TR2022001740A2 - Manyeti̇k nanoparti̇küller kullanilarak vücut sivilari ve sivilaştirilmiş dokularda mi̇kroorgani̇zmalarin yoğunlaştirilmasi ve çoğaltilmasi - Google Patents

Abstract

Bu buluş, steril vücut sıvısı örneklerinde santrifüj ile yoğunlaştırma işleminde yoğunlaştırılamayan 1mL?den az (0,1 cc?ye kadar) ve tespit edilemeyecek kadar düşük eser miktarda bulunan bütün mikroorganizmaların, daha kullanışlı ve daha basit alternatif bir yöntem olan, manyetik demir oksit nanopartiküller kullanılarak manyetik ayırma yöntemi ile manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyi üzerine tutunarak yoğunlaştırılması ve daha sonra uygun besi yerinde daha hızlı çoğaltılması ve teşhis edilmesi işlemlerini içerir. Bu buluş, manyetik demir oksit nanopartiküller kullanılarak vücut sıvıları ve sıvılaştırılmış dokularda mikroorganizmaların yoğunlaştırılması ve çoğaltılması ile ilgili olup, özelliği; manyetik demir oksit nanopartiküllerin sentezlenmesi ve sterilizasyonu, steril manyetik demir oksit nanopartiküllere BOS örneğinden eklenmesi, karışımın vortekslenmesi ve 2-7 dakika aralığında beklenmesi, manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmaların mıknatıs yardımı ile karışım ortamından ayrılması, manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmaların steril çözelti ile yıkanması, manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yoğunlaşan mikroorganizmaların besi yerine ekimi ve mikroorganizma türüne bağlı olarak 35-39 oC aralığında etüvde bekletilmesi işlem basamaklarını içermesidir.

Description

TARIFNAME MANYETIK NANOPARTIKÜLLER KULLANILARAK VÜCUT SIVILARI VE SIVILASTIRILMIS DOKULARDA MIKROORGANIZMALARIN YOGUNLASTIRILMASI VE ÇOGALTILMASI Teknolojik Alan: Bu bulus, steril vücut sivisi örneklerinde bulunan mikroorganizmalarin çöktürülerek yogunlastirmasi isleminde kullanilan santrifuj yöntemini gerektirmeyen daha kullanilisli ve daha basit alternatif bir yöntem olan manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak mevcut mikroorganizmalarin manyetik ayirma yöntemi ile manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyi üzerine tutunarak yogunlastirilmasi ve daha sonra uygun besi yerinde daha hizli çogaltilmasi ve teshis edilmesi islemlerini içeren manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak vücut sivilari ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi ile ilgilidir.

Teknigin Bilinen Durumu: Mevcut teknikte santrifüj islemi, en az 1 mL steril vücut sivisi örneginde bulunan mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi için yapilmaktadir. Santriûij ile yogunlastirma islemi hem zahmetli hem de zaman alicidir. Genel prosedürde santritîjj islemi ile steril vücut sivisi örneginde eser miktarda bulunan mikroorganizmalar tamamen çöktürülmezse yogunlugu az olan örneklerden hatali sonuçlarin alinmasi tedaviye engel bir durum olusturabilmektedir.

