CS224881B1 - Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents - Google Patents
Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents Download PDFInfo
- Publication number
- CS224881B1 CS224881B1 CS770181A CS770181A CS224881B1 CS 224881 B1 CS224881 B1 CS 224881B1 CS 770181 A CS770181 A CS 770181A CS 770181 A CS770181 A CS 770181A CS 224881 B1 CS224881 B1 CS 224881B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- oxosteroids
- isolation
- sorbents
- total
- biological material
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
Předmětem vynálezu je prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů z biologického materiálu na bázi sorbentů.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a means for isolating total 17-oxosteroids from sorbent-based biological material.
Skupina látek, označovaná hromadně jako 17-oxosteroidy, je tvořena jednak sloučeninami, které jsou součástí skupiny steroidních hormonů, produkovaných nadledvinami a gonádami, jednak sloučeninami, které vznikají při jejich metabolismu.A group of substances, referred to collectively as 17-oxosteroids, is composed of both compounds that are part of a group of steroid hormones produced by the adrenal gonads and compounds that arise during their metabolism.
Přebytek těchto hormonů je z organismu vylučován močí buS ve volná formě nebo jako konjugáty a kyselinou glukuronovou. Stanovení těchto látek má značný význam pro diagnostiku chorob nadledvin a je běžnou součástí palety endokrinologických vyšetření.Excess of these hormones are excreted from the body either in free form or as conjugates and glucuronic acid. The determination of these substances is of great importance for the diagnosis of adrenal diseases and is a common part of the variety of endocrinological tests.
Obvykle se provádí stanovení celkových 17-oxosteroidů v moči po jejich hydrolýze a separaci tak zvanou Zimmermannovou reakcí, kterou poskytují některé oxosloučeniny s 1,3-dinitrobenzenem. Izolace volných steroidů po hydrolýze moči je nutná zejména ze dvou důvodů. Moč obsahuje jen asi 5.10 až 5.10 % hmot. těchto látek spolu s velkým množstvím interferujících složek, které je nutné oddělit a volné steroidy zkoncentrovat.Usually, total 17-oxosteroids are determined in urine after hydrolysis and separation by the so-called Zimmermann reaction provided by some oxo compounds with 1,3-dinitrobenzene. Isolation of free steroids after urine hydrolysis is necessary mainly for two reasons. The urine contains only about 5.10 to 5.10 wt. these substances together with a large amount of interfering components that need to be separated and the free steroids concentrated.
Běžná je izolace volných 17-oxosteroidů extrakcí do organických rozpouštědel, například do benzenu, diethyletheru a do chlorovaných uhlovodíků. Jedná se vždy o pracný postup, vyžadující práci s hořlavinami nebo jedy v poměrně značných objemech. JednoduššíIt is common to isolate free 17-oxosteroids by extraction into organic solvents such as benzene, diethyl ether and chlorinated hydrocarbons. It is always a laborious procedure requiring work with flammable substances or poisons in relatively large volumes. Easier
224 881224 881
224 881 je ieolece těchto látek pomocí sorbentů na bázi polystyrénových gelů, která byla kupříkladu popsána Bradlowem (Bradlow, H.L.: Sterolds 11, 256, 1968). Nevýhodou izolace na těchto sorbentech jsou zejména velké změny ve zbotnéní vlivem rozdílných dielektrickýoh konstant vodného roztoku vzorku a používaných eluentů, projevující se obvykle trháním sloupce polystyrénového gelu v izolačních kolonách. Další nevýhody spočívají v tom, že polystyrénové gely vykazují poměrně vysokou zádrž vody, což opět ztěžuje eluci volných 17-oxosteroidů. Polystyrénové gely se kromě toho obtížně regenerují a výsledky analýz celkových 17-oxosteroidů po izolaci na regenerovaných sorbentech tohoto typu vykazují značné rozdíly, a to až o - 10 %. Polystyrénové gely vhodné kvality nejsou kromě toho v tuzemsku dostupné.224 881 is the isolation of these compounds with polystyrene gel-based sorbents as described, for example, by Bradlow (Bradlow, H.L .: Sterolds 11, 256, 1968). The disadvantage of isolation on these sorbents is in particular the large swelling changes due to the different dielectric constants of the aqueous solution of the sample and the eluents used, usually manifested by tearing the polystyrene gel column in the isolation columns. Further disadvantages are that polystyrene gels show a relatively high water retention, which again makes it difficult to elute free 17-oxosteroids. In addition, polystyrene gels are difficult to regenerate and the results of total 17-oxosteroid analyzes after recovery on regenerated sorbents of this type show considerable differences, up to -10%. In addition, polystyrene gels of suitable quality are not available in the Czech Republic.
