TR201809034T4 - Biyo-rejeneratif, restoratif ve ötrofik aktiviteye sahip bileşim. - Google Patents

Abstract

Buluş, cilt, kemik, eklemler, osteotendinöz ve miyotendinöz bileşkelerin dokuları, görme sisteminin mukozası ve yapıları dahil olmak üzere çeşitli bağ ve/veya epitelyal dokuların terapötik ve/veya kozmetik rejenerasyonu ve/veya onarıcı tedavisinde kullanıma yönelik olan, doğal kaynaklardan elde edilen polinükleotidlerin bir karışımını ve hyalüronik asidi içeren bir bileşim ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME BIYO-REJENERATIF, RESTORATIF VE ÖTROFIK AKTIVITEYE SAHIP BILESIM Bu açiklama, cilt, kemik, eklemler, osteotendinöz ve miyotendinöz bileskelerin dokulari, görme sisteminin mukozasi ve yapilari dahil olmak üzere çesitli bag ve/veya epitelyal dokulara yönelik yara olusumu, yeniden epitelizasyon, biyo-rejeneratif ve ötrofik aktiviteye sahip olan, polinükleotidleri (PN) ve hyalüronik asidi içeren bir bilesim ile ilgilidir ve dolayisiyla bu dokulari etkileyen hastaliklarin tedavisinde ve kozmetikte faydalidir.

Biyo-rejenerasyon ve yara onarimi, klasik olarak asagidaki sirada ilerleyen yaygin fizyopatolojik temellere sahiptir: 1. inflamatuvar asama 2. proliferatif asama 3. yeniden modelleme asamasi.

Biyolojik olarak bunlar seklen ayrilmaktadir ve sirali asamalar siklikla büyük ölçüde örtüsmektedir. Bu proseslerde burada açiklanan bilesimin, özel olmamakla birlikte esas olarak baslangiç asamalarini hyalüronik asit yoluyla ve son asamalari özel olmamakla birlikte esas olarak polinükleotidler (PN) yoluyla tesvik etmek üzere hareket ettigi söylenebilmektedir.

Inflamatuvar asamalar sirasinda, bir hidratlama fonksiyonuna sahip olan ve hücre göçünü kolaylastiran genis moleküllü (binlerce kDaIton) hyalüronik asidin serbest birakilmasini baslatan bir progresif reaksiyon vardir, bu ise daha sonra onarimin ilk asamalarini kolaylastiran belirgin pro-inflamatuvar rolü nedeniyle fragmanlara ayrilmaktadir. Bu nedenle hyalüronik asidin fonksiyonu, inflamatuvar prosesin ilk asamasinin karakteristigidir ve yara iyilesmesi sürecinin düzgün gelisiminden önce gelmektedir.

Fibroblastlar ve neoanjiyogenez ile hücre göçü, birinci asamanin tamamlanmasindaki merkezi olaydir.

Proliferatif asama sirasinda fibroblastlar rejenere olarak bir ekstraselüler matris olusturmaktadir. Hyalüronik asit bu asamada artik gerekmemektedir ve “doldurma” rolü, ilgili dokuya özgü olan hücreler tarafindan salgilanan cilt ve diger dokularin bilesenlerinin (kollajen, GAG, proteinler, glikoproteinler vb.) tamami tarafindan gerçeklestirilmektedir. Bu asama esas olarak polinükleotidler tarafindan kontrol edilmektedir. açiklamakta ve cilt gençlestirmesi için mezoterapide temin edilebilir ürünler olarak polinükleotid makromoleküllerinden, tek basina hyalüronik asitten ve hyalüronik asit arti vitaminler, amino asitler, mineraller, koenzimler, nükleik asitler, beta-glukan dahil olmak üzere diger etken maddelerden bahsetmektedir. asitlerin kullanimini açiklamaktadir. 6781, kemik dokusu rejenerasyonu için hyalüronik asit hidrojellerinin kullanimini açiklamaktadir. açiklamaktadir.

Bu bulus, hyalüronik asit ve PN'nin birlikte uygulanmasinin rejenerasyon, ötrofikasyon ve doku onariminin tüm asamalari sirasinda pozitif bir etkiye sahip oldugunun farkina varilmasina dayanmakta olup, ayri olarak kullanilan bilesenlerin uygulanmasina göre daha iyi sonuçlar elde edilmesini mümkün hale getiren, bilesenler arasindaki sinerjiyi ortaya koymaktadir.

