SK281368B6 - Method for obtaining estrogens from mare urine - Google Patents
Method for obtaining estrogens from mare urine Download PDFInfo
- Publication number
- SK281368B6 SK281368B6 SK245-99A SK24599A SK281368B6 SK 281368 B6 SK281368 B6 SK 281368B6 SK 24599 A SK24599 A SK 24599A SK 281368 B6 SK281368 B6 SK 281368B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- urine
- water
- mixture
- resin
- adsorption resin
- Prior art date
Links
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 title description 20
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 title description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 47
- 229940035811 conjugated estrogen Drugs 0.000 claims abstract description 40
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 57
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 57
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 17
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 12
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 11
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 11
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- -1 aliphatic ketones Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 8
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000012465 retentate Substances 0.000 claims description 6
- 235000003092 Artemisia dracunculus Nutrition 0.000 claims description 5
- 240000001851 Artemisia dracunculus Species 0.000 claims description 5
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims description 5
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000002170 ethers Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000003791 organic solvent mixture Substances 0.000 claims 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 abstract 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 13
- HVDGDHBAMCBBLR-UHFFFAOYSA-N enterolactone Chemical compound OC1=CC=CC(CC2C(C(=O)OC2)CC=2C=C(O)C=CC=2)=C1 HVDGDHBAMCBBLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- QTTMOCOWZLSYSV-QWAPEVOJSA-M equilin sodium sulfate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4C3=CCC2=C1 QTTMOCOWZLSYSV-QWAPEVOJSA-M 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N estrone 3-sulfate Chemical class OS(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 5
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 4
- 150000001896 cresols Chemical class 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N Dimethoxyethane Chemical compound COCCOC XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 2
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- SBZXBUIDTXKZTM-UHFFFAOYSA-N diglyme Chemical compound COCCOCCOC SBZXBUIDTXKZTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- JKKFKPJIXZFSSB-UHFFFAOYSA-N 1,3,5(10)-estratrien-17-one 3-sulfate Natural products OS(=O)(=O)OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNHGVULTSGNVIX-UHFFFAOYSA-N 1-(2-ethoxyethoxy)ethanol Chemical compound CCOCCOC(C)O BNHGVULTSGNVIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004208 3-hydroxyphenyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C([H])C(*)=C1[H] 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 206010003439 Artificial menopause Diseases 0.000 description 1
- 244000248349 Citrus limon Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046555 Urinary retention Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000005233 alkylalcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124339 anthelmintic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000921 anthelmintic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- RHDGNLCLDBVESU-UHFFFAOYSA-N but-3-en-4-olide Chemical compound O=C1CC=CO1 RHDGNLCLDBVESU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000002070 germicidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229920001225 polyester resin Polymers 0.000 description 1
- 239000004645 polyester resin Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/22—Urine; Urinary tract, e.g. kidney or bladder; Intraglomerular mesangial cells; Renal mesenchymal cells; Adrenal gland
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J75/00—Processes for the preparation of steroids in general
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Lubrication Of Internal Combustion Engines (AREA)
- Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Spôsob získavania extraktu obsahujúceho prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov z moču kobýl sa uskutočňuje extrakciou pevnej fázy zmesi konjugovaných estrogénov z moču žrebných kobýl na neiónových semipolárnych polymérnych adsorpčných živiciach.ŕA method for obtaining an extract comprising a natural mixture of conjugated estrogens from urine urine is carried out by extracting the solid phase of a mixture of conjugated estrogens from urine of the mares on non-ionic semipolar polymer adsorbents.
Description
Oblasť technikyTechnical field
Predložený vynález sa týka získania prirodzenej zmesi konjugovaných estrogénov z moču žrebných kobýl.The present invention relates to obtaining a natural mixture of conjugated estrogens from marrow urine.
Doterajší stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION
Estrogény sú v lekárstve používané na hormonálnu substitučnú terapiu. Hlavne sú zmesi estrogénov používané na liečbu a prevenciu ťažkostí vyskytujúcich sa u žien v období prechodu po prirodzenej alebo umelej menopauze. Pritom sa prirodzené zmesi konjugovaných estrogénov, ktoré sa vyskytujú v moči žrebných kobýl, ukázali ako obzvlášť účinné a dobre znášanlivé.Estrogens are used in medicine for hormone replacement therapy. In particular, estrogen mixtures are used for the treatment and prevention of difficulties experienced in women during the transition period following natural or artificial menopause. The natural mixtures of conjugated estrogens found in the urine of the mares have proved to be particularly effective and well tolerated.
Rozpustený obsah pevných látok v moči žrebných kobýl (= pregnant mares urine, v nasledujúcom skrátené ako „PMU“) môže kolísať prirodzene v širokých rozsahoch a všeobecne leží v rozsahu 40-90 g sušiny na liter. Okrem močoviny a iných obvyklých látok obsahujúcich moč sú v obsahu pevných látok PMU obsiahnuté fénolické zložky v množstvách cca 2-5 hmotn. % vztiahnuté na sušinu. Medzi týmito fenolickými zložkami sa nachádzajú krezoly a ako HPMF známy dihydro-3,4-bis[3hydroxyfenyl)metyl]2(3H)-furanón. Tieto látky sa môžu vyskytovať vo voľnej alebo konjugovanej forme. V PMU je obsiahnutá prirodzená zmes estrogénov, ktorá ďalekosiahlo existuje v konjugovanej forme, napr. ako sodná soľ poloesteru kyseliny sírovej (v nasledujúcom skrátené ako „sulfátová soľ“). Obsah konjugovaných estrogénov (vypočítaný ako sulfátová soľ estrogénov) môže byť medzi 0,3 a 1 hmotn. % vztiahnuté na sušinu.The dissolved solids content of urine mares (= pregnant mares urine, hereinafter abbreviated as "PMU") can fluctuate naturally over wide ranges and generally lies in the range of 40-90 g dry matter per liter. In addition to urea and other conventional urine-containing substances, the phenolic components are contained in the PMU solids in amounts of about 2-5 wt. % based on dry matter. Among these phenolic components are cresols and known as HPMF dihydro-3,4-bis [3-hydroxyphenyl) methyl] 2 (3H) -furanone. These may be in free or conjugated form. The PMU contains a natural mixture of estrogens, which extensively exists in conjugated form, e.g. as the sodium salt of a semi-sulfuric acid ester (abbreviated hereinafter as the “sulphate salt”). The conjugated estrogen content (calculated as estrogen sulfate salt) may be between 0.3 and 1 wt. % based on dry matter.
