CN205027757U - 一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒 - Google Patents
一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN205027757U CN205027757U CN201520787940.XU CN201520787940U CN205027757U CN 205027757 U CN205027757 U CN 205027757U CN 201520787940 U CN201520787940 U CN 201520787940U CN 205027757 U CN205027757 U CN 205027757U
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- antibody
- liquid
- elisa kit
- sample
- kit
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本实用新型提供一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,该试剂盒组成包括:包被有特异靶抗原的96孔酶标板、6个不同浓度的抗体的溶液、阴阳性参照品、酶标二抗液、显色液A和B、反应终止液、浓缩洗涤液、样品稀释液、封板膜及锡箔袋。本试剂盒实验过程包括向相应的反应孔中加入测定标准品和未知血样品,当待测样品中含有特异抗体时,抗体与包被在酶标板表面的靶抗原结合形成抗原抗体复合物。随后加入酶标二抗以及酶底物;酶催化显色液反应呈现蓝色,并在加入终止液后终止反应;此时的反应液呈现黄色,其颜色的深浅与样品中的抗体含量成正相关。本试剂盒具有操作简单、特异性强、灵敏度高等优点。
Description
技术领域
本实用新型涉及免疫学检测技术领域,具体涉及一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒。
背景技术
炎症性肠病(IBD)是一种病因尚未十分明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)。炎症性肠病的发病机制尚未阐明,目前认为是基因易感人群对肠道共生微生物产生的过度的先天或后天免疫反应所致。是一种病变部位发生在直肠和结肠的非特异性炎症,病灶主要限于大肠黏膜与黏膜下层。克罗恩病是一种慢性肉芽肿性炎症,病变可累及胃肠道各部位,而以末段回肠及临近结肠为主,多呈节段性、非对称性分布。
目前对于炎症性肠病的诊断主要依靠临床表现,结肠镜检查,影像学检查以及病理活检等,误诊率较高。目前尚缺乏特异性血清学诊断指标。酶联免疫法所采用的的是抗原-抗体的特异性免疫反应,较目前临床上所使用的诊断方法特异性较高,重复性好,试剂稳定,敏感性好,不需特殊仪器设备,目前是临床检测的一个重要方法。
实用新型内容
本实用新型目的在于:提供一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的ELISA试剂盒,为炎症性肠病的诊断和鉴别诊断提供一种特异性血清学指标,以提高诊断的准确性。
为实现上述目的,本实用新型所采取的技术方案是:提供一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的ELISA试剂盒。试剂盒由一块包被有特异靶抗原的96孔酶标板、6个已知浓度的抗体溶液、阴阳性对照品、酶标二抗液、显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液、样品稀释液、封板膜、锡箔袋、产品说明书和产品质检报告。试剂盒采用间接竞争ELISA方法,检测时,在相应的反应孔中加入阴阳对照和待测样品,若样品中含有炎症性肠病相关的特异性抗体,则与微孔表面的靶抗原结合而形成抗原-抗体复合物。充分洗涤后加入酶标第二抗体。连接在第二抗体上的酶催化加入的酶底物使反应液呈现蓝色。在终止液的存在下蓝色液体改变为黄色。颜色的深浅与样品中抗体的含量成正相关。
所述酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成,每个可拆装酶标反应微孔条本身构成了独立的检测单位。每个反应微孔条有8个反应孔,每个反应孔预包被了特异靶抗原。
所述封板膜是可粘贴塑料膜,大小与酶标板横切面大小一致。
所述试剂盒中的预装试剂可以进行满足96样本量测定(包括标准品及阴阳性对照品)。即可一次满板大样本量检测,也可以通过可拆卸微孔板条分批多次检测。由于用户临床样本量多少不同,这一特征为客户提供了多次检测的方便条件。同时铝箔袋一端胶封拉链式合口可以反复操作,因此保证了未使用板条的效期内存放。检测时,待检血清中目标抗体与包被抗原发生抗原-抗体反应,加入标记有辣根过氧化物酶(HRP酶)的第二抗体形成抗原-抗体-抗体结合物,用TMB(3,3’,5,5’-四甲基联苯胺)底物显色,待检血清中抗体含量与底物显色后的光吸光(OD值)成线性关系。根据试剂盒包含的标准曲线将待测样本的OD值代入根据标准曲线得到的方程式计算出待测样本中的抗体含量。
