NO824162L - Mikroorganismer av genus hypomikrobium og fremgangsmaate til avbinding av metylgruppeholdige forbindelser i vandig opploesninger - Google Patents

Mikroorganismer av genus hypomikrobium og fremgangsmaate til avbinding av metylgruppeholdige forbindelser i vandig opploesninger

Info

Publication number
NO824162L
NO824162L NO824162A NO824162A NO824162L NO 824162 L NO824162 L NO 824162L NO 824162 A NO824162 A NO 824162A NO 824162 A NO824162 A NO 824162A NO 824162 L NO824162 L NO 824162L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
hypomicrobium
compounds
nrrl
genus
microorganisms
Prior art date
Application number
NO824162A
Other languages
English (en)
Inventor
Oreste Ghisalba
Franz Heinzer
Martin Kueenzi
Original Assignee
Ciba Geigy Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ciba Geigy Ag filed Critical Ciba Geigy Ag
Publication of NO824162L publication Critical patent/NO824162L/no

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/32Processes using, or culture media containing, lower alkanols, i.e. C1 to C6
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215Microorganisms
    • Y10S435/822Microorganisms using bacteria or actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
  • Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Description

Oppfinnelsen vedrører nye fakultative metylotrope mikroorganismer av genusen hypomikrobium, en fremgangsmåte til mikrobiologisk rensning av vandige oppløsninger ved av-
bygning av metylgruppeholdige forbindelser i nærvær av disse mikroorganismer, cellemasser som fremstilles av disse mikroorganismer, samt anvendelsen av den ifølge fremgangsmåten oppnådde cellemasse.
Med begrepet "metylotrope mikroorganismer" forstår man slike mikroorganismer som vokser på næringsmedier som som karbonkilde inneholder forbindelser med bare et karbonatom, f.eks. metanol.
Med begrepet "fakultative metylotrope mikroorganismer" forstår man slike mikroorganismer som vokser på næringsmedier, som som karbonkilde inneholder forbindelser med et karbonatom, f.eks. metanol og/eller forbindelser med flere karbonatomer, f.eks. glukose.
I litteraturen er det omtalt fakultativ metylotrope mikroorganismer som i vandig oppløsning avbygger en eller flere forbindelser fra følgende gruppe av organiske forbindelser respektiv kan utnytte den som karbon- eller som karbon- og nitrogenkilde: metanol, etanol, acetater, f.eks. natriumacetat, formiater, f.eks. natriumformiat, monosaccharider, f.eks. glukose, disaccharider, f.eks. saccharose, dimetylfosfit, trimetylfosfit eller bestemte metylammoniumforbindelser, f.eks. metylammonium-, etyImetylammonium- eller dimetylammoniumklorid respektiv de frie aminer.
Slike mikroorganismer er deponert i forskjellige stammesaml-inger, f.eks. American Type Culture Collection (ATCC), i den tyske samling av mikroorganismer '(DMS ( eller i National Collection of Industrial Bacteria (NCIBI, og oppført i de av disse deponeringssteder publiserte kataloger.
Ved den stortekniske produksjon i den kjemiske industri frem- . kommer vandige oppløsninger, f.eks. avvann som inneholder disse forbindelser og/eller metylsulfater, f.eks. natriummetylsulfat delvis i meget høyde konsentrasjoner som forurensninger. For å unngå økologiske belastninger på grunn av disse forbindelser respektiv salter må man rense slike avvann. Rensningen medfører imidlertid meget store problemer. Således fjerner man hittil laverealkylammoniumsaltet, f.eks. metylammonium-, etylmetylammonium- eller dimetylammoniumklorid, eller metylsulfatet, f.eks. natriummetylsulfat ved forbrenning. Generelt må forbrenningen av organiske avfallsstoffer over lang tid anses som en meget ugunstig fjernemetode med store om-kostninger og likeledes høye økologiske belastninger.
Dette problem løses ved foreliggende oppfinnelse som vedrører nye fakultativ metylotrope mikroorganismer av genusen hypomikrobium som kan avbygge samtlige ovenfornevnte organiske forbindelser og fremfor alt metylsulfåter, f.eks. natriummetylsulfat. Oppfinnelsen vedrører likeledes en fremgangsmåte til mikrobiologisk rensing av vandige oppløsninger ved avbygning av laverealkanoler, laverealkanoater, monosaccharider, disacchardier, dimetylfosfit, trimetylfosfit, leverealkyl-ammoniumforbindelser eller av frie aminer herav eller av metylsulfatforbindelser eller blandinger av disse forbindelser i nærvær av disse mikroorganismer, cellemassene som fremstilles av disse mikroorganismer og anvendelsen av den ifølge fremgangsmåten oppnådde cellemasse.
