SU470114A3 - Способ получени монофосфата нуклеозида - Google Patents

Description

(54) еПСЮОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОФСХ:ФАТА НУКЛЕОЗИДА

(1) I звключаю1аи с |в том, что 8нгалоид 3;5 -циклоадейозинмонофосфат перевод т в 2-0 -СГ-8-галовд-Зу5. jB пвхдомонофоофат ( Шепл ема  айиштна  группа), который обра 5атывают раогвором, / |доДёр: щим yxcyctyto киспоту и «цвтат натри  дп  получени  ) -СДГ-б- N -ацетил вгОксиаденозин 3 5 гадос Ж)мокофосфата, на последний действуют ме- танольным аммиаком с образованием 2-О- (Т-8-оксиаденозин-355 ;Цикломонофосфата и 8-2-ангидро 8-окси-9-- уЗ -Д- арабинофураноэипйденин 3 .цикломонофосфата, полученное ангидросоединение обрабать :вают жидким сероводородом дл  обрааова;ни  В-меркапто-Э--- fl -Д-арабинофураноэил« аденин-3|5уцикломонофосфата , который Bod станавпшзают до -Д-арабинофуранозил ; аденин 3 5 цикломонофосфйта, NHg JL Отшепл ема  группа может представл ть собой такой остаток, как тозил, мезил, ани зил, брочзил, низил или триизопропилёензол;;, сульфонил, предпочтительно тозил. Раствор уксусной кислоты и ацетата натри  может включать уксусный ангидрид, а 2 «-О-СГ-6- N -ацетил-В-оксиаденозин;-3 54-цикломс )Нофосфат целесообразно обра батывать затем метанольным раствором аммиака дл  получени  ангидропроизводнога, k. . 8 МеЕК-аптоп1х изводное превращают в 19- ;8-Д-арабиной аноаиладенин-З.З-пикло Шовофосфат восстановлением в присутствии никел  Рене  в качестве катализатора. Процесс гфотекает по схеме: МНл Сйачалй Хромированием 3, &-Еикпоадено- зинм ЭйЬфосфата (11, который  вл етс  пр{фодным соединением, получают -в-бром- 4гЗ р-циклоаденозии;моно осфат( 111 ). Зате м ;л. соединение Ш обычно тоэилируют Д пй5У5вют. 2-CVro3H№-8-бромадёнозив-3 ,5-цикломонофосфат ( IV ). Если в п6ло-« жении 2 присоедин етс  друга  группа (СУ),5 т.е. не тозил, то образуетс  соединение 2-U« ЗГ 8-бромаденозин-3 , 5 -дикломонофосфаТц ПосШ этого соединение. IV обрабатыв ют раствором уксусного ангвдрида, ацетата натри  и уксусной кислоты. Далее на образовавшийс  2-О тозил-.6- М -ацетил-8 ОКсиаденозин-З .б-дикломонйфосфат .(-V ) действуют метанольным аммиаком ГСпиртовым раствором аммиака) (в несколько прй«« емов) и получают 3-СМгозил-8-оксиаденозин- ,-ЗJ5-циклoмoнc)фocфaт (VI ) и РО-8-ОКСИ-9- -Д-арабинофуранозиладенин 3,5-цикломонофосфат {УИ ). Соединение Vl можно получить обработкой продукта IV ацетатом натри , уксусной кислотой, а ангид ропроизводное VII - из соединени  VI , действу  на него натрием и Ц Ц «, -диметилформамидом (ДМФА), Заеем а гидропроизводное VI обрабатывают зййдким сероводородом дл  образовани  8-ме{жапто -9- -Д-арабинофуранозиладенй 3,5 цшсломонофосфата (Till ). Последний конверсируют предпочтительно восстановлэнием в присутствии никел  Рене  в качестве катализатора и получают целевой 9- Л -Д-арабинофуранозиладенин-З 5 цикломоно; фосфат ( I), Соединение УП1 можно пере вести в вещество 1 также путем обработки п- олуолсугазфонилхлоридом в пиридине или ОЕнспением N -бромсукцийимидом или йодом,,, Приведенные в схеме соединени  можно представить обшей формулой где X - водород, гидроксил, сульфоксил, га ;лоид или ангидро (анпщрид); f - водород или ацил С - С 1 R - водород или гидроксил; водород или ОС-Ваточна  группа, например тозил, мезил, аниаип, брозил , низил или триизопропилбензопч сульфонил} У - водород, щелочной металл или аммоний , В случае, когда R.-OH, R и R обозначают И, а Х-Н или 8 H R обоон ,чает ац л 1ишь в случав, когда Х-ОН, остаточна  группа; X представл ет собой галоид если R и R обозначают водород, а остаточную : В- можно группу. Заместители X, варьировать. Пример. Получение 2--О-вчЗзил -8-бромаденозин 3 г6 -цик ломонс Ьосфвта натри  ( 1У ).f ... 40,9 г (15)0 ммоль) соедине.ни  111 раствор ют в 250 мл 1 н. едкого натра и is перемешиваемый раствор вЛивают в тече |ние 15 мин раствор 76,26 г {4ОО i ммоль) толуолсульфохлор да в 60О мл|ди л, : океана. Реакционный раствор перемешиЕЙго |4 час при комнатной температуре ecbj выливают а 5 л лед ной воды при енергич;ном перемешиззаннй. Выпавший осадок от ,фйльтроаывают, промывают 2 л лед ной 1воды и сушат путем отсасывани . Высу шешп 1Й осадок суспендируют в 8ОО мл хлщроформа, энергично перемешивают, |фильтруют и промывают избытком 3 л хлси1роформа . Белый порснлок сушат в вакуум .эксикаторе над п тиокнсью фосфора до , ;утра и получают 55,ef 94%) соединени ГУ в виде хроматографически однфоднсАп I материала, : в ИК спектре обнаружена сильна  полоlea поглощени  при 1179 см (арилсуль , фанил). В ПМР-спектре-«номбрный протон (определение в Д„р} с центоом при. .. , ввдёЬнш-лета.