SU1265614A1 - Способ определени активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах - Google Patents
Способ определени активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах Download PDFInfo
- Publication number
- SU1265614A1 SU1265614A1 SU843700258A SU3700258A SU1265614A1 SU 1265614 A1 SU1265614 A1 SU 1265614A1 SU 843700258 A SU843700258 A SU 843700258A SU 3700258 A SU3700258 A SU 3700258A SU 1265614 A1 SU1265614 A1 SU 1265614A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- activity
- granules
- glucose
- erythrocytes
- enzyme
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
НзоВретение относитс к медицине , а именно к гематологии, и может быть применено дл диагностики гемолитических анемий и оценки метаболизма эритроцитов. Цель изобретени повышение точности способа. У пациента берут кровь, смешивают с инкубационной средой, содержащей дополнительно хлористый магнш, гепарин, метиленовую синь. Инкубир пот смесь при 37°С. 30 мин. Затем делают мазок, высушивают и микроскопируют (окул р х10; объектив х90). При этом подсчитывают общее количество гранул формазана в 200 эритроцитах. Определ ют среднее содержание гранул в одном эритроците, что и вл етс показатеi л ми активности фермента. При сред (Л ней концентрации гранул 3-5 констатируют сниженную, 7-9 - нормальную, 10-14 - повышенную активность фермента . 1 табл.
Description
Изобретение относитс к области медицины, а именно к гематологии, и может быть использовано клинико-диаг ностическими и научно-исследовательскими лаборатори ми дл диагностики ; гемолитических с анемий и оценки метаболизма эритроцитов. Цель изобретени - повьтение точности способа за счет исключени ин гибировани фермента фиксацией и до бавленип в инкубационную среду дополнительно хлористого магни , гепа рина и метиленовой сини, проведени инкубации непосредственно с пробой крови, приготовлени мазков и подсчета в них .среднего числа гранул формазана в одном эритроците. Способ осуществл ют следующим . образом. Из пальца пациента берут 0,05 мкл .крови и смешивают с 0,1 мкл инкубаци онной среды в центрифужной пробирке, котора предварительно нагрета до Состав инкубационной среды приведен , в таблице. Кровь инкубируют в термостате при в течение 30 мин, предварительно тщательно и осторожно перешав с инкубационной средой.-По истечении срока инкубации делают мазок, высушивают и микроскопируют (Окул р X 10 объектив X 90). При микроскопии мазков подсчитывают общее количество гранул формазана в 200 эритроцитах и определ ют среднее содержание гранул в одном эритроците, что и вл етс показателем активности фермента . Разработаны критерии дл оценки активности Г-6-ФДГ при использовании предлагаемого способа: при средней концентрации гранул от 3 до 5 констатируют сниженную, от 7 до 9 нормальную , от 10 до 14 - повышенную активность фермента. II р и м е р 1 . Больной М., 32 го . да, поступил с диагнозом: остра лекарственна гемолитическа анеми . С 15-летного возраста страдает приступами острого гемолиза, св занными с приемами анальгина. Антибиотики гемолитических кризов не дают. Анализ крови: гемоглобилин 73,0 г эритроцнтЕ 2250000, ц.п. 0,95; ретикулоциты (45 тыс./мкл). Содержапие непр ;.юго билирубина в сыво 142 ротке крови 45 мкмоль/л. Реакци Кумбса отрицательна . Дл вы снени причины гемолиза эритроцитов проведено определение активности Г-6-ФДГ по предлагаемому способу. У обследуемого больного общее количество гранул в 200 эритроцитах составило 631. Следовательно, активность Г-6-ФДГ составл ет 3,15, что свидетельствует о низком уровне активности фермента, обусловившем острый гемолиз эритроцитов после приема анальгетиков. П р и м е р 2. Больна Р. 40 лет, поступила с диагнозом: гемолитическа анеми . Анализ крови: гемоглобин 50 г/л; эритроциты 1600000; ц.п. 0,9; ретикулоциты 1,2% (19,2 тыс/мкл). В миелограмме содержание эритроидных клеток 45%. Содержание непр мого билирубина в сыворотке крови составл ет 14 мкмоль/л, пр мого нет. С целью исключени гемолитической анемии, обусловленной недостаточной активностью глюкозо-б-фосфатде гидрогеназы эритроцитов, проведено определение активности данного фермента по предлагаемому способу. У обследуемой больной общее количество гранул в 200 эритроцитах составило 1566. Таким образом, активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы составл ет 7,83, что соответствует нормальному уровню и позвол ет иск .гаочить дефицит фермента как причину гемолиза эритроцитов. П р И М е р 3. Больной Б. 35 лет, поступил с диагнозом: гемолитическа анеми . Анализ крови: гемоглобин 87 г/л; эритроциты 2900000; ц.п. 0,9; ретикулоциты 20% (580 тыс/мкл). Содержание непр мого билирубина в сыворотке крови 37 мкмоль/л, реакци Кумбса отрицательна . В мазке крови выражен микроцитоз. Осмотическа резистентность эритроцитов снижена. При объективном исследовании больного обнаружено увеличение селезенки. При .определении активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы по предлагаемому способу обнаружены высокие показатели: 12,8, что позвол ет исключить энзимопенический вариант гемолитической анемии и подтверждает диагноз:
