SU1651774A3 - Сухой бактериальный препарат дл получени продукта типа йогурт - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к молочной промышленности и биотехнологии и может быть использовано в качестве продукта, обладающего дезодорирующим действием, и в качестве добавки к кормам дл  животных и птиц. Цель изобретени  - придание целевому продукту повышенного дезодорирующего эффекта . Изобретение заключаетс  в создании композиции, содержащей по крайней мере один штамм молочнокислых палочек Lactobacillus deodorans,. Lactobacillus cleorans и смешанную культуру Lactobacillus sulfurica PERM P 7383 или PERM P 7384 и Lactobacillus nitrosus PERM P 7385 или PERM P 7386, из молочнокислых стрептококков Streptococcus faecalis PERM P 2083 или PERM P 7382, способных продуцировать антибиотики при соотношении культур от 150:1 до 0,01:1. Предусматриваетс  дополнительное содержание от 0,5 до 0,15 мае.ч. Bacillus coagulans или Bacillus subtilis и/или 10-100 мае.ч. Bifidobacterium sp. A TCC 11146 или АТСС 11863. Отобранными штаммами засевают йогуртовую среду и выдерживают смесь в течение 48 ч при 37°С, получа  в результате йогурт Полученный йогурт испытывают на запах и вкус и отбирают клетки, обладающие хорошим запахом и вкусом. 1 з.п. ф-лы, 4 табл. 3 с с& ел --4 -4

Description

Изобретение относитс  к молочной промышленности и биотехнологии и мо- 1жет быть использовано в качестве продукта, обладающего дезодорирующим действием, и в качестве добавки к кормам дл  животных и птиц.

Цель -изобретени  - придание целевому продукту повышенного дезодорирующего эффекта.

Изобретение заключаетс  в- создании композиции, содержащей по крайней

мере один штамм молочнокислых палочек L.deodorans и L.cleorans и стрептококков Sterptococcus faecalis и смешанную культуру Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus, отобранных с учетом дезодорирующего эффекта, наиболее сильно про вл ющегос  в указанном сочетании и при соотношении культур от 150:1 до 0,01:1. Кроме того, предусмотрено дог полнительное содержание 0,5-0,15 мае . ч.

ы

Bacillus coagulans или Bacillus sub- tilis и/или 10-100 мае.ч. Bifidobac- Leriura sp. ATCC 11146 или АТСС 11863

Отличи  четырех указанных типов

Lactobacillus от известных ранее Lactobacillus следующие.

Дл  размножени  известных штаммов обладающие запахом соединени , содержащие атомы серы, и обладающие запа- ком соединени , содержащие атомы азота, не  вл ютс  необходимыми Да- же при добавке таких обладающих за пахом соединений к питательной среде в которой известные штаммы Lactoba- cillus не могут размножатьс , размно жени  их не происходит. Даже при добавке этих соединений на стадии лога рифмического роста известных штаммов ускорение роста микроорганизмов не наблюдают. Известные штаммы Lactobacillus не потребл ют этих соедине- ний, которые полностью остаютс  в том количестве, в котором их добавл ют .

Известные штаммы Lactobacillus раздел ютс  в отношении ауксотропии на штаммы, которые могут размножать с  в среде Стефансона - Бетмана (S - W) при добавлении к ней кислоты Casamino и витаминов, и штаммы, ко- торые не размножаютс  в этой среде, пока к ней помимо кислоты Casamino и витаминов не добавл ютс  другие компоненты.

