SK13762003A3

SK13762003A3 - Deriváty 5-tio-beta-D-xylopyranozidov, spôsob ich prípravy, farmaceutické kompozície tieto deriváty obsahujúce a ich terapeutické použitie

Info

Publication number: SK13762003A3
Application number: SK1376-2003A
Authority: SK
Inventors: V�Ronique Barberousse; Soth Samreth
Original assignee: Laboratoires Fournier Sa
Priority date: 2001-05-11
Filing date: 2002-05-07
Publication date: 2004-04-06
Also published as: JP2004534036A; HUP0304065A2; AR035880A1; CN1518557A; RU2003132704A; IL158587A0; FR2824559A1; DE60210595D1; MXPA03010259A; ZA200308317B; ATE323097T1; EP1385858B1; CA2446763A1; BR0209102A; EE200300548A; CZ20033021A3; WO2002092614A1; BG108347A; NO20034985L; PL369632A1

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových derivátov 4-metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-5tio-p-D-xylopyranozidov, ich použitia na prípravu antitrombotických liečiv, ako aj farmaceutických kompozícií, ktoré uvedené deriváty obsahujú ako účinnú látku. Vynález sa taktiež týka spôsobu prípravy týchto zlúčenín.

Doterajší stav techniky

Patentový dokument EP 421 829 popisuje benzopyranón-p-D-tioxylozidy so všeobecným vzorcom A

v ktorom

X znamená atóm kyslíka alebo atóm síry,

Y znamená najmä atóm vodíka alebo skupinu -COCH₃,

Ra znamená najmä alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy a Rb znamená najmä atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo atóm halogénu.

Tieto zlúčeniny sú užitočné pri liečení a prevencii ochorení súvisiacich s poruchami krvného obehu, najmä ako venózne antitrombotiká.

PP1376-2003

32210ΖΓ h

Avšak zlúčeniny popísané v uvedenom patentovom dokumente EP 421 829 majú nedostatočnú rozpustnosť, najmä vo fyziologicky prijateľných rozpúšťadlách, na to, aby umožňovali ich použitie injekčným podaním. V dôsledku toho nie je možné ich použitie v prípade naliehavého podania alebo v prípade pacientov, ktorí sú v bezvedomí, u ktorých je injekčné podanie jediným možným spôsobom aplikácie, alebo v prípade, keď je z dôvodu zjednodušenia potrebné podať niektorú z uvedených zlúčenín v kombinácii s ďalšími liečivami infúziou.

Podstata vynálezu

Vynález sa týka nových derivátov 4-metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-5tio-p-D-xylopyranozidov majúcich antitrombotickú účinnosť. Tieto zlúčeniny sú dobre rozpustné vo zvyčajných fyziologicky prijateľných rozpúšťadlách, najmä v injekčných prostrediach. Takto môžu byť tieto zlúčeniny podané buď orálne alebo prostredníctvom injekcie, najmä intravenóznou cestou.

Predmetom vynálezu sú teda zlúčeniny so všeobecným vzorcom I

v ktorom

Ri, R₂ a R_3> ktoré sú rovnaké alebo odlišné, nezávisle jeden na druhom znamenajú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 6 uhlíkových atómov, pyridinylovú skupinu alebo

PP1376-2003

32210/T h skupinu -CH2-NR4-R5, v ktorej R₄ a R₅ nezávisle jeden na druhom znamenajú atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo R₄a R5 tvoria spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, pyrolidinylovú skupinu, piperidinylovú skupinu, hexahydroazepinylovú skupinu, morfolinylovú skupinu alebo piperazinylovú skupinu, za predpokladu, že aspoň jeden zo substituentov Ri, R₂ alebo R₃ je odlišný od alkylovej skupiny obsahujúcej 1 až 6 uhlíkových atómov, ako aj ich soli, solváty a hydráty, najmä soli, solváty a hydráty, ktoré sú farmaceutický prijateľné.

V rámci tohto opisu sa alkylovou skupinou obsahujúcou 1 až 4 uhlíkové atómy rozumie priamy alebo rozvetvený nasýtený uhľovodíkový reťazec majúci 1 až 4 uhlíkové atómy. Príklady alkylovej skupiny obsahujúcej 1 až 4 uhlíkové atómy zahŕňajú metylovú skupinu, etylovú skupinu, propylovú skupinu, butylovú skupinu, 1-metyletylovú skupinu, 1-metylpropytovú skupinu alebo 1,1dimetyletylovú skupinu. Alkylovou skupinou obsahujúcou 1 až 6 uhlíkových atómov sa rozumie priamy alebo rozvetvený nasýtený uhľovodíkový reťazec obsahujúci 1 až 6 uhlíkových atómov. Príklady alkylovej skupiny obsahujúcej 1 až 6 uhlíkových atómov zahŕňajú vyššie uvedené alkylové skupiny a pentylovú skupinu a hexylovú skupinu.

Soľami sa rozumejú adičné soli získané reakciou zlúčeniny so všeobecným vzorcom I obsahujúce bázickú funkciu v nesolifikovanej forme s minerálnou alebo organickou kyselinou. Výhodne sa jedná o farmaceutický prijateľné adičné soli.

Z minerálnych kyselín, ktoré sú vhodné na prevedenie zlúčenín so všeobecným vzorcom I na ich soli, sa výhodne používajú kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fosforečná a kyselina sírová. Z organických kyselín, ktoré sú vhodné na prevedenie zlúčenín so všeobecným

PP1376-2003

32210/T h

9

9 r t

Γ !· · vzorcom I na ich soli, sa výhodne používajú kyselina metánsulfónová a kyselina trifluóroctová.