De i det foregående og følgende anvendte generelle defini-sjoner av forbindelser har innen rammen av foreliggende oppfinnelse fortrinnsvis følgende betydninger: Laverealkanoler er f.eks. metanol eller etanol. Laverealkanoater er f.eks. salter av maur- eller eddiksyre, f.eks. natriumformiat, natrium- eller kaliumacetat. Monosaccharider er f.eks. heksoser, f.eks. glukose, videre fruktose, mannose eller galactose.
Disacchardier er f.eks. saccharose, maltose eller lactose. Laverealkylammoniumforbindelser er f.eks. metylammonium-, dimetylammonium- eller etylmetylammoniumklorid. Metylsulfatforbindelser er f.eks. natrium- eller kalium-metylsulfat.
Oppfinnelsen vedrører spesielt mikroorganismer av genusen hypomikrobium og en fremgangsmåte til mikrobiologisk rensing av vandige oppløsninger ved avbygning av metanol, etanol, glukose, dimetylfosfit, trimetylfosfit, natriumformiat, natriumacetat, metylammoniumklorid, dimetylammoniumklorid eller etyImetylammoniumklorid eller av frie aminer av disse salter eller av natriummetylsulfat.
Oppfinnelsen vedrører i første rekke mikroorganismer av genusen hypomikrobium fra gruppen av følgende stammer: Hypomikrobium MS 72 (NRRL-B-12573) , MS 75 (-NRRL-B-12572) ,
MS 219 (NRRL-B-12571), MS 223 (NRRL-B-12570) og MS 246 (NRRL-B-12569) og en fremgangsmåte til mikrobiologisk rensing av vandige oppløsninger ved avbygning av natriummetylsulfat.
De nye stammer er deponert ved Agricultural Research Culture Collection (NRRL) in Peoria, Illinois 61604, USA den 3.11.81 og oppbevares der under tidligere nevnte deponeringsnummere.
Isolering av de nye mikroorganismer
De nye mikroorganismer stammer fra klarslammet av et avvann-renseanlegg fra Ciba-Geigy AG (ARA-CG) og fra en søppeldeponi i Croglio, Kanton Tessin, Sveits og er på i og for seg kjent måte isolert som følger: Isoleringsmetode 1: En avvannprøve eller en klarslamsuspen-sjon (1 g pr. 10 ml sterilt vann) platteres på sterilt natriummetylsulf atholdig agar (på basis av næringsoppløsning MV 7). Næringsoppløsningen MV 7 inneholder i en liter vann følgende bestanddeler: 2 g NH4N03(nitrogenkilde), 1,4 g Na2HP04,
0,6 g KH2P04(puffer og fosforkilde), 0,2 g MgS04-7 H20,
0,01 g CaCl2-2 H20, 0,001 g FeS04-7 H20 og 1 ml sporelement-oppløsning (bestående av hver gang 20 mg/l Na2MoC>4-2 H20, Na2B4O7«10 H20, MnS04-H20, ZnS04«H20 og CuSG^-5 H20).
Man oppløser saltene i destillert vann, bringer med fortynnet natronlut til pH 7 og fyller opp med destillert vann til 1 liter. For fremstilling av den faste næringsbunnen NV 7-agar tilsettes næringsoppløsningen dessuten 20 g/liter agar (Difco). Man steriliserer i autoklav. Inkubasjonen foregår ved 28-30°C. Enkeltkolonier fjernes forsiktig og utstrykes igjen på det samme medium. Man gjntar denne prosedyre flere ganger til det foreligger rene isolater.
Isoleringsmetode 2: En avvannsprøve eller en klarslamsuspen-sjon (1 g pr. 10 ml sterilt vann) has i en rystekolbe hvori det befinner seg steril næringsoppløsning MV 7. Man tilsetter en sterilfiltrert vandig natriummetylsulfat oppløsning og inkuberer ved 2 8°C som standkultur i 14 dager eller som-rystekultur ved 25 0 Upm i 7 dager. 0,5 ml av denne første anrikningskultur has i den friske næringsoppløsning MV 7 og inkuberes igjen ved 28°C som standkultur eller rystekultur. 0,5 ml av annen anrikningskultur has igjen i den friske næringsoppløsning og inkuberes 7 dager ved 2 8°C. Annen eller tredje anrikningskultur platteres på steril natriummetylsulfatholdig MV 7-agar
(næringsoppløsning MV 7 med tilsetning av 20 g/liter agar)
Difco)) og inkuberes ved 28°C. Enkeltkolonier fjernes forsiktig og utstrykes igjen på samme medium. Denne prosedyre gjentas flere ganger inntil det foreligger rene isolater.
