TW200529808A - Quinone series pulmonary disease - Google Patents

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200529808 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 之肺癌治療劑及 本發明乃係以四烯曱萘醌為有效成分 肺癌癒後改善劑有關。 【先前技術】 最近，肺癌被定位為死亡率最高之疾病（參考文獻υ。 60%以上之肺癌病患被診斷為無法採用外 期（advanced stage)(參考文獻2)。在此情形下，=常二=日 化學治療劑加以治療，但是其成功效㈣常低（參考曰文獻3 :二又，大多數之化學治療劑’其副作用強，會顯著影 :病心之士:舌品質而成為問題。因此，就肺癌病患而言， 殷切期待高藥效且安全性優異之藥劑及治療方法。 維生素K係將存在於維生素κ依賴性蛋白質之N末 端之麩胺酸殘基’轉換為具有生理活性之卜縣麵胺酸之 酵素r-麵胺醒羧化酶之輔酶.同時，維生素κ為血液凝 固II因子（凝血酶原（prothrombin))、νπ、ΙΧ或χ 素Κ依賴性蛋白質之生合成上不可或缺之維生素。 維生素Κ類係由天然之K1(植物甲萘醌 (phytonadione))、K2(甲基萘酉昆類（menaqUin〇ne)、四烯甲萘 酉昆）或合成化合物之K3(甲萘醌（menadione))所構成。其 中’难生素K2 ’特別是四烯甲萘醌已做為骨質疏鬆症之治 療劑而供販賣。 據報告’四烯甲萘醌可抑制肝癌細胞株（Hep3B、Hep40) 之G殖（參考文獻6至8)。又，已知對於白血病細胞（Primary， 5 3]6762 200529808 —HL_60等），四稀曱雛可誘導細朗亡或分化（參考文獻5 至12)。此外，有報告亦記載四烯曱萘醌侧鏈上之槐牛兒 基拢牛兒醇在腫瘍細胞株（Η]_6〇、Κ562、MQh3、 • C〇1〇32〇DM)上（蒼考文獻u);或四烯甲萘醒類似物曱蔡醒 -3、甲萘醌-4及甲萘醌-5等初代培養白血病細胞中（參考文 '獻14)能誘導細胞凋亡。 〆 據報告四烯甲萘醌於白血病細胞，引起分化誘導，而 不僅對於白血病有效，對於固形腫瘍也有效（參考文獻15)。 然而，這些文獻中僅記載在試管中（in vitro)之效果， 對於肺癌之臨床效果則不詳。 另外’近來亦知四烯甲萘醌對於肝癌治療後之病患可 抑制其肝癌之再發而提高其生存率（參考文獻16)。然而， 對於癌症之臨床藥劑之功效隨癌症種類而異，乃有關業者 之技術常識，因此，隨各種癌症種類有分別進行臨床試驗 之需要。 • 在上述背景下，對於肺癌病患投與四烯甲萘醌等之維 生素K2，能否抑制肺癌之進行，以及藉由抑制肺癌腫瘍之 增大而改善癒後情形，迄今沒有臨床資料而未能詳明。 參考文獻： 6 316762 200529808 1 ) Parkin DM? Bray F? Ferlay J and Pisani P. Internationa] Journal of Cancer. 94: 153-156,2001 2 ) Fry WA, Phillips JL and Menck HR. Cancer. 86: 1867-1876, 1999 3 ) Fry WA, Phillips JL and Menck HR. Cancer. 86: 1867-1876, 1999 4 ) Noda K? Nishiwaki Y? Kawahara M, Negoro S5 Sugiura T5 Yokohama A, Fukuoka M? Mori K. Watanabe K? Tamura T? Yamamoto S. Saijo N and The Japan Clinical

