SK8295A3

SK8295A3 - N/exp_g/-monomethyl-l-arginine hydrochloride derivatives and their use in the treatment of septic shock

Info

Publication number: SK8295A3
Application number: SK82-95A
Authority: SK
Inventors: Harold F Hodson
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1992-07-24
Filing date: 1993-07-23
Publication date: 1995-07-11
Also published as: AU4715793A; CA2140852A1; DE69307894D1; CN1087624A; AU669557B2; ATE148451T1; IL106463A0; GB9215816D0; GR3022773T3; RU95105249A; NO302360B1; PL307238A1; NO950248L; CZ8095A3; WO1994002453A1; IL106463A; HU210876A9; NZ254865A; EP0651741A1; NO950248D0

Description

Deriváty hydrochloridu N^G-monometyl-L-arginínu a ich použitie pri ošetrovaní septického šoku

Oblasť: techniky

Tento vynález sa týka nových kryštalických solí (S)-N⁵-/imino(metylamino)metyl/ornitínu, farmaceutických prostriedkov, ktoré obsahujú takéto soli a ich použitia v medicíne, predovšetkým pri ošetrovaní a/alebo profylaxii septického šoku, najmä hypotenzie s ním spojenej.

Doterajší stav techniky

Medzinárodná patentová prihláška W091/04024 (US patent č. 5 028 627) popisuje použitie N^G-substituovaného arginínu alebo C c

N ,N -d.i.substituovaného arginmu na ošetrovanie hypotenzie. Táto patentová prihláška predovšetkým

N^G-monometyl-L-arginínu (ktorý je (S)-rr’-Zimino(metylamino)mety 1/ornitín čiže proti produkcii oxidu dusnatého pri a septického šoku. Oxid dusnatý je a cytotoxický prostriedok, ktorý sa bežne popisuje použitie tiež známy ako L-NMMA) na pôsobenie vyvolaní hypotenzie silný vazodilatátor produkuje v endotele ako endogénny regulátor cievneho tonusu a v makrofagoch ako časť hostiteľovho obranného mechanizmu.

Nevhodné zvýšenie syntézy oxidu dusnatého vedie k zveličeniu tohoto kroku, čo spôsobuje trvalú a výraznú vazodilatáciu, smerujúcu k hypofúzii rôznych vitálnych organizmov. Okrem toho podstatné zvýšenie pri syntéze oxidu dusnatého v rade buniek vedie k cytotoxicite a priamemu poškodeniu tkaniva, predovšetkým vaskulárneho endotelu.

Kilbourn a kol. (Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 87 , 3'629 /1990/) popisuje reakciu flavianátovej soli L-NMMA s Dowexom 1(OH“) a trituráciu výslednej volnej bázy L-NMMA na hodnotu pH 7,2 kyselinou chlorovodíkovou. Hydrochlorid sa neizoluje z roztoku.

Podstata vynálezu

Pôvodca tohoto vynálezu zistil, že hydrochlorid L-NMMA sa môže získať ako čistá soľ, napr. v kryštalickej forme, ktorá má značné fyzikálne výhody, napr. vzhladom na stabilitu. Počiatočné pokusy pripraviť; hydrochlorid v kryštalickej forme viedli k amorfnej látke charakteru skla, ktorá sa nedala kryštalizovať:. Kryštály hydrochloridu sa nečakane získali, pokiaľ sa amorfná látka charakteru skla ponechala za prítomnosti etanolu niekoľko mesiacov.

Preto tento vynález poskytuje hydrochloridovú soľ (S)-N⁵-/imino(metylamino)met.yl/ornitínu ako v podstate čistú soľ, napr. v tuhej forme a predovšetkým v kryštalickej forme. Táto hydrochloridová soľ L-NMMA je bezvodá a nie je hygroskopická.

S výhodou je soľ aspoň 70 %, predovšetkým s výhodou má aspoň 90 % čistotu a najvýhodnejšie má čistotu väčšiu ako 95 %.

Soľ sa vyskytuje prinajmenšom v troch odlišných izomorfných formách (A, B a C), ako sa zistilo difrakčnou analýzou rôntgenovým žiarením a diferenciálnou skenovacou kalorimetriou (DSC), a tento vynález zamýšľa zahrnúť každú izomorfnú formu jednotlivo alebo zmes dvoch alebo väčšieho počtu izomorfných foriem.

