SK281368B6 - Spôsob získavania estrogénov z moču kobýl - Google Patents
Spôsob získavania estrogénov z moču kobýl Download PDFInfo
- Publication number
- SK281368B6 SK281368B6 SK245-99A SK24599A SK281368B6 SK 281368 B6 SK281368 B6 SK 281368B6 SK 24599 A SK24599 A SK 24599A SK 281368 B6 SK281368 B6 SK 281368B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- urine
- water
- mixture
- resin
- adsorption resin
- Prior art date
Links
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 title description 20
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 title description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 47
- 229940035811 conjugated estrogen Drugs 0.000 claims abstract description 40
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 57
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 57
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 17
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 15
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 12
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 11
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 11
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- -1 aliphatic ketones Chemical class 0.000 claims description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 8
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 7
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000012465 retentate Substances 0.000 claims description 6
- 235000003092 Artemisia dracunculus Nutrition 0.000 claims description 5
- 240000001851 Artemisia dracunculus Species 0.000 claims description 5
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 claims description 5
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000002170 ethers Chemical group 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000003791 organic solvent mixture Substances 0.000 claims 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 abstract 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 13
- HVDGDHBAMCBBLR-UHFFFAOYSA-N enterolactone Chemical compound OC1=CC=CC(CC2C(C(=O)OC2)CC=2C=C(O)C=CC=2)=C1 HVDGDHBAMCBBLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- QTTMOCOWZLSYSV-QWAPEVOJSA-M equilin sodium sulfate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4C3=CCC2=C1 QTTMOCOWZLSYSV-QWAPEVOJSA-M 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N estrone 3-sulfate Chemical class OS(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 5
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 4
- 150000001896 cresols Chemical class 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N Dimethoxyethane Chemical compound COCCOC XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 2
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- SBZXBUIDTXKZTM-UHFFFAOYSA-N diglyme Chemical compound COCCOCCOC SBZXBUIDTXKZTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- JKKFKPJIXZFSSB-UHFFFAOYSA-N 1,3,5(10)-estratrien-17-one 3-sulfate Natural products OS(=O)(=O)OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNHGVULTSGNVIX-UHFFFAOYSA-N 1-(2-ethoxyethoxy)ethanol Chemical compound CCOCCOC(C)O BNHGVULTSGNVIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004208 3-hydroxyphenyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C([H])C(*)=C1[H] 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 206010003439 Artificial menopause Diseases 0.000 description 1
- 244000248349 Citrus limon Species 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010046555 Urinary retention Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000005233 alkylalcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124339 anthelmintic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000921 anthelmintic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- RHDGNLCLDBVESU-UHFFFAOYSA-N but-3-en-4-olide Chemical compound O=C1CC=CO1 RHDGNLCLDBVESU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000002070 germicidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229920001225 polyester resin Polymers 0.000 description 1
- 239000004645 polyester resin Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/22—Urine; Urinary tract, e.g. kidney or bladder; Intraglomerular mesangial cells; Renal mesenchymal cells; Adrenal gland
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J75/00—Processes for the preparation of steroids in general
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Virology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Lubrication Of Internal Combustion Engines (AREA)
- Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Spôsob získavania extraktu obsahujúceho prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov z moču kobýl sa uskutočňuje extrakciou pevnej fázy zmesi konjugovaných estrogénov z moču žrebných kobýl na neiónových semipolárnych polymérnych adsorpčných živiciach.ŕ
Description
Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka získania prirodzenej zmesi konjugovaných estrogénov z moču žrebných kobýl.
Doterajší stav techniky
Estrogény sú v lekárstve používané na hormonálnu substitučnú terapiu. Hlavne sú zmesi estrogénov používané na liečbu a prevenciu ťažkostí vyskytujúcich sa u žien v období prechodu po prirodzenej alebo umelej menopauze. Pritom sa prirodzené zmesi konjugovaných estrogénov, ktoré sa vyskytujú v moči žrebných kobýl, ukázali ako obzvlášť účinné a dobre znášanlivé.
Rozpustený obsah pevných látok v moči žrebných kobýl (= pregnant mares urine, v nasledujúcom skrátené ako „PMU“) môže kolísať prirodzene v širokých rozsahoch a všeobecne leží v rozsahu 40-90 g sušiny na liter. Okrem močoviny a iných obvyklých látok obsahujúcich moč sú v obsahu pevných látok PMU obsiahnuté fénolické zložky v množstvách cca 2-5 hmotn. % vztiahnuté na sušinu. Medzi týmito fenolickými zložkami sa nachádzajú krezoly a ako HPMF známy dihydro-3,4-bis[3hydroxyfenyl)metyl]2(3H)-furanón. Tieto látky sa môžu vyskytovať vo voľnej alebo konjugovanej forme. V PMU je obsiahnutá prirodzená zmes estrogénov, ktorá ďalekosiahlo existuje v konjugovanej forme, napr. ako sodná soľ poloesteru kyseliny sírovej (v nasledujúcom skrátené ako „sulfátová soľ“). Obsah konjugovaných estrogénov (vypočítaný ako sulfátová soľ estrogénov) môže byť medzi 0,3 a 1 hmotn. % vztiahnuté na sušinu.