Dolayisiyla bulusun bir amaci, tarifnamenin ayrilmaz bir parçasini olusturan asagidaki istemler ile tanimlanan kullanima yönelik polinükleotidler ve hyalüronik asidi içeren bir sineijistik etkiye sahip bir bilesim olup, söz konusu bilesim söz konusu istemlerde tanimlanmaktadir.

Hyalüronik asit (HA) glikoaminoglikanlar ailesine ait sülfür içermeyen tek polimerdir; memeli dokusunda yaygindir, yapisinda hiçbir dal yoktur ve glukuronik asit ve N-asetil- glukozamin içeren bir disakkaridin düzenli bir tekrarini içermektedir.

HA'nin boyutu degisiklik göstermekte olup, bazi dokularda 3 ve 9 milyon arasinda degisiklik göstermek üzere bir milyon Daltonu asmaktadir. Baslangiçta bu, 1934 yilinda Mayer tarafindan ismini aldigi vitröz cismin hiyaloid maddesinden izole edilmistir ve uzun yillar boyunca HA'nin özel bir biyolojik rolü olmadan sira disi hidrofilik yeteneklere sahip bir dolgu maddesi ve yapisal madde oldugu kabul edilmistir. Yalnizca son on yilda, özellikle CD44 ve RHAMM gibi HA'ya yönelik doku reseptörlerinin kesfini takiben bu polimerin biyolojik rolü tanimlanmistir. Doku rejenerasyonu ve onarimina iliskin daha karmasik proseslerde bir aktif madde olarak HA rolünün bilgisi böylece gelismistir.

Dolayisiyla literatürden temin edilebilir verinin organizasyonu, HA'nin artik bir atil molekül olarak degerlendirilmedigi, aksine hücre göçü ve bölünmesi, anjiyogenez ve doku büyümesi ve olgunlasmasi gibi önemli biyolojik süreçlere aktif bir sekilde katildiginin degerlendirildigi yeni bir kavrami getirmistir.

HA'nin fonksiyonlari, boyutuna bagli olarak önemli bir sekilde degisiklik göstermekte olup, bazen sasirtici etkiler üretmektedir. Aslinda yüksek molekül agirlikli moleküller yüksek oranda hidratlayiciyken ve hücre göçünü kolaylastirirken daha küçük fragmanlar inflamatuvar süreçleri tesvik eden bir aktiviteye sahiptir. Bunlar, rejeneratif ve onarici süreçlerin baslangiç asamalarina katilan olaylardir.

A. Bu bulusun kapsaminda hyalüronik asit, oldugu gibi veya örnegin sodyum ile çesitli tuzlar olarak kullanilabilmektedir. kDaIton arasinda bir molekül agirligina sahip sodyum tuzu kullanilmaktadir.

B. "Polinükleotidler" terimi, örnegin yaklasik olarak 250 kDaIton'luk bir sayisal ortalamali molekül agirligina sahip, tercihen 0.5 kDaIton ve 3000 kDaIton arasinda, daha çok tercihen 30 kDalton ve 2000 kDaIton arasinda bir molekül agirligi dagilimina sahip tercihen DNA olmak üzere nükleik asidin bir polimer zincirinin bir fraksiyonunu belirtmektedir. DNA polimer Zincirlerinin bu fraksiyonu, orijinal olarak bulunan toplam pürin bazlarindan çikarilan %1 ve %5 pürin bazi arasinda bir depürinasyon yüzdesine sahip polinükleotidlerin bir karisimini elde etmek üzere bilgi tasima kapasitesini elimine etmek için DNA'nin en azindan bir kismi depürinasyon asamasini ve tercihen bunlarin molekül agirliklarini azaltmak üzere DNA zincirlerinin kismi parçalara ayrilmasi asamasini içeren bir proses yoluyla balik sperminden veya bir bitki kaynagindan ekstraksiyon ile elde edilmektedir.

DNA'nin depürinasyon yüzdesi, orijinal olarak bulunan pürin bazlarinin toplamindan çikarilan %1 ila %5 pürin bazi (veya pürin içermeyen bölge) araliginda bulunmaktadir.

Tercih edilen bir depürinasyon yüzdesi %2 ve %2.5 arasindadir.