Прн электрофорезе ра бумаге в фосфатном бу4)ере (рН 7,2) цикло-АМП движетс  как однозарааное п тна УФ-спектр: 266 нм ( 150©О|; - -„,. - -264 нм (е 17700)|.Р -%акс ( 15200) П р и м е р 2, Получение 8-2-аюпзд ро-8-окси-9- Q гД-арабинофуранозйладе- , ,5-цикломонофосфата ( VII ), 32,8 г ацетата натр   раствор гот в 9ОО мл уксусной кислоты, затем приливают бОййуксусного ангидрида и 24 г (4О ммоль) соединени  IV, . Раствор поддерживают при температуре кипени  с обратным холодильником при отсутствии влаги в течение 3,75 час (температура бани 125°G), повле чего реакционную смесь охлаждают и упаривают досуха в ва сууме. Рстатрк 6ёра6аты ют метанолом, этано-1 лом и диоксаном, затем упаривают дл  удалени  последних остатков уксусной кио( лоты и суспендируют а смеси 600 мл йетанола и 4ОО мл этанола. ТЬердые куск суспензии измельчают и выпавший осадок фильтруют (дл  промывки берут-2ОО мл ме Танола). Вьюушеиный продукт ( V ) дает Однс одное п тно при хроматографировании В нескольких системах. Выход 22,61 г. .РН 11 . УФ- :пектр: РН 1 290 нм; макс 27а,б ЗО9,5. б) 2 «Ю-тозил-8-оксйаденозин-3,5-аикн Ьомоно осфат аммони  { Yi ), 2,168 г (4 ммоль) полученного на т Ьледней стадии соединени  ( У ) раствор joT в 6 О мл метанольного аммиака и piacTвор вьщержйвают 00 час при комнатной температуре, после чего упаривают досуха в вакууме. Остаток суспендируют и растирают с- 4О мл этанола и оставл ют до утра в холодильнике . Затем отфильтровывают выпавший осадок, промь1вают 20О мл этанола и сушат, получа  1в7 г соединени  VI , Фильтрат и пром; шную хсидкость упарийают в вакууме, а остаток перёкристаллизовывают из метанола (этанола) и получают еще О, Об 5 г соединени  VI . Общий выход 1,765 г (85,3%). УФ-спектр: Я 265 и 288 нм; макс f 282 ... макс в) в-2-Ангвдр - 8 окри-9- jB -Д арабинофуранозпладенин- 3 ,5-циклофосфат ( УИ ) Метод i, 1,551 г (3 ммоль) соединени VI раствор ют в 50 мл метанольного рас вора аммиака и раствор выдерживают 6 час при в баллоне. Продукты реакции ад- порб1фуют в колонке с кремнеземом (fAan линкродт - 1ОО меш.; размеры колонки 2,7 см X 70 см), елюиру;суг xлqpoфopMoм 4ОО мл), а затем смесью метанол - хлоро форм в объемном соотношении 1 ; 1. Продук УН про вл етс  по второму главному пику. Соответствующие фракции собирают и упаривают . Остаток раствор ют в 4О мл метано .ш, охлаждают и получают кристаллическую аммонийную соль соединени  УЛ . Огфильт ровывают Oj44 г образовавшейс  соли,фильтрат подкисл ют 2 н. сол ной кислотой до рН 2 и получают 0,16 г продукта VII в виде свободной кислоты. Общий выход 0,60 г или 59,, Н 3,13; Найдено, %: С 36,85; ,22. Вычислено, %: С 36,7Ij Н 3,08; N 21,40. В ИК- спектре ч тсутствует ; полоса полощени , соответствуюша  арилсульфонильой группе при 1179 сыг, В ПМР-спект е (определение в ДМСО/ НаОД) - аномерый протон в виде дублета с центром при (§ 6,5, что указаывает на арабинозную онфигурацию с 2 ангидро-св зью, и 2протон с триплетом, расположенным при б 5,95. УФ-спектр:J 259 и 286 (плечо) нм; . макс . 257 нм. Метод 2. 17,12 г (33,1 ммоль) соедиени  У1 раствор ют В: 2ОО мл метао ьного раствора аммиака в баллоне из нежавеющей стали и нагревают 9 час при 5Ъ. Содержимое охлаждают и упариват в вакууме досуха. Остатсж раствор ют 8О мл воды и фильтруют. Фильтрат смеивают с 8О мл этанола, подкисл ют 2 н. сол ной кислотой (рН 2) и оставл ют до тра в холодильнике. Затем фильтруют, промывают смесью метанол-этанол (50%; 2x25 мл) и сушат. Получают 5,О9 г {47,01%) соединени  VII , идентичного соединению, полученному по Методу 1. П р и м е р 3. Получение 8-меркапто- -9- -Дг-арабинофуранозиладенин-3,5f-цИкломонофосфата (соединение V11I ). Метод 1. Приготовл ют суспензию 1,ЗОг (4 ммоль) соединени  VII в 15 мл диметилформамида и 25 мл пиридина и затем внос т в нее 4О мл жидкого, сероводорода (готов т в баллоне). Содержимое выдержи вают 16 час при 1ОО С (температура бани ), охлаждают и упаривают в вакууме досуха . Остаток адсорбируют в колонке и кремниевой кислотой (Маллинкродт - 1ОО меш.; размеры колонки 5 х 4О см), затем элк ируют 950 мл хлороформа и смесью хлороформ метанол в объемном соотношении 1:1. В УФ-области Шч еютс  два главных пика абсорбции. Фракции, соответствующие первому пику собирают и упаривают. Полу-. . чают О,9 г белого порошка (вещество УИ1 ), а при трехкратной перекристаллизации из смеси метанол этанол - 0,835 г (57,7%) вещества. Чарть вещества раствор ют в воде и раствор подкисл ют до рН 2. Полученную кристаллическую свободную кислюту (Fin) сушат 4 час при 80 С в -вакууме.

