CN114306309A - 萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用 - Google Patents

萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114306309A
CN114306309A CN202111223905.1A CN202111223905A CN114306309A CN 114306309 A CN114306309 A CN 114306309A CN 202111223905 A CN202111223905 A CN 202111223905A CN 114306309 A CN114306309 A CN 114306309A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cancer
compound
dosage form
cells
pharmaceutical formulation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202111223905.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114306309B (zh
Inventor
马金珠
颜亮
刘海军
何俊杰
李萍
申珈馨
吴旭
王毅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing University
Original Assignee
Nanjing University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing University filed Critical Nanjing University
Priority to CN202111223905.1A priority Critical patent/CN114306309B/zh
Publication of CN114306309A publication Critical patent/CN114306309A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114306309B publication Critical patent/CN114306309B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明属于癌症治疗领域，具体涉及萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用。本发明提供了一种治疗癌症的药物，尤其是提供一种治疗肺癌的药物，以延长癌症患者的寿命，所述药物选自萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮。本发明表明萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮以浓度依耐性抑制肺癌A549细胞的增殖，本发明结果揭示了萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮具有抗肺癌增殖的活性及其可能的作用机制，为癌症的化疗药物研发提供了一个潜在的目标分子。

Description

萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用
技术领域
本发明属于癌症治疗领域，具体涉及萘基取代的三氟甲基苯并环 戊酮在癌症治疗中的应用。
背景技术
癌症是由于机体细胞失去正常调控,过度增殖而引起的疾病。过度 增殖的细胞称癌细胞，癌细胞常可侵犯周围组织(浸润，invasion), 甚至可经体内循环系统和/或淋巴系统转移到身体其他部分(癌症转 移)。
世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)发布了2020年全球最 新癌症负担数据。预估了全球185个国家36种癌症类型的最新发病率、 死亡率情况，以及癌症发展趋势。这项最新预估数据显示，2020年全 球新发癌症病例1929万例，其中男性1006万例，女性923万例；2020 年全球癌症死亡病例996万例，其中男性553万例，女性443万例。
因此，研究并发现一些治疗癌症，尤其是针对肺癌新的治疗药物， 对提高患者的生活质量将会起到非常重要的作用。近年来，含三氟甲 基类化合物的抗肿瘤活性陆续被发现，如吉非替尼对晚期非小细胞肺 癌有抗肿瘤活性，该药物能够抑制肿瘤的生长，促进肿瘤细胞凋亡； 索拉非尼作为一种新型治疗肿瘤的口服药物，能够治疗晚期无法进行 手术治疗的肝细胞癌。据研究，含氟类药物比不含氟的药物具有毒性 低、药效高、代谢能力强等特点，以成为抗肿瘤药物研发的一个新的 热点。因此，发现新的具有抗肿瘤活性的含氟化合物，将为肿瘤的临 床治疗提供新的潜在药物。
发明内容
(一)解决的技术问题
本发明提供了一种治疗癌症的药物，尤其是提供一种治疗肺癌的 药物，以延长癌症患者的寿命。
(二)技术方案
为实现以上目的，在一个实施例中，本发明提供了化合物Ⅰ在制 备治疗癌症药物中的应用，所述化合物Ⅰ的结构式如下：
Figure BDA0003308402660000021
优选地，所述癌症选自肺癌、肝癌、胃癌、食管癌、结直肠癌、白 血病、脑瘤、鼻咽癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、骨癌、子宫颈癌。
优选地，所述癌症选自肺癌。
在一个实施例中，本发明提供了一种药物制剂，所述药物制剂包括 化合物Ⅰ，所述化合物Ⅰ的结构式如下：
Figure BDA0003308402660000022
优选地，所述制剂选自液体剂型、固体剂型、半固体剂型或气体剂 型。
优选地，所述液体剂型包括溶液剂、注射剂、输液剂或口服液。
优选地，所述固体剂型包括片剂、胶囊剂、散剂或颗粒剂。
优选地，所述半固体剂型包括软膏剂或凝胶剂。
优选地，所述气体剂型包括气雾剂或喷雾剂。
在另一个实施例中，本发明提供了上述任一项药物制剂在制备治疗 癌症药物中的应用；优选地，所述癌症选自肺癌、肝癌、胃癌、食管 癌、结直肠癌、白血病、脑瘤、鼻咽癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、 骨癌、子宫颈癌；优选地，所述癌症选自肺癌。
(三)有益效果
本发明提供的化合物Ⅰ以浓度依赖性抑制肺癌A549细胞的增殖， 本发明结果揭示了化合物Ⅰ具有抗肺癌增殖的活性及其可能的作用机 制，为肺癌的化疗药物研发提供了一个潜在的目标分子。
附图说明
图1化合物Ⅰ的结构式
图2应用CCK-8法检测化合物Ⅰ对A549细胞活力的影响程度