наследственна микрофероцитарна гемолитическа анеми ,
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ определени активности гл1окозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах путем исследовани ее цитохимическим методом с использованием инкубационной среда, содержащей пнитротетразолий фиолетовый, трис-буфер рН 8,0, глюкозо-6-фосфатдинатриевую соль и НАДФ при физиологичесКоличество вещества, растворенного в 10 мл физиологического раствора, мгГлюкозо-6-фосфатдинатриева сольНАДФ MgCl п-Нитротетразолий фиоких услови х, отличающи йс тем, что, с целью повьппени точности за счет исключени ингибировани фермента фиксацией, инкубационна среда дополнительно содержит хлористый магний, гепарин и метиленовую синь, а инкубацию провод т непосредственно с пробой крови , далее готов т мазки и определ ют число гранул образовавшегос форма- зана в одном эритроците и по средней величине этого показател определ ют активность фермента.Количество раствора, используемого на одно исследование,мкл0,01 0,01 0,01
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU843700258A SU1265614A1 (ru) | 1984-02-10 | 1984-02-10 | Способ определени активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU843700258A SU1265614A1 (ru) | 1984-02-10 | 1984-02-10 | Способ определени активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1265614A1 true SU1265614A1 (ru) | 1986-10-23 |
Family
ID=21103345
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU843700258A SU1265614A1 (ru) | 1984-02-10 | 1984-02-10 | Способ определени активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1265614A1 (ru) |
-
1984
- 1984-02-10 SU SU843700258A patent/SU1265614A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Нарциссов Р.П. Дегидрогеназы с примене.чием п-нитротетразоли фиолетового. /В кн.; Н.С.Кисл к, Р,В.Ленска . Клетки крови у детей в норме и патоло гии. - М.: Медицина, 1978, с. 149. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Burch et al. | Improved method for measurement of delta-aminolevulinic acid dehydratase activity of human erythrocytes | |
Kusumi et al. | Rapid detection of pyuria by leukocyte esterase activity | |
CA1117401A (en) | Multi-purpose blood diluent for use in electronic blood analysis instrumentation | |
Peele Jr et al. | Semi-automated vs. visual reading of urinalysis dipsticks. | |
Lang et al. | Rapid Differentiation of Subarachnoid Hemorrhage from Traumatic Lumbar Puncture Using the D-Dimer/Assay | |
Stewart | Evaluation of a reagent-strip method for glucose in whole blood, as compared with a hexokinase method. | |
CA1089338A (en) | Creatinine assay and reagent system | |
SU1265614A1 (ru) | Способ определени активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах | |
US3536448A (en) | Uric acid detection | |
Li et al. | Improved method for determining erythrocyte creatine by the diacetyl-alpha-naphthol reaction: elimination of endogenous glutathione interference. | |
Moore et al. | Do urine dipsticks reliably predict microhematuria? The bloody truth! | |
Ludvigsen et al. | Kinetic enzymic assay for D (-)-lactate, with use of a centrifugal analyzer. | |
Grinstead et al. | The Ames Clinitek 200/Multistix 9 urinalysis method compared with manual and microscopic methods. | |
Delahunty et al. | Automated creatine kinase-MB estimation by immuno-inhibition: a clinical evaluation. | |
Peake et al. | Mechanism of platelet interference with measurement of lactate dehydrogenase activity in plasma. | |
JP3713901B2 (ja) | 破骨細胞由来酸性ホスファターゼの測定方法 | |
Devgun | Delay in centrifugation and measurement of serum constituents in normal subjects | |
Winsten et al. | Evaluation of a New System for the Kinetic Measurement of Serum Glutamic Oxalacetic Transaminase: An Interlaboratory Study | |
James et al. | Glucosuria: accuracy and precision of laboratory diagnosis by dip stick analysis. | |
SU1469464A1 (ru) | Способ определени резистентности эритроцитов | |
RU2018836C1 (ru) | Способ депротеинизации цельной капиллярной крови при ферментативном определении глюкозы | |
SU1596248A1 (ru) | Способ диагностики уросепсиса | |
SU1406486A1 (ru) | Способ определени активности воспалительного процесса в легких | |
SU1522106A1 (ru) | Способ определени железодефицитного состо ни | |
Saifer et al. | The photometric determination of sugar in biological fluids by ferricyanide reduction |