SU1508996A1

SU1508996A1 - Способ определени белка в листь х растений

Info

Publication number: SU1508996A1
Application number: SU874229496A
Authority: SU
Inventors: Владимир Георгиевич Шиманов; Людмила Егоровна Салиева; Сергей Юрьевич Кучинский
Original assignee: Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Каракулеводства
Priority date: 1987-03-09
Filing date: 1987-03-09
Publication date: 1989-09-23

Abstract

Изобретение относитс к биологическим исследовани м, а именно к определению белка в свежих листь х селектируемых растений, и может быть использовано в растениеводстве. Цель изобретени - повышение точности и сокращение времени определени . Навеску листьев измельчают, взвешивают и обрабатывают биуретовым реактивом, содержащим K, NA - винокислый при следующем соотношении компонентов, г/л: CUSO₄ 2-4, NAOH - 7-9, K, NA - винокислый 8-10, вода дистиллированна до 1 л. Полученный окрашенный центрифугат фотометрируют на синем светофильтре и определ ют содержание белка по формуле: X=D^.20, где X - содержание белка, % D - оптическа плотность раствора

20 - коэффициент перевода, в %. 2 табл.

Description

Изобретение относитс к биологическим исследовани м, а именно к определению белка в свежих листь х селектируемых растений, и может быть использовано в растениеводстве.

Цель изобретени - повышение точности и сокращение времени определени .

Предлагаемый способ осуществл ют следующим образом.

Приготавливают биуретовый реактив, дл чего в 0,2 н. (0,8%) растворе щелочи раствор ют 9 г К, Na винокисло- го и 3 г сернокислой кеди (CuSO) В 10 мл этого раствора растирают в ступке навеску пробы 0,1 г листьев до мазеобразного состо ни . Затем

эту смесь центрифугируют при 8000 об/мин в течение 1-2 мин. Полученный раствор зеленого цвета фотометрируют при синем светофильтре (длина волны 430± 10 нм). Процентное содержание белка в листь х рассчитывают по формуле

X D 20,

где D - показатель оптической плотности;

20 - коэффициент перевода в проценты .

Пример 1. Берут навеску 0,1 г листьев терескена, помещают в фарфоровую ступку, растирают с 10 мл биуретового реактива состава: 8 г К, Na винокислого и 2 г uSO

(У1

00

со о:

3150

и раствор ют в 0,175 н. (0,7%) растворе щелочи. Затем в течение 2 мин центрифугируют при 8000 об/мин и центрифугат фотометрируют на ФЭКгЗбМ в кювете 10 мл при синем светофильтре и получают показатель оптической плотности реакционной смеси, равньш 0,97. Подставл в формулу, получают содержание белка в листь х 19,4%.

Пример 2. Берут навеску 0,1 г пробы листьев терескена, помещают в фарфоровую ступку, растирают с 10 мл биуретового реактива состава 9 г K,Na винокислого и 3 г CuSO

и ра т вЬр ют в 0,2 н, (0,8%) растворе щелочи. Затем в течение 2 мин центрифугируют при 8000 об/мин и центрифугат фотометрируют на ФЭК-56М в кювете 10 мл при синем светофильт- ре и получают показатель оптической плотности реакционной смеси, равный 1,00, подставл в формулу, получают процентное содержание белка в листь х терескена 20%.

При максимальном количественном соотношении компонентов реактива процентное содержание белка больше 20%, что не соответствует действительности ,

В табл. 1 приведены сравнительные ДчУИные по содержанию белка в растени х аридной зоны, определенные по методу Кьельдал и предлагаемому способу.

Как видно из табл. 1, величина ошибки определени лежит в интервале 1-3%.

Процентное содержание белка стандартных растворов, определ емое по

представлено

предлагаемому способу,

в табл. 2.

По табл. 2, не провод математических расчетов, можно определ ть процентное содержание белка, зна оптическую плотность раствора. Например , дл терескена получают оптическую плотность, равную 1,00, после расчета получают 20% белка. Если найти в табл. 2 данную оптическую плотность, то ей соответствует 20% белка.

Предлагаемьш способ вл етс объективным способом определени содержани белка в листь х растений и на проведение анализа затрачиваетс 45-50 мин.

Claims

Сокращение времени определени достигаетс за счет отсутстви операций осветлени и фильтровани через фильтр с пористой пластинкой. Формула изобретейи

Способ определени белка в листь х растений, включающий измельчение пробы , ее взвешивание и обработку би- уретовым реактивом, центрифугирование и фотометрирование центрифугата, о т- личающийс тем, что, с целью повышени точности и сокращени времени определени , пробу обрабатывают водным раствором.биуретового реактива с добавкой К, Na винокислого, а полученный окрашенный центрифугат фотоколориметрйруют на синем светофильтре и определ ют содержание белка по формуле

X D 20, где X - содержание белка, %

D - оптическа плотность раствора-,

20 - коэффициент перевода, %.

Таблица 1

Камфоросма стандартна Саксаул черный Терескен Изень каменистый Чогон Камфоросма фаришска Камфоросма джам- бульска

0,0001

0,0002

0,0003

0,0004

0,0005

0,0006

0,0007

0,0008

0,0009

0,001

0,0011

0,0012

0,0013

0,0014

0,0015

0,0016

0,0017

0,0018

0,0019

0,002

0,0021

0,0022

0,0023

0,0024

0,0025

0,0026

0,0027

0,0028

0,0029

0,003

0,0031

0,0032

0,0033

0,0034

0,0035

0,0036

7,9

4,00

20,00

10,40

11,80

9,40

8,8

Таблица 2

0,2

0,4

0,6

0,8

1

1,2

1,4

1,6

1,8

2,0

2,2

2,4

2,6

2,8

3,0

3,2

3,4

3,6

3,8

4

4,2

4,4

4,6

4,8

5

5,2

5,4

5,6

5,8

6

6,2

6,4

6,6

6,8

7,0

7.2

15089968

Продолжение табл.2

150899610

Продолжение табл.2