SK281442B6 - Bicyklické amidínové deriváty, spôsob ich prípravy, farmaceutické kompozície s ich obsahom a ich použitie - Google Patents

Abstract

Sú opísané bicyklické amidínové deriváty všeobecného vzorca (I), kde D predstavuje päťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroatómy vybrané z O, N alebo S, prípadne substituovaný na uhlíkovom atóme halogénom, trifluórmetylovou skupinou, alkylom C1 až 6, nitro- alebo kyanoskupinou, a ktorý je pripojený k zostávajúcej časti zlúčeniny všeobecného vzorca (I) cez uhlíkový atóm; A predstavuje N(X) alebo CH(-CH2)m-NXY); U predstavuje NH, O alebo CH2; V predstavuje (CH2)a; W predstavuje (CH2)b; a, b, m, X a Y sú definované v opise spolu so spôsobmi ich prípravy a kompozíciami s ich obsahom. Zlúčeniny vzorca (I) sú inhibítormi NO-syntázy a sú využiteľné v terapii.ŕ

Description

Oblasť techniky

Tento vynález sa týka bicyklických amidínových derivátov, spôsobov ich prípravy, kompozícií s ich obsahom a ich použitia v terapii.

Doterajší stav techniky

Pri niektorých amidínových derivátooch sa opísala ich aplikácia v terapii. Podľa amerického patentu US Patent No. 3669974 (USV Pharmaceutical Corp.) a podľa britského patentu UK Patent Application 2226562 (Boots) sa opísalo použitie N-fenylamidínových derivátov pre liečenie diabetes. V Intemational Patent Application WO 92/04054 (University of Oregon) je opísané použitie N',N-disubstituovaných admidínov pri liečbe hypertenzie, depresie a halucinogénnych stavov. Používanie niektorých amidínov a symetrických bisamidínov ako analgetík pri liečbe zápalov a pri liečbe hypertenzie je opísané v belgickom patente No. 717740 a v UK patente No. 1180629 (obidva patenty od Delalande). V nemeckej prihláške vynálezu Germán Patent Application DE-OS-2321330 (Bayer) je opísané použitie amidínových derivátov ako herbicídov.

Opísané je takisto používanie inhibítorov NO-syntázy (nitric oxide synthetase) pri liečbe ochorení, napr. v International Patent Applications WO 94/12163 (Abbott), WO 93/13066 a WO 94/12165 (obidva Wellcome) a v európskej prihláške vynálezu European Patent Application 446699 (Merrell Dow), 547558 a 558468 (obidva Washington University). Používanie inhibítorov NO-syntázy (nitric oxide synthease) v terapii je takisto opísané vo WO 95/00505, WO 95/09619, WO 95/09621 (všetky Wellcome), WO 95/10266 (Otsuka), WO 95/11231 a WO 95/11014 (obidva Searle), pričom šesť z týchto dokumentov sa publikovalo po najskôr možnom dátume priority (earliest priority dáte) tejto prihlášky.

Prihlasovateľ už skôr opísal použitie guanidínových derivátov a amidínových derivátov, ktoré sú inhibítormi NOsyntázy pri liečbe okrem iného aj neurodegeneratívnych ochorení (WO 94/21621, WO 95/05363). Druhý z týchto patentov sa publikoval po najskôr možnom dátume priority tejto prihlášky.

Podstata vynálezu

Teraz sa zistila nová skupina bicyklických amidínových derivátov, ktoré majú využiteľnú farmaceutickú aktivitu.

Podľa prvého aspektu tohto vynálezu sme pripravili bicyclický amidínový derivát všeobecného vzorca (1) l Ί1—NK

D (I), kde

D predstavuje päťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroatómy vybrané z O, N alebo S, prípadne substituovaný na uhlíkovom atóme halogénom, trifluórmetylovou skupinou, alkylom Cl až 6, nitro- alebo kyanoskupinou, a ktorý je pripojený k zostávajúcej časti zlúčeniny všeobecného vzorca (1) cez uhlíkový atóm;

A predstavuje N(X) alebo CH(-CH₂)_m-NXY);

U predstavuje NH, O alebo CH₂;

V predstavuje (CH₂)_a; W predstavuje (CH₂)_b;

a a b nezávisle od seba predstavujú celé čísla od 0 do 3, za predpokladu, žc a + b je v rozsahu 1 až 3;

X a Y nezávisle od seba predstavujú vodík, alkyl Cl až 6, alebo skupinu -(CH₂)_nQ alebo -NXY predstavuje piperidinyl, pyrolidinyl, morfolinyl alebo tetrahydroizochinolinyl;

Q predstavuje bifenyl alebo fenyl, prípadne substituovaný jednou alebo niekoľkými skupinami vybranými zo skupín alkyl Cl až 6, alkoxyl Cl až 6, perfluóralkyl Cl až 6, halogén, nitro- alebo kyano-;

m predstavuje celé číslo 0 až 5; n predstavuje celé číslo 0 až 6;

alebo reťazec U-V-A-W je už definovaný ale s tým, že môže byť nenasýtený;

alebo reťazec U-V-A-W sa môže predstavovať reťazcom -NH-CH₂-CH₂-O- substituovaným na uhlíkovom atóme skupinou -(CHj)_ra-NXY, pričom m, X a Y sú definované uvedeným spôsobom, a príslušné farmaceutický prijateľné soli.

Preferovaná skupina látok všeobecného vzorca (I) je definovaná vzorcom (IA)

D (IA), kde

T predstavuje C₃.₅ nasýtený alebo nenasýtený alkylénový reťazec, substituovaný -(CH₂)_m-NXY; -O(CH₂)₂-NHsubstituovaný -(CH₂)_m-NXY; alebo -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)b-;

X a Y nezávisle od seba predstavujú vodík, alkyl Cl až 6, alebo skupinu -(CH₂)_nQ alebo -NXY predstavuje piperidinyl, pyrolidinyl, morfolinyl alebo tetrahydroizochinolinyl; Q predstavuje fenyl, prípadne substituovaný alkylom Cl až 6, alkoxylom Cl až 6, trifluórmetylom, halogénom, nitroalebo kyanoskupinou; a

U, m, n, a, b a D sú definované uvedeným spôsobom, ale s tým, že ak T predstavuje -U-(CH₂)_a -N(X)-(CH₂)_b- a X predstavuje -(CH₂)_nQ, predstavuje n celé číslo medzi 0 a 5, a príslušné farmaceutický prijateľné soli.

Uprednostňujeme, aby D predstavovalo päťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci jeden heteroatóm zvolený z O, N alebo S, prípadne substituovaný na uhlíkovom atóme halogénom. Zvlášť uprednostňujeme, aby D predstavovalo tienyl, furyl alebo pyrolyl, najmä tienyl alebo íuryl, zvlášť tienyl a najlepšie 2-tienyl.

Uprednostňujeme, aby T predstavovalo C3.5 nasýtený alebo nenasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY, najmä C₃.₅ nasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY, najmä C₃_₄ nasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY.

Ak T predstavuje C₃.₅ nasýtený alebo nenasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY; alebo O-(CH₂)₂-NH- substituovaný -(CH₂)_m-NXY, uprednostňujeme, aby X a Y nezávisle predstavovalo vodík, alkyl Cl až 6 alebo skupinu -(CH₂)_nQ. Zvlášť uprednostňujeme, aby X a Y nezávisle predstavovalo vodík, metyl, etyl alebo skupinu -(CH₂)„Q a najmä, aby symbol buď X alebo Y predstavoval vodík a druhý symbol aby predstavoval vodík alebo skupinu -(CH₂)„Q.

Uprednostňujeme, aby m predstavovalo 0 alebo 1, najmä 0.

Ak T predstavuje -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)_b-, uprednostňujeme, aby U predstavovalo CH₂.

Ak T predstavuje -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)_b-, uprednostňujeme, aby a + b bolo 1 alebo 2.

SK 281442 Β6

Ak T predstavuje -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)_b-, uprednostňujeme, aby X predstavovalo vodík, alkyl Cl až 6 alebo skupinu -(CH₂)„Q.

Ak X a/alebo Y predstavuje -(CH₂)_nQ, uprednostňujeme, aby n predstavovalo 0,1 alebo 2, najmä 1.

Uprednostňujeme, aby Q predstavovalo fenyl prípadne substituovaný alkylom Cl až 6 alebo halogénom, aj keď zvlášť uprednostňujeme, aby Q predstavovalo nesubstituovaný fenyl.

Podľa tohto vynálezu je ďalej chránený spôsob prípravy zlúčenín všeobecného vzorca (I) a ich farmaceutický prijateľných solí, ktorý zahŕňa:

a) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (II)

(II), kde U, V, A a W zodpovedajú definovaným symbolom, so zlúčeninou vzorca (III)

(III), kde D je už definované a L je odchádzajúca skupina;

b) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (IV)

(IV), kde U, V, A a W sú už definované a HA je kyselina, so zlúčeninou vzorca (V) kde U, V, W, X, Y a D sú už definované;

f) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (1), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY) a ako X, tak aj Y predstavujú vodík, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (VIII)

(VIII), kde U, V, W, m a D sú už definované;

g) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY), X predstavuje vodík a m predstavuje celé číslo od 1 do 5, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (IX)

(K), kde U, V, W, D a Y sú už definované;

h) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (1), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY), symbol X alebo Y predstavuje vodík a druhý symbol predstavuje skupinu -(CH₂)„Q, v ktorej n predstavuje celé číslo od 1 do 6, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (X)

kde Q, m, U, V, W a D sú už definované;

i) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom: A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY), symbol X alebo Y predstavuje vodík a druhý symbol predstavuje skupinu -(CH₂)„Q, v ktorej n predstavuje celé číslo od 1 do 6, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (XI)

D---=N (V), kde D je už definované;

c) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) v ktorom A predstavuje N(X) a X predstavuje alkyl Cl až 6 alebo skupinu -(CH₂)„Q reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) v ktorom X predstavuje vodík so zlúčeninou vzorca (VI)

R⁹ L (VI), kde R⁹ predstavuje alkyl Cl až 6 alebo skupinu -(CH₂)„Q a L je odchádzajúca skupina;

d) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY) a aspoň jeden symbol X alebo Y predstavuje alkyl Cl až 6 alebo skupinu -(CH₂)„Q, reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (1) v ktorom jeden alebo obidva symboly X a Y predstavujú vodík so zlúčeninou vzorca (VI);

e) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY) a m predstavuje celé číslo od 1 do 5, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (VII)

XYNCCKCHAn-l —»

(VII),

(XI), kde Q, m, U, V, W a D sú už definované; alebo

j) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-NXY) a X predstavuje vodík, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (XII)

(XII), kde U, V, W, D a Y sú už definované;

a v prípade potreby alebo nevyhnutnosti (where) prevádzanie výslednej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej inej soli na farmaceutický prijateľnú soľ, alebo naopak.

Pri postupe a) prebieha reakcia za miešania zmesi reaktantov vo vhodnom rozpúšťadle, napr. v nižšom alkanole ako je napríklad etanol, izopropanol alebo terciámy butanol pri teplote medzi laboratórnou teplotou a teplotou refluxu použitého rozpúšťadla. Čas reakcie závisí okrem iného od rozpúšťadla a od charakteru odchádzajúcej skupiny a môže byť až 48 hodín, avšak typický čas je od 1 do 5 hodín. Zodpovedajúca odchádzajúca skupina L môže predstavovať tioalkyl, sulfonyl, trifluórmetylsulfonyl (trifluorocarbon sulphonyl), halogenid, alkyl a arylalkoholy a tosylovú sku pinu; iné skupiny sú uvedené v publikácii „Advanced Organic Chemistry“, J.March (1985), tretie vydanie, McGraw-Hill na str. 315; tieto skupiny sú v tomto odbore veľmi dobre známe.