Zvyčajne sú extrakty z PMU obsahujúce konjugované estrogény získavané extrakciou pomocou polárnych, s vodou sa nemiešateľných alebo len málo miešateľných organických rozpúšťadiel, ako sú napr. etylester kyseliny octovej, n-butanol alebo cyklohexanol. Pri takých extrakciách kvapalina-kvapalina sa však vyskytuje veľký počet problémov, ako je silná tvorba peny, tvorba sedimentu, tvorba emulzie a zlé delenie fáz. Všeobecne je potrebné viac extrakčných krokov, čo vedie ku stratám a iba k čiastočnému získaniu obsahu estrogénov.
Von H- L. Bradlowom bolo roku 1968 (pozri Steroidy II (1968), 265-272) navrhnuté na extrakciu konjugovaných estrogénov z moču použitie Amberlitu 2 XAD-2R, neutrálne nepoláme hydrofóbne polyesterové živice firmy Rohm a Haas. Uvedená kapacita adsorpcie je malá. Podľa Bradlowa sa eventuálne zriedený moč vedie s nízkou prietokovou rýchlosťou cez stĺpec obsahujúci danú živicu. Estrogény sú eluované metanolom alebo etanolom. Nie sú však urobené žiadne údaje o ostatných látkach obsiahnutých v eluáte obsahujúcom estrogény.
Podstata vynálezu
Úlohou tohto vynálezu je vyvinúť technický postup na získavanie prirodzenej zmesi konjugovaných estrogénov z PMU, pričom by sa zabránilo známym nevýhodám doposiaľ zvyčajných extrakcií kvapalina-kvapalina, a ktorý dodáva produkt obohatený fenolickými, moč obsahujúcimi látkami a ďalekosiahle zbavený krezolov a HPMF. Teraz bol nájdený postup, ktorým môže byť v jednej extrakcii pevnej látky na neiónovej semipolámej polymémej adsorpčnej živici získaná zmes obohatená fenolickými, moč obsahujúcimi látkami, ktorá je ďalekosiahlo zbavená krezolov a HPMF, avšak prakticky úplne obsahuje prirodzený obsah estrogénov v PMU, ktorá môže slúžiť ako východiskový materiál na výrobu farmaceutík obsahujúcich prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov z PMU ako účinnú zložku.
Postup podľa vynálezu na získavanie fenolickými, moč obsahujúcimi látkami obohatené prirodzené zmesi konjugovaných estrogénov z PMU je založený na tom, že
a) sa močová kvapalina, ktorá predstavuje moč zbavený slizovitých a pevných látok, zúžený koncentrát tohto moču alebo zúžený močový retenát získaný membránovou filtráciou tohto moču, kontaktuje s príslušným množstvom semipolámej polymémej adsorpčnej živice, ktoré je dostatočné na adsorpciu zmesi konjugovaných estrogénov obsiahnutej v močovej kvapaline, a sa oddeľuje zmesou konjugovaných estrogénov nasýtená semipoláma polyméma adsorpčná živica od ostatnej močovej kvapaliny,
b) sa semipoláma polárna adsorpčná živica nasýtená zmesou konjugovaných estrogénov premýva pracou vodou upevnenou na pH minimálne 12,0, hlavne 12,5 -14,
c) sa premytá adsorpčná živica kontaktuje na desorpciu adsorbovanej zmesi konjugovaných estrogénov s dostatočným množstvom elučnej kvapaliny, ktorá predstavuje s vodou miešateľné organické rozpúšťadlo zo skupiny s vodou miešateľným éterom, nižších alkanolov a nižších alifatických ketónov alebo zmes z organického rozpúšťadla miešateľného s vodou a z eventuálne alkalický upravenej vody, eluát obsahujúci prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov od adsorpčnej živice sa oddelí a prípadne koncentruje.
Pre daný postup podľa vynálezu môže byť používaný PMU ako taký, z neho koncentrovaný získaný koncentrát alebo membránovou filtráciou získaný retenát. Nazhromaždený moč sa najprv známym spôsobom zbaví slizovitých a pevných látok. Ako účelné sa ukazuje usadzovanie pevných a slizovitých látok a tieto sa potom oddelia známymi deliacimi spôsobmi, napr. dekantáciou, separáciou a/alebo filtráciou. Tak môže byť PMU napr. vedený cez známe deliace zariadenie, napr. cez separátor, filtračné zariadenie alebo sedimentačné zariadenie. Ako deliace zariadenie môže slúžiť napr. pieskové lôžko alebo môžu byť použité obchodne bežné separátory, napr. dýzové alebo komorové separátory. Vhodné môžu byť rovnako mikrofiltračné zariadenie alebo ultrafiltračné zariadenie, pri použití ktorých môže byť súčasne dosiahnuté ďalekosiahle zbavenie zárodkov a vírusov filtrovaného PMU.
