TH12478A3 - กรรมวิธีการตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (Elisa) - Google Patents

กรรมวิธีการตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (Elisa)

Info

Publication number
TH12478A3
TH12478A3 TH1103000974U TH1103000974U TH12478A3 TH 12478 A3 TH12478 A3 TH 12478A3 TH 1103000974 U TH1103000974 U TH 1103000974U TH 1103000974 U TH1103000974 U TH 1103000974U TH 12478 A3 TH12478 A3 TH 12478A3
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
dengue
solution
urine
add
microplate
Prior art date
Application number
TH1103000974U
Other languages
English (en)
Other versions
TH12478C3 (th
Inventor
จวนสัมฤทธิ์ ศ.พญ.อำไพวรรณ
ชัยรัตน์ นางสาววรรธนี
ตั้งนรารัชชกิจ ผศ.พญ.กาญจนา
ยกส้าน รศ.ดร.นพ.สุธี
Original Assignee
นางสาวพลอยพรรณ จิตรแจ้ง
นางสาวนัททิยาพร บุญจริง
Filing date
Publication date
Application filed by นางสาวพลอยพรรณ จิตรแจ้ง, นางสาวนัททิยาพร บุญจริง filed Critical นางสาวพลอยพรรณ จิตรแจ้ง
Publication of TH12478A3 publication Critical patent/TH12478A3/th
Publication of TH12478C3 publication Critical patent/TH12478C3/th

Links

Abstract

DC60 (12/09/57) การตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะ เพื่อวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงกีที่รวดเร็วและสะดวก ตั้งแต่ระยะที่มีไข้ โดยใช้ชุดตรวจวินิจฉัยชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีที่เรียกว่า Dengue NS1 antigen มา ตรวจสอบในปัสสาวะผู้ป่วยที่ติดเชื้อไวรัสเดงกี ไม่ว่าจะเป็นโรคไข้เลือดออกหรือไข้เดงกีที่มีอาการ รุนแรงน้อยกว่า เพื่อตรวจหาชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีในปัสสาวะ ช่วยให้ผู้ป่วยไม่ต้องเจ็บตัวเพราะ ถูกเจาะเลือด ทำให้การวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงกีได้ตั้งแต่ผู้ป่วยยังอยู่ในระยะที่มีไข้ ช่วยให้แพทย์ ให้การดูแลรักษาผู้ป่วยได้อย่างถูกต้อง ป้องกันภาวะแทรกซ้อน ช่วยให้ผลการการรักษาผู้ป่วยมี ประสิทธิภาพสูงสุด การตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะ เพื่อวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงกีที่รวดเร็วและสะดวก ตั้งแต่ระยะที่มีไข้ โดยใช้ชุดตรวจวินิจฉัยชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีที่เรียกว่า Dengue NS1 antigen มาตรวจสอบในปัสสาวะผู้ป่วยที่ติดเชื้อไวรัสเดงกี ไม่ว่าจะเป็นโรคไข้เลือดออกหรือไข้เดงกีที่มี อาการรุนแรงน้อยกว่า เพื่อตรวจหาชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีในปัสสาวะ ช่วยให้ผู้ป่วยไม่ต้องเจ็บ ตัวเพราะถูกเจาะเลือด ทำให้การวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงดีได้ตั้งแต่ผู้ป่วยยังอยู่ในระยะที่มีไข้ ช่วยให้แพทย์ให้การดูแลรักษาผู้ป่วยได้อย่างถูกต้อง ป้องกันภาวะแทรกซ้อน ช่วยให้ผลการการ รักษาผู้ป่วยมีประสิทธิภาพสูงสุด

Claims (3)

ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา :แก้ไข 11/4/2559 1. กรรมวิธีการตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) โดยการตรวจหา ชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีที่เรียกว่า เดงกี เอ็นเอสวัน แอนติเจน (Dengue NS1 antigen) ใน ปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) มีขั้นตอนกระบวนการดังนี้ 2.1) เติม 50 ไมโครลิตร ((สูตร)1) ของสารละลายในแต่ละหลุมที่ต้องการตรวจสอบ 2.2) เติม 50 ไมโครลิตร ((สูตร)1) ของตัวควบคุมบวก (positive control), ตัวควบคุม กลาง (calibrator), ตัวควบคุมลบ (negative control) และตัวอย่างปัสสาวะที่ต้องการตรวจสอบ ใส่ ลงในแต่ละหลุมเรียงตามลำดับ สามารถดูการเปลี่ยนสีแต่ละหลุมจากสีเหลืองเป็นสีส้ม 2.3) เติม 100 ไมโครลิตร ((สูตร)1) ของสารละลายที่สามารถจับกับเดงกีเอนเอส 1 ได้ ใส่ลงทุกหลุมที่ทำการตรวจสอบ แต่ละหลุมจะเปลี่ยนจากสีส้มเป็นสีเขียว 2.4) นำแผ่นปิดไมโครเพลท (microplate) มาปิดบน ไมโครเพลท (microplate) ให้ แน่น แล้วเก็บไว้ที่ตู้บ่ม (incubator) อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส นานเป็นเวลา 90 นาที 2.5) เจือจางสารละลายล้างด้วยน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1:20 ทันทีก่อนใช้ 2.6) เทสารละลายในหลุมทดสอบทิ้ง ล้างด้วยสารละลายล้าง 6 ครั้ง ตามขั้นตอน ดังนี้ 2.6 .1) เทสารละลายทิ้งทั้งหมด โดยคว่ำ ไมโครเพลท (microplate) อย่าง รวดเร็ว 2.6.2) เติมสารละลายล้างให้เต็มหลุม ปริมาตร 200 ไมโครลิตร 2.6.3) เทสารละลายทิ้ง ทำ 6.1-6.3 ซ้ำ 6 ครั้ง 2.6.4) คว่ำไมโครเพลท (microplate) บนกระดาษซับ จนกระทั่งไม่เห็น หยดน้ำลงบนกระดาษซับ 2.6.5) รีบนำไมโครเพลท (microplate) มาเติมสารละลายขั้นต่อไป โดย อย่าปล่อยให้แห้งสนิท ขั้นตอนข้อ 7-9 ต่อไปนี้ ควรทำในที่มืดหรือเก็บ microplate ในกล่องทึบแสง 2.7) เติมสารละลายพิเศษโครโมจินนิค 160 ไมโครลิตร ((สูตร)1) 2.8) เก็บในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง (18-30 องซาเซลเซียส) นาน 30 นาที สารละลาย ในหลุมจะเปลี่ยนเป็นสีฟ้าใส 2.9) เติมสารหยุดปฏิกิริยา 100 ไมโครลิตร ((สูตร)1) ใส่ลงทุกหลุม สารละลายจะ เปลี่ยนเป็นสีเหลือง 10) อ่านค่าการดูดกลืนแสงด้วยเครื่องไมโครเพลท รีดเดอร์ (microplate reader) ที่ 450/620 nm อ่านค่าภายในเวลา 30 นาทีหลังจากเติมสารหยุดปฏิกิริยา 2. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งสารละลายที่ใช้ในการตรวจหาชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกี่ ได้แก่ สารละลายฟอสเฟต บัฟเฟอร์ (Phosphate Buffer) 3. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งตัวควบคุมบวก (positive control) ได้แก่ เซรั่มที่ทราบค่า NS1 4. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งตัวควบคุมกลาง (calibrator) ได้แก่ เซรั่มมาตรฐานที่ทราบค่า NS1 5. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งตัวควบคุมลบ (negative control) ได้แก่ เซรั่มที่ไม่มี NS1 6. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ ซึ่งสารละลายที่สามารถจับเดงกีเอนเอส 1 ได้ ได้แก่ แอนติเอนเอส 1 แอนติบอดี (Anti NS1 Antibody) 7. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ ซึ่งสารละลายล้าง ได้แก่ ทริสโซเดียมคลอไรด์บัฟเฟอร์ (Tris Nacl Buffer) 8. กรรมวิธีการตรวจหาโปรตีนเดงกี่ในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (ELISA) ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งสารหยุดปฏิกิริยา ได้แก่ กรดซัลฟูริค ความเข้มข้น 1เอ็น (1N Sulfuric Acid) ------------------------------------------------------------------
1. การตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะ เพื่อวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงกีที่รวดเร็วและ สะดวกตั้งแต่ระยะที่มีไข้ โดยการตรวจหาชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีที่เรียกว่า Dengue NS1 antigen ในปัสสาวะด้วยวิธี ELISA และ Strip test
2. การตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะ เพื่อวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงกีที่รวดเร็วและ สะดวกตั้งแต่ระยะที่มีไข้ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยการตรวจหาชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีที่เรียกว่า Dengue NS1 antigen ในปัสสาวะด้วยวิธี ELISA มีขั้นตอนกระบวนการดังนี้ 2.1) เติม 50 ไมโครลิตร (สูตร) ของสารละลายลงในแต่ละหลุมที่ต้องการตรวจสอบ 2.2) เติม 50 ไมโครลิตร (สูตร) ของตัวควบคุมบวก (positive control), ตัวควบคุมกลาง (calibrator), ตัวควบคุมลบ (negative control) และตัวอย่างปัสสาวะที่ต้องการตรวจสอบ ใส่ลงใน แต่ละหลุมเรียงตามลำดับ สามารถดูการเปลี่ยนสีแต่ละหลุมจากสีเหลืองเป็นสีส้ม 2.3) เติม 50 ไมโครลิตร (สูตร) ของสารละลายที่สามารถจับเดงกีเอนเอส 1 ได้ ใส่ ลงทุกหลุมที่ทำการตรวจสอบ แต่ละหลุมจะเปลี่ยนจากสีส้มเป็นสีเขียว 2.4) นำแผ่นปิด microplate มาปิดบน microplate ให้แน่น แล้วเก็บไว้ที่ตู้บ่ม (incubator) อุณหภูมิ 37 ํซ นานเป็นเวลา 90 นาที 2.5) เจือจางสารละลายล้างด้วยน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1:20 ทันทีก่อนใช้ 2.6) เทสารละลายในหลุมทดสอบทิ้ง ล้างด้วยสารละลายล้าง 6 ครั้ง ตามขั้นตอน ดังนี้ 2.6.1) เทสารละลายทิ้งทั้งหมด โดยคว่ำ microplate อย่างรวดเร็ว 2.6.2) เติมสารละลายล้างให้เต็มหลุม ปริมาตร 200 ไมโครลิตร 2.6.3) เทสารละลายทิ้ง ทำ 6.1-6.3 ซ้ำ 6 ครั้ง 2.6.4) คว่ำ microplate บนกระดาษซับ จนกระทั่งไม่เห็นหยดน้ำบนกระดาษซับ 2.6.5) รีบนำ microplate มาเติมสารละลายขั้นต่อไป โดยอย่าปล่อยให้แห้งสนิท ขั้นตอนข้อ 7- 9 ต่อไปนี้ ควรทำในที่มืดหรือเก็บ microplate ในกล่องทึบแสง 2.7) เติมสารละลายพิเศษโครโมจินนิค 160 ไมโครลิตร (สูตร) 2.8) เก็บในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง (18-30 ํซ) นาน 30 นาที สารละลายในหลุมจะเปลี่ยนเป็นสี ฟ้าใส 9) เติมสารหยุดปฏิกิริยา 100 ไมโครลิตร (สูตร) ใส่ลงทุกหลุม สารละลายจะเปลี่ยนเป็นสี เหลือง 10) อ่านค่าการดูดกลืนแสงด้วยเครื่อง microplate reader ที่ 450/620 nm อ่านค่าภายใน เวลา 30 นาทีหลังจากเติมสารหยุดปฏิกิริยา
3. การตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะ เพื่อวินิจฉัยภาวะติดเชื้อไวรัสเดงกีที่รวดเร็วและ สะดวกตั้งแต่ระยะที่มีไข้ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยการตรวจหาชิ้นส่วนของเชื้อไวรัสเดงกีที่เรียกว่า Dengue NS1 antigen ในปัสสาวะด้วยวิธี Strip test มีขั้นตอนกระบวนการดังนี้ 1) เติมปัสสาวะปริมาตร 50 ไมโครลิตร ใส่ลงในหลอดทดลอง 2) เติมสารละลายบัฟเฟอร์ 1 หยดลงไป 3) เขย่าหลอดทดลองเบาๆ เพื่อให้ผสมกัน 4) นำแถบกระดาษทดสองใส่ลงในหลอดทดลองที่ตั้งอยู่ในแนวตรง 5) อ่านผลเมื่อครบเวลา 15 นาที ถ้าไม่มีแถบสีม่วงเกิดขึ้นชัดเจน ให้นำแถบ กระดาษทดสอบใส่ลงในหลอดทดลอง และจับเวลาอีก 15 นาที จึงอ่านผล
TH1103000974U 2011-09-14 กรรมวิธีการตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (Elisa) TH12478C3 (th)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TH12478A3 true TH12478A3 (th) 2017-03-08
TH12478C3 TH12478C3 (th) 2017-03-08