Pri postupe b) sa reakcia výhodne uskutočňuje varením zmesi dvoch zlúčenín pod spätným chladičom počas niekoľkých hodín s prítomnosťou vhodného rozpúšťadla, pričom reakčná teplota je dostatočne vysoká na to, aby prebiehala kondenzácia rozpúšťadla v spätnom chladiči, avšak nie je tak vysoká, aby dochádzalo k rozkladu vzniknutého amidínu. Reakčná teplota sa môže pohybovať od laboratórnej teploty až do asi 250 °C, prednostne sa však táto reakcia uskutočňuje pri teplotách medzi asi 100 °C a 200 °C. Zistilo sa, že zvlášť dobrým rozpúšťadlom je odichlórbenzén a že je výhodné pridávať 4-dimetylaminopyridín ako katalyzátor. Pri ochladzovaní sa vytvárajú dve vrstvy, rozpúšťadlo je možné dekantovať a reakčnú zmes spracovať po prídavku vodnej zásady.

V tých prípadoch, keď sú reaktanty rozpustné v rozpúšťadle, je možné toto rozpúšťadlo pri zníženom tlaku odpariť a reakčnú zmes spracovať po prídavku vody. Kyselina HA môže byť organická alebo anorganická kyselina, napríklad kyselina chlorovodíková, bromovodíková, jodovodíková, sírová, dusičná, fosforečná, octová, mliečna, jantárová, fumarová, jablčná, maleínová, vínna, citrónová, benzoová alebo metánsulfónová.

Pri postupe c) prebieha reakcia pri bežných podmienkach, napríklad reakciou dvoch príslušných zlúčenín v inertnom rozpúšťadle v alkalickom prostredí (basic conditions) pri laboratórnej teplote počas až 12 hodín. Často sa zistilo, že pred reakciou so zlúčeninou vzorca (VI) bolo vhodné amín upraviť pôsobením NaH. Uprednostňujeme, aby L predstavovalo halogenid, najmä bromid.

Postup d) je možné uskutočňovať pri podmienkach, ktoré sú opísané v postupe c).

Pri postupe e) je možné redukciu uskutočňovať pôsobením dibóranu v inertnom rozpúšťadle, napríklad THF. Alternatívne, aj keď menej preťerované činidlá môžu zahŕňať lítiumalumíniumhydrid a činidlá pre katalytickú hydrogenáciu, napríklad II₂na Pd/C. Ďalšie podrobnosti o reakčných podmienkach, ktoré je možné používať pri týchto reakciách je možné vyhľadať v citovanej publikácii J. March: „Advanced Organic Chemistry“ na str. 1099 vrátane tu uvedených literárnych odkazov.

Pri postupe f) sa môže redukcia uskutočňovať pri rôznych reakčných podmienkach, napríklad pri podmienkach opísaných v publikácii J. March: „Advanced Organic Chemistry“ na str. 1103-1104. Tieto podmienky zahŕňajú katalytickú hydrogenáciu, použitie kovového Zn, Sn alebo Fe, A1H₃-A1C1j, sulfidov a ďalších. Uprednostňujeme uskutočňovanie tejto reakcie hydrogenáciou pri atmosférickom tlaku počas 3 až 6 hodín s prítomnosťou paládium-uhlíkového katalyzátora.

Pri postupe g), i) a j) sa môže redukcia uskutočňovať pôsobením nátriumborohydridu alebo nátriumkyanoborohydridu pri štandardných podmienkach.

Pri postupe h) sa môže reakcia uskutočňovať pri podmienkach analogických podmienkam opísaným pri postupe (e)·

Soli zlúčenín všeobecného vzorca (I) je možné pripravovať reakciou voľnej zásady alebo soli, enantioméru, tautoméru alebo chráneného derivátu príslušnej zlúčeniny s jedným alebo viacerými ekvivalentami príslušnej kyseliny. Túto reakciu je možné uskutočňovať v rozpúšťadle alebo v prostredí, v ktorom je soľ nerozpustná, alebo v rozpúšťadle, v ktorom je soľ rozpustná, ako je napr. voda, dioxán, etanol, tetrahydrofurán alebo dietyléter, alebo v zmesi rozpúš ťadiel, ktoré sa môžu odstrániť vo vákuu alebo lyofilizáciou. Táto reakcia sa môže uskutočňovať ako výmenná reakcia (metathetical) alebo sa môže uskutočňovať na iónexovej živici.

Zlúčeninu vzorca (II) je možné pripraviť redukciou príslušnej zlúčeniny vzorca (XIII) ¢0(XIII), kde U, V, A a W sú už definované.

Redukciu je možné uskutočňovať pri analogických podmienkach ako boli opísané podmienky pre postup f).

Niektoré zlúčeniny vzorca (II) sú buď známe, alebo sa môžu pripraviť bežnými metódami známymi ako také. Iné zlúčeniny vzorca II sa môžu pripraviť zo známych zlúčenín s jednoduchšími substituentami podľa analogických opísaných postupov pre postupy c) až j). Tak napríklad analogicky s uvedeným postupom j) sa zistilo, že je výhodné pripravovať niektoré zlúčeniny vzorca (XIII) v ktorých A predstavuje CH(-NXY) a X predstavuje vodík redukciou príslušného imínu, ktorý vznikne reakciou zlúčeniny vzorca NH₂Y s nitrovaným bicyklickým ketónom.

Zlúčeniny vzorca (IV) je možné pripravovať analogickými postupmi ako sú postupy opisujúce prípravu zlúčenín vzorca (II). Zlúčeniny vzorca (IV) je možné prevádzať na zodpovedajúce zlúčeniny vzorca (II) pôsobením zásady. Zlúčeniny vzorca (II) je možné prevádzať na zodpovedajúce zlúčeniny vzorca (IV) pôsobením protickej kyseliny HA, napr. jednou z uvedených kyselín.

Zlúčeniny vzorca (III) sú buď známe alebo je ich možné pripraviť známymi metódami. Tak napr. zlúčeniny vzorca (III), v ktorých L predstavuje tioalkyl sa môžu pripraviť pôsobením zodpovedajúceho tiamidu vzorca (XIV)

S D^^NHa (xiv), kde D je už definované, s alkyljodidom.

Zlúčeniny vzorca (VII), (VIII), (IX), (X), (XI), a (XII) sa môžu pripraviť analogickými postupmi ako sú tie, ktoré boli opísané pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca (I). Tieto zlúčeniny sa môžu ľahko pripraviť zo zlúčenín s jednoduchšími substituentmi pomocou bežných metód, napr. tvorbou amidu (VII, X) reakciou amínu s karboxylovou kyselinou alebo jej aktivovaným derivátom alebo tvorbou imínu (IX, XI, XII) reakciou amínu s aldehydom.

Zlúčeniny vzorca (V), (VI), (XIII) a (XIV) sú buď známe alebo sa môžu pripraviť bežnými metódami ako takými (per se).

Odborníkovi je zrejmé, že by mohlo byť žiaduce chrániť amínovú alebo inú reaktívnu skupinu pomocou chrániacej skupiny opísanej v publikácii „Protecting Groups in Organic Synthesis“ 2. vydanie (1991), ktorej autormi sú Greene a Wuts. Skupiny chrániace aminoskupinu, ktoré je možné uviesť zahŕňajú alkoxykarbonyl C2 až 7, napr. t-butyloxykarbonyl, fenylalkoxykarbonyl C8 až 13, napr. benzyloxykarbonyl alebo najmä trifluóracetát. Odstránenie chrániacej skupiny sa spravidla uskutočňuje pôsobením vodnej zásady, kyseliny alebo vodíkom.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu a medziprodukty je možné izolovať z príslušných reakčných zmesí bežnými pracovnými postupmi.

Termín „alkyl Cl až 6“ označuje alkylové skupiny s priamym, rozvetveným, nasýteným, nenasýteným, alifatickým alebo cyklickým reťazcom obsahujúcim 1 až 6 uhlíkových atómov.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) môžu existovať ako tautoméry, enantioméry alebo diastereoizoméry, pričom všetky tieto formy sú zahrnuté do rozsahu platnosti tohto vynálezu. Tieto rôzne optické izoméry sa môžu izolovať separáciou racemickej zmesi týchto zlúčenín s použitím bežných postupov, napr. pomocou trakčnej kryštalizácie alebo pomocou HPLC. Alternatívne je možné jednotlivé enantioméry pripravovať reakciou príslušného opticky aktívneho východiskového materiálu s takými reakčnými podmienkami, pri ktorých nedochádza k racemizácii.

Medziprodukty môžu takisto existovať ako enantioméry a môžu sa používať ako čistené enantioméry, diastereoizoméry, racemáty alebo zmesi.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) vykazujú využiteľné farmakologické pôsobenie na zvieratá. Tieto zlúčeniny majú najmä výhodné inhibičné pôsobenie na NO-syntázu a predpokladá sa, že budú vhodné aj pri liečbe alebo profylaxii ľudských ochorení za podmienok, pri ktorých syntéza alebo nadmerná syntéza oxidu dusičného (nitric oxide) tvorí podstatnú súčasť; ako sú napr. hypoxie, napr. pri srdcovej zástave alebo mŕtvici (stroke), neurovegetatívne poruchy vrátane degenerácie nervov a/alebo nekrózy nervov pri poruchách ako sú hypoxia, hypoglykémia, epilepsia a pri vonkajších poraneniach (ako sú poranenie miechy a hlavy), hyperbarické kyslíkové záchvaty a toxicita, demencia, napr. presenilná demencia, Alzheimerova choroba a demencia súvisiaca s AIDS, Sydenhamova choroba (S.chorea), Parkinsonova nemoc, Tourettov syndróm, Huntingtonova choroba, amyotropická laterálna skleróza, Korsakoffova nemoc, imbecilita súvisiaca s poruchami mozgových ciev, poruchy spánku, schizofrénia, depresia, autizmus, poruchy ovplyvnené ročným obdobím, poruchy vyvolané zmenou časového pásma, depresie alebo iné symptómy súvisiace s premenštruačným syndrómom (PMS), stavy úzkosti a septický šok. Je možné očakávať, že zlúčeniny vzorca (I) budú vykazovať aktivitu aj pri prevencii a zmene tolerancie na opiáty a diazepíny, pri liečbe drogových závislostí, budú spôsobovať utíšenie bolestí a bude ich možné používať pri liečbe migrény a iných vaskulámych bolestí hlavy. Tieto zlúčeniny podľa tohto vynálezu môžu takisto vykazovať výhodnú imunosupresívnu aktivitu, môžu sa použiť pri liečbe alebo profylaxii zápalov, neurogénnych zápalov, prechodných ťažkostí v lietadlách vrátane astmy a syndrómu respiračných ťažkostí u dospelých (ARDS), pri liečbe porúch gastrointestinálnej motility, rakoviny, pri začiatku pôrodných bolestí (induction of labour), na zníženie vylučovania žalúdočných kyselín a na zvýšenie kontraktívnej sily kostrových svalov.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sa javia najzaujímavejšie pri liečbe neurodegeneratívnych ochorení, migrény alebo pri prevencii a zmene tolerancie na opiáty a diazepíny alebo pri liečbe drogových závislostí a najmä pri liečbe neurodegeneratívnych ochorení.

Podľa ďalšieho aspektu tohto vynálezu navrhujeme zlúčeninu všeobecného vzorca (I) alebo jej farmaceutický prijateľné soli na použitie ako farmaceutický preparát (pharmaceutical).

Podľa ďalšej charakteristiky tohto vynálezu navrhujeme použitie zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej farmaceutický prijateľných solí pri výrobe liekov na liečbu alebo profylaxiu uvedených ochorení a stavov.

Takisto je navrhovaný spôsob liečby alebo profylaxia jednej z uvedených ochorení alebo stavov, ktorý zahŕňa podávanie terapeuticky účinných dávok zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo ich farmaceutický prijateľných solí osobám, ktoré trpia týmito ochoreniami alebo stavmi alebo sú k nim náchylné.

Pri uvedených terapeutických indikáciách sa samozrejme dávkovanie podávaných prípravkov bude meniť podľa použitej zlúčeniny, podľa spôsobu podávania a podľa požadovanej liečby. Všeobecne sa však uspokojivé výsledky dosiahnu pri podávaní v humánnej medicíne pri dennej dávke v rozsahu 1 mg a 2000 mg (vzťahujúce sa na pevnú substanciu).

