SU1413531A1

SU1413531A1 - Способ определени повреждени нервной системы

Info

Publication number: SU1413531A1
Application number: SU853981406A
Authority: SU
Inventors: Нина Павловна Таранова; Ольга Семеновна Лучакова
Original assignee: Институт Физиологии Им.И.П.Павлова
Priority date: 1985-11-22
Filing date: 1985-11-22
Publication date: 1988-07-30

Abstract

Дл раннего вы влени повреждений олигодендроглиальных и миелиновых структур нервной ткани в сьшоротке крови и/или в спинномозговой жидкости определ ют аутоантитела к галакто- цереброзидам мозга. При повышении их титра относительно нормы дл данной возрастной группы диагностируют повреждение упом нутых структур нервной ткани.

Description

(Л

с

со ел

со

Изобретение относитс к медицине и экспериментальной биологии, в частности к иммунологическим методам диагностики, и может быть использовано в клинической практике и в экспериментальных исследовани х эаболеваНИИ , св занных с деструкцией глиаль- ных и миелинизированных структур . нервной системы.

Цель изобретени - раннее вы вление повреждений олигодендроглиальных и миелиновых структур нервной ткани.

Дл достижени поставленной цели определ ют в сыворотке крови и/или в спинномозговой жидкости аутоантите ла к галактоцереброзидам мозга (ГалЦ и в случае превьшени их титра относительно нормы дл данной возрастной группы, диагностируют повреждение олигодендроглиальных и миелиновых структур нервной ткани.

Способ осуществл ют следующим образом .

Дл определени аутоантител к ГалЦ мозга в РСК готов т серию двукратных разведений сыворотки крови больного, внос т по 0,02 мл каждого разведени сыворотки в лунки полистироловых панелей , добавл ют во все лунки по 0,02 мл липидной суспензии антигена (содержащей ГалЦ, фосфолипиды и холестерин в примерном соотношении 11 :40:35 мкг на мл суспензии) и по 0,02 мл комплемента (в подобранной дозе) и инкубируют панель 45 мин при 37 С дл того, чтобы произощло образование комплекса антиген - антитело и фиксаци комплемента на этом комплексе. Затем во все пробы добавл ют по 0,04 мл гемолитической системы (смесь суспензии бараньих эритроцитов с антисывороткой против них) и инкубируют при 3-5 мин дл того- , чтобы комплемент, оставшийс не- св занным с комплексом ГалЦ - антитела , фиксировалс на втором комплексе эритроциты - антиэритроцитарные антитела и вызвал гемолиз эритроцитов . Результатом реакции или титром аутоантител к ГалЦ считают то разведение исследуемой сьшоротки, при котором гемолиз достигает 80-100%.

В случае положительной реакции и вы влени антител в титрах, четырехкратно превышающих верхнюю границу нормы (верхн граница нормы дл детей - титр 1:4, дл взрослых - титр 1:2), диагностируют наличие повреж-

0

5

0

5 g

0

5

0

50

5

дени олигодендроглиальных и миелиновых структр нервной ткани. При постановке иммунологических реакций с сывороткой крови - РСК, реакции пассивной гемагглютинации и др. диагностически значимым прин то считать 4- кратноё возрастание титра.

Пример 1, Больной Х-ин О., 9 л,и 9 мес., диагноз: острый энцефалит , установленный на основании результатов обследовани общеприн тым способом ( клинико-анамнестическое обследование, цитологическое и биохимическое исследование ликвора, . электрофизиологические методы), обследован согласно предлагаемому способу диагностики в конце первой недели заболевани . В сьторотке крови обнаружены антитела к ГалЦ в титре 1:256, что не только подтверждает наличие деструктивных изменений в . мозге, но и указывает на вовлечение в патологический процесс клеточных структур олигодендроглиального происхождени .

П р и м е р 2, Больна Ф-ва Н., 12 л,и 10 мес., диагноз: острый энцефалит , установленный общеприн тым способом, обследована согласно предлагаемому способу диагностики на 5-й день заболевани . В сьторотке крови обнаружены аутоантитела к ГалЦ в низком титре 1:4, не превышающем верхнюю границу нормы. Этот результат указьтает на то, что на данном этапе заболевание протекает без повреждени олигодендроглиальных и миелинизированных сФруктур мозга.

П р и м е р 3. Больной С-ин,. 60 л., диагноз: т жела черепно-мозгова травма, установленный на основании результатов клинико-анамнести- ческого исследовани , обследован согласно предлагаемому способу диагностики на третий день заболевани . В сьюоротке крови обнаружены аутоантитела к ГалЦ в титре 1:32, что указывает на развитие деструктивных изменений клеточных структур олигодендроглиального происхождени в ткани мозга у этого больного.Пример 4. Больной Ш-ев, 76 л., диагноз: черепно-мозгова травма средней т жести, установленный общеприн тым способом, обследован согласно предлагаемому способу диагностики ,на третий день болезни. Аутоантитела к ГалЦ обнаружены в низком

титре 1:2, не превышающем норму. Это позвол ет заключить, что повреждени олигодендроглиальных и миелиновых структур в данном случае черепно-мозговой травмы места не имеют.

