TH72427A

TH72427A - เทคนิคการทดลองหลอดแก้วสำหรับเซลล์ต้นกำเนิด

Info

Publication number: TH72427A
Application number: TH401002541A
Authority: TH
Inventors: ฟัลก้า นายวาเลนติน; โพรัท นายเยล; เบลคิน นายแดนนี่; ชิโมนี-ซอล์ค นายดัฟน่า; โพโรชอฟ นายสเว็ทลาน่า
Original assignee: นายจักรพรรดิ์ มงคลสิทธิ์; นางสาวปรับโยชน์ ศรีกิจจาภรณ์; นายบุญมา เตชะวณิช; นายต่อพงศ์ โทณะวณิก
Filing date: 2004-07-05
Publication date: 2005-11-21

Abstract

DC60 (01/10/47) กรรมวิธีที่ใช้กับเลือดที่ถูกสกัดได้ถูกคิดค้นขึ้นซึ่งประกอบไปด้วยการนำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความหนาแน่นน้อยกว่า 1.077 g/ml ต่อมา นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml เซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml นั้น นำมาเพิ่มจำนวน โดยการเพาะเลี้ยง second-pass cells เป็นเวลาระหว่าง 3-30 วัน กรรมวิธีที่ใช้กับเลือดที่ถูกสกัดได้ถูกคิดค้นขึ้นซึ่งประกอบไปด้วยการนำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความหนาแน่นน้อยกว่า 1.077 g/ml ต่อมา นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml เซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml นั้น นำมาเพิ่มจำนวนโดยการเพาะเลี้ยง second-pass cells เป็นเวลาระหว่าง 3-30วัน สิทธิบัตรยา

