SU517198A1 - Способ получени противогрибкового антибиотика - Google Patents

Claims (2)

1. Изобретение относитс  к фармацевтической про1ииишенности, а именно к производству антибиотиковi Известен способ получени  противо грибкового антибиотика, заключающийс  в том, что культуральную жидкость BidymocCadium iernatum Socc . экстрагируют хлороформом с последующим выделением целевого продукта путем многостадийной системы очистки,. Этот способ трудоемкий и Не обеспечивает достаточный выход и степень чистоты антибиотика. Отличительной особенностью предлагаемого способа  вл етс  то, что iuTaMMl3 da oc (uw iepnoituni басе, выргидивают на питательной среде, содержащей глюкозу и пептон (2,6:1,5). Культуральную жидкость при рН 7.экстрагирувдт смесью растворителей, состо щей из насыщенных и хлорированных углеводородов (хлористый метилен, хлороформ, четыреххлористый углерод) например петролейный эфир (т.кип,40VO C ) и четыреххлористый углерод (9:1 по объему). Растворители из объединенного экстракта частично отг гон ют в вакууме, а -зыпавшие кристал лы отдел ют фильтрованием. Получен|НЫй препарат повторно кристаллизуют из смеси бензола с гексаном или гептаном . ,, Пример 1. Антибиотик получают путем глубинного культивировани  T idymocEadium tenttottum при 28 С на среде, содержащей глюкозу (3,9%) и пептон (1,5%) в колбах на встр хиваемой качалке со скоростью вращени  220 об/мин, рН 6. Продолжительность ферментации 120 ч. Культуральную жидкость фильтруют. Фильтрат в объеме 10 л с содержанием антибиотика не ниже 100 мг/л (т.е. 1 г антибиотика По весу) экстрагируют при рН 7 четыре раза смесью петролейного эфира и четыреххлористого углерода (9:1) при соотношении культуральной жидкости и растворител  2:1. После разделени  сепарированием или центрифугированием объединенный экстракт упаривают в вакууме на роторном испарителе при температуре не выше 30°С до объема 150200 мл. Выпадающие при этом кристаллы белого или бледно-розового цвета отдел ют фильтрованием. Получают 0,8 г кристаллического продукта с содержанием 90% по весу антибиотика. П р и .м е р
2. 2. Кристаллизацию очищенного препарата, полученного по примеру 1, осуществл ют из смеси бенэол-гексан (2:1). Дл  этого навеску препарата раствор ют в 15-кратном объеме растворител  (15 мл на 1 г ве .щества) при температуре кипени . Зате раствор выдерживают при 0°С до полного выпадени  кристаллического., продукта . После фильтровани  и высушивани  получают мелкокристаллический порошок антибиотика белого цвета. Полученный антибиотик характеризуетс  следук цими свойствами: т.пл. 214-214, 39,9( с 0,4 в этиловом спирте); УФ-спектр в этиловом спирте Ямо«с211 (Е 9500); мол.вес 737 ИК-спектр имеет полосы поглощени  в области 3426, 3360, 3325, 1640, 1520 см. Эмпирическа  формула H(i,j К- Og,. На основании ИК-спектра, результатов титровани  кислотами и щелочами и исследовании продуктов кислотного гидролиза установлено, что антибиотик нейтральный полипептид. При жестком гидролизе антибиотика 5н. НСЕ в 20%ной уксусной кислоте (20 ч ) об.г разуютс , моль: Ь -лейцин 1;О-алло-изолейцин1J Ь - N -метиллейцин 1; D-эритро-1& -оксилейцин 1; U - М -метилаланин 3, При легком гидролизе (Зн. НС в 50%-ной уксусной кислоте) получают пептиды ,,„ H-MeUen-len-MeARa-OH, H-MeAea-HtfLen3Ee-MeAEa-OH, N-Len-MeAEa -MeAEa-HyLen-aee-MeAea-MeLen-OH . Антибиотик имеет формулу -SH. СНгСНМег Формула изобретени  Способ получени  противогрибкового антибиотика путем глубинного культивировани  DidymocBadium ternaiumSoicc. на питательной среде, содержащей источники углерода, азота , минеральные соли, с последующим вьщелением целевого продукта из культуральной жидкости экстракцией органическими раст-. ворител ми и очисткой кристаллизацией, отличающийс  тем, что, с целью повышени  выхода и чистоты антибиотика , продуцент выращивают на среде с пептоном и глюкозой, экстракцию осуществл ют смесью углеводорода и хлорированного углеводорода при рН 6-7 и кристаллизуют из смеси бензол-гексан (2:1).