Medzi výhodné zlúčeniny podľa vynálezu patria zlúčeniny so všeobecným vzorcom I, v ktorom

Ri, R₂ a R₃, ktoré sú rovnaké alebo odlišné, nezávisle jeden na druhom znamenajú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, pyridín-3-ylovú skupinu alebo skupinu -CH2-NR4-R5, v ktorej R₄ a R₅ nezávisle jeden na druhom znamenajú atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo taktiež R₄ a R5 spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané tvoria pyrolidinylovú skupinu, piperidinylovú skupinu, alebo morfolinylovú skupinu, za predpokladu, že aspoň jeden zo substituentov R1, R₂ alebo R₃ je odlišný od alkylovej skupiny obsahujúcej 1 až 4 uhlíkové atómy, ako aj ich farmaceutický prijateľné soli, solváty a hydráty.

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom I, v ktorom sú aspoň dva zo substituentov R₁₍ R₂ alebo R₃ rovnaké, ako aj ich farmaceutický prijateľné soli, solváty a hydráty, sú taktiež výhodnými zlúčeninami podľa vynálezu.

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom I, v ktorom sú R_1t R₂ alebo R₃rovnaké, ako aj ich farmaceutický prijateľné soli, solváty a hydráty, sú taktiež výhodnými zlúčeninami podľa vynálezu.

Ďalším predmetom vynálezu je spôsob prípravy zlúčenín so všeobecným vzorcom I, ktorý zahŕňa reakčné stupne, ktoré spočívajú v tom, že

1) sa uvedie v reakcii derivát 5-tio-p-D-xylopyranozidu so všeobecným vzorcom II

PP 13 76-2003

322I0/T h

v ktorom buď sú R'_1t R'2 a R'₃ rovnaké a znamenajú hydroxyskupinu, alebo dva zo substituentov R'1, R'₂ a R'3 sú rovnaké a znamenajú hydroxyskupinu a ostávajúci substituent R^, R'₂ alebo R'₃ znamená OC(O)Ri, -OC(O)R₂ resp. -OC(O)R₃, pričom R1, R₂ a R₃ majú významy uvedené pre všeobecný vzorec I, alebo jeden zo substituentov R'1, R'₂ alebo R'₃ znamená hydroxyskupinu a dva ostávajúce substituenty R'1, R'₂ alebo R'₃znamenajú -OC(O)Ri, -OC(O)R₂ resp. -OC(O)R₃, pričom Ri, R₂ a R₃majú významy uvedené pre všeobecný vzorec I, s príslušnou kyselinou so všeobecným vzorcom III

R-C-OH (III)

II o

alebo s halogenidom príslušnej kyseliny so všeobecným vzorcom llla

R-C-OH (llla)

II o

v ktorom Hal znamená atóm halogénu, najmä atóm chlóru, atóm fluóru a atóm brómu, výhodne atóm chlóru a R znamená R1, R₂ alebo R₃, ich významy sú definované pri všeobecnom vzorci I,

PP1376-2003

32210/T h

2) na čo sa takto získaná zlúčenina so všeobecným vzorcom I prípadne prevedie na niektorú z jej solí.

Prvým reakčným stupňom spôsobu podľa vynálezu je esterifikačný stupeň, ktorý môže byť uskutočnený za známych esterifikačných podmienok.

Výhodne sa tento esterifikačný stupeň uskutočňuje za použitia kopulačného činidla, akým je karbodiimid, napríklad 1-[3-dimetylamino)propyl]3-etylkarbodiimid (EDCI), výhodne v prítomnosti 1-hydroxybenzotriazolu (HOBT).

Esterifikačná reakcia sa všeobecne uskutočňuje v bezvodom rozpúšťadle, akým je napríklad dimetylformamid (DMF), pyridín a dichlórmetán, za prítomnosti aprotickej bázy, akou je trietylamín a 4-dimetylaminopyridín (DMPA) alebo ich zmesi.

Výhodne sa pracuje v suchej inertnej atmosfére, napríklad pod atmosférou dusíka alebo argónu a za prítomnosti činidla zachycujúceho vlhkosť, akým je napríklad molekulárne sito.

Uvedená reakcia sa výhodne uskutočňuje v teplotnom rozmedzí vymedzenom teplotou miestnosti a teplotou varu rozpúšťadla pod spätným chladičom.

Druhým reakčným stupňom spôsobu podľa vynálezu je stupeň prevedenia na soľ, ktorý sa uskutočňuje o sebe známym spôsobom reakciou zlúčenín so všeobecným vzorcom I s minerálnymi alebo organickými kyselinami, najmä s farmaceutický prijateľnými minerálnymi alebo organickými kyselinami, akými sú napríklad kyselina chlorovodíková, kyselina metánsulfónová alebo kyselina trifluóroctová.

Kyseliny so všeobecným vzorcom III a halogenidy kyselín so všeobecným vzorcom llla sú zlúčeniny, ktoré sú buď komerčne dostupné alebo je ich možné pripraviť o sebe známymi klasickými metódami.

PPl 376-2003

32210ΛΓ h

Zlúčenina so všeobecným vzorcom II, v ktorom R> = R'₂ = R'3 = OH, ktorá je uvádzaná ako zlúčenina 11.1, je popísaná v patentovom dokumente EP 421 829. Ostatné zlúčeniny so všeobecným vzorcom II sa môžu získať zo zlúčeniny ,1.1 reakciou s kyselinou alebo halogénom kyseliny so všeobecným vzorcom III resp. Hla, v ktorých sú skupiny R1, R₂ a R₃ prípadne chránené ďalej uvedeným spôsobom.