Výhodne môžu byť do moču pridávané konzervačné prostriedky, dezinfekčné prostriedky (germicídy), baktericídy a/alebo anthelmintiká.
Pokiaľ miesto PMU má byť použitý skoncentrovaný PMU-retenát, môže byť tento získavaný z PMU pomocou známej membránovej filtrácie. Obsah pevných látok retenátu a jeho zloženie sa môžu meniť podľa použitého PMU a membrány použitej na membránovú filtráciu. Napr. pri použití nanofiltrátovej membrány môže byť dosiahnuté takmer bezstratové koncentrovanie obsahu estrogénu v PMU-retenáte pri súčasnom odstránení až 50 hmotn. % nízkomolekulámeho PMU. Pre daný postup podľa vynálezu môžu byť použité PMU-retenáty, ktoré boli skoncentrované až na pomer cca 1 : 10, lepšie na pomer cca 1 : 7, a ktorých objem môže byť zúžený až na cca 1/10, prednostne 1/7, pôvodného objemu PMU.
Semipolámymi polymémymi adsorpčnými živicami, použiteľnými v kroku a) daného postupu, sú porézne organické neiónové polyméry, ktoré majú oproti nepolámym hydrofóbnym polymérnym adsorpčným živiciam prechodovú polaritu (= napr. s dipólovým momentom aktívneho povrchu živice v rozsahu od 1,0 do 3,0, obzvlášť od 1,5 do
2,0 Debye) a trochu hydrofilnejšiu štruktúru, napr. živica z esterov polykarbónových kyselín. Účelne sú použité makroporézne semipoláme živice s prednostne makroretikulárnou (sieťovo usporiadanou) štruktúrou a s priemernými priemermi pórov v rozsahu od 50 do 150, prednostne 70 až 100 Angstrômov, a špecifickým povrchom v rozsahu od 300 do 900, prednostne od 400 do 500 m2/g. Ako obzvlášť vhodnými sa ukazujú makroporézne, priečne sieťované alifatické živice z esterov polykarbónových kyselín, hlavne priečne sieťované živice z polyakrylesterov, ako je napr. Amberlite X AD-7R firmy Rohma a Haasa.
Podľa vynálezu môže adsorpcia konjugovaných estrogénov na semipolámej adsorpčnej živici prebiehať kontaktovaním PMU alebo jeho retanátu s adsorpčnou živicou, keď sa močová kvapalina zavedie do reaktora obsahujúceho adsorpčnú živicu a je s ňou udržiavaná v kontakte v priebehu času dostatočného na adsorpciu príslušného obsahu estrogénu. Po uskutočnenej adsorpcii konjugovaných estragónov na semipolámu adsorpčnú živicu môže byť adsorpčná živica, nasýtená zmesou konjugovaných estragónov, oddelená známym spôsobom od ostatnej močovej kvapaliny. Účelnejšie môže byť močová kvapalina vedená stĺpcom obsahujúcim danú adsorpčnú živicu takou prietokovou rýchlosťou, že kontaktný čas postačí na adsorpciu daného obsahu estragónov. Vhodné sú napr. prietokové rýchlosti, ktoré zodpovedajú prietoku od 3 do 10, prednostne od 5 do 7 objemových dielov PMU/1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu. Adsorpcia je vykonávaná prednostne pri teplote miestnosti. Účelné môže byť prietoková rýchlosť močovej kvapaliny riadená reaktorom prácami pri malom pretlaku alebo podtlaku. Množstvo aplikovanej semipolámej adsorpčnej živice sa môže meniť podľa druhu použitej adsorpčnej živice a množstva obsahu pevných látok v močovej kvapaline. Pri použití PMU môže byť príkladne jeden objemový diel adsorpčnej živice, napr. priečne zosietenej alifatickej adsorpčnej živice z esterov polykarbónových kyselín, napojený až 80 objemovými dielmi vopred spracovaného PMU bez toho, aby boli preukázateľné viditeľné množstvá estrogénu v odtekajúcej močovej kvapaline. Pri použití koncentrátu alebo retenátu PMU sa zaťažovacia kapacita adsorpčnej živice redukuje prirodzene v tej miere, v ktorej sú tieto skoncentrované. Tak môže byť napr. 1 objemový diel priečne zosietenej alifatickej adsorpčnej živice z esterov polykarbónových kyselín napojený množstvom močovej kvapaliny zodpovedajúcim 20 až 80, prednostne 30 až 50, objemovým dielom PMU.