Oncology Group. New England Journal of Medicine. 346: 85-91, 2002 5 ) Schiller JH5 Harrington D, Be]ani CP? Langer C5 Sandler A. Krook J. Zhu J5

Johnson DH and The Eastern Cooperative Oncology Group. New England Journal of Medicine. 346: 92-98, 2002 6 ) Carr BI. Wang Z and Kar S. Journal of Cell Physiology. 193: 263-274, 2002 7 ) Bouzahzah B? Nishikawa Y. Simon D and Carr Bl. Journal of Cell Physiology. 165: 459-467, 1995 8 ) Nishikawa Y5 Carr Bl, Wang M5 Kar S, Finn F, Dowd P5 Zheng ZB? Kerns H and

Naganathan S. Journal of Biological Chemistry. 270: 28304-28310, 1995 9 ) Yaguchi M, Miyazawa K5 Katagiri T5 Nishimaki J. Kizaki M, Tohyama K and

Toyama K. Leukemia, ]]： 779-787, 1997

1 0 ) Yaguchi M, Miyazawa M, Otawa M5 Katagiri T? Nishimaki ). Uchida Y5 Iwase O, Gotoh A? Kawanishi Y and Toyama K. Leukemia, 12: 1392-1397, 1998 1 1 ) Nishimaki J. Miyazawa K, Yaguchi M, Katagiri T. Kawanishi Y5 Toyama K, Ohyashiki K9 Hashimoto S, Nakaya K and Takiguchi T. Leukemia, 13: 1399-1405, 1999 12) Miyazawa K. Yaguchi M, Fimato K, Gotoh A5 Kawanishi Y5 Nishizav^a Y, You A and Ohyashiki K. Leukemia, 15: 1 ] Π-ll 175 2 001 13) Ohizumi H? Masuda Y? Nakajo S5 Sakai I, Ohsawa S and Nakaya. K Journal of Biochemistry. ]]7: 1]-】3, 1995 14) Yaguchi M5 Miyazawa K5 Katagiri T5 Nishimaki J5 Kizaki M? Tohyama K and Toyama K. Leukeinia. ] 1: 779-787, 3 997 316762 200529808 1 5)特開平6-305955號公報。 16)國際公開第03/105819號小冊子。 【發明内容】 有鑑及上述情況㈣行，其簡決之課題在對 肺癌病心提供高藥效且安全性優異之藥劑及治療方法。