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom II sa taktiež môžu získať z derivátov stanylénového typu so vzorcom IV

Bu,

Bu

(IV) v ktorom Bu znamená butylovú skupinu, spôsobom popísaným napríklad v J.Org.Chem. 1991, 56, 7015.

Funkcie esterového typu zlúčeniny so všeobecným vzorcom II môžu byť selektívne získané pôsobením jedného alebo dvoch ekvivalentov príslušných acylačných činidiel so všeobecným vzorcom Hla na zlúčeninu so vzorcom IV.

V prípade, že skupiny R1, R₂ alebo/a R3 obsahujú voľné amínové funkcie, potom je výhodné chrániť tieto funkcie ochrannými skupinami, aby bolo možné získať požadované zlúčeniny so všeobecným vzorcom I.

Protekčné a deprotekčné reakcie sú uskutočňované o sebe známym spôsobom. Výhodne sa ako ochranná skupina amínovej funkcie použije tercbutoxykarbonylová skupina, ktorá je odštiepiteľná v kyslom prostredí.

Takto chránené zlúčeniny so všeobecným vzorcom II budú uvádzané ako zlúčeniny ľ. Tieto zlúčeniny sa získajú reakciou zlúčenín so všeobecným vzorcom II s kyselinou alebo s halogenidom kyseliny so všeobecným vzorcom III resp. Hla, v ktorých sú skupiny R_1f R₂ a R3 chránené.

PP1376-2003

32210/T h

Zlúčeniny podľa vynálezu boli predmetom farmakologických štúdií.

Antitrombotická účinnosť zlúčenín podľa vynálezu bola študovaná in vivo u krýs za použitia modelu venóznej trombózy.

Účinnosť pri orálnom podaní bola študovaná za použitia protokolu popísaného v Thromb. Haemost. 1992, 67(1), 176-179. Účinnosť pri intravenóznom alebo orálnom podaní bola skúmaná podľa nasledujúceho protokolu.

Pokusy boli uskutočnené na krysích samčekoch Wistar, ktorí neboli v režime pôstu, mali telesnú hmotnosť 250 až 280 g a boli rozdelení do skupín po 10 jedincoch. Testované produkty boli zvieratám podávané buď orálne (žalúdočnou trubicou) vo forme roztoku alebo suspenzie vo fyziologickom sére alebo intravenóznou injekciou vo forme roztoku vo fyziologickom sére. Koncentrácia zlúčenín sa vypočíta tak, aby došlo k absorpcii množstva roztoku 2 ml/kg pri orálnom podaní a 1 ml/kg pri intravenóznej injekcii. Trombóza bola indukovaná v čase T (2, 4 alebo 8 hodín) po podaní testovaného produktu a vytvorený trombus bol odobratý a zvážený. Za účelom indukcie uvedenej trombózy bola uskutočnená venózna stáza pod hyperkoaguláciou technikou popísanou v: Wessler, J. Applied Physiol. 1959, 943 až 946, pričom ako hyperkoagulačné činidlo sa použil roztok aktivovaného faktoru X (Xa), poskytnutý spoločnosťou Biogenic a dávkovaný v množstve 7,5 nKat/kg. Účinnosť testovaných zlúčenín bola stanovená pri rôznych dávkach potom, čo boli tieto dávky podané buď orálne (p.o) alebo intravenózne (i.v.). Indukcia trombózy bola uskutočnená 4 hodiny alebo 8 hodín po podaní testovanej zlúčeniny orálne alebo 2 hodiny po podaní testovanej zlúčeniny intravenózne. Pre dávky meniace sa medzi 8 a 17 mg podanými p.o. boli získané po 4 hodinách percentuálne inhibície, vypočítané vzhľadom na hmotnosť trombu vytvoreného za neprítomnosti účinnej látky vo fyziologickom sére, meniace sa medzi 40 a 99 %. Pre dávky pohybujúce sa medzi 5 až 7 g a podané i.v. sa získajú po 2 hodinách percentuálne inhibície pohybujúce sa medzi 40 a 95 %.

PP1376-2003

322107T h

Ako príklad sa dá uviesť, že zlúčenina podľa príkladu 2A, podaná orálne v dávke 13 mg/kg, spôsobuje po 4 hodinách 91 % inhibíciu rastu hmotnosti venózneho trombu.

Táto zlúčenina podaná intravenózne v dávke 5,4 mg/kg spôsobuje po 2 hodinách 75 % inhibíciu rastu hmotnosti trombu.

Tieto výsledky ukazujú, že zlúčeniny podľa vynálezu vykazujú antitrombotickú účinnosť, najmä čo sa týka venóznej trombózy, a to ako pri orálnom, tak aj pri intravenóznom podaní.

Pre porovnanie sa dá uviesť, že zlúčeniny popísané v patentovom dokumente EP 421 829 sú nerozpustné vo fyziologickom sére a nemôžu byť teda podané intravenózne.

Predmetom vynálezu sú teda taktiež zlúčeniny so všeobecným vzorcom I podľa vynálezu, ako aj ich farmaceutický prijateľné soli, solváty a hydráty na ich použitie ako liečiva. Zlúčeniny so všeobecným vzorcom I alebo niektorá z ich farmaceutický prijateľných soli alebo niektorý z jej farmaceutický prijateľných solvátov alebo hydrátov môžu byť použité na prípravu antitrombotického liečiva určeného najmä na liečenie alebo prevenciu porúch venózneho krvného obehu a najmä na korekciu niektorých hematologických parametrov na venóznej úrovni.

