SU1143411A1 - Способ диагностики хронического пиелонефрита - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ПИЕЛОНЕФРИТА путем вы влени  возбудител  заболевани  с помощью реагента на предметном стекле, о тличающийс  тем, что, с целью повьнпени  чувствительности и специфичности диагностики, в качестве реагента используют суспензию инактивированных стафилококков штамма Cowan I, а возбудитель вы вл ют по наличию их коагглютинации.

Description

о

fi

:о Изобретение относитс  к медицине преимущественно к способам лаборатор ной диагностики заболеваний. Известен способ диагностики хрони ческого пиелонефрита путем вы влени  возбудител  заболевани  с помощью реагента напредметном стекле Щ. Однако известньш способ характеризуетс  недостаточной чувствительностью и специфичностью, а также ело жен при выполнении. Целью изобретени   вл етс  повышение чувствительности и специфичности диагностики. Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу диагностики хро нического пиелонефрита путем вы влени  возбудител  заболевани  с помощью реагента на предметном стекле в качестве реагента используют сус пензию инактивированных стафилококков штамма Cowan I, а возбудител  вы в1{ ют ПО наличию их коагглютинации . Способ осуществл етс  следующим образом. Дл  получени  3-7%-ной диагностической суспензии инактивированных стафилококков штамма Cowan I делают смыв микробов из 3-4 пробирок со ско шепным агаром, промывают их на центрифуге при 3000 об/мин в течение 30 мин и ресуспендируют по объему осадка с последующим добавлением мер тиол та в концентрации 1:1000 1:10000 . 3-8 мл свежей исследуемой мочи центрифугируют в течение 20-40 мин при скорости 1500 - 3000 об/мин. Мик робный осадок отмывают 2-4 раза физраствором и ресуспендируют отмытые микробы мочи в физрастворе до конце рации 3 - 15 ед. мутности. На предметном стекле смешивают по капле обоих препаратов и учитыва ют агглютинацию, по наличию которой в течение 2-3 мин определ ют характерные дл  хронического пиелонефрит фиксированные на бактери х антитела Пример. Йнактивированную культуру стафилококков штамма Cowan I получают путем смыва микробов из 4 пробирок со скошенным агаром, промыва  их на центрифуге при 3000 об/мин в течение 30 мин и ресу пендировани  по объему осадка, чтобы получить 5%-ную суспензию, к которо добавл ют мертиол т до концентрации 1:10000. Свежую мочу больных с бактериурией (100 тыс. и вьппе бактерий в 1 мл) в количестве 6 мл центрифугируют при 3000 об/мин 20 мин. Надосадок сливают , а микробный осадок двукратно промывают физраствором на центрифуге и ресуспендируют в физрастворе, чтобы получить суспензию с мутностью 5-10 ед. Каплю полученной суспензии микробов нанос т на предметное стекло и затем добавл ют каплю диагностического препарата стафилококков Cowan I. Быстро наступающа  агглютинаци  указывает на наличие антител, фиксированных на поверхности бактерий возбудителей пиелонефрита. Специфичность результатов устанавливаетс  по отсутствию агглютинации кип ченой (в течение 2-3 мин дл  раз- рушени  антител) суспензии микробов мочи. При бактериурии, происход щей из нижнего отдела мочевьзделительной системы (воспаление мочеточников мочевого пузыр , уретры, простаты), выдел емые бактерии не покрыты антителами . I Предлагаемый метод изучен одновременно с методом иммунофлюоресценции при обследовании 68 больных хроническим пиелонефритом и 42 больньк с заболевани ми мочевого пузыр  и простаты. Методом коагглютинации вы вили бактерии, покрытые антителами , у 64 из 68 больных хроническим пиелонефритом или в 94,1±4,03% случаев , а методом иммунофлюоресценции положительные результаты получены только у 52 (76,5±6,54%) больньгх;. Кроме того, последним методом получены положительные результаты у 14,,40% больных без хронического пиелонефрита. Недостаточна  чувствительность иммунофлюоресценции св зана с разрушением бактериальных клеток в организме больного на мелкие фрагменты, слабосвет щиес  и трудноотличимые от неспецифического фона в флюоресцентном препарате. Вместе с тем указанные микробные осколки, несущие на своей поверхности антитела, вполне могут взаимодействовать с бел .ком А стафилококка и способствовать коагглютинации корпускул диагностикума .

3114

Неспецифические результаты непр  мой иммунофлюоресценции у больных с уроинфекци ми, локализованными в нижнем отделе мочевьщелительной системы, св заны с тем, что флюоресцирующа  антиглобулинова  сыворотка реагирует со всеми.иммуноглобулинами человека, прикрепившимис  к поверхности бактерий, не только по типу реакции антиген - антитело, но и в результате неспециф ической физикохимической адсорбции. Кроме того, в оболочке некоторых бактерий имеютс  белок А-подобные вещества, также .способные к неспецифическому св зы- ванию иммуноглобулинов в том числе и флюоресцирующих. Таким образом, при вы влении в люминесцентном микроскопе кокков даже с ободочным свечением нельз  быть уверенным в том, что наблюдаютс  антитела, покрывающие возбудителей пиелонефрита, а не неспеци14

фическую адсорбциюь флюоресцирующих глобулинов этими бактери ми. В то же врем  наличие белок А-содержащих стафилококков в исследуемой пробе мочи не оказывает вли ни  на специфичность способа коагглютинации, поскольку такие микробы могут лишь участвовать в реакции вместе с аналогичными клетками Диагностического препарата .

Предлагаемый, способ более экономичен , т.е. 1 МП стафилококкового диагностикума оцениваетс  в 0,03 коп, а 1 мл флюоресцирующей сыворотки к глобулинам человека - 3 руб. Кроме того, не требуетс  люминесцентного микроскопа (МЛ-2 - 1200 руб. или ЛЮМАМ-Р2 - 5000 руб), а также специалиста по люминесцентной микроскопии. Пгэдлагаемый способ более быстрый, т.е. врем  анализа 40 мин, а при использовании иммуноЧпюоресценции 1 ч.

Claims (1)

1. СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКОГО ПИЕЛОНЕФРИТА путем выявления возбудителя заболевания с помощью реагента на предметном стекле, о тличающийся тем, что, с целью повьнпения чувствительности и специфичности диагностики, в качестве реагента используют суспензию инактивированных стафилококков штамма Cowan I, а возбудитель выявляют по наличию их коагглютинации.