Hygroskopické vlhkosti, zatiaľ štúdie ukazujú, že forma A vlhne pri 65 % čo forma B je značne menej hygroskopická.

Diferenciálna skanovacia kalorimetria ukazuje, že forma A je viac termodynamicky stabilná. Diferenciálna skenovacia kalorimetria sa tiež používa na stanovenie teploty topenia formy A a B, ktoré zodpovedajú 219 °C a približne 205 °C.

Tento vynález tiež poskytuje spôsob výroby kryštalického hydrochloridu L-NMMA, kde spôsob spočíva v tom, že sa L-NMMA nechá reagovať s kyselinou chlorovodíkovou a hydrochlorid sa nechá vykryštalizovať. Výhodný molárny pomer L-NMMA ku kyseline je od 1:1 do 1:5 a predovšetkým približne 1:1. Reakcia sa účelne uskutočňuje rozpúšťaním L-NMMA v roztoku kyseliny chlorovodíkovej (s výhodou na 0,5 až 5 molárny roztok a zvyčajne 2 molárny roztok), pri teplote, ktorá nie je nezvyčajná pri teplote od 10 do 80 °C a bežne pri teplote miestnosti. Výsledný roztok sa s výhodou odparuje (napr. pri zvýšenej teplote, t.z. od 35 do 60 °C, pri zníženom tlaku). Odparok sa potom kryštalizuje z vhodného rozpúšťadla, napr. rozpúšťaním odparku v minimálnom množstve horúceho etanolu, zvyčajne pri teplote varu a vody. Nedávno sa zistilo, že naočkovanie roztoku obsahujúceho hydrochloridovú soľ L-NMMA napomáha k jej kryštalizácii. Bez naočkovania kryštalizačný proces môže trvať niekoľko mesiacov.

Tento vynález ďalej L-NMMA, ktorý spočíva v odlišná od hydrochloridu sa ión tvoriaci pôvodnú rozpustením acetátovej chlorovodíkovej 0,5 koncentrácii. Roztok sa potom odparí (napr. t.z. od 3 0 do 7 0 tlaku). Odparok sa vodnom etanole a poskytuje tom, že sa s kyselinou soľ.

soli až 5 spôsob výroby hydrochloridu nechá reagovať soľ L-NMMA chlorovodíkovou a odstráni

Zvyčajne sa

L-NMMA vo molárnej, reakcia uskutočňuje vodnej bežne 2 pri zvýšenej °C, zvyčajne pri teplote 60 °C, pri nato rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle, roztok sa ochladí.

kyselin.e molárnej teplote, zníženom naočkuje kryštálmi kryštál napr. vo Studený roztok sa opäť hydrochloridovej soli L-NMMA, aby sa napomohlo začnému procesu.

Aj keď je možné podávať hydrochlorid L-NMMA ako surovú chemickú zlúčeninu, je výhodné predkladať ju ako farmaceutický prostriedok. Podľa ďalšieho znaku tento vynález poskytuje farmaceutický prostriedok obsahujúci hydrochlorid L-NMMA (ďalej označovaný tiež ako účinná látka) spolu s jedným alebo väčším počtom jeho farmäceuticky prijateľných nosných látok a prípadne jednou alebo väčším počtom terapeutických zložiek. Nosná látka alebo nosné látky musia byť prijateľné vtom zmysle, že sú znášanlivé s inými zložkami prostriedku a nemajú zhubný vplyv na svojho príjemcu.

Medzi prostriedky podlá tohoto vynálezu sa zahŕňajú také prostriedky, ktorú sú vhodné na orálne, parenterálne (vrátane subkutánneho, intradermáIného, intramuskulárneho, intravenózneho a .intraartikulárneho) , rektálne a lokálne (vrátane dermálneho, bukálneho, subliguálneho a intraokulárneho) podanie, aj keď najvýhodnejšia cesta môže závisieť napr. od stavu a ochorenia príjemcu. Prostriedky môžu byť zvyčajne prítomné vo forme jednotkovej dávky a môžu sa vyrábať lubovolnými spôsobmi, ktoré sú dobre známe v obore farmácie. Všetky takéto spôsoby zahŕňajú stupeň uvedenia do styku účinnej látky s nosnou látkou, ktorá pozostáva z jedného alebo väčšieho počtu prídavných zložiek. Zo všeobecného hladiska sa prostriedky môžu vyrábať rovnomerným a dôkladným uvedením do styku účinnej látky s kvapalnými nosnými látkami alebo jemne rozdrvenými pevnými nosnými látkami, prípadne s obidvoma týmito typmi nosných látok a potom, ak je potrebné, tvarovaním produktu na požadovaný prostriedok.