I følgende tabell 1 er det angitt deponeringsnummer, opprinn-else og isoleringsmetode for hver enkelt av de ovenfor nevnte stammer:
Karakterisering av de nye mikroorganismer
1. Generelle parametere og mikroskopi
Alle i tabell 1 oppførte stammer er gramnegative, oksydase-positive og vokser under aerobe betingelser optimalt ved 2 8° til 30°C. Som C-kilder respektiv C- og N-kilder kan de i vandig oppløsning utnytte metanol, etanol, glukose, dimetylfosfit, trimetylfosfit, formiat-, acetat-, metylammonium-, dimetylammonium-, etyImetylammonium- eller metylsulfationer. På grunn av denne egenskap egner de nye mikroorganismer seg for fremgangsmåter til mikrobiologisk rensning av slike vandige oppløsninger som inneholder disse C-kilder respektiv C- og N-kilder som forurensninger.
I den mikroskopiske avbildning (lysmikroskop) er alle stammer meget like og det som motile små staver av ca. l-2y lengde som opptrer enkeltvis, parvis eller agglomerert. Mange celler har "skaft" eller tråder. Det elektronmikroskopiske bilde befinner seg i god overensstemmelse med de lysmikroskopiske iakttagelser. En del av cellene viser hver gang lange "skaft" eller "tråder", idet hver celle maksimalt har et slikt skaft i polar posisjon. Noen skaftede celler har svøper. Ved enkelte skaftede celler er det ved enden av skaftet en fortykning
(knopp). En annen celletype har riktignok intet skaft, dertil imidlertid en subpolar svøpe.
Elektronmikroskopisk bilde av noen typiske celler av stammen ifølge tabell 1: 2. Biokjemisk karakterisering og klassifisering av de nye mikroorganismer.
Til karakterisering av de i tabell 1 oppførte stammer anvendes to handelvanlige prøvesysterner. Begge systemer egner seg for generelle biokjemiske karakteriseringer.
a) " Oxi- Ferm- Tube"- prøve ( Roche)
Dette prøvesystem anvendes ved gramnegative små staver med posi-tiv oksydasereaksjon. Prøven gjennomføres parallelt hver gang en gang med podningsmaterial fra den angjeldende stamme av metanol-agar og av nutrient-agar. Eksperimentell utførelse etter forskriften fra fremstilleren. Prøveresultatene er oppstilt i tabell 2.
På grunn av prøveresultatene i tabell 2 lar de enkelte stammer seg på grunn av deres overensstemmende trekk sammenfatte i tre grupper:
b) API 20 E- prøve
Prøven gjennomføres parallelt hver gang en gang med podnings-materiale av den angjeldende stamme fra metanol-agar og fra nutrient-agar. Eksperimentell utførelse etter fremstillerens forskrift. Prøveresultatene oppstilt i tabell 4. Etter prøveresultatene ifølge tabell 4 lar de enkelte stammer seg igjen innordne i gruppene I-III ifølge tabell 3. Riktignok viser det seg innenfor gruppene små forskjeller:
- MS 75 kan flytendegjøre gelatin, ikke MS 223.
- MS 219 og MS 246 adskiller seg eventuelt med hensyn til
ADH og LDC (i tillegg tenderer MS 246 til flokket vekst).
c) Sammenligning av de to prøvesystemer a) og b)
Det lar seg for de fem stammer ifølge tabell 1 stille følgende
tverrsammenligninger:
H2S-dannelse, indoldannelse og arginindihydrolase i begge systemer er alltid negative. Urease stemmer i begge systemer relativt godt o citratutnyttelsen stemmer fullstendig overens i begge systemer. De forskjellige funn med hensyn til N2-produksjon (nitratreduksjon) forklares med den høyere føl-somhet av bestemmelsene i API 20 E-prøven.