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a ich farmaceutický prijateľné soli sa môžu používať ako také, alebo vo forme zodpovedajúcich medicinálnych preparátov na perorálne alebo parenterálne podávanie.

Podľa tohto vynálezu sa navrhuje farmaceutická formulácia zahŕňajúca prednostne menej ako 80 % a viac preferovane menej ako 50 % zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo ich farmaceutický prijateľných solí v zmesi s farmaceutický prijateľným zrieďovacím prostriedkom alebo nosičom.

Príklady vhodných zrieďovacích prostriedkov a nosičov sú odborníkom dobre známe.

Enzým NO-syntáza(nitric oxide synthetase) má rad izomémych foriem a vplyv zlúčenín všeobecného vzorca (I) alebo ich farmaceutický prijateľných solí na aktivitu NO-syntázy sa môže vyhodnotiť (screen) podľa postupu, ktorý navrhli Bredt a Snyder v časopise Proc. Nat. Acad. Sci (1990)87, 682-685 a Fôrstermann a kol., Eur.J.Pharm. (1992)225, 161-165. NO-syntáza prevádza ’H-L-arginin na ³H-L-citrulín, ktorý je možné separovať pomocou chromatografie na katexoch a kvantifikovať scintiláciou. ,

Screen A ,

A. Screening aktivity neuronálnej NO-syntázy

Enzým sa izoloval z hipokampu krysieho mozgu alebo z malého mozgu. Malý mozog alebo hipokampus samcov krýs Sprague-Dawley(250-275 g) sa vyberie po CO₂-anestézii a po odstránení hlavy. Supematant z malého mozgu alebo hipokampu sa pripravil homogenizáciou v pufŕi 50 mM Tris-HCl s 1 mM EDTA (pH 7,2 pri 25 °C) a centrifugáciou počas 15 minút pri 20000 g. Reziduálny L-arginín sa zo supematantu odstránil chromatografiou na ionexe Dowex AG-50W-X8 v kolóne v sodíkovom cykle a ďalej v kolóne vo vodíkovom cykle a potom odstredením pri 1000 g počas 30 sekúnd.

Pri tomto vyhodnocovaní sa pridalo po 25 μΐ finálneho supematantu do 12 skúmaviek obsahujúcich 25 μΐ roztoku L-arginínu (s koncentráciou 18 μΐ ’H-L-arginínu, 96 nM ³H-L-arginínu) a buď 25 μΐ testovacieho pufra (50 mM HEPES, 1 mM EDTA, 1,5 mM CaCl₂, pH 7,4) alebo 25 μΐ testovanej zlúčeniny v tomto pufri pri 22°C. Do každej skúmavky sa pridalo 75 μΐ kompletného testovacieho pufra (assay b.) (50 mM HEPES, 1 mM EDTA, 1,5 mM CaCl₂, 1 mM DTT, 100 μΜ NADPH, 10 pg/ml calmodulin, pH 7,4) na iniciáciu reakcie a táto reakcia sa zastavila po 10 minútach prídavkom 2 ml terminačného pufra (20 mM HEPES, 2 mM EDTA, pH 5,5).

Označený L-citrulín sa separoval od označeného L-arginínu chromatografiou na kolóne naplnenej ionexom Dowex AG-50W-X8 s veľkosťou častíc 200 až 400 mesh. 1 ml z každej ukončenej reakcie sa pridal do zvláštnej 1 ml kolóny a eluát sa spojil s eluátom z dvoch premytí po 1 ml destilovanej vody a so 16 ml scintilačného „kokteilu“. L-citrulín sa potom kvantifikoval scintilačnou metódou.

Pri typickom pokuse s použitím supematantu z malého mozgu sa bazálna aktivita zvýšila o 20000 dpm/ml vzorky

SK 281442 Β6 nad hodnotu slepého pokusu s činidlami, ktorá bola 7000 dpm/ml. Na overenie postupu sa použil N-nitro-L-arginín, ktorý vykazoval 60 % inhibíciu NO-syntázy pri koncentrácii 1 μΜ.

Screen B

B. Screening aktivity makrofágnej NO-syntázy

Enzým sa pripraví z kultivovaných myších markofágických (murine macrophage) buniek línie J774A-1 (získaných z laboratórií Imperiál Cancer Research Fund). Bunky J774A-1 sa kultivovali v živnom prostredí Dulbecco Modifíed Eagles Médium (DNEM) obohatenom 10 % zárodkového hovädzieho séra, 4 mM L-glutamínu a antibiotikami (100 jedn./ml penicilín G, 100pg/ml steptomycín a 0,25 pg/ml amphotericín B). Bunky sa bežne kultivovali v bankách s objemom 225 cm³ obsahujúcich 35 ml živného média, pri teplote 37 °C a vo zvlhčenej atmosfére obsahujúcej 5 % CO₂.

NO-syntáza je produkovaná bunkami ako odozva na interferón(INF )a lipopolysacharid (LPS). Živné médium z kultivačných baniek (confluent culture ílask) sa odstránilo a nahradilo 25 ml (do každej banky) čerstvého média obsahujúceho 1 pg/ml LPS a 10 jednotiek/ml INF. Po 17 až 20 hodinách kultivácie sa bunky zhromaždili tak, že ich vrstva sa zoškrabala z povrchu v banke do kultivačného média. Bunky sa získali po odstredení (1000 g počas 10 minút) a lyzát sa pripravil pridaním odstredených buniek do roztoku obsahujúceho pufer 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 pri 20 °C), 10% (obj.)glycerolu, 0,1 % (obj) prípravku Triton-X-100, 0,1 μΜ ditiotreitolu a „kokteil“ proteázových inhibítorov obsahujúci leupeptín (2 pg/ml), inhibítor sójového trypsínu (10 pg/ml), aprotinín (5 pg/ml) a fenylmetylsulfonylfluorid (50 pg/ml).

Pri tomto vyhodnotení sa do 25 pl „kokteilu“ substrátu (50 mM Tris-HCl (pH 7,5 pri 20 °C), 400 pM NADPH, 20 pM flavinadeníndinukleotíd, 20 pM flavínmononukleotíd, 4 pM tetrahydrobiopterín, 12 pM L-arginín a 0,025 pCi L-[³H]arginín) pridalo do priehlbín (well) na filtračnú dosku s 96 priehlbinami (well filter plate) (veľkosť pórov 0,45 pM) obsahujúcej 25 pl roztoku skúšanej zlúčeniny v 50 mM Tris-HCl. Reakcia sa spustila prídavkom 50 pl bunkového lyzátu (pripraveného uvedeným postupom) a po jednohodinovej inkubácii pri laboratórnej teplote sa reakcia ukončila prídavkom 50 pl vodného roztoku 3 mM nitroarginínu a 21 mM EDTA.

Označený L-citrulín sa separoval od označeného L-arginínu pomocou ionexu Dowex AG-50W. 150 pl 25 % vodnej suspenzie ionexu Dowex 50W (Na⁺ forma) sa pridá ku skúšanému materiálu (assay) a potom sa všetok materiál (whole) sfíltruje na dosky s 96 priehlbinami. Odoberie sa 70 pl filtrátu a pridá sa do priehlbín dosiek s 96 priehlbinami, ktoré obsahujú pevné scintilačné činidlo. Po vysušení vzoriek sa obsah L-citrulínu stanoví kvantitatívne scintilačnou metódou.

Pri typickom pokuse sa zistila bazálna aktivita 300 dpm na 70 pl vzorky, a táto hodnota sa pri kontrolných pokusoch s činidlami (reagent controls) zvýšila na 1900 dpm. Pre overenie postupu sa ako štandard používal aminoguanidín, ktorého hodnota IC₅₀ (50 % inhibičnej koncentrácie) bola 10 pM.

Screen C

C. Screening aktivity endoteliálnej NO-syntázy

Tento enzým je možné izolovať z ľudských buniek endotelu žily pupočnej šnúry (human umbilical vein endothelial cells) (HUVEC) postupom, ktorý publikoval Pollock a spol. (1991) Proc.Nat.Acad.Sci., 88, 10480-10484. Tieto bunky HUVEC sa získali od firmy Clonetics Corp (San Diego, CA, USA) a kultivovali sa až do vytvorenia zhlukov (to confluency). Tieto bunky sa udržali do 35 40 pasáži bez výrazného zníženia výťažku NO-syntázy. Keď bunky vytvorili zhluky, boli resuspendované vo fosfátovom pufri Dulbecco s obsahom soli, odstreďované pri 800 ot/min. počas 10 minút a peleta buniek (pellet) sa homogenizovala v ľadovo chladnom pufri s pH 4,2, ktorý obsahoval 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10% glycerol, 1 mM fenylmetylsulfonylfluorid, 2 pM leupeptín. Potom sa uskutočnilo odstreďovanie pri 34000 ot/min. počas 60 minút, získaná peleta sa solubilizovala v homogenizačnom pufri, ktorý obsahoval tiež 20 mM CHAPS. Po 30 minútovej inkubácii na ľade sa suspenzia odstredila pri 34000 ot/min počas 30 minút. Získaný supematant sa až do svojho použitia uchovával pri teplote -80 °C.

Pri tomto vyhodnotení sa pridalo po 25 pl finálneho supematantu do 12 skúmaviek obsahujúcich 25 pl roztoku L-arginínu (s koncentráciou 12 pM ’H-L-arginínu, 64 nM ³H-L-arginínu) a buď 25 pl testovacieho pufra (50 mM HEPES, 1 mM EDTA, 1,5 mM CaCl_2> pH 7,4) alebo 25 pl testovanej zlúčeniny v tomto pufri pri 22 °C. Do každej skúmavky sa pridalo 25 pl kompletného testovacieho pufra (assay b.) (50 mM HEPES, 1 mM EDTA, 1,5 mM CaCl₂,l mM DTT,100 pM NADPH, 10 pg/ml calmodulín, 12 pM tetrahydrobiopterín, pH 7,4) na iniciáciu reakcie a táto reakcia sa zastavila po 10 minútach prídavkom 2 ml terminačného pufra (20 mM HEPES, 2 mM EDTA, pH 5,5).

Označený L-citrulín sa separoval od označeného L-arginínu chromatografiou na kolóne naplnenej ionexom Dowex AG-50W-X8 s veľkosťou častíc 200 až 400mesh. Potom bol 1 ml z každej ukončenej reakcie pridaný do zvláštnej 1 ml kolóny a eluát sa spojil s eluátom z dvoch premytí po 1 ml destilovanej vody a so 16 ml scintilačného „kokteilu“. L-citrulín sa potom kvantifikoval scintilačnou metódou.

Pri typickom pokuse sa bazálna aktivita zvýšila o 5000 dpm/ml vzorky nad hodnotu slepého pokusu s činidlami, ktorý vykazoval aktivitu 1500 dpm/ml. Na overenie postupu sa použil N-nitro-L-arginín, ktorý vykazoval 70 - 90 % inhibíciu NO-syntázy' pri koncentrácii 1 μΜ.

Tieto zlúčeniny je možné takisto testovať pri ex-vivo pokusoch na hodnotenie miery ich prenikania do mozgu.

Screen D

Ex-vivo pokusy na stanovenie aktivity neuronálnej NO-syntázy

Samcom krýs Sprague-Dawley (250-275 g) sa intravenózne podalo 10 mg/kg testovanej zlúčeniny rozpustenej v 0,9 %-nom roztoku soli alebo pri kontrolnom pokuse samotný roztok soli. Po určenom čase (spravidla 2 až 24 hodín) po podaní boli zvieratá usmrtené, malý mozog sa vybral a supematant sa pripravil a hodnotil na aktivitu nitrátsyntetázy podľa postupu uvedeného v Screen A.

Pri ďalšom overovacom pokuse sa podiel supematantu z malého mozgu naniesol na kolónu naplnenú prípravkom 2'-5’-ADP Sepharosa (ktorý viaže NO-syntázu) a potom eluoval NADPH. Získaný eluát sa testoval na aktivitu NO-syntázy podľa postupu uvedeného v Screen A.

