SK12842001A3 - Spôsob vyvolania vírusovej odolnosti v rastline - Google Patents
Spôsob vyvolania vírusovej odolnosti v rastline Download PDFInfo
- Publication number
- SK12842001A3 SK12842001A3 SK1284-2001A SK12842001A SK12842001A3 SK 12842001 A3 SK12842001 A3 SK 12842001A3 SK 12842001 A SK12842001 A SK 12842001A SK 12842001 A3 SK12842001 A3 SK 12842001A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- plant
- virus
- sequence
- promoter
- group
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 title description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 74
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 53
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 53
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 31
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 claims abstract description 12
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 92
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 claims description 30
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 claims description 23
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 claims description 19
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 claims description 16
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 13
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 10
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 10
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 claims description 9
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 claims description 9
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 claims description 7
- 235000021533 Beta vulgaris Nutrition 0.000 claims description 7
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 claims description 6
- 241001279892 Benyvirus Species 0.000 claims description 5
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 claims description 5
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000724309 Hordeivirus Species 0.000 claims description 4
- 241001112830 Pomovirus Species 0.000 claims description 4
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000002689 soil Substances 0.000 claims description 4
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 claims description 4
- 235000003276 Apios tuberosa Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000219195 Arabidopsis thaliana Species 0.000 claims description 3
- 235000010744 Arachis villosulicarpa Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000724681 Barley yellow mosaic virus Species 0.000 claims description 3
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 claims description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims description 3
- 241000264850 Pecluvirus Species 0.000 claims description 3
- 108010068086 Polyubiquitin Proteins 0.000 claims description 3
- 102100037935 Polyubiquitin-C Human genes 0.000 claims description 3
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 claims description 2
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 claims 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 claims 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 claims 1
- WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N acetyl chloride Chemical compound CC(Cl)=O WETWJCDKMRHUPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000012346 acetyl chloride Substances 0.000 claims 1
- 239000000417 fungicide Substances 0.000 claims 1
- XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N glyphosate Chemical compound OC(=O)CNCP(O)(O)=O XDDAORKBJWWYJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 claims 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 claims 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 8
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 8
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 7
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 5
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 5
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 5
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- LVMUGODRNHFGRA-AVGNSLFASA-N Arg-Leu-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O LVMUGODRNHFGRA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 4
- 240000006162 Chenopodium quinoa Species 0.000 description 4
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CO VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- JAQNUEWEJWBVAY-WBAXXEDZSA-N Ala-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 JAQNUEWEJWBVAY-WBAXXEDZSA-N 0.000 description 3
- NJPQBTJSYCKCNS-HVTMNAMFSA-N Glu-His-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N NJPQBTJSYCKCNS-HVTMNAMFSA-N 0.000 description 3
- GQGAFTPXAPKSCF-WHFBIAKZSA-N Gly-Ala-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O GQGAFTPXAPKSCF-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- YXTFLTJYLIAZQG-FJXKBIBVSA-N Gly-Thr-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YXTFLTJYLIAZQG-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 3
- LVVBAKCGXXUHFO-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LVVBAKCGXXUHFO-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- MQCPGOZXFSYJPS-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MQCPGOZXFSYJPS-KZVJFYERSA-N 0.000 description 3
- 241000219793 Trifolium Species 0.000 description 3
- MICSYKFECRFCTJ-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O MICSYKFECRFCTJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 3
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 3
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 3
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 3
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 2
- 235000015493 Chenopodium quinoa Nutrition 0.000 description 2
- UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Asp Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O UFPXDFOYHVEIPI-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N Gly-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)CNC(=O)C[NH3+] XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 2
- TVQGUFGDVODUIF-LSJOCFKGSA-N His-Arg-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N TVQGUFGDVODUIF-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- ZHHLTWUOWXHVQJ-YUMQZZPRSA-N His-Ser-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N ZHHLTWUOWXHVQJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- XIRYQRLFHWWWTC-QEJZJMRPSA-N Leu-Ala-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XIRYQRLFHWWWTC-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 2
- 244000141359 Malus pumila Species 0.000 description 2
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 description 2
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 description 2
- XPVCDCMPKCERFT-GUBZILKMSA-N Met-Ser-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O XPVCDCMPKCERFT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- MTHRMUXESFIAMS-DCAQKATOSA-N Pro-Asn-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O MTHRMUXESFIAMS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 101150023114 RNA1 gene Proteins 0.000 description 2
- 101150084101 RNA2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100353432 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) PRP2 gene Proteins 0.000 description 2
- VAUMZJHYZQXZBQ-WHFBIAKZSA-N Ser-Asn-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O VAUMZJHYZQXZBQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N Ser-Ser-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N KQNDIKOYWZTZIX-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N Thr-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IQHUITKNHOKGFC-MIMYLULJSA-N 0.000 description 2
- LTSIAOZUVISRAQ-QWRGUYRKSA-N Tyr-Gly-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O LTSIAOZUVISRAQ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- 240000000851 Vaccinium corymbosum Species 0.000 description 2
- 235000003095 Vaccinium corymbosum Nutrition 0.000 description 2
- 235000017537 Vaccinium myrtillus Nutrition 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- -1 alanine amino acid Chemical class 0.000 description 2
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 2
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 235000021014 blueberries Nutrition 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010076756 leucyl-alanyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 1
- RNHKOQHGYMTHFR-UBHSHLNASA-N Ala-Phe-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CC=CC=C1 RNHKOQHGYMTHFR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- PGNNQOJOEGFAOR-KWQFWETISA-N Ala-Tyr-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=C(O)C=C1 PGNNQOJOEGFAOR-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- OHYQKYUTLIPFOX-ZPFDUUQYSA-N Arg-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O OHYQKYUTLIPFOX-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXOPYFNQLVUOAQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VYZBPPBKFCHCIS-WPRPVWTQSA-N Arg-Val-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N VYZBPPBKFCHCIS-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 1