根据方法验证程序,本试剂盒标准品浓度与OD值的相关曲线的线性回归系数(R2值)大于或等于0.990,灵敏度小于或等于0.5U/ml,批内差小于10%。本试剂盒操作无需特殊实验仪器,仅需酶标仪、移液器、振荡器等实验室基本仪器。试剂盒附有操作说明书,操作简便快捷。
本实用新型的优点是:检测人血清中炎症性肠病相关抗体的ELISA试剂盒灵敏度高、检测快速并可量化,稳定性好,可同时对多个样本进行检测,检测样本所需要的时间短,操作简便,不需要特殊实验仪器设备,可广泛应用于实验室检测。
附图说明
图1为本实用新型的结构示意图;
图2为本实用新型的试剂摆放位置示意图;
图3为本实用新型可拆酶标板俯视图;
图4为本实用新型盖板膜平面图;
图中:1、盒体;2、试剂固定件;3、包被特异靶抗原的酶标板;4、封板膜;5、标准品;6、阳性质控品;7、阴性质控品;8、显色液A;9、显色液B;10、酶标抗原工作液;11、样品稀释液;12、洗涤液;13、终止液。
具体实施方式
以下通过实施例和附图详细说明本实用新型的技术方案,并不以此限定本实用新型的实施范围。凡依照本实用新型披露内容所进行的本领域等同替换,均属于本实用新型的保护范围。
参照图1至图4所示,一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的酶联免疫检测试剂盒,由盒体1及试剂固定件2、包被特异靶抗原的酶标板3(置于铝箔袋31内)、封板膜4、标准品5、阳性质控品6、阴性质控品7、显色液A8、、显色液B9、酶标抗原工作液10、样品稀释液11、洗涤液12和终止液13组成。
实施例1
一种检测人血清中的抗酿酒酵母抗体(ASCA)IgA的ELISA试剂盒。试剂盒由一块包被有特异靶抗原的96孔酶标板、6个已知浓度的ASCAIgA抗体溶液、阴阳性对照品、酶标二抗液、显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液、样品稀释液、封板膜、锡箔袋、产品说明书和产品质检报告。试剂盒采用间接竞争ELISA方法,检测时,在相应的反应孔中加入阴阳对照和待测样品,若样品中含有特异性抗体,则与微孔表面的靶抗原结合而形成抗原-抗体复合物。充分洗涤后加入酶标二抗液,连接在抗体上的酶催化底物使反应液呈现蓝色,在终止液的存在下改变为黄色。颜色的深浅与样品中抗体的含量成正相关。
所述酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成,每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔,每个反应孔预包被特异靶抗原。
所述封板膜是可粘贴塑料膜,大小与酶标板横切面大小一致。
实施例2
一种检测人血清中抗人中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)IgG的ELISA试剂盒,试剂盒由一块包被有特异靶抗原的96孔酶标板、14瓶试剂及两张封板膜;14瓶试剂分别为:6瓶已知浓度的UC抗体溶液、阴性对照样品、阳性对照样品、酶标二抗液、显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液及样品稀释液,封板膜、锡箔袋、产品说明书和产品质检报告。试剂盒采用间接竞争ELISA方法,检测时,在相应的反应孔中加入阴阳对照和待测样品,若样品中含有特异性抗体,则与微孔表面的靶抗原结合而形成抗原-抗体复合物。充分洗涤后加入酶标二抗液,连接在抗体上的酶催化底物使反应液呈现蓝色,在终止液的存在下改变为黄色。颜色的深浅与样品中抗体的含量成正相关。
所述酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成,每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔,每个反应孔预包被特异靶抗原。
所述封板膜是可粘贴塑料膜,大小与酶标板横切面大小一致。
实施例3
一种检测人血清中的抗酿酒酵母抗体(ASCA)IgG的酶联免疫检测试剂盒。试剂盒由一块经过特殊包被有靶抗原的96孔酶标板、6个已知浓度的ASCAIgG抗体溶液、阴阳性对照品、酶标二抗液、显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液、样品稀释液、封板膜、锡箔袋、产品说明书和产品质检报告。试剂盒采用间接竞争ELISA方法,检测时,在相应的反应孔中加入阴阳对照和待测样品,若样品中含有特异性抗体,则与微孔表面的靶抗原结合而形成抗原-抗体复合物。充分洗涤后加入酶标二抗液,连接在抗体上的酶催化底物使反应液呈现蓝色,在终止液的存在下改变为黄色。颜色的深浅与样品中抗体的含量成正相关。