Zlúčeniny, ktoré prenikajú krysím mozgom a inhibujú neuronálnu NO-syntázu sa prejavujú znížením aktivity NO-syntázy ako v pripravenom supematante, tak aj v eluáte z kolóny naplnenej prípravkom 2'-5'-ADP Sepharosa.

Pri screeningu aktivity NO-syntázy sa aktivita jednotlivých zlúčenín vyjadrovala ako IC₅o (koncentrácia látky, ktorá spôsobí pri hodnotení 50%-né zníženie aktivity).

SK 281442 Β6

Hodnoty IC₅₀ testovaných látok boli na začiatku stanovované podľa inhibičnej aktivity 1, 10 a 100 μΜ roztokov týchto zlúčenín. Zlúčeniny, ktoré inhibovali tento enzým minimálne o 50 % pri koncentrácii 10 μΜ sa skúšali znova pri zodpovedajúcich koncentráciách, ktoré umožňovali presnejšie stanovenie hodnoty ICjo.

Pri už skôr uvedenom screeningu A (hodnotenie aktivity voči neuronálnej izoforme NO-syntázy) poskytla zlúčenina z ďalej uvedeného príkladu 1 hodnotu IC₅₀ nižšiu ako 10 μΜ, čo ukazuje na možnú terapeutickú použiteľnosť. V screeningu B a C (hodnotenie aktivity voči makrofágnej a endoteliálnej izoforme NO-syntázy) poskytla zlúčenina z ďalej uvedeného príkladu 1 hodnoty IC₅₀ vyššie ako desaťnásobok hodnoty z už uvedeného screeningu A, čo ukazuje na výhodnú selektivitu.

Zlúčeniny z príkladu 2-9, 10 a) f), 11 - 13 a 19 - 24 sa takisto testovali pri screeningu A a takisto poskytli hodnotu IC₅o nižšiu ako 10 μΜ. To znamená, že pri týchto látkach je takisto možné očakávať využiteľnú terapeutickú aktivitu.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a ich farmaceutický prijateľné soli majú výhodu v tom, že sú menej toxické, sú účinnejšie, selektívnejšie, majú dlhší čas pôsobenia, majú širšie spektrum aktivity, sú silnejšie, vyvolávajú menej vedľajších účinkov, ľahšie sa absorbujú alebo majú iné vhodné farmaceutické vlastnosti v porovnaní s látkami už skôr známymi a používanými v uvedených terapeutických oblastiach.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) a ich farmaceutický prijateľné soli môžu mať výhodu aj v tom, že majú selektívnejšie pôsobenie na neuronálnu izoformu NO-syntázy, a preto je možné očakávať, že budú mať výhodnú terapeutickú použiteľnosť so zníženými vedľajšími účinkami na inhibíciu ostatných izoforiem.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Tento vynález je ilustrovaný nasledujúcimi príkladmi:

Príklad 1 N-((2-(Fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

a) 5-Nitro-2-indanón

Zlúčenina sa pripravila postupom, ktorý opísali Heusler a Schieffer Ber., (1899)32,33.

b) 5-Nitro-2-(fenylmetyl)aminoindan

Do banky sa vložili: 5-nitro-2-indanón (1,48 g, 8,36 mmól), benzylamin (4,40 ml, 41,8 mmól), octová kyselina (15,0 ml), molekulárne sito 4 A (20 ml), THF (15 ml) a MeOH (15 ml), a táto zmes sa ochladila na teplotu 0 °C. Potom sa pridával počas 5 minút po častiach nátriumkyanoborohydrid (1,05 g, 16,7 mmól). Zmes sa miešala počas 14 hodín, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na sirup. Zmes sa zalkalizovala pôsobením 2N NaOH a extrahovala sa éterom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili sa síranom horečnatým, sfiltrovali, skoncentrovali a chromatografovali na silikagéli (3 % metanol/metylénchlorid). Výťažok 5-nitro-2-(fenylmetyl) -aminoindanu: (1,18 g, 53 %); hmotn. spektrá:

(M+H)⁺=269.

c) 2-(5-Nitroindanyl)-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid

K miešanému roztoku 5-nitro-2-(fenylmetyl)aminoindanu (1,18 g, 4,40 mmól) a trietylamínu (0,61 ml, 4,40 mmól) v metylénchloride (50 ml) sa pridával po kvapkách trifluóracetánhydrid (0,63 ml, 4,40 mmól). Po jedno minútovom miešaní sa reakčná zmes naliala do vody a extrahovala sa metylénchloridom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili sa síranom horečnatým a sfiltrovali cez krátku vrstvu silikagélu (20% etylacetát/hexán) a získal sa 2-(5-nitroindanyl)-N-(fenylmetyljtrifluóracetamid: (1,17 g, 73%); hmotn. spektr. (M+H)⁺=365.

d) 2-(5-Aminoindanyl)-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid

K miešanému roztoku 2-(5-nitroindanyl)-N-(fenylmetyljtrifluóracetamidu (1,17 g, 3,21 mmól) v THF/MeOH (100 ml, 1 ; 1) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi=0,689.10⁴Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila, takže sa získal 2-(5-aminoindanyl)-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid, ktorý bol podľa TLC homogénny a použil sa ihneď v reakčnom kroku (f).

e) S-metyl-2-tioféntiokarboximid-hydrojodid

K roztoku 2-tiofénkarboxtioamidu (Maybridge Chemical) (11,1 g) v acetóne (60 ml) sa pridal jódmetán (13,4 g). Po 6 hodinách pri teplote 22 °C vznikla žltá pevná látka oddelená filtráciou, premytá acetónom (2 x 25 ml) a vysušená, takže sa získalo 18,45 g S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodídu, b. 1.195 °C.

f) N-((2-(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

K roztoku 2-(5-aminoindanyl)-N-(fenylmetyl)trifluóracetamidu (1,0 g, 3,0 mmól) v izopropanole (6 ml)/DMF (0,5 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximid-hydrojodid (0,85 g, 3,0 mmól). Zmes sa miešala počas 14 hodín, zriedila sa metanolom (6 ml) a 2 N NaOH (6 ml) a zohrievala na teplotu 50 °C počas 0,5 hodiny. Táto zmes sa naliala do vody a extrahovala sa etylacetátom (3. x. x 30 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a chromatografovali sa na silikagéli (20 % metanol/metylénchlorid), aby sa získala zlúčenina uvedená v názve vo forme voľnej zásady. Pôsobením IPA/štaveľovej kyseliny sa získal N-((2-(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamiddioxalát ako biela pevná látka: (0,47 g, 30 %); b. 1.130-135 °C.

Príklad 2 N-((2-(Fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) 7-Nitro-3,4-dihydro-2( 1 H)-naftalenón

Táto zlúčenina sa pripravila podľa metódy opísanej v J. Med. Chem.(1989),32,2128.

b) 7-Nitro-2-((fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalén

Do banky sa vložili 7-nitro-3,4-dihydro-2(lH)-naftalenón (1,50 g, 7,85 mmól), benzylamin (4,30 ml, 39,3 mmól), octová kyselina (8,0 ml), molekulové sito 4 A (20 ml), THF (15 ml) a MeOH (15 ml) a táto zmes sa ochladila na teplotu 0 °C. Potom sa v priebehu 5 minút pridal po častiach nátriumkyanoborohydrid (0,99 g, 15,7 mmól). Táto zmes sa miešala počas 14 hodín, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na sirup. Potom sa zalkalizovala pomocou 2N NaOH a extrahovala sa éterom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili sa síranom horečnatým, sfiltrovali a chromatografovali sa na silikagéli (3 % metanol/metylénchlorid) pri vzniku 7-nitro-2-((fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalénu (2,10 g, 95%); hmotn.spektr. (M+H)⁺= 283.

c) 2-(7-Nitro-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid

K miešanému roztoku 7-nitro-2-((fenylmetyl)amino)1,2,3,4-tetrahydronaftalénu (2,10 g, 7,45 mmól) a trietylamínu (1,07 ml, 7,45 mmól) v metylénchloride (50 ml) sa pridal po kvapkách triíluóracetánhydrid (1,05 ml, 7,45 mmól). Po jednominútovom miešaní sa zmes naliala do vody a extrahovala metylénchloridom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa potom premyli vodou, vysušili síranom horečnatým a sfiltrovali sa cez krátku vrstvu silikagélu (20 % etylacetát/hexán) pri vzniku 2-(7-nitro-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamidu: (2,55 g,

%); hmotn. spektr. (M+H)⁺= 379.

d) 2-(7-Amino-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid

K miešanému roztoku 2-(7-nitro-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamidu (2,55 g, 6,75 mmól) v THF/MeOH (100 ml, 1:1) sa pridalo katalytické množstvo 10% PD/C. Táto zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi = 0,689.10⁴ Pa) počas 1 hodiny, sfíltrovala sa cez celit a zahustila sa, takže sa získal 2-(7-amino-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid, ktorý bol podľa TLC homogénny a použil sa ihneď v nasledujúcom reakčnom kroku.

e) N-((2-fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

K roztoku 2-(7-amino-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamidu (2,11 g, 6,07 mmól) v izopropanole (10 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodid (1,72 g, 6,07 mmól). Táto zmes sa miešala počas 14 hodín, zriedila sa metanolom (6 ml) a 2N NaOH (6 ml) a zohrievala sa na teplotu 50 °C počas 0,5 hod. Zmes sa naliala do vody a extrahovala sa etylacetátom (3 x 30 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili tak, že sa získala pevná látka, ktorá po prekryštalovaní (metylénchlorid/hexán) poskytla N-((2-fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid ako bielu pevnú látku: (0,66 g, 30 %); b. t. 119 - 120 °C.

Príklad 3 N-((2-Amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

a) 7-Nitro-2-amino-l ,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochlorid

Do banky sa vložili 7-nitro-l-tetralón (1,50 g, 7,85 mmól), octan amónny (6,05 ml, 78,5 mmól), kyselina octová (8,0 ml), molekulárne sito 4 A (20 ml), THF (15 ml) a MeOH (15 ml) a táto zmes sa ochladila na teplotu 0 °C.

Počas 5 minút sa po častiach pridával nátriumkyanoborohydrid (0,99 g, 15,7 mmól). Získaná zmes sa miešala počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na sirup. Zmes sa zalkalizovala pomocou 2N NaOH a extrahovala sa éterom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a po ich zahustení vznikol olejovitý produkt. Zlúčenina sa izolovala vo forme hydrochloridu: 7-nitro-2-amino-l,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochlorid: (1,00 g, 56 %), b. t.>300 °C.

b) 2-(7-Nitro-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-triíluóracetamid

K miešanému roztoku 7-nitro-2-amino-l,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochloridu (1,00 g, 4,39 mmól) a trietylamínu (1,22 ml, 8,77 mmól) v metylénchloride (50 ml) sa pridal po kvapkách triíluóracetánhydrid (0,62 ml, 4,39 mmól). Po jednominútovom miešaní sa zmes naliala do vody a extrahovala metylénchloridom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa potom premyli vodou, vysušili sa síranom horečnatým a sfiltrovali cez krátku vrstvu silikagélu (20 % etylacetát/hexán) pri vzniku 2-(7-nitro-(l, 2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamidu: (0,78 g, 62 %); hmotn. spektr. (M+H)⁺=289.

c) 2-(7-Amino-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid

K miešanému roztoku 2-(7-nitro-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamidu (0,76 g, 2,21 mmól) v THF/MeOH (100 ml, 1:1) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi=0,689.10⁴Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila, takže sa získal 2-(7-amino-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid, ktorý bol podľa TLC homogénny a použil sa ihneď v nasledujúcom reakčnom kroku.

d) N-((2-Amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid

K roztoku 2-(7-amino-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamidu (0,70 g, 2,71 mmól) v izopropanole (10 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximid-hydrojodid (0,77 g, 2,71 mmól). Táto zmes sa miešala počas 14 hodín, zriedila sa metanolom (6 ml) a 2N NaOH (6 ml) a zohrievala na teplotu 50 °C počas 0,5 hodiny. Zmes sa naliala do vody a extrahovala sa etylacetátom (3 x 30 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, prefiltrovali, zahustili sa a chromatografovali na silikagéli (20 % metanol/metylénchlorid), pričom sa získal olejovitý produkt, ktorý sa previedol na dihydrobromid: N-((2-amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid: (0,37 g, 32 %); rozklad >210 °C.

