SU923525A1 - Способ определени резистентности эритроцитов - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к гематологическим лабораторным исследовани м, и может быть использовано дл  диагностики при токсикозах , бронхопневмони х, туберкулезе , лейкемии, лимфогрануломатозе, циррозе печени, при различных гемолитических заболевани х. Известен способ определени  резистентности эритроцитов путем их разрушени  с последующим определением гемоглобина . Однако на проведение исследовани  3известным способом затрачиваетс  боль шое количество времени, при этом спо соб обладает низкой чувствительностью что затрудн ет диагностику. Цель изобретени  - повышение чувствительности и ускорение способа. Поставленна  цель достигаетс  тем что согласно способу определени  резистеитности эритроцитов путем их разрушени  с последующим определением гемоглобина эритроциты разрушают; ультразвуком с возрастающей интенсивностью от 0,05 до 0,6 Вт/см при частоте 880-890 кГц. Способ осуществл ют следующим образом . .В центрифужную приборку с каплей гепарина производ т забор 0,5 мл крови из любой сосудистой зоны (из пальца или вены). В предварительно подготовленные четыре центрифужные пробирки , содержащие 1,9 мл физиологического раствора хлористого натри , внос т 0,1 мл крови. Содержимое пробирок осторожно перемешивают. Пробы озвучивают-, например, на ультразвуковом приборе Ультразвук Т-5. Рабоча  частота высокочастотных колебаний составл ет 880+8 8 кГц. Озвучивание производ т путем соприкосновени  ультразвуковой головки поверхностью 1 см с поверхностью физиологического раствора, содержащего эритроциты. Режим озвучивани : 0,05 Вт/см (1-  пробирка); 0,2 Вт/см 39 ( 2-  пробирка); О, Вт/см (3-  пробирка ); 0,6 Вт/см ( пробирка). Врем  озвучивани  3 мин. Все пробир ки центрифугируют 10 мин при 2000об/ 1н 0 надосадочном растворе хлористого натри , содержащем разрушенные эрит роциты, определ етс  уровень гемогло бина. Дл  этого из каждой пробирки отбирают по 0,3 ил надосадочной жидкости и помещают в соответствующее количество пробирок, содержащих 2,7 мл MitjOH (1 мм концентрированного разводитс  до 250 мл водой) содержимое пробирок тщательно перемешивают и йютометрируют или спектро фотометрируют в кювеТе (1 см) при длине волны 570 нм. Результаты выражают в грамм %. Концентрацию гемоглобина определ ют по формуле: К ОП.22, где К концентраци  гемоглобина в грамм %; ОП - оптическа  плотность на регистрирующем приборе. В тех случа х, ког да определение ведетс  в крови при патологических процессах, сопровождающихс  изменением количества эритроцитов , например,- при кровопотери, необходимо делать поправку на гематокрит . И в расчетной формуле исполь зуетс  гематокритный показатель: ОП. 22 Н где Н - гематокритна  величина, . Полученные значени  гемоглобина на каждом режиме суммируют и получаю величину гемоглобина, свидетельствую щую о гемолизе эритроцитов при обработке их ультразвуком. Увеличение выхода гемоглобина по сравнению с нор мой указывает на снижение резистивности эритроцитов, уменьшение выхода гемоглобина на повьпоение резистивнос ти. Пример. Больной Г., лет. В течение двух последних лет страдает приступами стенокардии. При поступлении в стационар сн та ЭКГ„ проведено определение в крови комплекса биохимических показателей, подтвержда щих наличие хронической ишемической болезни.У больного произведен забор крови с каплей гепарина из вены. Дл  оп ределени  резистентности эритроцитов отобрано 0,5 мл. После озвучивани  полу чены результаты, представленные в табл. 1. Таким образом, у больного Г. выход гемоглобина составл ет 5,76 г % при норме 15,6 ;t 0,67 г %, что свидетельствует о повышенной резистивности эритроцитов. С целью сравнени  предлагаемого способа с извёЬтным у 5 кроликов моделировалась остра  кровопотер  (65% объема крови) и определ лась резистентность эритроцитов в исходном cotто нии и через 2 ч после потери крови . Дл  выражени  гюлученных результатов использовали известный способ показатель средней клеточной хрупкости , т.е. резистентности, соответствующую тому проценту раствора хлористого натри , при котором гемолизуетс  50 клеток. Изменение процента раствора, при котором гемолизуетс  50% клеток, отражает изменение резистентности эритроцита . Показатели резистентности эритроцитов 7 кроликов в исходном состо нии и через 2 ч после т желой (б5%) кровопотери известным и предлагаемым способами приведены в табл. 2. Как видно из табл. 2, исследование резистентности эритроцитов известным способом показало, что у интактных животных 50% клеток гемолизуетс  при 0, растворе NaCl. После острой кровопотери 50% клеток гемолизируетс  „р, о,/,7 растворе NaCl, что  вл етс  свидетельством того, что резис тентность эритроцитов через 2 ч после массивной потери крови не изменена . При использовании предлагаемого способа выход гемоглобина с учетом гематокритной величины увеличилс  на 24% по сравнению с исходным фоном, j что свидетельствует о снижении резистентности эритроцита ло сравнению с данными интактных кроликов. Таким образом, предлагаемый способ  вл етс  более чувствительным и позвол ет вы вить функциональные изменени  эритроцитов уже в первые часы развити  патологического процесса , не вы вл емого известным спосо бом .

npo6MpKM,Jl/f

Режим озвучивани , Вт/см

1.а.§-5.и..«.1

гемоглоСосто ние резисграмм %

тентности

Claims (1)

1. Формула изобретения

   Способ определения резистентности эритроцитов путем их разрушения с последующим определением гемоглобина, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, эритроциты раз рушают ультразвуком с возрастающей интенсивностью от 0,05 до 0,6 Вт/см⁴ при частоте 880-890 кГц.