SU1535892A1 - Способ получени ферментных мембран - Google Patents
Способ получени ферментных мембран Download PDFInfo
- Publication number
- SU1535892A1 SU1535892A1 SU884403363A SU4403363A SU1535892A1 SU 1535892 A1 SU1535892 A1 SU 1535892A1 SU 884403363 A SU884403363 A SU 884403363A SU 4403363 A SU4403363 A SU 4403363A SU 1535892 A1 SU1535892 A1 SU 1535892A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- enzyme
- membranes
- range
- membrane
- concentration
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение относитс к биотехнологии, а именно к способам получени ферментных мембран, которые могут найти применение в измерительных приборах на основе ферментных электродов дл определени метаболитов, физиологически важных соединений и ферментной активности. Цель изобретени - улучшение качества целевого продукта за счет расширени диапазона измер емых концентраций субстратов ферментов. Способ получени ферментных мембран заключаетс в св зывании ферментов с нерастворимым пленочным носителем в присутствии глутарового альдегида и сывороточного альбумина. В качестве носител используют микропористые дерные фильтры с пористостью 0,02 - 3,0%, приготовленные из лавсановой пленки путем ее облучени в ускорителе ионами инертных газов с последующим травлением в растворе щелочи. Способ позвол ет получить ферментные мембраны, пригодные дл измерени концентраций субстратов ферментов в диапазоне их концентраций 4 - 10 мМ, тогда как известные мембраны пригодны только до концентрации 1,5 - 2 мМ. 3 табл.
Description
20%-ным раствором едкого натра при 50°С, Пористость получаемых при этом дерных фильтров зависит от времени травлени (табл.1). Она составл ет 0,02-3%. Дл приготовлени ферментного сло 1600 ед. глюкозооксидаэы раствор ют в 0,6 мл 0,01 М фосфатного буфера рН 6,8, добавл ют О, мл Ц, Умного сывороточного альбумина и 0, мл 25%-ного глутарового альдегида . Эту смесь тщательно перемешивают и выливают на дерные фильтры размерами 20x20 см. На поверхность приготовленных двухслойных мембран надевают ацетатцеллюлозную мембрану толщиной 10 мкм. Полученные трехслойные мембраны помещают в холодильник на 2k ч. Затем разрезают на куски диаметром 2 мм и накладывают на Pt электрод (с Pt электродом контактирует ацетатцеллюлозна мембрана) и определ ют ток электрода при рН 7,2 и 19°С, задава 0,6 В отн. Ag/AgCl электрода.
Зависимость чувствительности электрода и диапазона линейного участка калибровочных графиков от пористости мембраны приведена в табл, 1.
Аналогично примеру 1 готоаг тэех- слойную мембрану с использс-Ct- Ur макропористой .чи по изь° . fij viy
СПОСОбу (ПОРИСТОСТЬ i,). to,
линейного участка градуировок ior о грасрь.сз при использовании 3
раНЫ СОСТ ЭЬЛЯС 1,5 ММ, О l /BCTBi lтельность - 21,6 нА/мМ.
Пример 2. Аналогично примеру 1 изготавливают ферментную мембрану дл определени этанола с использова- нием алкогольоксидазы. Дл сравнени параллельно используют макропористую мембрану по прототипу.
В табл. 2 приведены сравнительные
лактатоксидазы раствор ют L капле смеси сывороточного альбумина и глутарового альдегида в пропорци х как в примере 1 и выливают на дерный фильтр, определ ют ток электрода при рН 7,2.
Линейна зависимость градуировоч- ного графика при испопьзовании дерного фильтра наблюдаетс до концентрации лактата 10 мМ, в том врем как в случае использовани макропористой мембраны она сохран ете ч только до концентрации 1,5 мМ. Диапазон измер емых концентраций расшир етс в 6 раз.
Пример k. Срав игельное определение глюкозы в крсчи с использованием фермеитно. мембране, изготовленной по предложенному и известному способам.
Готов т фермеч-ч ю мембоану аналогично примепу , нанос т ее на электрод, измер ют ток нанесении на электрод кап--и неразбавленной крови . Параллельно изготавливают ферментную мембрану по известному способу , иэмер ют -к электродI в 20-кратно .еннсм , зце ис- спегуемой i рс при помощи анализа- то з ЗКСАН-Г) ,
Устамовленн ie концентрации глюкозы приведены в табл. 3.