Günümüzde, Özellikle steril vücut sivilari olarak tanimlanan Beyin Omurilik Sivisi (BOS), Periton-Perkard-Plevra sivilari ile eklem sivilari gibi örneklerin yani sira, kan ve sivilastirilmis doku örneklerinde çogu zaman enfeksiyon etkeni mikroorganizmalarin az sayida bulunmalari nedeniyle hastaliklarin tanisi örnekten yapilan direkt inceleme ve kültür gibi yöntemler ile yapilmaktadir. Saptama duyarliligini artirmak için klasik olarak en yaygin kullanilan yöntem, sivi veya sivilastirilmis örneklerin santrifuj edilerek hücrelerin, mikroorganizmalarin çöktürülerek yogunlastirilmasidir. Numuneler santrifüj ile çöktürüldükten sonra üst sivi dökülerek aranan mikroorganizmalar tüpün dibinde kalan az miktarda sivi içerisinde yogunlastirilmis kisimda aranmaktadir. Bu kapsamda mikrobiyoloji laboratuvarlarinda yapilan santriiî'ij ile yogunlastirma isleminde, numune miktarinin en az 1 mL olmasi gerekmektedir. Genel prosedürde steril vücut sivisi örneginde eser miktarda bulunan mikroorganizmalar santrifüj islemi ile tamamen çöktürülememeleri nedeniyle yogunlugu az olan örneklerden hatali sonuçlarin alinmasi tedaviye engel bir durum olusturabilmektedir. Bu nedenle santrifüj yöntemine alternatif olabilecek hem lmL”den az örneklerde hem de az yogunluga sahip örneklerde bakteri yogunlastirmasina ve çogaltilmasina alternatif olabilecek teknolojilere ihtiyaç duyulmaktadir. Literatürde mikroorganizmalarin yogunlastirilmasina yönelik çesitli çalismalar mevcuttur. Yapilan çalismalarin çogunlugunda mikroorganizmalari yakalayabilecek degisik fonksiyonel gruplara sahip yüzeyler hazirlanmistir. Ancak hazirlanan yüzeylerin birbirlerine göre maliyet, seçicilik ve islevsellik açisindan avantaj ve dezavantajlara sahip oldugu görülmektedir. Bu çalisinalardan bazilari asagida özetlenmistir.

JP2009 l48246A yayin numarali Japon patent çalismasinda “Konsantre Mikroorganizma Yöntemi” açiklanmistir. Bu bulusta, yüzeyi seker kapli nanopartiküller ile birçok mikroorganizma bileseni içeren bir numuneden sadece tek bir mikroorganizmanin (Viral etkenin) spesifik olarak seçici bir sekilde yüzeye tutunarak konsantre edilebildigi bir yöntemden bahsedilmektedir. immobilize altin nanoparçacik ve dekstran sülfat immobilize altin nanoparçacik ile virüsü yakalama yöntemi, fraksiyonlama yöntemi, bagisiklama yöntemi ve antiviral antikor üretme yöntemi” açiklanmistir. Mevcut bulusta, yüzeyi dextran sülfat kapli nanopartiküller ile virüslerin baglanmasi ve viral proteinlerinin fraksiyonlarinin ortaya çikarilmasidir. Bu sekilde elde edilen viral antijenlere karsi antikor olusturmaya yönelik bir bulus olup asi çalismalarinda kullanim alanina sahip olunmasi yönteminden bahsedilmektedir. Bu bulus ile bazi viral etkenlerin seçici davranarak spesifik olarak baglanmasi ve bu yöntemle fraksiyonlara ayrilabildigi ileri sürülmektedir.

Konsantre Etme Yöntemi, Hücre veya Bakteri Konsantre Etme Yöntemi ve Manyetik Kompozit” açiklanmistir. Mevcut bulusta yüzeyi seker kapli nanopartiküller kullanilarak sadece örnekte bulundugu varsayilan bir hücreye yönelik, virüs etkenlerinin de dahil oldugu tek bir mikroorganizmaya yönelik yogunlastirma yönteminden bahsedilmektedir.

Ayrica bu patentte yogunlastirmanin santritüj yöntemi kadar iyi oldugu iddia edilmistir.

Ancak santrifüj yöntemine göre daha iyi oldugu ifade edilmemistir.

