之交叉硏究。測定氯硝西泮和7-胺 基-氯硝西泮之血漿及尿液水準，例如：利用HPLC及UV 偵測。這類硏究之第二個目的包括測定本發明鼻內遞送之 氯硝西泮調和物的安全性及耐受性並利用qEEG製圖評估 其藥物動力學效果（見，如：下列實例9 )。其他在人體 中之初步硏究係利用問卷及視覺近似評價標尺（Visual Analog Scale ( VAS ))來決定鼻內調和物之局部耐受 性。VAS爲一種已用在許多硏究中，定量鼻通道之主體通 道。另外’利用問卷及量尺評估認知 '睡意及情緒效果 -88- 200824693 (見，如：下列實例10 )。再者’可利用，例如：LEEDS 心智運動多重選擇反應時間（MCRT)試驗來評估注意力 及警覺性。 實例9 qEEG製圖 測定經由鼻內途徑投服本發明氯硝西泮組成物之患者 的EEG製圖。亦可投服不含氯硝西泮之載劑對照組。EEG 帶之標準如下：δ(0·5-305Ηζ) ； Θ ( 4-7.5Ηζ ) ；α(8- 12.5 Hz );及β ( 13-3 2HZ)。後二者分成如下之分帶：αΐ (8-9.5Hz ) ; α2 ( 10.12.5Hz) •，及 β 1 ( 1 3 -1 7 · 5 Hz ) ; β2 (18-20·5Ηζ )及 β3 ( 21-32Hz)。 EEG帶之功能關聯如下：δ，鎭靜潛力；θ，認知： α，警覺性/注意力；β，覺醒/焦慮。Θ帶增加顯示出與主 觀焦慮緩解相關（Ansseau，M·，al·，“Self-reports of anxiety level and EEG changes after a single dose of benzodiazepines. Double- blind comparison of two forms of oxazepam，“ Neuropsychobiology 12(4): 255-9 (1984))。 對照組氯硝西泮可經由靜脈內投服選擇之劑量。安慰 劑亦係經由靜脈內投服。 取得投服氯硝西泮及安慰劑後之相關於時間的EEG 參數之動力間製圖（絕對能量）。 亦可利用，如：史丹福睡意量尺評估鎭靜效果。 -89 - 200824693 這些結果預期可支持配製成用於藥學應用之鼻內投 藥，以供治療癲癇連續發作之氯硝西泮組成物的用途，其 中可見到快速開始抗痙攣效果，但僅有最少之不良效果 (諸如增加最少之鎭靜效果）。 實例10 氯硝西泮之認知效果 _ 本實例利用神經認知試驗描述配製成用於鼻內投藥之 ~ 氯硝西泮組成物的藥物動力學效果。使用認知藥物硏究之 電腦化評估系統（“CDR”Reading，英國）的測試選擇。此 硏究通常爲雙肓、隨機化、安慰劑對照之交叉設計。對照 組中可經由靜脈內投服（i.v.)接受選擇劑量之氯硝西泮 及安慰劑。 認知功能通常係利用注意力工作電池（attentional task battery )來評估注意力及利用文字認知工作來評估二 φ 期記憶。在各期之篩選及第1天之認知試驗程序訓練後， 通常係在給藥前及第1天給藥後30、60、90、120及180 分鐘完成CDR評估。執行CDR電腦化認知評估系統之注 意力工作電池及利用文字認知工作。各次評估時均提出並 行工作，以容許經由提供不同、但相同刺激來重複評估。 試驗可以如下列之順序進行：提供文字；單純反應時 間；數字警覺性；選擇反應時間；及文字認知。