Claims

ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา :แก้ไขใหม่ 25/8/2560 1. วิธีการสำหรับใช้กับเลือดที่สกัดออกมา, ซึ่งประกอบรวมด้วย: การนำเลือดเข้าสู่เกรเดียนท์ (gradient) ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่ มีความหนาแน่นน้อยกว่า 1.077 g/ml; การนำ first-pass cells เข้าสู่เกรเดียนท์ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; การเพิ่มจำนวนเซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml โดยการเพาะเลี้ยง second-pass cells เป็นเวลาระหว่าง 1 และ 30 วัน ในสารเพาะเลี้ยงซึ่งประกอบรวมด้วยหนึ่งสารหรือ มากกว่า ที่ถูกเลือกจากกลุ่มซึ่งประกอบด้วย: ออโตโลกัสเซรัม, VEGF , b-FGF,IGF และเฮปาริน (heparin); เพื่อที่จะใช้ประชากรของเซลล์ที่เพาะเลี้ยงที่มีโปรเจนนิเตอร์เซลล์เม็ดเลือด (hematopoietic progenitor cell) มาก และโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเอนโดธีเลียล โปรเจนนิเตอร์เซลล์ (EPCs) ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------- (เดิม) 1. วิธีการที่นำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมามีดังต่อไปนี้ : นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ เพิ่มจำนวนเซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074g/ml โดยการเพาะเลี้ยง second- pass cells เป็นเวลา 3-30วัน 2. วิธีการในข้อถือสิทธิ 1 การนำเซลล์เม็ดเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่ง รวมถึง การนำเซลล์เม็ดเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่เหมือนฟิคอล 3. วิธีการในข้อถือสิทธิ 1 การนำเซลล์เม็ดเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่สอง หมายรวม ถึง การนำเซลล์เม็ดเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่เหมือนเพอร์คอล 4. วิธีการในข้อถือสิทธิ 1 การนำเซลล์เม็ดเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่สอง หมายรวม ถึง การนำเซลล์เม็ดเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่เหมือนออพติเพรพ 5. วิธีการที่นำมาใช้กับเซลล์ต้นกำเนิดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเนื้อเยื่อซึ่งประกอบด้วยเซลล์ต้นกำเนิดไปปั่นแยกในgradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการ คัดเลือก first-passcells ที่มีความหนาแน่นน้อยกว่า 1.077 g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; นำ second-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สามซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก third-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.068 g/ml; และ เพิ่มจำนวนเซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074g/ml โดยการเพาะเลี้ยง third- pass cells เป็นเวลา 3-30 วัน 6. วิธีการในข้อถือสิทธิ 5 การปั่นแยกใน gardent ที่สามเหมาะสำหรับการคัดเลือก เซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.059 และ 1.068 g/ml และการนำ second-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สาม หมายถึงการคัดเลือกเซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.059 และ 1.068 g/ml 7. วิธีการนำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้ นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ อบ second-pass cells บนผิวพื้นที่มีแอนติบอดี้ 8. วิธีการนำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ อบ second-pass cells บนผิวพื้นที่มีโมเลกุลเร่งการเจริญเติบโตนอกเหนือไปจากคอลลาเจน หรือโฟโบรเนคติน 9. วิธีการในข้อถือสิทธิ 8 การเพาะเลี้ยง second-pass cells หมายถึง อบ second-pass cells บนพื้นซึ่งประกอบด้วยคอลลาเจนและไฟโบรเนคตินอย่างน้อยหนึ่งอย่างนอกจากโมเลกุลเร่ง การเจริญเติบโต 1 0. วิธีการนำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ เพาะเลี้ยง second-cells เป็นเวลา 1-5 วันในสารเพาะเชื้อที่มีเซรัมน้อยกว่า 5% 1 1. วิธีการที่นำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเลือกไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077 g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองศึ่งเหมาะาหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ เพาะเลี้ยง second-pass cells เป็นเวลา 1-5 วัน ในสารเพาะเชื้อที่มีเซรัมมากกว่า 10% 1 2. วิธีการในข้อถือสิทธิ 11 การเพาะ second-pass cellsหมายถึง เพาะ second-pass cells ในสารเพาะเชื้อที่มีเซรัมน้อยกว่า 20 % 1 3. วิธีการนำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; ในช่วง low-serum เพาะ second-pass cells ในสารเพาะเชื้อที่มีเซรัมน้อยกว่า 10 % และ ในช่วง high serum เพาะ second-pass cells ในสารเพาะเชื้อที่มีเซรัมมากกว่าหรือ เท่ากับ 10 % 1 4. วิธีการในข้อถือสิทธิ 13 การเพาะ second-pass-cells ในช่วง low-serum หมายถึง เพาะ second-pass cells เป็นเวลาระหว่าง 1-5 วัน 1 5. วิธีการในข้อถือสิทธิ 13 การเพาะ second-pass-cells ในช่วง high-serum หมายถึง เพาะ second-pass cells เป็นเวลาระหว่าง 1-30 วัน 1 6. วิธีการในข้อถือสิทธิ 13 การเพาะ second-pass-cells ในช่วง low-serum ให้กระทำ หลังการเพาะ second-pass cells ในช่วง high-serum 1 7. วิธีการในข้อถือสิทธิ 13 การเพาะ second-pass-cells ในช่วง low-serum ให้กระทำ หลังการเพาะ second-pass cells ในช่วง high-serum 1 8. เทคนิคที่นำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้ นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; ในช่วงภาวะออกซิเจนต่ำซึ่งเกิดขึ้นอย่างน้อย 2 ชั่วโมงให้เพาะเลี้ยง second-pass cells ใน ภาวะออกซิเจนต่ำ และในช่วงภาวะออกซิเจนไม่ต่ำซึ่งเกิดขึ้นอย่างน้อย 1 วัน ให้เพาะเลี้ยง second- pass cells ในภาวะออกซิเจนไม่ต่ำ 1 9. วิธีการในข้อถือสิทธิ 18 ภาวะออกซิเจนต่ำและไม่ต่ำนั้นเกิดขึ้นในช่วงของการเพาะ เลี้ยงเซลล์ซึ่งใช้เวลาน้อยกว่า 30 วัน และการเพาะเลี้ยง second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำ หมาย ถึง เพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำในช่วงสองวันแรกของช่วงเวลาการเพาะเซลล์ 2 0. วิธีการในข้อถือสิทธิ 18 ภาวะออกซิเจนต่ำและไม่ต่ำนั้นเกิดขึ้นในช่วงของการเพาะ เลี้ยงเซลล์ซึ่งใช้เวลาน้อยกว่า 30 วัน และการเพาะเลี้ยง second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำ หมาย ถึง เพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำในช่วงสองวันสุดท้ายของช่วงเวลาการเพาะเซลล์ 2 1. วิธีการในข้อถือสิทธิ 18 ภาวะออกซิเจนต่ำและไม่ต่ำนั้นเกิดขึ้นในช่วงของการเพาะ เลี้ยงเซลล์ซึ่งใช้เวลาน้อยกว่า30 วัน และการเพาะเลี้ยง second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำ หมาย ถึง เพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำอย่างน้อย 2 ชั่วโมง ในช่วงระหว่างสองวันแรกและ สองวันหลังของช่วงเวลาการเพาะเซลล์ 2 2. วิธีการในข้อถือสิทธิ 18 การเพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำ ให้กระทำ ก่อนการเพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนไม่ต่ำ 2 3. วิธีการในข้อถือสิทธิ 18 การเพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนต่ำ ให้กระทำ หลังการเพาะ second-pass cells ในภาวะออกซิเจนไม่ต่ำ 2 4. วิธีการที่นำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเลือดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความ หนาแน่นน้อยกว่า 1.077g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ เพาะ second-pass cells ในสารเพาะเชื้อซึ่งประกอบด้วยอย่างน้อยสารใดสารหนึ่งสารดัง ต่อไปนี้ : อิริธโธรพอยอิทินสตาดิน โมเลกุล และแอนตี้ไดอะบีทิค 2 5. วิธีการในข้อถือสิทธิ 24 ยาต้านโรคเบาหวาน หมายถึง โรซิกไลตาโซน และการเพาะ เลี้ยง second-pass cells หมายถึงการเพาะเลี้ยง second-pass cells ในสารเพาะเซลล์ที่มีโรซิกไลดา โซน 2 6. วิธีการที่นำมาใช้กับเลือดที่สกัดออกมา มีดังต่อไปนี้: นำเนื้อเยื่อที่มีเซลล์ต้นดำเนิดไปปั่นแยกใน gradient ที่หนึ่งซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก first-pass cells ที่มีความหนาแน่นน้อยกว่า 1.077 g/ml; นำ first-pass cells ไปปั่นแยกใน gradient ที่สองซึ่งเหมาะสำหรับการคัดเลือก second-pass cells ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074 g/ml; และ เพิ่มจำนวนเซลล์ที่มีความหนาแน่นระหว่าง 1.055 และ 1.074g/ml โดยเพาะเลี้ยง second- pass cells เป็นเวลาระหว่าง3-30 วัน 2 7. วิธีการในข้อถือสิทธิ 26 ประกอบด้วย สารสกัดเซลล์ต้นกำเนิดจากไขกระดูด 2 8. วิธีการในข้อถือสิทธิ 26 ประกอบด้วย การเคลื่อนย้ายเซลล์ต้นกำเนิดออกจากไข กระดูดเพื่อช่วยในการสกัดเซลล์ต้นกำเนิด 2 9. วิธีการในข้อถือสิทธิ 26 ประกอบด้วย สารสกัดเซลล์ต้นกำเนิดจากเลือด 3 0. วิธีการในข้อถือสิทธิ 26 การเพาะ second-pass cellsประกอบด้วย เพาะ second-pass cells ในภาชนะบรรจุที่หนึ่งในช่วงแรกของการเพาะเลี้ยงเซลล์ นำ second-pass cells บางส่วนออกจากภาชนะบรรจุที่หนึ่งเมื่อหมดช่วงแรกของการเพาะ เลี้ยงเซลล์ และ เพาะเซลล์ที่นำออกมาจากภาชนะบรรจุที่หนึ่งในภาชนะบรรจุที่สองในช่วงที่สองของการ เพาะเลี้ยงเซลล์ 3