本發明研究者為解決上述課題，再三深入研^士果， =現對肺癌病患在臨床上投與四埽甲麵，可抑㈣癌之 進仃’以及抑制肺癌腫瘍之增大藉此而能 形，並且長期投與也不會產生副作用而完成本發日 Γ 即，本發明有關下列各項·· 成：生素K2或其水合物為有效成分之肺癌用醫藥組 ()t ΐϊ〇)項所記載之醫藥組成物’係供治療肺癌切 癌癒後之改善用者。 4肺 (3) (4) (5) (6) 以對病患投與有效量之含 效成分之醫藥組成μ 素 或八水合物為有 、、、、成物為4寸徵之肺癌之治療方法。 以對病患投與有效量 效成分之醫藥电…：素或其水合物為有 v、、成物為彳寸彳政之肺癌癒後之改善方、本 ‘造肺癌治療劑用 / 。 制、止姑广故 維生素K2或其水合物之用途。 衣:le肺癌瘡後改盖 途。 《改°别用之維生素K2或其水合物之用 劑之 之治 依攄太择日項中，維生素K2可為四烯甲萘醌。 维峰iio ^已確認做為肺癌之治療劑及癒後改善 、’'好為四稀甲萘·之有效性。使用本發明 3】6762 8 200529808 -療劑及癒後改善劑，肺癌病病患之治療及癒後之改善 可能。 ’' 又1依據本發明對於肺癌病病患之維生素K2,最好是 ，四烯曱萘醌做為治療劑及癒後改善劑之效果之外，長期二 投與維生素K2，最好為四烯曱萘醌，也能期待極高安全 性’因此藉繼續長時間治療’能大幅度改善肺癌病病患 生活品質成為可能。 【實施方式】 •實施本發明之最佳途徑： 本發明之實施形態說明如下，下述實施形態僅為說明 ^發明之例舉’本發明並非侷限於該範圍。本發明在不脫 離其主旨之範圍内，可藉由各種形態而實施。 、又，本說明書中所引用之文獻及公開公報，專利公報 或其他專利文獻，亦做為參考納入本發明說明書中。 1 ·本發明之概要 • 本發明研究者在臨床上發現藉由投與維生素K2代表 之四烯曱奈醌，能抑制肺癌之進行及抑制肺癌腫瘍之增 大而改善癒後，且更進而發現長期間投與也不會發生副作 用，而完成了本發明。因此，本發明乃有關含有維生素K2， =好以四烯甲萘醌為有效成分之醫藥組成物，特別是肺癌 /口療劑及肺癌癒後改善劑。另外，對於病患投與有效量之 含維生素K2，較好以四烯甲萘醌為有效成分之醫藥組成物 之肺癌治療方法及肺癌癒後改善方法，以及製造肺癌治療 劑及肺癌癒後改善劑為目的之維生素K2，較好為四烯曱萘 316762 9 200529808 6昆j用途也包括在本發明之範圍。維生素〇，較 甲奈醌之水合物也在本發明之範圍。 、 2·維生素K2 、、准生# K2(甲奈醌)在生物體内係由腸内細菌所合 成’已知有構造類似之各種同系物存在。甲萘 ； 如下式（1)所示。 稱仏式

式⑴中，η不1至7之整數。本發明所使用之維生素 =中、，較佳之代表性維生素Κ2為η=4(即，甲萘醌-句之 全反式異構物之四婦曱萘醌。 本發明中所使用之四烯曱萘醌乃化學名為2_曱基·％ φ四異戊烯基-1，4_萘醌，其構造式如下： 土 〇