- GHWWTICYPDKPTE-NGZCFLSTSA-N Asn-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N GHWWTICYPDKPTE-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 1
- SVABRQFIHCSNCI-FOHZUACHSA-N Asp-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SVABRQFIHCSNCI-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 235000021537 Beetroot Nutrition 0.000 description 1
- 241000709145 Beta macrocarpa Species 0.000 description 1
- 235000011331 Brassica Nutrition 0.000 description 1
- 241000219198 Brassica Species 0.000 description 1
- 241000710175 Carlavirus Species 0.000 description 1
- 235000021538 Chard Nutrition 0.000 description 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 1
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- 241000732800 Cymbidium Species 0.000 description 1
- OIMUAKUQOUEPCZ-WHFBIAKZSA-N Cys-Asn-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O OIMUAKUQOUEPCZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DZLQXIFVQFTFJY-BYPYZUCNSA-N Cys-Gly-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O DZLQXIFVQFTFJY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- XTHUKRLJRUVVBF-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XTHUKRLJRUVVBF-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- QGZSAHIZRQHCEQ-QWRGUYRKSA-N Gly-Asp-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QGZSAHIZRQHCEQ-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- ZIMTWPHIKZEHSE-UWVGGRQHSA-N His-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O ZIMTWPHIKZEHSE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N L-arginyl-L-glutamic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- FGMHXLULNHTPID-KKUMJFAQSA-N Lys-His-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)CC1=CN=CN1 FGMHXLULNHTPID-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- PGLGNCVOWIORQE-SRVKXCTJSA-N Lys-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PGLGNCVOWIORQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WEDDFMCSUNNZJR-WDSKDSINSA-N Met-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WEDDFMCSUNNZJR-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 241000207746 Nicotiana benthamiana Species 0.000 description 1
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 1
- 241000132144 Polymyxa betae Species 0.000 description 1
- 241000710181 Potato virus M Species 0.000 description 1
- 241000710007 Potexvirus Species 0.000 description 1
- OOKCGAYXSNJBGQ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OOKCGAYXSNJBGQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WXWDPFVKQRVJBJ-CIUDSAMLSA-N Ser-Asn-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N WXWDPFVKQRVJBJ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DINQYZRMXGWWTG-GUBZILKMSA-N Ser-Pro-Pro Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DINQYZRMXGWWTG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- KRGDDWVBBDLPSJ-CUJWVEQBSA-N Thr-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O KRGDDWVBBDLPSJ-CUJWVEQBSA-N 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- CTDPLKMBVALCGN-JSGCOSHPSA-N Tyr-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O CTDPLKMBVALCGN-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- XXROXFHCMVXETG-UWVGGRQHSA-N Val-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XXROXFHCMVXETG-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- NZYNRRGJJVSSTJ-GUBZILKMSA-N Val-Ser-Val Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NZYNRRGJJVSSTJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- INJRKJPEYSAMPD-UHFFFAOYSA-N aluminum;silicic acid;hydrate Chemical compound O.[Al].[Al].O[Si](O)(O)O INJRKJPEYSAMPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 108010084572 phenylalanyl-valine Proteins 0.000 description 1
- BULVZWIRKLYCBC-UHFFFAOYSA-N phorate Chemical compound CCOP(=S)(OCC)SCSCC BULVZWIRKLYCBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032361 posttranscriptional gene silencing Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000007480 spreading Effects 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8283—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for virus resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/00022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Oblasť techniky
Vynález sa týka spôsobu vyvolania vírusovej odolnosti v bunke a rastline, predovšetkým BNYW-odolnosť i v bunke a rastline cukrovej repy.
Doterajší stav techniky
Rozšírené vírusové ochorenie cukrovej repy (Beta vulgaris) nazývané rizománia je vyvolané benyvírusom, vírusom nekrotického žltnutia žiliek repy (BNYW) (23, 24), ktorý je prenášaný do koreňa repy pôdnou hubou Polymyxa betae (25).
Ochorenie sa významne dotýka výmerov, kde sa pestuje cukrová repa na priemyselné použitie v Európe, USA a Japonsku a stále sa rozširuje na rozličných miestach v Západnej Európe (26, 27). Keďže neexistuje žiadny praktický spôsob , ako účinne kontrolovať šírenie vírusu vo veľkom chemickými alebo fyzikálnymi prostriedkami (28), ani v rastlinách, ani v pôde, hlavným zámerom bolo identifikovať pôvodné zdroje odolnosti vo vnútri zárodočnej plazmy cukrovej repy a pestovaním vyvinúť odrody rastlín cukrovej repy exprimujúce gény odolnosti. Veľký počet takýchto génov tolerancie vo víruse bolo identifikovaných a niektoré boli úspešne použité v pestovaní komerčných odrôd cukrovej repy (29, 30, 31).
Najvhodnejšie použitie BNYW-odolných alebo tolerantných odrôd umožní farmárom pestovať rastliny cukrovej repy v BNYWinfikovaných oblastiach, kde rastlina cukrovej repy je nevyhnutou zložkou striedavého hospodárstva a významne zabezpečuje pestovateľom zisk.
Veľký počet podrobných štúdií ukázal, že rozdiel v citlivosti na BNYW-infekciu medzi genotypmi alebo odrodami cukrovej repy všeobecne odráža rozdiel v rozširovaní alebo premiestňovaní vírusu v tkanivách koreňov (32).
Avšak, je tu stále niekoľko správ, ktoré jasne ukazujú, že gény odolnosti, dokonca z rozdielneho zdroja zárodočnej plazmy alebo zo široko príbuznej zárodočnej plazmy (33), by zabezpečili rozsiahly mechanizmus odolnosti. Takýto stav by vysvetľoval viac zvládnuteľný stav na určenie dlhotrvajúcej stratégie BNYW-odolnosti.
Od roku 1986, veľký počet správ a publikácií opisuje používanie izolovaných vírusových génových sekvencií exprimovaných v rastlinách na udelenie vysokého stupňa tolerancie proti vírusu alebo dokonca na udelenie širokého spektra typov rezistencie proti veľkému počtu príbuzných vírusov (34, 35, 36) . Jednou z najdokladovanejších stratégií vírusovej odolnosti na základe genetického inžinierstva u viacerých pestovaných druhov ako sú zemiak, dyňa, uhorka alebo paradajka, je použitie vírusovej génovej sekvencie, ktorá pod kontrolou rastlinných regulačných prvkov kóduje kapsidový proteín cieľového vírusu (37) .
Avšak, pre odolnosť sprostredkovanú kapsidovým proteínom, prejav určitého stupňa odolnosti v transgénnej rastline by mohol byť pripísaný rozdielnemu mechanizmu ako RNA kosupresii a nie nevyhnutne produkcii proteínovej sekvencie.
Vo všeobecnosti, vírusová sekvencia bude prenesená vo vhodnej bunke alebo tkanivovej kultúre rastlinného druhu použitím Agrobacterium sprostredkovaného transformačného systému alebo metódou priameho génového prenosu podlá obmedzení metódy tkanivového alebo bunkového pestovania, ktoré môžu byť úspešne použité v danom druhu. Celá rastlina bude regenerovaná a expresia transgéna bude charakterizovaná.
Hoci cukrová repa je známa ako nepoddajný druh v bunkovom pestovaní, limitujúci rozsah praktických prihlášok genetického inžinierstva u tohoto druhu, je množstvo oddelených správ úspešnej transformácie a regenerácie celých rastlín (38).
Niekoľko príkladov skonštruovanej tolerancie voči BNYW prostredníctvom transformácie a expresie sekvencie BNYW kapsidového proteínu v genóme cukrovej repy bolo tiež zverejnených (39, WO91/13159) hoci zriedka ohlásia údaje na celé funkčné transgénne rastliny cukrovej repy (40) . Predovšetkým, správy ukazujú obmedzené údaje na úrovni pozorovanej odolnosti v infikovaných podmienkach s transgénymi rastlinami cukrovej repy transformovanými génom kódujúcim sekvenciu BNYW kapsidového proteínu (41, 42) .
Úplný technologický balík vrátane metódy transformácie cukrovej repy a použitie expresie sekvencie BNYW kapsidového proteínu ako zdroja odolnosti v transgénnej rastline cukrovej repy získanej spomínanou metódou transformácie bol popísaný v patentovej prihláške WO91/13159.