Yukarida belirtilenden, PN karakteristiklerinin asagidakilere tabi tutulmamis klasik polinükleotidlerinkinden gözle görülür derecede farkli oldugu açiktir: . kismi depürinasyon, . virüslere ve prionlara yönelik sterilizasyon teknikleri, . kuru oldugunda %0.5 altinda protein miktarlari ve 0.2 ile 3000 kDalton arasinda degisiklik gösteren bir molekül agirligi araligi ile %98 safligi asan ürünün saflastirilmasi için prosesler.

PN'nin fibroblastlar, endotelyal hücreler ve diger hücrelerde mitozu baslatabilme yetenegine sahip oldugu bilinmektedir ve belgelenmistir. Bunlar, doku onarimini stimüle etmek üzere kullanilmistir ve birçok deney modelinde ekstraselüler matrise özgü moleküllerin ex novo sentezi için kayda deger kapasite göstermistir.

Tüm yara iyilesmesi proseslerinde bilimsel literatür, PN'nin hasar onarimi üzerinde pozitif bir etkiye sahip oldugunu dogrulamistir. PN ayrica, birçok inflamatuvar faktörün tesirini modüle etmek ve bunlari farkli hücre hatlarinin büyümesinde ve bunlarin sekretuar aktivitesinde oldukça önemli ve biyolojik olarak oldukça aktif moleküller haline getiren fizyolojik büyüme faktörleri ile etkilesimde bulunmak üzere kayda deger bir yetenege sahiptir.

Kullanilan polinükleotidler, örnegin yaklasik olarak 250 kDalton olan bir sayisal ortalamali molekül agirligi ile tercihen 0.2 kDalton ila 3000 kDalton, daha çok tercihen kDalton ve 2000 kDalton arasinda bir molekül agirligi dagilimina sahiptir.

Bilesim asagidakileri içermektedir: o yukarida açiklandigi gibi hyalüronik asit . yukarida açiklandigi gibi polinükleotidler (PN).

Sivi formülasyonlar (örnegin enjekte edilebilir formülasyonlar veya göz damlasi) için tercihen 0 mg/ml ila 50 mg/ml'lik konsantrasyonlarda mannitol olmak üzere uygun ozmolariteyi elde etmek üzere polioller kullanilirken, nötraliteye yakin bir pH (7.0 +/- 1.0) saglamak üzere tercihen fosfat tamponu olmak üzere bir tampon sistemi kullanilmaktadir.

Kullanilan mannitol, Avrupa Farmakopesi'ne göre enjekte edilebilir kullanima yönelik steril, apirojenik veya farmasötik siniftadir.

Kullanilan fosfat tamponu, enjekte edilebilir kullanima yönelik farmasötik sinifta, steril veya apirojeniktir.

Kullanilan bilesimler tipik olarak asagidakileri içermektedir: . 1 mg/ml ila 20 mg/ml arasi, tercihen 5 mg/ml ila 12 mg/ml arasi polinükleotidler, . polinükleotid/hyalüronik asit orani agirlikça 0.2:1 ila 2:1 araliginda olan 1 mg/ml ila 20 mg/ml arasi, tercihen 5 mg/ml ila 12 mg/ml arasi hyalüronik asit.

Mannitol: 40 mg/ml fosfat tamponu: 1.3 mg/ml hyalüronik asit: 7.5 mg/ml Mannitol: 40 mg/ml fosfat tamponu: 1.3 mg/ml hyalüronik asit: 10 mg/ml PN 10 mg/ml Mannitol: 40 mg/ml fosfat tamponu: 1.3 mg/ml hyalüronik asit: 3.5 mg/ml PN 3.5 mg/ml Örnek 4 Mannitol: 40 mg/ml fosfat tamponu: 1.3 mg/ml hyalüronik asit: 5 mg/ml polinükleotidler: 15 mg/ml Mannitol: 40 mg/ml fosfat tamponu: 1.3 mg/ml hyalüronik asit: 3 mg/ml PN (sirasiyla): 7.5, 11, 16 mg/ml Bulusa göre bilesimlerin sinerjistik etkisi, saf hyalüronik asit, saf PN ve ikisinin bir kombinasyonunun hücre büyümesi ve protein ekspresyonu üzerindeki etkisini belirlemek üzere in vitro testler yoluyla belirlenmistir.