Semipoláma adsorpčná živica nasýtená zmesou konjugovaných estragónov sa v postupovom kroku b) premýva pracou vodou upravenou na pH minimálne 12,0, hlavne od 12,5 do 14, prednostne cca od 12,5 až 13,5. Ako pracia voda môžu byť použité vodné roztoky inertných zásaditých látok rozpustných v močovej kvapaline, ktoré sú dostatočne silné, aby boli dosiahnuté hodnoty pH aspoň 12,5. Oproti semipolámej polymémej adsorpčnej živici, sa ako inertné, vodorozpustné zásadité látky hodia prednostne vodorozpustné anorganické zásady, ako sú hydroxidy alkalických kovov alebo hydroxidy kovov alkalických zemín, hlavne hydroxid sodný. Účelne obsahuje pracia voda len zhruba také množstvo zásaditých látok, ktoré sú potrebné na dosiahnutie žiaducej hodnoty pH, prednostne cca 13. Množstvo pracej vody je zvolené tak, aby bolo dostatočné na ďalekosiahle odstránenie fenolických látok obsahujúcich moč bez toho, aby pritom bolo vymyté za zmienku stojacie množstvo konjugovaných estrogénov.
Ako účelné sa ukazuje napr. použitie od 2 do 10, hlavne od 4 do 6, ložných objemov premývacej kvapaliny na jeden ložný objem adsorpčnej kyseliny. Pritom sa pracia voda účelne vedie reaktorom obsahujúcim adsorpčnú živicu s prietokovou rýchlosťou od 3 do 10, prednostne od 5 do 7, objemových dielov pracej vody/1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu.
V kroku daného postupu c) sa nakoniec spracuje premytá adsorpčná živica nasýtená zmesou konjugovaných estrogénov s množstvom elučnej kvapaliny, ktoré je dostatočné na elúciu zmesi konjugovaných estrogénov, a získa sa eluát obsahujúci prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov PMU. Podľa vynálezu používaná elučná kvapalina predstavuje s vodou miešateľné organické rozpúšťadlo zo skupiny s vodou miešateľných éterov, nižších alkanolov a nižších alifatických ketónov alebo zmes z takého s vodou miešateľného rozpúšťadla a eventuálne alkalický upravenej vody Ako éterické zložky sa hodia s vodou miešateľné cyklické étery ako tetrahydrofurán alebo dioxán, ale tiež s vodou miešateľné étery s otvoreným reťazcom ako napr. ctylénglykoldimetyléter (=Monoglyme), dietylénglykoldimetyléter (-Diglyme) alebo etyloxyetyloxyetanol (=karbitol). Ako nižšie alkoholy sa hodia s vodou miešateľné alkylalkoholy s 1 - 4, prednostne 1 - 3, atómami uhlíka, hlavne etanol alebo izopropanol. Ako nižšie alifatické ketóny sa hodia s vodou miešateľné ketóny s 3 - 5 uhlíkovými atómami, hlavne acetón. Ako obzvlášť priaznivé sa ukazujú elučné kvapaliny, v ktorých je organickým rozpúšťadlom etanol. Účelne sú ako elučné kvapaliny používané zmesi z vopred menovaných a s vodou miešateľných organických rozpúšťadiel a eventuálne alkalický upravenej vody. Hodnota pH takých vodu obsahujúcich elučných činidiel leží v neutrálnej až alkalickej oblasti až do pH 13 a môže prednostne byť cca 10 až 12. Ako rozpúšťadlovä zložka vo vode obsahujúcej elučnej kvapaline je volené rozpúšťadlo stabilné v používanej oblasti pH. Vo vodu obsahujúcich alkalických elučných kvapalinách s hodnotami pH cca 10 až 12 sa hodia ako rozpúšťadlové zložky nižšie alkoholy, prednostne etanol. Žiadaná hodnota pH vodnatého elučného činidla sa nastavuje pridaním zodpovedajúceho množstva vodorozpustnej inertnej zásaditej látky, prednostne anorganickej zásady, napr. hydroxidu alkalického kovu alebo hydroxidu kovu alkalických zemín, hlavne hydroxidu sodného. Vo vodnatých elučných kvapalinách môže objemový pomer s vodou miešateľného organického rozpúšťadla s vodou ležať v rozsahu od 40 : 60 do 20 : 80, prednostne cca 30 : 70. Použité množstvo elučného činidla môže byť cca 3 až 10, hlavne cca 4 až 6 jeho objemu na príslušný objem adsorpčnej živice. Vhodnejšie sa elučné kvapalina vedie reaktorom obsahujúcim zmesou estrogénov napojenú adsorpčnú živicu takou prietokovou rýchlosťou, aby kontaktný čas postačoval na úplnú elúciu zmesi konjugovaných estrogénov. Pri použití zmesi etanolu s vodou v objemovom pomere 30 ; 70 sa hodia príkladne prietokové rýchlosti od 3 do 10, prednostne od 5 do 7, objemových dielov elučnej kvapaliny na 1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu. Účelne sa vykonáva elúcia v teplotnom rozsahu teploty miestnosti cca do 60 °C, prednostne pri cca 40 až 50 °C. V žiaducom prípade sa prietoková rýchlosť reguluje prácou pri ľahko zvýšenom tlaku, napr. pri pretlaku až do 0,2 bar a eluát sa zachytáva v niekoľkých frakciách. Obsahy jednotlivých eluátových frakcií konjugovaných estrogénov a fenolických, v moči obsiahnutých látok, ako sú krezoly a HPMF môžu byť určené známym spôsobom pomocou vysokovýkonnej kvapalinovej chromatografíe (=high performance liquid chromatography, skrátené ako „HPLC“).
