SU1638161A1 - Штамм вируса дерного полиэдроза дл производства инсектицидного препарата - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, а именно к производству биологических инсектицидов дл  лесного и сельского хоз йства. Целью изобретени   вл етс  получение нового штамма вируса  дерного полиэдроза, обладающего большей вирулентностью по отношению к непарному шелкопр ду. Штамм вируса  дерного полиэдроза Pd -1-5 получен путем отбора из природного изол тора вируса , выделенного обычными методами из больной гусеницы непарного шелкопр да и депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов Института ВНИИгенетика, где ему был присвоен коллекционный номер ВКПМ virus-1. Суспензи  вируса штамма Pd-1-5 в воде имеет ЛКводл  гусеницы Porthetria dispar, равную 3 х 104 полиэдров на 1 мл или 0,2 х 105 полиэдров на гусеницу, в то врем  как штамм-прототип имеет ЛКво 4x10 и 4 х 10 соответственно. Биологическа  активность препарата, основанного на штамме Pd -1-5, дл  гусениц Porthetria dispar второго возраста составила 0,004 мг/г корма, а у аналогичного препарата , полученного на основе штамма-прототипа , 0,02 мг/г корма. 1 табл. сл с

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности, а именно к производству биологических инсектицидов дл  лесного и сельского хоз йства.

Целью изобретени   вл етс  получение нового штамма вируса  дерного полиэдроза , обладающего большой вирулентностью по отношению к непарному шелкопр ду.

Штамм Pd-1-5 получен путем отбора из природного изол та вируса, выделенного обычными методами из больной гусеницы непарного шелкопр да. Депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика , где получен коллекционный номер ВКМП virus-1.

Штамм имеет следующие морфологические и физиологические характеристики.

Морфологические признаки. Относитс  к группе бакуловирусов, в частности к вирусам  дерного полиэдроза, к виду Porthetria dispar.

Палочковидные вирусные частицы - ба- куловирусы включены в полиморфные белковые тела - полиэдры. В среднем в каждом полиэдре включено по 1215 ± 15 вирусных частиц, размерами 40-70 нм х 250-350 нм. Вирусные частицы имеют оболочку развити , в которой могут содержатьс  как одио

СА) 00

сЈ

ночные нуклеокапсиды, так и пучки, состо щие из 3-5 и более нуклеокапсидов. Классы вирусных частиц характеризуютс  следующими отношени ми нуклеокапсидов: q 1 69 ± 0,9; q2 18 ± 1,1; дз 64 ± 1,8; ц 31 ± 0,8; qs 25 ± 1,1 (q - количество вирусных частиц, содержащее определенное количество нуклеокапсидов).

Физиологические признаки. Штамм Pd-1-5 культивируетс  в гусеницах непарного шелкопр да, зараженных путем скарм- ливани  искусственного корма, инфицированного вирусом.

Состав искусственной питательной среды (ИПС) дл  выращивани  гусениц непарного шелкопр да; агар 10 г; пшеничные отруби 25 г; солодовые ростки 45 г; фасоль 20 г; кормовые дрожжи 15 г; аскорбинова  кислота 3 г; фолиева  кислота 5 мг; метабен 2 г; этиловый спирт 12 мл; вода 400 см3.

При заражении гусениц 4 возраста 1 г ИПС опрыскивают (смешивают) 0,2 мл водной суспензии полиэдров с титром 107.

Инкубационный период заболевани  4- 6 дней. Вирус репродуцируетс  практически во всех ткан х гусениц. Оптимальна  температура дл  репродукции вируса 24 ± 2°С. Рекомендуетс  хранить штамм при температуре от -12 до -70°С.

В качестве прототип вз т штамм вируса  дерного полиэдроза непарного шелкопр да S-13-p, который используетс  при производстве вирусного инсектицида Вирин-ЭНШ и получен путем адаптации вируса  дерного полиэдроза ивовой вол нки к непарному шелкопр ду.

Характеристики штамма Pd-1-5 и известного штамма приведены в таблице.

Как видно из таблицы, предлагаемый штамм Pd-1-5 в 10 раз активнее, а количество контаминантной микрофлоры в 100 раз ниже по сравнению с этими же показател ми известного штамма S-13-p.

Пример. Получение вирусного инсектицида .

Партию гусениц непарного шелкопр да по достижении ими четвертой возрастной стадии инфицируют вирусом  дерного полиэдроза , штамм Pd-1-5. Корм опрыскивают вирусной суспензией штамма Pd-1-5 с титром 107 полиэдров в 1 мл. Через 12 дней провод т сбор инфицированных гусениц.

Партию вирусосодержащих гусениц измельчают в гомогенизаторе при 1500 об/мин и добавл ют равное по весу количество аэросила. В процессе смешивани  получают светло-серую порошкообразную смесь вирусный инсектицид. Полученный инсектицид (Вирин-НШ) представл ет собой воздушно-сухой , сыпучий, легко и равномерно ресуспендируемый в воде, стойкий при хранении в течение 5 лет порошок, содержащий вирусные включени , тканевые фрагменты гусениц и аэросил, который одновременно  вл етс  наполнителем и при- липателем. 1 г инсектицида содержит 1 х 1010 вирусных включений,

Выход вируса из одной зараженной и погибшей от данного штамма гусеницы составл ет 1-2 млрд. полиэдров. Препарат, наработанный на штамме Pd-1-5,  вл етс  экологически чистым, обладает избирательным действием только к целевому насекомому - непарному шелкопр ду. Вирин-НШ безопасен дл  теплокровных животных и человека. Дл  получени  сравнительных данных параллельно из другой партии инфицированных гусениц аналогичным образом получают вирусный инсектицид на основе известного штамма S-13-p. Биологическа  активность, выраженна  в ЛКзо, составл ла соответственно 0,004 и 0,02 мг/г

корма дл  гусениц Portheria dispar второго возраста.

Таким образом, штамм Pd-1-5 позвол ет получить инсектицид, который патогенен дл  гусениц Porthetrla dispar, причем по

своей активности в п ть раз превышает инсектицид , полученный на основе известного штамма S-13-p.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Штамм вируса  дерного полиэдроза Porthetria dispar ВКПМ virus-1 дл  производства инсектицидного препарата.