Na základe publikovaných informácií,' nemôže byť uzavreté, že spôsob odolnosti sprostredkovaný kapsidovým proteínom poskytne nejakú možnosť udeliť rastline cukrovej repy úplnú imunitu voči BNYW-infekcii pomocou úplnej inhibicie vírusového množenia a mechanizmov šírenia. Identifikovať spôsob odolnosti, ktorý významne blokuje šírenie vírusu v skorej fáze infekčného procesu by bolo veľkým krokom k úspešne sa vyvíjajúcej takejto transgénnej odolnosti. Okrem toho, takáto odolnosť by spestrila použiteľný spôsob odolnosti.
Pretože je ukázané, že choroba sa šíri v mnohých krajinách alebo oblastiach rýchlosťou závisiacou na kombinácii početných miestnych environmentálnych a poľnohospodárskych faktorov, je tu silný záujem spestriť genetické spôsoby odolnosti, ktoré môžu samotné alebo v kombinácii, udeliť stabilnú a dlhotrvajúcu stratégiu odolnosti súčasných a budúcich odrôd rastlín cukrovej repy, ktoré sa pestujú na priemyselné využitie.
Genóm benyvírusov nekrotického žltnutia žiliek repy (BNYW) sa skladá z piatich RNA plus polarity, dve z nich (RNA a 2) kódujú funkcie nevyhnutné pre infikovanie všetkých rastlín, zatiaľ čo ďalšie tri (RNA 3, 4 a 5) sú zahrnuté vo vektorom sprostredkovaných infekciách hostiteľských rastlín (Beta macrocarpa, Beta vulgaris, Spinacear oleracea^ Chenopodium quinoa, atď.) koreňov (1). Pohyb BNYW z bunky do bunky je riadený aparátom troch za sebou idúcich nepatrne sa prekrývajúcich vírusových génov na RNA 2, známy ako trojnásobný génový blok (TGB) (2), ktorý kóduje vírusové proteíny P42, P13 a P15 (génové produkty sú označené podľa prepočítania ich Mr v kilodaltonoch (3).
V nasledujúcom opise, TGB gény a im zodpovedajúce proteíny budú stotožňované nasledujúcimi termínmi: TGB1, TGB2, TGB3 alebo ich kódovaným vírusovým proteínovým číslom P42, P13 a P15. TGB kópie sú prítomné v iných rastlinných vírusoch a charakteristické črty ich TGB dovolujú klasifikáciu menovaných vírusov do dvoch skupín: vírusy skupiny I, ktoré zahŕňajú hordéivírusy, benyvírusy, pecluvírusy a pomovírusy a vírusy skupiny II reprezentované potexvírusmi a carlavírusmi (4, 5, 6, 44) .
Pre vírusy skupiny II, kapsidový proteín je tiež zahrnutý do pohybu vírusov z bunky do bunky.
Vývin odolnosti voči vírusovým infekciám v rastline blokovaním pohybu z bunky do bunky bol opísaný u vírusov X zemiaka (PVX) (45) a u vírusu mozaiky ďateliny plazivej (WC1MV) (46) v Nicotiana benthamiana. Tieto dva vírusy patria do vyššie opísanej skupiny II. V obidvoch prípadoch, viaceré aminokyseliny boli nahradené alanínom v hydrofilnej časti TGB sekvencie v smere N-koncovej hydrofóbnej domény spomenutej aminokyselinovej sekvencie. Avšak, nebolo možné so spomenutými mutantami získať úplnú odolnosť, obzvlášť keď koncentrácia vírusového vyvolávateľa je v rastline zvyšovaná.
Podstata vynálezu
Predložený vynález sa snaží poskytnúť nový spôsob na zavedenie rôznych vírusových odolností do bunky a rastliny a získať vírusom odolné bunky a rastliny.
Hlavným cieľom vynálezu je poskytnúť nový spôsob na zavedenie BNYW-odolnosti do bunky a rastliny a získanie BNYW-odolnej bunky a rastliny, konkrétne bunky a rastliny cukrovej repy (Beta vulgaris ssp.) .
Predložený vynález poskytuje použitie alternatívnej sekvencie rastlinného vírusu, obzvlášť BNYW, na získanie vysokého stupňa tolerancie voči vírusovej infekcii, predovšetkým na zaistenie rýchleho a úplného zablokovania vírusového množenia a mechanizmov šírenia v rastline, obzvlášť v rastline cukrovej repy (Beta vulgaris), vrátane kŕmnej repy, „Swiss chard a stolovej repy, ktoré tiež môžu byť predmetom tejto vírusovej infekcie. Expresia odolnosti bude získaná v transgénnej bunke a rastline, predovšetkým v bunkách a rastlinách cukrovej repy vytvorených metódou transformácie uvedenou v patentovej prihláške W095/10178 transformačnými metódami založenými na tumefaciens alebo priamym génovým transferom. Kôli jej vysokej účinnosti, transformačná metóda, ako je opísaná vo WO95/10178, umožňuje produkciu veľkého počtu transformovaných rastlín, predovšetkým rastlín cukrovej repy, a bude uprednostnená na alebo inými Agroba c terium rozvoj transgénnych rastlín, charakterizované pre ich ktoré môžu byť analyzované a stupeň vírusovej odolnosti, predovšetkým BNYW odolnosti, vrátane ich oblasti ocenenia.
V tabuľke 1 sú predstavitelia vírusov majúci TGB2 sekvenciu, molekulová hmotnosť TGB2 spomenutých vírusov, ich hostiteľ a referencie.
Tabulka 1
| Vírus | Velkosť TGB 2 (kDa) | Hostite! | Referencia |
| SKUPINA - I | |||
| Vírus nekrotického žltnutia žiliek repy | 13 | repa | Bouzouba a kol., J. Gen. Virol. 67, 1689- 1700 (1986) |
| Vírus čiarkovitej mozaiky jačmeňa | 14 | jačmeň | Gustafson a kol., Nucl. Acids Res. 14, 3895- 3909 (1986) |
| Vírus mop top zemiaka | 13 | zemiak | Scott a kol., J. Gen. Virol. 75, 3561-3568 (1994) |
| Vírus trsovitosti podzemnice olejnej | 14 | podzemnica olejná | Herzog a kol., J. Gen. Virol. 75, 3147-3155 (1994) |
| Pôdou prenosný vírus repy | 13 | cukrová repa | Koenig a kol., Virology 216, 202-207 (1996) |
| SKUPINA II | |||
| Vírus jamkovitosti kmeňa jablone | 13 | jabloň | Jelkman, J. Gen. Virol. 75, 1535-1542 (1994) |
| Vírus spôsobujúci vysychanie čučoriedky | 12 | čučoriedka | Cavileer a kol., J.Gen. Virol. 75, 711-720 (1994) |
| Vírus M zemiaka | 12 | zemiak | Zavriev a kol., J. Gen. Virol. 72, 9-14 (1991) |
| Vírus mozaiky ďateliny plazivej | 13 | ďatelina | Forster a kol., Nucl. Acids Res. 16, 291-303 (1988) |
| Vírus mozaiky Cymbidium | 14 | orchidea | Neo a kol., Plánt Mol. Biol. 18, 1027-1029 (1992) |
Navrhol sa nový spôsob na poskytnutie odlnosti voči rastlinným vírusom v rastline blokovaním vírusového množenia a mechanizmov šírenia v spomínanej rastline, predovšetkým v jej koreňovom tkanive. Aby sa demonštrovala spomenutá odolnosť,
Ί bol opísaný efekt nadprodukcie TGB2 sekvencie samotnej alebo v kombinácii počas BNYW množenia a mechanizmu šírenia v rastlinách C. quinoa, ktoré sú tiež hostitelmi BNYW vírusov a ktoré mohli byť lahšie manipulovateľné odborníkom.