四烯甲蔡醌係黃色結晶或油狀物質，無臭無味，易為 光線所分解。又，幾乎不溶於水。四烯曱萘醌又稱為維生 素Κ_π ’維生素Κ2(簡稱VK2)、VK-II，本發明說明書中 10 316762 200529808 亦簡稱為「VK2」。 四稀甲奈醌等維生素K2之藥理作用乃有關在血液凝 固因子（凝血酶原、VII、ιχ、χ)之生合成過程中，將 .酸殘基轉變為具有生理活性之Τ ·絲麵胺酸時之緩基化 ^應：即’四烯甲萘醌等維生素Κ2之藥理作用為促ς正 血酶原等之肝合成、賦活生物體之止血機制、 止血生理作用者。 I發明之醫藥組成物之有效成分維生素κ 籲烯甲蔡酉昆，同時可為其無水物或亦可形成為水合物^四 开:：甲奈醒有多元結晶形態存在，但不偈限於特定之結晶 、:：物了Γ壬意之單一結晶形態，亦可為各種結晶形態之 :二。另外’本發明所使用之維生素κ2，較好為四稀甲 …比或^水合物亦包括在生物體内分解所產生之代謝物。 方法製月血中Γ使用之維生素Κ2或其水合物可依據周知 •又易衣侍。又’可從合成廠商以市販品取得。 據周知方明成中所二用，四婦甲蔡酉昆或其水合物也可依 49-5价二除可按照代表性例舉之曰本特開昭 :〇戒公報所公開之方法即容 成廠商容易取得苴市販口 ^ 』由口 「凱兹膠壹「1 四烯甲萘醌有膠囊劑(例如 注射劑(：：」-13拉開-膠囊」(以上皆屬衛材公司製品))、 /土牙r d (例如凱茲_N注射 凱兹糖裝（衛材公 :材么〜品））、糖漿劑（例如 何a』衣°。））寺製劑市販品。 本毛明所使用之維生素K2也可投與在體内代謝 ]] 316762 200529808 而成為维生素Κ2，軔缸& ,.子為四烯曱萘醌之物質。在體内代謝 成為四稀曱奈酉昆之物暂* ^ 貝亚然知'別限制，例如可為維生素 K1、植物曱_醌等。植物芰 ^ X -1 甲7r、酉比有K-one膠囊劑（商品名， :材公=)、κ，鍵劑(商品名，衛材公司製品)或 w'商。。名’衛材公司製品）等之市販品可購得。 3·肺癌用醫藥組成物 丁 ^發明提供含維生素K2，較好為四婦甲萘醌或其水合 效成刀之肺癌用醫藥組成物。本發明之醫藥組成物 可供使用作為例如肺癌治錢及肺癌賴改善劑。 …本發明中所指肺癌，包括腺癌（adenocarcinoma)、肺扁 平上皮細胞癌（亦稱為鱗狀細胞癌（sq_0Us cell 咖⑽01^))、腺鱗狀細胞癌（aden〇SqUam〇us cdl carClnoma)、大細胞癌（丨㈣“η咖）、小細胞癌 (smaU cell carcin〇ma)等（參考日本肺癌學會編臨床.病 理、肺癌處理規定’改訂第5版’東京，金原出版社， 年下里幸雄，WHO，肺及胸膜腫瘍組織型分類第三版解 說：肺上皮性腫瘤。肺癌2〇〇〇; 4〇U至1〇)。本發明中， 肺癌之病期無特別限制。例如依照TNM分類法所分類之 各種病期（IA、IB、IIA、IIB、IIIA、mB、IV 期）皆包括 内。 本發明中，「肺癌治療劑」乃指對罹患上述肺癌之病患 具有抑制肺癌進行之作用，使肺癌腫瘍消失之作用，或^ 制腫瘍增大之作用的肺癌用醫藥組成物。 本舍明中’「癒後」乃指疾病之經過或終結之意。本發 316762 12 200529808 :月中所指肺癌癒後改善劑乃係具有抑制肺癌之進 p制肺癌腫瘍之增大作用之肺癌用醫藥組成物。 〆 產生:劑及癒後改善劑’由於長期投與也不會 就可維持良好生活品質觀點亦極有益。 胸部c;等：醫樂組成物之效果，可藉由胸部χ光照片、 讀結果或身體檢查之病理組織診斷，或腫 瘍標記值而判斷之。上述 4或腫 可為CYFHA2W。 例如非小細胞肺癌 稀甲；=物可直接使用維生素Κ2,較好為四 寺（例如賦形劑、社人叫、崩 ，、子上奋許之載劑 矯臭劑、安定u° '潤滑劑、著色劑、矯味 酸驗值劑、⑽促㈣、界面活性劑、 二:之:腐" 必要時h 文照常用方法製劑化後使用。又， 二二素類、胺基酸等成分。製劑之形態 '=、軟膏劑、貼敷劑，但非揭限在上述劑二 合物為有效成分之醫藥组成物之 但以經π投與較佳。