Известные штаммы Lactobacillus размножаютс  в обычной среде хуже по сравнению с Escherichia coli и тому подобных. Так, способность их к размножению составл ет 0,5 от соот- ветствующей величины дл  Escherichia coli. Их стационарна  кишечна  способность сохран етс  в течение 1-2 дней Относительно их очищающей способности, даже в отношении обла- дающих запахом соединений, содержащих атомы углерода, ничего не известно «

Все четыре указанных штаммов Lactobacillus обладают следующими свойствами Lactobacillus, Они  вл ютс  грам-полохительными, анаэробными или микроаэрофильными, представл ют собой необразующие спор палочки, которые в зависимости от типа штамма могут быть сферическими, изогнутыми или нитеобразными; они неподвижны, отрицательны по отношению к каталазе и не снижают содержание нитратов;

5 0

0

„

0

5

они не разлагают желатин, не продуцируют индол или сероводород. Некоторые из них имеют бипол рную окраску. Они не разлагают белки и жиры или разлагают их в очень слабой степени. Они лучше размножаютс  в анаэробных или микроэробных, чем в аэробных услови х , интенсивно разлагают сахара и стойки к кислотам. При использовании их дл  ферментации глюкозы образуетс  молочна  кислота с выходом более 50%. Размножение их ускор етс  при добавке к питательной среде уксусной кислоты. Они непатогенные по отношению к животным и растени м. Lactobacillus clearans оказывают очень м гкое действие даже при введении их орально в больших количествах и снижают содержание плохо пахнущих веществ в испражнени х, не вызыва  непри тных ощущений при длительном использовании. Однако при прекращении приема штамм выводитс  из организма через кишечный тракт, тер   свою способность оказывать дезодорирующее действие in vivo в течение непродолжительного времени.

Дезодорирующа  способность Lactobacillus deodorans на несколько пор дков выше по сравнению с Lactobacillus clearans, и, кроме того, они полностью разлагают плохо пахнущие соединени .

Дл  каждого вида Lactobacillus OT- оирают те клетки, которые имеют большее значение. Lactobacillus lactis, используемые в предлагаемом способе, выдел ют, например, следующим образом.

В среде А (среда S-W + витамин + + агар, при этом среда S-W имеет еле- дующий состав, г: ; MgSO x х 7Н,,0 0,7; NaCl 1; ( 4; FeS04-7%0 0,03; глюкоза 5) или в среде В (среда S-W + казалинова  кислота + агар) формируют колонию с помощью анаэробной культуры из фекалий. После этого выращивают полученную колонию в среде LBS, Селективна  среда дл  Lactobacillus lactis состоит из, г: триптиказ 10; экстракт дрожжей 5; м сной экстракт 10; 6; кислый лимоннокислый аммоний 2; глгаг коза 20; твин 80 1 (торговое название моноолеата поликсиэтиленсорбита- на); ацетат натри  40; раствор В 15 мл;- лед на  уксусна  кислота (99,5%), не требующа  установлени 

5165

рН и стерилизации 3,7 мл (раствор в меет следуюций состав, г: FeS(4 x 7HtO 0,5; Мп80ф-пНгО 2,47; NaCl 0,5; MgS04- 7НгО 10; вода 250 мл), и собирают выращенные на ней бакте- иальные клетки Эти клетки выращи- вают затем в обычной агаровой пита- ельной среде и из всех получаемых таммов оставл ют только те, которые в точности отвечают определению Lac- tobacillus lactis.

После этого полученные штаммы раздел ют в соответствии с величиной ауксотропии с помощью следующих пиательных сред: глюкоза или крахмал, неорганические соли и вода (Q); ере а q с добавкой обладающего запахом соединени , содержащего атомы серы, азота или углерода, содержащегос  в екали х (Ј); среда q.c добавкой витаминов , no-отдельности или в комбинации (6); среда Q с добавкой одной или нескольких аминокислот (2); среа Q с добавкой одного или нескольких особых витаминов (J); среда 0 с обавкой триптофана (6); среда q с добавкой одной или нескольких аминокислот , содержащих атомы серы (Ж)

В указанной питательной среде под витаминами имеютс  в виду витамины А, В|, Вд, В,{ , никотинамид, пан- то тенат кальци , витамины С и и т.д. Под особыми витаминами имеютс  в виду другие, отличные от перечисленных , витамины, такие как фолева  кислота, биотип и т.п. Иод аминокислотами имеютс  в виде отличные от особых аминокислот и аминокислот, содержащих атомы серы, аминокислоты, такие как глицин, глутаминова  кислота , лизин, аланин, фенилаланин, альгинин, аспарагинова  кислота и т.п. Под аминокислотами, содержащими атомы серы, имеютс  в виду цистин, цистеин, метионин, таурин и т.д.

