CZ59899A3 - Postup k získávání estrogenů z moči klisen - Google Patents

Description

Předložený vynález se týká získávání přirozené směsi konjugovaných estrogenů z moči březích klisen. Dosavadní stav techniky

Estrogeny jsou v lékařství používány k hormonální substituční terapii. Zejména jsou směsi estrogenů používány k léčbě a prevenci potíží vyskytujících se u žen v době přechodu po přirozené nebo umělé menopauze. Přitom se přirozené směsi konjugovaných estrogenů, jež se vyskytují v moči březích klisen, ukázaly jako zvlášť účinné a dobře snášenlivé.

Rozpuštěný obsah pevných látek v moči březích klisen (= pregnant mares urine, v následujícím zkráceno jako PMU) může kolísat přirozeně v širokých rozsazích a obecně leží v rozsahu 40-90 g sušiny na litr. Vedle močoviny a jiných obvyklých moč obsahujících látek jsou v obsahu pevných látek PMU obsaženy fenolické složky v množstvích cca 2-5 hm.% vztaženo na sušinu. Mezi těmito fenolickými složkami se nacházejí kresoly a jako HPMF známý dihydro-3,4-bis[3-hydroxyfenyl)metyl]-2(3H)-furanon. Tyto látky se mohou vyskytovat ve volné nebo konjugované formě. V PMU je obsažena přirozená směs estrogenů, která dalekosáhle existuje v konjugované formě, např, jako sodná sůl poloesteru kyseliny sírové (v následujícím zkráceno jako sulfátová sůl. Obsah konjugovaných estrogenů (vypočten jako sulfátová sůl estrogenů) může činit mezi 0,3 a 1 hm.% vztaženo na sušinu.

Obvykle jsou extrakty z PMU obsahující konjugované estrogeny získávány extrakcí pomocí polárních, s vodou se nemísitelných nebo jen málo mísitelných organických rozpouštědel, jako jsou např. etylester kyseliny octové, n-butanol nebo cyklohexanol. U takových extrakcí kapalina-kapalina se však vyskytuje velký počet problémů, jako je silná tvorba pěny, tvorba sedimentu, tvorba emulze a špatné dělení fází. Obecně je zapotřebí více extrakčních kroků, což vede ke ztrátám a jen k částečnému získání obsahu estrogenů.

Von H. L. Bradlowem bylo roku 1968 (viz Steroidy 11 (1968), 265-272) k extrakci konjugovaných estrogenů z moči navrženo použití Amberlitu 2

XAD-2^R, neutrální nepolární hydrofobní polystyrénové pryskyřice firmy Rohm a Haas. Uvedená kapacita adsorpce je malá. Podle Bradlowa se eventuálně zředěná moč vede s nízkou průtokovou rychlostí přes sloupec obsahující danou pryskyřici. Estrogeny jsou eluovány metanolem nebo etanolem. Nejsou však učiněny žádné údaje o ostatních látkách obsažených v eluátu obsahujícím estrogeny.

Podstata vynálezu

Úkolem tohoto vynálezu je vyvinout technický postup k získávání přirozené směsi konjugovaných estrogenů z PMU, přičemž by se zabránilo známým nevýhodám dosud obvyklých extrakcí kapalinakapalina, a jenž dodává produkt obohacený fenolickými, moč obsahujícími látkami a dalekosáhle zbavený kresolů a HPMF.

Nyní byl nalezen postup, jímž může být v jedné extrakci pevné látky na neiontové semipolámí polymemí adsorbční pryskyřici získána směs obohacená fenolickými, moč obsahujícími látkami, jež je dalekosáhle bavená kresolů a HPMF, avšak prakticky úplně obsahuje přirozený obsah estrogenů v PMU, která může • · • ·

sloužit jako výchozí materiál pro výrobu farmaceutik obsahujících přirozenou směs konjugovaných estrogenů z PMU jako účinnou složku.