Zvyčajne sú extrakty z PMU obsahujúce konjugované estrogény získavané extrakciou pomocou polárnych, s vodou sa nemiešateľných alebo len málo miešateľných organických rozpúšťadiel, ako sú napr. etylester kyseliny octovej, n-butanol alebo cyklohexanol. Pri takých extrakciách kvapalina-kvapalina sa však vyskytuje veľký počet problémov, ako je silná tvorba peny, tvorba sedimentu, tvorba emulzie a zlé delenie fáz. Všeobecne je potrebné viac extrakčných krokov, čo vedie ku stratám a iba k čiastočnému získaniu obsahu estrogénov.Typically, PMU extracts containing conjugated estrogens are obtained by extraction with polar, water-immiscible or only slightly miscible organic solvents, such as e.g. ethyl acetate, n-butanol or cyclohexanol. However, such liquid-liquid extractions have a large number of problems, such as strong foam formation, sediment formation, emulsion formation and poor phase separation. In general, more extraction steps are required, resulting in losses and only partial recovery of estrogen content.
Von H- L. Bradlowom bolo roku 1968 (pozri Steroidy II (1968), 265-272) navrhnuté na extrakciu konjugovaných estrogénov z moču použitie Amberlitu 2 XAD-2R, neutrálne nepoláme hydrofóbne polyesterové živice firmy Rohm a Haas. Uvedená kapacita adsorpcie je malá. Podľa Bradlowa sa eventuálne zriedený moč vedie s nízkou prietokovou rýchlosťou cez stĺpec obsahujúci danú živicu. Estrogény sú eluované metanolom alebo etanolom. Nie sú však urobené žiadne údaje o ostatných látkach obsiahnutých v eluáte obsahujúcom estrogény.Von H-L. Bradlow was proposed in 1968 (see Steroids II (1968), 265-272) to extract conjugated estrogens from urine using Amberlite 2 XAD-2 R , neutrally non-polar hydrophobic polyester resins from Rohm and Haas. Said adsorption capacity is small. According to Bradlow, eventually diluted urine is passed at a low flow rate through a column containing the resin. The estrogens are eluted with methanol or ethanol. However, no data are provided on other substances contained in the estrogen-containing eluate.
Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION
Úlohou tohto vynálezu je vyvinúť technický postup na získavanie prirodzenej zmesi konjugovaných estrogénov z PMU, pričom by sa zabránilo známym nevýhodám doposiaľ zvyčajných extrakcií kvapalina-kvapalina, a ktorý dodáva produkt obohatený fenolickými, moč obsahujúcimi látkami a ďalekosiahle zbavený krezolov a HPMF. Teraz bol nájdený postup, ktorým môže byť v jednej extrakcii pevnej látky na neiónovej semipolámej polymémej adsorpčnej živici získaná zmes obohatená fenolickými, moč obsahujúcimi látkami, ktorá je ďalekosiahlo zbavená krezolov a HPMF, avšak prakticky úplne obsahuje prirodzený obsah estrogénov v PMU, ktorá môže slúžiť ako východiskový materiál na výrobu farmaceutík obsahujúcich prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov z PMU ako účinnú zložku.SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a technical process for obtaining a natural mixture of conjugated estrogens from PMU while avoiding the known drawbacks of hitherto conventional liquid-liquid extractions and supplying a product enriched with phenolic urine-containing substances. A process has now been found which can be obtained in a single solid extraction on a nonionic semipolar polymer adsorption resin, a mixture enriched with phenolic urine-containing substances, which is largely devoid of cresols and HPMF but practically completely containing the natural estrogen content of the PMU, which can serve as starting material for the manufacture of pharmaceuticals containing a natural mixture of conjugated estrogens from PMU as the active ingredient.
Postup podľa vynálezu na získavanie fenolickými, moč obsahujúcimi látkami obohatené prirodzené zmesi konjugovaných estrogénov z PMU je založený na tom, žeThe process according to the invention for obtaining phenolic urine-containing substances enriched with natural mixtures of conjugated estrogens from PMU is based on the fact that:
a) sa močová kvapalina, ktorá predstavuje moč zbavený slizovitých a pevných látok, zúžený koncentrát tohto moču alebo zúžený močový retenát získaný membránovou filtráciou tohto moču, kontaktuje s príslušným množstvom semipolámej polymémej adsorpčnej živice, ktoré je dostatočné na adsorpciu zmesi konjugovaných estrogénov obsiahnutej v močovej kvapaline, a sa oddeľuje zmesou konjugovaných estrogénov nasýtená semipoláma polyméma adsorpčná živica od ostatnej močovej kvapaliny,(a) urine liquid, which is urine-free and solid-free urine, a constricted urinary concentrate or constricted urinary retention obtained by membrane filtration of the urine, is contacted with an appropriate amount of semipolar polymer adsorbent resin sufficient to adsorb the conjugated estrogen mixture contained in the urine , and separated by a mixture of conjugated estrogens saturated semipolar polymer adsorption resin from other urinary fluid,
b) sa semipoláma polárna adsorpčná živica nasýtená zmesou konjugovaných estrogénov premýva pracou vodou upevnenou na pH minimálne 12,0, hlavne 12,5 -14,b) washing the semipolar polar adsorption resin saturated with a mixture of conjugated estrogens with washing water fixed to a pH of at least 12.0, in particular 12.5 -14,
c) sa premytá adsorpčná živica kontaktuje na desorpciu adsorbovanej zmesi konjugovaných estrogénov s dostatočným množstvom elučnej kvapaliny, ktorá predstavuje s vodou miešateľné organické rozpúšťadlo zo skupiny s vodou miešateľným éterom, nižších alkanolov a nižších alifatických ketónov alebo zmes z organického rozpúšťadla miešateľného s vodou a z eventuálne alkalický upravenej vody, eluát obsahujúci prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov od adsorpčnej živice sa oddelí a prípadne koncentruje.c) contacting the washed adsorbent resin to desorbed the adsorbed mixture of conjugated estrogens with a sufficient amount of an elution liquid which is a water miscible organic solvent of the water miscible ether group, lower alkanols and lower aliphatic ketones, or a mixture of water miscible organic solvent and possibly alkaline treated water, the eluate containing the natural mixture of conjugated estrogens from the adsorption resin is separated and optionally concentrated.