Príklad 4 N-((l-Amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

a) 7-Nitro-1 -amino-1,2,3,4-tetrahydronaftalén

7-Nitro-l-amino-l,2,3,4-tetrahydronaftalén sa pripravil takisto ako 7-Nitro-2-amino-l,2,3,4-tetrahydronaftalén. Táto zlúčenina sa izolovala vo forme hydrochloridu: (0,30 g, 12 %); b. t.>300 °C.

b) l-(7-Nitro-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid l-(7-Nitro-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid sa pripravil takisto ako 2-(7-Nitro-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid: (0,35 g, 95 %); hmotn. spektr. (M+H)⁺=289.

c) 1 -(7-Amino-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid l-(7-Amino-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid sa pripravil takisto ako 2-(7-amino-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-trifluóracetamid a použil sa ihneď v ďalšej reakcii.

d) N-(( 1 -Amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamiddioxalát

N-((l-amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát sa pripravil takisto ako N-((2-amino)8

SK 281442 Β6

-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid až na to, že sa izoloval ako soľ kyseliny šťaveľovej: (0,18 g, 33 %); rozklad >155 °C.

Príklad 5 N-((2-Ammo)-mdan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

a) 5-Nitro-2-aminomdanhydrochlorid

K 2-aminoindanhydrochloridu (19,11 g, 0,112 mol) pri teplote 0 °C sa pridala kyselina sírová (60 ml) a potom dusičnan draselný (11,84 g, 0,117 mol). Táto zmes sa nechala zohriať na laboratórnu teplotu, počas ďalších 2 hodín sa miešala a potom sa naliala na ľad/50 % NaOH (celkom 500 ml). Zmes sa extrahovala éterom (3 x 200 ml), spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili sa na olejovitý produkt, ktorý sa previedol na hydrochlorid. Prekryštalovaním zo zmesi izopropanol/metanol sa získal 5-nitro-2-aminoindanhydrochlorid: (14,58 g, 60%); b. t.>300°C.

b) 2-(5-Nitroindanyl)-N-trifluóracetamid

K miešanému roztoku 5-nitro-2-aminoindanhydrochloridu (1,00 g, 5,89 mmól) a trietylamínu (0,82 ml, 5,89 mmól) v metylénchloride (50 ml) sa pridal po kvapkách trifluóracetánhydrid (0,83 ml, 5,89 mmól). Po jednominútovom miešaní sa zmes naliala do vody a extrahovala sa metylénchloridom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa potom premyli vodou, vysušili síranom horečnatým a sfiltrovali sa cez krátku vrstvu silikagélu (20 % etylacetát/hexán) pri vzniku 2-(5-nitroindanyl)-N-trifluóracetamidu: (1,51 g, 93%); b. t. 153-154 °C.

c) 2-(5-Aminoindanyl)-N-triíluóracetamid

K miešanému roztoku 2-(5-nitroindanyl)-N-trifluóracetamidu (0,58 g, 2,25 mmól) v THF/MeOH (100 ml, 1 : 1) sa pridalo katalytické množstvo 10% Pd/C. Táto zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi=0,689.10⁴ Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila, takže sa získal 2-(5-Aminoindanyl)-N-trifluóracetamid, ktorý bol podľa TLC homogénny a použil sa ihneď v nasledujúcom reakčnom kroku.

d) N-((2-Amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

K roztoku 2-(5-ammoindanyl)-N-trifluóracetamidu (0,52 g, 2,25 mmól) v izopropanole (6 ml) a DMF (0,5 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboxymid-hydrojodid (0,64 g, 2,25 mmól). Táto zmes sa miešala počas 14 hodín, zriedila sa metanolom (6 ml) a 2 N NaOH (6 ml) a zohrievala sa na teplotu 50 °C počas 0,5 hodiny. Zmes sa naliala do vody a extrahovala sa etylacetátom (3 x 30 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a chromatografovali sa na silikagéli (20 % metanol/melylénchlorid), aby sa získala uvedená zlúčenina ako voľná zásada. Pôsobením IPA/šťaveľovej kyseliny sa získal N-((2-amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát ako biela pevná látka: (0,60 g, 50 %); b. t. rozklad 70 °C.

Príklad 6 N-((2-)Metyl)(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid

a) 5-Nitro-2-(fenylmetyl)aminoindanhydrochlorid

K 5-nitro-2-aminoindanhydrochloridu (3,00 g, 14,00 mmól) v DMF (60 ml) sa pridal trietylamín (4,07 ml, 29,40 mmól) a potom, benzylbromid (1,74 ml, 14,68 mmól). Táto zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas 1 hodiny, naliala sa do vody (200 ml) a extrahovala etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali sa cez krátku vrstvu silikagélu a zahustili sa na sirup. Látka uvedená v podtitule sa získala ako hydrochlorid: (2,29 g, 54 %); b. t. rozklad 266 °C.

b) 5-N itro-2-(mety l)(feny Imety l)aminoindanhydrochlorid

K 5-nitro-2-(fenylmetyl)aminoindanhydrochloridu (2,29 g, 7,52 mmól) v DMF sa pridal uhličitan draselný (2,60 g, 18,80 mmól) a potom mctyljodid (0,47 ml, 7,52 mmól). Táto zmes sa zohriala na laboratórnu teplotu, miešala sa počas 16 hodín, naliala sa do vody (400 ml) a extrahovala sa etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali sa cez krátku vrstvu silikagélu a zahustili sa na sirup. Látka uvedená v titule sa získala ako hydrochlorid: (1,08 g, 45 %); b. t. rozklad 280 °C.

c) 5-Amino-2-(mety l)(feny lmetyl)aminoindandihydrochlorid

K 5-nitro-2-(fenylmetyl)aminoindanhydrochloridu (1,08 g, 3,39 mmól) v 85 % kyseline octovej vo vode sa pridal práškový zinok (3,0 g). Táto zmes sa miešala počas 1 minúty, sfiltrovala sa cez celit a zahustila sa. Získaný koncentrát sa zneutralizoval 2N NaOH a extrahoval etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým a odparili sa na sirup. K získanému olejovitému produktu sa pridal IPA/HC1, reakčná zmes sa zahustila a použila v nasledujúcom reakčnom kroku.

d) N-((2-)Metyl)(fcnylmctyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid

K 5-amino-2-(metyl)(fenylmetyl)aminoindandihydro-.. chloridu v DMF (10 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximid-hydrojodid 0,98 g, 3,45 mmól) a pyridín (0,27 ml, 3,29 mmól). Táto zmes sa miešala počas 14 hodín, naliala sa do vody s 2N NaOH a extrahovala etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a chromatografovali na silikagéli (10 % metanol/metylénchlorid), aby sa získala uvedená zlúčenina vo forme voľnej zásady. Pôsobením IPA/šťaveľovej kyseliny sa získal N-((2-)metyl)(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid ako biela pevná látka: (0,43 g, 25 %); b. 1.196 - 200 °C.

Príklad 7

N-(( 1 -amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dihydrochlorid

a) 6-Nitro-l-aminoindanhydrochlorid

1-Aminoindan (10,0 g, 75,08 mmól) sa pridal ku koncentrovanej kyseline sírovej (40 ml) pri teplote 0 °C. Táto zmes sa nechala zohriať na laboratórnu teplotu, aby sa pomohlo rozpúšťaniu a potom sa ochladila na 0 °C. Po častiach sa pridal dusičnan draselný (7,60 g, 75,08 mmól) a zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas 1 hodiny, potom sa naliala na ľad s 50 % NaOH. Získaný vodný roztok sa extrahoval chloroformom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, odfarbili sa aktívnym uhlím, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/HC1 sa získala uvedená zlúčenina: (6,90 g, 43 %); b. t.: rozklad 280 °C.

SK 281442 Β6

b) 6-Amino-l-aminoindanhydrochlorid

K roztoku 6-nitro-l-aminoindanhydrochloridu (1,00 g, 4,66 mmól) v MeOH (100 ml) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi = 0,689.10⁴ Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila. Získal sa 6-amino-1-aminoindanhydrochlorid, ktorý bol podľa TLC homogénny a ktorý sa použil ihneď v nasledujúcom reakčnom kroku.

c) N-(( 1 -amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrochlorid

K 6-amino-l-aminoindanhydrochloridu (0,74 g, 4,01 mmól) v DMFA/IPA (4 ml, 1 : 1) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximid-hydrojodid (1,26 g, 4,41 mmól). Táto zmes sa zohrievala na teplotu 50 °C, miešala sa počas 16 hodín, naliala sa do vody s 2N NaOH a extrahovala etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/šťaveľovej kyseliny sa získal N-(( 1 -amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrochlorid ako biela pevná látka: (0,79 g, 60%) b. t.: rozklad > 200 °C.

Príklad 8 N-((l-(fenylmetyl)amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

a) 6-Nitro-l-(fenylmetyl)aminoindanhydrochlorid

K 6-nitro-l-aminoindanhydrochloridu (1,90 g, 8,85 mmól) v DMF (30 ml) sa pridal trietylamín (2,50 ml, 18,06 mmól) a potom benzylbromid (1,07 ml, 9,03 mmól). Táto zmes sa zohriala na laboratórnu teplotu, miešala sa počas 3 hodín, naliala sa do vody (100 ml) a extrahovala etylacetátom (3 x 70 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali cez krátku vrstvu silikagélu a zahustili sa na olej. Uvedená zlúčenina sa izolovala vo forme hydrochloridu: (1,34 g, 50%); b. t. 234-235 °C.

b) 6-Amino-1 -(fenylmetyl)aminoindanhydrochlorid

K 6-nitro-1 -(fenylmetyl)aminoindanhydrochloridu (1,34 g, 4,40 mmól) v MeOH (100 ml) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi = 0,689.10⁴ Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila. Získal sa 6-amino-l-(fenylmetyl)aminoindanhydrochlorid, ktorý bol podľa TLC homogénny a ktorý sa použil ihneď v nasledujúcom reakčnom kroku.

c) N-(( 1 -(fenylmetyl)amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát

K 6-amino-1 -(fenylmetyl)ammoindanhydrochloridu (1,21 g, 4,40 mmól) v DMF (20 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodid (1,38 g, 4,84 mmól). Táto zmes sa zohrievala na teplotu 50 °C počas 16 hodín, naliala sa do vody s 2N NaOH a extrahovala sa etylacetátom (3 x x 50 mi). Spojené extakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili sa na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/šťaveľovej kyseliny sa získal N-((l-(fenylmetyl)amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát ako biela pevná látka: (1,06 g, 46%); b. t.: rozklad >120 °C.