Resultatene av "Oxi/TermTuve " prøven og "API 20 E" prøven ville tillate"en tilordning av stemmen ifølge tabell 1 som pseudomonas species, pseudomonas-lignende, alicaligenes faecalis eller achromobacter species. Ved siden av biokjmiske data er det for disse genera dessuten typisk typen av besvøp-ning av de gramnegative små staver. Således er pseudomonas-stammene monotrik eller multitrik polart besvøpet og i meget sjeldne tilfeller ikke besvøpet og achromobacter utstyrt med 1 til 4, under tiden inntil 8, peritriske svøper. Elektronmikroskopiske funn for noen typiske celler (se avbildningen tidligere i teksten) viser imidlertid at stammen ifølge tabell 1 ikke kan tilordnes noen av de overnevnte genera. Stammene er entydig skaftede bakterier. Såvel det lysmikroskopiske som også det elektronmikroskopiske funn passer til overgruppen av knoppede eller skaftede bakterier og innen denne gruppe til gruppen hypomikrobium. Det elektronmikroskopiske funn stemmer overens med dette i "Bergey's Manual of Determinative Bacteriology" (8.opplag) i avsnittet "Budding and/or appendaged Bacteria" for genusen hypomikrobium beskrivende trekk.
Stammens konservering
For konservering av stammen ifølge tabell i egner det seg følgende metoder: a) Adsorbsjon av cellematerialet av angjeldende stamme på glasskuler i glyceroloppløsning og etterfølgende lagring ved -20°C. b) Oppbevaring av cellematerialet av angjeldende stamme på skrå- agar,, og c) Lyo-ampuller. Den angjeldende kultur frasentrifugeres for næringsoppløsning og cellemassen resuspenderes i 1/4
til 1/3-volum 15%-ig skummet melk og lyofiliseres.
Av de i tabell 1 oppførte stammer kan det danne seg spontant mutanter eller det lar seg fremstille kunstige mutanter som likeledes som de naturlige stammer i vandig oppløsning kan avbygge laverealkanoler, f.eks. metanol eller etanol, laverealkanoater, f.eks. natriumformiat eller natriumacetat, monosaccharider, f.eks. glukose, disaccharider, f.eks. saccharose, metylammoniumforbindelser, f.eks. metyl-, etylmetyl- eller dimetylammoniumklorid, samt fremfor alt metylsulfat, f.eks. natriummetylsulfat og produsere cellemasse, Slike mutanter kan man frembringe kjemisk, f.eks. med visse guanidinderi-vater, f.eks. N-metyl-N<1->nitro-N-nitrosoguanidin eller med alkalinitrit, f.eks. natriumnitrit, eller fysikalsk, f.eks. med ultrafiolett-, røntgen- eller radioaktiv stråling.
Mikroorganismen ifølge oppfinnelsen finner anvendelse i en fremgangsmåte til mikrobiologisk rensning av vandige oppløs-ninger ved avbygning av lavere alkanoler, laverealkanoater, monosaccharider, disaccharider, dimetylfosfit, trimetylfosfit, laverealkylammoniumforbindelser eller av frie aminer herav, eller av metylsulfatforbindelser som blandinger av disse forbindelser, idet fremgangsmåten erkarakterisert vedat i en slik vandig oppløsning dyrkes en mikroorganisme av genusen hypomikrobium eller en fra denne mikroorganisme avledet for fremgangsmåten anvendbar mutant i nærvær av essensielle uorganiske salter og eventuelt en nitrogenkilde, ca. 20° til ca. 40°C og en pH-verdi fra ca. 4 til 7,5 og hvis ønsket isoleres den dannede cellemasse.
Ved dyrkning eller fermentering avbygger de i tabell 1 opp-førte stammer de i vandige oppløsning, f.eks. i et avvann be-finnende bestanddeler, eksempelvis metanol, etanol, glukose, natriumacetat, dimetylfosfit, trimetylfosfit, metylammonium-dimetylammonium- eller etyImetylammoniumklorid og fremfor alt natriummetylsulfat og forbruker oksygen.
Disse bestanddeler kan delvis avbygges- i meget høye konsentrasjoner av den angjeldende forbindelse eller det angjeldende salt, av de i tabell 1 oppførte mikroorganismer. Ved avbygnings-fremgangsmåten produserer mikroorganismene cellemasse og som ytterligere fermentasjonprodukt karbondioksyd. Ved avbygning av metylammonium-, dimetylammonium- eller etyImetylammoniumklorid oppstår som ytterligere fermentasjonsprodukt ammonium-klorid og klorhydrogen og ved avbygning av natriummetylsulfat oppstår natriumhydrogensulfat. pH-verdien er ved tilsetning av pufferoppløsning, f.eks. fosfatpupperoppløsning eller av vandig base, f.eks. vandig natrium- eller kaliumhydroksyd-oppløsning å innstille på verdier mellom ca. 4,0 og 7,5, fotrinnsvis ca. 5 til 6.
