TH14994U - ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ และกระบวนการตรวจจำแนกเชื้อแบคทีเรียดังกล่าว - Google Patents

Abstract

------20/09/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนริ (L johnsonii) ที่ได้รับการออกแบบให้มีความเหมาะสมในระดับสปีขีส์ โดยมีความจำเพาะ ความ ไว และความแม่นยำสูงต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ไพรเมอรีที่สร้างขึ้นตามการประดิษฐ์นี้จะ ใช้ได้กับวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส โดยถูกนำมาใช้เพื่อเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนริ ในตัวอย่างที่ต้องการตรวจสอบอย่างจำเพาะ จากนั้นวิเคราะห์และประมวลผลข้อมูลที่ได้จากการ ทำปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสด้วยวิธีการแยกด้วยไฟฟ้าด้วยเจลอะกาโรส จากการทดลองพบว่า ไพรเมอร์ตาม การประดิษฐ์นี้มีความจำเพาะต่อเชื้อแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนริ โดยมีความไวในการตรวจจำแนกเชื้อ แบคทีเรียที่ 107 เซลล์ต่อมีลลิลิตร (CFU/mL) อีกทั้งยังมีความแม่นยำสูงในการจำแนกเชื้อดังกล่าว โดยไม่ เกิดปฏิกิริยาข้ามกับเชื้อซนิดอื่นในกลุ่มแลคโทบาซิลลัสและแบคทีเรียสายพันธุอื่บที่เลือกมาใช้ในการทดลอง จะเห็นว่า ไพรเมอร์ตามการประดิษฐ์นี้ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการตรวจจำแนกเชื้อแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนริ ให้มีความถูกต้องและแม่นยำมากยิ่งขึ้น และสามารถทราบผลการทดสอบได้ภายในระยะเวลา อันรวดเร็ว รวมถึงช่วยลดโอกาสความผิดพลาดจากการจับอย่างไม่จำเพาะเจาะจงของไพรเมอริได้ดียิ่งขึ้น ซึ่ง จะก่อให้เกิดประโยชน์อย่างยิ่งต่ออุตสาหกรรมอาหาร เครื่องดื่ม และอาหารเสริม โดยเฉพาะอย่างยิ่งการ นำไปใช้ประโยฃน้ในการตรวจจำแนกเชื้อแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนริ ในผลิตภัณฑ์อาหาร อาหารหมัก และ ยา ------------ หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ (L johnsonii) ที่ได้รับการออกแบบให้มีความเหมาะสมในระดับสปีชีส์ โดยมีความจำเพาะ ความไว และความแม่นยำสูงต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ไพรเมอร์ที่สร้างขึ้นตามการ ประดิษฐ์นี้จะใช้ได้กับวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส โดยถูกนำมาใช้เพื่อเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของแบคทีเรีย แล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ในตัวอย่างที่ต้องการตรวจสอบอย่างจำเพาะ จากนั้นวิเคราะห์และ ประมวลผลข้อมูลที่ได้จากการทำปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสด้วยวิธีการแยกด้วยไฟฟ้าด้วยเจลอะกาโรส จากการทดลองพบว่า ไพรเมอร์ตามการประดิษฐ์นี้มีความจำเพาะต่อเชื้อแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ โดย มีความไวในการตรวจจำแนกเชื้อแบคทีเรียที่ 107 เซลล์ต่อมิลลิลิตร (CFU/mL) อีกทั้งยังมีความแม่นยำสูง ในการจำแนกเชื้อดังกล่าว โดยไม่เกิดปฏิกิริยาข้ามกับเชื้อชนิดอื่นในกลุ่มแลคโทบาซิลลัสและแบคทีเรีย สายพันธุอื่นที่เลือกมาใช้ในการทดลอง จะเห็นว่า ไพรเมอร์ตามการประดิษฐ์นี้ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพใน การตรวจจำแนกเชื้อแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ให้มีความถูกต้องและแม่นยำมากยิ่งขึ้น และสามารถ ทราบผลการทดสอบได้ภายในระยะเวลาอันรวดเร็ว รวมถึงช่วยลดโอกาสความผิดพลาดจากการจับอย่าง ไม่จำเพาะเจาะจงของไพรเมอร์ได้ดียิ่งขึ้น ซึ่งจะก่อให้เกิดประโยชน์อย่างยิ่งต่ออุตสาหกรรมอาหาร เครื่องดื่ม และอาหารเสริม โดยเฉพาะอย่างยิ่งการนำไปใช้ประโยชน์ในการตรวจจำแนกเชื้อ แล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ในผลิตภัณฑ์อาหาร อาหารหมัก และยา