Pre daný postup podľa vynálezu môže byť používaný PMU ako taký, z neho koncentrovaný získaný koncentrát alebo membránovou filtráciou získaný retenát. Nazhromaždený moč sa najprv známym spôsobom zbaví slizovitých a pevných látok. Ako účelné sa ukazuje usadzovanie pevných a slizovitých látok a tieto sa potom oddelia známymi deliacimi spôsobmi, napr. dekantáciou, separáciou a/alebo filtráciou. Tak môže byť PMU napr. vedený cez známe deliace zariadenie, napr. cez separátor, filtračné zariadenie alebo sedimentačné zariadenie. Ako deliace zariadenie môže slúžiť napr. pieskové lôžko alebo môžu byť použité obchodne bežné separátory, napr. dýzové alebo komorové separátory. Vhodné môžu byť rovnako mikrofiltračné zariadenie alebo ultrafiltračné zariadenie, pri použití ktorých môže byť súčasne dosiahnuté ďalekosiahle zbavenie zárodkov a vírusov filtrovaného PMU.For the process of the invention PMU may be used as such, the concentrate obtained therefrom, or the retentate obtained by membrane filtration. The collected urine is first freed of mucilaginous and solid substances in a known manner. The deposition of solid and mucilaginous substances proves expedient and is then separated by known separation methods, e.g. decanting, separating and / or filtering. Thus, the PMU may e.g. guided through a known separating device, e.g. through a separator, filter device or sedimentation device. As a separating device, e.g. sand bed or commercially available separators, e.g. nozzle or chamber separators. Microfiltration equipment or ultrafiltration equipment may also be suitable in which far-reaching PMU-filtered germs and viruses can be simultaneously achieved.
Výhodne môžu byť do moču pridávané konzervačné prostriedky, dezinfekčné prostriedky (germicídy), baktericídy a/alebo anthelmintiká.Preservatives, disinfectants (germicides), bactericides and / or anthelmintics may preferably be added to the urine.
Pokiaľ miesto PMU má byť použitý skoncentrovaný PMU-retenát, môže byť tento získavaný z PMU pomocou známej membránovej filtrácie. Obsah pevných látok retenátu a jeho zloženie sa môžu meniť podľa použitého PMU a membrány použitej na membránovú filtráciu. Napr. pri použití nanofiltrátovej membrány môže byť dosiahnuté takmer bezstratové koncentrovanie obsahu estrogénu v PMU-retenáte pri súčasnom odstránení až 50 hmotn. % nízkomolekulámeho PMU. Pre daný postup podľa vynálezu môžu byť použité PMU-retenáty, ktoré boli skoncentrované až na pomer cca 1 : 10, lepšie na pomer cca 1 : 7, a ktorých objem môže byť zúžený až na cca 1/10, prednostne 1/7, pôvodného objemu PMU.If a concentrated PMU retentate is to be used instead of the PMU, it can be recovered from the PMU by known membrane filtration. The retentate solids content and composition may vary depending on the PMU used and the membrane used for membrane filtration. E.g. using a nanofiltrate membrane, an almost loss-free concentration of estrogen content in the PMU-retentate can be achieved while removing up to 50 wt. % of low molecular weight PMU. PMU retentates which have been concentrated up to about 1: 10, preferably about 1: 7, and whose volume can be reduced to about 1/10, preferably 1/7, of the original volume of PMU.
Semipolámymi polymémymi adsorpčnými živicami, použiteľnými v kroku a) daného postupu, sú porézne organické neiónové polyméry, ktoré majú oproti nepolámym hydrofóbnym polymérnym adsorpčným živiciam prechodovú polaritu (= napr. s dipólovým momentom aktívneho povrchu živice v rozsahu od 1,0 do 3,0, obzvlášť od 1,5 doThe semipolar polymeric adsorbent resins useful in step a) of the process are porous organic nonionic polymers having a transient polarity (= e.g. with a dipole moment of active resin surface in the range of 1.0 to 3.0) relative to the non-polar hydrophobic polymeric adsorption resin. in particular from 1.5 to 1.5
2,0 Debye) a trochu hydrofilnejšiu štruktúru, napr. živica z esterov polykarbónových kyselín. Účelne sú použité makroporézne semipoláme živice s prednostne makroretikulárnou (sieťovo usporiadanou) štruktúrou a s priemernými priemermi pórov v rozsahu od 50 do 150, prednostne 70 až 100 Angstrômov, a špecifickým povrchom v rozsahu od 300 do 900, prednostne od 400 do 500 m2/g. Ako obzvlášť vhodnými sa ukazujú makroporézne, priečne sieťované alifatické živice z esterov polykarbónových kyselín, hlavne priečne sieťované živice z polyakrylesterov, ako je napr. Amberlite X AD-7R firmy Rohma a Haasa.2.0 Debye) and a slightly more hydrophilic structure, e.g. polycarboxylic acid ester resin. Suitably, macroporous semipolar resins with a preferably macroreticular (meshed) structure and with average pore diameters in the range of 50 to 150, preferably 70 to 100 Angstroms, and a specific surface in the range of 300 to 900, preferably 400 to 500 m 2 / g are used. . Macroporous, cross-linked aliphatic resins of polycarbonic acid esters, particularly cross-linked polyacrylic ester resins, such as e.g. Amberlite X AD-7R from Rohma and Haasa.