Mikroorganizma Nükleik Asit Amplifikasyon Olmayan Tespit ve Siniflandirma Yöntemi” açiklanmistir. Bu çalismada biyo-tip alaninda, özellikle patojenik mikroorganizmalarin tanimlanmasinda nükleik asit amplifikasyonu (çogaltilmasi) islemi yapilmadan dogrudan mikroorganizmayi saptama ve tipleme yöntemleri ve kitleri alani ile ilgilidir. Çalismada olasi etkenler (örnekte bulundugu düsünülen mikroorganizmalar) özgül olarak saptanmasindan ve tanimlanmasindan bahsedilmektedir. Bulusta çözülmesi gereken teknik problem, amplifikasyon olmadan patojenik mikroorganizmanin nükleik asitlerini saptamak ve tiplenmesi için bir yöntem saglamaktir. Bu bulus, her bir çalismada aranan tek bir mikroorganizmanm nükleik asitleri algilanmakta ve bunun ile mikroorganizma tanimlanmaktadir.

Teknigin bilinen durumunda yer alan “Darabdhara, G., Boruah, P. K., Hussain, N., Borthakur, P., Sharma, B., Sengupta, P., & Das, M. R., Magnetic nanoparticles towards efficient adsorption of gram positive and gram negative bacteria: an investigation of adsorption parameters and interaction mechanism. Colloids and Surfaces A: FC304 nanoparçaciklar (NP'ler), yukaridan asagiya (mekanik bilyali ögütme) ve asagidan yukariya yaklasimlar (kimyasal indirgeme yöntemi) olmak üzere iki farkli teknikle sentezlenmektedir. Sentezlenen NP'ler, gram pozitif bakteri Staphylococcus aureus ve gram negatif bakteri Escherichia coli'nin adsorpsiyonuna yönelik etkili adsorbanlar olarak kullanilmasindan bahsedilmektedir.

Yukaridaki buluslara ek olarak günümüzde kullanilan santritüj ile yogunlastirma isleminde saptanan teknik sorunlar: Rutin uygulamada lmllden az olan BOS örnekleri santrifüj edilememektedir.

BOS gibi steril Vücut sivilari ile sivilastirilabilir örneklerdeki en büyük sorunlardan biri numune miktarinin az olmasidir. Örnegin, analiz için 0,2 cc BOS numunesi olmasi durumunda numune santrifüj islemi ile yogunlastirilamamaktadir. 0,1 cc numunenin tümüne ekim yapilmaktadir. Bu durumda Biyokimyasal analizler için örnek kalmamaktadir. 1 mL ve üzeri örnek olmasi durumunda santrifüj ile yogunlastirma islemi yapilmaktadir. Santriûij ile yogunlastirma isleminde elde edilen pelletin tümü ekim için kullanilamamaktadir. Ekim için öze yardimi ile pelletten az miktarda örnek alinmakta ve ekim yapilmaktadir. Pelletten öze yardimi ile örnek alma körlemesine yapilmaktadir. Pelletten rastgele alinan örnekte bakteri bulunmama ihtimali vardir. Bundan dolayi hastanin BOS numunesinde mikroorganizmalar var olmasina ragmen negatif sonuç verilebilmektedir. Laboratuvarlarda siklikla gözlemlenmektedir. Örneklerdeki bakteriyel yükün düsük olmasindan dolayi santrifüj ile yogunlastirma isleminden sonra Gram boyama yönteminin duyarliligi genellikle düsüktür (%40-80).

Santrifüj cihazlari yüksek maliyetlidir.

Yogun numune kabulü yapan mikrobiyoloji laboratuvarlarinda, BOS örneginin Santrifüj ile yogunlastirma islemi laboratuvar çalisanlarina ekstra is yükü getirmektedir.

Santritüj cihazlarinin laboratuvar ve numune kaybi kazalarina neden olabilme riskleri vardir.

Santrifüj cihazinin düzenli olarak kalibrasyonunun yapilmasi gerekir.