Je známe, že BNYW nevyžadujú syntézu vírusového kapsidového proteínu na tvorbu lézií na listoch hostitelov tak ako Chenopodium quinoa (7), čo naznačuje, že tvorba viriónov nie je potrebná na pohyb z bunky do bunky.
Spôsob, v ktorom TGB zložky napomáhajú procesu pohybu nie je preštudovaný, hoci počítačom spracované porovnania sekvencii odhalili charakteristické konzervované sekvencie, ktoré môžu poskytnúť kľúče k ich funkcii. Takto, 5'-proximálny TGB proteín (TGB1) stále obsahuje sériu sekvenčných motívov charakteristických pre ATP/GTP-viažúcu helikázu, zatial čo druhý proteín (TGB2) má vždy dve potenciálne membránu preklenujúce hydrofóbne domény oddelené hydrofilnou sekvenciou, ktorá obsahuje vysoko konzervovaný peptidový motív neznámeho významu (6).
Doteraz nebol oznámený žiaden príklad vírusovej skupiny I, v ktorom sú traja TGB členovia usporiadaní rozdielne na tej
I istej RNA alebo sú rozdelení do rôznych genómových RNA, predpokladajúc, že ich spojenie v osobitnom poradí by mohlo byť dôležité v regulácii ich funkcie.
Predložený vynález sa týka spôsobu vyvolania vírusovej odolnosti voči vírusovej skupine I obsahujúcej trojnásobný génový blok (TGB2). Spomínané vírusy skupiny I zahrňujú hordéivírusy, benyvírusy, pecluvírusv a pomovírusy, prednostne vírusy vyberané zo skupiny skladajúcej sa z vírusu nekrotického žltnutia žiliek repy, vírusu čiarkovitej mozaiky jačmeňa, vírusu mop top zemiaka, vírusu trsovitosti podzemnice olejnej a pôdou prenosného vírusu repy; spomenutý spôsob zahŕňa nasledujúce kroky:
- príprava nukleotidového konštruktu obsahujúceho nukleotidovú sekvenciu zodpovedajúcu aspoň 70% nukleotidovej sekvencie
TGB2 divého typu spomínaného vírusu skupiny I alebo jej zodpovedajúcej cDNA, operačne spojenej do jednej alebo viacerých regulačných sekvencii aktívnych v rastline,
- transformácia rastlinnej bunky s nukleotidovým konštruktom a podía možnosti
- regenerácia transgénnej rastliny z transformovanej rastlinnej bunky.
Výhodne, nukleotidová sekvencia zodpovedajúca aspoň 70% nukleotidovej sekvencie TGB2 divého typu alebo jej zodpovedajúcej cDNA obsahuje substitúciu aspoň jednej aminokyseliny za inú odlišnú aminokyselinu v TGB2 sekvencii divého typu SEQ ID NO. 1 (obr. 1) . Prednostne, substitúcia aspoň jednej aminokyseliny za inú odlišnú aminokyselinu je robená v oblastiach bohatých na hydrofilné aminokyseliny zvyčajne prítomných na povrchu zodpovedajúceho proteínu v jeho natívnej konfigurácii. Radšej, modifikácia je robená v hydrofilnej oblasti sekvencie divého typu v smere N-koncovej hydrofóbnej domény a práve proti smeru konzervovanej centrálnej domény.
Podľa výhodného uskutočnenia predloženého vynálezu, spomínané aminokyseliny sú každá nahradená aminokyselinou alanínom.
Prednostne, rastlina alebo rastlinná bunka je rastlinou ktorá môže byť infikovaná vyššie prednostne alebo rastlinnou bunkou, opísaným vírusom a je vyberaná zo skupiny podzemnice olejnej a zo zemiaka, jačmeňa, pozostávajúcej cukrovej repy.
Predložený vynález sa tiež týka získanej rastlinnej bunky a transgénnej (alebo transformovanej) rastliny (rozumieť menované rastlinné bunky) odolných voči spomínaným vírusom a obsahujúcich spomínaný nukleotidový konštrukt.
Neočakávane sa zistilo, že je možné vyvolať BNYW-odolnosť v rastline metódou, ktorá zahŕňa nasledujúce kroky:
- príprava nukleotidového konštruktu obsahujúceho nukleotidovú sekvenciu zodpovedajúcu aspoň 70%, radšej aspoň 80%, najradšej aspň 90% nukleotidovej sekvencie divého typu obsiahnutú medzi nukleotidmi 3287 a 3643 na 5’ vlákne genomickej alebo subgenomickej RNA 2 vírusu BNYW alebo jej zodpovedajúcej cDNA, operačne spojenej do jednej alebo viacerých regulačných sekvencii aktívnych v rastline,
- transformácia rastlinnej bunky s menovaným konštruktom a podľa možnosti »
- regenerácia transgénnej rastliny z transformovanej rastlinnej bunky.
Nukleotidová sekvencia obsiahnutá medzi nukleotidmi 3287 a 3643 na 5’ vlákne genomickej alebo subgenomickej RNA 2 kódujúcej P13 proteín je zobrazená na obr. 1 (SEQ ID N0.1). Mutovaná nukleotidová sekvencia a jej zodpovedajúca mutovaná aminokyselinové sekvencia sú opísané v nasledujúcom vyobrazení ako SEQ ID NO.3 (obr. 2).
Ďalšia stránka predloženého vynálezu sa týka rastlinnej bunky a transgénnej rastliny (rozumieť menované rastlinné bunky) odolných voči BNYW a obsahujúcich nukleotidový konštrukt majúci nukleotidovú sekvenciu zodpovedajúcu aspoň 70%, radšej aspoň 80%, najradšej aspoň 90% nukleotidovej sekvencie obsiahnutej medzi nukleotidmi 3287 a 3643 na 5' vlákne genomickej alebo subgenomickej RNA 2 divého typu vírusu BNYW alebo jej zodpovedajúcej cDNA, operačne spojenej do jednej alebo viacerých regulačných sekvencii aktívnych v rastline.
Prednostne, menovaná rastlinná bunka alebo transgénna rastlina (rozumieť menované rastlinné bunky) odolná voči BNYW je získaná spôsobom podľa vynálezu.
Varianty nukleotidovej sekvencie divého typu (SEQ ID NO.l) zahŕňajú inzerciu, substitúciu alebo deléciu nukleotidov kódujúcich tie isté alebo rozdielne aminokyseliny (pozri obr.
2) . Preto, predložený vynález sa týka tiež menovaných variantov nukleotidovej sekvencie SEQ ID NO.l, napríklad SEQ ID NO.3, ktoré predstavujú aspoň 70%, radšej 80%, najradšej 90% podobnosť so spomenutou nukleotidovou sekvenciou a ktoré sú skôr schopné hybridizovať so spomenutou nukleotidovou sekvenciou v prísnych alebo neprísnych podmienkach, ako to popísal Sambrook a kol., §§ 9.47-9.51 v Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor, New York (1989).