Pri elúcii sa najprv získa slabo zafarbená až bezfarebná, prakticky estrogény neobsahujúca predkvapová frakcia, ktorej množstvo zodpovedá všeobecne cca jednému ložnému objemu. Hlavné množstvo konjugovaných estrogénov, príkladne medzi 80 a 99 % konjugovaných estrogénov existujúcich vo východiskovej PMU (v moči žrebných kobýl), sa nachádza v nasledujúcich, tmavožlto až hnedo zafarbených hlavných eluátových frakciách, ktorých množstvo zahŕňa všeobecne 2 až 4 ložné objemy. V nasledujúcich dokvapových zadných frakciách sú všeobecne obsiahnuté už len stopy konjugovaných estrogénov. Pokiaľ sú získané zadné frakcie, ktoré obsahujú ešte konjugované estrogény nad 10 hmotn. % vztiahnuté na sušinu a menej než 0,6 hmotn. % krezolov a HPMF vztiahnuté na sušinu, môžu byť tieto frakcie spojené s hlavným eluátom bohatým na estrogény na ďalšie spracovanie.
Hlavný eluát oddelený opísaným spôsobom od adsorpčnej živice obsahuje v PMU sa vyskytujúcu prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov vedľa len malého podielu pôvodne v PMU prítomného obsahu fenolických, v moči obsiahnutých látok. Tento eluát môže slúžiť ako východiskový materiál na výrobu liečiv obsahujúcich prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov. Ak je to žiaduce, môže byť eluát ďalej zúžený známym spôsobom, aby bol získaný koncentrát ďaleko zbavený organických rozpúšťadiel, ktorý je vhodný na ďalšie galenické spracovanie. V žiaducom prípade môže byť tiež sušením rozprašovaním vyrobená zmes pevných látok zbavená elučného činidla. Pokiaľ má byť prirodzená zmes konjugovaných estrogénov použitá na výrobu pevných liekov, môže byť vhodné primiešať k eluátu obsahujúcemu konjugované estrogény ešte pred koncentrovaním alebo sušením rozprašovaním pevný nosič, aby sa týmto spôsobom získala zmes pevných látok obsahujúca konjugované estrogény a nosiče. Ako eluát obsahujúci zmes estrogénov, tak z toho vyrobený koncentrát alebo rozprašovaním vysušený pevný produkt môžu byť známym spôsobom zapracované do pevných alebo kvapalných galenických prípravkov ako napr. tabliet, dražé, kapsúl alebo emulzií. Tieto galenické prípravky môžu byť vyrábané podľa známych spôsobov s použitím zvyčajných pevných alebo kvapalných nosičov ako napr. škrobu, celulózy, mliečneho cukru (laktózy) alebo mastenca alebo kvapalných parafínov a/alebo s použitím obvyklých farmaceutických pomocných látok napr. napučiavadiel tabliet, rozpúšťacích alebo konzervačných prostriedkov. Tak môže byť produkt obsahujúci konjugované estrogény zmiešaný známym spôsobom s farmaceutickými nosičmi a pomocnými prostriedkami a daná zmes môže byť vyhotovená do vhodného dávkovacieho tvaru,
Nasledujúce príklady majú bližšie vysvetliť daný vynález, avšak bez toho, aby bol obmedzený jeho rozsah.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklady 1 - 3
Všeobecný pracovný predpis na získanie extraktu z PMU obsahujúceho prirodzenú zmes v PMU obsiahnutých konjugovaných estrogénov, ktoré sú ďalekosiahlo obohatené fenolickými látkami obsiahnutými v moči.
A) Adsorpcia obsahu cstrogénu PMU na semipolámej adsorpčnej živici z polyakrylesterov
Stĺpec s výškou 30 cm s priemerom 2,4 cm je naplnený 65 ml vo vode napučanou semipolámou polyakrylesterovou adsorpčnou živicou (= Amberlite XAD-7 firmy Rohm a Haas, s veľkosťou zŕn 0,3 až 1,2 mm, dipólmomentom 1,8 Debye, priemerným priemerom pórov 80 Angstrómov a špecifickým povrchom cca 450 m2/g v suchom stave). 21 PMU filtrované mikrofiltračným zariadením alebo čistené vedením cez separátor (obsah sušiny (=TS) a tiež pomocou
HPLC určené obsahy estrónsulfátovej soli, krezolu a HPMF, pozri nasledujúcu tabuľku) sú pri teplote miestnosti vedené prietokovou rýchlosťou 6 ml/min. (=cca 5,5 ložného objemu za hodinu) cez daný stĺpec. Obsah estrogénov PMU je adsorbovaný úplne na takto napojenom stĺpci semipolámej adsorpčnej živice. Prebehnutá močová kvapalina je vyšetrovaná pomocou HPLC na obsah konjugovaných estrogénov (vypočítaný ako estrónsulfátová soľ) a ukazuje sa ako prakticky zbavená obsahu estrogénov. Kvapalina pretečená stĺpcom je odstránená.