i

Б качестве Streptococcus faecalis,

используемых в предлагаемом способе, примен ютс  микроорганизмы, добавл емые к кормам дл  домашних животных . Это должен быть штамм, способный продуцировать антибиотик, поскольку вырабатываемый им антибиотик подавл ет рост и размножение кишечных сапрофитов и косвенно способствует размножению Lactobacillus, используемых в предлагаемом изобретении .

7746

Дл  выделени  таких Streptococcus faecalis в качестве источника используют фекалии человека или домашних животных. Выращивание осуществл ют при 34-39°С в аэробных услови х (в течение 48 ч) в селективной дл  Streptococcus faocalis питательной среде, например среде SF, состо щей

из, г: пептон 20; глюкоза 5; 4; 1,5; ЫаЖЦ 0,5; NaCl 5; ВСР (бромкрезоловый пурпурньй) 0,032; агар 15; вода 1 л (рН 6,9- 7,2).

5 Полученные Streptococcus faecalis подвергают испытани м на гемолиз, оставл   негемолитическне клетки, из которых отбирают те, которые обладают способностью продуцировать

0 антибиотики. Полученным штаммом засевают питательную среду, состо щую из сн того молока и сахарозы. Из полученных в результате бактериальных клеток отбирают клетки, обладающие

5 хорошим запахом и имеющие нужные показатели , и используют их дл  осуществлени  предлагаемого изобретени .

Типичный метод испытани  штамма

0 на способность продуцировать антибиотики заключаетс  в высевании Streptococcus faecalis на агаровую питательную среду диаметром 10 мм, содержащую сахар и СаСОа, выращивании в точение 48-72 ч при 37°С,штриховой разнодке больных зародыши на среде в радиальном направлении от центра среды, покрытой Streptococcus iaecalis, и продолжении выращивани 

0 в течение 24-48 ч дл  определени , продуцируют ли Streptococcus faecalis антибиотики.

Антибиотики, вырабатываемые Streptococcus faecalis, представл ют

5 собой нестойкие к повышенным температурам аминоглюкозиды. При этом один штамм продудирует 4-5 видов антибиотиков , обладающих узким спектром антибактериальной активности

0 Эти 4-5 видов антибиотиков с узким спектром антибактериальной активности вместе обладают такими же свойствами, как один антибиотик с очень широким спектром антибактериальной активное-

5 ти

Streptococcus faecalis  вл ютс 

нетоксичными по сравнению с актив- ностью и метаболизмом других кишечных бактерий, доход щих до 100 биллионов

5

116

Относительно негемолитического штам ма Streptococcus faecalis, продуци- рующего антибиотики, следует отметит что он повышает активность Lactoba- Bifidobacterium и подавл ет активность патогенных бактерии.

Предпочтительными штаммами Streptococcus faecalis  вл ютс  штаммы, ран щиес  в Fermentation Research Institute (Япони ) под номерами национальной регистрации FERM-P 2082 и 7382 (номера международной регист- рации IFO 14452 и 14453).

Б соответствии с предлагаемым по крайней мере один из микроорганизмов Lactobacillus deodorans Lactobacil- lus clearans и смешанный штамм Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus используютс  в комбинации с упом нутым микроорганизмом Streptococcus faecalis. Соотношение Lactobacillus и Streptococcus faecalis в комбинации находитс  в пределах (150:0.01):1, предпочтительно (100-0,01);, а наиболее предпочти тельно (30-0,03):I. Наиболее целе- сообразно использовать их в отноше- нии 10:1, которое характерно дл  кишечной флоры При непосредственном нанесении на слизистую оболочку кожи Lactobacillus используютс  в меньшем количестве,, чем Streptococcus, a именно в соотношении (1-0,03):. При использовании Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus дл  достижени  того же эффекта, что и в случае Lactobacillus clearans, доста точно примен ть смесь Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus, в которой бы каждый из компонентов находилс  в таком же количестве, как и Lactobacillus clearans.