Postup podle vynálezu k získávání fenolickými, moč obsahujícími látkami obohacené přirozené směsi konjugovaných estrogenů z PMU je vyznačen tím, že

a) se močová kapalina, která představuje moč zbavenou slizových a pevných látek, zúžený koncentrát této moči nebo zúžený močový retentát získaný membránovou filtrací této moči, kontaktuje s příslušným množstvím semipolámí polymemí adsorbční pryskyřice, jež je dostatečné k adsorpci směsi konjugovaných estrogenů obsažené v močové kapalině, a odděluje směsí konjugovaných estrogenů napojenou semipolámí polymemí adsorbční pryskyřici od ostatní močové kapaliny,

b) se semipolámí polární adsorbční pryskyřice napojená směsí konjugovaných estrogenů promývá prací vodou nastavenou na rozsah pH minimálně 12,0, zejména 12,5 - 14,

c) se promytá adsorbční pryskyřice kontaktuje s k desorpci adsorbované směsi konjugovaných estrogenů dostatečným množstvím eluční kapaliny, jež představuje s vodou mísitelné organické rozpouštědlo ze skupiny s vodou mísitelným éterem, nižších alkanolů a nižších alifatických ketonů nebo směs z organického rozpouštědla mísitelného s vodou a z eventuálně alkalicky nastavené vody, a odděluje a eventuálně zužuje eluát obsahující přirozenou směs konjugovaných estrogenů od adsorbční pryskyřice.

Pro daný postup podle vynálezu mohou být používány PMU jako takový, z něho zúžením získaný koncentrát nebo z něho membránovou filtrací získaný retentát. Nashromážděná moč se nejprve známým způsobem zbaví slizových a pevných látek. Jako účelná se ukazuje sedimentace pevných a slizových látek a tyto se pak oddělí známými dělicími způsoby, např. dekantací, separací a/nebo filtrací. Tak může být PMU např. veden přes známé oddělovací zařízení, např. separátor, filtrační zařízení nebo sedimentační zařízení. Jako dělicí zařízení může sloužit např. pískové lože nebo mohou být použity obchodně běžné separátory, např. tryskové nebo komorové separátory. Žádoucí může být rovněž mikrofiltrační zařízení nebo ultrafiltrační zařízení, při jejichž použití může být současně dosaženo dalekosáhlého zbavení zárodků a virů filtrovaného PMU.

V žádoucím případě mohou být k moči přidávány konzervační prostředky, dezinfekční prostředky (germicidy), baktericidy a/nebo anthelmintika.

Pokud místo PMU má být použit zkoncentrovaný PMU-retentát, může být tento získáván z PMU pomocí známé membránové filtrace. Obsah pevných látek retentátu a jeho složení se mohou měnit podle použitého PMU a membrány použité k membránové filtraci. Např. při použití nanofiltrátové membrány může být dosaženo téměř bezztrátové koncentrace obsahu estrogenů v PMU-retentátu při současném odstranění látek obsažených při až 50 hm.%-ním nízkomolekulámího PMU. Pro daný postup podle vynálezu mohou být použity PMU-retentáty, které byly zkoncentrovány až na poměr cca 1:10, lépe na poměr cca 1:7, a jejichž objem může být zúžen až na cca 1/10, přednostně cca 1/7, původního objemu PMU.

Semipolámími polymemími adsorbčními pryskyřicemi použitelnými v kroku a) daného postupu jsou porézní organické neiontové polymery, jež mají oproti nepolárním hydrofobním polymemím adsorbčním pryskyřicím přechodovou polaritu (= např. s dipólovým momentem aktivního povrchu pryskyřice v • · · · • ·

rozsahu od 1,0 do 3,0, zvláště od 1,5 do 2,0 Debye) a trochu hydrofilnější strukturu, např. pryskyřice z esterů polykarbonových kyselin. Účelně jsou použity makroporézní semipolámí pryskyřice s přednostně makroretikulámí (síťově uspořádanou) strukturou a s průměrnými průměry pórů v rozsahu od 50 do 150, přednostně 70 až 100 Angstrómů, a specifickým povrchem v rozsahu od 300 do 900, přednostně od 400 do 500 m2/g. Jako obzvlášť vhodnými se ukazují makroporézní, příčně síťované alifatické pryskyřice z esterů polykarbonových kyselin, zejména příčně síťované pryskyřice z polyakrylesterů, jako je např. Amberlite XAD-7R firmy Rohma a Haase.