1. วิธีการในข้อถือสิทธิ 30 การนำ second-pass cells บางส่วนออกมา หมายถึง การเลือก เซลล์เพื่อที่จะเซลล์ที่ติดกับผิวภาชนะบรรจุที่หนึ่งออกมา 3

2. วิธีการในข้อถือสิทธิ 30 การนำ second-pass cells บางส่วนออกมา หมายถึง การเลือก เซลล์เพื่อที่จะเซลล์ที่ไม่ติดกับผิวภาชนะบรรจุที่หนึ่งออกมา 3

3. วิธีการในข้อถือสิทธิ 30 ภาชนะบรรจุที่หนึ่งจะมีโมเลกุลเร่งการเจริญเติบโตอยู่บน พื้นผิว และการเพาะเซลล์ในภาชนะบรรจุที่หนึ่ง หมายถึง เพาะเซลล์ในภาชนะบรรจุที่หนึ่งที่มี โมเลกุลเร่งการเจริญเติบโต 3

4. วิธีการในข้อถือสิทธิ 33 โมเลกุลเร่งการเจริญเติบโตเลือกมาจากรายการที่ประกอบ ด้วยคอลลาเจน ไพโบรเนตติน ปัจจัยการเจริญเติบโต และแอนตี้บอดี้สำหรับรีเซพเตอร์พื้นผิวเซลล์ ต้นกำเนิด 3

5. วิธีการในข้อถือสิทธิ 30 ภาชนะบรรจุที่สองนั้นจะมีโมเลกุลเร่งการเจริญเติบโตบน พื้นผิว และการเพาะเซลล์ในภาชนะบรรจุที่สอง หมายถึง เพาะเลี้ยงเซลล์ในภาชนะบรรจุที่สองที่ มีโมเลกุลเร่งการเจริญเติบโต 3

6. วิธีการในข้อถือสิทธิ 35 โมเลกุลเร่งการเจริญเติบโตเลือกมาจากรายการที่ประกอบ ด้วยคอลลาเจน ไพโบรเนตติน ปัจจัยการเจริญเติบโต และแอนตี้บอดี้สำหรับรีเซพเตอร์พื้นผิวเซลล์ ต้นกำเนิด