Дл  получени  сухих бактериальных препаратов Lactobacillus и Streptococcus faecalis с добавкой Bifido- bacterium и/или Bacillus достаточно смешать их в соотношении 5 15 мае.ч. Lactobacillus, 10-100 мае.ч. Bifido- bacterium и 0,05-0,15 мае.ч. Bacillus на 1 мас.ч. Streptococcus faecalis . При использовании комбинации четырех указанных штаммов Lactobacillus и Streptococcus faecalis в соответствии с предлагаемым они могут также использоватьс  с добавкой Bifidobacterium, Bacillus или смеси последних. При использовании Bifidobacterium дезодорирующее действие

7748

препарата сохран етс  даже после

прекращени  приема его. Bacillus же повышает способность Lactobacillus и Streptococcus перерабатывать плохо пахнущие вещества в процессе дезодо- рировани .

Б качестве Bifidobacterium дл  осуществлени  предлагаемого изобретени  может использоватьс  штамм Bifidobacterium, используемый дл  получени  йогурта, или штамм, исполь- зуемый в пищевых продуктах. В пред лагаемом изобретении используютс  штаммы, хран щиес  в АТСС

В качестве Bifidobacterium дл  осуществлени  предлагаемого изобре- тени  используютс  штаммы Bacillus coagulans, представл ющие собой

0 прекрасный бактериальный посевной

материал дл  получени  йогурта, штампы . Bacillus coagulans, представл ющие собой прекрасный бактериальный мате- риал дл  ферментации сои, и т.п. Возможно также применение и других штаммов Bacillus, использующихс  при получении пищевых продуктов. Bifido- bacteri un предпочтительно использовать в количестве, в 1-10 раз (по

массе) превышающем количество Lactobacillus , a Bacillus в количестве, составл ющем 1-0,01% от количества Lactobacillus.

Соотношение отдельных штаммов,

f полученных в результате предлагаемого выращивани  штаммов.соответствует соотношению этих штаммов при добавлении и х до выращивани  в питательную среду. Однако дл  выращивани 

0 нескольких штаммов, включа  Bifidobacterium , желательно подбирать такую питательную среду дл  одновременного размножени  бактерий, в которой размножение Bifidobacterium про-

5 исходило бы с высокой скоростью, дл  того чтобы размножение Bifidobacterium , протекающее с более низкой скоростью , могло бы начатьс  раньше дру гих видов штаммов

0 Выделение Streptococcus faecalis осуществл ют следующим образом.

В качестве питательной среды используют среду SF (20 г пептона, 5 г глюкозы, 4 г , 1,5 г KHgPO,..,

5 0,5 г NaN03, 5 г NaCl, 0,032 г ВСР, 15 г агара и 1 л воды; рН 6,9-7,2), представл ющую собой селективную среду дл  выращивани  Streptococcus faecalis, Суспендируют в этой пита-

тельной среде фекалии человека или животных и осуществл ют выращивание в аэробных услови х при 37вС в теме ние 48 ч.

Клетки, идентифицированные как Streptococcus faecalis, подвергают испытани м на гемолиз и отбирают не гемолитические клетки.

Испытывают отобранные клетки на способность продуцировать антибиоти- ки и оставл ют клетки, обладающие такой способностью.

Отобранным штаммом засевают йогур- товую среду, состо щую из 100 г обезжиренного молока и 100 г сахарозы, и выдерживают смесь в течение 48 ч при 37°С, получа  в результате йогурт. Полученный йогурт испытывают на запах и вкус и отбирают клетки, обл; дающие хорошими запахом и вкусом. Выделение клеток из питательной среды провод т следующим образом .