Príklad 9 N-((2-((3-Chlórfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidin

a) 2-((3-Chlórfenyl)karbonyl)amino-6-nitroindan

K 2-amino-6-nitroindanhydrochloridu (1,5 g, 7,0 mmól) v metylénchloride (50 ml) pri teplote 0 °C sa pridal trietylamín (2,1 ml, 15,0 mmól) a potom 3-chlórbenzoylchlorid (1,0 ml, 7,5 mmól). Táto zmes sa ihneď naliala do vody a vrstvy sa oddelili. Vodná vrstva sa extrahovala metylénchloridom (2 x 20 ml) a spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt, ktorý bol podľa TLC homogénny a ktorý sa použil ihneď v ďalšom reakčnom kroku: Hmotn. spektr.(M+H)⁺= 317.

b) 2-((3-Chlórfenyl)metyl)amino-6-nitroindan

K 2-((3-chlórfenyl)karbonyl)amino-6-nitromdanu (2,2 g, 7,0 mmól) v THF (75 ml) sa pridal po kvapkách BH₃.THF (1,0 M, 35 ml, 35 mmól). Táto zmes sa zohrievala pod spätným chladičom počas 12 hodín, ochladila sa na teplotu 0 “C, pridala sa 4N HCl (60 ml) a zmes sa zohrievala ešte 1 hodinu pod spätným chladičom. Získaný roztok sa odparil na olejovitý produkt, zalkalizoval sa 50 % NaOH a extrahoval metylénchloridom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olej. Pôsobením IPA/HC1 sa získal 2-((3-chlórfenyl)metyl)amino-6-nitroindan: (2,1 g, 88 % v dvoch krokoch); b. t. 234 - 237 °C.

c) 2-((3-Chlórfenyl)metyl)amino-6-aminoindan

K 2-((3-chlórfenyl)metyl)amino-6-nitroindanhydrochloridu (2,1 g, 6,13 mmól) v 85 % AcOH/H₂O (40 ml) sa pridal kovový zinok (1,6 g, 24,5 mmól). Táto zmes sa miešala počas 5 minút, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na 0lej. Olej sa vylial do zalkalizovanej vody a extrahoval chloroformom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili sa na olej. Pôsobením IPA/HC1 sa získal 2-((3-chlórfenyl)metyl)amino-6-aminoindan: (1,5 g, 70%); b. t. vyššia ako 270 °C.

d) N-((2-((3-Chlórfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín

Zmes 2-((3-chlórfenyl)metyl)ammo-6-aminoindandihydrochloridu (1,5 g, 4,2 mmól), S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodidu (1,3 g, 4,6 mmól) a pyridínu (0,34 ml, 4,2 mmól) v DMF (10 ml) sa miešala počas 24 hodín. Potom sa táto zmes naliala do vody, zalkalizovala 2N NaOH a extrahovala etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a chromatografovali na silikagéli (12% metanol/metylénchlorid) a získal sa bezfarebný olej. Pôsobením IPA/HC1 sa získal N-((2-((3-chlórfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxymidín: (0,75 g, 40 %); b. t. 297 - 299 °C.

Príklad 10

Podľa postupu uvedeného v príklade 9 sa pripravili nasledujúce zlúčeniny:

a) N-((2-((2-Metylfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. t.l83°C

b) N-((2-((3-Metylfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. t.195 °C

c) N-((2-((4-Metylfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. 1.182 °C

d) N-((2-((Etyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. t. 236-238 °C

e) N-((2-(((4-Fenyl)fenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. 1.182 °C

f) N-((2-(((4-Hexyl)fenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. t.125 °C

g) N-((2-((3-Brómfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín: b. 1.182 °C

Príkladll

N-((2-((3-Chlórfenyl)metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl-2-tiofénkarboximidamid

a) 7-Nitro-2-(((3 -chlórfeny l)metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaftalén

Zmes 7-mtro-3,4-dihydro-2(lH)-naftalenónu (1,50 g, 7,85 mmól), 3-chlórbenzylamínu (4,70 ml, 39,3 mmól), octovej kyseliny (6,0 ml), molekulového sita 4 A (20 ml), THF (15 ml) a MeOH (15 ml) sa vložila do banky a ochladila na teplotu 0 °C. K tejto zmesi sa počas 5 minút pridával po častiach nátriumkyanoborohydrid (0,99 g, 15,7 mmól). Zmes sa miešala počas 14 hodín, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na sirup. Potom sa zalkalizovala 2N NaOH a extrahovala éterom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali, zahustili a chromatografovali na silikagéli (3 % metanol/metylénchlorid), aby sa získal bezfarebný olej. Pôsobením IPA/HC1 na tento olej sa získal 7-nitro-2-(((3-chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochlorid: (1,34 g, 50 %); hmotn. spektr. (M+H)⁺= 317.

b) 7-Amino-2-(((3-chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalén

K 7-nitro-2-(((3-chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochloridu (1,34 g, 3,80 mmól) v 85 % AcOH/HjO (75 ml) sa pridal kovový zinok (2,48 g, 38,0 mmól). Zmes sa miešala počas 5 minút, sfiltrovala sa cez celit a odparila sa na olej. Získaný olej sa vylial do zalkalizovanej vody a extrahoval chloroformom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/HC1 sa získal 7-amino-2-(((3-chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalén (1,4 g, 99 %); hmotn. spektr. (M+H)⁺= 288.

c) N-((2-((3-Chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl-2-tiofénkarboximidamid

Zmes 7-amino-2-(((3-chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftaléndihydrochloridu (1.32 g, 3,70 mmól), S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodidu (1,3 g, 4,6 mmól) a pyridínu (0,30 ml, 3,7 mmól) v DMF (15 ml) sa miešala počas 24 hodín. Táto zmes sa potom naliala do vody, zalkalizovala 2N NaOH a extrahovala etylacetátom (3 x x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/štaveľová kyselina sa získal N-((2-((3-chlórfenyl)metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl-2-tiofénkarboximidamid-dioxalát: (0,71 g, 33 %); rozklad nad 100 °C.

Príklad 12 N-((2-(Fenylmetyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl-2-tiofénkarboximidamid

a) 7-Nitro-2-((fenylmetyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalén

K miešanému roztoku 7-nitro-2-((fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaftalénu (1,5 g, 5,4 mmól) v DMF (30 ml) sa pridal uhličitan draselný (1,5 g, 10,8 mmól) a metyljodid (0,36 ml, 5,8 mmól). Táto zmes sa miešala počas 24 hodín, vyliala sa do vody a extrahovala etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/HC1 sa získal 7-nitro-2-((fenylmctyl)metyl)amíno)-1,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochlorid: (0,89 g, 50 %); hmotn.spektr. (M+H)⁺ = 297.

b) 7-Amino-2-((fenylmetyl)metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaftalén

K7-nitro-2-((fenylmetyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalénhydrochloridu (0,89 g, 2,7 mmól) v 85 % AcOH/H₂O (75 ml) sa pridal kovový zinok (3,5 g, 54,0 mmól). Zmes sa miešala počas 5 minút, sfiltrovala sa cez celit a odparila na olejovitý produkt. Tento olejovitý produkt sa vylial do zalkalizovanej vody a extrahoval chloroformom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/HC1 sa získal 7-amino-2-((fenylmetyl)metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaftalén: (0,81 g, 88 %); hmotn. spektr. (M+H)⁺= 267.

c) N-((2-(Fenylmetyl)metyl)amino)-1,2,3,4-tretrahydronaft-7-yl-2-tiofénkarboxymidamid

Zmes 7-amino-2-((fenylmetyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaňaléndihydrochloridu (0,81 g, 2,4 mmól), S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodidu (0,74 g, 2,6 mmól) a pyridínu (0,19 ml, 2,4 mmól) v DMF (15 ml) .sa miešala počas 24 hodín. Potom sa zmes naliala do vody, zalkalizovala 2N NaOH a extrahovala etylacetátom (3,-x x 50 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali, zahustili a chromatografovali na silikagéli (15% MeOH/metylénchlorid). Zahustením frakcie sa získala pevná látka, ktorá po prekryštalovaním zo zmesi etylacetát/hexán poskytla N-((2-fenylmetyl)metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl-2-tiofénkarboximidamiddihydrochlorid: (0,14 g, 16 %); b. t. 176 - 178 °C.

Príklad 13

N-(( 1 -(Fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) 7-Nitro-l-((fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaftalén

7-Nitro-l-tetralón (2,0 g, 10,5 mmól), benzylamín (1,2 ml, 10,5 mmól) a titanizopropoxid (3,9 ml, 13,1 mmól) sa zmiesili a miešali počas 1 hodiny. Táto zmes sa potom zriedila absolútnym etanolom (12 ml), pridal sa nátriumkyanoborohydrid (0,44 g, 7,0 mmól) a miešala sa počas 20 hodín. Pevný podiel (soilds ? pozn. prekl.) sa odfiltroval a premyl etanolom. Etanolický podiel sa skoncentroval a zostávajúci olejovitý produkt sa použil ihneď v ďalšej reakcii: hmotn. spektr.(M+H)⁺= 283.

b) 1 -(7-Nitro-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid

K miešanému roztoku 7-nitro-l-((fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaftalénu (2,96 g, 10,50 mmól) a dietylamínu (1,46 ml, 10,50 mmól) v metylénchloride (50 ml) sa pridal po kvapkách trifluóracetánhydrid (1,46 ml,

10,50 mmól). Po jednominútovom miešaní sa zmes naliala

SK 281442 Β6 do vody a extrahovala sa metylénchloridom (3 x 20 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým a sfiltrovali cez krátku vrstvu silikagélu (20 % etylacetát/hexán) a získal sa l-(7-nitro(l,2, 3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid: (1,90 g, 48%, dva kroky); hmotn. spektr. (M+H)⁺= 379.

c) 1 -(7-Amino-( 1,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmety 1)trifluóracetamid

K miešanému roztoku l-(7-nitro-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamidu (1,91 g, 5,05 mmól) v THF/MeOH (100 ml, 1:1) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi=0,689.10⁴Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala cez celit a zahustila sa, pričom sa získal l-(7-amino(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamid, ktorý bol podľa TLC homogénny a ktorý sa použil ihneď v ďalšom reakčnom kroku.

d) N-(( 1 -Fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

K roztoku l-(7-amino-(l,2,3,4-tetrahydronaftyl))-N-(fenylmetyl)trifluóracetamidu (1,76 g, 5,05 mmól) v izopropanole (10 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodid (1,44 g, 5,05 mmól). Zmes, ktorá vznikla sa miešala počas 14 hodín, potom sa zriedila metanolom (6 ml) a 2N NaOH (6 ml) a zohrievala na teplotu 50 °C počas 0,5 hodiny. Potom sa zmes naliala do vody a extrahovala etylacetátom (3 x 30 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili sa na olejovitý produkt. Pôsobením IPA/HBr sa získal N-((2-(fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamiddihydrobromid vo forme bielej pevnej látky: (0,53 g, 20 %); b. t.260-262 °C.

Príklad 14

N-(( 1 -(Fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) 6-Acetamido-( 1 -((fényl)metyl)amino)indan

6-Acetamido-l-indanón (5,0 g, 27,6 mmól), benzylamín (3,1 ml, 27,9 mmól) a titánizopropoxid (10,2 ml, 34,5 mmól) sa zmiešali a miešali počas 1 hodiny. Získaná zmes sa zriedila absolútnym etanolom (30 ml), pridal sa k nej nátriumkyanoborohydrid (1,2 g, 19,3 mmól) a miešala sa počas 20 hodín. Pevný podiel sa odfiltroval a premyl etanolom. Etanolický podiel sa skoncentroval a zostávajúci olej sa rozpustil v etylacetáte a extrahoval sa IN HCI (3 x x 50 ml). Vodná vrstva sa zneutralizovala 2N NaOH a extrahovala sa etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a odparili, pričom sa získal olejovitý produkt, ktorý sa použil bez čistenia v ďalšom reakčnom kroku.

b) 6-Amino-( 1 -((fenyl)metyl)amino)indan

6-Acetamido-(l-((fenyl)metyl)amino)indan sa varil pod spätným chladičom so 4N HCI (50 ml) počas 20 minút, potom sa ochladil a extrahoval etylacetátom (3 x 50 ml). Vodná vrstva sa zneutralizovala 2N NaOH a extrahovala sa etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili sa na olejovitý produkt. Tento olej sa rozpustil v IPA a po reakcii s IPA/HC1 poskytol dihydrochlorid: (2,0 g, 24 % pri dvoch krokoch); b. t.: rozklad pri teplote nad 250°C.

c) N-((l-(Fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid

K 6-amino-( 1 -((fenyl)metyl)amino)indan-dihydrochloridu (2,0 g, 6,4 mmól) v DMF (20 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodid (2,2 g, 7,7 mmól) a pyridín (0,57 ml, 7,1 mmól). Získaná zmes sa miešala pri teplote 50 °C počas 20 hodín, potom sa naliala do zalkalizovanej vody a extrahovala etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali, zahustili a chromatografovali sa na silikagéli (6 % metanol/metylénchlorid). Získané extrakty sa skoncentrovali na olejovitý produkt, ktorý sa potom rozpustil v metanole, pridal sa IPA/HC1 a éter. Pevné podiely sa oddelili filtráciou a premyli éterom: (1,1 g, 40 %); b. t.: rozklad nad 180 °C.