Testlerin Açiklamasi Insan kökenli fibroblastlar, %10 fetal bovin serumu (BFS) ile desteklenmis büyüme ortami (Dulbecco'nun Modifiye Eagle Ortami) üzerinde kültürlenmistir. Hücreler, .000/cm2'lik bir yogunluk ile tohumlanmistir. Tohumlamadan 24 saat sonra hücreler, yine DMEM + %10 BFS'de hazirlanan, tabloda gösterilen kosullar altinda inkübe edilmistir.

Hücreler sayilmistir ve proteinler 3 günlük islemin ardindan ölçülmüstür. Hücrelerin sayisi bir hücre sayma aleti kullanilarak ölçülmüstür, proteinler bir modifiye edilmis Lowry yöntemi kullanilarak boyanmis protein lizatlarinin spektrofotometrik okumasindan ölçülmüstür.

Asagidaki tablo, test edilen bilesimlerin konsantrasyonlarini göstermektedir. Hücre büyümesi ve protein içerigine iliskin degerler, kontrolün % degeri olarak ifade edilmektedir ve son bahsedilen kontrol, zaman içinde ayni noktada ölçülen herhangi bir isleme tabi tutulmamis fibroblastlarin bir kültürü olarak degerlendirilmelidir.

BILESIM KONSANTRASYON HÇCBE _ PROTEIN (ug/ml) BUYUMESI EKSPRESYONU (kontrole (kontrole kiyasla kiyasla °/o % cinsinden) cinsinden) Kontrol: 100 100 Hyalüronik 12 104 103 asit (HA) 37 104 105 50 103 104 111 105 104 333 106 107 PN 12 117 115 37 121 119 50 125 126 111 127 127 333 129 128 BILESIM KONSANTRASYON HýCßE _ PROTEIN (ug/ml) BUYUMESI EKSPRESYONU (kontrole (kontrole kiyasla kiyasla °/o % cinsinden) cinsinden) Tablo 1'deki veriler ve Sekil 1 ve Sekil 2'deki karsilik gelen grafikler, hyalüronik asidin konsantrasyonu arttikça aktivitesini degistirmedigini, protein ekspresyonu ve hücre büyümesine iliskin hafif bir etkiyi sürekli olarak korudugunu göstermektedir. Ancak, polinükleotidlerin artan doz ile etkilerini arttirdigi açiktir.

Ayri bilesenler açisindan karisim - ayni toplam konsantrasyon için %50 hyalüronik asit ve %50 polinükleotid içermistir - ile elde edilen etki, tek basina kullanilan PN'nin ve elbette tek basina kullanilan HA'nin etkisinden tutarli bir sekilde daha iyidir (örnegin karsilastirma, tek basina kullanilan 37 tig/ml HA, tek basina kullanilan 37 tig/ml PN ve her ikisinden 18.5 ug/ml içeren bir karisim arasinda yapilmistir); dolayisiyla tek basina hyalüronik asidin küçük etkisi göz önüne alindiginda, hyalüronik asidin varliginin PN'nin etkisinin arttirilmasinda önemli oldugu açiktir, bunlar hücre büyümesi ve protein ekspresyonunda asil öneme sahip bilesenlerdir.

HA ve PN'nin kombine edilmesinin hücre rejenerasyonunda sinerjistik bir etkiye sahip oldugu ve protein matrisi birikmesinin elde edildigi sonucu çikarilabilmektedir.

Hyalüronik asit konsantrasyonunun hücre büyümesi ve matris üretimi amaçlari için büyük ölçüde ilgisiz oldugu göz önüne alindiginda, hyalüronik asit konsantrasyonunun 1 mg/ml'de sabit tutuldugu ve PN'nin artan konsantrasyonlarda kullanildigi bir diger test gerçeklestirilmistir. HA konsantrasyonunu 1 mg/ml'ye ayarlama karari, HA çesitli seyreltilerde tek basina test edildiginde, bunun rejenerasyonu ve hücre sekresyonunu tesvik etme yetenegi nispeten sabit ve orta derecede olmasina ragmen bunun deney kosullari altinda maksimum etkili konsantrasyon oldugunun bulundugu önceki deneylerin bir sonucu olarak gerçeklestirilmistir.

