TH104746A - การทำให้บริสุทธิ์ของแอนตี้บอดี้โดยการโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนประจุบวก - Google Patents

Abstract

DC60 (15/01/52) วิธีการสำหรับการทำให้แอนตี้บอดี้บริสุทธิ์โดยการโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยน ประจุบวกถูกอธิบายซึ่งขั้นตอนการล้างพีเฮชสูงถูกใช้เพื่อกำจัดของสิ่งปนเปื้อนก่อนการชะแอนตี้บอดี้ ที่ต้องการโดยใช้บัฟเฟอร์การชะที่มีการนำไฟฟ้าที่เพิ่มขึ้น วิธีการสำหรับการทำให้แอนตี้บอดี้บริสุทธิ์โดยการโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยน ประจุบวกถูกอธิบายซึ่งขั้นตอนการล้างพีเฮชสูงถูกใช้เพื่อกำจัดของสิ่งปนเปื้อนก่อนการชะแอนตี้บอดี้ ที่ต้องการโดยใช้บัฟเฟอร์การชะที่มีการนำไฟฟ้าที่เพิ่มขึ้น

Claims (20)

1. วิธีการสำหรับการทำให้บริสุทธิ์แอนตี้บอดี้จากองค์ประกอบที่ประกอบด้วยแอนตี้บอดี้ และอย่างน้อยหนึ่งสิ่งปนเปื้อน, ซึ่งวิธีการประกอบด้วยขั้นตอนที่เป็นลำดับของ: (a) การบรรจุองค์ประกอบไปบนวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกโดยที่องค์ประกอบอยู่ที่พีเฮช แรก; (b) การล้างวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การล้างแรกที่พีเฮชซึ่งมากกว่าพีเฮช ขององค์ประกอบใน (a), โดยที่พีเฮชของบัฟเฟอร์การล้างแรกคือตั้งแต่ประมาณ 6.8 ถึง ประมาณ 9.0; (c) การล้างวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การล้างที่สองที่พีเฮชซึ่งน้อยว่าพีเฮช ของบัฟเฟอร์การล้างแรก; และ (d) การชะแอนตี้บอดี้จากวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การชะที่การนำไฟฟ้าซึ่ง มากกว่าอย่างแท้จริงของบัฟเฟอร์การล้างที่สอง

2. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่พีเฮชของบัฟเฟอร์การล้างที่สองและพีเฮชของ บัฟเฟอร์การชะเท่ากันโดยประมาณ

3. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่แอนตี้บอดี้ยึดเกาะกับ CD20 ของมนุษย์

4. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่แอนตี้บอดี้ยึดเกาะกับปัจจัยการเจริญเติบโต เนื้อเยื่อบุโพรงของหลอดเลือดของมนุษย์ (VEGF)

5. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่พีเฮชขององค์ประกอบภายใน (a) คือตั้งแต่ประมาณ 4.0 ถึงประมาณ 6.0, พีเฮชของบัฟเฟอร์การล้างแรกคือตั้งแต่ประมาณ 6.8 ถึงประมาณ 8.0, พีเฮชของ บัฟเฟอร์การล้างที่สองคือตั้งแต่ประมาณ 5.0 ถึงประมาณ 6.0, และพีเฮชของบัฟเฟอร์การชะคือตั้งแต่ ประมาณ 5.0 ถึงประมาณ 6.0

6. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่การนำไฟฟ้าของบัฟเฟอร์การชะคือตั้งแต่ประมาณ 10 มิลลิซีเมน/เซนติเมตรถึงประมาณ 100 มิลลิซีเมน/เซนติเมตร

7. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่บัฟเฟอร์การชะประกอบด้วยประมาณ 100 ถึง ประมาณ 300 มิลลิโมลาร์ NaCI

8. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่วัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกประกอบด้วยอนุภาค การไหล-ผ่านตลอดของโพลี(สไตรีน-ไดไวนิลเบนซีน) ที่เชื่อมขวางที่ถูกเคลือบด้วยโพลีไฮดรอกซีเลท โพลีเมอร์ที่ทำหน้าที่ด้วยหมู่ซัลโฟโพรพิล

9. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 โดยที่สิ่งปนเปื้อนถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยโปรตีน รังไข่แฮมสเตอร์จีน (CHOP), โปรตีน A ที่ชะละลาย, DNA, แอนตี้บอดี้ที่เกาะเป็นกลุ่ม, ส่วนประกอบ สารอาหารของการเพาะเลี้ยงเซลล์, การาไมซิน, และสิ่งปนเปื้อนไวรัส

10. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 1 ที่ประกอบเพิ่มเติมด้วยการนำองค์ประกอบที่ ประกอบด้วยแอนตี้บอดี้ไปทำหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติมก่อน, ระหว่าง, หรือไม่ก็หลังขั้นตอน (a) ถึง (d) เพื่อได้รับการเตรียมที่เป็นเนื้อเดียวกันของแอนตี้บอดี้

11. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 10 ที่ประกอบเพิ่มเติมด้วยการคอนจูเกตแอนตี้บอดี้ที่ทำให้ บริสุทธิ์กับโมเลกุลที่ไม่เป็นเนื้อเดียวกัน

12. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 10 หรือ 11 ที่ประกอบเพิ่มเติมด้วยการเตรียมองค์ประกอบ ทางเภสัชกรรมโดยการรวมการเตรียมที่เป็นเนื้อเดียวกันของแอนตี้บอดี้หรือแอนตี้บอดี้ที่คอนจูเกตกับ ตัวพาที่สามารถยอมรับได้ทางเภสัชกรรม

13. วิธีการสำหรับการทำให้บริสุทธิ์แอนตี้บอดี้ซึ่งยึดเกาะ CD20 ของมนุษย์จาก องค์ประกอบที่ประกอบด้วยแอนตี้บอดี้และหนึ่งหรือมากกว่าหนึ่งสิ่งปนเปื้อนที่ถูกเลือกจากกลุ่มที่ ประกอบด้วยโปรตีนรังไข่แฮมสเตอร์จีน (CHOP), โปรตีน A ที่ชะละลาย, DNA, และ CD20 แอนตี้บอดี้ ที่เกาะเป็นกลุ่ม, ซึ่งวิธีการประกอบด้วยขั้นตอนที่เป็นลำดับของ: (a) การบรรจุองค์ประกอบไปบนวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกโดยที่องค์ประกอบอยู่ที่พีเฮช ตั้งแต่ประมาณ 4.0 ถึงประมาณ 6.0; (b) การล้างวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การล้างแรกที่พีเฮชตั้งแต่ประมาณ 6.8 ถึงประมาณ 9.0; (c) การล้างวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การล้างที่สองที่พีเฮชตั้งแต่ประมาณ 5.0 ถึงประมาณ 6.0; และ (d) การชะแอนตี้บอดี้จากวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยใช้บัฟเฟอร์การชะที่มีพีเฮชตั้งแต่ ประมาณ 5.0 ถึงประมาณ 6.0 และการนำไฟฟ้าตั้งแต่ประมาณ 10 มิลลิซีเมน/เซนติเมตรถึง ประมาณ 100 มิลลิซีเมน/เซนติเมตร

14. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 13 โดยที่แอนตี้บอดี้คือริทูซิแบบ

15. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 13 โดยที่บัฟเฟอร์การชะประกอบด้วยประมาณ 100 ถึง ประมาณ 300 มิลลิโมลาร์ NaCI

16. วิธีการสำหรับการทำให้บริสุทธิ์แอนตี้บอดี้ซึ่งยึดเกาะปัจจัยการเจิญเติบโตเนื้อเยื่อบุ โพรงของหลอดเลือดของมนุษย์ (VEGF) จากองค์ประกอบที่ประกอบด้วยแอนตี้บอดี้และหนึ่งหรือ มากกว่าหนึ่งสิ่งปนเปื้อนที่ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยของส่วนประกอบสารอาหารของการ เพาะเลี้ยงเซลล์, การาไมซิน, โปรตีนรังไข่แฮมสเตอร์จีน (CHOP), DNA, สิ่งปนเปื้อนไวรัส, และ VEGF แอนตี้บอดี้ที่เกาะเป็นกลุ่ม, ซึ่งวิธีการประกอบด้วยขั้นตอนที่เป็นลำดับของ; (a) การบรรจุองค์ประกอบไปบนวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกโดยที่องค์ประกอบอยู่ที่พีเฮช ตั้งแต่ประมาณ 4.0 ถึงประมาณ 6.0; (b) การล้างวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การล้างแรกที่พีเฮชตั้งแต่ประมาณ 6.8 ถึงประมาณ 8.0; (c) การล้างวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยบัฟเฟอร์การล้างที่สองที่พีเฮชตั้งแต่ประมาณ 5.0 ถึงประมาณ 6.0; และ (d) การชะแอนตี้บอดี้จากวัสดุการแลกเปลี่ยนประจุบวกด้วยใช้บัฟเฟอร์การชะที่มีพีเฮชตั้งแต่ ประมาณ 5.0 ถึงประมาณ 6.0 และการนำไฟฟ้าตั้งแต่ประมาณ 10 มิลลิซีเมน/เซนติเมตรถึง ประมาณ 100 มิลลิซีเมน/เซนติเมตร

17. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 16 โดยที่แอนตี้บอดี้คือบีวาซิซูแมบ

18. วิธีการของข้อถือสิทธิข้อที่ 16 โดยที่บัฟเฟอร์การชะประกอบด้วยประมาณ 100 ถึง ประมาณ 300 มิลลิโมลาร์ NaCI

19. องค์ประกอบที่ประกอบด้วยริทูซิแมบในบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยประมาณ 25 มิลลิโมลาร์ HEPES, ที่พีเฮชประมาณ 7.8

20. องค์ประกอบที่ประกอบด้วยบีวาซิซูแมบในบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยประมาณ 25 มิลลิโมลาร์ MOPS ที่พีเฮชประมาณ 7.0