SU659620A1 - Питательна среда дл выращивани микроорганизмов-продуцентов лизина - Google Patents

Description

Лльбу.микмое 5-20 молоко Стабилизатор 10-30 Вода остальное С целью повьпиени  содержани  свободных аминокислот э питательно среде, целесообразно провести ферментный или кислотный гидролиз аль буминного молока и в питательную среду ввести полученный гидролизат Альбуминное молоко  вл етс  по604HIJM продуктом молочной промышле ности и получают его из подсырной сыворотки, которую подогревают и о рабатывают коагулирующим агентом, отдел ют жидкую фракцию, содержащую молочный сахар, и получают сгусик альбуминное молоко . Оно предст л ет собой концентрат, содержащий белки, представленные альбумином, глобулином, гамма-формой казеина, казеиновой пылью, не улавливаемой при фильтрации, а также минеральны вещества,витамины, биокатализаторы ферменты и пигменты, гормоны и др. Содержание общего азота субстрата 1,0-1,5% , в том числе содержание белкового азота - 0,6-1,2%. В субс рате присутствуют небелковые.азотные соединени  в виде мочевины 27-32 мг%, аминокислот 23-70 мг%, мочевой кислоты - 85-99 мг%, креа на 8-11%, пуриновых оснований 20-25 мг% и продуктов распада нукле иновых кислот. Минеральные вещества представлены окис ми. В их состав вход т (в % от содержани  золы) : калий - 31,3, натрий -9,2, кальций 20,1, магний -2,4, фосфор - 23,7. Ценность альбуминного молока опреде л етс  также наличием фосфолипидов служащих передатчиками кислорода, благотворно вли ющих на де тельность ферментов. Альбуминное молоко характеризуетс  высоким содержанием ценных компонентов (около 50%), используемых ауксотрофными культурами Продуцентами L-лизина. Подверга  альбуминное молоко гидролизу, резко повышают содержани свободных аминокислот (до 23% от со держани  сухих веществ). Дл  приготовлени  кислотных гидролизатов в качестве гидролизующего агента можно использовать не только сол ную кислоту, но и уксусную , фосфорную. Гидролиз 3%-ной сол ной кислотой осуществл ют в автоклаве при 0,15 МПа в течение 2 час при соотношении субстрата и гидролизующего агента 5:1. Гидролиз 96%-ной уксусной кислотой провод т при 0,15 МПа или 0,11 МПа в течение 2 час при соотношении субстрата и Гидролизуюшего агента 1:1 или 2:1. Гидролиз фосфорной кислотой пр воц т при ГН 0,2 и 0,11 МПа в течение 1 час. Дл  приготовлени  ферментных гидролизатов в качестве гидролизующего агента используют протеолитические ферменты производства НИИ Прикладной энзимологии или технический препарат протосубтилин ГЗх производства Вильнюсского ферментного завода и Ефремов ского биохимического завода.Гидролиз провод т в течение 4-6 час при 4548°С и рН 7,2-7,5. Концентраци  . ферментного препарата составл ет 0,5%. Сущность изобретени  по сн етс  примерами. П р и м е р 1. Готов т питательную, реду следующего состава (г/л среды): Меласса (по содержанию РВ)100 АММОНИЙ фосфорнокислый25 Калий фосфорнокислый однозамещенный 0,5 Калий фосфорнокислый двузамещенный0 , 5 Кукурузный.экстракт10 Альбуминное молоко10 Вода до 1- л. рН 7,2-7,5 стабилизируют мелом (10 г/л) . Ферментацию культуры Bnevibacteч um sp. 22 ЛД ведут при 31 + , асход О2. в первые 24 час - во врем  оста культуры - 50% насыщени , во рем  биосинтеза - 10-20% насыщени . После 60 час культивировани  кульуральна  жидкость содержит 35,3 г/л Ь-лизина. П р и м е р 2. Питательна  среда л  выращивани  продуцента L-лизина pevibactei°ium sp. 22 л имеет следующий остав (г/л среды): Меласса100 АММОНИЙ сернокислый 25 Калий фосфорнокислый однозамешенный 0,5 Калий фосфорнокислый двузамешенный 0,5 Кукурузный экстракт 10 Гидролизат альбуминного молока 30%-ной уксусной кислотой 5 Мел10 Водадо 1 л. Услови  культивировани  аналоичны примеру 1. . В конце ферментации в культуальной жидкости накапливаетс  7,8 г/л L-лизина. П р и м е р 3. Дл  выращивани  родуцента L-лизина Bnevibactentum p.22 ЛД используют питательную среду следующего состава (г/л среМеласса150 АММОНИЙ сернокислый 3