В случае Lactobacillus clearans, Lactobacillus deodorans, Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitro- sus, используемых в предлагаемом изобретении, а также Streptococcus faecalis и Bacillus, каждый из штаммов «по-отдельности высевают в упом нутую лактозную питательную среду MRS, а именно в среду, содержащую, г: м сной экстракт 10; пептон 10; экстракт дрожжей 5; лактоза 20; твин-80 I мл; 80,2; ацетат натри  5; цитрат аммони  2; MgSO x х 7Н40 0,2; Mn.S04-4HtO 0,05, провод т выращивание при 37 С в течение 72 ч и выдел ют клетки с помощью охлаждаемой центрифуги.

В случае Bifidobacterium исходный штамм высевают в лактозную среду MRS с добавкой 1 мг витамина В, 8 мг пантотената кальци  и 0,1 мг биотина провод т выращивание при 37 С в течение 96 ч и отдел ют клетки с помощью охлаждаемой центрифуги.

Отделение клеток осуществл ют следующим образом. i

Пример 1. Определ ют степень дезодорировани  9H-0 и №Ц при использовании смеси штаммов Lactobacillus и Streptococcus faecalis.

Штаммы Lactobacillus и Streptococcus faecalis засевают в среду, содержащую,, г: м сной экстракт 5; пептон 5; глюкоза 1; СаСОд 1; фекалии , содержащие 0,5 г Яа-В-ЭН О или 0,5 г Ш«, I, и осуществл ют выращивание дл  определени  уменьшени  содержани  и Жэ. Получен- ные результаты приведены в табл 1. Дл  сравнени  опыты повтор ют в тех же услови х, но вместо смеси Lactobacillus и Streptococcus faecalis используют только штаммы Lacto- bacterium. Полученные результаты приведены в табл. 2.

Как видно из табл.2, при использовании комбинации Lactobacillus и

5 Streptococcus faecalis способность усваивать обладающие запахом вещества возрастает на 10-20% по сравнению с тем случаем, когда используютс  одни только Lactobacillus. Кроме того, LacQ tobacillus deodorans поглощают обладающие запахом веществ в большей пени, чем Lactobacillus clearans. Первые потребл ют NauS-9H,jO и N11, гголностыо в течение 72 ч, тогда как

5 Lactobacillus clearans их полностью не потребл ют. Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus также не потребл ют полностью обладающие запахом вещества.

0Использовавшиес  в опытах штаммы

перечислены в табл. 3.

Приведенные в табл.3 штаммы а и Ь Streptococcus faecalis продуцируют антибиотики. Штаммы с и d Strepto5 coccus faecalis не продуцируют антибиотиков . Штамм A Bacillus представл ет собой семенные клетки дл  получени  йогурта (Bacillus coagulaus). Штамм В Bacillus представл ет собой

0 семенные клетки дл  ферментации сои (Bacillus subtil is)о

Пример 2. Опыты по дезодорации провод т с использованием штамма FERM-P № 7382, в дальнейшем

5 называемого штамм a (Streptococcus faecalis), и штаммов IFO 14253 и 14450.

К 1 г свежих экскрементов человека добавл ют 9 мл изотонического

Q раствора хлористого натри , К одной части (смесь 1) полученной таким образом смеси добавл ют 1 мл раствора с культурой клеток Lactobacillus clearans, а к другой части (смесь 2) , 1 мл раствора культуры клеток Lactobacillus clearans и 0,5 мл раствора культуры клеток штамма Q , после чего обе порции выдерживают при 37 С в течение 48 ч.

1 1

На основании оценки интенсивности запаха делают вывод, что степень де зодорации выше в серии опытов со смесью 2, а количество недезодориро- ванных фекалий вдвое меньше, чем в случае смеси 1. При этом в последнем случае дезодорацию фекалий не наблюдают в двух из дес ти опытов.

При оральном введении одних тольк Lactobacillus clearans в комбинации с штаммом а установлено, что дезодорирующий эффект выше (степень дезо- дориоовани  определ ют путем анализа выдел ющихс  фекалий) в том случае, когда используетс  комбинаци  Lactobacillus со штаммом а , причем при этом всегда имеет место дезодорирование .