Santrifüj cihazi kazalarinda (santrifüj tüplerinin islem sirasinda parçalanmasi gibi) çevreyi kontamine etme riski vardir. Laboratuvar kaynakli insan enfeksiyonlarina Santritüj ile yogunlastirma islemlerinde ve literatürdeki tekniklerde steril vücut sivisi örneginde mikroorganizma yogunlugunun düsük olmasi problem yaratmaktadir. Sonuç olarak yukarida bahsedilen dezavantajlarin üstesinden gelebilen düsük yogunlukta 1 mL°den daha az olan steril vücut sivisi örneklerinin yogunlastirilmasi, katalitik etki ile çogaltilmasi, hizli, kolay uygulanabilen düsük maliyetli ve az zaman gerektiren yeni bir yöntem/metod gelistirilmesine ihtiyaç duyulmaktadir.

Bulusun Tanimi: Bu bulus, manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak vücut sivilari ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi olup, özelligi; hem düsük yogunluga sahip hem de 1 mL"den daha az örneklerden mikroorganizmalarin tamaminin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi için yeni bir teknik olmasidir.

Yukarida bahsedilen ve asagida da detayli anlatimdan ortaya çikacak tüm amaçlari gerçeklestirmek üzere bulus; lmL°den daha az (örnegin 0,1 cc) vücut sivisi örneklerinde bulunan eser miktarda bile olsa mikroorganizmalarin manyetik ayirma ile manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutturularak yogunlastirilmasi ve daha sonra uygun besi yerinde manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyi üzerinde katalitik etki yaratacak sekilde daha hizli çogaltilmasini ve teshis edilmesini saglamaktadir. Bu amaçla santrifüj teknigini gerektirmeyen daha kullanilisli alternatif bir yöntemin mevcut yöntemlere göre daha kisa sürede, daha güvenilir, daha kolay ve daha düsük maliyetli olmasi planlanmistir.

Bulus konusu yöntemin avantaj lari: l) Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma isleminde lml”den az (0,1 cc°ye kadar) örneklerde yogunlastirma ve çogaltma islemi yapilabilmektedir. 2) Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirrna isleminde, manyetik demir oksit nanoparçaciklar Gram negatif, Gram pozitif bakterileri, maya mantarlarini ve özellikle en sik görülen akut menenj it etkenlerini yüksek afinite ile yakalayip yogunlastirip, çogaltabilmektedir.

Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma ve çogaltma islemi maliyeti düsük ve uygulanmasi kolaydir.

Manyetik demir oksit nanopartikül ile yogunlastirma ve çogaltma isleminde kullanilan manyetik demir oksit nanopartiküller, oda sicakliginda uzun raf ömrüne sahiptirler.

Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma ve çogaltma isleminde enfeksiyon riski çok azdir (Teorik olarak Sifir) Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma ve çogaltma islemi ayirim gözetmeksizin tüm laboratuvarlarda uygulanabilmektedir Bu yöntemin en büyük avantaji, Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma ve çogaltma islemi ile hasta tanisinin hizli bir sekilde yapilabilmesidir.

Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma ve çogaltma isleminde kullanilan manyetik demir oksit nanoparçaciklar kalibrasyon ve bakim gerektirmez.

Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma ve çogaltma islemi gelecekteki çalismalara da isik tutacaktir BOS örneklerinin subkültüründe bakterileri izole etme yetenegi santrifüj cihazlarindan çok daha yüksektir.

Manyetik demir oksit nanopartiküller ile yogunlastirma islemi, Gram boyama yönteminin duyarliligini artirmaktadir.

Güncel literatüre göre patojenik etkene sahip mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi yöntemleri incelendiginde, bulusumuzun özgün degere sahip oldugu anlasilmaktadir. Yüzeyinde herhangi bir fonksiyonel gruba ihtiyaç olmadan sade manyetik demir oksit nanopartiküller ile en ucuz ve zahmetsiz bir yöntem olarak yüksek potansiyele sahiptir.

Bulus konusu ürün yapisal ve karakteristik özellikleri ve tüm avantajlari asagida verilen sekiller ve bu sekillere atiflar yapmak suretiyle yazilan detayli açiklama sayesinde daha net anlasilaeaktir ve bu nedenle degerlendirmenin de bu sekiller ve detayli açiklama göz önünde bulundurularak yapilmasi gerekmektedir.

