SU933700A1 - Способ приготовлени препаратов бактерий дл просмотра в сканирующем микроскопе - Google Patents

Description

I

Изобретение относитс  к микробиопогии .

Известен способ подготовки колоний бактерий дл  просмотра в сканирующем микроскопе, включающий замсфаживание бактерий и высушивание в замороженном состо нии fl .

Этот способ подготовки препаратов бактерий путем лиофилизаций требует специальной вакуумной камеры и охлаждение до температуры твердой углекислоты. Кроме того, лиофилизаци  сильно повреждает клетки за счет образовани  в них кристалликов льда. Данный способ не позвол ет просмотреть колонию на разной глубине, качество снимков очень низкое, способ трудоемок, врем , необходимое на подготовку бактерий к просмьтру, составл ет приблизительно по 246 ч.

Известен также способ приготовлени  препаратов бактерий дл  просмотра в сканирующем микроскопе, включающий выращивание копсжий бактерий на питательной среде с последующим фиксированием, приклеивание электропроводным клеем к металлическому столику и напыление металла на препарат ..

Однако известный способ очень трудоемок , долог и не позвол ет изучать мелкие микроорганизмы например фитопатогенные бактерии.

Целью изобретени   вл етс  упрощение способа и сокращение времени приготовлени .

10

Дл  достижени  поставленной цели согласно способу приготовлени  препаратов бактерий дл  просмотра в сканирукущем микроскопе, включающему выращивание колоний бактерий на питательной.среде с

15 последующим фиксированием, приклеивание электропроводным клеем к металлическому столику и напыление металла на препарат, фиксирование колоний бактерий провод т путем погружени  их вместе с агаровой

20 подушкой в концентрированный раствор металла на 2-72 ч, а после приклеивани  к столику снимают поверхностную пленку и производ т нанесение бороздок

на поверхности колонии на гпубин - 0.10 ,2 мм.

П р и м в р . На питательных средах Ьодержащих агар-агар вьфащивают копо НИИ фитопатогенных бактерий различных родов, например, Peeudovnoi as или Еи ,rv-fmaЭти колонии зафиксированы вместе с агаровой подушкой в концентрированном метаноле в течение 2, 5-6, 10, 12, 24 и 72 ч при комнатной температуре.

Далее колонии приклеивают клеем БФ-2 к специальному металлическому столику дл  сканирующего микроскопа Э5АЛ-5О-А, не дожида сь Испарени  метанола .

Приклеенные колонии хранились от 1-2 ч до 6 мес. и при этом качество изображений не мен лось.

Непосредственно перед напылением металла На колонию провод т бороздки тонкой препаровальной иглой и снимают бактериальную пленку.

Колонии просматривают на  шжском сканирующем электронном микроскопе марки 351Л-50-А.

Предложенный способ имеет следующие преимущества; фиксируетс  цела  колони  бактерий, что искйточает операцию приг«. товлени  взвесей; исключаетс  центрифугирование , которое приводит к массовой гибели исходного материала; примен етс  одно легкодоступное фиксирующее вещество; исключаетс  применение сложных буферньос смесей при фиксации; значительно сокращаетс  врем  подготовки к просмотру в микроскопе.

Claims (2)

1.Стать  Маме оова К. Ю. и др. Извести  АН СССР. Сер. биологическа , Наука, 1978, № 6.

2.БОЛЬШОЙ практикум по .физиологии растений, М., Высша  щкола, 1978, с. 252-264.