Dyrkingen foregår i nærvær av essensielle uorganiske salter. Slike salter er eksempelvis helogenider, f.eks. klorider, karbonater, sulfater eller fosfater av alkali-, jordalkali- eller overgangsmetaller samt borater eller molybdater av alkali-metaller.
Foretrukkede essensielle uorganiske salter er eksempelvis dinatrium- eller dikaliumhydrogenfosfat, natrium- eller kaliumdihydrogenfosfat, magnesium- eller jernsulfat og kalium-og kalsiumklorid. I mindre mengder' kan det dessuten tilsettes sink-, mangan- og koppersulfat, natriummolybdat og boraks.
Til rensning av vandige oppløsninger som ikke inneholder nitro-genholdige forbindelser og eksempelvis bare metanol, etanol, glukose, dimetylfosfit, trimetylfosfit, formiat- acetat- eller monoalkylsulfationer, tilsetter man som nitrogenkilde eksempelvis aminosyrer, peptider eller proteiner respektiv deres av-bygningsprodukter som pepton eller trypton, kjøttekstrakter, mel, f.eks. fra mais, hvete eller bønner, f.eks. fra soja-bønner, destillasjonsrediser fra alkoholfremstilling, gjær-ekstrakter og fortrinnsvis ammoniumsalter, f.eks. ammonium-klorid, eller nitrater, f.eks. kalium- eller ammoniumnitrat.
Dyrkningen foregår under aerobe betingelser, f.eks. under oksygen- eller lufttilførsel, og nemlig under rysting eller omrøringer i rystekolber eller fermenterere. Dyrkningen lar seg gjennomføre i et temperaturområde på ca. 20°C til ca.
40°C, fortrinnsvis ved ca. 27° til ca. 30°C.
Dyrkningen kan foregå porsjonsvis, f.eks. ved en- eller flere gangers tilsetning av næringsoppløsning respektiv de tilsvarende karbon- og nitrogenkilder eller kontinuerlig ved permanent tilsetning av næringsoppløsning respektiv de tilsvarende karbon-og nitrogenkilder.
Fortrinnsvis dyrker man i flere trinn, idet man i første
rekke fremstiller en eller flere forkulturer, f.eks. i et flytende næringsmedium, som man deretter overpoder i den egentlige hovedkultur. En forkultur lar seg eksempelvis fremstille, idet man overfører en prøve med cellemateriale angjeldende mikroorganismer som eksempelvis oppbevares over skrå-agar til en steril næringsoppløsning, f.eks. MV 7 med
en egnet karbonkilde, f.eks. natriummetylsulfat og.inkuberer flere dager ved 28°C. Med denne første forkultur poder man frisk næringsoppløsning, f.eks. MV 7 med samme karbonkilde og inkuberer igjen flere dager ved 2 8°C.
Man kan følge fermentasjonsforløpet ved prøveuttak analyttisk under fermenteringen, f.eks. ved måling av pH-verdi av kultur-en eller den optiske tetthet som er et mål for veksten av den eventuelle stamme samt gravimetrisk ved hjelp av tørrvekten av den dannede cellemasse.
Den dannede cellemasse lar seg avsluttende, f.eks. opparbeide etter en av de tallrike i det europeiske patent 0 010 243 omtalte fremgangsmåter å overføre til gjødningsmiddel.
Som cellemasse er det i foreliggende tilfelle å forstå alle
i levende tilstand, f.eks. i delingstilstand eller hviletilstand i partiell eller fullstendig celledød, eller allerede i den enzymiske spaltning eller i spaltning ved fremmedkulturer be-^ finnende cellesystemer, som oppbygges av mikroorganismen ifølge søknaden.
Denne cellemasse er et verdifullt råstoff og kan anvendes
som encelle-protein eksempelvis som storfe-fortilsetning. Cellemassen lar seg også eksempelvis anvende som suspensjon eller opparbeidet, f.eks. etter avvanning eller pasteuriser-ing som gjødningsmiddel. Man kan anvende cellemassen også
som utgangsmaterial til fremstilling av biogass med høy varmeverdi (sammensetning ca. 70% metan, 29% karbondioksyd og 1% hydrogen, varmeverdi ca. 5500 - 6500 kcal/m 3), eksempelvis ved anaerob gjæring i forråtnelsestårn. Residuet (forråtnelsesslammet) fra fremstillingsfremgangsmåten av biogass er likeledes et høyverdig gjødningsmiddel som sammen-lignet til opprinnelig cellemasse er anriket med nitrogen.