Bulusun Açiklanmasi: Bulus konusu yöntem; manyetik demir oksit nanopartiküllerin sentezlenmesi ve sterilizasyonu, steril manyetik demir oksit nanopartiküllere BOS ömeginden eklenmesi, karisimin vortekslenmesi ve 2-7 dakika araliginda beklenmesi, manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin miknatis yardimi ile karisim ortamindan ayrilmasi, manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin steril çözelti ile yikanmasi, manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yogunlasan mikroorganizmalarin besi yerine ekimi ve mikroorganizma türüne bagli olarak 35-39 oC araliginda etüVde bekletilmesi islem basamaklarini içermektedir.

Bulus konusu yöntemde BOS örneginde yer alan mikroorganizmalarin manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunmasi için steril manyetik demir oksit nanopartiküllere BOS örneginden eklenmektedir.

Bulus konusu yöntemde manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin karisim ortamindan izole edilerek yüzeyde yogunlastirilmasi için manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin miknatis yardimi ile karisim ortamindan ayrilmaktadir.

Bulus konusu yöntemde manyetit demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yogunlasan mikroorganizmalarin, yüzeyin katalitik etkisi ile besi yerinde hizli bir sekilde çogaltilmasi için manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yogunlasan mikroorganizmalarin besi yerine ekimi ve mikroorganizma türüne bagli olarak 35-39 oC araliginda etüvde bekletilmektedir.

Bulusun Detayli Açiklanmasi: Bulus konusu yöntemde literatürde bilinen kimyasal, fiziksel ve biyolojik yöntemlerle Manyetik Demir Oksit Nanopartiküllerin sentezi yapilmistir. Ardindan asagidaki islem akislari sonucunda Vücut sivilari ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi saglanmistir.

Manyetik demir oksit nanopartikülleri içeren steril tüp, Steril manyetik demir oksit nanopartiküllere BOS örneginden eklenmesi, Iki dakika vorteks islemi, Karisimin 15 dakika bekletilmesi Manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin miknatis ile karisim ortamindan ayrilmasi, Manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin steril çözelti ile yikanmasi, Manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin pastör pipeti ile uygun besi yerine subkültürünün yapilmasi Mikroorganizma türüne bagli olarak 37 0C inkübasyon islemi uygulanmasi, Yukarida yapilan islem basamaklari sonucunda: BOS Numunesinin Negatif olmasi Durumunda; Direkt bakisi anlamli olmayan BOS numunelerinin hem santrifüj islemi sonrasi hem de manyetik demir oksit nanopartiküller ile yapilan etkilesim islemi sonrasinda subkültür sonucunda koloni tespit edilmemistir. Yapilan Santrifi'ij islemi sonrasinda subkültür ve inkübasyon süresi sonunda bakteri üremesine rastlanmamistir. Yapilan manyetik demir oksit nanopartikül islemi sonrasinda subkültür ve inkübasyon süresi sonunda bakteri üremesine rastlanmamistir. Tablo l,de de gösterildigi gibi 280 BOS Ömeginin 2557inde her iki yöntemde de bakteri tespit edilmemistir.

BOS Numunesinin Pozitif olmasi Durumunda; Direkt bakisi anlamli olan BOS numunesinin santritîij islemi sonrasinda yapilan subkültürde inkübasyon süresi sonunda hiçbir sekilde bakteri tespit edilmezken, ayni örnegin manyetik demir oksit nanopartiküller ile etkilesimi sonrasinda yapilan subkültürde bakteri tespit edilmistir. 280 BOS numunesinin santrifuj ve manyetik demir oksit nanopartikül islemleri sonrasinda subkültür inkübasyon sonucunda pozitif ve negatif olarak elde edilen degerlerin karsilastirmali sonuçlari Tablo lide verilmistir. Tablo l°de de görüldügü gibi 280 örnegin 83inde santrifüj yönteminde bakteri tespit edilmez iken manyetik demir oksit nanoparçaeiklar ile bakteri tespit edilmistir.