四蝉甲萘醒之膠^:特別限制， 飢兹膠囊劑（衛材公 '' …W可猎由商品名為 而取得，X，糖將匈開膠囊劑 製品)而取得，：：可稭由商品名為凱兹糖漿劑(衛材公司 劑(衛二：射劑可藉由商品名為飢…射 316762 13 200529808 如上述本發明所使用之維生 ^ 謝而成為維生素]^^，較”，也可採用在體内代 生素们、植物β㈣為四稀甲蔡醒之物質（例如維 品名為K-one膠囊劑（衛 J比之知展劑可藉由商 商品名A ir a司衣品），另外，旋劑可4έ由 汚口口名為K-one錠劑（衛材公 寿曰由 為“e散劑（衛材公司製品相可精由商品名 用夕^本舍明也包括製造肺癌治療劑或肺癌濟後改盖砷 用之:生素K2,較好為四婦甲萘醒或其水合物 分之：：生素Κ2,較好為四烯m戈其水合物為有效成 ==之醫藥組成物，有用於肺癌治療及肺 ^二換吕之’本發明提供對肺癌病患投與有效量之含唯 二Γ較好為四稀甲萘醌或其水合物為有效成分之醫荜 、、成物之肺癌治療方法以及肺癌癒後改善方法。 水人：：ΓΓ有效之維生素K2,較好為四婦甲萘酿或其 ^物之投與量（即，有效量），成人⑽公斤體重）計，通 吊在10至200rng/日範圍，以15至135mg/日較佳，尤其 以30至60mg/日(例如45mg/a)更佳。投與期間並盔特別 限，，例如！至1000日，以7至3〇〇日為較佳。投與期間 :隨肺癌之治療效果或癒後改善效果以及病患狀況（例如 行為能力）而適當設定。 以上述使用方法及用量投與本發明醫藥組成物於病串、 時，可在不發生副作用（即使發生副作用，也不會影響病串、 之微弱程度）下獲得肺癌之治療效果或癒後改善效杲。^ 貫施例 316762 ]4 200529808 以下藉具體例舉說明本發明，但本發明不侷限在其範 •圍。又，實施例中，或稱四烯曱萘醌為「VK2」。 實施例1 :藉由四烯曱萘醌抑制肺癌細胞株之增殖 本實施例中，以6種肺癌細胞株試驗四烯曱萘醌之增 ' 殖阻礙效果。 •[細胞株] 急性白血病細胞株（Acute Leukemia Cell Line)(HL-60)、小細胞肺癌細胞株（Small Cell)(LU-13 9、LU-130)、肺 鲁爲平上皮癌細胞株（亦即鱗狀細胞癌（Squamous))(LC-AI、 LC-1/sq)、肺腺癌細胞株（Adenocarcinoma)(PC-14、CCL1 85) 以及大細胞肺癌細胞株（Large Cell)(IA-LM)係購自美國 Type Culture Collection(Rockville，MD) 〇 細胞使用添力α 1 0% FCS(Hyclone，Logan，UT)、2mML-麩胺醯胺、青霉素（50U/ml)、鏈霉素（100# g/ml)之RPMI 1640(GIBCO, Grand Island, NY)(下文中，或簡稱為培養基） φ培養基維持其繼代培養。並以指數函數增殖之細胞提供以 下實驗使用。 [試劑及抗體] 四烯曱萘醌購自衛材公司（東京，曰本）。順氯氨鉑 (Cisplatin，下文中或簡稱為CDDP)購自曰本化藥公司（東 京，曰本）。PC5-共軛AP02.7單株抗體（mAb : cIone2.7， 下文中或簡稱為AP02.7)係對發生細胞凋亡之細胞特異性 表現之7A6抗原反應者，購自immunotcch公司（馬賽，法 國）0 316762 200529808 [活細胞數之評估] 將肺癌細胞株曝露在各種濃度（01至5〇〇#M)之四烯 曱萘醌96小時之後，回收培養之細胞，藉由流動細胞儀 (flow cytometry)測其活細胞數。