Karisimda kullanilacak Hyalüronik Asit konsantrasyonunu 1 mg/ml'ye ayarlama karari, Hyalüronik Asidin farkli seyreltilerinin 3 ve 7 gün boyunca kültürde bulunan fibroblastlar üzerinde test edilmesi ile elde edilen veriler ile verilmistir. Hücre büyümesi, Alamar Test yöntemi ile degerlendirilmistir. Veriler, 100'e ayarlanan kontrole kiyasla islemden geçirilen hücrelerin büyüme yüzdesi olarak ifade edilerek Sekil 3'teki grafikte gösterilmektedir.

Bu deney verilerine bagli olarak 1 mg/ml HA dozu, bunun hücre büyümesi üzerinde ters etkilesim olmaksizin uygulanabilen maksimum olmasi, dolayisiyla HA'nin hidratlama etkisinden en iyi sekilde yararlanmasi açisindan en uygun doz olarak tanimlanmistir.

Sekil 4'teki grafik ve asagidaki karsilik gelen Tablo 2, HA'nin PN'nin etkisini önemli bir sekilde arttirdigini dogrulamaktadir, aslinda HA varliginda 12 u/ml PN, HA yoklugunda 100 ug/ml'ye esdeger sonuçlar elde etmektedir. ortalama sd ortalama sd min maks min maks Ayrica HA, doku hidrasyonunun kontrolünde önemli bir role sahip olan bir maddedir ve bu, PN'nin gücünü arttirma etkisine göre önemli bir avantaj olup, bulusun amacini Içeren uygulamalar için süphesiz bir sekilde faydali olan bir etkiye sahip karisimi saglamaktadir.

Dolayisiyla söz konusu karisimda polinükleotidlerin ve hyalüronik asidin kombinasyonu tamamlayici bir etkiye sahiptir - önceki, fibroblastlar ve ekstraselüler protein içerigindeki artisi stimüle etmektedir, sonraki matrisin hidrasyonunu tesvik etmektedir.

Dolayisiyla, tedavi edilen dokunun bilesenlerinin tamaminin onarilmasini saglayarak gerekli oldugunda doku trofizminin iyilesmesine ve madde kaybi oldugunda lezyonlarin onarilmasina olanak saglayan bir sinerjistik aktivite elde edilmektedir.

Diger deney testleri, polinükleotidlerin (PN), interlökin 1 beta (Ile) nedeniyle bir önceki inflamatuvar uyaricinin varliginda veya yoklugunda sinoviyositlerde proteinlerin üretilmesinde hyalüronik asidin aktivitesi üzerinde bir güç arttirma etkisine sahip oldugunu göstermistir.

Testlerin sonuçlari Sekil 5'teki histogramda gösterilmektedir, burada inflamatuvar uyarici IL1b varliginda ve yoklugunda (kontrol) sinoviyositlerin kontrol, hyalüronik asit (Hyal, 1 mg/ml), polinükleotidler (PN, 50 iJ/ml) ve Hyal + PN (1 mg/ml ve 50 p/ml) ile stimülasyonunu takiben üretilen ug cinsinden protein miktari 0rdinat olarak çizilmektedir.

Bulusun ana konusu ekli istemler ile tanimlanan kullanima yönelik bilesimler ile ilgiliyken gözlenen sonuçlar isiginda, açiklanan bilesimler asagidaki aktivitelerin gerekli oldugu terapötik veya kozmetik dogasina sahip tüm uygulamalarda kullanilabilmektedir: a) örnegin yüz, boyun, gögüs, genel olarak cilt, cilt kivrimlari ve mukozal cilt (majör ve minör Iabya) ve saçin biyorevitalizasyonuna yönelik kafa derisi gibi kütanöz ek yerleri olmak üzere cildi biyo-rejenere etme aktivitesi; b) topikal olarak uygulandiginda (cilt lezyonlari veya distrofiler) veya intra- artiküler instilasyon yoluyla uygulandiginda trofik, onarici ve yaglayici aktiviteler; c) ülserler, yatalak hastalar ve farkli türlerde madde kaybi durumunda perilezyonel instilasyon yoluyla trofik ve onarici aktivite; (1) göz damlasi, kremler veya oftalmik jeller yoluyla uygulandiginda konjunktiva ve korneanin yeniden epitelizasyonundaki aktivite.