自收集之 數據產生二種複合計分：注意能力，來自三種注意力工作 之速度測量値均堅定落於單一因子上；注意持續性，自注 -90- 200824693 意力工作選擇反應時間及數字警覺性取得之正確測量値均 反映個體保持注意及避免錯誤之能力。通常係在各給藥時 間計算各測量値之統計摘要（η，數目；平均値；sem，標 準誤；sd，標準差；中間値；min，最小；max，最大；及 缺掉）。在各測量値方面，將各給藥前（基線）數據自各 給藥後時間之數據減去，以衍生“與基線之差異”積分。 利用未調整之積分及衍生自“與基線之差異”積分繪製圖 形（平均値±^111)。 利用，例如：sAS PROC MIXED對數據進行重複測量 値共變數分析（ANCOVA )。在模型中配合順序、劑量、 期間、時間及給藥*時間交互作用之固定條件。在模型中 配合個體順序中之隨機效果。使用給藥前（基線）積分作 爲共變數。顯著性通常係在〇.〇5之水準測試。 對大部分測量而言，預期所選擇之氯硝西泮的治療劑 量將顯示出對顯著損害有些許統計上之支撐。預期氯硝西 泮顯示出劑量倚類性認知（注意力及二期記憶）損害之樣 式。損害大小及期間將由增加氯硝西泮之劑量來決定。 實例11 氯硝西泮在25^下在乙二醇醚中之溶解度 咸信有多種乙二醇醚溶劑可被接受用來溶解在鼻內塗 藥中之苯並二氮呼。比較下表中所示之四種乙二醇醚。 -91 - 200824693 表21 ___ 乙二醇酸 1 # 名稱 CAS 通用 密度 1 1，2-二甲氧基乙烷 110-71-4 二乙二醇二甲醚 0.867 2 二(乙二醇)甲醚 111-77-3 甲基卡必醇 1.023 3 二乙二醇單乙醚 111-90-0 卡必醇DEGEE 0.999 4 二(乙二醇)二乙醚 112-36-7 二乙基卡必醇 0.909

稱10毫克重之氯硝西泮，將其加入Pfeiffer單劑量 噴霧系統（Pfeiffer of America， Princeton，NJ)中所使 用之玻璃小瓶中。依下述製備四種溶劑之各四個樣本。將 1 30微升之各溶劑用吸管移至小瓶中，並以黑色氯丁基橡 皮塞塞住。然後，將樣本音波粉碎1 〇分鐘再將各溶劑之 二個樣本貯存在2 5 °C中至少1 2小時。 自小室中移出玻璃小瓶並在5000rpm下離心2分鐘。 然後自各玻璃小瓶中採取1 〇微升樣本，精確稱重並以1 毫升乙腈稀釋之。利用無管柱之Agilent HPLC系統、10 微升注射體積、乙腈流動相（〇.3毫升/分鐘）及在35〇nm 處以UV偵測而藉UV分析藥物濃度。根據以空白樣本及 標準溶液進行之校準，自峰値面積計算溶解度。 -92- 200824693 表22 氯硝西泮在乙二 醇醚中之溶解度 溶劑 在25°C之溶解度毫克/¾升 1，2-二甲氧基乙烷 39.3 二(乙二醇)甲醚 56.4 二乙二醇單乙醚(DEGEE) 41.8 二(乙二醇)二乙醚 19.0 實例12 Φ 氯硝西泮在三種溫度下在乙二醇醚中之溶解度 利用實例11之程序（在25 °c之溶解度包含在下表中 以供參考）。將樣本貯存在冷藏室或冷凍室中至少1 2小 時，此時沈澱物大致上已沈下。然後，將-1 5 °C及5 °C樣本 之玻璃小瓶分別在及5°C，5000rpm下離心2分鐘。 下示之溶解度指出在這些乙二醇醚中之氯硝西泮的溶解度 在25 °C及-1 5 °C間僅有很少之溫度倚賴性。這些組成物可 貯存在至高3 0°C及至低-15 °C間且維持其穩定性。 