Podľa vynálezu môže adsorpcia konjugovaných estrogénov na semipolámej adsorpčnej živici prebiehať kontaktovaním PMU alebo jeho retanátu s adsorpčnou živicou, keď sa močová kvapalina zavedie do reaktora obsahujúceho adsorpčnú živicu a je s ňou udržiavaná v kontakte v priebehu času dostatočného na adsorpciu príslušného obsahu estrogénu. Po uskutočnenej adsorpcii konjugovaných estragónov na semipolámu adsorpčnú živicu môže byť adsorpčná živica, nasýtená zmesou konjugovaných estragónov, oddelená známym spôsobom od ostatnej močovej kvapaliny. Účelnejšie môže byť močová kvapalina vedená stĺpcom obsahujúcim danú adsorpčnú živicu takou prietokovou rýchlosťou, že kontaktný čas postačí na adsorpciu daného obsahu estragónov. Vhodné sú napr. prietokové rýchlosti, ktoré zodpovedajú prietoku od 3 do 10, prednostne od 5 do 7 objemových dielov PMU/1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu. Adsorpcia je vykonávaná prednostne pri teplote miestnosti. Účelné môže byť prietoková rýchlosť močovej kvapaliny riadená reaktorom prácami pri malom pretlaku alebo podtlaku. Množstvo aplikovanej semipolámej adsorpčnej živice sa môže meniť podľa druhu použitej adsorpčnej živice a množstva obsahu pevných látok v močovej kvapaline. Pri použití PMU môže byť príkladne jeden objemový diel adsorpčnej živice, napr. priečne zosietenej alifatickej adsorpčnej živice z esterov polykarbónových kyselín, napojený až 80 objemovými dielmi vopred spracovaného PMU bez toho, aby boli preukázateľné viditeľné množstvá estrogénu v odtekajúcej močovej kvapaline. Pri použití koncentrátu alebo retenátu PMU sa zaťažovacia kapacita adsorpčnej živice redukuje prirodzene v tej miere, v ktorej sú tieto skoncentrované. Tak môže byť napr. 1 objemový diel priečne zosietenej alifatickej adsorpčnej živice z esterov polykarbónových kyselín napojený množstvom močovej kvapaliny zodpovedajúcim 20 až 80, prednostne 30 až 50, objemovým dielom PMU.According to the invention, adsorption of conjugated estrogens on the semipolar adsorption resin can be accomplished by contacting the PMU or its retanate with the adsorption resin when the urine fluid is introduced into the reactor containing the adsorption resin and maintained in contact with it over a time sufficient to adsorb the respective estrogen content. After adsorption of the conjugated tarragons to the semipolar adsorption resin has been carried out, the adsorption resin saturated with the mixture of conjugated tarragons can be separated from the other urinary fluid in a known manner. More expediently, the urinary fluid may be passed through a column containing said adsorption resin at a flow rate such that the contact time is sufficient to adsorb said tarragon content. Suitable are e.g. flow rates corresponding to a flow rate of from 3 to 10, preferably from 5 to 7 parts by volume of PMU / 1 part by volume of adsorption resin per hour. The adsorption is preferably carried out at room temperature. Conveniently, the urinary fluid flow rate can be controlled by the reactor by performing low or negative pressure. The amount of semipolar adsorption resin applied can vary depending on the type of adsorption resin used and the amount of solids content in the urinary fluid. When using PMU, for example, one part by volume of the adsorption resin may be e.g. a cross-linked aliphatic adsorption resin of polycarbonic acid esters, coupled with up to 80 parts by volume of pretreated PMU without demonstrable visible amounts of estrogen in the effluent urinary fluid. When using PMU concentrate or retentate, the loading capacity of the adsorption resin is naturally reduced to the extent that they are concentrated. Thus, e.g. 1 part by volume of a cross-linked aliphatic adsorption resin of polycarbonic acid esters connected with an amount of urine liquid corresponding to 20 to 80, preferably 30 to 50, by volume of PMU.
Semipoláma adsorpčná živica nasýtená zmesou konjugovaných estragónov sa v postupovom kroku b) premýva pracou vodou upravenou na pH minimálne 12,0, hlavne od 12,5 do 14, prednostne cca od 12,5 až 13,5. Ako pracia voda môžu byť použité vodné roztoky inertných zásaditých látok rozpustných v močovej kvapaline, ktoré sú dostatočne silné, aby boli dosiahnuté hodnoty pH aspoň 12,5. Oproti semipolámej polymémej adsorpčnej živici, sa ako inertné, vodorozpustné zásadité látky hodia prednostne vodorozpustné anorganické zásady, ako sú hydroxidy alkalických kovov alebo hydroxidy kovov alkalických zemín, hlavne hydroxid sodný. Účelne obsahuje pracia voda len zhruba také množstvo zásaditých látok, ktoré sú potrebné na dosiahnutie žiaducej hodnoty pH, prednostne cca 13. Množstvo pracej vody je zvolené tak, aby bolo dostatočné na ďalekosiahle odstránenie fenolických látok obsahujúcich moč bez toho, aby pritom bolo vymyté za zmienku stojacie množstvo konjugovaných estrogénov.The semipolar adsorption resin saturated with the conjugated tarragon mixture is washed in process step b) with washing water adjusted to a pH of at least 12.0, preferably from 12.5 to 14, preferably from about 12.5 to 13.5. As wash water, aqueous solutions of inert bases soluble in the urinary fluid and strong enough to achieve a pH of at least 12.5 can be used. Unlike the semi-polar polymeric adsorption resin, water-soluble inorganic bases such as alkali metal hydroxides or alkaline earth metal hydroxides, in particular sodium hydroxide, are preferred as inert, water-soluble bases. Suitably, the wash water contains only about the amount of alkaline substances required to achieve the desired pH, preferably about 13. The amount of wash water is selected to be sufficient to remove the urine-containing phenolic substances far beyond being washed out without mentioning it. standing amounts of conjugated estrogens.
Ako účelné sa ukazuje napr. použitie od 2 do 10, hlavne od 4 do 6, ložných objemov premývacej kvapaliny na jeden ložný objem adsorpčnej kyseliny. Pritom sa pracia voda účelne vedie reaktorom obsahujúcim adsorpčnú živicu s prietokovou rýchlosťou od 3 do 10, prednostne od 5 do 7, objemových dielov pracej vody/1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu.For example, e.g. use of from 2 to 10, in particular from 4 to 6, bed volumes of wash liquid per bed volume of adsorbent acid. The washing water is expediently passed through a reactor containing an adsorption resin having a flow rate of from 3 to 10, preferably from 5 to 7, parts by volume of washing water / 1 part by volume of adsorption resin per hour.
