TH18315Y - กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก - Google Patents

Abstract

------25/12/2562------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้าบทสรุปการประดิษฐ์ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับกรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักโดยมีขั้นตอนดังนี้ คัดเลือกส่วนใบของกระทุ จากนั้นล้างทำความสะอาดแล้วนำมาทำให้แห้ง จากนั้นนำมาแช่ในตัวทำละลาย กรองและแยกเอากากออก แล้วนำสารละลายที่ได้มาระเหยตัวทำละลายออก จากนั้นนำมาใส่ในคอลัมน์แล้วนำมาละลายด้วยตัวทำละลาย จากนั้นใส่ซิลิกาเจลชนิดหยาบลงในสารละลายสกัดหยาบ แล้วค่อย ๆถ่ายลงไปในคอลัมน์ จากนั้นใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตเป็นตัวชะสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ออกจากคอลัมน์ แล้วนำมาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟี แล้วนำไประเหย จะได้สารสกัดย่อยโรโดไมรโทนลักษณะเป็นผงละเอียด สีเขียวเข้มออกดำ แล้วทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟี นำไประเหย จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก มีลักษณะเป็นผงละเอียด สีเขียวอ่อน ------------ หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับกระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกี่งบริสุทธิ์จากใบ กระทุ โดยมีขั้นตอนดังนี้ นำใบกระทุมาทำความสะอาด จากนั้นทำให้แห้ง แล้วนำมาสกัดด้วยคอลัมน์จนได้สาร สกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก

Claims (8)