Nukleotidová sekvencia zodpovedajúca aspoň 70%, radšej aspoň 80%, najradšej aspoň 90% nukleotidovej sekvencie obsiahnutej medzi nukleotidmi 3287 a 3643 na 5' vlákne genomickej alebo subgenomickej RNA 2 vírusu BNYW alebo jej zodpovedajúcej cDNA je prednostne sekvenciou obsahujúcou substitúciu aspoň jednej aminokyseliny za inú odlišnú aminokyselinu v RNA 2 sekvencií BNYW vírusu divého typu alebo jej zodpovedajúcej cDNA. Prednostne, spomenutá substitúcia je robená v oblastiach, v ktorých hydrofilné aminokyseliny sú zvyčajne prítomné na povrchu proteínu v jeho natívnej konfigurácii (47), ako je to popísané na obr. 2 (A = substitúcia alanínom). Prednostne, spomenutá substitúcia jednej alebo viacerých aminokyselín je mutáciou, ktorá dovoluje substitúciu jednej alebo viacerých aminokyselín za jednu alebo viac alanínových aminokyselín.
Podlá obsahu predloženého vynálezu, spomenutá nukleotidová sekvencia je SEQ ID NO.3.
Prednostne, spomenuté sekvencie sú tiež schopné vyvolať BNYW odolnosť v rastline.
Termíny „vyvolanie vírusovej odolnosti v rastline znamenajú vyvolanie možnej redukcie alebo významného oneskorenia v objavení sa infekčných prejavov, vírusového množenia alebo jeho spôsobov šírenia v rastline, predovšetkým v koreňových tkanivách.
Na obr. 3 sú znázornené výsledky ukazujúce schopnosť rastliny koinokulovanej replikónovým konštruktom s nukleotidovou sekvenciou podľa vynálezu, obzvlášť sekvenciou znižovanie menovaného s koinokuláciou mutovanej
SEQ ID NO. 3., inhibovať pohyb BNYW v C. quinoa. Infekčný faktor BNYW je preukázaný objavením sa lokálnych lézií listov menovanej rastliny po koinokulácii vírusom S12 divého typu. Obr. 3 ukazuje počet lokálnych lézií na listoch rastliny spôsobenými izolátom BNYW S12 (obsahujúcim RNA1 a RNA2) keď koinokulované s rôznymi replikónmi inkorporovanými buď mutovanými sekvenciami, vrátane SEQ ID NO. 3 identifikovanými na obr. 2 alebo nukleotidovou sekvenciou divého typu (T) .
Osem dní po spomínanej inokulácii sú lokálne lézie identifikované. Výsledky troch experimentov ukazujú, že efektu je zväčša pozorované sekvencie SEQ ID NO.3 (do 100% inhibície). Tento efekt nie je spôsobený možným blokovacím efektom na RNA1 a RNA2 replikácii, ale replikóny podlá vynálezu dovoľujú blokovanie biochemických mechanizmov zahrnutých v pohyboch z bunky do bunky spôsobenými infekčnými vírusmi.
Regulačnými sekvenciami nukleotidovej sekvencie podľa vynálezu sú promótorové sekvencie a terminačné sekvencie aktívne v rastline.
Nukleotidový konštrukt môže tiež zahŕňať selekčný markerový gén, ktorý by mohol byť použitý na identifikovanie transformovanej bunky alebo rastliny a na exprimovanie nukleotidového konštruktu podľa vynálezu.
Prednostne, bunkou je stomatálna bunka a rastlinou je cukrová repa (Beta vulgaris ssp.} rozumieme menované bunky.
Podľa vynálezu, promótorová sekvencia je konštitutívna alebo cudzorodá promótorová sekvencia. Príkladmi sú 35S promótorová sekvencia vírusu mozaiky karfiolu, polyubikvitínový promótor Arabidopsis thaliana (43), promótor, ktorý je aktívny hlavne v koreňových tkanivách ako je par promótor hemoglobínového génu z Perosponia andersonii (Landsman a kol., Mol. Gen. Genet. 214: 68-73 (1988)) alebo zmes z toho.
Posledná stránka predloženého vynálezu sa týka transgénneho rastlinného tkaniva ako je plod, byl, koreň, hľuza, semeno transgénnej rastliny podľa vynálezu alebo reprodukčná štruktúra (prednostne vyberaná zo skupiny pozostávajúcej z kalusov, pukov alebo embryí) získaných z transgénnej rastliny alebo bunky podía vynálezu.
Techniky rastlinnej transformácie, tkanivého pestovania a regenerácie použité v metóde podía vynálezu sú tými, ktoré sú dobre známe odborníkom. Tieto techniky sú prednostne tie, ktoré sú opísané v medzinárodných patentových prihláškach WO95/10178 alebo WO91/13159, zodpovedajúce európskej patentovej prihláške EP-B-0517833, ktoré sú tu včlenené referenciou. Tieto techniky sú radšej použité na prípravu transgénnej cukrovej repy podľa vynálezu.