所述酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成,每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔,每个反应孔预包被特异靶抗原。
所述封板膜是可粘贴塑料膜,大小与酶标板横切面大小一致。
本实用新型的使用方法如下:
采用常规方法收集全血标本,置血样本在室温下30分钟后吸取血清待用。待测血清如在24小时内使用,可于2-8℃条件保存,若需长期存放,应保存于-20℃以下,并避免反复冻融。
向包被特异靶抗原的酶标板的微孔中加入待检血清样品,静置使其抗原-抗体反应结合;
用样品稀释液将待测血清按比例稀释,每孔加入100uL,室温振荡孵育;
洗涤:去掉孔内溶液,加入洗涤液,静置,去掉洗涤液,并重复3次;
酶标二抗:加入酶标二抗,每孔100uL,室温振荡孵育;
洗涤:同步骤;
显色:加显色液A、显色液B,室温振荡显色15min,在酶的作用下,酶底物转换成显色物质;
终止反应:每孔加入终止液,然后在450nm光波长下测定OD值;
计算抗体浓度值:根据标准曲线中各已知标准品的浓度与OD值的比,可以通过公式来计算待测抗体的浓度值。随后根据说明书中标明的试剂盒界定值(Cut-off值)来确定所测血样本中的抗体浓度属于正常范围还是异常范围。
实验结果说明:
绘制标准曲线:标准孔复孔所得OD值求出平均值,以标准品的浓度单位(U/ml)为横坐标,对应OD值为纵坐标,在数据分析软件中绘出标准曲线;
样品浓度:由标准品的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值带入方程式,即为样品浓度;
Cut-off值:本试剂盒根据cut-off值的界定判断阴阳性结果。
Claims (7)
1.一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,结构包括盒体和盒内的一块包被有特异靶抗原的96孔酶标板、14瓶试剂及两张封板膜,其特征在于:酶标板是采用96孔板作为固定载体,在微孔中预包被能结合被测抗体的特异靶抗原;14瓶试剂分别为:6瓶已知浓度的抗体溶液、阴性对照样品、阳性对照样品、酶标二抗液、显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液、样品稀释液。
2.根据权利要求1所述的一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述的ELISA试剂盒需求盒体为69克硬质纸材所制。
3.根据权利要求1所述的一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述96孔酶标板为聚苯乙烯酶标板,该板置于真空锡箔袋内。
4.根据权利要求1所述的一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,封板膜是与酶标板横切面大小一致的可粘贴性塑料膜。
5.根据权利要求1所述的一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述6瓶已知浓度的抗体溶液,阴性对照品、阳性对照品、酶标二抗液、样品稀释液、浓缩洗涤液及终止液分别装在用白色瓶身为特征的复合塑料瓶;显色液A液和显色液B液分别装在用棕色盖子和棕色瓶身为特征的复合塑料瓶。
6.根据权利要求1所述的一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成,每个可拆装酶标反应微孔条有8个反应孔,每个反应孔预包被特异靶抗原。
7.根据权利要求1所述的一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,6瓶已知浓度的抗体溶液、阴性对照品、阳性对照品均为1ml溶液/瓶;样品稀释液、浓缩洗涤液及酶标二抗液均为15ml溶液/瓶;显色液A液和显色液B液均为8ml溶液/瓶;终止液为10ml溶液/瓶。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201520787940.XU CN205027757U (zh) | 2015-10-14 | 2015-10-14 | 一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201520787940.XU CN205027757U (zh) | 2015-10-14 | 2015-10-14 | 一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN205027757U true CN205027757U (zh) | 2016-02-10 |