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Early diagnosis of Dengue infection using a commercial Dengue Duo rapid test kit for the detection of NS1, IGM, and IGG
Atkins Comparison of results of three commercial heartworm antigen test kits in dogs with low heartworm burdens
CN103884839B (zh) 一种用于定量检测fmdv有效抗原的反向液相阻断elisa方法
Yassine et al. Performance evaluation of five ELISA kits for detecting anti-SARS-COV-2 IgG antibodies
CN101363860A (zh) 梅毒螺旋体抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法
CN105572353A (zh) 一种用于检测肝癌标志物的抗体芯片试剂盒
Sanbonmatsu-Gámez et al. Analytical performance of the automated multianalyte point-of-care mariPOC® for the detection of respiratory viruses
CN102368071B (zh) 检测肺炎支原体IgM抗体的化学发光免疫试剂盒
Kim et al. Evaluation of the SD Bioline Norovirus rapid immunochromatography test using fecal specimens from Korean gastroenteritis patients
Chakravarti et al. Immunodiagnosis of dengue virus infection using saliva
CN205679623U (zh) 一种快速检测登革病毒ns1抗原胶体金检测试纸条及试剂盒
Wong et al. Evaluation of a point-of-care portable analyzer for measurement of plasma immunoglobulin G, total protein, and albumin concentrations in ill neonatal foals
CN106645065A (zh) 一种特异性识别及灵敏检测人血清蛋白的荧光试剂合成方法及应用
TH12478A3 (th) กรรมวิธีการตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (Elisa)
TH12478C3 (th) กรรมวิธีการตรวจโปรตีนเดงกีในปัสสาวะด้วยวิธีอีลิซา (Elisa)
Xinglin et al. Quantitative and qualitative study of enzyme-linked immunosorbent assay to detect IgG against Japanese encephalitis virus in swine sera
Prabowo et al. Clinical evaluation of a developed paper-based Dengue NS1 rapid diagnostic test for febrile illness patients
CN108254555A (zh) 一种用于sftsv检测的荧光免疫检测卡及其制备方法和应用
CN119064599A (zh) Nlrc5在制备脓毒症诊断试剂盒中的应用
CN205027757U (zh) 一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒
CN106771259A (zh) 用于检测人血清中Pygo2蛋白含量的ELISA试剂盒、使用方法及用途
CN102368068A (zh) 检测肺炎衣原体IgM抗体的试剂盒
Kaya et al. The “MICE” scoring system in differentiating the identical twins leptospirosis and hantavirus infection
CN111337667A (zh) 一种快速检测新型冠状病毒检测试剂盒及检测方法
Mahmood et al. Detection of Adenovirus antigen and its correlation with clinical signs among children with gastroenteritis