Podle vynálezu může adsorpce konjugovaných estrogenů na semipolámí adsorbční pryskyřici probíhat kontaktováním PMU nebo jeho retentátu s adsorbční pryskyřicí, když se močová kapalina zavede do reaktoru obsahujícího adsorbční pryskyřici a je s ní udržována v kontaktu po dobu dostatečnou pro adsorpci příslušného obsahu estrogenů. Po proběhlé adsorpci konjugovaných estrogenů na semipolámí adsorbční pryskyřici může být adsorbční pryskyřice napojená směsí konjugovaných estrogenů oddělena známým způsobem od ostatní močové kapaliny. Účelněji může být močová kapalina vedena sloupcem obsahujícím danou adsorbční pryskyřicí takovou průtokovou rychlostí, že kontaktní doba postačí pro adsorpci daného obsahu estrogenů. Vhodné jsou např. průtokové rychlosti, které odpovídají průtoku od 3 do 10, přednostně od 5 do 7 objemových dílů PMU/1 objemový díl adsorbční pryskyřice/hodinu. Adsorpce se provádí přednostně při teplotě místnosti. Účelně může být průtoková rychlost močové kapaliny řízena reaktorem pracemi při malém přetlaku nebo podtlaku. Množství aplikované semipolámí adsorbční pryskyřice se může měnit podle dmhu použité adsorbční pryskyřice a množství obsahu pevných látek v močové kapalině. Při použití PMU může být příkladně jeden objemový díl adsorbční pryskyřice, např. příčně zesítěné alifatické adsorbční pryskyřice z esterů polykarbonových kyselin, napojen až 80 objemovými díly předem zpracovaného PMU, aniž by byla prokazatelná znatelná množství estrogenů v odtékající močové kapalině. Při použití koncentrátu nebo retentátu PMU se zatěžovací kapacita adsorbční pryskyřice redukuje přirozeně v té míře, v níž jsou tyto zkoncentrovány. Tak může být např. 1 objemový díl příčně zesíťované adsorbční pryskyřice z alifatických esterů polykarbonových kyselin napojen množstvím močové kapaliny odpovídajícím 20 až 80, přednostně 30 až 50, objemovým dílům PMU.

Semipolámí adsorbční pryskyřice napojená směsí konjugovaných estrogenů se v postupovém kroku b) promývá prací vodou nastavenou na rozsah pH minimálně 12,0, zejména od 12,5 do 14, přednostně cca od 12,5 až 13,5. Jako prací voda mohou být použity vodné roztoky inertních zásaditých látek rozpustných v močové kapalině, jež jsou dostatečně silné, aby bylo dosaženo hodnot pH alespoň 12,5. Oproti semipolámí polymemí adsorbční pryskyřici se jako inertní, vodorozpustné zásadité látky hodí přednostně vodorozpustné anorganické zásady, jako jsou hydroxidy alkalických kovů nebo hydroxidy kovů alkalických zemin, zejména hydroxid sodný. Účelně obsahuje prací voda jen zhruba takové množství zásaditých látek, jež jsou potřebné k dosažení žádoucí hodnoty pH, přednostně cca 13. Množství prací vody je zvoleno tak, aby bylo postačující pro dalekosáhlé odstranění fenolických látek obsahujících moč, aniž by přitom byla vymyta za zmínku stojící množství konjugovaných estrogenů.

Jako účelné se ukazuje např. použití od 2 do 10, zejména od 4 do 6, ložných objemů promývací kapaliny najeden ložný objem adsorbční kyseliny. Přitom se prací voda účelně vede reaktorem obsahujícím • · · · ♦♦···«····· • « · · · ···· « · · · · ·· ······ • · · · · · · · ·····*· ·· «· ^ř · · · adsorbční pryskyřici s průtokovou rychlostí od 3 do 10, přednostně od 5 do 7, objemových dílů prací vody/1 objemový díl adsorbční pryskyřice/hodinu.