Prostriedky podlá tohoto vynálezu, vhodné na orálne podanie, môžu byť prítomné ako oddelené jednotky, ako napr. kapsule, kašety alebo tablety, z ktorých každá obsahuje vopred stanovené množstvo účinnej látky, ako prášky alebo granule, ako roztoky alebo suspenzie vo vodnej alebo nevodnej kvapaline alebo ako kvapalné emulzie typu olej vo vode alebo voda v oleji. Účinná látka môže byť tiež prítomná vo forme bolusu alebo pasty.

Tablety sa môžu zhotovovať lisovaním alebo odlievaním, prípadne s jednou alebo väčším počtom prídavných zložiek. Lisované tablety sa môžu vyrábať vo vhodnom prístroji lisovaním účinnej látky vo volne tečúcej forme, ako v prášku alebo granuliach, ktorá je prípadne zmiešaná so spojivom, kĺzavou látkou, inertným riedidlom, mastivom, povrchovo aktívnou látkou alebo činidlom napomáhajúcim dispergovanie. Odlievané tablety sa môžu vyrábať na vhodnom stroji odlievaním zmesi práškových účinných látok, zvlhčených inertným kvapalným riedidlom. Tablety sa môžu prípadne poťahovať alebo opatriť zárezom a môžu sa pripravovať tak, aby sa dosiahlo pomalé alebo riadené uvolňovanie účinnej látky v nich obsiahnutej.

Prostriedky vhodné na parenterálne podávanie zahŕňajú vodné a nevodné sterilné injekčné roztoky, ktoré môžu napr. obsahovať antioxidačné činidlá, tlmivé roztoky, bakteriostatické prípravky a rozpustené látky, pomocou ktorých sa dosahuje izotonický stav s krvou zamýšľaného príjemcu a vodné a nevodné sterilné suspenzie, ktoré môžu obsahovať napr. suspendačné činidlá a zahusťovadlá. Prostriedky môžu byť prítomné v zásobníkoch pre jedinú dávku alebo pre väčší počet dávok, napr. v uzavretých ampuliach alebo v liekovkách a môžu sa skladovať za lyofilných podmienok (dosiahnutých vymrazovaním), pričom sa bezprostredne pred použitím vyžaduje iba prídavok sterilnej kvapalnej nosnej látky, napr. vody pre injekcie. Extemporálne injekčné roztoky a suspenzie sa môžu pripravovať zo sterilných práškov, granúl a tabliet druhov, ktorú sú popísané vyššie.

Prostriedky na rektálne podávanie môžu byť prítomné ako čipky, ktoré obsahujú zvyčajné nosné látky, ako kakaové maslo alebo polyetylénglykol.

Prostriedky vhodné na lokálne podanie do úst, napr. na podanie bukálne alebo sublinguálne, zahŕňajú kapsule obsahujúce účinnú látku vo vhodnom ochutenom základe, založenom na sacharóze a akácii alebo tragante, pastilky, ktoré obsahujú účinnú látku v základe, akým je želatína a glycerín alebo sacharóza a akácia.

S výhodou sa sol bude podávať vo forme vodného roztoku pufrovaného na svoju vlastnú hodnotu pKa.

Výhodné prostriedky tvorené dávkovou jednotkou sú prostriedky, ktoré obsahujú účinnú látku v účinnom mnbžstve, zodpovedajúcom dávke popísanej ďalej alebo jej príslušnému dielu.

Je potrebné vedieť, že okrem zložiek predovšetkým uvedených vyššie, prostriedky podlá tohoto vynálezu môžu zahŕňať tiež iné látky obvyklé v obore vzhladom na typ príslušného prostriedku. Nap». prostriedky vhodné na orálne podanie môžu zahŕňať ochuťovadlá.