Oppfinnelsen skal forklares nærmere ved hjelp av noen eks-empler hvor gradene er angitt i Celsius grader.
Elsempel 1 (Fremstilling av forkulturen)
1 prøve med over skrå-agar oppbevart cellemateriål av mikroorganisme av stamme MS 72 (se tabell 1) has i en rystekolbe inneholdende 20 ml næringsoppløsning MV 7 med den ovenfor an-gitte sammensetning og 5 g/l natriummetylsulf at.. Man tilsetter ca, 1 mMol av en fosfatpufferoppløsning av pH 7 og inkuberer 72 timer ved 28° og 250 Upm. 5-7 ml av denne første forkultur inkuberes i en annen rystekolbe inneholdende 100 ml næringsoppløsning MV 7, 10 g/l natriummetylsulfat og 5 mMol fosfatpuffer (pH:7) i 72 timer ved 28° og 250 U pm.
Eksempel 2
Analogt eksemepel 1 lar det seg fremstille forkulturer av stammene MS 75, 219, 223 og 246 (se tabell 1).
Eksempel 3
I en laboratoriefermenterer forenes 10 1 eventuelt varmesterilisert (sterilisering 20 min. ved 120°) næringsopp-løsning MV 7 med en eventuelt sterilfiltrert natriummety1-sulfatoppløsning således at det fremkommer et omtrentlig arbeidsvolum på 10 1 med en konsentrasjon på ca. 5 g/l natriummetylsulfat.
Man tilsetter en prøve med ca. 500 ml av annen forkultur av stammen MS 72 og overholder følgende betingelser: pH-verdi 5,5, som holdes konstant ved tilsetning hver gang av 4-normal natronlut og 1-normal saltsyre, temperatur: 2 8°, lufttilførsel: 0,26 1/1.min. og rørehastighet på 400 til 700 Upm.
Stammen vokser på rent natriummetylsulfat som eneste karbonkilde. Etter 75 timer er det anvendte natriummetylsulfat praktisk talt fullstendig avbygget. Den dannede cellemasse foreligger som blanding av enkelt celler eller aggregater av forskjellige størrelser, som man kan adskille ved avsetning eller sentrifugering.
Eksempel 4
Analogt eksempel 3 lar natriummetylsulfat seg avbygge i
vandig oppløsning, idet man i en laboratoriefermenterer dyrker forkulturer av stammen MS 75, 219, 223 og 246.
Eksempel 5
I en laboratoriefermenterer forenes 10 1 varmesterilisert (sterilisering 20 minutter ved 120°) næringsoppløsning MV 7 med en sterilfiltrert natriummetylsulfatholdig avvannopp-løsning (sammensetning: 31% natriummetylsulfat, 10% metanol,
1% sulfat, 56% vann og mindre enn 2% aromater), således at det fremkommer et samlet volum på ca, 10 1 med en konsentrasjon på ca, 10 g/l natriummetylsulfat. Man tilsetter en prøve med ca. 5 00 ml av annen forkultur av stammen MS 7 2 og overholder de i eksempel 3 nevnte betingelser. I løpet av de neste 4-5 dager foregår en fullstendig "av bygning av substrat-et.
Eksempel. 6
analogt eksempel 5 lar natriummetylsulfat seg avbygge i sterilfiltrert avvannoppløsninger, idet man i en laboratoriefermenterer dyrker forkulturer av stammene MS 75, 219, 22 3
og 246.
Eksempel 7
Analogt eksempel 5 oh 6 lar det seg under utelatelse av steril-filtrering avbygge natriummetylsulfat i avvannoppløsninger, idet man i en labroatoriefermenterer dyrker forkulturer av stammene MS 72, 75, 219, 223 og 246.

Claims (10)

1. Mikroorganismer av genusen hypomikrobium eller av mutanter avledet fra disse mikroorganismer, karakterisert ved at de formår å produsere cellemasse i en vandig opp-løsning som inneholder laverealkanoler, laverealkanoater, monosaccharider, disaccharider, dimetylfosfit, trimetylfosfit, laverealkylammoniumforbindelser eller frie aminer herav eller metylsulfatforbindelser eller blandinger av disse forbindelser.