Результаты этих опытов (in vivo) свидетельствуют о том, что Lactobacillus clearans, а также Lactobacillus в сочетании со штаммом q сохран ют свою активность в кишечнике, в котором присутствуют фекалии (содержащие микроорганизмы, вызывающие гниение, большей частью анаэробные, в количестве до 1, клеток на 14 фекалий). Хот  значительный эффект получен как при использовании только Lactobacillus clearans, так и в случае комбинации их со штаммом Q тем не менее комбинаци  Lactobacillus .clearans со штаммом более эффективна . Под эффективностью имеетс  в виду высока  степень дезодорировани  и уменьшение числа случаев отсутстви  дезодорирующего действи .

Описанные опыты относ тс  к использованию Lactobacillus clearans, аналогичные сравнительные опыты провод т с использованием Lactobacillus deodorans и смеси Lactobacillus sul- furica с Lactobacillus nitrosus (штаммы IFO 14255, 14256, 14252, 14253), а именно сравнивают действие Lactobacillus deodorans и Lactobacillus deodorans в комбинации со штаммом О , а также смеси Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus с этой же смесью, но в комбинации со штаммом Q

При этом ту же тенденцию, как и в случае Lactobacillus clearans, наблюдают при использовании смеси Lactobacillus sulfurica и Lactobacillus nitrosus.

Эффект действи  штамма О больше в случае Lactobacillus deodorans, a

77412

именно при использовании штамма а штамм Streptococcus faecalis, продуцирующий антибиотики, оказывает значительно более сильное действие в отношении уничтожени  плохих запахов не только при оральном введении, но и при наружном применении препарата в области лобка у женщин.

Пример 3. Получение йогурта.

При получении йогурта путем ферментации Lactobacillus clearans и Streptococcus faecalis пигательную среду дл  посевных клеток, содержащую 30 г обезжиренного молока и 3 г карбоната кальци  (рН 7,0), раздел ют на две части и стерилизуют. После этого засевают каждую из порций указанными штаммами и осуществл ют выра-

щивание при 37°С в течение 24 ч, получа  в результате посевные клетки Lactobacillus clearans и Streptococcus faecalis (количество клеток составл ет 1,5-10 кл./мл дл  Lacto5 bacillus clearans и 2-Ю9 кл./мл дл  Streptococcus faecalis),

Параллельно стерилизуют 1000 мл среды дл  получени  йогурта, состо щей из ШО г обезжиренного молока,

0 100 г сахарозы и 2 г агара.

К приготовленной таким образом среде дл  получени  йогурта добавл ют 1 0 мл посевных клеток Lactobacillus clearans, 0,8 мл посевных клеток

c Streptococcus faecalis, осуществл ют выращивание при 37°С в течение 24 ч, получа  в результате йогурт.

Полученный йогурт содержит 2,5-10 кл./мл Lactobacillus clearans

0 и 2,5-108 кл./мл Streptococcus faecalis . Соотношение между Lactobacillus clearans и Streptococcus faecalis равно 10:1. Этот йогурт ввод т человеку и животным.

5 I

При получении йогурта ферментацией Lactobacillus clearans, Streptococcus faecalis и Bifidobacterium посевные клетки Lactobacillus clea- Q rans и Streptococcus faecalis получают путем приготовлени  питательной среды дл  посевных клеток, посева каждого из штаммов в питательную среду и выращивани  при 37°С в течение 24 ч. Bifidobacterium засевают

5

в питательную среду дл  посевных клеток, состо щую из 30 г обезжиренного молока, 1 г цистеина, 1 мг витамина В, 8 мг пантогената кальци  и

13

J

0,1 г биотина, и осуществл ют выращивание при 37°С в течение 72 ч

Параллельно стерилизуют 200 мь среды дл  получени  йогурта, состо щей из 100 г обезжиренного молока, 100 г сахарозы, 2 г агара и г цистеинь, и фильтруют ее и стерильных услови х. После этого к прнго- товлеиной среде добавл ют мг витамина В-, 8 мг пантогената кальци  и О,1 мг биотина.