Zlúčeniny podlá tohoto vynálezu sa môžu zvyčajne podávať orálne alebo injekčnou cestou v dávke, ktorá je v rozsahu od 1 do 100 mg na kilogram telesnej hmotnosti príjemcu za deň, s výhodou v rozsahu od 3 do 50 mg/kg za deň. Dávky nad 3 mg/kg za deň sa môžu podávať v rade menších dávok počas predĺženého časového obdobia, t.z. infúziou počas niekolkých hodín. Rozsah dávok pre dospelého človeka je všeobecne v rozsahu od 70 mg do 7 g za deň, s výhodou v rozsahu od 200 mg do 3,5 g za deň. Tablety alebo iné formy na podávanie v oddelených jednotkách môžu zvyčajne obsahovať množstvo zlúčeniny podlá tohoto vynálezu, ktoré je účinné v takejto dávke alebo tvorí násobok takejto dávky, napr. v jednotkách,·ktoré obsahujú od 70 do 500 mg, zvyčajne okolo 100 a ž 3 0 0 mg.

Zlúčeniny podlá tohoto vynálezu sa najvýhodnejšie podávajú orálne alebo injekciou (intravenózne alebo subkutánne). Presné množstvo zlúčeniny podávané pacientovi bude závisieť od rozhodnutia ošetrujúceho lekára. Použitá dávka však bude závislá na rade okolností, vrátane veku a pohlavia pacienta, presnom ochorení, ktoré sa ošetruje a na ťažkosti ochorenia. Tiež cesta podania sa môže meniť podlá stavu ochorenia a jeho ťažkosti.

p _f

Ako uz bolo uvedene, hydrochlorid N -monometyl-L-argininu sa môže používať na ošetrovanie Preto ďalší znak tohoto r· ,

N -monometyl-L-argimnu na a/alebo profylaxiu septického šoku, vynálezu sa týka hydrochloridu použitie pri výrobe liečiva na ošetrovanie a/alebo profylaxiu septického šoku. Ešte ďalší znak tohoto vynálezu poskytuje spôsob ošetrovania a/alebo profylaxie septického šoku, ktorý spočíva v tom, že sa podáva terapeuticky účinné množstvo hydrochloridu N^G-monometyl-L-arginínu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Vynález bude teraz popísaný vo forme príkladov.

Príklad 1

Spôsob výroby hydrochloridu (S)-N⁵-/imino(metylamino)metyl/ornitínu (hydrochloridu L-NMMA)

Zmes 16,86 g (100 mmol) hydrochloridu ornitínu, 34,8 g (150 mmol) N,S-dimetyltiouroniumjodidu a 100 ml 2-molárneho vodného roztoku hydroxidu sodného sa mieša pri teplote 100 °C počas 5 hodín. Roztok sa potom ochladí, upraví na hodnotu pH 3 pomocou 2-molárnej vodnej kyseliny chlorovodíkovej a vnesie sa na stĺpec živice Dowex 50W-X8 (H⁺) (vlhké lôžko s objemom 200 ml). Stĺpec sa premýva vodou až sa získa neutrálny eluát a potom sa eluuje 0,5-molárnym vodným roztokom hydroxidu amónneho. Frakcie s objemom približne 15 ml sa odoberajú a sledujú chromátografiou na tenkej vrstve na silikagele s vizualizáciou ninydrínom. Frakcie 26 až 45 sa spoja a odparia pri teplote 45 °C pri zníženom tlaku. Získa sa 9,5 g bezfarebnej živice, ktorá sa rozpustí v 2-molárnej vodnej kyseline chlorovodívej a výsledný roztok sa odparí pri teplote 50 °C pri zníženom tlaku. Amorfný odparok sa spracuje so 108 ml horúceho etanolu a zmes sa intenzívne mieša, pri teplote varu, a pritom sa prikvapkávaním pridajú 4 ml vody. Zvyšok sa postupne rozpustí a vzniknutý roztok sa naočkuje niekoľkými kryštálmi hydrochloridovej soli, aby sa začala kryštalizácia. Zmes sa ochladí a potom uloží pri teplote 4 °C na dobu 2 hodín na dokončenie kryštalizácie. Vzniknutá látka sa odfiltruje, premyje etanolom a suší vo vákuovom exsikátore, aby s’a získalo 9,6 g hydrochloridu L-NMMA ako bezvodej bezfarebnej kryštalickej tuhej látky, ktorá je homogénna podlá chromátografie na tenkej vrstve a vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie a podía NMR spektrálnej analýzy a hmotnostného spektra je v súlade s navrhnutou štruktúrou.