Приме р 5. Согласно предлагаемому способу обследован кролик из группы животных, отобранных дл иммунизации с целью получени моноспецифических антисывороток к определенным очшценным антигенам мозга. В сыворотке кролика обнаружены аутоанти- тела к ГалЦ в титре 1:16, что свидетельствовало о деструктивном процессе в мозге и послужило основанием дл его выбраковки. Гистологический анализ ткани мозга (окраска азур- эозином) подтвердил наличие патологического процесса в мозге.: в оболочках мозга, а также в сером и белом веществе были обнаружены вные воспалительные изменени . Это позвол ет заключить, что предлагаемый способ диагностики может быть использован в экспериментальной биологии и экспериментальной невропатологии как дл выбраковки животных, так и дл ни экспериментальных моделей различных поражений мозга. .

Испытание способа проведено при обследовании 34 здоровых лиц, 7 больных с инфекционным заболеванием, не затрагивающим нервнута систему, и 68 больных с инфекционньми, воспали- тельными и травматическими поражени ми ЦНС и пне. Результаты теоретической и экспериментальной проверки предлагаемого способа, а также анализ примеров его конкретного выполнени свидетельствуют о том, что предлагаемый способ обладает высокой специфичностью по отношению к нервной ткани, так как основан на вы влении аутоан- тител к ГалЦ, локализованным исключительно ив нервной ткани и вл ющимс специфическими антигенньми маркерами клеточных структур олигодендро- глиального происхождени . Специфичность способа подтверждаетс отсутствием антител к ГалЦ у больных без поражени нервной системы, а также об зательным вы влением высоких титров против ГалЦ антител в случа х заведомо острых деструктивных поражений нервной ткани.

Применение предлагаемого способа дает возможность диагностировать как в ЦНС, так и в пне наличие ранних

0 5 0

с

0

5

0

5

тонких деструктивных изменений в нервной ткани, не вы вл емых другими методами, а также диагностировать деструктивные изменени в определенных клеточных структурах нервной ткани, а именно в олигодендроцитах и миелиновых оболочках, за счет высокой специфичности способа.

Предлагаемый способ дает объективный лабораторньй тест дл повыщени точности диагноза у р да неврологических больных (дифференциальна диагностика менингитов и минингознцефа- литов; определение степени т жести черепно-мозговых травм, наличие или отсутствие периаксональной демиелини- зации при поражени х ПНС и пр.), а также дл уточнени патогенеза заболевани у данного больного, а своевременна постановка правильного диагноза позвол ет обеспечить выбор патогенетически обоснованной терапии.

Кроме того, предлагаемый способ дает возможность на основании специфического лабораторного теста выбра- ковьшать экспериментальных животных с бессимптомнь1ми поражени ми мозга при отборе здоровых животных дл получени моноспецифических антисьшоро- ток, а также дл диагностики повреждени клеточных структур нервной ткани при изучении различных экспериментальных моделей различных поражений ЦНС.

Способ характеризуетс простотой исполнени и может быть использован в любом стационаре, имеющем лабораторию , располагающую техникой постановки иммунологических реакций. Осуществление способа не требует специального оборудовани , за исключением обычно примен ющегос дл серологической диагностики, и он-может быть проведен средним медицинским персоналом , имеющим квалификацию лаборанта. Способ не травматичен, так как требует дл анализа лищь небольщие количества Сдо 0,3 мл) сыворотки крови или ликвора. Применение способа рекомендуетс дл дифференциальной диагностики функциональных нарушений и органических поражений нервной системы при инфекционно-воспалительных,. дегенеративных демиелинизирующих про- цессах, токсических и травматических поражени х мозга, нарушени х кровоснабжени мозга и других неврологических заболевани х дл раннего вы5U1353I6

влени деструктивных изменений в что, с целью раннего вы влени пов- клеточных структурах нервной ткани. реждений олигодендроглиальных и миелиновых структур нервной ткани, в исследуемой крови и ликворе определ ют антитела к галактоцереброзидам и при повышении их титра по сравнению с нормой определ ют повреждение нервФормула изобретени

Способ определени повреждени нервной системы путем исследовани крови, отличающийс тем.

ной системы.

Claims

Формула изобретения

Способ определения повреждения нервной системы путем исследования крови, отличающийс я тем, что, с целью раннего выявления повреждений олигодендроглиальных и миелиновых структур нервной ткани, в ис· ₅ следуемой крови и ликворе определяют антитела к галактоцереброзидам и при повышении их титра по сравнению с нормой·· определяют повреждение нервной системы.