Predmetom vynálezu sú teda taktiež farmaceutické kompozície obsahujúce zlúčeninu so všeobecným vzorcom I alebo niektorú z jej farmaceutický prijateľných solí alebo niektorý z jej farmaceutický prijateľných solvátov alebo hydrátov. Tieto farmaceutické kompozície všeobecne obsahujú vhodné farmaceutické pomocné látky. Uvedené pomocné látky sa zvolia podľa farmaceutickej formy kompozície a podľa požadovaného spôsobu podania, ktorým je najmä orálne alebo injekčné podanie.

Uvedené farmaceutické kompozície sa pripravia o sebe známymi klasickými postupmi. Tak napríklad zlúčeniny podľa vynálezu môžu byť

PP1376-2003

32210/T h formulované s fyziologicky prijateľnými pomocnými látkami na získanie injikovanej formy na okamžité použitie, na získanie injikovateľnej formy, ktorá sa dá pripraviť bezprostredne pred použitím alebo na získanie pevnej formy na orálne podanie, akou je napríklad želatínová tobolka alebo tableta.

Ako príklad je možné uviesť, že injikovateľná forma môže byť výhodne pripravená lyofilizáciou sfiltrovaného a sterilizovaného roztoku obsahujúceho zlúčeninu podľa vynálezu a rozpustnú pomocnú látku v množstve, ktoré je dostatočné a nevyhnutné na získanie izotonického roztoku po pridaní vody bezprostredne pred použitím injekcie. Forma podateľňa orálne bude výhodne tvorená želatínovou tobolkou obsahujúcou zlúčeninu podľa vynálezu, ktorá bola jemne rozomletá alebo ešte lepšie mikronizovaná a zmiešaná s o sebe známymi pomocnými látkami, akými sú napríklad laktóza, predželatinizovaný škrob a stearát horečnatý.

Za účelom dosiahnutia terapeutického alebo profylaktického účinku môže každá jednotková dávka obsahovať 25 až 500 mg aspoň jednej zlúčeniny podľa vynálezu.

V nasledujúcich príkladoch uskutočnenia vynálezu sú pod označením „príprava“ uvedené príklady popisujúce syntézu medziproduktov, zatiaľ čo pod označením „príklad“ sú uvedené príklady popisujúce syntézu zlúčeniny so všeobecným vzorcom I podľa vynálezu. Tieto príklady majú iba ilustračný charakter a nijako neobmedzujú vlastný rozsah vynálezu, ktorý je jednoznačne vymedzený definíciou patentových nárokov a obsahom popisnej časti. Teploty topenia sú merané na Kofflerovom bloku a hodnoty nukleárnej magnetickorezonančnej spektroskopie sú charakterizované chemickým posunom vypočítaným vzhľadom k TMS, počtom protónov združených so signálom a formou signálu, pričom s znamená singlet, d znamená dublet, t znamená triplet, q znamená kvadruplet a m znamená multiplet. U spektra každej zo zlúčenín je taktiež uvedená pracovná frekvencia a použité rozpúšťadlo. V príkladoch skratka DMSO znamená dimetylsulfoxid.

PP1376-2003

32210/T h

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príprava 1

Kyselina N-morfolínoctová, zlúčenina III.1

a) Benzyl-N-morfolínoacetát

K roztoku 5,03 g benzyl-2-brómacetátu v 75 ml tetrahydrofuránu sa pod prúdom argónu a pri teplote miestnosti pridajú 3 ml morfolínu. Okamžite sa vytvorí biela zrazenina. Reakčná zmes sa potom mieša po dobu 17 hodín. Biela vyzrážaná soľ sa odfiltruje a premyje 50 ml etylacetátu. Filtrát sa postupne premyje 50 ml nasýteného vodného roztoku uhličitanu sodného, 50 ml vody a 50 ml nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Organická fáza sa vysuší nad síranom horečnatým, sfiltruje a odparí a ostatná žltá kvapalina sa prečistí chromatograficky na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou etylacetátu a hexánu v objemovom pomere 6:4.

Výťažok 65 %

b) Kyselina N-morfolínoctová

K roztoku 3,25 benzyl-N-morfolínoacetátu v 100 ml etanolu sa pridá 325 mg paládia na aktívnom uhlí. Zmes sa potom mieša pod atmosférou vodíka pri teplote miestnosti po dobu 17 hodín. Hydrogenačný katalyzátor sa potom odstráni filtráciou a dvakrát premyje 50 ml metanolu. Filtrát sa odparí, pričom sa získa požadovaný produkt vo forme pevnej bielej látky.

Výťažok: 97 %,

Teplota topenia 151 až 155 °C.

Rovnakým spôsobom sa syntetizujú nasledujúce zlúčeniny:

kyselina N-piperidínoctová, zlúčenina III.2, teplota topenia: 209 až 212 °C; kyselina N-pirolidínoctová, zlúčenina III.3, teplota topenia: 138 až 141 °C;

PP 13 76-2003

32210/T h • t t · • ••r'* ŕ t r e · · e · · e Pf

P · r » · < r r p r· » r · P <- '

Ν,Ν-dietylglycín, zlúčenina 111.4, teplota topenia: 131 až 133 °C.