Výše uvedené nedostatky odstraňuje prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů » z biologického materiálu na bázi sorbentů typu polymerů podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že je tvořen makroporesním kopolymerem s 90 až 10 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 10 až 90 % hmot. ethylendlmethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 1,7 . IO’23 až 1,6 . 10-^ kg a velikosti čésti 20 až 600 s výhodou 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 39 % hmot. ethylendlmethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 5 · IO“22 kg a velikosti částic 100 až 200^um.The aforementioned drawbacks are eliminated by means for the isolation of total 17-oxosteroids from the sorbent-based biological material according to the invention, which consists of a macroporous copolymer with 90 to 10 wt. % hydroxyethyl methacrylate and 10 to 90 wt. ethylene dimethyl methacrylate having a molecular weight exclusion of 1.7. IC 23 - 1.6. % And a particle size of 20 to 600, preferably 61% by weight. % hydroxyethyl methacrylate and 39 wt. ethylene dimethyl methacrylate having a molecular weight exclusion of 5 · 10 22 22 kg and a particle size of 100 to 200 µm.
Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů z biologického materiálu podle vynálezu má proti dosavadním prostředkům používaným k těmto účelům řadu předností.The means for isolating total 17-oxosteroids from the biological material according to the invention has a number of advantages over the prior art means used for this purpose.
Vylučuje nebezpečnou a zdlouhavou extrakci do organických rozpouštědel založenou na použití hořlavin nebo jedů a podstatně zkracuje dobu potřebnou na jednu analýzu, a to asi o dvě hodiny. Na rozdíl od dosud známých polystyrénových sorbentů lze prostředek podle vynálezu snadno regenerovat a opakovaně použít, aniž by bylo pozorováno zhoršení přesnosti nebo správnosti analýz. Regenerace je snadná a provádí se pronytím methanolem a vodou. Materiál lze takto použít až dvacetkrát. Prostředek podle vynálezu vykazuje ve srovnání s polystyrénovými sorbenty podstatně vyšší přesnosti při analýze, nebol nedochází k trhání sloupce a zádrž vody je také minimální. Při srovnání analýz pomocí prostředku podle vynálezu ee třemi postupy využívajícími extrakci do diethyletheru a dichlormethanu byly nalezeny prakticky totožné výsledky při stanovení celkových 17-oxosteroidů v moči s koeficienty korelace v rozmezí 0,98 až 0,99. Přesnost stanovení při opakované regeneraci a použití prostředku podle vynálezu se přitom pohybovala v oboru - 4 % a pravděpodobnost 95 %·It eliminates dangerous and protracted extraction into organic solvents based on the use of flammable substances or poisons and significantly reduces the time required for one analysis, by about two hours. In contrast to the prior art polystyrene sorbents, the composition of the invention can be easily regenerated and reused without observing a deterioration in the accuracy or accuracy of the assays. Regeneration is easy and is done by washing with methanol and water. The material can be used up to 20 times. The composition according to the invention exhibits substantially higher analytical accuracy compared to polystyrene sorbents, since there is no column tearing and the water retention is also minimal. By comparing the analyzes using the composition of the invention with three procedures using extraction into diethyl ether and dichloromethane, practically identical results were found in the determination of total 17-oxosteroids in urine with correlation coefficients ranging from 0.98 to 0.99. The accuracy of the determination during repeated regeneration and use of the composition according to the invention was in the field - 4% and probability 95% ·
Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroidů podle vynálezu je na rozdíl od polystyrénových sorbentů dostupný v tuzemsku ve vhodné kvalitě a čistotě a jeho snadná regenerace se projevuje slevněním stanovení. Také jeho použití k izolaci aanalýze celkových 17-oxosteroidů je jednoduché. Moč po kyselé hydrolýze se prolije kolonkou obsahující prostředek podle vynálezu v množství 10 ml hydrolyzátu na 1 g prostředku, kolonka se promyje roztokem hydroxidu alkalického kovu a potom vodou do neutrální reakce eluátuIn contrast to the polystyrene sorbents, the total 17-oxosteroid isolation agent according to the invention is available in the Czech Republic in suitable quality and purity and its easy regeneration results in a reduction in the assay. Also, its use to isolate and analyze total 17-oxosteroids is simple. Urine after acid hydrolysis is passed through a column containing the composition of the invention in an amount of 10 ml of hydrolyzate per g of composition, the column is washed with an alkali metal hydroxide solution and then with water until the eluate is neutral.