B) Premývanie napojeného stĺpca s adsorpčnou živicou
Napojený stĺpec adsorpčnej živice je premytý 300 ml vodného roztoku hydroxidu sodného pri pH uvedenom v tabuľke. Okrem toho sa daným stĺpcom vedie alkalická pracia voda s prietokovou rýchlosťou 6 ml/min. (=cca 5,5 ložného objemu za hodinu). Pracia kvapalina, ktorá prešla, je vyšetrovaná pomocou HPLC na obsah estrónsulfátovej soli, krezolu a HPMF. Vyšetrenie ukázalo, že počas vymývacej fázy sa premyje menej než 5% všetkých estrogénov zachytených v stĺpci.
C) Desorpcia konjugovaných estrogénov z premytého stĺpca adsorpčnej živice
315 ml elučnej kvapaliny (pridaním hydroxidu sodného k zmesi alkalický upravenej vody a rozpúšťadla, zloženie a pH pozri nasledujúcu tabuľku) je vedené prietokovou rýchlosťou cca 6 ml/min. stĺpcom predhriatym na elučnú teplotu uvedenú v danej tabuľke. Eluát, ktorý prešiel, je zachytený do 6 frakcií. Prvá frakcia tvorí cca 65 ml (=cca 1 ložný objem), zvyšné frakcie tvoria vždy cca 50 ml. Jednotlivé frakcie sú vyšetrené pomocou HPLC na obsah estrónsulfátovej soli, krezolu a HPMF. Prvá frakcia sa zhromažďuje, pokiaľ sa eluát javí ako bezfarebný až slabo žltý. Táto frakcia obsahuje iba stopy estrónsulfátovej soli.
Po prebehnutí prvého ložného objemu eluátu dochádza ku zmene farby eluátu na intenzívny tmavohnedý farebný tón. V nasledujúcich frakciách 2 až 4 sú potom obsiahnuté cca 80 až 98 % všetkého množstva konjugovaných estrogénov adsorbovaných na stĺpci. Zvyšné frakcie obsahujú už len malé množstvo estrónsulfátovej soli. To je rovnako značne viditeľné na poklese farebnej intenzity. Pripadne môžu byť zvyšné frakcie po oddestilovaní daného rozpúšťadla pridané ešte ku kroku A).
Pre frakcie obsahujúce hlavné množstvo konjugovaných estrogénov sú v nasledujúcej tabuľke obsiahnuté vždy obsah sušiny (TS) v hmotn. % a obsahy estrogénsulfátu, krezolu a HPMF určené pomocou HPLC. Tieto frakcie obsahujú extrakty vhodné na ďalšie galenické spracovanie.
D) Regenerácia stĺpca adsorpčnej živice
Na regeneráciu sa daný stĺpec premyje najprv 100 ml zmesi etanol/voda obsahujúcej 50 % etanolu a upravenej na pH 12, potom sa 150 ml vodného 10 %-ného roztoku citrónu amónneho a ešte so 150 ml zmesou etanol/voda a nakoniec so 100 ml destilovanej vody. Celková regenerácia prebieha pri teplote 45 °C. Stĺpec môže byť viackrát, príkladne až 40-krát, nasýtený a znovu regenerovaný.
Claims (8)
- PATENTOVÉ NÁROKYL Postup na získanie fenolickými, v moči obsiahnutými látkami obohatenej prirodzenej zmesi konjugovaných estrogénov z moču žrebných kobýl, vyznačujúci sa t ý m , žea) močová kvapalina, ktorá predstavuje moč zbavený slizovitých a pevných látok, zúžený koncentrát tohto moču alebo membránovou filtráciou tohto moču získaný zúžený močový retenát, sa kontaktuje s množstvom neiónovej semipolámej polymémej adsorpčnej živice dostatočným na adsorpciu zmesi konjugovaných estragónov obsiahnutej v močovej kvapaline a semipoláma polyméma adsorpčná živica s naadsorbovanou danou zmesou konjugovaných estragónov sa oddeľuje od ostatnej močovej kvapaliny,b) neiónová semipoláma polyméma adsorpčná živica s naadsorbovanou zmesou konjugovaných estrogénov sa premýva pracou vodou upravenou minimálne na pH 12 ac) premytá adsorpčná živica sa kontaktuje s takým množstvom elučnej kvapaliny, ktoré je dostatočné na desorpciu adsorbovanej zmesi konjugovaných estrogénov, pričom táto kvapalina predstavuje s vodou miešateľné organické rozpúšťadlo zo skupiny s vodou miešatcľných éterov, nižších alkanolov a nižších alifatických ketónov alebo zmes z organického rozpúšťadla miešateľného s vodou a eventuálne alkalický upravenej vody, eluát obsahujúci prirodzenú zmes konjugovaných estrogénov sa od adsorpčnej živice oddelí a prípadne koncentruje.