V kroku daného postupu c) sa nakoniec spracuje premytá adsorpčná živica nasýtená zmesou konjugovaných estrogénov s množstvom elučnej kvapaliny, ktoré je dostatočné na elúciu zmesi konjugovaných estrogénov, a získa sa eluát obsahujúci prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov PMU. Podľa vynálezu používaná elučná kvapalina predstavuje s vodou miešateľné organické rozpúšťadlo zo skupiny s vodou miešateľných éterov, nižších alkanolov a nižších alifatických ketónov alebo zmes z takého s vodou miešateľného rozpúšťadla a eventuálne alkalický upravenej vody Ako éterické zložky sa hodia s vodou miešateľné cyklické étery ako tetrahydrofurán alebo dioxán, ale tiež s vodou miešateľné étery s otvoreným reťazcom ako napr. ctylénglykoldimetyléter (=Monoglyme), dietylénglykoldimetyléter (-Diglyme) alebo etyloxyetyloxyetanol (=karbitol). Ako nižšie alkoholy sa hodia s vodou miešateľné alkylalkoholy s 1 - 4, prednostne 1 - 3, atómami uhlíka, hlavne etanol alebo izopropanol. Ako nižšie alifatické ketóny sa hodia s vodou miešateľné ketóny s 3 - 5 uhlíkovými atómami, hlavne acetón. Ako obzvlášť priaznivé sa ukazujú elučné kvapaliny, v ktorých je organickým rozpúšťadlom etanol. Účelne sú ako elučné kvapaliny používané zmesi z vopred menovaných a s vodou miešateľných organických rozpúšťadiel a eventuálne alkalický upravenej vody. Hodnota pH takých vodu obsahujúcich elučných činidiel leží v neutrálnej až alkalickej oblasti až do pH 13 a môže prednostne byť cca 10 až 12. Ako rozpúšťadlovä zložka vo vode obsahujúcej elučnej kvapaline je volené rozpúšťadlo stabilné v používanej oblasti pH. Vo vodu obsahujúcich alkalických elučných kvapalinách s hodnotami pH cca 10 až 12 sa hodia ako rozpúšťadlové zložky nižšie alkoholy, prednostne etanol. Žiadaná hodnota pH vodnatého elučného činidla sa nastavuje pridaním zodpovedajúceho množstva vodorozpustnej inertnej zásaditej látky, prednostne anorganickej zásady, napr. hydroxidu alkalického kovu alebo hydroxidu kovu alkalických zemín, hlavne hydroxidu sodného. Vo vodnatých elučných kvapalinách môže objemový pomer s vodou miešateľného organického rozpúšťadla s vodou ležať v rozsahu od 40 : 60 do 20 : 80, prednostne cca 30 : 70. Použité množstvo elučného činidla môže byť cca 3 až 10, hlavne cca 4 až 6 jeho objemu na príslušný objem adsorpčnej živice. Vhodnejšie sa elučné kvapalina vedie reaktorom obsahujúcim zmesou estrogénov napojenú adsorpčnú živicu takou prietokovou rýchlosťou, aby kontaktný čas postačoval na úplnú elúciu zmesi konjugovaných estrogénov. Pri použití zmesi etanolu s vodou v objemovom pomere 30 ; 70 sa hodia príkladne prietokové rýchlosti od 3 do 10, prednostne od 5 do 7, objemových dielov elučnej kvapaliny na 1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu. Účelne sa vykonáva elúcia v teplotnom rozsahu teploty miestnosti cca do 60 °C, prednostne pri cca 40 až 50 °C. V žiaducom prípade sa prietoková rýchlosť reguluje prácou pri ľahko zvýšenom tlaku, napr. pri pretlaku až do 0,2 bar a eluát sa zachytáva v niekoľkých frakciách. Obsahy jednotlivých eluátových frakcií konjugovaných estrogénov a fenolických, v moči obsiahnutých látok, ako sú krezoly a HPMF môžu byť určené známym spôsobom pomocou vysokovýkonnej kvapalinovej chromatografíe (=high performance liquid chromatography, skrátené ako „HPLC“).In process step c), a washed adsorption resin saturated with a mixture of conjugated estrogens with an amount of elution liquid sufficient to elute the mixture of conjugated estrogens is finally treated to obtain an eluate containing a natural mixture of conjugated estrogen PMU. The elution liquid used according to the invention is a water-miscible organic solvent of the group of water-miscible ethers, lower alkanols and lower aliphatic ketones or a mixture of such a water-miscible solvent and optionally alkaline treated water. Water-miscible cyclic ethers such as tetrahydrofuran or dioxane, but also water miscible open chain ethers such as e.g. ethylene glycol dimethyl ether (= Monoglyme), diethylene glycol dimethyl ether (-Diglyme) or ethyloxyethyloxyethanol (= carbitol). Suitable lower alcohols are water-miscible alkyl alcohols having 1-4, preferably 1-3, carbon atoms, in particular ethanol or isopropanol. Suitable lower aliphatic ketones are water-miscible ketones having 3-5 carbon atoms, especially acetone. Elution fluids in which the organic solvent is ethanol are particularly favorable. Suitably, mixtures of the above-mentioned and water-miscible organic solvents and possibly alkaline-treated water are used as elution liquids. The pH of such water-containing eluents lies in the neutral to alkaline range up to pH 13 and may preferably be about 10-12. As the solvent component in the water-containing elution liquid, the solvent selected is stable in the pH range used. In water-containing alkaline elution liquids having a pH of about 10-12, lower alcohols, preferably ethanol, are suitable as solvent components. The desired pH of the aqueous eluent is adjusted by adding a corresponding amount of a water-soluble inert base, preferably an inorganic base, e.g. an alkali metal hydroxide or an alkaline earth metal hydroxide, especially sodium hydroxide. In aqueous eluents, the volume ratio of water-miscible organic solvent with water may range from 40:60 to 20:80, preferably about 30:70. The amount of eluent used may be about 3 to 10, especially about 4 to 6, by volume. per volume of adsorption resin. More preferably, the elution liquid is passed through a reactor containing the estrogen mixture coupled to the adsorption resin at a flow rate such that the contact time is sufficient to completely elute the conjugated estrogen mixture. When using a mixture of ethanol and water in a volume ratio of 30; 70 are suitable, for example, flow rates of from 3 to 10, preferably from 5 to 7, parts by volume of elution liquid per 1 part by volume of adsorption resin per hour. Suitably, elution is carried out in a temperature range of room temperature up to about 60 ° C, preferably at about 40 to 50 ° C. If desired, the flow rate is controlled by operating at a slightly elevated pressure, e.g. at an overpressure of up to 0.2 bar and the eluate is collected in several fractions. The contents of the individual eluate fractions of conjugated estrogens and phenolic urine-containing substances such as cresols and HPMF can be determined in a known manner by means of high performance liquid chromatography (abbreviated as "HPLC").
Pri elúcii sa najprv získa slabo zafarbená až bezfarebná, prakticky estrogény neobsahujúca predkvapová frakcia, ktorej množstvo zodpovedá všeobecne cca jednému ložnému objemu. Hlavné množstvo konjugovaných estrogénov, príkladne medzi 80 a 99 % konjugovaných estrogénov existujúcich vo východiskovej PMU (v moči žrebných kobýl), sa nachádza v nasledujúcich, tmavožlto až hnedo zafarbených hlavných eluátových frakciách, ktorých množstvo zahŕňa všeobecne 2 až 4 ložné objemy. V nasledujúcich dokvapových zadných frakciách sú všeobecne obsiahnuté už len stopy konjugovaných estrogénov. Pokiaľ sú získané zadné frakcie, ktoré obsahujú ešte konjugované estrogény nad 10 hmotn. % vztiahnuté na sušinu a menej než 0,6 hmotn. % krezolov a HPMF vztiahnuté na sušinu, môžu byť tieto frakcie spojené s hlavným eluátom bohatým na estrogény na ďalšie spracovanie.The elution initially yields a slightly colored to colorless, practically estrogen-free pre-drip fraction, the amount of which generally corresponds to approximately one bed volume. The major amount of conjugated estrogens, for example between 80 and 99% of the conjugated estrogens existing in the starting PMU (in the urine of the mares), is found in the following dark yellow to brown colored eluate fractions, which generally comprise 2-4 bed volumes. In general, only traces of conjugated estrogens are generally contained in the subsequent post-run fractions. If back fractions are obtained which still contain conjugated estrogens above 10 wt. % based on dry weight and less than 0.6 wt. % of cresols and HPMF based on dry matter, these fractions may be combined with the main estrogen rich eluate for further processing.