224 881 a 17-oxosteroldy se z kolonky vymyjí 10 ml metanolu, přičemž se jímá posledních 6 ml eluátu. Dále se stanovení provádí například fotometricky po reakci s 1,3-dinitrobenzenam224 881 and 17-oxosterolds are eluted from the column with 10 ml of methanol, collecting the last 6 ml of eluate. Further, the determination is carried out, for example, photometrically after reaction with 1,3-dinitrobenzenam
Příklad 1Example 1
Prostředek k izolaci celkových 17-oxosteroidů je tvořen kopolymerem o 71 % hmot. ethylendimethakrylátu a 29 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a vylučovací mezí molekulová hmotnosti 1,7 . 10-20 až 1,6 . 10-1^ kg a velikostí částic 25 až 40^.The means for the isolation of total 17-oxosteroids consists of a copolymer of 71% by weight. % ethylene dimethacrylate and 29 wt. hydroxyethyl methacrylate and a molecular weight exclusion limit of 1.7. 10 -20 to 1.6. 10 -1 .mu.m and a particle size of 25 to 40 .mu.m.
Přiklad 2Example 2
Jako prostředek k izolaci celkových 17-oxosteroidů se použije makroporézní kopolymer s 39 % hmot. ethylendimethakrylátu a 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu o vylučo—23 vací mezi molekulové hmotnosti 6,6 .10 kg a velikosti částic 200 až 600<um.A macroporous copolymer of 39 wt.% Is used as a means to isolate the total 17-oxosteroids. % ethylene dimethacrylate and 61 wt. hydroxyethyl methacrylate having a molecular weight exclusion of 6.6-10 kg and a particle size of 200-600 .mu.m.
Příklad 3Example 3
K izolaci celkových 17-oxosteroidů ae použije kopoiymer s 61 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 39 % hmot. ethylendimethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 5 . 10“22 kg a velikosti části 100 až 200 Rim.A copolymer with 61 wt.% Was used to isolate the total 17-oxosteroids. % hydroxyethyl methacrylate and 39 wt. ethylenedimethacrylate with a molecular weight exclusion of. 10 “ 22 kg and the size of the part 100 to 200 Rim.
Příklad 4Example 4
Prostředkem pro izolaci celkových 17-oxosteroidů je kopoiymer 14 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 86 % hmot. ethylendimethakrylátu o vylučovací mezi molekulové hmotnosti 4 · 1O~19 tg a velikosti částic 100 až 300 ^am.The means for isolating the total 17-oxosteroids is a copolymer of 14% by weight. % hydroxyethyl methacrylate and 86 wt. ethylene dimethacrylate having a molecular weight exclusion of 4 · 10? 19 tg and a particle size of 100 to 300 µm.