К полученной таю-iM образом среде добавл ют 10 мл посевных клеток Bifidobacterium и осуществл ют выра- щивание при 37°С в течение 36 ч.

Затем к питательной среде одно временно добавл ют 10 мл посевных клеток Lactobacillus clearaas и 0,8 мп посевных клеток Streptococcus faecalis и продолжают выращивание при 37°С в течение 36 ч, получа  в результате йогурт.,

Полученный таким образом йогурт содержит 2-10 i actobacillus clearans, 2-10 к л. /мл Streptococcus faecalis и.ЗмО кл./мл Bifidobacte- rium. Соотношение между Lactobacillus clearansp Streptococcus faecalis и Bifidcbacterium равно 10:1:15..

Пример 4„ Получение сухих препаратов. ,

Дл  получени  полусухих препаратов засевгют по отдельности каждым штаммом Lactobacillus clenrans и Streptococcus faecalis описанную лактозную питательную среду MRS, a также штаммом Bif idobac teriutr соответствующую питательную среду и осу ществл ют выращивание каждой культу ры. К 10 г влажных клеток, отобран- ных путем центрифугировани , добавл ют по 300 г крахмала, высушенного при повышенной температуре до остаточной влажности 0,2%, и 1 г цис- теина и перемешивают компоненты, получа  в результате препарат с конечной влажностью 2% или менее.

Получение препаратов, содержащих Lactobacillus clearans и Streptococcus faecalis, ведут путем смешени  высушенных и смешанных с крахмалом 50 г Lactobacillus clearans и i r Streptococcus faecalis. Полученным препаратом заполн ют пузырьки, герме тически закупоривают их в атмосфере азота и хран т в темном прохладном4 месте„

1774«

Получение препаратов, содержащих Lactobacillus с lea ran-s Streptococcus faecalis и Bif idobac terir.m, ОУ дут путем смешени  кы су пеших к смешанных с 1флхм2л№ опнсггным образом 0 г Lar.tobacillus clearans, I r Streptococcus faecalis и 100 r Bifi- aobacter LUIB, Полученным препаратом

JQ заполн ют пузырьки, герметично закупоривают их в атмосфере а°ота и хран т в темном прохладном месте.

Дн  получени  сухих препаратов засевают по отдельности каждым штаи

(5 мо.м Lac cobaci llus clearans и Streptococcus faecalis описанную питатель нуте среду MRS, а также штаммом Bifi- irboc terium соответствующую питатель iivi- r.pn;ry i; осуществл ют выращивание

20 каждой культуры. 10 г влажных клеток из , .отобранных Г утем центрифугировани , дпсаергиру- юг -з 100 мл раствора, содержащего КС лактозы и 0,1% цистина, и получен25 ную дисперсию высушивают с помощью сублимационной сушки

Получение препаратов, содержащих Lactobacillus clearans и Streptococcus faecalis, ведут путем смешешш

30 полученных описанным образом 10 г препарата живых клеток Lactobacillus clearans и 1 г препарата живых клеток Streptococcus faecalis. Полученным препаратом заполн ют ампулы и хран т их.

Получение препаратор, содержащих Lactobacillus r.learans, Streptococcus faecalis и Bifidobacterium, ведут путем смешени  полученных описанным

35

способом 10 г Lactobacillus clearans, 1 г Streptococcus faecalis и 100 г Bifidobacterium. Из полученного пре- парат.0 готов т таблетки, которые хран т з пузырьках.

11 р и м ер 5. Смешанную культу

ру Lactobacillus clearans, Lactoba- cillus deodorans и смешанный штамм Lactobacillus sulfurica и/или Lactobacillus nitrosus в равных колнчестзах и Streptococcus faecalis и/или bacillus genes получают с использованием среды, состо щей из 1000 г молока или смеси молока и соевого сока , 100 г сахарозы и 2гагара. После

стерилизации среды указанные штаммы инокулируют одновременно в среду в требуемом соотношении клеток и получают культуру при 37°С в течение 24 ч дл  подготовки йогурта, содер-

15

жацего ферментированное молоко, смесь молока и соевого сока.