- 2. Postup podľa nároku 1,vyznačujúci sa t ý m , že v kroku a) je ako neiónová semipoláma adsorpčná živica použitá makroporézna živica z esterov polykarbónových živíc.
- 3. Postup podľa nároku 2, vyznačujúci sa t ý m , že ako živica z esterov polykarbónových kyselín je použitá priečne sieťovaná alifatická živica esteru polykarbónovej kyseliny, prednostne priečne sieťovaná polyakrylesterová živica s prednostne makroretikulámou štruktúrou.
- 4. Postup podľa jedného z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, žc sa v postupovom kroku a) 1 objemový diel neiónovej semipolámej adsorpčnej živice nasýti množstvom močovej kvapaliny zodpovedajúcim 20 až 80, prednostne 30 až 50, objemovým dielom moču.
- 5. Postup podľa jedného z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že v kroku a) sa močová kvapalina vedie reaktorom obsahujúcim neiónovú semipolámu polymému adsorpčnú živicu prietokovou rýchlosťou, ktorá zodpovedá prietoku 3 až 10, prednostne 5 až 7 objemových dielov moču/1 objemový diel adsorpčnej živice za hodinu.
- 6. Postup podľa jedného z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že v kroku b) použitá pracia voda je vodným roztokom hydroxidu sodného upraveného na pH cca 12,5 až 13,5.
- 7. Postup podľa jedného z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že v kroku c) je ako elučná kvapalina použitá zmes z vody a s vodou miešateľného organického rozpúšťadla s objemovým pomerom organického rozpúšťadla k vode v rozsahu 20 : 80 až 40 : 60, hlavne 30: 70.
- 8. Postup podľa jedného z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že v postupovom kroku c) je použitá elučná kvapalina obsahujúca etanol.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/EP1996/003820 WO1998008526A1 (de) | 1996-08-30 | 1996-08-30 | Verfahren zur gewinnung von oestrogenen aus stutenharn |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK24599A3 SK24599A3 (en) | 1999-10-08 |
| SK281368B6 true SK281368B6 (sk) | 2001-02-12 |
Family
ID=8166300
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK245-99A SK281368B6 (sk) | 1996-08-30 | 1996-08-30 | Spôsob získavania estrogénov z moču kobýl |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0923381B1 (sk) |
| JP (1) | JP4285773B2 (sk) |
| AT (1) | ATE264109T1 (sk) |
| AU (1) | AU722739B2 (sk) |
| CA (1) | CA2263757C (sk) |
| CZ (1) | CZ298761B6 (sk) |
| DE (2) | DE19681621D2 (sk) |
| DK (1) | DK0923381T3 (sk) |
| ES (1) | ES2219694T3 (sk) |
| HK (1) | HK1021884A1 (sk) |
| HU (1) | HU228763B1 (sk) |
| IL (1) | IL128670A (sk) |
| NO (1) | NO318390B1 (sk) |
| PL (1) | PL185919B1 (sk) |
| PT (1) | PT923381E (sk) |
| SK (1) | SK281368B6 (sk) |
| WO (1) | WO1998008526A1 (sk) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10037389A1 (de) | 2000-08-01 | 2002-02-14 | Solvay Pharm Gmbh | Verfahren und Vorrichtung zur Anreicherung und Stabilisierung von konjugierten Oestrogenen aus Stutenharn |
| DE10159161A1 (de) | 2001-12-01 | 2003-06-18 | Solvay Pharm Gmbh | Verfahren zur Gewinnung von Oestrogenen aus Stutenharn |
| TWI332400B (en) | 2001-12-14 | 2010-11-01 | Solvay Pharm Gmbh | Preformulation for the tableting of natural mixtures of conjugated estrogens |
| TWI252111B (en) | 2001-12-14 | 2006-04-01 | Solvay Pharm Gmbh | Matrix film tablet with controlled release of a natural mixture of conjugated estrogens |
| AR041121A1 (es) * | 2002-10-11 | 2005-05-04 | Solvay Pharm Gmbh | Procedimiento para la obtencion de una mezcla natural de estrogenos conjugados |
| US20040072814A1 (en) | 2002-10-11 | 2004-04-15 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Method for obtaining a natural mixture of conjugated equine estrogens depleted in non-conjugated lipophilic compounds |
| CN1332973C (zh) * | 2003-03-06 | 2007-08-22 | 深圳市海达克实业有限公司 | 结合态雌性激素的提取方法 |
| ATE410435T1 (de) * | 2003-07-17 | 2008-10-15 | Solvay Pharm Gmbh | Verfahren zur gewinnung eines natürlichen gemisches konjugierter equin esrtrogene |
| CA2542515C (en) * | 2003-10-24 | 2012-08-14 | Thorgard Pharmaceuticals (Aust) Pty Ltd | Estrogen extraction from pregnant animal urine |