V kroku daného postupu c) se nakonec zpracuje promytá adsorbční pryskyřice napojená směsí konjugovaných estrogenů s množstvím eluční kapaliny, jež je dostatečné k eluci směsi konjugovaných estrogenů, a získá se eluát obsahující přirozenou směs konjugovaných estrogenů PMU. Podle vynálezu používaná eluční kapalina představuje s vodou mísitelné organické rozpouštědlo ze skupiny s vodou mísitelných éterů, nižších alkanolů a nižších alifatických ketonů nebo směs z takového s vodou mísitelného rozpouštědla a eventuálně alkalicky nastavené vody. Jako éterické složky se hodí s vodou mísitelné cyklické étery jako tetrahydrofuran nebo dioxan, ale také s vodou mísitelné étery s otevřeným řetězcem, jako např. etylénglykoldimetyléter (= Monoglyme), dietylénglykoldimetyléter (= Diglyme) nebo etyloxyetyloxyetanol (= karbitol). Jako nižší alkoholy se hodí s vodou mísitelné alkylalkoholy s 1 - 4, přednostně 1 - 3, atomy uhlíku, zejména etanol nebo isopropanol. Jako nižší alifatické ketony se hodí s vodou mísitelné ketony s 3 - 5 uhlíkovými atomy, zejména aceton. Jako obzvlášť příznivé se ukazují eluční kapaliny, v nichž je organickým rozpouštědlem etanol. Účelně jsou jako eluční kapaliny používány směsi z předem jmenovaných s vodou mísitelných organických rozpouštědel a eventuálně alkalicky nastavené vody. Hodnota pH takových vodu obsahujících elučních činidel leží v neutrální až alkalické oblasti až do pH 13 a může přednostně činit cca 10 až 12. Jako rozpouštědlová složka ve vodu obsahující eluční kapalině je voleno rozpouštědlo stabilní v používané oblasti pH. Ve vodu obsahujících alkalických elučních kapalinách s hodnotami pH cca 10 až 12 se hodí jako rozpouštědlové složky nižší alkoholy, přednostně etanol. Žádaná hodnota pH vodnatého elučního činidla se nastavuje přidáním odpovídajícího množství vodorozpustné inertní zásadité látky, přednostně anorganické zásady, např. hydroxidu alkalického kovu nebo hydroxidu kovu alkalických zemin, zejména hydroxidu sodného. Ve vodnatých elučních kapalinách může objemový poměr s vodou mísitelného organického rozpouštědla s vodou ležet v rozsahu od 40:60 do 20:80, přednostně cca 30:70. Použité množství elučního činidla může činit cca 3 až 10, zejména cca 4 až 6 jeho objemu na příslušný objem adsorbční pryskyřice. Vhodněji se eluční kapalina vede reaktorem obsahujícím směsí estrogenů napojenou adsorbční pryskyřici takovou průtokovou rychlostí, aby kontaktní doba postačovala k úplné eluci směsi konjugovaných estrogenů. Při použití směsi etanolu s vodou v objemovém poměru 30:70 se hodí příkladně průtokové rychlosti od 3 do 10, přednostně od 5 do 7, objemových dílů eluční kapaliny na 1 objemový díl adsorbční pryskyřice za hodinu. Účelně se provádí eluce v teplotním rozsahu teploty místnosti cca do 60°C, přednostně při cca 40 až 50°C. V žádoucím případě se průtoková rychlost reguluje prací při lehce zvýšeném tlaku, např. při přetlaku až do 0,2 bar a eluát se jímá v několika frakcích. Obsahy jednotlivých eluátových frakcí konjugovaných estrogenů a fenolických, v moči obsažených látek, jako jsou kresoly a HPMF, mohou být určeny známým způsobem pomocí vysokovýkonné kapalinové chromatografíe (= high performance liquid chromatography, zkráceno jako HPLC).

Při eluci se nejprve získá slabě zbarvená až bezbarvá, prakticky estrogeny neobsahující předkapová frakce, jejíž množství odpovídá obecně cca jednomu ložnému objemu. Hlavní množství konjugovaných estrogenů, příkladně mezi 80 a 99% konjugovaných estrogenů existujících ve výchozí PMU (moči březích klisen), se nachází v následujících, tmavožlutě až hnědě zbarvených hlavních eluátových frakcích, jejichž množství « · • · · · • · ·· · * · ······ • · ···· · · ······· ·· ·· ·» · ·· zahrnuje obecně 2 až 4 ložné objemy. V následujících dokapových zadních frakcích jsou obecně obsaženy již jen stopy konjugovaných estrogenů. Pokud jsou získány zadní frakce, jež obsahují ještě konjugované estrogeny nad 10 hm.% vztaženo na sušinu a méně než 0,6 hm.% kresolů a HPMF vztaženo na sušinu, mohou být tyto frakce spojeny s hlavním eluátem bohatým na estrogený k dalšímu zpracování.