Hlavný eluát oddelený opísaným spôsobom od adsorpčnej živice obsahuje v PMU sa vyskytujúcu prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov vedľa len malého podielu pôvodne v PMU prítomného obsahu fenolických, v moči obsiahnutých látok. Tento eluát môže slúžiť ako východiskový materiál na výrobu liečiv obsahujúcich prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov. Ak je to žiaduce, môže byť eluát ďalej zúžený známym spôsobom, aby bol získaný koncentrát ďaleko zbavený organických rozpúšťadiel, ktorý je vhodný na ďalšie galenické spracovanie. V žiaducom prípade môže byť tiež sušením rozprašovaním vyrobená zmes pevných látok zbavená elučného činidla. Pokiaľ má byť prirodzená zmes konjugovaných estrogénov použitá na výrobu pevných liekov, môže byť vhodné primiešať k eluátu obsahujúcemu konjugované estrogény ešte pred koncentrovaním alebo sušením rozprašovaním pevný nosič, aby sa týmto spôsobom získala zmes pevných látok obsahujúca konjugované estrogény a nosiče. Ako eluát obsahujúci zmes estrogénov, tak z toho vyrobený koncentrát alebo rozprašovaním vysušený pevný produkt môžu byť známym spôsobom zapracované do pevných alebo kvapalných galenických prípravkov ako napr. tabliet, dražé, kapsúl alebo emulzií. Tieto galenické prípravky môžu byť vyrábané podľa známych spôsobov s použitím zvyčajných pevných alebo kvapalných nosičov ako napr. škrobu, celulózy, mliečneho cukru (laktózy) alebo mastenca alebo kvapalných parafínov a/alebo s použitím obvyklých farmaceutických pomocných látok napr. napučiavadiel tabliet, rozpúšťacích alebo konzervačných prostriedkov. Tak môže byť produkt obsahujúci konjugované estrogény zmiešaný známym spôsobom s farmaceutickými nosičmi a pomocnými prostriedkami a daná zmes môže byť vyhotovená do vhodného dávkovacieho tvaru,The main eluate separated from the adsorption resin as described above contains a natural mixture of conjugated estrogens present in the PMU, in addition to only a small proportion of the phenolic content present in the urine present in the PMU. This eluate can serve as a starting material for the manufacture of medicaments containing a natural mixture of conjugated estrogens. If desired, the eluate can be further narrowed in a manner known per se in order to obtain a substantially free organic solvent concentrate which is suitable for further galenic processing. If desired, a sputter-free mixture of solids can also be produced by elution. If the natural mixture of conjugated estrogens is to be used for the manufacture of solid medicaments, it may be appropriate to admix the solid carrier conjugate to the eluate containing the conjugated estrogens prior to concentrating or spray drying to obtain a solids mixture containing the conjugated estrogens and carriers. Both the estrogen-containing eluate and the concentrate produced therefrom or the spray-dried solid product can be incorporated into solid or liquid galenic formulations such as e.g. tablets, dragees, capsules or emulsions. These galenic formulations can be manufactured according to known methods using conventional solid or liquid carriers such as e.g. starch, cellulose, milk sugar (lactose) or talc or liquid paraffins and / or using conventional pharmaceutical excipients e.g. tablets, diluents or preservatives. Thus, the conjugated estrogen-containing product can be admixed in a known manner with pharmaceutical carriers and excipients, and the mixture can be made into a suitable dosage form,
Nasledujúce príklady majú bližšie vysvetliť daný vynález, avšak bez toho, aby bol obmedzený jeho rozsah.The following examples are intended to illustrate the invention in more detail, but without limiting its scope.
Príklady uskutočnenia vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Príklady 1 - 3Examples 1-3
Všeobecný pracovný predpis na získanie extraktu z PMU obsahujúceho prirodzenú zmes v PMU obsiahnutých konjugovaných estrogénov, ktoré sú ďalekosiahlo obohatené fenolickými látkami obsiahnutými v moči.General Working Instructions for Obtaining a PMU Extract Containing a Natural Mixture of PMU Contained Conjugated Oestrogens That Are Widely Enriched with Phenolic Substances Contained in the Urine.
A) Adsorpcia obsahu cstrogénu PMU na semipolámej adsorpčnej živici z polyakrylesterovA) Adsorption of PMU cstrogen content on semi-polar adsorption resin from polyacrylesters
Stĺpec s výškou 30 cm s priemerom 2,4 cm je naplnený 65 ml vo vode napučanou semipolámou polyakrylesterovou adsorpčnou živicou (= Amberlite XAD-7 firmy Rohm a Haas, s veľkosťou zŕn 0,3 až 1,2 mm, dipólmomentom 1,8 Debye, priemerným priemerom pórov 80 Angstrómov a špecifickým povrchom cca 450 m2/g v suchom stave). 21 PMU filtrované mikrofiltračným zariadením alebo čistené vedením cez separátor (obsah sušiny (=TS) a tiež pomocouA 30 cm column with a diameter of 2.4 cm is filled with 65 ml of a water-swollen semipolar polyacrylester adsorption resin (= Amberlite XAD-7 from Rohm and Haas, with a grain size of 0.3 to 1.2 mm, a dipole diameter of 1.8 Debye) , an average pore diameter of 80 Angstroms and a specific surface area of about 450 m 2 / g in the dry state). 21 PMU filtered by microfiltration equipment or cleaned by passing through a separator (dry matter content (= TS) and also using
HPLC určené obsahy estrónsulfátovej soli, krezolu a HPMF, pozri nasledujúcu tabuľku) sú pri teplote miestnosti vedené prietokovou rýchlosťou 6 ml/min. (=cca 5,5 ložného objemu za hodinu) cez daný stĺpec. Obsah estrogénov PMU je adsorbovaný úplne na takto napojenom stĺpci semipolámej adsorpčnej živice. Prebehnutá močová kvapalina je vyšetrovaná pomocou HPLC na obsah konjugovaných estrogénov (vypočítaný ako estrónsulfátová soľ) a ukazuje sa ako prakticky zbavená obsahu estrogénov. Kvapalina pretečená stĺpcom je odstránená.HPLC contents of estrone sulfate salt, cresol and HPMF (see the following table) are conducted at a flow rate of 6 ml / min at room temperature. (= about 5.5 bed volumes per hour) through the column. The estrogen content of PMU is adsorbed completely onto the column of the semipolar adsorption resin so bonded. The recovered urine fluid is examined by HPLC for conjugated estrogen content (calculated as estrone sulfate salt) and appears to be practically free of estrogen content. The liquid flowing through the column is removed.