Příklad 5Example 5
Jako prostředek k izolaci celkových 17-oxosteroidů se použije makroporesní kopolymer s 83 % hmot. hydroxyethylmethakrylátu a 17 % hmot. ethylendimethakrylátu o vylu-23 čovací mezi molekulové hmotnosti 3,3 . 10 kg a velikosti částic 150 až 400^um.A macroporous copolymer with 83 wt.% Is used as a means to isolate the total 17-oxosteroids. % hydroxyethyl methacrylate and 17 wt. ethylene dimethacrylate having a molecular weight exclusion of 3.3. 10 kg and a particle size of 150 to 400 µm.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS770181A CS224881B1 (en) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS770181A CS224881B1 (en) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS224881B1 true CS224881B1 (en) | 1984-01-16 |
Family
ID=5426600
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS770181A CS224881B1 (en) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS224881B1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ298761B6 (en) * | 1996-08-30 | 2008-01-23 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Method for obtaining estrogens from urine of mares |
-
1981
- 1981-10-21 CS CS770181A patent/CS224881B1/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ298761B6 (en) * | 1996-08-30 | 2008-01-23 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Method for obtaining estrogens from urine of mares |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Locatelli et al. | Analytical methods for the endocrine disruptor compounds determination in environmental water samples | |
| de Alda et al. | Liquid chromatography–(tandem) mass spectrometry of selected emerging pollutants (steroid sex hormones, drugs and alkylphenolic surfactants) in the aquatic environment | |
| Higa et al. | Isolation of catecholamines in biological fluids by boric acid gel | |
| Cohn | [107] Methods of isolation and characterization of mono-and polynucleotides by ion exchange chromatography | |
| Rees et al. | A Solvent for the Paper Chromatographic of Separation of Glucose and Sorbitol | |
| EP2282209B1 (en) | Method for labelling sugar chains | |
| Engel et al. | The estimation of urinary metabolites of administered estradiol-17 β-16-C14 | |
| Harris et al. | QUANTITATIVE CHROMATOGRAPHIC METHODS: PART 7. ISOLATION OF AMINO ACIDS FROM SERUM AND OTHER FLUIDS | |
| Sharon et al. | Isolation and study of the chemical structure of a disaccharide from Micrococcus lysodeikticus cell walls | |
| CN107907620A (en) | The method that ultrasonic extraction Solid Phase Extraction pre-treatment combination LC-MS technology detects six 24 kinds of antibiotic of class in feces of livestock and poultry at the same time | |
| Axelson et al. | Selective liquid chromatographic isolation procedure for gas chromatographic-mass spectrometric analysis of 3-ketosteroids in biological materials | |
| Resnik et al. | Chromatography of organic acids in cured tobacco | |
| Tanuma et al. | Distribution of poly (ADP-ribose) in histones of HeLa cell nuclei | |
| CS224881B1 (en) | Means for isolation of 17-oxosteroids from biological material based on sorbents | |
| Spiro et al. | Monosaccharide determination of glycoconjugates by reverse-phase high-performance liquid chromatography of their phenylthiocarbamyl derivatives | |
| Sjövall et al. | General and selective isolation procedures for GC/MS analysis of steroids in tissues and body fluids | |
| Oka et al. | Extraction-monitoring and rapid flow fractionation for determination of serum corticosteroids | |
| Sṕencer | Ion exchange chromatograhy of polyols | |
| Tetsuo et al. | Selective isolation procedures for GC/MS analysis of ethynyl steroids in biological material | |
| CN105954370B (en) | It is a kind of to detect the confirmation analysis method that piperazine remains in fowl and porcine tissue | |
| Eneroth et al. | Quantification of cholesteryl sulfate and neutral sterol derivatives in human feces after purification on lipophilic sephadex gels: Bile acids and steroids 188 | |
| CN112625119B (en) | Estrone antigen and preparation method thereof | |
| Phillips et al. | Interaction of omeprazole with DNA in rat tissues | |
| Sjövall et al. | Estimation of dehydroepiandrosterone sulfate in human serum by gas-liquid chromatography | |
| Bryant et al. | Quantification by Gas Chromatography of N, N′-Di-(2-chloroethyl)-phosphorodiamidic Acid in the Plasma of Patients Receiving Isophosphamide |