Hlavní eluát oddělený výše popsaným způsobem od adsorbční pryskyřice obsahuje v PMU se vyskytující přirozenou směs konjugovaných estrogenů vedle jen malého podílu v PMU přítomného obsahu fenolických, v moči obsažených látek. Tento eluát může sloužit jako výchozí materiál pro výrobu léčiv obsahujících přirozenou směs konjugovaných estrogenů. Je-li to žádoucí, může být eluát dále zúžen známým způsobem, aby byl získán koncentrát dalece zbavený organických rozpouštědel, jenž je vhodný pro další galenické zpracování. V žádoucím případě může být také sušením rozprašováním vyrobena směs pevných látek zbavená elučního činidla. Pokud má být přirozená směs konjugovaných estrogenů použita pro výrobu pevných léků, může být vhodné přimíchat k eluátu obsahujícímu konjugované estrogeny již před koncentrováním nebo sušením rozprašováním pevný nosič, aby se tímto způsobem získala směs pevných látek obsahující konjugované estrogeny a nosiče. Jak eluát obsahující směs estrogenů tak z toho vyrobený koncentrát nebo rozprašováním vysušený produkt pevných látek mohou být známým způsobem zapracovány do pevných nebo kapalných galenických přípravků, jako např. tablet, dražé, kapslí nebo emulzí. Tyto galenické přípravky mohou být vyráběny podle známých způsobů s použitím obvyklých pevných nebo kapalných nosičů, jako např. škrobu, celulózy, mléčného cukru (laktózy) nebo talku (mastku) nebo kapalných parafínů a/nebo s použitím obvyklých farmaceutických pomocných látek, např. bubřidel tablet, rozpouštěcích nebo konzervačních prostředků. Tak může být produkt obsahující konjugované estrogeny smíchán známým způsobem s farmaceutickými nosiči a pomocnými prostředky a daná směs může být převedena do vhodného dávkovacího tvaru.

Následující příklady mají blíže vysvětlit daný vynález, aniž by však byl omezen jeho rozsah.

Příklady provedení vynálezu

Příklady 1 - 3

Obecný pracovní předpis k získání extraktu z PMU obsahujícího přirozenou směs v PMU obsažených konjugovaných estrogenů, jež jsou dalekosáhle obohaceny fenolickými látkami obsaženými v moči.

A) Adsorpce obsahu estrogenů PMU na semipolámí adsorbční pryskyřici z polyakrylesterů

Sloupec o výšce 30 cm s průměrem 2,4 cm je naplněn 65 ml ve vodě nabobtnalé semipolámí polyakrylesterové adsorbční pryskyřice (= Amberlite XAD-7 firmy Rohm a Haas, o velikosti zra 0,3 až 1,2 mm, dipólmomentu 1,8 Debye, průměrném průměru pórů 80 Angstrómů a specifickém povrchu cca 450 m^/g v suchém stavu). 2 1 PMU filtrované mikrofiltračním zařízením nebo čištěné vedením přes separátor (obsah sušiny (= TS) a také pomocí HPLC určené obsahy estronsulfátové soli, kresolu a HPMF viz následující tabulku) jsou při teplotě místnosti vedeny průtokovou rychlostí 6 ml/min (= cca 5,5 ložného objemu za hodinu) přes daný sloupec. Obsah estrogenů PMU je adsorbován plně na takto napojeném sloupci semipolámí adsorbční pryskyřice. Proběhlá močová kapalina je vyšetřována pomocí • · • ·· ·» ···· •••· ·· · · • · · · · ···· • * ·· · · · ······ • « · · · · · · ······· ·· ·· ·· ··

HPLC na obsah konjugovaných estrogenů (vypočtený jako estronsulfátová sůl) a ukazuje se jako prakticky zbavená obsahu estrogenů. Kapalina proteklá sloupcem je odstraněna.

B) Promývání napojeného sloupce s adsorbční pryskyřicí

Napojený sloupec adsorbční pryskyřice je promyt 300 ml vodného roztoku hydroxidu sodného při pH uvedeném v tabulce. Kromě toho se daným sloupcem vede alkalická prací voda s průtokovou rychlostí 6 ml/min (= cca 5,5 ložného objemu za hodinu).

Proběhlá prací kapalina je vyšetřována pomocí HPLC na obsah estronsulfátové soli, kresolu a HPMF. Vyšetření ukázalo, že během vymývací fáze se promyje méně než 5% všech estrogenů zachycených v sloupci.

C) Desorpce konjugovaných estrogenů z promytého sloupce adsorbční pryskyřice

315 ml eluční kapaliny (přidáním hydroxidu sodného ke směsi alkalicky nastavené vody a rozpouštědla, složení a pH viz následující tabulka) je vedeno průtokovou rychlostí cca 6 ml/min sloupcem předehřátým na eluční teplotu uvedenou v dané tabulce. Proběhlý eluát je zachycen do 6 frakcí. První frakce činí cca 65 ml (= cca 1 ložný objem), zbylé frakce činí vždy cca 50 ml. Jednotlivé „frakce jsou vyšetřeny pomocí HPLC na obsah estronsulfátové soli, kresolu a HPMF. První frakce se shromažďuje, dokud se eluát jeví bezbarvý až slabě žlutý. Tato frakce obsahuje jen stopy estronsulfátové soli.