Príprava 2

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-3,4-di-0-acetyl-5-tio-p-D-xylopyranozid, zlúčenina II.2

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,4-di-O-acetyl-5-tio-p-D-xylopyranozid, zlúčenina II.3

a) 4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-3,4-di-O-(dibutylstanylén)-5-tio-p-Dxylopyranozid, zlúčenina IV

Suspenzia 4 g 4-metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-5-tio-p-Dxylopyranozidu (zlúčenina 11.1) a 6,14 g dibutylcínoxidu v 200 ml metanolu sa za miešania zahrieva na teplotu varu pod spätným chladičom po dobu 4 hodín v banke vybavenej Soxhletovým nástavcom obsahujúcim patrónu s molekulárnym sitom 4 A. Po filtrácii reakčnej zmesi sa rozpúšťadlo vyparí pri zníženom tlaku. Takto získaná zlúčenina IV sa použije ako taká v nasledujúcich reakčných stupňoch.

b) K suspenzii 6,25 g zlúčeniny IV v 200 ml dioxánu sa po kvapkách pridá roztok 1,9 g acetylchloridu v 20 ml dioxánu. Po 2 hodinách pri teplote 30 °C sa reakčná zmes sfiltruje a rozpúšťadlá sa vyparia pri zníženom tlaku. Chromatografia na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou cyklohexánu a etylacetátu v objemovom pomere 45:55 umožňuje oddeliť 1,5 g zlúčeniny II.2 (34 %) a 660 mg zlúčeniny II.3 (14 %).

Zlúčenina II.2:

Teplota topenia: 169 °C, [a]_D ²²: -162°C (c = 0,2, CHCI₃).

Zlúčenina II.3.

¹H nukleárne magnetickorezonančné spektrum:

PP1376-2003

32210/T h (300 MHz, DMSO)

7,70 (d, 1H),

7,17 (d, 1H),

7,00 (dd,1H),

6,28 (s,1H),

5,75 (d,1H, Ji-2=9 Hz),

5,16 (t, 1H),

4,77 (m, 1H),

3,62 (m, 1H),

2,84 (m, 2H),

2,40 (s, 3H),

2,00 (s, 3H),

1,96 (s, 3H).

Príprava 3

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-4-0-(2,2-dimetylpropanoyl)-5-tio-p-Dxylopyranozid, zlúčenina II.4

K suspenzii 41 g zlúčeniny IV získanej v príprave 2 v 800 ml dioxánu sa po kvapkách pridá 19,575 g trimetylacetylchloridu. Po dvoch hodinách pri teplote 30 °C sa reakčná zmes sfiltruje. Filtráty sa vyberú etylacetátom, premyjú sa vodou a potom sa vysušia nad síranom horečnatým. Rozpúšťadlá sa vyparia pri zníženom tlaku a získaný zvyšok sa prečistí chromatografický na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou cyklohexanónu a etylacetátu v objemovom pomere 55:45.

Výťažok: 59 %,

Teplota topenia: 160 °C, [aj_D ²³: -97°C (c = 0,5, CH₃OH).

PP1376-2003

32210/T h

Príprava 4

4-Metyl-2-oxo-2H-1 -benzopyrán-7-yl-4-O-acetyl-5-tio-p-D-xylopyranozid, zlúčenina II.5

K roztoku 4,4 g zlúčeniny IV získanej v príprave 2 v 20 ml dichlórmetánu sa pridá pod inertnou atmosférou 0,57 ml acetylchloridu a potom po 5 hodinách miešania sa pridá ešte 0,2 ml acetylchloridu. Reakčná zmes sa mieša po dobu 3 dní. Po filtrácii sa získa zlúčenina II.5.

Výťažok: 61 %,

Teplota topenia: 210 °C, [a]_D ²²: -68° (c = 0,48, DMSO).

Príklad 1

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,3,4-tri-O-[(dimetylamino)acetyl]-5-tio-pD-xylopyranozid

K roztoku 1 g 4-metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-5-tio-p-D-xylopyranozidu (zlúčenina 11.1) v 25 ml dimetylformamidu (DMF) sa pod atmosférou argónu za prítomnosti molekulárneho sita 3A postupne pridajú 2 ml trietylamínu, 2,84 g 1-[3-(dimetylamino)propyl]-3-etyl-karbodiimid-hydrochloridu (EDCI), 0,56 g 4-dimetylaminopyridínu (DMPA), 30 ml 0,5M roztoku hydrátu 1hydroxybenzotriazolu v DMF a 1,53 g Ν,Ν-dimetylglycínu. Reakčná zmes sa potom mieša po dobu 18 hodín. Vylúčená zrazenina sa odfiltruje a premyje 30 ml etylacetátu. Filtrát sa zahustí a zvyškový oranžový olej sa vyberie 100 ml vody a 15 ml trietylamínu. Vodná fáza sa extrahuje etylacetátom (100 ml + 50 ml). Organické fázy sa zlúčia a premyjú 50 ml vody a potom 50 ml nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Organická fáza sa potom vysuší nad síranom horečnatým, sfiltruje a zahustí. Pevný žltý zvyšok sa chromatografuje na silikagéli za použitia elučnej zostavy tvorenej zmesou etylacetátu a trietylamínu v objemovom pomere 99:1 a následne elučnou sústavou

PP 1376-2003

32210/T h e <* tvorenou zmesou dichlórmetánu, metanolu a trietylamínu v objemovom pomere 9:1:0,1. Zlúčené frakcie sa odparia a zvyšková nažitia pevná pena sa vyberie dietyléterom. Požadovaný produkt sa odfiltruje a premyje dietyléterom. Výťažok: 72 %, teplota topenia: 112 až 114 °C.