Family
ID=55260280
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201520787940.XU Active CN205027757U (zh) | 2015-10-14 | 2015-10-14 | 一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN205027757U (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110297093A (zh) * | 2019-03-18 | 2019-10-01 | 山西瑞豪生物科技有限公司 | 一种检测人免疫球蛋白g4的方法和试剂盒 |
-
2015
- 2015-10-14 CN CN201520787940.XU patent/CN205027757U/zh active Active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110297093A (zh) * | 2019-03-18 | 2019-10-01 | 山西瑞豪生物科技有限公司 | 一种检测人免疫球蛋白g4的方法和试剂盒 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106885908B (zh) | 血清psmd4蛋白的检测试剂盒及其检测方法与应用 | |
CN102680698B (zh) | 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(ngal)测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法) | |
JP2011508197A5 (zh) | ||
CN104655846A (zh) | 一种检测孕酮的酶联免疫试剂盒及其检测方法 | |
CN103048465B (zh) | 一种il-6微孔板式化学发光检测试剂盒及其制备方法 | |
CN102841206B (zh) | 肌钙蛋白T(Troponin-T,TNT)测定试剂盒 | |
CN111505313B (zh) | 一种联合诊断支原体肺炎的诊断试剂盒及其应用 | |
CN101852799A (zh) | 免疫层析法检测试剂及其制作方法 | |
CN102507918A (zh) | 抗环瓜氨酸肽抗体测定试剂盒 | |
CN105510575A (zh) | 抗磷脂酶A2受体抗体IgG试剂盒及检测方法 | |
CN105486875A (zh) | 视黄醇结合蛋白检测试剂盒 | |
CN104215776A (zh) | 一种基于太赫兹时域光谱的无标记血凝素蛋白检测方法 | |
CN105929154A (zh) | 快速检测布鲁氏菌病抗体的试纸条及其试剂盒 | |
CN205027757U (zh) | 一种检测人血清中抗体的elisa试剂盒 | |
CN104049082B (zh) | 人组织激肽释放酶活性检测试剂盒及其应用 | |
CN206038696U (zh) | 一种定量钙卫蛋白检测免疫层析试纸条 | |
CN204422533U (zh) | 一种艾滋病尿液、唾液快速检测试剂盒 | |
Aita et al. | Chemiluminescence and ELISA-based serum assays for diagnosing and monitoring celiac disease in children: a comparative study | |
US10613081B2 (en) | Quality control system and kit for automated ELISA devices | |
CN106645745A (zh) | 一种快速定量检测微量白蛋白的均相荧光免疫试剂及制备与检测方法 | |
CN204347035U (zh) | 一种环瓜氨酸肽抗体酶联免疫检测试剂盒 | |
CN209264735U (zh) | 一种用于两步法免疫层析的高通量检测装置 | |
CN205317783U (zh) | 一种脂蛋白相关磷脂酶a2荧光定量检测试纸及检测卡 | |
US20140011190A1 (en) | Method for performing a rapid test | |
CN107436360A (zh) | 一种高尔基蛋白‑73小型elisa检测系统及使用方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |