TH86100B - กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ - Google Patents

Abstract

------04/12/2563------(OCR) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการพัฒนาแอนติบอดีอะเรย์มาใช้กับการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหาร ซึ่งยังไม่ปรากฎว่ามีผู้ใดคิดประดิษฐ์มาก่อน โดยจัดให้มีการควบคุมกรรมวิธีและปัจจัยต่างๆให้มีความเหมาะสม ซึ่งขั้นตอนการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารจะใช้แอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารตรึงลงบนสไลด์ที่เคลือบด้วย poly-L-lysine หรือสารเคลือบชนิดอื่น ได้แก่ nitrocellulose, amino silane,aldehyde เป็นต้น แล้วป้องกันปฏิกิริยาเกิดแบบไม่จำเพาะเจาะจงด้วย 3 เปอร์เซ็นต์ (นํ้าหนัก/ปริมาตร) skimmilk และใช้แอนติบอดีทุติยภูมิที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์HRP แสดงผลโดยใช้ซับสเตรท chemiluminescentพบว่าสามารถตรวจเชื้อผสมทั้งในสารละลายบัฟเฟอร์และในนํ้านมได้ ข้อดีของกรรมวิธีนี้คือ สามารถตรวจหาเชื้อก่อโรคได้หนึ่งชนิด (single detection) หรือหลายๆ ชนิด (multiplex detection) ในหนึ่งตัวอย่างด้วยการตรวจเพียงครั้งเดียว โดยใช้ปริมาณสารในขั้นตอนต่างๆ น้อย มีราคาถูก รวดเร็ว ง่ายต่อการวิเคราะห์ตรวจสอบ และสามารถพัฒนาไปเป็นผลิตภัณฑ์ชุดตรวจเพื่อใช้ในเชิงพาณิชย์ได้ ------------ ------08/02/2562------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการพัฒนาแอนติบอดีอะเรย์มาใช้กับการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหาร ซึ่งยังไม่ปรากฏว่ามีผู้ใดคิดประดิษฐ์มาก่อน โดยจัดให้มีการควบคุมกรรมวิธีและปัจจัยต่างๆให้มีความเหมาะสม ซึ่งขั้นตอนการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารจะใช้แอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารตรึงลงบนสไลด์ที่เคลือบด้วย poly-L-lysine หรือสารเคลือบชนิดอื่น ได้แก่ nitrocellulose, amino silane,aldehyde เป็นต้น แล้วป้องกันปฏิกิริยาเกิดแบบไม่จำเพาะเจาะจงด้วย 3 เปอร์เซ็นต์ (นํ้าหนัก/ปริมาตร) skimmilk และใช้แอนติบอดีทุติยภูมิที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ HRP แสดงผลโดยใช้ซับสเตรท chemiluminescentพบว่าสามารถตรวจเชื้อผสมทั้งในสารละลายบัฟเฟอร์และในนํ้านมได้ ข้อดีของกรรมวิธีนี้คือ สามารถตรวจหาเชื้อก่อโรคได้หนึ่งชนิด (single detection) หรือหลายๆ ชนิด (multiplex detection) ในหนึ่งตัวอย่างด้วยการตรวจเพียงครั้งเดียว โดยใช้ปริมาณสารในขั้นตอนต่างๆ น้อย มีราคาถูก รวดเร็ว ง่ายต่อการวิเคราะห์ตรวจสอบ และสามารถพัฒนาไปเป็นผลิตภัณฑ์ชุดตรวจเพื่อใช้ในเชิงพาณิชย์ได้ ------------ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการพัฒนาแอนติบอดีอะเรย์มาใช้กับการตรวจหาเชื้อก่อโรคใน อาหาร ซึ่งยังไม่ปรากฏว่ามีผู้ใดคิดประดิษฐ์มาก่อน โดยจัดให้มีการควบคุมกรรมวิธีและปัจจัยต่างๆ ให้มีความ เหมาะสม ซึ่งขั้นตอยการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารจะใช้แอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรคใน อาหารตรึงลงบนสไลด์ที่เคลือบด้วย poly-L-lysine หรือสารเคลือบชนิดอื่น ได้แก่ nitrocellulose, amino silane, aldehyde เป็นต้น แล้วป้องกันปฏิกิริยาเกิดแบบไม่จำเพาะเจาะจงด้วย 3 เปอร์เซ็นต์ skim milk และใช้ แอนติบอดี้ทุติยภูมิที่ติฉลากด้วยเอนไซม์ HRP แสดงผลโดยใช้ซับสเตรท chemiluminescent พบว่าสามารถ ตรวจเชื้อผสมทั้งในสารละลายบัฟเฟอร์และในน้ำนมได้ ข้อดีของกรรมวิธีนี้คือ สามารถตรวจหาเชื้อก่อโรคได้ หนึ่งชนิด (single detection) หรือหลายๆ ชนิด (multiplex detection) ในหนึ่งตัวอย่างด้วยการตรวจเพียงครั้งเดียว โดยใช้ปริมารสารในขั้นตอนต่างๆน้อยมีราคาถูก รวดเร็ว ง่ายต่อการวิเคราะห์ตรวจสอบ เเละสามารถพัฒนา ไปเป็นผลิตภัณฑ์ชุดตรวจเพื่อใช้ในเชิงพาณิชย์ได้