Zodpovedajúci trihydrochlorid (príklad 1a) sa pripraví pridaním 7,5 ml 1M roztoku chlorovodíka v dietylétere k roztoku 0,7 g zlúčeniny z príkladu 1 v 3 ml bezvodého metanolu pri teplote 0 °C. Okamžite sa tvorí nažltlá pasta. Zmes sa potom zriedi 5 ml bezvodého dietyléteru, mieša pri teplote 0 °C po dobu 1 hodiny, na čo sa zahustí, pričom sa získa nažltlý pevný produkt.

Teplota topenia: 196 °C, [a]_D ²²: -32° (c = 0,55, CH₃OH).

Ak sa postupuje rovnakým spôsobom, potom sa zo zodpovedajúcej kyseliny Iii pripravia za prítomnosti alebo za neprítomnosti HOBT v rámci príkladov 2 až 5A zlúčeniny, ktoré sú uvedené v nasledujúcej tabuľke 1.

PP1376-2003

32210/T h

Tabuľka 1

^R‘Y° o

PRÍKLAD	R¹	T.t alebo RMN¹H
2		T.t. = 209-212
2A	-CH_a-- ^HC1	T.t = 194
3	—^cts-ⁿQ]	T.t. = 51-55
3A	-CH₂—, HCI	T.t. = 187
4	-CH₂-N(CH₂CH₃)2	RMNíH (300 MHz, CDCI₃) : 7,50 (d, 1H); 6,96 (2d, 2H), 6,18 (s, 1H); 5,54 (m, 1H); 5,24 (m, 3H); 3,28 (s, 4H); 3,24 (s, 2H); 3,03 (m, 1H); 2,58 (m, 13H); 2,39 (s, 3H); 0,96 (m, 8H).
4A	-CH₂-N(CH₂CH3)₂₎ HCI	T.t = 149
5	Λ~Λ -CH —N O ² V_7	T.t. = 215
5A	P~\ -CH —N 0 , HCI ¹ \_y	T.t = 198

PP1376-2003

32210/T h

Príklad 6

4-Metyl-2-oxo-2 H-1 -benzopy rán-7 -y I-2,3,4-tri-O-(py rid í η-3-ylka rbo nyl)-5-tio-p-Dxylopyranozid g zlúčeninyll.1 a 11 g nikotinoylchlorid-hydrochloridu sa mieša v 50 ml pyridínu pri teplote miestnosti po dobu 48 hodín. Reakčná zmes sa sfiltruje a rozpúšťadla sa vyparia. Získaný zvyšok sa premyje vodou a potom sa prečistí chrómatografiou na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou dichlórmetánu, metanolu a amoniaku v objemovom pomere 95:5:0,5. Získaný biely práškový produkt sa vysuší pri zníženom tlaku.

[a]_D ²⁶: -37° (c = 0,6, CHCI₃).

Príklad 7

4- Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-3-O-[(dimetylamino)acetyl]-2,4-di-O-acetyl5- tio-p-D-xylopyranozid

Roztok 620 mg zlúčeniny II.3 v 20 ml dichlórmetánu stabilizovaného penténom sa za prítomnosti 563 mg EDCI, 302 mg Ν,Ν-dimetylglycínu a 89 mg DMAP zahrieva na teplotu varu pod spätným chladičom po dobu jednej hodiny. Reakčná zmes sa potom sfiltruje. Filtrát sa premyje roztokom chloridu amónneho a chloridu sodného, na čo sa organická fáza vysuší nad síranom horečnatým. Rozpúšťadlá sa vyparia pri zníženom tlaku a získaný zvyšok sa prečistí chromatograficky na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou toluénu a izopropanolu v objemovom pomere 10:1.

Výťažok: 76 %

Teplota topenia: 214 °C, ¹H-nukleárne magnetickorezonančné spektrum:

(300 MHz, DMSO)

6,00 (d, 1H, Jv2 = 8,4 Hz),

5,32 (2t,2H),

4,98 (m, 1H),

3,15 (m, 3H),

2,94 (m, 1H),

PP1376-2003

32210/T h

2.40 (s. 3Η).

2.21 (s,6H).

2,00 a 1.92 (2s. 6H).

Zodpovedajúci metánsulfonát (príklad 7A) sa získa nasledujúcim spôsobom: 466 mg zlúčeniny z príkladu 7 sa uvedie do roztoku v 30 ml etylacetátu. K tomuto roztoku sa pridá roztok 92 mg kyseliny metánsulfónovej v 4 ml tetrahydrofuránu. Po jednej hodine sa reakčná zmes sfiltruje.

Výťažok: 79 %.

Teplota topenia: 203 °C, [ct]_D ²¹'⁵: -56°C (c = 0.44. CHCI₃).

Príklad 8

4- Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2-O-[(dimetylamino)acetyl]-3,4-di-O-acetyl5- tio-p-D-xylopyranozid

Zlúčenina podľa príkladu 8 sa pripraví zo zlúčeniny II.2 spôsobom, ktorý je analogický so spôsobom popísaným v príklade 7.

Výťažok: 92 %,

Teplota topenia: 102 °C, ¹H-nukleárne magnetickorezonančné spektrum:

(300 1	MHz, DMSO)
6,02	(d, 1H, 3,.2=8,
5,4	(t, 1H),
5,26	(t, 1H),
5,00	(m, 1H),
3,08	(m, 3H),
2,95	(m, 1H),
2,40	(s, 3H),
2,21	(s, 6H),
2,01 a 1,99 (2s, 6H)

PPI376-2003

32210/T h

Príklad 8A

4- Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2-O-[(dimetylamino)acetyl]-3,4-di-O-acetyl5- tio-p-D-xylopyranozid-metánsulfonát

Zlúčenina podľa príkladu 8A sa pripraví rovnakým spôsobom, aký bol popísaný v príklade 7A.