«

Príklad 2

Spôsob výroby hydrochloridu L-NMMA z monohydrátu acetátu tejto zlúčeniny

186 g monohydrátu acetátu L-NMMA sa rozpustí v 350 ml 2-molárnej vodnej kyseliny chlorovodíkovej a roztok sa odparí pri teplote 60 °C pri zníženom tlaku. Odparok sa potom rozpustí približne v 150 ml vody a odparí pri zníženom tlaku pričom proces rozpustenia a odparovania sa potom dvakrát opakuje. Odparok sa potom rozpustí v 25 ml horúcej vody, za prídavku 25 ml etanolu na zvýšenie mobility. Stále ešte horúci roztok sa mieša, spracuje s 1200 ml etanolu, naočkuje niekoľkými kryštálmi a v miešaní sa pokračuje pri teplote miestnosti počas 5 hodín. Zmes sa udržuje pri teplote 4 °C cez noc a kryštalická tuhá látka sa odfiltruje, premyje etanolom a suší vo vákuovom exsikátore, aby sa získalo 108 g hydrochloridu L-NMMA, ktorý je identický vo všetkých ohľadoch s látkou popísanou vyššie.

Príklad 3

Vzorka amorfného hydrochloridu, vyrobená ako v príklade 1 avšak bez očkovania, kryštalizuje potom, čo sa ponechá v kľude pod etanolom počas približne 5 mesiacov pri teplote 4 °C. Táto látka sa použije na očkovanie pri spôsoboch z príkladov 1 a 2.

Vzorky očkovacích kryštálov hydrochloridu L-NMMA sú podľa potreby dostupné od School of Chemistry, the University of Birmingham, Birmingham B15 2TT.

Claims

1. Hydrochlorid N^G-monometyl-L-arginínu ako v podstate čistá sol.

p , *

2. Hydrochlorid N -monometyl-L-argimnu vo forme tuhej latky.

3. Hydrochlorid N^G-monometyl-L-arginínu v kryštalickej forme.

4. Izomorfná forma hydrochloridu N^G-monometyl-L-arginínu podlá nároku 3, ktorá má teplotu topenia približne 219 °C.

5. Izomorfná forma hydrochloridu N^G-monometyl-L-arginínu podlá nároku 3, ktorá má teplotu topenia približne 205 °C.

6. Spôsob výroby kryštalického hydrochloridu N^G-monometyl-L-arginínu, vyznačujúci sa tým, že sa nechá reagoval N^G-monometyl-L-arginín s kyselinou chlorovodíkovou a hydrochloridová sol sa nechá vykryštalizovať.

7. Spôsob podlá nároku 6,vyznačujúci sa tým, že p

pomer N -monometyl-L-argimnu ku kyseline chlorovodíkovej je od 1:1 do 1:5.

p

8. Sposob výroby hydrochloridu N -monometyl-L-argimnu, vyznačujúci sa tým, že sa nechá reagovať sol N-monometyl-L-argimnu odlišná od hydrochloridovej soli s kyselinou chlorovodíkovou, odstráni sa ión tvoriaci pôvodnú sol a hydrochloridová sol sa nechá vykryštalizovať.

9. Spôsob podlá nároku 6, 7 alebo 8,vyznačujúci sa tým, že sa kryštalizačnému procesu napomáha očkovaním jedným alebo väčším počtom kryštálov hydrochloridu p

N ^-monometyl-L-argimnu.

10. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje hydrochlorid N^G-monometyl-L-arginínu spolu s jeho jedným alebo väčším počtom farmaceutický prijateľných nosných látok a prípadne jednou alebo väčším počtom terapeutických zložiek.

11. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 10, vyznačuj úc 1 sa tým, ze obsahuje hydrochlorid N -monometyl-L-arginínu podľa nároku 1 až 5, ktorý je rozpustený vo vode a pufrovaný na svoju vlastnú hodnotu pKa.

12. Použitie hydrochloridu N^G-monometyl-L-arginínu na výrobu liečiva na ošetrovanie alebo profylaxiu septického šoku.

13. Spôsob ošetrovania alebo profylaxie septického šoku, vyznačujúci sa tým, že sa podáva terapeuticky p

účinné množstvo hydrochloridu N -monometyl-L-argininu.