活細胞數乃利用Ep][cs Π型之流動細胞測定儀（曰本貝格曼_哥爾特（Beckman_ Coulter)公司，東京，日本）分析之。 更具體而言，LC-AI、LC-1/sq、PCM4、CCL_185 及 IA-LM，係將曝露於各種濃度（〇1至5〇〇#m)之四烯甲萘 醌96小時之細胞以及未曾曝露之細胞，分別在室溫下，以 胰蛋白酶-EDTA溶液（GIBC0, Grand Is〗and，Νγ)保溫培養 5至1 〇分鐘。然後，回收該細胞並以培養基洗淨1次，為 獲得充分的細胞懸濁液，使用塑膠注射筒以23(}注射針， 使該細胞通過3次。 就LIM39及LIM30而言，將曝露於各種濃度（〇1至 500 "M)之四稀曱萘酿96小時之細胞及未曾曝露之細胞， 刀另j離。回收，在至溫下於騰蛋白酶4〇丁八溶液（gibco

Grand Island，NY)保溫培養5分鐘。為獲得充分之細胞懸 濁液，使用塑膠注射筒以23G注射針，使該細胞通過3次， 再懸濁於PBS中。 就HL 60而3，將曝露於各種濃度（〇〗至M)之 四烯甲萘酉昆96小時之細胞及未曾曝露之細胞，分別離心回 收。為獲得充分之細胞懸濁液，使用塑膠注射筒，以23〇 注射針使該細胞通過3次，再懸濁於pBS中。 其次，將該細胞在代下，使用含1% pi(pr〇pi〇dium 316762 200529808 iodide，Sigma Chemical 公司製品，St，L〇uis，M〇)之溶液 •染色。 首先，將檢測各個細胞株之活細胞用之細胞圖之門環 區域依據PI染色陰性區域（即，示活細胞）以及前方和側方 散亂光密度加以設定。然後，為獲得均一之細胞懸濁液， •將細胞輕輕吸取，導入至流動細胞測定儀。將活細胞之門 環區域内之細胞數，就各個細胞株測定60秒鐘。 其結果示於第1圖。各圖之縱軸示活細胞之相對數目 鲁（Relative cell number)(%)，橫軸示四稀甲萘醌（νκ2)之濃 度。四烯曱萘醌和HL-60同樣對所有肺癌細胞株之細胞增 殖係以用量依賴性加以抑制（參照第丨圖）。就所有之細胞 株，觀察到藉由四烯曱萘醌處理之有意的增殖抑制效果， IC5〇 為 7.5 至 75//M。 實施例2 :藉由四烯曱萘醌誘導肺癌細胞株之細胞凋亡 本實施例中，就肺癌細胞株中之增殖抑制是否因細胞 春凋亡誘導所造成者進行試驗。 細胞之培養及懸濁液之調製按照實施例1同樣方法進 行。為觀察形態學上之變化，細胞懸濁液係使用細胞離心 機（Shandon Cytospin 2(Shandon公司製品’匹兹堡，賓 州）），按照規定方法將預備好之細胞（prepared cell)進行 May-Giemsa染色。細胞使用LU-139(小細胞肺癌細胞株： Small Cell)、LC-AI(肺扁平上皮癌細胞株：Squamous)以及 PCM4(肺腺癌細胞株：Adenocarcinoma)。 第2圖上段圖片示對照細胞株（Control)，下段圖片示 316762 17 200529808 經四烯曱萘醌處理之細胞株（VK2(+))。在四烯曱萘醌曝露 96小時（96 1111\卩〇511代）之各細胞株（1^-139及1^-八1係使 用10//Μ之四烯曱萘醌，PC-14係使用50//Μ之四烯曱萘 醌），誘發細胞凋亡之細胞顯示典型之形態學上之變化（例 • 如細胞凋亡小體之形成，核之斷片化等）（參照第2圖）。 •為評估誘發細胞凋亡之細胞之百分比率，使用ΑΡ02.7 以流動細胞測定儀解析之。 硫胱胺酸蛋白酶-3活性（Caspase-3 Activity)，乃使用 •含有 PhiPhiLux-G6D2 之基質試藥套劑（Oncolmmunin， College Park, MD)藉由流重力細胞測定儀評估之。