B) Premývanie napojeného stĺpca s adsorpčnou živicouB) Washing of the attached adsorbent resin column
Napojený stĺpec adsorpčnej živice je premytý 300 ml vodného roztoku hydroxidu sodného pri pH uvedenom v tabuľke. Okrem toho sa daným stĺpcom vedie alkalická pracia voda s prietokovou rýchlosťou 6 ml/min. (=cca 5,5 ložného objemu za hodinu). Pracia kvapalina, ktorá prešla, je vyšetrovaná pomocou HPLC na obsah estrónsulfátovej soli, krezolu a HPMF. Vyšetrenie ukázalo, že počas vymývacej fázy sa premyje menej než 5% všetkých estrogénov zachytených v stĺpci.The attached adsorbent resin column is washed with 300 ml of aqueous sodium hydroxide solution at the pH indicated in the table. In addition, alkaline wash water at a flow rate of 6 ml / min was passed through the column. (= approx. 5.5 loading volumes per hour). The wash liquor that has passed is examined by HPLC for estrone sulfate salt, cresol and HPMF. Examination showed that less than 5% of all estrogen retained in the column was washed during the wash phase.
C) Desorpcia konjugovaných estrogénov z premytého stĺpca adsorpčnej živiceC) Desorption of conjugated estrogens from the washed adsorption resin column
315 ml elučnej kvapaliny (pridaním hydroxidu sodného k zmesi alkalický upravenej vody a rozpúšťadla, zloženie a pH pozri nasledujúcu tabuľku) je vedené prietokovou rýchlosťou cca 6 ml/min. stĺpcom predhriatym na elučnú teplotu uvedenú v danej tabuľke. Eluát, ktorý prešiel, je zachytený do 6 frakcií. Prvá frakcia tvorí cca 65 ml (=cca 1 ložný objem), zvyšné frakcie tvoria vždy cca 50 ml. Jednotlivé frakcie sú vyšetrené pomocou HPLC na obsah estrónsulfátovej soli, krezolu a HPMF. Prvá frakcia sa zhromažďuje, pokiaľ sa eluát javí ako bezfarebný až slabo žltý. Táto frakcia obsahuje iba stopy estrónsulfátovej soli.315 ml of elution liquid (by adding sodium hydroxide to a mixture of alkaline treated water and solvent, composition and pH see the following table) is conducted at a flow rate of about 6 ml / min. a column preheated to the elution temperature given in the table. The eluate that passed is collected in 6 fractions. The first fraction is about 65 ml (= about 1 bed volume), the remaining fractions are about 50 ml each. Individual fractions are assayed by HPLC for estrone sulfate salt, cresol and HPMF. The first fraction was collected when the eluate appeared colorless to pale yellow. This fraction contains only traces of estrone sulfate salt.
Po prebehnutí prvého ložného objemu eluátu dochádza ku zmene farby eluátu na intenzívny tmavohnedý farebný tón. V nasledujúcich frakciách 2 až 4 sú potom obsiahnuté cca 80 až 98 % všetkého množstva konjugovaných estrogénov adsorbovaných na stĺpci. Zvyšné frakcie obsahujú už len malé množstvo estrónsulfátovej soli. To je rovnako značne viditeľné na poklese farebnej intenzity. Pripadne môžu byť zvyšné frakcie po oddestilovaní daného rozpúšťadla pridané ešte ku kroku A).After the first loading volume of the eluate, the color of the eluate is changed to an intense dark brown color tone. Approximately 80 to 98% of the total amount of conjugated estrogens adsorbed on the column are then contained in the following fractions 2 to 4. The remaining fractions contain only a small amount of the estrone sulfate salt. This is also clearly visible in the decrease in color intensity. Optionally, the remaining fractions can be added to step A) after distilling off the solvent.
Pre frakcie obsahujúce hlavné množstvo konjugovaných estrogénov sú v nasledujúcej tabuľke obsiahnuté vždy obsah sušiny (TS) v hmotn. % a obsahy estrogénsulfátu, krezolu a HPMF určené pomocou HPLC. Tieto frakcie obsahujú extrakty vhodné na ďalšie galenické spracovanie.For fractions containing the major amount of conjugated estrogens, the following table contains the dry matter (TS) content in wt. % and estrogen sulphate, cresol and HPMF contents determined by HPLC. These fractions contain extracts suitable for further galenic processing.
D) Regenerácia stĺpca adsorpčnej živiceD) Regeneration of adsorption resin column
Na regeneráciu sa daný stĺpec premyje najprv 100 ml zmesi etanol/voda obsahujúcej 50 % etanolu a upravenej na pH 12, potom sa 150 ml vodného 10 %-ného roztoku citrónu amónneho a ešte so 150 ml zmesou etanol/voda a nakoniec so 100 ml destilovanej vody. Celková regenerácia prebieha pri teplote 45 °C. Stĺpec môže byť viackrát, príkladne až 40-krát, nasýtený a znovu regenerovaný.For regeneration, the column is washed first with 100 ml of an ethanol / water mixture containing 50% ethanol and adjusted to pH 12, then with 150 ml of an aqueous 10% ammonium lemon solution and still with 150 ml of an ethanol / water mixture and finally with 100 ml of distilled water. water. The total regeneration takes place at 45 ° C. The column may be saturated and regenerated several times, for example up to 40 times.