表23 氯硝西泮在乙二醇醚中之溶解度（毫克/毫升） 溶劑 -15C 5C 25C 1，2-二甲氧基乙烷 35.2 35.7 39.3 二(乙二醇)甲醚 58.1 53.9 56.4 二乙二醇單乙醚 43.3 37.7 41.8 二(乙二醇)二乙醚 19.5 18.5 19.0 實例13 -93- 200824693 氯硝西泮在含水溶劑中之溶解度 完成在1 00%溶劑中測量溶解度後將來自實例1 1之樣 本部分移液至另一組玻璃小瓶（Pfeiffer單劑量玻璃小 瓶）中並與不同比例之ΡΗ6·8緩衝水混合，以形成120微 升之20%至80%乙二醇醚之水性混合物。所有樣本顯示出 立即沈澱。將玻璃小瓶貯存在25 °C約1天。採樣前，將玻 璃小瓶在23°C，5000rpm離心2分鐘。結果顯示於下；來 自實例1 1之純溶劑溶解度包含在供中以供參考。水含量 增加時溶解度降低。 表24 氯硝西泮在溶劑/水溶液中之溶解度（毫克/毫升） %溶劑 100 80 60 40 20 溶劑 %水 0 20 40 60 80 1，2-二甲氧基乙烷 39.3 29.6 9.2 0.64 0.18 二(乙二醇)甲醚 56.4 18.9 2.8 1.00 0.26 二乙二醇單乙醚 41.8 21.8 4.5 0.52 0.30 二(乙二醇)二乙醚 19.0 38.8 8.5 1.23 0.31

實例14 人類藥物動力學硏究結果 依實例8中之描述進行人類藥物動力學硏究。 在一種三期交叉設計中讓1 5位年輕、健康男性自願 者經由口服、靜脈內及鼻內途徑接受1毫克氯硝西泮之單 位劑量。氯硝西泮之鼻內調和物在給藥後G · 2 0 0小時（約 -94- 200824693 12分鐘）產生其中位數Tmax，但口服後係在2小時產生 中位數Tmax，而鼻內投藥係在0.1小時產生中位數° 經由口服、鼻內途徑投服1毫克氯硝西泮後之平均Cmax 値彼此相當（鼻內途徑··平均値土 SD，7.12 ±3· 8 1奈克/毫 升，口服途徑··平均値±SD，7.64 :1:1.74奈克/毫升而靜脈 內途徑：平均値土SD，42.5 ±10.8奈克/毫升）。因此，鼻 內途徑之Cmax爲口服途徑之Cmax的93%，靜脈內途徑之 Cmax 的 17% 〇 經由靜脈內與口服途徑投服1毫克氯硝西泮後24小 時之AUCs二者類似（分別約106及95奈克•小時/毫 升），而經由鼻內途徑投藥後24小時之AUC (約58奈 克·小時/毫升）大約爲經由靜脈內途徑投服後所觀察到者 之一半。因此，AUCin : AUCiv =1 : 1·83，而 AUCin : AUC。^ =1 : 1.64，而相對於靜脈內投服之生物利用率爲 5 5 %，相對於口服之生物利用率爲6 1 %。 硏究中所記錄之最常見的副作用爲嗜睡及鼻部不適 (分別爲75.6%及26· 7%)。據報導，鼻內給藥後15位實 驗對象中有1 〇位（約67% )感到嗜睡，口服給藥後1 5位 實驗對象中有1 3位（約8 7% )感到嗜睡。靜脈內給藥後 約93 %之實驗對象報告嗜睡或鎭靜（1丨/ i 5感到嗜睡， 3 /1 5感到鎭靜）。鼻內給藥後1 5位實驗對象中有1 2位 (約8 0 % )感到鼻部不適。實驗參數中無臨床上相關之變 化。 投服1毫克氯硝西泮後，在三種投藥途徑中之24小 -95- 200824693 時血液樣本收集中，7-胺基-氯硝西泮之濃度持續增加。經 由鼻內途徑投藥之平均Cmax値（I·〗7奈克升）低於糸M 由靜脈內及口服途徑投藥所觀察到者。