Príklad 15

Nasledujúca zlúčenina sa pripravila podľa metódy uvedenej v príklade 14;

N-((l-(Fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid: b. t.: rozklad nad 200 °C.

Príklad 16

N-((2-(Fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaň-7-yl)-2-furánkarboximidamid

a) 2-((Fenyl)karbonyl)amino-7-nitrotetralín

K 2-amino-7-nitrotetralínu (2,8 g, 14,5 mmól) v THF (50 ml) a 10% roztoku uhličitanu draselného (100 ml) sa pridal benzoylchlorid (1,7 ml, 15,3 mmól). Po pridaní celého množstva sa reakčná zmes zriedila vodou na objem 250 ml. Vyzrážané pevné podiely sa oddelili filtráciou, premyli vodou a vysušili vo vákuu: (4,2 g, 98 %), b. t. 194- 198 °C.

b) 2-((Fenyl)metyl)amino-7-mtrotetralfahydrochlorid

K 2-((fenyl)karbonyl)amino-7-nitrotetralínu (4,2 g, 14,1 mmól) v bezvodom THF (100 ml) sa pridal bóran-THF (49,3 ml, IM THF, 49,3 mmól). Táto zmes sa zohrievala pod spätným chladičom počas 5 hodín, ochladila sa na teplotu 0 °C a reakcia sa zastavila pridaním 4N HCI po kvapkách. Zmes sa potom znova zohrievala pod spätným chladičom počas 1 hodiny, zahustila sa vo vákuu a pevný podiel sa odfiltroval (premyl vodou) a vysušil vo vákuu: (3,5 g, 78 %), b. t. nad 300 °C.

c) 2-((Fenyl)metyl)amino-7-aminotetralínhydrochlorid

K miešanému roztoku 2-((fenyl)metyl)amino-7-nitrotetralínu (2,0 g, 6,3 mmól) v MeOH (100 ml) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto reakčná zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi = 0,689.10⁴ Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na olejovitý produkt, ktorý bol podľa TLC homogénny a použil sa ihneď v ďalšom reakčnom kroku.

d) N-((2-(Fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-íuránkarboximidamid

K 2-((fenyl)metyl)amino-7-aminotetralínhydrochloridu (1,8 g, 6,3 mmól) v DMF (20 ml) sa pridal S-metyl-2-furántiokarboximidhydrojodid (2,0 g, 7,5 mmól), Táto zmes sa miešala počas 2 hodín pri teplote 45 °C, potom sa naliala do zalkalizovanej vody a extrahovala etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili na olejovitý produkt. Získaný olej sa rozpustil v metanole, pridal sa IPA/HC1 a éter. Pevné podiely sa oddelili filtráciou a premyli éterom: (2,2 g, 84 %), b. t.: rozklad nad 195 °C.

Príprava chirálnych medziproduktov pre príklady 17 a 18

Štiepenie 2-amino-7-nitrotetralínu

2-Amino-7-nitrotetralín (30 g, 156 mmól) rozpustený v 200 ml acetónu sa pridal k dibenzoyl-D-kyseline vínnej (58,7 g 164 mmól) takisto rozpustenej v 200 ml acetónu. Získaná hustá pasta sa sfiltrovala a premyla acetónom. Táto pasta sa varila pod spätným chladičom s 3 1 zmesi voda/etanol/acetonitril (1 : 1 : 1) a potom sa za horúca sfiltrovala. Pevný podiel, získaný filtráciou sa prekryštalizoval z uvedenej zmesi rozpúšťadiel (3x): získalo sa (5,25 g, 6%) jedného izoméru, ako sa preukázalo chirálnou kapilárnou zónovou elektroforézou, b. t. 240 - 242 °C.

Podobne sa mohla použiť dibenzoyl-L-vínna kyselina na získanie opačného enantioméru s použitím toho istého systému rozpúšťadiel, ktorý sa opísal skôr: získalo sa (5,3 g, 6 %) jedného izoméru, ako sa preukázalo chirálnou kapilárnou zónovou elektroforézou, b. t.240 - 242 °C.

Príklad 17 (+)-N-((2-(Fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7 -y 1)-2-tiofénkarboximidamid

a) (+)-2-((Fenyl)karbonyl)amino-7-nitrotetralín

K 2-amino-7-nitrotetralínu (1,8 g, 9,39 mmól, získaného cez dibezoyl-D-vínnu kyselinu) v THF (50 ml) a 10 % roztoku uhličitanu draselného (100 ml) sa pridal benzoylchlorid (1,2 ml, 10,1 mmól). Po pridaní celého množstva sa reakčná zmes zriedila vodou na objem 250 ml. Vyzrážané pevné podiely sa oddelili filtráciou, premyli vodou a vysušili sa vo vákuu: (2,8 g, 100%), b. t. 208 - 209 °C, [a]_D+21,9 (c 0,33 DMSO).

b) (+)-2-((Fenyl)metyl)amino-7-nitrotetralínhydrochlorid

K (+)-2-((fenyl)karbonyl)amino-7-nitrotetralínu (2,8 g, 9,4 mmól) v bezvodom THF (100 ml) sa pridal bóran-THF (32,8 ml, IM THF, 32,8 mmól). Táto zmes sa zohrievala pod spätným chladičom počas 5 hodín, ochladila sa na teplotu 0 °C a reakcia sa zastavila pridaním 4N HC1 po kvapkách. Zmes sa potom znova zohrievala pod spätným chladičom počas 1 hodiny, odparila sa vo vákuu a pevný podiel sa odfiltroval (premyl vodou) a vysušil vo vákuu: (2,8 g, 94 %), b. t. nad 300 °C, [a]_D+51,0 (c 0,33 DMSO).

c) (+)-2-((Fenyl)metyl)amino-7-aminotetralínhydrochlorid

K miešanému roztoku (+)-2-((fenyl)metyl)amino-7-nitrotetralínu (2,8 g, 8,7 mmól) v MeOH (100 ml) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto reakčná zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi = 0,689.10⁴ Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na pevný sklovitý produkt, ktorý bol podľa TLC homogénny; [a]_D+73,3 (c 0,87 DMSO).

d) (+)-N-((2-(Fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

K(+)-2-((fenyl)metyl)amino-7-aminotetralínhydrochloridu (2,5 g, 8,7 mmól) v DMF (20 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodid (3,0 g, 10,4 mmól). Táto zmes sa miešala počas 4 hodín pri teplote 45 °C, potom sa naliala do zalkalizovanej vody a extrahovala etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali a zahustili sa na olejovitý produkt. Získaný olej sa rozpustil v metanole, pridal sa IPA/HC1 a éter. Pevné podiely sa oddelili filtráciou a premyli éterom. Po jednom prekryštalovaní zo zmesi IPA/MeOH/Et₂O sa získala biela pevná látka:

(2,5 g,66 %), b. t. :rozklad nad 260 °C, [a]_D+44,5 (c 0,62 DMSO).

Príklad 18 (-)-N-((2-(Fcnylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

a) (-)-2-((Fenyl)karbonyl)amino-7-nitrotetralín

K 2-amino-7-nitrotetralínu (1,8 g, 9,39 mmól, získaného cez dibenzoyl-L-kyselinu vínnu) v THF (50 ml) a 10 % roztoku uhličitanu draselného (100 ml) sa pridal benzoylchlorid (1,2 ml, 10,1 mmól). Po pridaní celého množstva sa reakčná zmes zriedila vodou na objem 250 ml. Vyzrážané pevné podiely sa oddelili filtráciou, premyli vodou a vysušili vo vákuu: (2,8 g, 100 %), b. t. 208 - 209 °C, [a]_D-24,0 (e 0,87 DMSO).

b) (-)-2-((Fenyl)metyl)amino-7-nitrotetralínhydrochlorid

K (-)-2-((fenyl)karbonyl)amino-7-nitrotetralínu (2,8 g, 9,4 mmól) v bezvodom THF (100 ml) sa pridal bóran-THF (32,8 ml, IM THF, 32,8 mmól). Táto zmes sa zohrievala pod spätným chladičom počas 5 hodín, ochladila sa na teplotu 0 °C a reakcia sa zastavila pridaním 4N HC1 po kvapkách. Zmes sa potom znova zohrievala pod spätným chladičom počas 1 hodiny, odparila sa vo vákuu a pevný podiel sa odfiltroval (premyl vodou) a vysušil vo vákuu: (2,8 g, 94 %), b. t. nad 300 °C, [a]_D-50,4 (c 0,39 DMSO):

c) (-)-2-((Fenyl)metyl)amino-7-aminotetralínhydrochlorid

K miešanému roztoku (-)-2-((fenyl)metyl)amino-7-nitrotetralínu (2,8 g, 8,7 mmól) v MeOH (100 ml) sa pridalo katalytické množstvo 10 % Pd/C. Táto reakčná zmes sa hydrogenovala pri tlaku 50 psi (1 psi=0,689.10⁴Pa) počas 1 hodiny, sfiltrovala sa cez celit a zahustila na pevný sklovitý produkt, ktorý bol podľa TLC homogénny; [a]_D+74,6 (c 0,80 DMSO).

d) (-)-N-((2-(Fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid

K (-)-2-((fenyl)metyl)amino-7-aminotetralínhydrochloridu (2,5 g, 8,7 mmól) v DMF (20 ml) sa pridal S-metyl-2-tioféntiokarboximidhydrojodid (3,0 g, 10,4 mmól). Táto zmes sa miešala počas 4 hodín pri teplote 45 °C, potom sa naliala do zalkalizovanej vody a extrahovala etylacetátom (3 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyli vodou, vysušili síranom horečnatým, sfiltrovali sa a zahustili na olejovitý produkt. Získaný olej sa rozpustil v metanole, pridal sa IPA/HC1 éter. Pevné podiely sa oddelili filtráciou a premyli éterom. Po jednom prekryštalovaní zo zmesi rozpúšťadiel IPA/MeOH/Et₂O sa ziskala pevná látka: (2,7 g, 71 %), b. t. : rozklad nad 260 °C, [a]_D-44,5 (c 0,57 DMSO).

Príklad 19 N-(2,3,4,5-Tetrahydro-lH-3-benzazepín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid

a) 2,3,4,5-Tetrahydro-lH-3-benzazepín-7-amín-monohydrochlorid

K roztoku 2,3,4,5-tetrahydro-7-nitro-lH-3-benzazepínhydrochloridu (1,68 g,7,35 mmól)v etanole (100 ml) sa pridalo 5 % paládium na uhlíku (0,2 g), roztok sa vložil do Paarovho hydrogenačného aparátu a pripustil sa vodík s tlakom 45 psi (1 psi=0,689.10⁴Pa). Po dosiahnutí teoretickej spotreby vodíka (2 hod.) sa katalyzátor odfiltroval a premyl vodou (25 ml). Získaný filtrát sa odparil. Potom sa pridal absolútny etanol a reakčná zmes sa odparila, aby sa

SK 281442 Β6

Príklad 24 N-(Izochinolín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid

a) 7-Nitroizochinolín

Roztok 7-nitro-3,4-dihydroizochinolínu (3,00 g, 17,0 mmól) a 5 % paládia na uhlíku (3,0 g) v dekaline (75 ml) sa zohrieval pod spätným chladičom počas 3 hodín. Po ochladení sa roztok sfiltroval a katalyzátor sa premyl chloroformom (200 ml). Po oddestilovaní rozpúšťadla vo vákuu sa získal 7-nitroizochinolín vo forme žltohnedej pevnej látky. MS 175 (M+H).

b) Izochinolín-7-amín

7-Nitroizochinolín (1,62 g, 9,25 mmól) v etanole (150 ml) sa hyrogenoval v Paarovom hydrogenačnom aparáte s katalyzátorom, ktorým bolo 5 % paládium na uhlíku (0,2 g) počas 3 hodín pri tlaku 50 psi (1 psi=0,689.10^{I * * 4}Pa). Reakčná zmes sa potom sfiltrovala a rozpúšťadlo sa odparilo pri zníženom tlaku. Prekryštalizovaním pevnej látky v etanole (3 ml) sa získal izochinolín-7-amín (0,98 g) ako žltohnedý pevný produkt. MS 145 (M+H), NMR (CDClj) 9,02(s,lH),8,29(d,lH),7,63(d,lH),7,47 (d, 1H),7,13(dd,H),7,03(d, lH),4,00(široký,2H).

c) N-(Izochinolín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid

Roztok izochinolín-7-amínu (0,96 g, 6,7 mmól) a S-metyl-2-tioféntiokarboximidu (2,42 g, 8,36 mmól) v izopropanole (4 ml) a DMF (4 ml) sa miešal počas 18 hodín. Tento roztok sa potom nalial do zriedeného hydroxidu sodného a extrahoval sa metylénchloridom. Získaný extrakt sa vysušil síranom horečnatým a po odparení rozpúšťadla sa získal olejovitý produkt, ktorý státím stuhol. Látka sa čistila chromatografiou na kolóne naplnenej silikagélom (5 % metanol v chloroforme nasýtený plynným amoniakom) a získalo sa 1,31 g pevnej látky. Táto látka sa prekryštalizovala z etylacetátu (25 ml) a získalo sa 1,05 g látky uvedenej v nadpise vo forme belavého produktu. B. t. 177,5 -178,5 °C.