Claims (8)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/EP1996/003820 WO1998008526A1 (en) | 1996-08-30 | 1996-08-30 | Method to obtain oestrogens from mare's urine |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK24599A3 SK24599A3 (en) | 1999-10-08 |
| SK281368B6 true SK281368B6 (en) | 2001-02-12 |
Family
ID=8166300
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK245-99A SK281368B6 (en) | 1996-08-30 | 1996-08-30 | Method for obtaining estrogens from mare urine |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0923381B1 (en) |
| JP (1) | JP4285773B2 (en) |
| AT (1) | ATE264109T1 (en) |
| AU (1) | AU722739B2 (en) |
| CA (1) | CA2263757C (en) |
| CZ (1) | CZ298761B6 (en) |
| DE (2) | DE59610985D1 (en) |
| DK (1) | DK0923381T3 (en) |
| ES (1) | ES2219694T3 (en) |
| HK (1) | HK1021884A1 (en) |
| HU (1) | HU228763B1 (en) |
| IL (1) | IL128670A (en) |
| NO (1) | NO318390B1 (en) |
| PL (1) | PL185919B1 (en) |
| PT (1) | PT923381E (en) |
| SK (1) | SK281368B6 (en) |
| WO (1) | WO1998008526A1 (en) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10037389A1 (en) | 2000-08-01 | 2002-02-14 | Solvay Pharm Gmbh | Method and device for the enrichment and stabilization of conjugated estrogens from mare's urine |
| DE10159161A1 (en) | 2001-12-01 | 2003-06-18 | Solvay Pharm Gmbh | Process for obtaining estrogens from mare's urine |
| TWI332400B (en) * | 2001-12-14 | 2010-11-01 | Solvay Pharm Gmbh | Preformulation for the tableting of natural mixtures of conjugated estrogens |
| TWI252111B (en) * | 2001-12-14 | 2006-04-01 | Solvay Pharm Gmbh | Matrix film tablet with controlled release of a natural mixture of conjugated estrogens |
| AR041121A1 (en) * | 2002-10-11 | 2005-05-04 | Solvay Pharm Gmbh | PROCEDURE FOR OBTAINING A NATURAL MIXTURE OF CONJUGATED STROGENS |
| US20040072814A1 (en) | 2002-10-11 | 2004-04-15 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Method for obtaining a natural mixture of conjugated equine estrogens depleted in non-conjugated lipophilic compounds |
| CN1332973C (en) * | 2003-03-06 | 2007-08-22 | 深圳市海达克实业有限公司 | Extraction process of conjugated female hormone |
| AU2004259093B2 (en) * | 2003-07-17 | 2010-12-23 | Abbott Products Gmbh | Method for obtaining a natural mixture of conjugated equine estrogens |
| EP1675867A4 (en) * | 2003-10-24 | 2013-04-10 | Thorgard Pharmaceuticals Asut Pty Ltd | Estrogen extraction from pregnant animal urine |
| US20140371180A1 (en) | 2013-06-14 | 2014-12-18 | Dr. Reddy's Laboratories Ltd. | Process for purification and isolation of estrogens |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL7111863A (en) * | 1970-10-13 | 1972-04-17 | ||
| CS224881B1 (en) * | 1981-10-21 | 1984-01-16 | Jiri Semenka | Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents |
-
1996
- 1996-08-30 IL IL12867096A patent/IL128670A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 AU AU69304/96A patent/AU722739B2/en not_active Ceased
- 1996-08-30 AT AT96930139T patent/ATE264109T1/en active
- 1996-08-30 ES ES96930139T patent/ES2219694T3/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-30 HU HU9903776A patent/HU228763B1/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 PL PL96331884A patent/PL185919B1/en unknown
- 1996-08-30 PT PT96930139T patent/PT923381E/en unknown
- 1996-08-30 DK DK96930139T patent/DK0923381T3/en active
- 1996-08-30 DE DE59610985T patent/DE59610985D1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-30 CA CA002263757A patent/CA2263757C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-08-30 JP JP51119598A patent/JP4285773B2/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-08-30 WO PCT/EP1996/003820 patent/WO1998008526A1/en active IP Right Grant
- 1996-08-30 DE DE19681621T patent/DE19681621D2/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-08-30 SK SK245-99A patent/SK281368B6/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 EP EP96930139A patent/EP0923381B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-30 CZ CZ0059899A patent/CZ298761B6/en not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-02-26 NO NO19990952A patent/NO318390B1/en not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-02-09 HK HK00100736A patent/HK1021884A1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE264109T1 (en) | 2004-04-15 |
| SK24599A3 (en) | 1999-10-08 |
| AU6930496A (en) | 1998-03-19 |
| IL128670A (en) | 2001-05-20 |
| EP0923381A1 (en) | 1999-06-23 |
| CZ59899A3 (en) | 1999-06-16 |
| HUP9903776A3 (en) | 2000-04-28 |
| EP0923381B1 (en) | 2004-04-14 |
| CA2263757C (en) | 2007-10-23 |
| DK0923381T3 (en) | 2004-05-10 |
| PT923381E (en) | 2004-09-30 |
| AU722739B2 (en) | 2000-08-10 |
| CZ298761B6 (en) | 2008-01-23 |
| NO990952D0 (en) | 1999-02-26 |
| JP2000516938A (en) | 2000-12-19 |
| NO318390B1 (en) | 2005-03-14 |
| DE59610985D1 (en) | 2004-05-19 |
| CA2263757A1 (en) | 1998-03-05 |
| NO990952L (en) | 1999-02-26 |
| HK1021884A1 (en) | 2000-07-14 |
| HUP9903776A2 (en) | 2000-03-28 |
| IL128670A0 (en) | 2000-01-31 |
| ES2219694T3 (en) | 2004-12-01 |
| PL331884A1 (en) | 1999-08-16 |
| WO1998008526A1 (en) | 1998-03-05 |
| HU228763B1 (en) | 2013-05-28 |
| DE19681621D2 (en) | 1999-09-30 |
| PL185919B1 (en) | 2003-08-29 |
| JP4285773B2 (en) | 2009-06-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK281368B6 (en) | Method for obtaining estrogens from mare urine | |
| US5723454A (en) | Method for obtaining estrogens from pregnant mare urine by solid phase extraction on a semi-polar adsorber resin | |
| CA2468933C (en) | Method for obtaining oestrogen from mare's urine | |
| JP4125788B2 (en) | How to get estrogen from mare urine | |
| US5814624A (en) | Method for obtaining estrogens from pregnant mare urine by solid-phase extraction | |
| RU2179028C2 (en) | Method to isolate estrogens from mare's urine | |
| US6855704B2 (en) | Process for isolating conjugated estrogens | |
| US7964586B2 (en) | Method for obtaining a natural mixture of conjugated equine estrogens | |
| CN1101682C (en) | Method to obtain oestrogens from mare's urine | |
| RU2179029C2 (en) | Method to obtain estrogens from mare's urine | |
| MXPA99001923A (en) | Method toobtain oestrogens from mare's urine | |
| CN1234740A (en) | Process to obtain oestrogens from mare's urine |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TC4A | Change of owner's name |
Owner name: ABBOTT PRODUCTS GMBH, HANNOVER, DE Effective date: 20120920 |
|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20150830 |