Yukarida bahsedilen uygulamalara yönelik uygun farmasötik formlar asagidakiler olabilmektedir: . çok kullanimlik siseler, tek kullanimlik viyaller, önceden doldurulmus ve tek kullanimlik enjektörler, . spreyler veya köpükler, ilaçli gazli bezler ve topikal uygulamalara yönelik diger uygun cihazlar yoluyla transdermal uygulamaya yönelik sivilar veya emülsiyonlar veya diger formlar, mukozal yüzeylere, dogal açikliklara (oral kavite, vajina, rektum), yumurtaliklara uygulanabilen formülasyonlar için uygun eksipiyanlara sahip bilesimler, supozituvarlar, tabletler ve ovüller, kanüller, merhemler, kremler, jeller, gözyasi ikameleri olarak ve/veya bir yeniden epitelize etme etkisine sahip oftalmik damlalar, topikal uygulamalara yönelik ve estetik/rejeneratif amaçlar ve oküler yapilar dahil olmak üzere epitelyum, mukoza ve bag dokular için amaçlanan madde kaybinin onarimini tesvik eden aktiviteler için farkli türlerde emülsiyonlar (kremler, merhemler, serumlar, jeller).

Claims (1)

1. ISTEMLER . Hyalüronik asit ve balik sperminden veya bir bitki kaynagindan ekstrakte edilen polinükleotidlerin bir karisimini içeren bilesim olup, özelligi söz konusu polinükleotid karisiminin en azindan kismen depürine edilmis DNA'nin polimer zincirlerinin bir fraksiyonu olmasi, burada söz konusu polinükleotid karisiminin, cilt dokularinin rejenerasyonu ve/veya onarimina yönelik terapötik tedavide kullanilmak üzere, orijinal olarak bulunan toplam pürin bazlarindan çikarilan %1 ve %5 pürin bazi arasinda bir depürinasyon yüzdesine sahip olmasi ve 0.5 kDaIton ile 3000 kDaIton arasinda bir molekül agirligi dagilimina sahip olmasidir. . Cilt veya kafa derisinin terapötik biyo-rejenerasyon tedavisi için Istem 1'e göre . Subkütanöz instilasyon yoluyla kütanöz dokunun onarimina yönelik tedavilerde kullanim için Istem 1'e göre kullanima yönelik bilesim. . Transdermal tasimaya uygun formülasyonlarda kütanöz uygulamalar Için Istem 1'e göre kullanima yönelik bilesim. . 1 mg/ml ila 20 mg/ml hyalüronik asit ve 1 mg/ml ila 20 mg/ml söz konusu polinükleotid karisimini içeren, Istem 1 ila 4'ten herhangi birine göre kullanima yönelik bilesim. . 5 mg/ml ila 12 mg/ml hyalüronik asit ve 5 mg/ml ila 12 mg/ml söz konusu polinükleotid karisimini içeren, Istem 5'e göre kullanima yönelik bilesim. . Agirlikça 0.2:1 ile 221 arasinda bir oranda polinükleotidleri ve hyalüronik asidi içeren, Istem 5 veya 6'ya göre kullanima yönelik bilesim. . Önceki istemlerden herhangi birine göre kullanima yönelik bilesim olup, özelligi söz konusu polinükleotid karisiminin, 30 kDalton ile 2000 kDaIton arasinda bir molekül agirligi dagilimina sahip nükleik asidin polimer zincirlerinin bir fraksiyonu olmasidir. . Önceki istemlerden herhangi birine göre kullanima yönelik bilesim olup, özelligi söz konusu polinükleotid karisiminin, nükleik asidin polinükleotid zincirlerinin kismi fragmantasyon asamasini ve nükleik asidin kismi depürinasyon asamasini Içeren bir prosedür yoluyla balik sperminden veya bir bitki kaynagindan ekstraksîyon ile elde edilmesidir. 10.500 kDalton ile 3000 kDaIton arasinda bir molekül agirligina sahip hyalüronik asidi içeren, önceki istemlerden herhangi birine göre kullanima yönelik bilesim. 11.Tercihen mannitol olmak üzere farmasötik olarak kabul edilebilir bir poliol içeren bir sulu solvent içinde fizyolojik salin solüsyonunu içermeyen, sivi formda, önceki istemlerden herhangi birine göre kullanima yönelik bilesim. bir ozmolariteye sahip, Istem 11'e göre kullanima yönelik bilesim. 13.Istem 1 ve 5 ila 12'den herhangi birine göre polinükleotidlerin bir karisimini ve hyalüronik asidi içeren bir bilesimin cilt dokularinin kozmetik tedavisine yönelik kullanimi.