Claims (18)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Bicyklický amidínový derivát všeobecného vzorca (I)

   I Ti—NIí

   D (I), kde

   D predstavuje päťčlenný heterocyklický aromatický kruh obsahujúci 1 až 4 heteroatómy vybrané z O, N alebo S, prípadne substituovaný na uhlíkovom atóme halogénom, trifluórmetylovou skupinou, alkylom Cl až 6, nitro- alebo kyanoskupinou, a ktorý je pripojený k zostávajúcej časti zlúčeniny všeobecného vzorca (I) cez uhlíkový atóm;

   A predstavuje N(X) alebo CH(-CH₂)_m-NXY);

   U predstavuje NH, O alebo CH₂;

   V predstavuje (CH₂)_a; W predstavuje (CH₂)b; a a b nezávisle od seba predstavujú celé čísla od 0 do 3, za predpokladu, že a + b je v rozsahu 1 až 3;

   X a Y nezávisle od seba predstavujú vodík, alkyl Cl až 6, alebo skupinu -(CH₂)„Q alebo -NXY predstavuje piperidinyl, pyrolidinyl, morfolinyl alebo tetrahydroizochinolinyl;

   Q predstavuje bifenyl alebo fenyl prípadne substituovaný jednou alebo niekoľkými skupinami vybranými zo skupín alkyl Cl až 6, alkoxyl Cl až 6, perfluóralkyl Cl až 6, halogén, nitro- alebo kyano-;

   m predstavuje celé číslo 0 až 5; n predstavuje celé číslo 0 až 6; alebo reťazec U-V-A-W je už definovaný, ale s tým, že môže byť nenasýtený;

   alebo reťazec U-V-A-W môže byť predstavovaný reťazcom -NH-CH₂-CH₂-O-substituovaným na uhlíkovom atóme skupinou -(CH₂)_m-NXY, pričom m, X a Y sú definované uvedeným spôsobom, a príslušné farmaceutický prijateľné soli a enantioméry týchto zlúčenín.
2. 2. Zlúčenina všeobecného vzorca (I), podľa nároku 1, ktorá má štruktúru definovanú vzorcom (IA):

   D (IA), kde

   T predstavuje C₃.₅ nasýtený alebo nenasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY; -O(CH₂)₂-NHsubstituovaný -(CH₂)_m-NXY; alebo -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)b-;

   X a Y nezávisle od seba predstavujú vodík, alkyl Cl až 6, alebo skupinu -(CH₂)„Q alebo -NXY predstavuje piperidinyl, pyrolidinyl, morfolinyl alebo tetrahydroizochinolinyl;

   Q predstavuje fenyl, prípadne substituovaný alkylom Cl až 6, alkoxylom Cl až 6, trifluórmetylom, halogénom, nitro- alebo kyanoskupinou; a

   U, m, n, a, b a D sú definované uvedeným spôsobom, ale s tým, že ak T predstavuje -U-(CH₂)_a -N(X)-(CH₂)_b a X predstavuje -(CH₂)„Q, predstavuje n celé číslo medzi 0 a 5, ₄.

   a príslušné farmaceutický prijateľné soli a enantioméry týchto látok.
3. 3. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 2, kde T predstavuje C₃.₅ nasýtený alebo nenasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY; alebo -O(CH₂)₂-NH substituovaný -(CH₂)_m-NXY; a X a Y nezávisle predstavujú vodík, alkyl Cl až 6 alebo skupinu -(CH₂)„Q.
4. 4. Zlúčenina všeobecného vzorca (I), podľa nároku 2 alebo nároku 3, kde T predstavuje C₃.₅ nasýtený alebo nenasýtený alkylénový reťazec substituovaný -(CH₂)_m-NXY.
5. 5. Zlúčenina všeobecného vzorca (I), podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 4, kde m predstavuje 0 alebo 1.
6. 6. Zlúčenina všeobecného vzorca (I), podľa nároku 2, kde T predstavuje -U-íCHjlaNjXj-ÍCHjji, a X predstavuje vodík, alkyl Cl až 6, alebo skupinu -(CH₂)_nQ.
7. 7. Zlúčenina podľa nároku 2 alebo nároku 6, kde T predstavuje -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)b- a U predstavuje CH₂.
8. 8. Zlúčenina podľa nároku 2, 6 alebo 7, kde T predstavuje -U-(CH₂)_a-N(X)-(CH₂)_b- a a+b sú 1 alebo 2.
9. 9. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde n predstavuje 0, 1 alebo 2 a X a/alebo Y predstavuje -(CH₂)„Q.
10. 10. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde X a/alebo Y predstavuje -(CH₂)„Q a Q predstavuje fenyl, prípadne substituovaný alkylom Cl až 6 alebo halogénom.
11. 11. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde D predstavuje päťčlenný heterocyklický kruh obsahujúci jeden heteroa tóm vybraný z O, N alebo S, prípadne substituovaný na uhlíkovom atóme halogénom.
12. 12. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 11, kde D predstavuje tienyl, pyrolyl alebo furyl.
13. 13. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 12, kde D predstavuje 2-tienyl.
14. 14. Zlúčenina všeobecného vzorca (I), ktorá je: N-((2-(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid N-((2-(fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-((2-amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-(( 1 -amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-((2-amino)-indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid; N-((2-(metyl)(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)2-tiofénkarboximidamid;

    N-(( 1 -amino)indan-6-y l)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-(( 1 -(fenylmetyl)amino)indan-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid

    N-((2-((3-chlórfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín;

    N-((2-((2-metylfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín;

    N-((2-((3-metylfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín;

    N-((2-((4-metylfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidin;

    N-((2-(etyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín; N-((2-(((4-fenyl)fenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín;

    N-((2-(((4-hexyl)fenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín;

    N-((2-((3-brómfenyl)metyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboxamidín;

    N-((2-((3-chlórfenyl)metyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-((2-(fenylmetyl)(metyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-((l-(fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronafi-7-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-(( 1 -(fenylmetyl)amino)indan-5-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-(( 1 -(fenylmetyl)amino)-1,2,3,4-tetrahydronaft-6-yl)-2-tiofénkarboximidamid;

    N-((2-(fenylmetyl)amino)-l,2,3,4-tetrahydronaft-7-yl)-2-íuránkarboximidamid;

    N-(2,3,4,5-tetrahydro-lH-3-benzazepín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid;

    N-(l,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid;

    N-(2-benzyl-l,2,3,4-tetrahydroizochinolín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid;

    N-( 1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-5-yl)tiofén-2-karboximidamid;

    N-( 1,2,3,4-tetrahydroizochinolín-6-yl)tiofén-2-karboximidamid;

    N-(izochinolín-7-yl)tiofén-2-karboximidamid;

    alebo ich farmaceutický prijateľné soli alebo enantioméry.
15. 15. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z predchádzajúcich nárokov na použitie ako farmaceutický preparát.
16. 16. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca (I), vyznačujúci sa tým, že zahŕňa:

    a) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (II) kde U, V, A a W zodpovedajú symbolom definovaným v nároku 1, so zlúčeninou vzorca (III) r

    z\ (III), kde D je definované takisto ako v nároku 1 a L je odchádzajúca skupina;

    b) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (IV) (IV), kde U, V,A a W sú definované takisto ako v nároku 1 a HA je kyselina, so zlúčeninou vzorca (V)

    D- (V) kde D je definované takisto ako v nároku 1;

    c) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje N(X) a X predstavuje alkyl C1 až 6 alebo skupinu -(CH₂)_nQ reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (1), v ktorom X predstavuje vodík so zlúčeninou vzorca (VI)

    R⁹ L (VI), kde R’predstavuje alkyl C1 až 6 alebo skupinu -(CH₂)_nQ a L je odchádzajúca skupina;

    d) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY) a aspoň jeden symbol X alebo Y predstavuje alkyl C1 až 6 alebo skupinu -(CH₂)_nQ, reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom jeden alebo obidva symboly X a Y predstavujú vodík, so zlúčeninou vzorca VI;

    e) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY) a m predstavuje celé číslo od 1 do 5, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (Vil)

    I

    XYNCOíCHj)^! — HC..

    (VII), kde U, V, W, X,Y a D sú definované takisto ako v nároku 1;

    f) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_ra-NXY) a ako X tak aj Y predstavujú vodík, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (VIII)

    OjN-íCHAn---^H (VIII),

    SK 281442 Β6 kde U, V, W, m a D sú definované takisto ako v nároku 1;

    g) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY), X predstavuje vodík a m predstavuje celé číslo od 1 do 5, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (IX)

    19. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 14 na výrobu liekov na liečbu alebo na profylaxiu neurodegeneratívnych ochorení, migrény alebo prevencie a zmeny tolerancie na opiáty a diazepíny alebo na liečenie drogových závislostí.

    Y-N’CHCCHJm.r^-

    NH \=NH

    D

    Koniec dokumentu (IX), kde U,V,W,D a Y sú definované takisto ako v nároku 1;

    h) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_ra-NXY), symbol X alebo Y predstavuje vodík a druhý symbol predstavuje skupinu -(CH₂)„Q v ktorom n predstavuje celé číslo od 1 do 6, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (X)

    QíCHjJn.iCONHfCHjlni— ^H (X), kde Q, m, U, V, W a D sú definované takisto ako v nároku i;

    i) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-(CH₂)_m-NXY), symbol X alebo Y predstavuje vodík a druhý symbol predstavuje skupinu -(CH₂)„Q v ktorom n predstavuje celé číslo od 1 do 6, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (XI)

    QtCHjJ.nCH-N-fCH^ň— (XI), kde Q, m, U, V, W a D sú definované takisto ako v nároku 1; alebo

    j) prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom A predstavuje CH(-NXY) a X predstavuje vodík, redukciou zodpovedajúcej zlúčeniny vzorca (XII) (ΧΠ), kde U, V, W, D a Y sú definované takisto ako v nároku 1; a v prípade potreby alebo nutnosti prevádzanie výslednej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej inej soli na jej farmaceutický prijateľnú soľ, alebo naopak.
17. 17. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje zlúčeninu uvedenú v ktoromkoľvek nároku 1 až 14 spolu s farmaceutický prijateľnou zried’ovacou látkou alebo nosičom.
18. 18. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek nároku 1 až 14 na výrobu liekov na liečbu alebo na profylaxiu ochorení alebo stavov, ku ktorým prispieva syntéza alebo nadmerná syntéza NO-syntázy.