- Bakteri Çogaltma Etkisi; Manyetik demir oksit nanopartiküller ile etkilestirilen BOS numunesinin subkültüründe esit inkübasyon süresinde santrifüj islemi sonrasi 100 KOB/mL bakteri tespit edilirken, ayni BOS numunesinin manyetik demir oksit nanopartiküller ile islem sonrasinda subkültür ve inkübasyon süresi sonunda 3200 KOB/mL bakteri tespit edilmistir.

- Bakteri Çesitliligini Tespit Etme; Direkt bakisi anlamli olan BOS numunelerin santrifiij islemi sonrasinda yapilan subkültürde inkübasyon sûresi sonunda bir bakteri tespit edilirken, ayni örnegin manyetik demir oksit nanopartiküller ile etkilesimi sonrasinda yapilan subkültürde iki çesit bakteri tespit edilmistir.

- Ayrica manyetik demir oksit nanopartiküller tarafindan, klinik örneklerde siklikla enfeksiyon etkeni olan S. marcesdens, Abaumannii, Kpneumoni'ae ve S.

Pyogenes, Spneumoniae, H. influenza, Nmeningi'tidis, P. agglomerans bakterileri ve Cneoformans mantari yüksek afinite ile yakalandigi yapilan subkültür islemi Tablo 1 kültür laboratuvarina gelen 280 BOS numunesinin santrifüj ve manyetik demir oksit nanopartikül islemleri sonrasinda subkültür inkübasyon sonucunda pozitif ve negatif olarak elde edilen degerlerin karsilastirmali sonuçlari.

Claims (5)

ISTEMLER
1. l- Bulus, manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak vücut sivilan ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi ile ilgili olup, özelligi; - manyetik demir oksit nanopartiküllerin sentezlenmesi ve sterilizasyonu, - steril manyetik demir oksit nanopartiküllere BOS örneginden eklenmesi, - karisimin vortekslenmesi ve 2-7 dakika araliginda beklenmesi, - manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin miknatis yardimi ile karisim ortamindan ayrilmasi, - manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin steril çözelti ile yikanmasi, - manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yogunlasan mikroorganizmalarin besi yerine ekimi ve mikroorganizma türüne bagli olarak 35-39 0C araliginda etüvde bekletilmesi islem basamaklanni içermesidir.
2. 2- Istem lsde bahsedilen manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak vücut sivilari ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi olup, özelligi; BOS örneginde yer alan mikroorganizmalarin manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunmasi için steril manyetik demir oksit nanopartiküllere l mL”den az (0,1 cc°ye kadar) BOS örneginden eklenmesi ile karakterize edilmesidir.
3. 3- Istem 1`de bahsedilen manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak vücut sivilari ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi olup, özelligi; manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin karisim ortamindan izole edilerek yüzeyde yogunlastirilmasi için manyetik demir oksit nanopartiküllere tutunan mikroorganizmalarin miknatis yardimi ile karisim ortamindan ayrilmasi ile karakterize edilmesidir.
4. 4- istem 1*de bahsedilen manyetik demir oksit nanopartiküller kullanilarak vücut sivilari ve sivilastirilmis dokularda mikroorganizmalarin yogunlastirilmasi ve çogaltilmasi olup, özelligi; manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yogunlasan mikroorganizmalarin, yüzeyin katalitik etkisi ile besi yerinde hizli bir sekilde çogaltilmasi için manyetik demir oksit nanopartiküllerin yüzeyine tutunarak yogunlasan mikroorganizmalarin besi yerine ekimi ve mikroorganizma türüne bagli olarak 3
5. 5-39 oC araliginda etüvde bekletilmesi ile karakterize edilmesidir.