图3应用CCK-8法检测化合物Ⅱ对A549细胞活力的影响程度
图4应用CCK-8法检测化合物Ⅲ对A549细胞活力的影响程度
图5应用CCK-8法检测化合物Ⅳ对A549细胞活力的影响程度
图6 EdU实验检测化合物Ⅰ对细胞增殖的影响
图7流式细胞术检测化合物Ⅰ对肺癌A549凋亡的影响
图8化合物Ⅰ对肺癌A549细胞增殖相关信号通路的影响
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结 合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、 完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是 全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有 作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护 的范围。
下面通过具体的实施例进行详细的说明。
本发明所用的材料来源如下：
DMEM培养基(Gibco)；胰酶(Gibco)；胎牛血清(Sigma)；CCK-8 试剂盒、细胞凋亡试剂盒(北京凯基生物)；RIPA裂解液(北京碧云 天生物)；BCA蛋白浓度检测试剂盒(ThermoFisher)；DMSO(Sigma)； 一抗GAPDH、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、cyclin D1、PARP(CellSignaling Technology)；人肺癌A549细胞(中科院上海细胞库)；化合 物Ⅰ-化合物Ⅳ为南京大学化学化工学院合成。
化合物Ⅰ-化合物Ⅳ的结构式如下：
Figure BDA0003308402660000041
化合物Ⅰ(代号为XX0335)
Figure BDA0003308402660000042
化合物Ⅱ(代号为XX00125)
Figure BDA0003308402660000043
化合物Ⅲ(代号为XX00126)
Figure BDA0003308402660000044
化合物Ⅳ(代号为XX00136)
数据处理和统计分析采用SPSS19.0软件。所有数据以均数±标准 差(mean±SD)表示，组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05表示 差异具有统计学意义。每组实验重复三次。
实施例1化合物Ⅰ-化合物Ⅳ抑制A549细胞活力
肺癌A549细胞培养在37℃、5％的CO2环境中，培养液配方为含 10％的胎牛血清的DMEM完全培养基。待细胞培养到对数期后进行后 续实验。
使用浓度为6.25、12.5、25和50μg/mL的化合物Ⅰ-化合物Ⅳ处理 A549细胞24h后，通过CCK-8法检测细胞活力。结果表明：化合物Ⅰ 结构如图1所示，与溶剂对照组相比，不同浓度的化合物Ⅰ处理A549 细胞24h后，细胞的活力受到抑制且呈现剂量依耐性(图2A)，其IC50 为9.631μg/mL(图2B)。而化合物Ⅱ-化合物Ⅳ处理后，A549细胞的相 对活力并未呈现浓度下降趋势，没有剂量依耐性抑制A549细胞活力的 作用(见图3-5)。
所述CCK-8法检测细胞活力具体为：将人肺癌细胞A549按照密 度为每孔5×103个细胞，接种到96孔板中。待细胞贴壁后，加入浓度 为(6.25、12.5、25和50μg/mL)的化合物Ⅰ-化合物Ⅳ处理细胞。24h后， 加入CCK-8试剂使其浓度为每孔2.5g/L，继续培养2h，在450nm波 长下使用酶标仪测定每孔的吸光度(A)值。细胞相对活力的计算公式 为：细胞相对活力＝实验组A450值/空白对照组A450值。
实施例2化合物Ⅰ抑制A549细胞增殖
使用EdU试剂盒检测化合物Ⅰ对A549细胞增殖的影响。实验结 果表明，化合物Ⅰ处理A549细胞24h后，与溶剂对照组相比，细胞的 增殖受到抑制，且呈现剂量依耐性(图6A和6B)。
所述EdU试剂盒检测细胞增殖情况具体为：将A549细胞以2×105/ 孔的密度均匀铺至12孔板中，待细胞融合度到80％，加入不同浓度 (DMSO、6.25、12.5、25μg/mL)的化合物Ⅰ。刺激24h后，每孔加入 稀释的EdU溶液(每1mL完全培养基中加入EdU溶液1μL)1mL于 37℃孵育2h；随后，PBS清洗3遍，加入150μL/孔4％多聚甲醛溶液 固定30min；吸掉培液，再加入浓度为2mg/mL的甘氨酸溶液150μL/ 孔，室温孵育5min；PBS清洗3遍，随后加入250μL/孔的渗透液(0.5％ 的TritonX100)孵育10min；PBS清洗1遍；加入250μL/孔的染色液 (Appollo染色液)室温避光30min；渗透液清洗3次，10min/次；随 后用1×Hoechst进行细胞核染色30min，再用PBS清洗2次；最后采 用Olympus BX51荧光显微镜观察并拍照。
实施例3化合物Ⅰ诱导肺癌A549细胞凋亡
细胞凋亡试验结果表明：化合物Ⅰ处理A549细胞24h后，凋亡细 胞比例与溶剂对照组相比显著增加。对第二和第四象限的凋亡细胞进 行统计分析表明，化合物Ⅰ诱导A549细胞凋亡，且呈现剂量依耐性 (p<0.05，图7A和图7B)。
所述细胞凋亡具体试验方法为：将A549细胞培养于12孔板中， 待细胞融合度达到80％，加入不同浓度(DMSO、6.25、12.5、25μg/mL) 的化合物Ⅰ，24h后消化收集细胞。预冷的PBS清洗3遍，加入1×binding buffer重悬，分别加入1μL的FITC和PI染料染色15min。流式细胞仪 (Beckman型号)上机检测，结果通过系统自带的软件进行分析。
实施例4化合物Ⅰ抑制了A549细胞中的Akt/mTOR信号通路
CCK-8及EdU实验表明，化合物Ⅰ抑制了肺癌A549细胞的活力 与增殖，因此我们采用Western blot法对细胞增殖相关信号通路进行了 测定。结果表明：采用Western Blot检测相Akt、p-Akt、mTOR及p-mTOR 蛋白表达变化，结果表明，随着化合物Ⅰ浓度的升高，p-Akt及p-mTOR 的表达量逐渐减少(图8A和8B，p<0.05)，而Akt和mTOR总蛋白水 平没有发生改变。以上结果表明，化合物Ⅰ通过抑制Akt和mTOR的磷 酸化水平，抑制了A549细胞的增殖。
不同浓度的化合物Ⅰ刺激A549细胞24h后，有活性的 cleaved PARP表达升高，而Cycline D1表达量显著降低(图8C和图 8D，p<0.05)。分别对PARP、cleaved PARP和CyclineD1的蛋白条 带进行灰度分析，结果表明，化合物Ⅰ能诱导凋亡相关蛋白cleaved PARP表达，并能抑制细胞周期蛋白Cycline D1的表达(图8C和图 8D，p<0.05)。