Как видно из табл. 3, найденные концентрации практически совпадают.
Данные, приведенные в табл. 1 показывают , что при использовании дерных фильтров, пористость которых 0,02-3%, обеспечиваетс достижение цели, так как диапазон линейности градуировочных графиков расшир етс в 2-50 раз, т.е. концентраци определ емой глюкозы в растворе может составл ть -100 мМ, вместо 1,9 мМ.
параметры полученных электродов.
Из этих данных следуе, что линейность градуировочных графиков в случае использовани дерных фильтров наблюдаетс до 30 мМ в случае электрода 2, до 15 мМ (3), до 7,5 мМ И) и до 5 мМ (5), тогда как градуировоч- ный график электрода, содержащего мембрану (1), изготовленную согласно известному способу, нелинеен уме при концентрации 2,5 мМ.
Пример 3. Аналогично примеру 1 изготавливают ферментную мембрану дл определени лактата. Дл приготовлени ферментного сло 50 ед.
5 Наибольший диапазон линейности граду- ировочного графика наблюдаетс при использовании дерного фильтра с пористостью 0,02%, однако при этом чувствительность электрода уменьшаетс до 0,05 нА/мМ. Аналогична вза- имосв зь между диапазоном линейности и чувствительностью следует также из макрокинетического уравнени . Таким образом, оптимальными параметрами с практической точки зрени обладают мембраны, в которых используютс дерные фильтры с пористостью 0,05-3%. Они обладают линейностью в практически важном диапазоне концентрации глю51
козы и достаточной чувствительностью,
Механическа прочность дерных фильтров до травлени составл ет 12,6-13,4 кг/мм2 и уменьшаетс до 9,3 кг/мм при травлении в течение 30 мин при 50 С и в 20%-ном растворе щелочи. Таким образом, прочность предложенной мембраны с низкой пористостью бопьше, чем макропористой мембраны по известному, прочность которой мен етс в пределах 7,5- 9,1 кг/мма при изменении пористости от 4,7 до 11 ,4%.
Таким образом, применение предложенного способа поззол ет улучшить кг естео целевого продукта за счет расширений диапазона измерг.еммх концентрации Ферментов в
Диапазон линейного участка калибровочного графика, мМ УуҐсГГр йТё л s г ь , чд/м 1
100
50 35
25
20
15 Ю
j J.ob 0,19 0,35 1,0 1,65 2,5 5 12,5 20
Примечание,
Этанолчувствительные электроды исследованы при рН 8, содержат макропористую мембрану (1) или микропористые дерные фильтры (2-5); врем траелени 10 мин (2), 15 мин (3), 20 мин (4) и 30 мин (5).
50ТаблицаЗ
358926
2-50 раз (ог 4 до 100 мМ вместо 1,9 мМ).