Výťažok: 76 %,

Teplota topenia: 110 °C, [a]_D ²³: -44°C (c = 0,29, CHCI₃).

Príklad 9

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,3-bis-0-[(dimetylamino)acetyl]-4-0-(2,2dimetylpropanoyl)-5-tio-p-D-xylopyranozid-dimetylsulfonát g zlúčeniny II.4 sa uvedú do roztoku v 50 ml dichlórmetánu za prítomnosti molekulárneho sita 4A. Na získanie roztoku sa pridajú 3 g EDCI, 0,6 g DMPA a 1,63 g Ν,Ν-dimetylglycínu. Po 4 hodinách miešania a reakčná zmes sfiltruje. Filtrát sa premyje roztokom chloridu amónneho a potom vodou a vysuší nad síranom horečnatým. Rozpúšťadlá sa vyparia za zníženého tlaku. Získaný zvyšok sa prečisti chromatograficky na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou dichlórmetánu a metanolu v objemovom pomere 10.Ί. 2,45 g získanej zlúčeniny sa rozpustí v 50 ml bezvodého etylacetátu, na čo sa po kvapkách pridá 600 mikrolitrov kyseliny metánsulfonovej v roztoku v 13 ml THF. Po 45 minútach miešania sa vylúčená zrazenina odfiltruje a vysuší. Výťažok: 69.%,

Teplota topenia: 236 °C,

Príklad 10

4-Metyl-2-oxo-2H-1 -benzopyrán-7-yl-4-o-acetyl-2,3-bis-O[(dimetylamino)acetyl]-5-tio-p-D-xylopyranozid-dimetánsulfonát

PPI3 76-2003

32210/T h

Roztok 500 mg zlúčeniny 11.5 v 20 ml dichlórmetánu sa mieša pod inertnou atmosférou za prítomnosti 838 mg EDCI, 167 mg DMAP a 450 mg Ν,Ν-dimetylglycínu po dobu 3 hodín. Reakčná zmes sa premyje vodou a organická fáza sa zahustí pri zníženom tlaku. Zvyšok sa prečistí chromatograficky na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou dichlórmetánu a metanolu v objemovom pomere 10:1. Získaných 490 mg získanej zlúčeniny sa vyberie 10 ml etylacetátu a k získanej zmesi sa pridá 135 mikrolitrov kyseliny metánsulfónovej v 2 ml tetrahydrofuránu. Vylúčená zrazenina sa odfiltruje pri zníženom tlaku.

Výťažok: 50 %.

Teplota topenia: 130 °C [a]_D ²²: -14° (c = 0,39, DMSO).

Príklad 11

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,3,4-tri-0-(aminoacetyl)-5-tio-p-Dxylopyranozid-tri-(trifluóracetát)

a) 4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,3,4-tri-O-[(N-te/'c-butoxykarbonylamino)acetyl]-5-tio-p-D-xylopyranozid, zlúčenina ľ.1

Suspenzia 325 mg zlúčeniny 11.1 v 15 ml dimetylformamidu sa zahrieva až na dosiahnutie rozpustenia suspendovaného podielu, na čo sa ochladí na teplotu miestnosti. Za miešania sa pridá 578 mg N-ŕerc-butoxykarbonylglycínu, 690 mg ľ(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid-hydrochloridu a 184 mg dimetylaminopyridínu. Reakčná zmes sa udržuje za týchto podmienok po dobu 20 hodín, na čo sa dimetylformamid odparí pri zníženom tlaku. Zvyšok sa vyberie dichlórmetánom. Táto organická fáza sa postupne premyje 1N vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, roztokom hydrogénuhličitanu sodného a nasýteným roztokom chloridu sodného a následne vysuší na sírane horečnatom. Rozpúšťadlá sa z organickej fázy vyparia pri zníženom tlaku a zvyšok sa prečistí chromatograficky na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou toluénu a etylacetátu v objemovom pomere 7:3.

PP1376-2003

32210/T h

Výťažok: 80 %, ¹H-nukleárne magnetickorezonančné spektrum: (300 MHz, DMSO)

7,73 (d, 1H),

7,16 (m, 4H),

7,00 (dd, 1H),

6.29 (s, 1H),

6,00 (d,1H, J=8,8 Hz),

5,40 (t, 1H),

5.30 (t, 1H),

5,07 (m, 1H),

3,68 (dd, 2H),

3,11 (t, 1H),

2,94 (dd, 1H),

1,38 (s, 9H).

3,68 (dd, 2H),

b) 630 mg zlúčeniny ľ.1 sa rozpustí v 75 ml kyseliny trifluóroctovej (TFA) a 25 ml dichlórmetánu stabilizovaného penténom. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti po dobu jednej hodiny, na čo sa rozpúšťadlá vyparia pri zníženom tlaku. Zvyšok sa vyzráža v dietylétere a zrazenina sa odfiltruje. Táto zrazenina sa potom prečistí chromatograficky na silikagéle za použitia elučnej sústavy tvorenej zmesou vody, acetonitrilu a TFA v objemovom pomere 4:1:0,001. Frakcia obsahujúca amín zbavený ochrannej skupiny sa potom dvakrát lyofílizuje.

Výťažok: 32 %.

Teplota topenia: 136 °C [a]_D ²⁴: -18°C (c = 0,155, CH₃OH).