Смешанную культуру штаммов, используемую в предыдущем случае с добавлением Bifidobacterium получают в упом нутой среде, в которую добавл - ют 1 г цистина, 1 мг витамина В, 8 MI патогината кальци  и О,1 мг биотина в стерильных услови х, при чем Bifidobacterium культивируют ранее при 37°С в течение 36 ч, затем другие штаммы засевают одновременно и культивирование продолжают при 37°С в течение 36 ч дл  подготовки продукта .

Полученный предлагаемый продукт обеспечивает лучший вкус и запах, чем сравниваемый образец, который по- лучен при ферментации только Lacto- bacillus.

Через 8 ч после инокул ции указанных Lactobacillus и/или Bacillus в среду инокулируют Streptococcus fae- calis. Культивирование осуществл ют при 37°С в целом в течение 48 ч. Полученный продукт обеспечивает лучший вкус и запах по сравнению с продуктом , в котором указанные четыре штамма были засе ны одновременно.

Через 24 ч после инокул ции Bifidobacterium инокулируют Lactobacillus и/или Bacillus, Спуст  8 ч инокулируют в указанную среду Streptococcus faecalis. Культивирование провод т при 37°С в течение 48 ч. Полученный таким образом продукт обеспечивает

16

51774Ib

лучший вкус и запах по сравнению с продуктом, в котором указанные четыре штамма были засе ны одновременно.

Предлагаемый продукт может быть использован как добавка к корму, предназначенному дл  кормлени  животных , в том числе кошек, собак, порос т , а кроме этого, и дл  птиц.

10

Claims (2)

1. Формула изобретени 

   1 Сухой бактериальный препарат дл  получени  продукта типа йогурт, содержащий молочнокислые палочки

   15 Lactobacillus и молочнокислые стрептококки Streptococcus, отличающий с  тем, что, с целью придани  целевому продукту повышенного дезодорирующего эффекта, он содержит из молочнокислых палочек Lactobacillus по крайней мере один штамм Lactobacillus deodorans, Lactobacillus clearans и смешанную культуру Lactobacillus sulfurica PERM P 7383 или PERM P 7384 и Lactobacillus nitrosus PERM P 7385 или PERM P 7386, из молочнокислых стрептококков - Streptoc.occus faecalis PERM P 2083 или P- 7382, способные продуцировать

   30 антибиотики при соотношении культур (150-0,01):.
2. 2. Препарат по п., о тлич а ю- щ и и с   тем, что он дополнительно содержит 0,5-0,15 мае.ч. Bacillus

   35 coagulans или Bacillus sibtilis и/или 10-100 мае.ч. Bifidobacterium sp . ATCC 11 146 или АТС 1186 3.

   Таблица 1

   20

   25

   Lactobacillus

   ns

   sus

   rica

   ®

   @

   @

   w

   @

   @ © @

   Штамм

   FERM-F

   6587 6588 6589 6590

   1946 2742 2779 2780 2781 1782

   7385 7386

   7383 7384

   2082

   (() strain)

   7382.

   (jg) strain)

   Bifidobacterium

   2930 (Astrain)

   мидшдч ч e vw4ar -5 s «f в 0ч&«  т-с «4-аэд з « &

   Примечание:

   Регистрационные номера, приведенные на одной линии, относ тс  к одному и тому же штамму Используемое сокращенное название, приведено в скобках после регистрационного номера

   а б ji is ц а 2

   Таблица 3

   .

   IFO

   14253

   м

   14254 14450

   -

   14451

   14257 14258

   14255 14256

   14452 14453

   6569 (©strain) 14506 (фstrain) 1 1146 (© strain) П863 (/ strain)

   3335

   (B strain)

   Примечание А- отлично; В - хорошо; С довольно хорошо; D вкус и запах подобно соевому соку; 70m +30S 70 молока и 30 мае.Z соевого сока; 50т +50S - 50 мас.% молока и 50 мае. соевого сока.

   Таблица 4