TH24254U - กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ - Google Patents

กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ

Info

Publication number
TH24254U
TH24254U TH2003000890U TH2003000890U TH24254U TH 24254 U TH24254 U TH 24254U TH 2003000890 U TH2003000890 U TH 2003000890U TH 2003000890 U TH2003000890 U TH 2003000890U TH 24254 U TH24254 U TH 24254U
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
raw starch
starch
raw
culture medium
cassava
Prior art date
Application number
TH2003000890U
Other languages
English (en)
Other versions
TH24254Y (th
Inventor
เกตุบท นางสาวปรารถนา
เชี่ยวชาญเลิศฟ้า นางสาวพัชรศรัณ
ผาสอน นางสาวภัทรา
แววนุกูล นางสาวรัตติยา
สุธีร์วรพงศ์ นางสาวศวรรณี
รัตนะกนกชัย นายกนก
เตชะอภัยคุณ นายจักรกฤษณ์
Original Assignee
มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
Filing date
Publication date
Application filed by มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี filed Critical มหาวิทยาลัยเทคโนโลยีพระจอมเกล้าธนบุรี
Publication of TH24254U publication Critical patent/TH24254U/th
Publication of TH24254Y publication Critical patent/TH24254Y/th

Links

Abstract

------16/05/2567------(OCR) กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ ประกอบด้วย เริ่มจากเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีแป้งดิบเป็นแหล่งคาร์บอน แล้วนำมาคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศและเจริญเติบโตได้ในแป้งดิบ ต่อด้วยจำแนกสายพันธุ์ของจุลินทรีย์บริสุทธิ์ที่ผลิตเอนไซม์ย่อยแป้งดิบ และนำมาผลิตเอนไซม์และตรวจสอบกิจกรรมของเอนไซม์ที่ผลิตขึ้นจากจุลินทรีย์บริสุทธิ์ที่คัดแยกได้ สุดท้ายย่อยแป้งดิบชนิดต่าง ๆ โดยใช้เอนไซม์ที่ผลิตขึ้นจากจุลินทรีย์สายพันธุ์อาร์เอสสี่ขีดสิบสี่ ------------

Claims (1)

  1. ------16/05/2567------(OCR) 1. กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ ประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ก. ขั้นตอนการเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีแป้งดิบเป็นแหล่งคาร์บอน โดยใช้อาหารสังเคราะห์ที่ประกอบด้วย โพตัสเชียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต (KH22P04,) 0.05 ถึง 0.25 กรัม ได้โพตัสเชียมไฮโดรเจนฟอสเฟต (K2HP04) 0.05 ถึง 0.35 กรัม ยูเรีย (Urea) 0.05 ถึง 0.35 กรัม สารสกัดจากยีสต์ (Yeast extract) 0.1 ถึง 1.0 กรัม สารละลายแร่ธาตุ (mineral solution) 5 ถึง 50ไมโครลิตร ในน้ำกลั่น 100 มิลลิลิตร ปรับพีเอซให้เป็น 6.0 ถึง 8.0 จากนั้นเติมสีอินดิเคเตอร์(resazurin) 50 ไมโครลิตร และซีสเตอีน (cysteine) 0.05 ถึง 0.2 กรัม นำไปบ่มที่ 70 องศาเซลเชียส เป็นเวลา 1 ชั่วโมงข. เติมแป้งมันสำปะหลังดิบหรือกากมันสำปะหลังร้อยละ 0.5 ถึง 1.0 บรรจุใส่ขวด โดยบรรจุขวดแยกระหว่างแป้งดิบกับส่วนอาหารเลี้ยงเชื้อ แล้วนำไปไล่อากาศด้วยก๊ซไนโตรเจน เป็นเวลา 1 ถึง 10 นาที ฆ่าเชื้อด้วยหม้อนึ่งความดันไอที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส ความดัน 15ปอนด์ต่อตารางนิ้ว เป็นเวลา 15 ถึง 45 นาที ทิ้งให้เย็นจนมีอุณหภูมิ 25 ถึง 45 องศาเซลเซียสแล้วนำแป้งดิบและอาหารเลี้ยงเชื้อมาผสมกันภายในตู้ที่ไร้ออกซิเจน (anaerobic chamber)ค. เติมตัวอย่างดินบริเวณกองกากมันสำะหลัง (ร้อยละ 1 ถึง 5 น้ำหนักต่อปริมาตร) ที่เก็บมาใส่ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อตามข้อ ก. และ ข. จากนั้นบ่มที่อุณหภูมิ 25 ถึง 60 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ถึง 5 วัน สังเกตการเจริญเติบโโดยตรวจสอบปริมาณการลดลงของปริมาณแป้งดิบความขุ่นของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เพิ่มขึ้น และปริมาณก๊าซที่เกิดขึ้นจากการเจริญเติบโต พบว่าตัวอย่างที่ อาร์เอสสี่ (RS4) สามารถย่อยสลายแป้งมันสำปะหลังดิบได้มากกว่าร้อยละ 80(น้ำหนักแห้ง) ของน้ำหนักเริ่มต้น ในระยะเวลา 3 วันง. การคัดแยกจุลินทรีย์สายพันธุ์บริสุทธิ์จากกลุ่มจุลินทรีย์อาร์เอสสี่ (RS4) จากข้อ ค. ด้วยวิธีการทำโรลทิวป์ (roll tube) โดยมีการเตรียมอาหารเหมือกับข้อ ก. และ ข. เติมผงวุ้น (Bactoagar) ร้อยละ 0.5 ถึง 1.5 (น้ำหนักต่อปริมาตร) ลงในหลอดโรลทิวป์เพื่อทำให้เกิดเป็นแผ่นฟิลม์บางภายในหลอด นำหลอดโรลทิวป์ที่มีการเติมกลุ่มจุลินทรีย์อาร์เอสสี่ (RS4) บ่มที่อุณหภูมิ 30 ถึง 45 องศาเซลเซียส จนกระทั่งโคโลนีปรากฏบนแผ่นฟิลม์อาหาร จากนั้นทำการเลือกเอาเฉพาะโคโลนีที่สามารถเกิดบริเวณวงใส (clear zone) ย้ายลงไปยังสูตรอาหารเหลวตามข้อ ก. และ ข. เพื่อเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่คัดแยกโดยสังเกตการย่อยแป้งมันสำปะหลังดิบพบว่าจุลินทรีย์อาร์เอสสี่ขีดสิบสี่ (RS4-14) มีอัตราการย่อยสูงที่สุด เมื่อเปรียบเทียบกับจุลินทรีย์เดี่ยวอื่นๆ ภายในระยะเวลา 4 วัน2. กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 จุลินทรีย์สายพันธุ์อาร์เอสสี่ขีดสิบสี่ มีความคล้ายคลึงกับคลอสทริเดียม เอสพี ซีสี่ทับหนึ่ง (Clostridium sp. C4/1) และ คลอสทริเดียม เอสพี ซีเอฟพีเอขีดยี่สิบ (Clostridium sp. CFPA-20) และคลอสทริเดียม ฟาลแลต (Clostridium fallax) ร้อยละ 99 99 และ 95 ตามลำดับ3. กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 2 ข้อใดข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง มีกากมันสำปะหลังดิบเป็นแหล่งอาหาร ร้อยละ0.5 ถึง 2.0 (น้ำหนักต่อปริมาตร) ทำการถ่ายจุลินทรีย์สายพันธุ์อาร์เอสสี่ขีดสิบสี่ ที่มีค่าความขุ่น 0.2 ถึง 0.8 (600นาโนเมตร) ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ นำไปบ่มที่อุณหภูมิ 30 ถึง 45 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ถึง 96 ชั่วโมงหลังจากนั้นนำไปปั่นเหวี่ยงด้วยเครื่องปั่นแยกด้วยแรงเหวี่ยงที่ความเร็ว 5,000 ถึง 10,000 รอบต่อนาที อุณหภูมิ 4ถึง 10 องศาเซลเชียส เป็นเวลา 5 ถึง 15 นาที ส่วนน้ำเลี้ยงส่วนใส (supernatant) ใช้เป็นเอนไซม์หยาU (crudeenzyme) ซึ่งเอนไซม์หยาบแสดงกิจกรรมเอนไซม์จำเพาะ (Specific activity) ของแอลฟ่าอะไมเลส กลูโคอะไมเลส แอลฟ่ากลูโคซิเดส คาร์บอกซิเมทิลเซลลูเลส ไซลาเนส เบต้าไซโลซิเดส และ เพคติเนส ------------ -
TH2003000890U 2020-04-24 กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ TH24254Y (th)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TH24254U true TH24254U (th) 2024-08-09
TH24254Y TH24254Y (th) 2024-08-09