Claims (4)

------20/09/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ที่มีลำดับนิวคลีโอไทด์ ดังต่อไปนี้ ไพรเมอร์ฟอร์เวิร์ด 140 : 5’- TGTTGTTTATCCTAAGTTCCGGTG -3’ ไพรเมอร์รีเวิร์ส 297 : 5’- AGGCGTACGATCATAAGCTTTCT -3’ 2. ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง ไพรเมอร์ดังกล่าวมีความจำเพาะต่อยีน LJ_RS05850 ของเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ 3. กระบวนการตรวจจำแนกเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ (L johnsonii) ด้วยการใช้ ไพรเมอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 2 ประกอบด้วย ก) การเตรียมตัวอย่างดีเอ็นเอบริสุทธิ์จากเชื้อแบคทีเรีย ข) การเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอ โดยการใช้คู่ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรีย แล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ด้วยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส ค) การวิเคราะห์และแปลผลจากชื้นผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการทำปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสโดยการแยก ชิ้นดีเอ็นเอด้วยกระแสไฟฟ้า 4. กระบวนการตรวจจำแนกเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ตามข้อถือสิทธิที 3 ที่ซึ่ง สภาวะที่ เหมาะสมในการเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอด้วยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอสิเมอเรส คือ ขั้นที่ 1 94 องศาเซลเซียส, 3 นาที ขั้นที่ 2 (25-30 รอบ) 94 องศาเซลเซียส, 30 วินาที 56-58 องศาเซลเซียส, 30 วินาที 72 องศาเซลเซียส, 1 นาที ขั้นที่ 3 72 องศาเซลเซียส, 5 นาที ------------ หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ

1. ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ที่มีลำดับนิวคลีโอไทด์ ดังต่อไปนี้ ไพรเมอร์ฟอร์เวิร์ด 140 : 5’- TGTTGTTTATCCTAAGTTCCGGTG -3’ ไพรเมอร์รีเวิร์ส 297 : 5’- AGGCGTACGATCATAAGCTTTCT -3’

2. ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง ไพรเมอร์ดังกล่าวมีความจำเพาะต่อยีน LJ_RS05850 ของเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ

3. กระบวนการตรวจจำแนกเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ (L johnsonii) ด้วยการใช้ ไพรเมอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 2 ประกอบด้วย ก) การเตรียมตัวอย่างดีเอ็นเอบริสุทธิ์จากเชื้อแบคทีเรีย ข) การเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอ โดยการใช้คู่ไพรเมอร์ที่มีความจำเพาะต่อเชื้อแบคทีเรีย แล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ด้วยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส ค) การวิเคราะห์และแปลผลจากชิ้นผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการทำปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสโดยการ แยกชิ้นดีเอ็นเอด้วยกระแสไฟฟ้า

4. กระบวนการตรวจจำแนกเชื้อแบคทีเรียแล็กโทบาซิลลัส จอห์นโซนอิ ตามข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่ง สภาวะที่ เหมาะสมในการเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอด้วยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่พอสิเมอเรส คือ ขั้นที่ 1 94 องศาเซลเซียส, 3 นาที ขั้นที่ 2 (25-30 รอบ) 94 องศาเซลเซียส, 30 วินาที 56-58 องศาเซลเซียส, 30 วินาที 72 องศาเซลเซียส, 1 นาที ขั้น ที่ 3 72 องศาเซลเซียส, 5 นาที