Po proběhnutí prvního ložného objemu eluátu dochází ke změně barvy eluátu na intenzívní tmavohnědý barevný tón. V následujících frakcích 2 až 4 jsou pak obsaženy cca 80 až 98% veškerého množství konjugovaných estrogenů adsorbovaných na sloupci. Zbylé frakce obsahují již jen malé množství estrogensulfátové soli. To je rovněž značně viditelné na poklesu barevné intenzity. Po případě mohou být zbylé frakce po oddestilování daného rozpouštědla přidány ještě ke kroku postupu A).

Pro frakce obsahující hlavní množství konjugovaných estrogenů jsou v následující tabulce obsaženy vždy obsah sušiny (TS) ve hm.% a obsahy estrogensulfátu, kresolu a HPMF určené pomocí HPLC. Tyto frakce obsahují extrakty vhodné pro další galenické zpracování.

D) Regenerace sloupce adsorbční pryskyřice

K regeneraci se daný sloupec promyje nejprve 100 ml směsi etanol/voda obsahující 50% etanolu a nastavené na pH 12, potom se 150 ml vodného 10%-ního roztoku citranu amonného a ještě se 150 ml směsi etanol/voda a nakonec se 100 ml destilované vody. Celková regenerace probíhá při teplotě 45°C. Sloupec může být vícekrát, příkladně až 40-krát, napojen a znovu regenerován.

Claims (8)

1. Postup k získání fenolickými, v moči obsaženými látkami obohacené přirozené směsi konjugovaných estrogenů z moči březích klisen, vyznačující se tím, že se

a) močová kapalina, jež představuje moč zbavenou slizových a pevných látek, zúžený koncentrát této moči nebo membránovou filtrací této moči získaný zúžený močový retentát, kontaktuje s množstvím semipolámi polymemí adsorbční pryskyřice dostatečným k adsorpci směsi konjugovaných estrogenů obsažené v močové kapalině a semipolámi polymemí adsorbční pryskyřici napojenou danou směsí konjugovaných estrogenů odděluje od ostatní močové kapaliny,

b) semipolámi polymemí adsorbční pryskyřice napojená směsí konjugovaných estrogenů promývá prací vodou nastavenou minimálně na pH 12, a

c) promytá adsorbční pryskyřice kontaktuje s takovým množstvím eluční kapaliny, jež je dostatečné k desorpci adsorbované směsi konjugovaných estrogenů, přičemž tato kapalina představuje s vodou mísitelné organické rozpouštědlo ze skupiny s vodou mísitelných éterů, nižších alkanolů a nižších alifatických ketonů nebo směs z organického rozpouštědla mísitelného s vodou a eventuálně alkalicky nastavené vody, a odděluje a popřípadě zužuje přirozenou směs konjugovaných estrogenů od adsorbční pryskyřice.

2. Postup podle nároku 1, vyznačující se tím, že v kroku daného postupu a) je jako semipolámi adsorbční pryskyřice použita makroporézní pryskyřice z esterů polykarbonových pryskyřic.

3. Postup podle nároku 2, vyznačující se tím, že jako pryskyřice z esterů polykarbonových kyselin je použita příčně síťovaná alifatická pryskyřice esteru polykarbonové kyseliny, přednostně příčně síťovaná poiyakrylesterová pryskyřice s přednostně makroretikulámí strukturou,

4. Postup podle jednoho z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že se v postupovém kroku a) 1 objemový díl semipolámi adsorpční pryskyřice napojí množstvím močové kapaliny odpovídajícím 20 až 80, přednostně 30 až 50, objemovým dílům moči.

5. Postup podle jednoho z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že v kroku postupu a) se močová kapalina vede reaktorem obsahujícím semipolámi polymemí adsorpční pryskyřici průtokovou rychlostí, jež odpovídá průtoku 3 až 10, přednostně 5 až 7 objemových dílů moči/1 objemový díl adsorpční pryskyřice/hodinu.

6. Postup podle jednoho z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že v kroku postupu b) použitá prací voda je vodným roztokem hydroxidu sodného nastaveným na pH cca 12,5 až 13,5.

7. Postup podle jednoho z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že v kroku postupu c) je jako eluční kapalina použita směs z vody a s vodou mísitelného organického rozpouštědla s objemovým poměrem organického rozpouštědla k vodě v rozsahu 20:80 až 40:60, zejména 30:70.

8. Postup podle jednoho z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že v postupovém kroku c) je použita eluční kapalina obsahující etanol.