PP1376-2003

32210/T h

Príklad 11a

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,3,4-tri-0-(aminoacetyl)-5-tio-p-Dxylopyranozid-trihydrochlorid

K roztoku 883 mg zlúčeniny ľ.1 v 5 ml bezvodého etanolu sa pod atmosférou argónu a pri teplote miestnosti pridá 40 ml 1M roztoku chlorovodíka v dielyléteri. Po 18 hodinách miešania sa získaná biela zrazenina odfiltruje a premyje bezvodým dietyléterom.

Teplota topenia: 180 °C [a]_D ²⁵: -25°C (c = 0,42, CH₃OH).

Príklad 12

4-Metyl-2-oxo-2H-1-benzopyrán-7-yl-2,3,5-tri-0-([/metyl-amino)acetyl]-5-tio-p-Dxylopyranozid-trihydrochlorid

Zlúčenina podľa príkladu 12 sa pripraví zo zlúčeniny 11.1 a N-(ŕercbutoxykarbonyl)-N-metylglycínu postupom, ktorý je analogický s postupom popísaným v príkladoch 11 a 11 A.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

Ο v ktorom

Ri, R₂ a R₃, ktoré sú rovnaké alebo odlišné, nezávisle jeden na druhom znamenajú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 6 uhlíkových atómov, pyridinylovú skupinu alebo skupinu -CH2-NR4-R5, v ktorej R4 a R5 nezávisle jeden na druhom znamenajú atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo R₄a R₅ tvoria spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, pyrolidinylovú skupinu, piperidinylovú skupinu, hexahydroazepinylovú skupinu, morfolinylovú skupinu alebo piperazinylovú skupinu, za predpokladu, že aspoň jeden zo substituentov R₁₍ R₂ alebo R₃ je odlišný od alkylovej skupiny obsahujúcej 1 až 6 uhlíkových atómov, ako aj ich soli, solváty a hydráty, najmä soli, solváty a hydráty, ktoré sú farmaceutický prijateľné.

PP1376-2003

32210/T h

2. Zlúčeniny podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že

R_1t R₂ a R₃, ktoré sú rovnaké alebo odlišné, nezávisle jeden na druhom znamenajú alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy, pyridín-3-ylovú skupinu alebo skupinu -CH₂-NR₄-R₅, v ktorej R₄ a Rs nezávisle jeden na druhom znamenajú atóm vodíka, alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 4 uhlíkové atómy alebo taktiež R₄ a R5 tvoria spoločne s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, pyrolidinylovú skupinu, piperidinylovú skupinu alebo morfolinylovú skupinu, za predpokladu, že aspoň jeden zo substituentov R1, R₂ alebo R₃ je odlišný od alkylovej skupiny obsahujúcej 1 až 4 uhlíkové atómy.

3. Zlúčeniny podľa niektorého z nárokov 1 alebo 2, vyznačujúce sa tým, že aspoň dva zo substituentov R^ R₂ alebo R₃ sú rovnaké.

4. Zlúčeniny podľa nároku 3, vyznačujúce sa tým, že R1, R₂ a R₃ sú rovnaké.

5. Zlúčenina podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na použitie ako liečivo.

6. Použitie zlúčeniny podľa niektorého z nárokov 1 až 4 na prípravu antitrombotického liečiva.

7. Použitie podľa nároku 6 pre prípravu liečiva určeného na liečenie alebo prevenciu porúch venózneho krvného obehu.

8. Farmaceutická kompozícia obsahujúca ako účinnú látku zlúčeninu podľa niektorého z nárokov 1 až 4 v kombinácii s farmaceutický prijateľnou pomocnou látkou.

9. Farmaceutické kompozície podľa nároku 8, vyznačujúce sa tým, žesú v injikovateľnej forme.

PP1376-2003

32210/T h , c r^r

10. Spôsob prípravy zlúčeniny podľa niektorého z nárokov 1 až 5, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa reakčné stupne, ktoré spočívajú v tom, že:

1) sa uvedie v reakcii derivát 5-tio-p-D-xylopyranozidu so všeobecným vzorcom II v ktorom buď sú R'i, R'₂ a R'₃ rovnaké a znamenajú hydroxyskupinu, alebo dva zo substituentov R’_1t R'₂ a R'₃ sú rovnaké a znamenajú hydroxyskupinu a ostávajúci substituent R'^ R'₂ alebo R'3 znamená OC(O)Ri, -OC(O)R₂ resp. -OC(O)R₃, pričom R_1t R₂ a R₃ majú významy uvedené pre všeobecný vzorec I, alebo jeden zo substituentov R'1, R'₂ alebo R'₃ znamená hydroxyskupinu a dva ostávajúce substituenty R'·,, R'₂ alebo R'₃znamenajú -OC(O)Ri, -OC(O)R₂ resp. -OC(O)R₃, pričom R1, R₂ a R₃majú významy uvedené pre všeobecný vzorec I, s príslušnou kyselinou so všeobecným vzorcom III

R-C-OH (III)

II o

alebo s halogenidom príslušnej kyseliny so všeobecným vzorcom llla

R-C-Hal (llla)

II o

PP1376-2003

32210/T h v ktorom Hal znamená atóm halogénu, najmä atóm chlóru, atóm fluóru a atóm brómu, výhodne atóm chlóru a R znamená R-ι, R₂ alebo R3, ich významy sú definované pri všeobecnom vzorci I,
2) na čo sa takto získaná zlúčenina so všeobecným vzorcom I prípadne prevedie na niektorú z jej solí.