------25/12/2562------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้าข้อถือสิทธิ 1. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ ก. คัดเลือกส่วนใบของกระทุ จากนั้นล้างทำความสะอาดแล้วนำมาทำให้แห้ง อบที่อุณหภูมิ 60-75 องศาเซลเซียส จากนั้นนำใบกระทุแห้งไปบดละเอียด ในขั้นตอนนี้ได้ใบกระทุแห้งบดละเอียด ข. นำใบกระทุแห้งบดละเอียดที่ได้จากขั้นตอน ก มาแช่ในตัวทำละลายที่อุณหภูมิ 25-28 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 3-15 วัน จากนั้นกรองและแยกเอากากออก แล้วนำสารละลายที่ได้มาระเหยตัวทำละลาย ออก ที่อุณหภูมิ 40-45 องศาเซลเซียส ในขั้นตอนนี้จะได้สารสกัดหยาบจากใบกระทุ ค. บรรจุซิลิกาเจล (silica gel) ขนาดหยาบ ลงในคอลัมน์ โดยคอลัมน์ที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 8 ซม. บรรจุ ซิลิกาเจลให้ได้ความสูง 32 เซนติเมตร ใช้เฮกเซน (C6H14) ทำให้ซิลิกาเจลเปียก ในขั้นตอนนี้จะได้ซิลิ กาเจลคอลัมน์ ง. นำสารสกัดหยาบจากใบกระทุที่ได้จากขั้นตอน ข มาละลายด้วยตัวทำละลาย จากนั้นใส่ซิลิกาเจล ชนิดหยาบลงในสารละลายสกัดหยาบ คนจนสารละลายสกัดหยาบแห้งเป็นผงร่วน จากนั้นค่อย ๆ ถ่าย ลงไปในคอลัมน์อย่างช้า ๆ เพื่อให้ผิวหน้าของซิลิกาเจลเรียบอยู่เสมอ จากนั้นใช้ตัวทำละลายผสม เฮกเซน-เอทิลอะซิเตต เป็นตัวชะสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ออกจากคอลัมน์ ตามลำดับ ในขั้นตอนนี้จะได้สาร สกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทน จ. สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทน ที่ได้จากขั้นตอน ง. มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โคร มาโทกราฟีใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซน-เอทิลอะซิเตต จากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหยสาร แบบหมุน (Rotary Evaporator) จะได้สารสกัดย่อยโรโดไมรโทนลักษณะเป็นผงละเอียด สีเขียวเข้ม ออกดำ ฉ. นำสารสกัดย่อยโรโดไมรโทนที่ได้จากขั้นตอน จ. มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟีใช้ตัว ทำละลายผสมเฮกเซนและไดคลอโรมีเทนและเมนทานอล จากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหย สารแบบหมุน (Rotary Evaporator) จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก โดยมี ลักษณะเป็นผงละเอียด สีเขียวอ่อน 2. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง ใน ขั้นตอน ข ตัวทำละลาย เลือกได้จาก อะซิโตน (C3H6O) เอทานอล ( CH3CH2OH) หรือ อะซิโตน 3. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง ใน ขั้นตอน ข อาจจะเปลี่ยนตัวทำละลายทุกๆ 3 วัน แทนการแช่สารละลายเป็นเวลา 3-15 วัน 4. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเน้นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง ใน ขั้นตอน ง ตัวทำละลาย เลือกได้จาก คลอโรมีเทน (CH2Cl2) หรือ เอทิลอะซิเตท (C4H8O2) 5. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง อัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอน ง คือ อัตราส่วน 80-96 ต่อ 4-20 %โดยปริมาตร 6. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง อัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอน จ คือ อัตราส่วน 94 ต่อ 6 %โดย ปริมาตร หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า 7. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง อัตราส่วนตัวทำละลายผสมเฮกเซน-ไดคลอโรมีเทน-เมนทานอล ในขั้นตอน ฉ คือ อัตราส่วน 80 ต่อ 16 ต่อ 4 %โดยปริมาตร 8. กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก ตามข้อถือสิทธิ 1-5 ข้อใด ข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง สามารถเพิ่มเติมขั้นตอนการทดสอบปริมาณสารสกัด ดังนี้ ช. นำ 100 % ไดคลอโรมีเทนมาเป็นเฟสเคลื่อนที่ ทำการตรวจสอบสารละลายที่ถูกชะออกมาด้วย ทินเลเยอร์โครมาโตกราฟีที่มีซิลิกาเจลเป็นเฟสอยู่กับที่และทำการรวมสารละลายที่มีลักษณะของจุดสาร บนทินเลเยอร์โครมาโตกราฟีที่คล้ายกันเข้าด้วยกัน จากสารสกัดไดคลอโรมีเทนให้ได้สารกึ่งบริสุทธิ์ ใช้ เครื่องโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงวิเคราะห์ปริมาณสารโรโดไมรโทนในสารสกัดย่อยกึ่งบริสุทธิ์ เทียบกับสารโรโดไมรโทนบริสุทธิ์ที่ทำการวิเคราะห์หาสูตรโครงสร้างด้วย เอ็นเอ็มอาร์ สเปคโทรสโคปี (1D และ 2D NMR spectroscopy) และแมส สเปกโทรสโครปี (mass spectroscopy) ------------ หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ

1. กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ประกอบด้วยขั้นตอน ดังนี้ ก. คัดเลือกส่วนใบของกระทุ จากนั้นล้างทำความสะอาดแล้วน่ามาทำให้แห้ง อบที่อุณหภูมิ 60-75 องศาเซลเซียส จากนั้นน่าใบกระทุแห้งไปบดละเอียด ในขั้นตอนนี้ได้ใบกระทุแห้งบดละเอียด ข. นำใบกระทุแห้งบดละเอียดที่ได้จากขั้นตอน ก มาแซในตัวทำละลายที่อุณหภูมิ 25-28 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 3-15 วัน จากนั้นกรองและแยกเอากากออก แล้วน่าสารละลายที่ได้มาระเหยตัวทำละลาย ออก ที่อุณหภูมิ 40-45 องศาเซลเซียส ในขั้นตอนนี้จะได้สารสกัดหยาบจากใบกระทุ ค. บรรจุซิลิกาเจล (silica gel) ขนาดหยาบ ลงในคอลัมน์ ใช้เฮกเซน (C6H14) ทำให้ซิลิกาเจลเปียก ใน ขั้นตอนนี้จะได้ซิลิกาเจลคอลัมน์ ง. น่าสารสกัดหยาบจากใบกระทุที่ได้จากขั้นตอน ข มาละลายด้วยตัวทำละลาย จากนั้นใส่ซิลิกาเจล ชนิดหยาบลงในสารละลายสกัดหยาบ คนจนสารละลายสกัดหยาบแห้งเป็นผงร่วน จากนั้นค่อย ๆ ถ่าย ลงไปในคอลัมน์อย่างข้า ๆ เพื่อให้ผิวหน้าของซิลิกาเจลเรียบอยู่เสมอ จากนั้นใช้ตัวทำละลายผสม เฮกเซน-เอทิลอะซิเตต เป็นตัวซะสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ออกจากคอลัมน์ ตามลำดับ ในขั้นตอนนี้จะได้สาร สกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทน จ. สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทน ที่ได้จากขั้นตอน ง. มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โคร มาโทกราฟีใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซน-เอทิลอะซิเตต จากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหยสาร แบบหมุน (Rotary Evaporator) จะได้สารสกัดย่อยโรโดไมรโทนลักษณะเป็นผงละเอียด สีเขียวเข้ม ออกดำ ฉ. นำสารสกัดย่อยโรโดไมรโทนที่ได้จากขั้นตอน จ. มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟีใช้ตัว ทำละลายผสมเฮกเซนและไดคลอโรมีเทนและเมนทานอล จากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหย สารแบบหมุน (Rotary Evaporator) จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีโรโดไมรโทนเป็นสารหลัก โดยมี ลักษณะเป็นผงละเอียด สีเขียวอ่อน

2. กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง ในขั้นตอน ข ตัวทำละลาย เลือกได้จาก อะซีโตน (C3H6O) เอทานอล ( CH3CH2OH) หรือ อะซิโตน

3. กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง ในขั้นตอน ข อาจจะเปลี่ยนตัวทำละลายทุกๆ 3 วัน แทนการแช่สารละลายเป็นเวลา 3-15 วัน

4. กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง ในขั้นตอน ง ตัวทำละลาย เลือกได้จาก คลอโรมีเทน (CH2Cl2) หรือ เอทิลอะซิเตท (C4H8O2)

5. กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง อัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอน ง คือ อัตราส่วน 80-96 ต่อ 4-20 %โดยปริมาตร

6. กระบวบการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง อัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอน จ คือ อัตราส่วน 94 ต่อ 6 %โดย ปริมาตร หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า

7.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง อัตราส่วนตัวทำละลายผสมเฮกเซน-ไดคลอโรมีเทน-เมนทานอล ในขั้นตอน ฉ คือ อัตราส่วน 80 ต่อ 16 ต่อ 4 %โดยป'ริมาตร

8.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุ ตามข้อถือสิทธิ 1-5 ข้อ ใดข้อหนึ่ง ที่ซึ่ง สามารถเพิ่มเติมขั้นตอนการทดสอบปริมาณสารสกัด ตังนี้ ซ. นำ 100 % ไดคลอโรมีเทนมาเป็นเฟสเคลื่อนที่ ทำการตรวจสอบสารละลายที่ถูกซะออกมาด้วย ทินเลเยอร์โครมาโตกราฟที่มีซิสิกาเจลเป็นเฟสอยู่กับที่และทำการรวมสารละลายที่มีลักษณะของจุดสาร บนทินเสเยอร์โครมาโตกราฟที่คล้ายกันเข้าด้วยกัน จากสารสกัดไดคลอโรมีเทนให้ได้สารกึ่งบริสุทธิ์ ใช้ เครื่องโครมาโทกราฟของเหลวสมรรถนะสูงวิเคราะห์ปริมาณสารโรโดไมรโทนในสารสกัดย่อยกึ่งบริสุทธิ์ เทียบกับสารโรโดไมรโทนบริสุทธิ์ที่ทำการวิเคราะห์หาสูตรโครงสร้างด้วย เอ็นเอ็มอาร์ สเปคโทรสโคปี (1D และ 2D NMR spectroscopy) และแมส สเปกโทรสโครปี (mass spectroscopy)