9

Найдвно,%: С 3.1,44; И 3,48; N 18,34

о 12 5 - 2 Е-5ычислено , %: С 31,6О; Н 3,72; N 18,46.

рН 1

- 244 нм

УФ-спектр: макс

{ 1О620) и ЗО8нм { 2617О);

рН 11 294 нм (23970). макс

ПМР-спектр (в RyO} обнаруживает аномерный протон в виде дублета „ с цент ром при О 87,0,

Метод 2, В баллоне из нержавеющей стали готов т суспензию 7,7 г {23,3 ммоль) соединени  VII в НО мл диметилформамида , затем приливают -. 55 мл жидкого сероводорода. Содержимое реактора выдерживают 20 час при , охлаждают , выпавший осадок отфильтровывают при . помощи 10О мл этанола, промывают 10О мл эфира, сушат при отсасывании и получают 5,39 г почти чистого продукта VII в виде белого порошка. Это вещество раствор ют в 30 мл воды и фильтруют. К фильтрату добавл ют 30 мл этанола, затем подкисл ют ЗО мл 2 н. сол ной кислоты (рН 2), выпавший осадок вещества выдерживают 1 час при комнатной температуре и отфильтровывают. Осадок промывают 5 мл водного этанола (5О%), после чего сушат 4 час при 6О°С и О,1 мм рт. ст. Получают 3,85 г хроматографически однородного вещества VIll . Фильтрат при дальнейшем подкислении дает еше 0.2О г этого вещества.