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Antier et al. Pectinase-hyperproducing mutants of Aspergillus niger C28B25 for solid-state fermentation of coffee pulp
Dung et al. Functionality of selected strains of moulds and yeasts from Vietnamese rice wine starters
US7888085B2 (en) Method for increased production of biogas
Nusrat et al. Comparative studies on the production of extracellular α-amylase by three mesophilic Bacillus isolates
US20210139938A1 (en) Aspergillus oryzae blcy-006 strain and application thereof in preparation of galactooligosaccharide
Kumar et al. Optimization of process parameters for the production of inulinase from a newly isolated Aspergillus niger AUP19
Antranikian et al. Conditions for the overproduction and excretion of thermostable α-amylase and pullulanase from Clostridium thermohydrosulfuricum DSM 567
Mary Brintha Croos et al. Isolation of a cellulase producing Bacillus cereus from cow dung and determination of the kinetic properties of the crude enzyme.
CN101864366A (zh) 一种桔青霉菌株及其应用
RU2001949C1 (ru) Штамм гриба TRICHODERMA REESEI - продуцент целлюлолитических ферментов
CN104630166A (zh) 微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法
CN118325768A (zh) 一株产纤维素酶的特基拉芽孢杆菌dc-15及其应用
CN103911315B (zh) 一株产褐藻胶裂解酶的菌株及其应用
CN102533570B (zh) 一种黑曲霉及其应用及发酵制备柠檬酸的方法
Sarangbin et al. Yam bean starch: a novel substrate for citric acid production by the protease-negative mutant strain of Aspergillus niger
JPS61209594A (ja) アルコ−ルの製造方法
US4737459A (en) Regulation and enhancement of enzyme production
CN101451116A (zh) 一种表达高温α-淀粉酶的基因工程菌株
NO824162L (no) Mikroorganismer av genus hypomikrobium og fremgangsmaate til avbinding av metylgruppeholdige forbindelser i vandig opploesninger
CN116083256A (zh) 一株哈萨克斯坦酵母fjy-3菌株及其应用
TH24254Y (th) กรรมวิธีการคัดแยกและคัดเลือกจุลินทรีย์ที่ไม่ใช้อากาศในการเจริญเติบโตที่สามารถผลิตเอนไซม์ย่อยสลายแป้งดิบ
RU2001103C1 (ru) Штамм бактерий BACILLUS LICHENIFORMIS - продуцент термостабильных амилолитических ферментов
Alhadithy et al. Product concentration, yield percentage and productivity of citric acid formation using Aspergillus niger isolated from palm dates
CN114657073B (zh) 一株高产纤维二糖酶的橘青霉菌株及其应用
Sani et al. Isolation, partial purification and characterization of α-amylase from Bacillus subtilis