四稀曱萘 酉昆處理後，用PBS洗淨細胞，在37°C下和基質試劑保溫培 養60分鐘。硫胱胺酸蛋白酶-3活性係藉由螢光以FL2頻 率（激發波長為488nm)，使用流動細胞測定儀分析之。細 胞使用LIM39(小細胞肺癌細胞株：Small Cell)及LC-AI(肺 扁平上皮癌細胞株：Squamous Cell)。 φ 第3圖上段之各圖示對照細胞群之結果，而下段之各 圖示經四烯甲萘酿處理之細胞群（VK2)之結果。各圖之縱 軸示活細胞之相對數目（％)。「afa」意指本身之螢光強度 (auto-f】uorescence activity)，圖中以％所示之值，意指 AP02.7或硫胱胺酸蛋白酶-3活性陽性細胞之百分比率。 曝露於10//M之四烯曱萘醌96小時之各細胞株（LU-139 及LC-AI)藉AP02.7染色之細胞數目及硫胱胺酸蛋白酶-3 活性有意地增加（參照第3圖）。據此，確認四烯曱萘醌能 誘發肺癌細胞株之細胞凋亡。 316762 200529808 實施例3 :藉由四烯曱萘醌之肺癌細胞株之G0/G1停滞（停 止） 本實施例中，將LU-139及HL-60曝露於四烯曱萘醌 (VK2)72小時之後，評估其細胞周期。 • 細胞之培養及懸濁液之調製按照實施例1同樣方法進 -行。其次，固定細胞並以含有1 %PI、100 // g/ml毛地黃皂 普，0.01 % NaN3，200mg/ml RNase(Sigma 公司製品）及 2.5% FCS之溶液在室溫培養10分鐘使染色。細胞藉由細胞周期 •分析程式 Multi Cycle AV(Phoenix Flow Systems 公司，聖 地牙哥，加州）以流動細胞測定儀分析之。 其結果，LU-139中，四烯曱萘醌和HL-60同樣有意 地增加G0/G1期之細胞集團（參照第4圖，小點表示者）。 據此確認四烯曱萘醌引起肺癌細胞株之G0/G1停滯（停 止）。 以四烯曱萘醌處理之細胞在G0/G1期中，LU-139之 鲁蓄積比率少於HC-60之蓄積比率恐係由於LU-139之加倍 期間長於HL-60之加倍期間所造成（LU-139為96小時，而 HL-60為24小時）。 實施例4 ··對LU-139之四烯曱萘醌及CDDP之併用效果 本實施例中，就LU-139評估四烯曱萘醌及CDDP之 併用效果。 將LU-139先用0.5或10// Μ之CDDP曝露2小時， 然後，再將該細胞曝露於0.5或10//Μ之四烯曱萘醌 (VK2)96小時（處理96hr)。培養細胞、懸濁液之調製以及 19 3]6762 200529808 活細胞數目之測定按照實施例丨相同方法進行。 其結果示於第5圖。第5圖之曲線 相對數目％。 $之“活細胞之 首先對未曝露於CDDP之細胞，以5/m之四稀甲安 酉昆處理者較之未處理之細胞並未表現任何效杲（參考第1 圖中之CDDPG#M群）。然後，—度經CDDP曝露之細胞， 以之四稀甲萘醌處理者，較之CDDp單獨處理，顯 示有意之增殖阻礙（第5圖中，C猜5、1G"M群）。第，5 圖中’「a」示P<0.05，無處理（對照）對VK2單獨者，rb」 不 P<0.05’CDDP 單獨對 VK2+CDDp，「c」示 ρ〈〇〇5 , 單獨對VK2+CDDP。 實施例5 本貝施例中，對於下述肺癌病患進行四稀甲蔡醒之投 與試驗。 [病例]84歲男性 #[診斷]原發性肺癌（低分化型腺癌，IIb期，τ3ν〇ν〇)， 併發慢性肺氣腫。 [現病歷]2_年，主訴有血瘦，在呼吸器專 科門衫。