| US20140371180A1 (en) | 2013-06-14 | 2014-12-18 | Dr. Reddy's Laboratories Ltd. | Process for purification and isolation of estrogens |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL7111863A (sk) * | 1970-10-13 | 1972-04-17 | ||
| CS224881B1 (cs) * | 1981-10-21 | 1984-01-16 | Jiri Semenka | Prostředek pro izolaci celkových 17-oxosteroiďú z biologického materiálu na bázi sorbentů |
-
1996
- 1996-08-30 EP EP96930139A patent/EP0923381B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-30 DE DE19681621T patent/DE19681621D2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-08-30 CZ CZ0059899A patent/CZ298761B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 SK SK245-99A patent/SK281368B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 JP JP51119598A patent/JP4285773B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-08-30 WO PCT/EP1996/003820 patent/WO1998008526A1/de active IP Right Grant
- 1996-08-30 AT AT96930139T patent/ATE264109T1/de active
- 1996-08-30 IL IL12867096A patent/IL128670A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 ES ES96930139T patent/ES2219694T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-30 DK DK96930139T patent/DK0923381T3/da active
- 1996-08-30 DE DE59610985T patent/DE59610985D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-08-30 CA CA002263757A patent/CA2263757C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-08-30 PT PT96930139T patent/PT923381E/pt unknown
- 1996-08-30 AU AU69304/96A patent/AU722739B2/en not_active Ceased
- 1996-08-30 HU HU9903776A patent/HU228763B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-08-30 PL PL96331884A patent/PL185919B1/pl unknown
-
1999
- 1999-02-26 NO NO19990952A patent/NO318390B1/no not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-02-09 HK HK00100736A patent/HK1021884A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU722739B2 (en) | 2000-08-10 |
| CA2263757C (en) | 2007-10-23 |
| DE59610985D1 (de) | 2004-05-19 |
| EP0923381A1 (de) | 1999-06-23 |
| HK1021884A1 (en) | 2000-07-14 |
| NO318390B1 (no) | 2005-03-14 |
| PL331884A1 (en) | 1999-08-16 |
| JP4285773B2 (ja) | 2009-06-24 |
| AU6930496A (en) | 1998-03-19 |
| HU228763B1 (hu) | 2013-05-28 |
| SK24599A3 (en) | 1999-10-08 |
| PL185919B1 (pl) | 2003-08-29 |
| NO990952D0 (no) | 1999-02-26 |
| WO1998008526A1 (de) | 1998-03-05 |
| CZ59899A3 (cs) | 1999-06-16 |
| DE19681621D2 (de) | 1999-09-30 |
| IL128670A (en) | 2001-05-20 |
| DK0923381T3 (da) | 2004-05-10 |
| JP2000516938A (ja) | 2000-12-19 |
| EP0923381B1 (de) | 2004-04-14 |
| HUP9903776A3 (en) | 2000-04-28 |
| PT923381E (pt) | 2004-09-30 |
| CA2263757A1 (en) | 1998-03-05 |
| NO990952L (no) | 1999-02-26 |
| ES2219694T3 (es) | 2004-12-01 |
| CZ298761B6 (cs) | 2008-01-23 |
| ATE264109T1 (de) | 2004-04-15 |
| HUP9903776A2 (hu) | 2000-03-28 |
| IL128670A0 (en) | 2000-01-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK281368B6 (sk) | Spôsob získavania estrogénov z moču kobýl | |
| US5723454A (en) | Method for obtaining estrogens from pregnant mare urine by solid phase extraction on a semi-polar adsorber resin | |
| CA2468933C (en) | Method for obtaining oestrogen from mare's urine | |
| JP4125788B2 (ja) | 牝馬の尿からエストロゲンを取得する方法 | |
| US5814624A (en) | Method for obtaining estrogens from pregnant mare urine by solid-phase extraction | |
| RU2179028C2 (ru) | Способ извлечения эстрогенов из мочи кобылы | |
| US6855704B2 (en) | Process for isolating conjugated estrogens | |
| US7964586B2 (en) | Method for obtaining a natural mixture of conjugated equine estrogens | |
| RU2179029C2 (ru) | Способ получения эстрогенов из кобыльей мочи | |
| MXPA99001923A (es) | Procedimiento para la obtencion de estrogenos a partir de orina de yeguas | |
| CN1228027A (zh) | 由牝马尿液获取雌激素的方法 | |
| CN1234740A (zh) | 由牝马尿获取雌激素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TC4A | Change of owner's name |
Owner name: ABBOTT PRODUCTS GMBH, HANNOVER, DE Effective date: 20120920 |
|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20150830 |