經由靜脈內與口服 途徑投藥後之平均Cmax値相類似（約2奈克7笔升）°經 由鼻內途徑投藥之平均AUCt (約I6·9奈克·小時/笔升） 低於經由靜脈內及口服途徑投藥所觀察到者。靜脈內及口 服途徑投藥之平均AUCt相類似（30奈克.小時/毫升）。 實例15 qEEG製圖 依實例9中之描述爲實例14中所描述之15位自願者 測定EEG略圖。根據自基線開始之變化’氣硝西泮產生 苯並二氮呼之EEG變化特徵。靜脈內投樂後之效果最 大，接著爲鼻內及口服途徑投藥。在不同時間點產生之不 同投藥途徑間的統計學上有意義的差異間接證明不同效果 之不同期間。一般而言’經由所有三種途徑投服之氯硝西 泮增加EEG上之δ及β活性，降低α及Θ活性。此活性 圖樣在經由鼻內及靜脈內途徑投服氯硝西泮後很快即引人 注意（給藥後之前3至6分鐘），在口服後稍晚出現（約 給藥後2小時）。 聚焦在時間進程對β-1相對力量之效果的事後多重分 析（post-hoc analysis)確立鼻內投服氯硝西泮有效且效 力幅度類似於口服投藥之效果，具有介於靜脈內及口服途 徑投藥間之中度延遲作用時間。加上來自繪圖分析之δ、Θ -96- 200824693 及α的EEG略圖，這些結果符合先前以不同之苯並二氮 呼藥物進行之硏究的藥物動力學變化報告。 實例16 氯硝西泮之認知效果 依實例1 〇中之描述爲實例1 4中所描述之1 5位自願 者取得精神運動及主觀試驗之結果。在客觀試驗（Leeds 精神運動試驗）及主觀試驗（Bond and Lader VAS及 Karolinska睡眠量尺）中，與靜脈內調和物相較下，鼻內 氯硝西泮噴霧顯示出作用快速開始。靜脈內及鼻內投藥之 作用在約30分鐘時開始明顯，而口服投藥之作用在約2 小時開始明顯。 本技藝之技術熟習人士可清楚明白在不悖離本發明之 精神及範圍的情況下，上述之較佳體系可具有多種不同之 修改及變化。這類修改及變化係在本發明之範圍內。 【圖式簡單說明】 第1圖呈現在7小時（h )之期間內每單位面積滲透 之氯硝西泮的平均累積量的圖示。圖形中，水平軸爲以小 時（h)表示之時間，垂直軸爲每單位面積滲透之藥物的 平均滲透量（微克/平方公分）。 第2圖呈現在三醋酸精或丙二醇與四氫糠醇聚乙二醇 醚之混合物中之氯硝西泮的溶解度。圖形中，垂直軸爲以 毫克/毫升表示之CLO (氯硝西泮）的溶解度，水平軸爲 -97- 200824693 三醋酸精（ΤΑ)或丙二醇（PG)與四氫糠醇聚乙二醇醚 (GF)之百分比（％)。圖形中，PG/GF之線性回歸爲y = -0·6539χ + 66·185，其相關係數爲 R2 =0.9 9 0 4 ; T A/GF 之 線性回歸爲 y =-〇.6229x + 67.597，其相關係數爲 R2 = 0.999 〇 第3圖呈現5種氯硝西泮調和物之刺激數據。刺激値 之比較係以相對於醋酸溶液及視特朗（setron )調和物來 表示。圖形中，垂直軸係整合爲時間函數之血壓（積分） 而水平軸爲下列以50微升劑量測試之調和物：CLZ20 80 — 10毫克/毫升氯硝西泮、20%特可托® ( Transcutol ) (TC ) 、80 % 聚乙二醇（PEG) ;CLZ5050---10 毫克 /毫升 氯硝西泮、50%TC、5 0%PEG; CLZ70G30T---10 毫克 / 毫升 氯硝西泮、70%GF、3 0%TA ； CLZ20T80P02T---10 毫克 /毫 升氯硝西泮、l〇%TC、90%PEG 200 及 0.2%吐溫 20 (Tween20 ):生理食鹽水（陰性對照組）；醋酸 (HOAc ) 0.3% (陽性對照組）；醋酸（HOAc ) 1 .5% (陽 性對照組）；視特朗（陽性對照組）。 