Claims (10)

------04/12/2563------(OCR) 1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ที่มีลักษณะเฉพาะคือ สามารถตรวจหาเชื้อก่อ โรคในอาหารตั้งแต่ 1 ชนิดขึ้นไปได้พร้อมกันในการตรวจครั้งเดียว ซึ่งประกอบด้วยขั้นตอน ดังนี้ 1) การตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิบนแผ่นสไลด์ (spotting); นำแอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรค ในอาหาร ละลายในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิ ได้แก่ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ซาไลน์ (phosphate buffered saline; PBS) pH 7.2 มาตรึง (Spot) ลงบนแผ่นสไลด์ที่เคลือบด้วย พอลิ แอล ไลซีน (poly-L-lysine) หรือสารเคลือบชนิดอื่น ในปริมาตร 0.5 ไมโครลิตรต่อหยด (spot) นำไปเก็บในตู้ควบคุมความชื้นที่ 30-35 เปอร์เซ็นต์ อุณหภูมิ 23-25 องศาเซลเซียส เป็นเวลาประมาณ 12-16 ชั่วโมง 2) การป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจง (blocking) ; โดยการเติมสารละลายบัพเฟอร์ที่เหมาะสม สำหรับการป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจงลงบนพื้นแผ่นสไลด์ ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ 3 เปอร์เซ็นต์ (นํ้าหนัก/ปริมาตร) สกิมมิลค์ (skim milk) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์ซาไลน์ (PBS, blocking solution) ลงบนพื้นแผ่นสไลด์ วางไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที 3) การล้างแผ่นสไลด์ (washing); ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ซาไลน์ (PBS) ที่มีทวีน20 (Tween20) อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดยเขย่าเบาๆ และล้าต้องการเก็บแผ่นสไลด์ไว้ทดสอบทำได้โดยนำแผ่นสไลด์ไปทำให้ แห้งและเก็บไว้ในอุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส สามารถเก็บได้เป็นระยะเวลาอย่างน้อย 2 เดือน 4) ใส่สารละลายตัวอย่างที่มีเชื้อแบคทีเรียที่ละลายอยู่ใน 1 เปอร์เซ็นต์ (นํ้าหนัก/ปริมาตร) สกิมมิลด์ (skim milk) ปริมาตร 100 ไมโครลิตร แล้วใช้แผ่นกระจกปิดสไลด์ ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา อย่างน้อย 15 นาที 5) การล้างแผ่นสไลด์ (washing); ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ PBS ที่มีทวีน20 (Tween20) อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดยเขย่าเบาๆ 6) ใส่แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ HRP ซึ่งละลายใน 1 เปอร์เซ็นต์(นํ้าหนัก/ปริมาตร) สกิมมิลค์ (skim milk) ปริมาตร 100 ไมโครลิตร แล้วใช้แผ่น กระจกสไลด์ปิด ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที 7) การล้างแผ่นสไลด์ (washing); ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ PBS ที่มีทวีน20 (Tween20) อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดยเขย่าเบาๆ 8) ใส่ซับสเตรทเคมิลูมิเนสเซนท์ (chemiluminescent) ปริมาตร 100 ไมโครลิตร เพื่อใช้ในการติดตาม แสดงผล 9) ทำการประกบกับฟิล์มเป็นเวลา 3 นาที ล้างด้วยนํ้ายาล้างฟิล์มดีเวลอปเปอร์ (Developer) ต่อด้วยล้าง นํ้าสะอาด และ ล้างด้วยนํ้ายาฟิกเซอร์ (Fixer) 10) อ่านผลที่ได้2. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง เชื้อก่อโรคในอาหาร ดังกล่าวคือ เชื้อ E. coli O157:H7, Salmonella spp., Listeria spp., Shigella spp., Vibrio spp., Staphylococcus spp., Rotavirus group A หรือ Rotavirus group B หรือ Norwalk virus3. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง แอนติบอดีทุติยภูมิ มีลักษณะเฉพาะคือ มีความจำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารชนิดเดียวหรือหลายชนิดก็ได้4. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง ความเข้มข้นของ แอนติบอดีทุติยภูมิที่ใช้ มีลักษณะเฉพาะคือ แปรผันไปตามชนิดและคุณสมบัติของเชื้อที่เป็นแอนติเจน รวมถึงแหล่งที่มาของแอนติบอดีทุติยภูมิ5. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง สารเคลือบชนิดอื่น คือ ไนโตรเซลลูโลส (nitrocellulose)6. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 5 ที่ซึ่ง สารเคลือบ ชนิดอื่น คือ อะมิโนไซเลน (amino silane)7. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 5- 6 ข้อใดข้อหนึ่ง ที่ ซึ่ง สารเคลือบชนิดอื่น คือ อัลดีไฮด์ (aldehyde)8. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1-7 ข้อใดข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง สามารถนำไปใช้กับผลิตภัณฑ์ชุดตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหาร ------------ ------08/02/2562------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ สามารถตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารตั้งแต่ 1 ชนิดขึ้นไปได้พร้อมกันในการตรวจครั้งเดียว ซึ่งประกอบด้วยขั้นตอน ดังนี้ 1)การตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิบนแผ่นสไลด์ (spotting) ; นำแอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรค ในอาหาร ละลายในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิ ได้แก่ phosphate buffered saline (PBS) pH 7.2 มาตรึง (spot) ลงบนแผ่นสไลด์ที่เคลือบด้วย poly-L-lysine หรือสารเคลือบชนิด อื่น ในปริมาตร 0.5 ไมโครลิตรต่อหยด (spot) นำไปเก็บในตู้ควบคุมความชื้นที่ 30-35 เปอร์เซ็นต์ อุณหภูมิ 23-25 องศาเซลเซียส เป็นเวลาประมาณ 12-16 ชั่วโมง 2)การป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจง (blocking); โดยการเติมสารละลายบัพเฟอร์ที่เหมาะสม สำหรับการป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจงลงบนพื้นแผ่นสไลด์ ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ 3 เปอร์เซ็นต์ (น้ำหนัก/ปริมาตร) skim milk ใน PBS (blocking solution) ลงบนพื้นแผ่นสไลด์ วางไว้ที่ อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15นาที 3)การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ PBS ที่มี Tween20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆละ 3-5 นาที โดยเขย่าเบาๆ และถ้า ต้องการเก็บแผ่นสไลด์ไว้ทดสอบทำได้โดยนำแผ่นสไลด์ไปทำให้แห้งและเก็บไว้ในอุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส สามารถเก็บได้เป็นระยะเวลาอย่างน้อย 2 เดือน 4)ใส่สารละลายตัวอย่างที่มีเชื้อแบคทีเรียที่ละลายอยู่ใน 1 เปอร์เซ็นต์ (น้ำหนัก/ปริมาตร) skim milk ปริมาตร 100 ไมโครลิตร แล้วใช้แผ่นกระจกปิดสไลด์ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที 5) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ PBS ที่มี Tween20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดย เขย่าเบาๆ 6)ใส่แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ HRP ซึ่งละลายใน 1 เปอร์เซ็นต์ (น้ำหนัก/ปริมาตร) skim milk ปริมาตร 100 ไมโครลิตร แล้วใช้แผ่นกระจกสไลด์ปิด ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที 7)การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ PBS ที่มี Tween20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดย เขย่าเบาๆ 8)ใส่ซับสเตรท chemiluminescent ปริมาตร 100 ไมโครลิตร เพื่อใช้ในการติดตามแสดงผล 9) ทำการประกบลับฟิล์มเป็นเวลา 3 นาที ล้างด้วยน้ำยาล้างฟิล์ม Developer ต่อด้วยล้างน้ำสะอาด และ ล้างด้วยน้ำยา Fixerหน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า10) อ่านผลที่ได้2. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง เชื้อก่อโรคในอาหารดังกล่าวคอ เชอ E. coli 0157:H7, Salmonella spp., Listeria spp., Shigella spp., Vibrio spp., Staphylococcusspp., Rotavirus group A หรอ Rotavirus group B และ Norwalk virus3. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซํ่ง แอนติบอดีทุติยภูมิมีลักษณะเฉพาะคือ มีความจำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารชนิดเดียวหรือหลายชนิดก็ได้4. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 4 ที่ซึ่ง ความเข้มข้นของแอนติบอดีทุติยภูมิที่ใช้ มีลักษณะเฉพาะคือ แปรผันไปตามชนิดและคุณสมบตของเชื้อที่เปีนแอนติเจนรวมถึงแหล่งที่มาของแอนติบอดีทุติยภูมิ 5. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง สารเคลือบชนิดอื่นได้แก่ nitrocellulose6. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 5 ที่ซึ่ง สารเคลือบชนิดอน ได้แก่ amino silane7. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1หรือ5-6ข้อใดข้อหนํ่ง ที่ซึ่ง สารเคลือบชนิดอื่น ได้แก่ aldehyde8. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1-7 ข้อใดข้อหนํ่ง ที่ซึ่งสามารถนำไปใช้กับผลิตภัณฑ์ชุดตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหาร ------------

1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดิอะเรย์ ที่มีลักษณะเฉพาะคือ สามารถตรวจหาเชื้อก่อ โรคในอาหารตั้งแต่ 1 ชนิดขึ้นไปได้พร้อมกันในการตรวจครั้งเดียว ซึ่งประกอบด้วยขั้นตอน ดังนี้ 1) การตรึงแอนจิบอดีปฐมภูมิบนแผ่นสไลด์ (spotting) ; นำแอนติบอดีปฐมภูมิที่จำเพาะต่อเชื่อมต่อโรค ในอาหาร ละลายในบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับตรึงแอนติบอดีปฐมภูมิ ได้แก่ phosphate buffered saline (PBS) pH 7.2 มาตรึง (spot) ลงบนแผ่นสไลด์ที่เคลือบด้วย poly-L-lysine หรือสารเคลือบชนิด อื่น ในปริมาตร 0.5 ไมโครลิตรต่อหยด (spot) นำไปเก็บในตู้ควบคุมความชื่นที่ 30-35 เปอร์เซ็นต์ อุณหภูมิ 23-25 องศาเซลเซียส เป็นเวลาประมาณ 12-16 ชั่วโมง 2) การป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจง (blocking) ; โดยการเติมสารละลายบัพเฟอร์ที่เหมาะสม สำหรับการป้องกันปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะเจาะจงลงบนพื้นแผ่นสไลด์ ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ 3 เปอร์เซ็นต์ skim milk ใน PBS (blocking solution) ลงบนพื้นแผ่นสไลด์ วางไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็น เวลาอย่างน้อย 15 นาที 3) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ PBS ที่มี Tween20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดยเขย่าเบาๆ และถ้า ต้องการเก็บแผ่นสไลด์ไว้ทดสอบทำได้โดยนำแผ่นสไลดไปทำให้แห้งและเก็บไว้ในอุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส สามารถเก็บได้เป็นระยะเวลาอย่างน้อย 2 เดือน 4) ใส่สารละลายตัวอย่างที่มีเชื้อแบคทีเรียที่ละลายอยู่ใน 1 เปอร์เซ็นต์ skim milk ปริมาตร 100 ไมโครลิตร แล้วใช้แผ่นกระจกปิดสไลด์ ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที 5) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ PBS ที่มี Tween20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดย เขย่าเบาๆ 6) ใส่แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ HRP ซึ่งละลายใน 1 เปอร์เซ็นต์ skim mailk ปริมาตร 100 ไมโครลิตร แล้วใช้แผ่นกระจกสไลด์ปิด ทิ้งไว้ที่อุณหภูมิห้อง เป็นเวลาอย่างน้อย 15 นาที 7) การล้างแผ่นสไลด์ (washing) ; ล้างแผ่นสไลด์ด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ที่เหมาะสมสำหรับการล้าง ได้แก่ สารละลายบัฟเฟอร์ PBS ที่มี Tween20 อยู่ 0.05 เปอร์เซ็นต์ จำนวน 3 ครั้งๆ ละ 3-5 นาที โดย เขย่าเบาๆ 8) ใส่ซับสเตรท chemilhuminescent ปริมาตร 100 ไมโตรลิตร เพื่อใช้ในการติดตามแสดงผล 9) ทำการประกบกับฟิล์มเป็นเวลา 3 นาที ล้างด้วยน้ำยาล้างฟิล์ม Developer ต่อด้วยล้างน้ำสะอาด และ ล้างด้วยน้ำยา Fixer 10) อ่านผลที่ได้

2. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง เชื้อก่อโรคในอาหาร ได้แก่ เชื้อ E. coli O157:H7 Salmonella spp. หรือ เชื้อก่อโรคในอาหารชนิดอื่นๆ

3. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ที่ซึ่ง เชื้อก่อโรคใน อาหารชนิดอื่นๆ ได้แก่ Listeria spp., Shigella spp., Vibrio spp., Staphylococcus spp., Rotavirus group A และ B Norwalk virus ฯลฯ

4. กรรมวิธีการตรวจหาเชื่อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะเรย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง แอนติบอดีทุติยภูมิ มีลักษณะเฉพาะคือ มีความจำเพาะต่อเชื้อก่อโรคในอาหารชนิดเดียวหรือหลายชนิดก็ได้

5. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะรเย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 4 ที่ซึ่ง ความเข้มข้น ของแอนติบอดีทุติยภูมิที่ใช้ มีลักษณะเฉพาะคือ แปรผันไปตามชนิดและคุณสมบัติของเชื้อที่เป็นแอนติเจน รวมถึงแหล่งที่มาของแอนติบอดีทุติยภูมิ

6. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะรเย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง สารเคลือบชนิดอื่น ได้แก่ nitrocellulose

7. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะรเย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 6 ที่ซึ่ง สารเคลือบ ชนิดอื่น ได้แก่ amino silane

8. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะรเย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 6-7 ข้อใดข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง สารเคลือบชนิดอื่น ได้แก่ aldehyde

9. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหารด้วยแอนติบอดีอะรเย์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1-8 ข้อใดข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง สามารถนำไปใช้กับผลิตภัณฑ์ชุดตรวจหาเชื้อก่อโรคในอาหาร

10.อ่านผลที่ได้