2. Mikroorganismer av genusen hypomikrobium ifølge krav 1 eller mutanter avledet fra disse mikroorganismer, karakterisert ved at de formår å produsere cellemasse i en vandig oppløsning som inneholder metanol, etanol, glukose, dimetylfosfit, trimetylfosfit, metylammoniumklorid, dimetylammoniumklorid, etylmetylammoniumklorid eller natriummetylsulfat eller blandinger av disse forbindelser.
3. Mikroorganismer av genusen hypomikrobium ifølge krav 1 fra gruppen av følgende stammer: Hypomikrobium MS 72 (NRRL-B-12573) Hypomikrobium MS 75 (N RRL-B-12572) Hypomikrobium MS 219 (NRRL-B-125 71) Hypomikrobium MS 223 (NRRL-B-12570), og Hypomikrobium MS 246 (NRRL-B-1256 9)
4. Fremgangsmåte til mikrobilogisk rensning av vandige opp-løsninger ved avbygning av laverealkanoler, laverealkanoater, monosaccharider, disaccharider, dimetylfosfit, trimetylfosfit, laverealkylammoniumforbindelser eller frie aminer herav eller av metylsulfatforbindelser eller blandinger av disse forbindelser, karakterisert ved at man i en slik vandig opplø sning dyrker en mikroorganisme av genusen hypomikrobium eller en fra denne mikroorganisme avledet for frem gangsmåten anvendbar mutant i nærvær av av essensielle uorganiske salter og eventuelt en nitrogenkilde ved ca. 20° til ca. 40°C og en pH-verdi fra ca. 4 til ca. 7,5 og hvis ønsket isolerés.den dannede cellemasse.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 4, til mikrobiologisk rensning av vandige opplø sninger ved avbygning av metanol, etanol, glukose, dimetylfosfit, trimetylfosfit, metylammoniumklorid, dimety1ammoniumklorid, etylmetylammoniumklorid eller natriummetylsulfat eller blandinger av disse forbindelser, karakterisert ved at man i en slik vandig oppløsning dyrker en mikroorganisme av genusen hypomikrobium eller en fra denne mikroorganisme avledet for fremgangsmåten anvendbar mutant.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5 til mikrobilogisk rensning av vandige oppløsninger ved avbygning av natriummetylsulfat, karakterisert ved at man i en slik vandig oppløsning.dyrker 'en mikroorganisme fra gruppen av følgende stammer: Hypomikrobium MS 72 (NRRL-B-12573), MS 75 (NRRL-B-12572), MS 219 (NRRL-B-12570) og MS 246 (NRRL-B-12569)
7. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 4-6, karakter-is e.' r t ved at man gjennomfører dyrkningen ved 28°C.
8. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 4-7, karakterisert ved at man gjennomfører dyrkningen porsjonsvis.
9. Fremgangsmåte ifølge et av kravene 4-7, karakterisert ved at.man gjennomfører dyrkningen kontinuerlig.
10. Den ved fremgangamåten ifølge krav 4 fremstilte cellemasse.
NO824162A 1981-12-11 1982-12-10 Mikroorganismer av genus hypomikrobium og fremgangsmaate til avbinding av metylgruppeholdige forbindelser i vandig opploesninger NO824162L (no)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH793281 1981-12-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO824162L true NO824162L (no) 1983-06-13

Family

ID=4332585

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO824162A NO824162L (no) 1981-12-11 1982-12-10 Mikroorganismer av genus hypomikrobium og fremgangsmaate til avbinding av metylgruppeholdige forbindelser i vandig opploesninger

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4492756A (no)
EP (1) EP0082114B1 (no)
JP (1) JPS58155085A (no)
KR (1) KR840002903A (no)
AT (1) ATE28665T1 (no)
CA (1) CA1208579A (no)
DE (1) DE3276870D1 (no)
DK (1) DK550182A (no)
ES (1) ES8402238A1 (no)
FI (1) FI824213L (no)
IL (1) IL67446A (no)
NO (1) NO824162L (no)
PT (1) PT75968B (no)
ZA (1) ZA829093B (no)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS587297B2 (ja) * 1976-05-21 1983-02-09 秦 興世 脱臭剤とその製造方法及び保存法