第4圖呈現以平均血壓變化爲根據之8種氯硝西泮調 和物和對照調和物的刺激積分數據。生理食鹽水、醋酸溶 液及視特朗調和物之數據欄（即，‘最右邊四欄）代表自先 前實驗取得之數據並插入供比較。圖形中，垂直軸係整合 爲時間函數之血壓（積分）而水平軸對應於測試之調和物 (該調和物列於表1 1中）。生理食鹽水係作爲陰性對照 組；0 · 3 %醋酸（Η Ο A c )及〇 · 9 % Η Ο A c爲陽性刺激對照 -98 - 200824693 組；視特朗爲陽性刺激對照組。 第5圖呈現在兔子硏究中之藥物動力學數據。圖形 中，垂直軸爲氯硝西泮之濃度（CLZ濃度（奈克/毫 升）），水平軸爲以分鐘表示之時間（時間（min.))。 數據繪圖之說明如下：調和物I，密閉之圓形；調和物 Π，密閉之正方形；調和物m，正三角形；及調和物IV， 淡X。帶有深X之上方數據線對應於靜脈內投藥之數據。 第6圖摘要投服本發明氯硝西泮組成物之測試動物鼻 腔的組織病理學結果。圖形中，垂直軸爲受影響之動物的 數目；水平軸爲藉一組組三條帶狀圖所組成之測試組。在 各帶狀圖中，垂直帶之順序如下：積分〇;積分1;及積 分2。 第7圖顯示3公分處煙羽區與非水性溶劑基質黏性間 之相關性。所示之水之數據係用於比較（□)。溶劑基質 之比較呈現於表19中。圖形中，垂直軸爲以公分計之煙 羽區，水平軸爲黏性（cP)。 第8圖顯示噴霧角度與非水性溶劑基質黏性間之相關 性。所示之水之數據係用於比較（□)。溶劑基質之比較 呈現於表19中。圖形中，垂直軸爲噴霧角度（以度 計），水平軸爲黏性（c P )。 第9圖顯示煙羽不對稱性（Dmax/Dmin )與非水性溶劑 基質黏性間之相關性。所示之水之數據係用於比較 (□)。溶劑基質之比較呈現於表1 9中。溶劑基質之組 成物呈現於表19中。圖形中，垂直軸爲（Dmax/Dmin )， 而水平軸爲黏性（cP )。 99-

Claims (1)

1. 200824693 ^ 十、申請專利範園 1 · 一種用於透黏膜投藥於哺乳動物之藥學組成物，其 包含 一種溶劑系統，其包含氯硝西泮（clonazepam)可溶 解於其中之第一種溶劑（此第一種溶劑能滲透入鼻黏膜組 織），及氯硝西泮在其中之溶解度較在第一種溶劑中之溶 解度差的第二種溶劑，其中該溶劑系統包含1 〇% (重量/ _ 重量）或更少之水性緩衝溶液，先決條件爲該溶劑系統不 ~ 包含游離之聚乙二醇聚合物；及 治療有效量之氯硝西泮。 2. —種用於透黏膜投藥於哺乳動物之藥學組成物，其 包含 一種溶劑系統，其包含氯硝西泮可溶解於其中之烷基 醚溶劑，此溶劑能滲透入鼻黏膜組織，及 治療有效量之氯硝西泮， φ 其中該組成物爲單相且均質。 3 .如申請專利範圍第1項之組成物，其中該第一種溶 劑爲二乙二醇單乙醚或四氫糠醇聚乙二醇醚。 4 .如申請專利範圍第1項之組成物，其中該第一種溶 劑之存在量係在約30重量％至約70重量％之間。 5 .如申請專利範圍第4項之組成物，其中該第二種溶 劑爲三醋酸甘油酯或丙二醇。 6.如申請專利範圍第1或2項之組成物，其中該氯硝 西泮之存在量係介於0.1重量％和20重量％之間。 -100 - 200824693 ， 7·如申請專利範圍第1或2項之組成物，其進一步包 含一或多種選自下列之成分：界面活性劑、抗氧化劑、藥 學上可接受之聚合物、多元醇 '脂質、黏膜滲透增強劑、 著色劑、調味劑、麻醉劑、共溶劑及調整滲透壓之作用 劑。 8 ·如申請專利範圍第1或2項之組成物，其中該組成 物係配製成可在-15°C與3 0°C之間噴出。 H 9·如申請專利範圍第2項之藥學組成物，其中該烷基 醚溶劑係選自：1，2-二甲氧基乙烷、二（乙二醇）甲醚、 二乙二醇單乙醚及二（乙二醇）二乙醚。 10·如申請專利範圍第9項之藥學組成物，其中該烷 基醚溶劑爲二乙二醇單乙醚。 1 1 .如申請專利範圍第7項之藥學組成物，其中該抗 氧化劑係濃度爲100至3000 ppm之丁羥基甲苯。 12.如申請專利範圍第1或2項之組成物，其中該組 φ 成物係以介於約25微升和150微升之間或介於約50微升 和3 00微升之間的單位治療劑量使用。 1 3 .如申請專利範圍第1或2項之組成物，其中該氯 硝西泮之治療有效量爲每單位劑量介於約〇·1毫克和5.0 毫克之間。 1 4. 一種用於透黏膜投藥於哺乳動物之包含氯硝西泮 的藥學組成物，其特徵爲（Ο氯硝西泮之Tmax，在單次 透黏膜投藥後，不超過2小時，及（ii )氯硝西泮之生物 利用率，在單次透黏膜投藥後，不低於經口遞送之同等劑 -101 - 200824693 量氯硝西泮之生物利用率的30%。 1 5 ·如申請專利範圍第1 4項之組成物，其中在單次透 黏膜投藥後的該氯硝西泮Tmax低於或等於30分鐘且單次 透黏膜投藥後的該氯硝西泮生物利用率高於或等於該經口 遞送之同等劑量氯硝西泮之生物利用率的55%。 16.—種用於透黏膜投藥於哺乳動物之包含氯硝西泮 的藥學組成物，其特徵爲（i )氯硝西泮之Cmax，在單次 透黏膜投藥後，至少爲經口遞送之同等劑量氯硝西泮之 Cmax的約75%，及（ii)氯硝西泮之生物利用率，在單次 透黏膜投藥後，不低於該經口遞送之同等劑量氯硝西泮之 生物利用率的30%。 1 7 .如申請專利範圍第1 6項之組成物，其中單次透黏 膜投藥後的該氯硝西泮Cmax高於或等於該經口遞送之同 等劑量氯硝西泮之Cmax的90%且單次透黏膜投藥後的該 氯硝西泮生物利用率高於或等於該經口遞送之同等劑量氯 硝西泮之生物利用率的5 5 %。 1 8 . —種用於鼻內投藥於哺乳動物之包含氯硝西泮的 藥學組成物，其特徵爲（i )在單次鼻內投藥後，氯硝西 泮之AUC ( AUCin )對經口遞送之同等劑量氯硝西泮之 AUC ( AUCoral )的比例爲至少約 AUCin : AUCora! =1 ： 3.3，其中該AUC値係在相同期間內測定。 19.一種用於將活性劑投藥於需要彼之哺乳動物的方 法，該方法包含： 經由該哺乳動物之鼻黏膜將氯硝西泮遞送至該哺乳動 -102- 200824693 物之血流中，其中該氯硝西泮係在包含申請專利範圍第1 至1 8項中任一項之組成物的劑型中遞送。 20.如申請專利範圍第19項之方法，其中該哺乳動物 係罹患癲癇連續發作且係在癲癇發作症狀開始時遞送，或 者其中該哺乳動物係患有選自下列之焦慮狀態：恐慌發 作、社交恐懼症、社交焦慮及操作焦慮。 2 1 · —種製造氯硝西泮組成物之方法，其包含 將申請專利範圍第1至1 8項中任一項之溶劑系統和 氯硝西泮混合，以提供適用於鼻內投服氯硝西泮之單相均 質溶液。 -103-