Claims (1)
- Формула изобретениDСпособ получени ферментных мембран , включающий св зывание ферментов с лавсановой мембраной путем обработ10 ки глутаровым альдегидом в присутствии сывороточного альбумина, отличающийс тем, что, с целью улучшени качества целевого продукта за счет расширени диапазона измер ец- мых- концентраций субстратов ферментов, в качестве лавсановой мембраны используют дерные фильтры с пористостью 0,02-3,0%, полученные из лавсановой пленки.Таблица 1252015 Ю
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884403363A SU1535892A1 (ru) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | Способ получени ферментных мембран |
| LTRP1171A LT2558B (lt) | 1988-04-15 | 1993-09-27 | Fermentiniu membranu gavimo budas |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU884403363A SU1535892A1 (ru) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | Способ получени ферментных мембран |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1535892A1 true SU1535892A1 (ru) | 1990-01-15 |
Family
ID=21365841
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU884403363A SU1535892A1 (ru) | 1988-04-15 | 1988-04-15 | Способ получени ферментных мембран |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1535892A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998023734A1 (de) * | 1996-11-26 | 1998-06-04 | Gkss-Forschungszentrum Geesthacht Gmbh | Polymermembran mit in der membran lokalisierten enzymen sowie verfahren zur herstellung von erzeugnissen mittels in polymermembranen ablaufender reaktionen |
-
1988
- 1988-04-15 SU SU884403363A patent/SU1535892A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| KyjiMc Ю 4j Лигчли пиески, системы на ос ню е i-MMuf Hji поьанчых ферментов. ; ./и ю( . Moi ел с , I 31 , х,. 20, Авторе -.о г v« гпьство (,1СР 11 J, . f П 03, i982 v Cf ОСОС ПО С ОЬ МНЧТ ШХ 1ЕМ- bi ) /1 У obpe г м ие о иосггг К Ьиотех- ологм , j MI м о способам получе- ,(i i нрментнь м r-iopaii, к тоиь е м°гут ,.ч ь ИЗМОРМТРльнв1х приi o f i JB 41-Рме/ jl лектродов лп ofipr/i / -i-iri мс гаОсгтитоБ , физиоло- i мчсг и ti DKt |-цинен1.,и 1 ферментfb OL Р7i1 о г 1, i Ф i h т i | 1(-с. IT н тгит( к биип ех- 1 но f cnc-o6afj полуме- (i / ij.ibpaf , гсотооье мо- м , измерительных г JL ферме ITHLI элекг1 Я h f Т fee ЛИТОВ , 41 „ )() Г 1t 1 I If I 1)fj if Г ПЗГ UbJ; - -Ii f П f Гг с 11 -oe с л JF i M jl iK I 11 и PO, IH r оспинеиии и i .,п шение ка тс. d с (ет 1 о -1СрЯ°МИ,х ICO - ОЬ . i f Б св зькэании зой м .чРраной мой активности. Цель изобретени улучшение качества целевого продукта за счет расширени диапазона иэмер е- мьк концентрации субстратов фермен- rori. Способ получени ферментных м * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998023734A1 (de) * | 1996-11-26 | 1998-06-04 | Gkss-Forschungszentrum Geesthacht Gmbh | Polymermembran mit in der membran lokalisierten enzymen sowie verfahren zur herstellung von erzeugnissen mittels in polymermembranen ablaufender reaktionen |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU608875B2 (en) | Sensor of the enzyme electrode type for the determination of an analyte | |
| US6242207B1 (en) | Diagnostic compositions and devices utilizing same | |
| US4886740A (en) | Enzyme-electrode sensor with organosilane treated membrane | |
| US3814668A (en) | Method and device for the semi-quantitative determination of glucose in aqueous fluids | |
| US7888061B2 (en) | Method of stabilising or reactivating a creatinine sensor with a divalent manganese ion | |
| Mascini et al. | Amperometric acetylcholine and choline sensors with immobilized enzymes | |
| US4317879A (en) | Glucose analyzer membrane containing immobilized glucose oxidase | |
| US5118404A (en) | Enzyme electrode and a method of determining concentration of an analyte in a sample solution | |
| EP1282417B1 (de) | Creatinin-biosensor | |
| JPH0210902B2 (ru) | ||
| EP0142849A2 (en) | Multilayer chemical analytical element | |
| JP2005523726A (ja) | 体液中のクレアチニン濃度測定用テストストリップ、及び測定方法 | |
| JPH0453385B2 (ru) | ||
| JP2018535421A (ja) | 酵素センサ用の外層 | |
| WO1994002842A1 (en) | Analytical method for the detection and measurement of paracetamol | |
| EP0859954B1 (en) | Biosensors comprising a membrane | |
| JPH046907B2 (ru) | ||
| CA1096281A (en) | Calibrator composition based upon dialyzed blood serum | |
| SU1535892A1 (ru) | Способ получени ферментных мембран | |
| JPS61145447A (ja) | 固定化酵素膜 | |
| JPS60185153A (ja) | 固定化酵素膜 | |
| EP1889075B1 (en) | Method of stabilising or reactivating a creatinine sensor with a solution of a divalent manganese ion | |
| JPH068797B2 (ja) | 改良ナトリウムイオン選択性電極及びその使用方法 | |
| US6020052A (en) | Laminated membrane structure for polarographic measurement and methods of making said structures | |
| US4987075A (en) | Method of making an enzyme membrane for enzyme electrodes |