胸部X光照片上，在左巾下肺野確認有5χ 大小之腫瘤性病變，胸部c丁檢查也觀察左右s8處有6χ 5cm大小之腫瘤性病變。施以經支氣管肺部生理檢查，由 病理組織診斷為低分化型腺癌。 、仉2002年9月起，開始經口投與四烯曱萘醌（商品名 為袼拉開·何材公司製品），45mg/日，開始當初；未觀察 20 316762 200529808 到四烯甲萘醌所致之明顯效果，但是在2〇〇2 . 卞1 1月，確 認由於支氣管腫瘤之閉塞所產生之右下葉無氣肺之改善。 另外，非小細胞肺癌之腫瘍標記之CYFRA2i_i(正常 3.5ng/ml以下）上升至36 6ng/m】者，到2〇〇3年8月二低^ M.lng/ml(參考第6圖）。其間，胸部χ光照片上未 瘤陰影之增大傾向’從投與四稀甲萘醌後經過14個月雒柱 極為良好之行為能力。另外，未觀疚 、，寺 致之副作用。 未“Μ與四~甲萘醌所 腫J::X光照片上，確認腫瘤陰影之增大抑制，同時 腫己之-之CYFRA21]也確認降低，並且經 ，後3年以上’仍維持極為良好之生活品質。又，亦：觀 祭到一般抗癌劑投盥時所 喊 用。综合上二；ΛΓ卩制等副作 有效。 四烯甲奈I在肺癌治療上顯示極為 產·_業上 由於可期待維生素K2,較好是四稀曱萘醌 療劑及癒後改善劑跑 果而使肺癌病患之治療變為可行。 1水：物發明’以維生素Κ2’較好為四烯甲萘醌或 二外…=療r.魔後改善劑除了對於肺癌病患有效 藉繼續二四也能期待極高之安全"此 【圖式簡單說明】大大改善肺癌病患之生活品質。 乐圖不错由四歸甲萘酉昆處理之細胞增殖抑制圖。如 316762 2】 200529808 第1圖所示，以四烯甲萘醌處理，其細胞增殖抑制呈現用 量依賴性。 第2圖示藉由四烯曱萘醌處理之形態學上變化。如第 2圖所示，藉由四烯曱萘醌處理，可觀察到發生細胞调亡 之細胞有典型的形態學上變化。 、 第3圖示藉由四烯曱萘醌處理所誘導之細胞凋亡。如 第3圖所示藉由四烯曱萘醌處理，增加αρ〇2·7陽性細胞 及硫胱胺酸蛋白酶-3(caspase-3)之活性。 鲁 第4圖示藉由四烯曱萘醌處理之G0/G1停滯（arrest)。 如第4圖所示，藉由四烯曱萘醌處理，G0/G1期之細胞集 團增加。 第5圖示四烯曱萘醒及CDDP處理對細胞增殖抑制之 併用效果之圖。如第5圖所示，藉由四烯甲萘酉昆及CDDP 處理，可觀察到對細胞增殖抑制之併用效果。 第6圖示投與四烯曱萘醌後之細胞角蛋白19片段 鲁(CYFRA21-1)之變遷圖。如第6圖所示，藉由投與四烯甲 萘醌，CYFRA21-1 由 36.6ng/ml 降低為 16.1ng/ml。 22 316762

Claims (1)

1. 200529808 十、申請專利範圍： L -種肺癌用醫藥組成物，其係含 物做為有效成分。 一水口 2·=請專利範圍第W之肺癌用醫藥組成物，其係供肺 癌治療或肺癌癒後改善用者。 =請專利範圍第丨項或第2項之肺癌用醫藥組成物， 八中’維生素K2係四烯甲萘醒。 4.二重肺癌之治療方法，其特徵為將以維生素〖2或其水 :物作為有效成分之醫藥組成物以有效量投與病患。 肺癌之癒後改善方法，其特徵為將以維生素以或 :水合物作為有效成分之醫藥組成物以有效量投與病 恩。 6. 二申請專利範圍第4項或第5項之方法，其中，維生素 K2係四烯甲萘醌。 7. :種維生素Κ2或其水合物之用途，其係 劑用者。 8·種維生素Κ2或其水合物之用途，其係製造肺癌癒後 改善劑用者。 •如申凊專利範圍帛7項或第8項之用途，其中，維生素 Κ2係四烯甲萘醌者。 八 316762 23