LITERATÚRA
1. Richards K.E. & Tamada T., Annu. Rev. . Phythopathol. 30, 291213 (1992)
2. Gilmer D. a kol., Virology 189, 40-47 (1992)
3. Bouzoubaa S. a kol., J. Gen. Virol. 68, 615-626 (1987)
4. Herzog E. a kol., J. Gen. Virol. 18, 3147-3155 (1994)
5. Scott K.P. a kol., J. Gen. Virol. 75, 3561-3568 (1994)
6. Koonin E.V. & Dolja V.V., Crit. Rev. Biochem. And Mol. Biol. 28, 375-430 (1993)
7.Schmitt C. a kol., Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 89, 5715-5719 (1992)
8.Morozov S. Y. a kol., J. Gen. Virol. 72, 2039-2042 (1991)
22. Pelletier J. & Sonenberg N., Náture 334, 320-325 (1988)
23. Tamada T. & Baba T., Annals of the Phythopathologica Society of Japan 39, 325-332 (1973)
24. Kuszala M. & Putz C., Annals of Phythopathology 9, 435-446 (1977)
25. Tamada T., CMI/AAB Description of Plants Viruses 44, (1975)
26. Asher M. J. C., Rhizomania in the Sugar Beet Crop, ed. D. A. Cooke a R. K. Scott,
Campman & Halí, London, 312-338 (1993)
27. Richard-Molard M., Rhizomanie V Inštitút francais de la betterave industrielle.. Compterendu des travaux effctués en 1994, ITB, Paris 225-229 (1995)
28. Henry C. M. a kol., Plánt Pathology 41, 483-489 (1992)
29. Grassi G. a kol., Phytopath. Medit. 28, 131-139 (1989)
30. Merdinoglu D. a kol., Acad. Agric. Fr. 79, 85-98 (1993)
31. Scolten O.E. a kol., Archives of Virology 136, 349-361 (1994)
32. Bíittenr G. & Bíircky K., Proceedings of the First Symposium of the International
Working Group on Plánt Viruses with Fungal Vectors,
Braunschweig Germany, August 21-24 (1990)
33. Whitney E.D., Plánt Disease 73, 287-289 (1989)
34. Powell A.P. a kol., Science 232, 738-743 (1986)
35. Fritchen J.H. & Beachy R.N., Ann. Rev. Microbiol. 47, 739763 (1993)
36. Wilson T.M.A-, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90, 3134-3141 (1993)
37. Gonsalves D. & Slighom J.L., Seminars in Virology 4, 397405 (1993)
38. D' Halluin K. a kol., Biotechnology 10, 309-314 (1992)
39. Kallerhof J. a kol., Plánt Celí Reports 9, 224-228 (1998)
40. Ehlers U. a kol., Theoretical and Appied Genetic 81, 777782 (1991)
41. Kraus J. a kol., Field performance of transgenic sugar beet plants expresing BNYW coat protein plants, Fourth Iternational Congress of Plánt Molecular Biology, Int. Soc. for Plánt Molecular Biology, Amsterdam (1994)
42. Maiss E. a kol., Proceedings of the Third International Symposium on the Biosafety Results of Field Tests of Genetically Modified Plants and Microorganisms, Monterey, 129-139 (1994)
43. Norris a kol., Plánt Molecular Biology 21, 895-906 (1993)
44. Solovyev a kol., Virology 219, 9-18 (1996)
45. Seppänen P. a kol., J. of General Virology 78, 1241-1246 (1997)
46. Beck a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91, 10310-10314 (1994)
47. Cunningham et Wells, Sciences 244, 1081-1085 (1989) /r
ZOZNAM SEKVENCIÍ <110> CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE <120> SPÔSOB VYVOLANIA VÍRUSOVEJ ODOLNOSTI V RASTLINE, <13O> P.SES.03/EP <140> 99200773.2 <141> 1999-03-12 <160> 4 <170> PatentIn Ver. 2.1 <210> 1 <211> 357 <212> DNA <213> Virus nekrotického žltnutia žiliek repy <220>
<221> CDS <222> (1)..(354) <400> 1
| atg tct agg gaa | ata acc | get ega Ala Arg | CCC Pro | aat aag aat gtg cct | att íle 15 | gtt Val | 48 | |||||||||
| Met Ser 1 | Arg Glu | íle 5 | Thr | Asn 10 | Lys | Asn | Val | Pro | ||||||||
| gtt | ggt | gtt | tgt | gtt | gtg | get | ttc | ttt | gta | ttg | ctg | gcg | ttc | atg | cag | 96 |
| val | Gly | Val | Cys | Val | Val | Ala | Phe | Phe | Val | Leu | Leu | Ala | Phe | Met | Gin | |
| 20 | 25 | 30 | ||||||||||||||
| caa | aaa | cat | aag | aca | cat | tct | ggg | ggt | gat | tac | gga | gtc | cca | aca | ttc | 144 |
| Gin | Lys | His | Lys | Thr | His | Ser | Gly | Gly | Asp | Tyr | Gly | Val | Pro | Thr | Phe | |
| 35 | 40 | 45 | ||||||||||||||
| tct | aac | ggt | ggt | ata | tat | aga | gac | ggt | aca | aga | tca | get | gat | ttt | aat | 192 |
| Ser | Asn | Gly | Gly | íle | Tyr | Arg | Asp | Gly | Thr | Arg | Ser | Ala | Asp | Phe | Asn | |
| 50 | 55 | 60 | ||||||||||||||
| agt | aac | aat | cat | cgt | get | tac | ggg | tgc | ggt | ggg | tct | ggg | ggt | age | gtt | 240 |
| Ser | Asn | Asn | His | Arg | Ala | Tyr | Gly | Cys | Gly | Gly | Ser | Gly | Gly | Ser | Val | |
| 65 | 70 | 75 | 80 | |||||||||||||
| agt | agt | ega | gtt | ggg | cag | caa | cte | att | gtg | tta | get | att | gtt | tct | gtg | 288 |
| Ser | Ser | Arg | Val | Gly | Gin | Gin | Leu | íle | Val | Leu | Ala | íle | Val | Ser | Val | |
| 85 | 90 | 95 | ||||||||||||||
| tta | ata | gtg | tca | cta | tta | caa | ega | tta | agg | tct | cca | cca | gaa | cac | att | 336 |
| Leu | íle | Val | Ser | Leu | Leu | Gin | Arg | Leu | Arg | Ser | Pro | Pro | Glu | His | íle | |
| 100 | 105 | 110 | ||||||||||||||
| tgt | aat | ggt | get | tgt | ggt | taa | 357 | |||||||||
| Cys | Asn | Gly | Ala | Cys | Gly |
<210> 2 <211> 118 <212> PRT
115
1/3
- * · u
| <213» Virus nekrotického | žltnutia | l žiliek | repy |
| <400> 2 | |||
| Met Spr Arg Glu íle Thr | Ala Arg | Pro Asn | Lys Asn Val Pro íle Val |
| 1 5 | 10 | 15 | |
| Val Gly Val Cys Val Val | Ala Phe | Phe Val | Leu Leu Ala Phe Met Gin |
| 20 | 25 | 30 | |
| Gin Lys His Lys Thr His | Ser Gly | Gly Asp | Tyr Gly Val Pro Thr Phe |
| 35 | 40 | 45 | |
| Ser Asn Gly Gly íle Tyr | Arg Asp | Gly Thr | Arg Ser Ala Asp Phe Asn |
| 50 | 55 | 60 | |
| Ser Asn Asn His Arg Ala | Tyr Gly | Cys Gly Gly Ser Gly Gly Ser Val | |
| 65 70 | 75 80 | ||
| Ser Ser Arg Val Gly Gin | Gin Leu | íle Val | Leu Ala íle Val Ser Val |
| 85 | 90 | 95 | |
| Leu íle Val Ser Leu Leu | Gin Arg | Leu Arg | Ser Pro Pro Glu His íle |
| 100 | 105 | 110 | |
| Cys Asn Gly Ala Cys Gly | |||
| 115 |
<210> 3 <211» 357 <212» DNA <213> vírus nekrotického žltnutia žiliek repy <220» <221» CDS <222» (1)..(354) <400» 3 atg tct agg gaa ata acc get ega ccc aat aag aat gtg cct att gtt
Met Ser Arg Glu íle Thr Ala Arg Pro Asn Lys Asn Val Pro íle Val
5 10 15 gtt ggt gtt tgt gtt gtg get ttc ttt gta ttg ctg gcg ttc atg cag
Val Gly Val Cys Val Val Ala Phe Phe Val Leu Leu Ala Phe Met Gin