JPS61162171A (ja) * 1985-01-09 1986-07-22 チバ‐ガイギー アクチエンゲゼルシヤフト ヒポミクロビウム属微生物及びその使用方法
US4833086A (en) * 1986-03-21 1989-05-23 The B F Goodrich Company Microbial degradation of hydrocarbons
US5271844A (en) * 1992-09-11 1993-12-21 Alcan International Limited Processes for the alkaline biodegradation of organic impurities
JPH10510711A (ja) * 1994-12-16 1998-10-20 サイテク・テクノロジー・コーポレーシヨン 有機化合物(1種もしくは複数)を分解する微生物を得るための方法
US5585272A (en) * 1994-12-16 1996-12-17 Cytec Technology Corporation Solid phase system for aerobic degradation
US5633164A (en) * 1994-12-16 1997-05-27 Cytec Technology Corporaton Methods for fluid phase biodegradation
US5641679A (en) * 1994-12-16 1997-06-24 Cytec Technology Corporation Methods for bio-remediation
US5688685A (en) * 1994-12-16 1997-11-18 Cytec Technology Corporation System and methods for biodegradation of compounds
AU6721396A (en) * 1995-08-08 1997-03-05 James R. Brainard Heterogeneous waste processing
US6916446B1 (en) 2002-09-18 2005-07-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Bioreactor method, apparatus and product thereby

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1370892A (en) * 1970-12-09 1974-10-16 Ici Ltd Microbiological production of protein

Also Published As

Publication number Publication date
IL67446A0 (en) 1983-05-15
CA1208579A (en) 1986-07-29
FI824213A0 (fi) 1982-12-08
PT75968A (en) 1983-01-01
DK550182A (da) 1983-06-12
ES518037A0 (es) 1984-01-16
EP0082114B1 (de) 1987-07-29
ATE28665T1 (de) 1987-08-15
FI824213L (fi) 1983-06-12
ZA829093B (en) 1983-09-28
IL67446A (en) 1988-12-30
US4492756A (en) 1985-01-08
PT75968B (en) 1985-12-20
DE3276870D1 (en) 1987-09-03
KR840002903A (ko) 1984-07-21
ES8402238A1 (es) 1984-01-16
EP0082114A1 (de) 1983-06-22
JPS58155085A (ja) 1983-09-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hungate The anaerobic mesophilic cellulolytic bacteria
Barker et al. Clostridium kluyverii, an organism concerned in the formation of caproic acid from ethyl alcohol
EP0077014A2 (en) Process for producing hydrogen by alga in alternating light/dark cycle
US4540666A (en) Methane fermentation
NO824162L (no) Mikroorganismer av genus hypomikrobium og fremgangsmaate til avbinding av metylgruppeholdige forbindelser i vandig opploesninger
CS224624B2 (en) Method for producing 2,5-diketo-d-gluconic acid or its salts
JPS58165786A (ja) クロストリジウム・アセトブチリカムのブタノールおよびアセトン高生産性突然変異体の創製方法
NO824163L (no) Mikroorganismer av genus pseudomonas og fremgangsmaate til avbygging av metylgruppeholdige forbindelser i vandige opploesninger
CA1238593A (en) Microorganisms of the genus pseudomonas and process for the degradation of compounds containing methyl groups in aqueous solutions
CN110257303B (zh) 一株适用于处理杀暝丹含氰废水的鸟氨酸芽孢杆菌
US4514501A (en) Method for cultivation of microorganism
JP4055228B2 (ja) エリスリトールの製造方法
RU2080382C1 (ru) Штамм бактерий clostridium acetobutylicum-продуцент н-бутилового спирта и ацетона
RU2310685C1 (ru) Штамм бактерий serratia marcescens, продуцирующий липолитические ферменты, для получения препарата для очистки сточных вод от жиров
KR0134131B1 (ko) 세파로스포린 c를 생산하는 미생물 및 이를 이용한 세파로스포린 c의 제조방법
SU1449583A1 (ru) Штамм бактерий BacILLUS SUвFILIS - продуцент эндонуклеазы рестрикции BSU 15 I
JPS589672B2 (ja) ビセイブツノバイヨウホウホウ
SU562205A3 (ru) Способ получени алкалоидов спорыньи
CN104328070A (zh) 一组产河豚毒素的海洋细菌组合
KR0178085B1 (ko) 트리코스포로노이데스 속 변이균주 및 이를 이용한 에리스리톨의 제조방법
Suchardová et al. Degradation of cellulose by thermophilic bacteria
UA137353U (uk) Штам clostridium acetobutylicum imb b-7807 - продуцент н-бутанолу, ацетону та етанолу
CN101974470A (zh) 一种稀有放线菌的分离方法
JPH06165670A (ja) 線虫の天敵微生物の増殖方法
JPS6015313B2 (ja) 微生物によるβ−アミラ−ゼの製造法