Смешивают первоначальный фильтрат реакционной смеси и промывную жидкость, упаривают и аде орбируют в колонке с сухой кремниевой кислотой {размеры колонки 4,5x18 см). Затем элюируют 150 мл 5О%-ного метанольного хлороформа и 1О%-ным метанольным аммиаком (собирают 4ч акции по 10 мл). Далее собирают (}чэакцию, соответствующую чистому соединению Vin и упаривают. Остаток раст вор ют в метаноле при помощи 2 н. едкого аммони  и осаждают подкислением, получа  1,3 г чистого вещества VIII . Общий выход 5,15 г или 61,2%.

Пример 4. Получение 9- А -Д-арабинофуранозиладеиин-3 , 5 -циклофосфата {вешество I).

3,О4 г {S ммоль) соединени  Шраст« вор ют в 25О мл метанола, содержащего 1О мл 2 н. едкого аммони . В получен;ный раствор внос т 36 г никел  Рене  и смесь выдерживают 18 час при температуре кипени  {с обр тным холодильнике)

1C

(температура бани ). . к 11a.iiH...y)тор отфильтровывают слой цептл, промывакл- 1ОО мл метанола, содержащим 1О мл 2 н, едкого аммони . Фильтрат вместе с гфомывной жидкостью упаривак/г досуха, а остаток раствор ют в ЗО ктл ме танола и нескольких капл х 2 и. едкого аммони . Раствор отфильтровывают л подкисл ют . Выпадает 2.,05 г свободной кисло ты ( вещество 1). Фильтрат упаривают и получают еще 0,24 г, Обший выход 2,24 г или 31%. Остаток перекристаллизовывают путем растворени  в воде и подкислени , после чего сушат 4 час при 8О С и 1 мм рт. ст.

Найдено, %: С 36,20; Н 3,52; N 21,27.

So l2 eV/Вычислено , %: С 36,48; Н 3,67;

N 21,09. и 01 па

.,рН

256 нм УФ-абсорбци :

макс.

( 6 15200); Я Р 5в ( 15400).

макс

Предмет изобретени 

Claims (4)

1.Способ получени  монофосфата нуклеозида , отличающийс  тем, что

8-галоид-3,5-циклоаденозинмонофосфат перевод т в 2-О-ОГ-8-галоид-3,3-цикломонофосфат {СГ-отщепл ема  чзащитна  группа ), который обрабатывают раствором, содержащим уксусную кислоту и ацетат натри ,

дл  получени  2-O-Or-6-N -ацетил-8- -оксиаденозин-3,5-цикломонофосфата, на последний действуют метанольным аммиаком с образованием 2-О-ОГ-8-Ьксиаденс зин-3 ,5-ц5жломонофосфата и 8-2-агегндр

-в-окси-9- J9 -Д-арабинофуранозИладенин-3 ,5-цикломонофосфата, полученное ангидросоединение обрабатывают Лндким сероводородом дл  образовани  8-мерчапто-9- -Д-арабинофуранозиладенин-3, 5 -ник ломонофосфата , который восстанавливают до 9- jQ -Д-арабинозиладенин-3, 5 -цнк ломонофосфата .

2.Способ по п. 1, о т л и ч а ж: шн йс   тем, что отшепл ема  группа может

представл ть собой такой остаток, как то зил, мезил,Занизил, брозил, низил или иоопропилбензолйульфонил, предпочтительно тозил.

3.Способ по п, 1, о т л и ч а ю ш к йс  тем, что раствор уксусной кислоты и

ацетата натри  включает уксусный ангидрид, а 2 -О-ЮГ««6-Н -«цетил 8-сжсипденоз п -. ,,5 чцикломонофосфат обрабатывают затем метанольным раствором aMNinoKa дл 

;Лолучени  ангидропроизвопного.

1112

4. Способ no и, 1, о т л и ч а ю щ и й-г-3,5«-цикломонофосфат восстановлением

с   тем, что 8 «меркаптопроиэводное присутствии никел  Рене  в качестве каращают в 9« j9 -Д-арабиноф.-ранозиладени тализатора.

470114