25 30 caa gca get gcg aca cat tct ggg ggt gat tac gga gtc cca aca ttt
Gin Ala Ala Ala Thr His Ser Gly Gly Asp Tyr Gly Val Pro Thr Phe
40 45 tct aac ggt ggt ata tat aga gac ggt aca aga tca get gat ttt aat
Ser Asn Gly Gly íle Tyr Arg Asp Gly Thr Arg Ser Ala Asp Phe Asn
55 60 agt aac aat cat cgt get cac ggg tgc ggt ggg tct ggg ggt age gtt
Ser Asn Asn His Arg Ala Tyr Gly Cys Gly Gly Ser Gly Gly Ser Val
70 75 80 agt age ega gtt ggg cag caa ctt att gcg cca gcc act gcc ccc gcg
Ser Ser Arg Val Gly Gin Gin Leu íle Val Leu Ala íle Val Ser Val
144
192
240
288
2/3
| 85 | 90 | 95 | ||||||||||||||
| tta | ata | gtg | tca | cta | tta | caa | ega | tta | agg | tet | cca | cca | gaa | cac | att | 336 |
| Leu | íle | Val | Ser | Leu | Leu | Gin | Arg | Leu | Arg | Ser | Pro | Pro | Glu | His | íle | |
| 100 | 105 | 110 | ||||||||||||||
| tgt | aat | ggt | get | tgt | ggt | taa | 357 | |||||||||
| Cys | Asn | Gly | Ala | Cys | Gly |
115 <210> 4 <211> 118 <212> PRT <213> Vírus nekrotického žltnutia žiliek repy <400> 4
| Met Ser Arg Glu íle Thr Ala Arg | Pro | Asn 10 | Lys | Asn | Val | Pro íle 15 | Val | ||||||||
| 1 | 5 | ||||||||||||||
| Val | Gly | Val | Cys | Val | Val | Ala | Phe | Phe | Val | Leu | Leu | Ala | Phe | Met | Gin |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Gin | Ala | Ala | Ala | Thr | His | Ser | Gly | Gly | Asp | Tyr | Gly | Val | Pro | Thr | Phe |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Ser | Asn | Gly | Gly | íle | Tyr | Arg | Asp | Gly | Thr | Arg | Ser | Ala | Asp | Phe | Asn |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Ser | Asn | Asn | His | Arg | Ala | Tyr | Gly | Cys | Gly | Gly | Ser | Gly | Gly | Ser | Val |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Ser | Ser | Arg | Val | Gly | Gin | Gin | Leu | íle | Val | Leu | Ala | íle | Val | Ser | Val |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Leu | íle | val | Ser | Leu | Leu | Gin | Arg | Leu | Arg | Ser | Pro | Pro | Glu | His | íle |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Cys | Asn | Gly | Ala | Cys | Gly |
115
3/3
Claims (21)
- PATENTOVÉ NÁROKYSpôsob vyvolania odolnosti voči vírusovej skupine I obsahujúcej TGB2 sekvenciu v rastlinnej bunke alebo rastline vyznačujúci sa tým, že zahŕňa nasledujúce kroky:- príprava nukleotidového konštruktu obsahujúceho nukleotidovú sekvenciu majúcu aspoň 70% homológiu s nukleotidovou sekvenciou TGB2 menovaného vírusu alebo s jej komplementárnou cDNA, operačne spojenou do jednej alebo viacerých regulačných sekvencii aktívnych v rastline,- transformácia rastlinnej bunky s nukleotidovým konštruktom a podlá možnosti- regenerácia transgénnej rastliny z transformovanej rastlinnej bunky.1. Spôsob podlá nároku 1, vyznačujúci sa tým, že nukleotidová sekvencia nukleotidového konštruktu má aspoň 80% homológiu s nukleotidovou sekvenciou TGB2 menovaného vírusu alebo s jej komplementárnou cDNA.
- 2. Spôsob podľa nároku 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že vírusová skupina I je vyberaná zo skupiny skladajúcej sa z hordéivírusov, benyvírusov, pecluvírusov a pomovírusov, radšej vyberaná zo skupiny skladajúcej sa z vírusu nekrotického žltnutia žiliek repy, vírusu čiarkovitej mozaiky jačmeňa, vírusu mop top zemiaka, vírusu trsovitosti podzemnice olejnej a pôdou prenosného vírusu repy.
- 3. Spôsob podľa vyznačujúci sa bunkou.
- 4. Spôsob podía vyznačujúci sa niektorého z predchádzajúcich nárokov, tým, že rastlinná bunka je stomatálnou niektorého z predchádzajúcich nárokov, tým, že rastlina je vyberaná zo skupiny-1^skladajúcej sa z cukrovej repy, zemiaka, jačmeňa alebo z podzemnice olejnej.
- 5. Spôsob podľa nároku 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že vírusom je BNYW, nukleotidová sekvencia TGB2 menovaného vírusu je obsiahnutá medzi nukleotidmi 3287 a 3643 na 5' vlákne genomickej alebo subgenomickej RNA 2 vírusu BNYW a rastlinou je repa, prednostne cukrová repa (Beta vulgaris).
- 6. Spôsob podlá niektorého z predchádzajúcich nárokov, vyznačujúci sa tým, že regulačná sekvencia obsahuje promótorovú sekvenciu alebo terminačnú sekvenciu aktívnuI v rastline.
- 7. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že promótorová sekvencia je konštitutívnou alebo cudzorodou promótorovou sekvenciou.
- 8. Spôsob podlá predchádzajúceho nároku 7, vyznačujúci sa tým, že promótorová sekvencia je vyberaná zo skupiny skladajúcej sa z 35S promótora vírusu mozaiky karfiolu a/alebo polyubikvitínový promótor Arabidopsis thaliana.
- 9. Spôsob podía niektorého z nárokov 7 až 9, vyznačujúci sa tým, že promótorová sekvencia je promótor, ktorý je schopný byť aktívny hlavne v tkanivách koreňov rastlín, ako je par promótor hemoglobínového génu z Perosponia andersonii.
- 10. Transgénna rastlina odolná voči vírusovej skupine I obsahujúcej nukleotidový konštrukt majúci aspoň 70% homológiu s nukleotidovou sekvenciou TGB2 menovaného vírusu alebo s jej zodpovedajúcou cDNA, operačne spojenou do jednej alebo viacerých regulačných sekvencií aktívnych v rastline.- ΙΌ
- 11. Transgénna rastlina podlá nároku 11, nukleotidový konštrukt má nukleotidovú sekvenciu zodpovedajúcu aspoň 80% homológie s nukleotidovou sekvenciou TGB2 menovaného vírusu alebo s jej komplementárnou cDNA.
- 12. Transgénna rastlina podľa nároku 11 alebo 12, vírus je vyberaný zo skupiny skladajúcej sa z hordéivirusov, benyvírusov, pecluvírusov a pomovírusov, prednostne vyberaná zo skupiny skladajúcej sa z vírusu nekrotického žltnutia žiliek repy, vírusu čiarkovítej mozaiky jačmeňa, vírusu mop top zemiaka, vírusu trsovitosti podzemnice olejnej a pôdou prenosného vírusu repy.
- 13. Transgénna rastlina podľa nárokov 11 až 13 je rastlinou vybratou zo skupiny skladajúcej sa z cukrovej repy, zemiaka, jačmeňa alebo podzemnice olejnej.
- 14. Transgénna rastlina podľa nárokov 11 alebo 12, transgénna rastlina je repa, prednostne cukrová repa (Beta vulgaris), vírus je BNYW a nukleotidová sekvencia TGB2 menovaného vírusu je obsiahnutá medzi nukleotidmi 3287 a 3643 na 5’ vlákne genomickej alebo subgenomickej RNA 2 vírusu BNYW alebo jej zodpovedajúcej cDNA.
- 15. Transgénna rastlina podľa niektorého z predchádzajúcich nárokov 11 až 15, regulačná sekvencia obsahuje promótorovú sekvenciu a terminačnú sekvenciu aktívnu v rastline.
- 16. Transgénna rastlina podlá niektorého z predchádzajúcich nárokov 11 až 16, regulačné sekvencie obsahujú promótorovú sekvenciu ktorá je konštitutívnou alebo cudzorodou promótorovou sekvenciou.
- 17. Transgénna rastlina podlá nároku 17, promótorová sekvencia je vyberaná zo skupiny skladajúcej sa z 35S promótora vírusu mozaiky karfiolu ' a/alebo polyubikvitínový promótor Arabidopsis thaliana.
- 18. Transgénna rastlina podlá nároku 17 alebo 18, promótorová sekvencia je promótor, ktorý je schopný byť aktívny hlavne v tkanivách koreňov rastlín, ako je par promótor hemoglobínového génu z Perosponia andersonii.
- 19. Transgénna rastlina podlá niektorého jedného z nárokov 11 až 19, ďalej nesie prirodzenú toleranciu voči vírusovej skupine I.
- 20. Transgénna rastlina podlá niektorého jedného z nárokov 11 až 20, ďalej obsahuje odolnosť voči pesticídom, herbicídom alebo fungicídom, prednostne odolnosť vyberanú zo skupiny pozostávajúcej z odolnosti voči hlístovcom, odolnosti voči glyfosfátu, glufosomátu a/alebo acetylchloridu.
- 21. Tkanivo transgénnej rastliny vybrané zo skupiny pozostávajúcej z plodu, byle, koreňa, hluzy, semena rastliny podlá niektorého z predchádzajúcich nárokov 11 až 21.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99200773A EP1038961A1 (en) | 1999-03-16 | 1999-03-16 | Method for inducing viral resistance into a plant |
| PCT/EP2000/002176 WO2000055301A2 (en) | 1999-03-12 | 2000-03-07 | Method for inducing viral resistance into a plant |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK12842001A3 true SK12842001A3 (sk) | 2002-04-04 |
Family
ID=8239983
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1284-2001A SK12842001A3 (sk) | 1999-03-16 | 2000-03-07 | Spôsob vyvolania vírusovej odolnosti v rastline |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP1038961A1 (sk) |
| AU (1) | AU3810500A (sk) |
| EA (1) | EA005168B1 (sk) |
| EE (1) | EE200100481A (sk) |
| HU (1) | HUP0200240A3 (sk) |
| PL (1) | PL351521A1 (sk) |
| SK (1) | SK12842001A3 (sk) |
| WO (1) | WO2000055301A2 (sk) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE0004755D0 (sv) * | 2000-12-21 | 2000-12-21 | Plant Science Sweden Ab | Virus resistance in plants |
| MD719Z (ro) * | 2013-06-11 | 2014-08-31 | Институт Зоологии Академии Наук Молдовы | Procedeu de tratare a cartofului contra nematodului Ditylenchus destructor |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EA004328B1 (ru) * | 1996-08-19 | 2004-04-29 | Сес Еуропе Н.В./С.А. | Способ придания растительной клетке или растению устойчивости к вирусу, содержащему последовательность 3 тройного блока генов (tgb3), и трансгенное растение, устойчивое к указанному вирусу |
-
1999
- 1999-03-16 EP EP99200773A patent/EP1038961A1/en not_active Withdrawn
-
2000
- 2000-03-07 HU HU0200240A patent/HUP0200240A3/hu unknown
- 2000-03-07 PL PL00351521A patent/PL351521A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2000-03-07 EE EEP200100481A patent/EE200100481A/xx unknown
- 2000-03-07 SK SK1284-2001A patent/SK12842001A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2000-03-07 EA EA200100884A patent/EA005168B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-03-07 AU AU38105/00A patent/AU3810500A/en not_active Abandoned
- 2000-03-07 EP EP00916929A patent/EP1161538A2/en not_active Withdrawn
- 2000-03-07 WO PCT/EP2000/002176 patent/WO2000055301A2/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1038961A1 (en) | 2000-09-27 |
| EP1161538A2 (en) | 2001-12-12 |
| AU3810500A (en) | 2000-10-04 |
| EA200100884A1 (ru) | 2002-04-25 |
| HUP0200240A2 (hu) | 2002-05-29 |
| EA005168B1 (ru) | 2004-12-30 |
| WO2000055301A2 (en) | 2000-09-21 |
| EE200100481A (et) | 2002-12-16 |
| WO2000055301A3 (en) | 2001-01-25 |
| HUP0200240A3 (en) | 2003-12-29 |
| PL351521A1 (en) | 2003-04-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Callaway et al. | The multifunctional capsid proteins of plant RNA viruses | |
| Bezerra et al. | Increase of tospoviral diversity in Brazil with the identification of two new tospovirus species, one from chrysanthemum and one from zucchini | |
| Frost et al. | Tobacco transgenic for the flax rust resistance gene L expresses allele-specific activation of defense responses | |
| Silva et al. | Sequence diversity of NS M movement protein of tospoviruses | |
| AU729306B2 (en) | Dna construct to confer multiple traits on plants | |
| Chowrira et al. | Coat protein-mediated resistance to pea enation mosaic virus in transgenic Pisum sativum L. | |
| JPH08506489A (ja) | Ｐｌｒｖ感染に耐性の植物 | |
| Verma et al. | Coat protein sequence shows that Cucumber mosaic virus isolate from geraniums (Pelargonium spp.) belongs to subgroup II | |
| CN1119422C (zh) | 抗病毒植物 | |
| Reavy et al. | Immunity to Potato Mop-Top Virus in Nicotiana benthamiana Plants Expressing the Coat Protein Gene ls Effective Against Fungal lnoculation of the Virus | |
| HU223266B1 (hu) | Eljárás vírussal szembeni rezisztencia indukálására növényben | |
| SK12842001A3 (sk) | Spôsob vyvolania vírusovej odolnosti v rastline | |
| Ullah et al. | Effect of substitution of the amino termini of coat proteins of distinct potyvirus species on viral infectivity and host specificity | |
| US6835538B1 (en) | Method of genetic modification of a wild type viral sequence | |
| AU726197B2 (en) | Methods and materials for producing pathogen-resistant plants | |
| Kumar et al. | Management of viral diseases of crops | |
| WO2019122374A1 (en) | Geminivirus resistant plants | |
| Lee et al. | Characterization of the 3′-terminal nucleotide sequence of two Korean isolates of Daphne virus S support its placement as a distinct species of the genus Carlavirus | |
| US8901372B2 (en) | Plant resistance to banana bunchy top virus | |
| Spiegel et al. | Note: Characterization of a Peanut mottle virus isolate infecting peanut in Israel | |
| Tousignant et al. | I. MOLECULAR PARASITISM AND BIOCONTROL | |
| Grumet et al. | Molecular Approaches to Biological Control of Virus Diseases of Plants | |
| US20050257287A1 (en) | Vectors capable of imparting herbicide resistance and viral cross protection and methods | |
| Chen et al. | Transgenic protection against virus infection in orchids | |
| Dardick et al. | Gene-for-gene interactions |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FC9A | Refused patent application |