所述Western blot法对细胞增殖相关信号通路进行测定，以检测细 胞增殖相关蛋白表达具体包括：将A549细胞培养于6孔板中，待细胞 生长到90％后按照前述方法处理细胞。24h后收集细胞，加入RIPA裂 解液提取细胞蛋白。各组蛋白浓度通过BCA蛋白测定试剂盒测定，随 后加入蛋白上样缓冲液，100℃煮沸5min。按照每孔60微克的加样量 进行SDS-PAGE(下层胶浓度为10％)电泳，完成后将蛋白转移到PVDF 膜(甲醇浸润处理)上。将PVDF膜用含5％脱脂奶粉的BSA溶液封 闭，室温孵育1h。加入稀释后的一抗(1:1500)，4℃放置一夜。随后， 用TBST清洗3遍后加入稀释好的二抗(1:5000),室温孵育1h，TBST 清洗3遍。最后将PVDF膜放入暗盒中，正面向上，加入发光液，暗 室压片曝光。
本发明表明化合物Ⅰ以浓度依耐性抑制肺癌A549细胞的增殖，本 发明结果揭示了化合物Ⅰ具有抗肺癌增殖的活性及其可能的作用机 制，为肺癌的化疗药物研发提供了一个潜在的目标分子。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅 仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定 要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺 序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性 的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅 包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括 为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的 情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要 素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管 参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员 应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改， 或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不 使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.化合物Ⅰ在制备治疗癌症药物中的应用，其特征在于，所述化合物Ⅰ的结构式为：
Figure FDA0003308402650000011
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述癌症选自肺癌、肝癌、胃癌、食管癌、结直肠癌、白血病、脑瘤、鼻咽癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、骨癌、子宫颈癌。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述癌症选自肺癌。
4.一种药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包括化合物Ⅰ，所述化合物Ⅰ的结构式为：
Figure FDA0003308402650000012
5.如权利要求4所述的药物制剂，其特征在于，所述制剂选自液体剂型、固体剂型、半固体剂型或气体剂型。
6.如权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，所述液体剂型包括溶液剂、注射剂、输液剂或口服液。
7.如权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，所述固体剂型包括片剂、胶囊剂、散剂或颗粒剂。
8.如权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，所述半固体剂型包括软膏剂或凝胶剂。
9.如权利要求5所述的药物制剂，其特征在于，所述气体剂型包括气雾剂或喷雾剂。
10.权利要求4-9所述的任一项药物制剂在制备治疗癌症药物中的应用。
CN202111223905.1A 2021-10-18 2021-10-18 萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用 Active CN114306309B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111223905.1A CN114306309B (zh) 2021-10-18 2021-10-18 萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111223905.1A CN114306309B (zh) 2021-10-18 2021-10-18 萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114306309A true CN114306309A (zh) 2022-04-12
CN114306309B CN114306309B (zh) 2023-05-23

Family

ID=81045312

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111223905.1A Active CN114306309B (zh) 2021-10-18 2021-10-18 萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114306309B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114010622A (zh) * 2021-10-18 2022-02-08 南京大学 含氟化合物在制备治疗癌症药物中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111388463A (zh) * 2020-04-22 2020-07-10 山东大学 朝藿素c或组合物在制备治疗肺癌制剂中的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111388463A (zh) * 2020-04-22 2020-07-10 山东大学 朝藿素c或组合物在制备治疗肺癌制剂中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YI ZHU等: "Ligand-Dependent Regiodivergent Enantioselective Allylic Alkylations of α-Trifluoromethylated Ketones", 《ORGANIC LETTERS》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114010622A (zh) * 2021-10-18 2022-02-08 南京大学 含氟化合物在制备治疗癌症药物中的应用
CN114010622B (zh) * 2021-10-18 2023-05-12 南京大学 含氟化合物在制备治疗癌症药物中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN114306309B (zh) 2023-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Deng et al. The pro-apoptosis effect of sinomenine in renal carcinoma via inducing autophagy through inactivating PI3K/AKT/mTOR pathway
Xu et al. Therapeutic mechanism of ginkgo biloba exocarp polysaccharides on gastric cancer
Li et al. Characterization of xanthatin: Anticancer properties and mechanisms of inhibited murine melanoma in vitro and in vivo
Guo-Yu et al. β-Elemene induces apoptosis and autophagy in colorectal cancer cells through regulating the ROS/AMPK/mTOR pathway
Wang et al. Theabrownins produced via chemical oxidation of tea polyphenols inhibit human lung cancer cells in vivo and in vitro by suppressing the PI3K/AKT/mTOR pathway activation and promoting autophagy
Wang et al. Angelicin inhibits liver cancer growth in vitro and in vivo
CN109125324A (zh) 酰基辅酶a∶胆固醇酰基转移酶-1抑制剂的新用途
Gan et al. Natural product pectolinarigenin exhibits potent anti-metastatic activity in colorectal carcinoma cells in vitro and in vivo
Liu et al. Flavonoids from Scutellaria barbata D. Don exert antitumor activity in colorectal cancer through inhibited autophagy and promoted apoptosis via ATF4/sestrin2 pathway
Jiang et al. Dihydrotanshinone I inhibits the growth of hepatoma cells by direct inhibition of Src
CN114306309A (zh) 萘基取代的三氟甲基苯并环戊酮在癌症治疗中的应用
Awasthi et al. Antitumor activity of a pexidartinib bioisostere inhibiting CSF1 production and CSF1R kinase activity in human hepatocellular carcinoma
Cui et al. Piperlongumine inhibits esophageal squamous cell carcinoma in vitro and in vivo by triggering NRF2/ROS/TXNIP/NLRP3-dependent pyroptosis
Li et al. Ginkgolic acid inhibits proliferation and migration of glioblastoma cells by inducing cell cycle arrest and apoptosis
Xie et al. Therapeutic effect of TMZ-POH on human nasopharyngeal carcinoma depends on reactive oxygen species accumulation
US20200000740A1 (en) Zeaxanthin for tumor treatment
CN114129558B (zh) 倍半萜内酯类化合物在制备化疗药物抗肿瘤增效剂或耐药逆转剂中的应用
Fang et al. Mechanism of autophagy regulating chemoresistance in esophageal cancer cells
CN108379268A (zh) 尼非韦罗在制备抗肿瘤药物中的应用
Bai et al. Chiral ruthenium (II) complex as potent radiosensitizer of 125 I through DNA-damage-mediated apoptosis
CN114010622A (zh) 含氟化合物在制备治疗癌症药物中的应用
Zhou et al. Plantamajoside Inhibits the Growth of Acute Myeloid Leukemia Cells by Modulating NF-κB and PI3K/AKT Signaling Pathways.
JP2014058496A (ja) Ｗｎｔ／β‐ｃａｔｅｎｉｎシグナル経路抑制用ベンゾキノン系化合物、ならびに、それを用いた皮膚癌病状改善用医薬組成物およびサプリメント
CN109303783A (zh) 自噬抑制剂在制备增强石蒜碱抗肝癌活性药物中的应用
CN114366740B (zh) 化合物a-6在制备广谱抗癌药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant