SI9210090A

SI9210090A - Substituirani hidroksikarbamoilmetil- ali substituirani hidroksifosfonilmetil- derivati n-/4-metilvaleril/,3-metil-l-valinamida

Info

Publication number: SI9210090A
Application number: SI9210090A
Authority: SI
Inventors: John Michael Broadhurst; Paul Anthony Brown; William Henry Johnson; Geoffrey Lawton
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1991-02-01
Filing date: 1992-01-29
Publication date: 1995-04-30

Abstract

Spojine s formulo (|) R1 predstavlja vodik, amino, zaščiten amino, acilamino ali nižji alkil po potrebi substituiran z arilom, hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino, zaščitenim amino, acilamino, maleimido, sukcinimido, naftalimido, 2, 3-dihidro-1, 3-diokso-1H-benz (d, e) izokinol-2-ilom, karboksilom, zaščitenim karboksilom, karba- moilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil) karbamoilom, di(nižji alkiljamino, karboksi-nižji alka- noilaminom, pirolidino ali morfolino; R2 predstavlja vodik ali nižji alkil po potrebi substituiran z arilom, amino, zaščitenim amino, di(nižji alkiljamino, gva- nidino, karboksilom, zaščitenim karboksilom, karba- moilom, mono(nižji alkiljkarbamoilom, di(nižji alkil) karbamoilom, di(nižji alkoksi)fosfinilom, dihidroksi- fosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino; R3 predstavlja vodik ali nižji alkil po potrebi substituiran s hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino ali zaščitenim amino; R4 predstavlja vodik, hidroksi, nižji alkoksi ali benziloksi, in R5 predstavlja vodik ali halogen in njihove farmacevtsko sprejemljive soli. Produkti se uporabljajo za pripravo zdravil za zdravljenje ali preventivo degenerativnih bolezni sklepov ali za zdravljenje invazivnih tumorjev, ateroskleroze ali mul- tiple skleroze. Lahko jih pridobimo po znanih me- todah.

Description

Izum se nanaša na derivate aminokislin, na postopek za njihovo pridobivanje in na zdravila, kijih vsebujejo.

Derivati aminokislin, pridobljeni s tem izumom, so spojine s splošno formulo

Rl predstavlja vodik, amino, zaščiten amino, acilamino ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino, zaščitenim amino, acilamino, maleimido, sukcinimido, naftalimido, 2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-ilom, karboksilom, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)aminom, karboksi-nižji alkanoilaminom, pirolidino ali morfolino;

R² predstavlja vodik ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, amino, zaščitenim amino, di(nižji alkil)aminom, gvanidino, karboksilom, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkoksi)fosfinilom, dihidroksifosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino;

R3 predstavlja vodik ali nižji alkil po potrebi substituiran s hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino ali zaščitenim amino;

R^ predstavlja vodik, hidroksi, nižji alkoksi ali benziloksi, in R^ predstavlja vodik ali halogen, in njihove farmacevtsko sprejemljive soli.

Spojine s formulo I imajo pomembne farmakološke lastnosti. Posebno so inhibitorji kolagenaze in jih lahko uporabljamo za reguliranje ali preventivo degenerativnih bolezni sklepov, kot je revmatični artritis in osteoartritis, ali za zdravljenje invazivnih tumorjev, ateroskleroze ali multiple skleroze.

Predmet tega izuma so spojine s formulo I in njihove farmacevtsko sprejemljive soli same ali za uporabo kot terapevtsko aktivne snovi; postopek za pridobivanje omenjenih spojin in soli; zdravila, ki vsebujejo omenjene spojine in soli, in pridobivanje teh zdravil; kot tudi uporaba teh spojin in soli za reguliranje ali preventivo bolezni ali izboljšanje zdravstvenega stanja, posebno za uravnavanje in preventivo bolezni degeneracije sklepov ali pri zdravljenju invazivnih tumorjev ali ateroskleroze, ali za pridobivanje zdravil za reguliranje ali preventivo bolezni degeneracije sklepov ali za zdravljenje invazivnih tumorjev, ateroskleroze ali multiple skleroze.

V tem opisu se sam ali v kombinaciji uporablja izraz nižji alkil, ki označuje alkilno skupino z ravno ali z razvejeno verigo, ki vsebuje največ šest ogljikovih atomov, kot metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, sek.butil, izobutil, terc.-butil, n-pentil, n-heksil in podobno. Podobno izraz nižji alkoksi označuje alkoksi skupino z ravno ali razvejeno verigo, ki vsebuje največ šest ogljikovih atomov, kot npr. metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, n-butoksi, terc.-butoksi in podobno. Izraz aril označuje po potrebi substituirano fenilno ali naftilno skupino, pri čemer so substituenti izbrani izmed halogena, trifluorometila, nižjega alkila, nižjega alkoksi, fenila in podobnega. Acilni del acilamino skupine je izveden iz alkanojske kisline, ki vsebuje največ šest ogljikovih atomov, kot so npr. acetil, propionil, butiril, pivaloil in druge, iz po potrebi substituirane benzojske ali naftalenkarboksilne kisline, kot so npr. benzoil, 4-klorbenzoil, 2karboksibenzoil, 1- ali 2-naftoil, in druge, ali z arilom substituirane alkanojske kisline, ki vsebuje največ šest ogljikovih atomov, npr. fenilacetila in drugih. Nižji alkanoilni del karboksi-nižje alkanoilamino skupine je izveden iz alkanojske kisline, ki vsebuje največ šest ogljikovih atomov, kot so npr. acetil, propionil, butiril in druge. Izraz halogen označuje fluor, klor, brom ali jod.

Izraz zaščiteni amino, zaščiteni hidroksi in zaščiteni karboksi označuje amino, hidroksi in karboksi skupine, ki so zaščitene na znan način, kot je npr. običajno v kemiji peptidov. Amino skupino lahko npr. zaščitimo z benziloksikarbonilom, terc.butoksikarbonilom, acetilom ali podobno skupino, ali v obliki ftalimido ali podobne skupine. Hidroksi skupino lahko zaščitimo npr. v obliki zlahka cepljivega etra, kot npr. terc.-butiletra ali benziletra, ali v obliki zlahka cepljivega estra, kot npr. acetata. Tako npr. lahko karboksi skupino zaščitimo v obliki zlahka cepljivega estra, kot so metiln, etilni, benzil ali podobno.

Spojine s formulo I tvorijo farmacevtsko sprejemljive soli z bazami, kot so hidroksidi alkalijskih kovin (npr. natrijev hidroksid ali kalijev hidroksid), hidroksidi zemljoalkalijskih kovin (npr. kalcijev hidroksid in magnezijev hidroksid), amonijev hidroksid in podobno. Spojine s formulo I, ki so bazične, tvorijo farmacevtsko sprejemljive soli s kislinami. Kot takšne soli ne pridejo v poštev samo soli z anorganskimi kislinami, kot so halogenovodikove kisline (npr. klorovodikova in bromovodikova kislina), žveplova kislina, solitrna kislina, fosforna kislina in dr., temveč tudi soli z organskimi kislinami, kot so ocetna kislina, vinska kislina, jantarna kislina, fumarna kislina, maleinska kislina, jabolčna kislina, salicilna kislina, citronska kislina, metansulfonska kislina, ptoluensulfonska kislina in druge.

Spojine s formulo I vsebujejo najmanj dva asimetrična ogljikova atoma in lahko zato obstajajo kot optično aktivni enantiomeri, kot diastereoizomeri ali kot racemati. Cilj izuma je uporaba vseh teh oblik.

V spojinah s formulo I, ki jih nudi predloženi izum, Rl prednostno predstavlja vodik, amino, acetilamino, benziloksikarbonilamino ali nižji alkil, po potrebi substituiran z amino, fenilom, ftalimido, sukcinimido, karboksi, alkoksikarbonilom, morfolino, hidroksi ali acetoksi, posebno vodik, amino, acetilamino, benziloksikarbonilamino, metil, 5-amino-pentil, 4-ftalimidobutil, 5-ftalimidopentil, 5-hidroksipentil, 5-acetoksipentil, aminometil, ftalimidometil, sukcinimidometil, benzil, 3-fenilpropil, 3-karboksipropil, 3-metoksikarbonilpropil, benzoilaminometil, morfolinometil, acetilaminometil,

2-ftalimidoetil, 3-hidroksipropil ali 3-acetoksipropil. R² prednostno predstavlja nižji alkil, po potrebi substituiran z amino, arilom, gvanidino, karboksi, di(nižji alkoksi)fosfinilom, dihidroksifosfinilom ali morfolino, posebno metil, 4-aminobutil, 1feniletil, 5-karboksipentil, dietoksifosfinilmetil, dihidroksifosfinilmetil, ali 5-morfolinopentil. R^ prednostno predstavlja vodik, hidroksimetil, 2-aminoetil ali 4-aminobutil, posebno vodik. R^ prednostno predstavlja vodik, hidroksi ali benziloksi, posebno vodik ali hidroksi. R^ prednostno predstavlja vodik ali brom.

Najbolj prednostne spojine s formulo I, kijih nudi predloženi izum, so :

N²-[(R)-[hidroksikarbamoilmetil]-4-metilvaleril]-Nl’3-dimetil-L-valinamid,

N²-2(R ali S)-[l(S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]Nl,3-dimetil-L-valinamid (izomer 2),

N²-[2(R ali S)-[[[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid,

N²-[2(R ali S)-[[(R)-(amino)[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-Lvalinamid,

N²-[(2R ali S)-[[(R)-(amino)[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamid, N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetilL-valinamid,

N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)-butil]-4-metilvaleriljN 1,3-dimetil-L-valinamid,

N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-Lvalinamid in

N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-sukcinimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamid.

Po postopku v smislu izuma dobimo spojine s formulo I in njihove farmacevtsko sprejemljive soli

a) z reakcijo kisline s splošno formulo

R¹⁰ (ID kjer R.10 predstavlja vodik, zaščiten amino, acilamino ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, zaščitenim hidroksi, zaščitenim amino, acilamino, maleimido, sukcinimido, naftalimido, 2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il, zaščitenim karboksi, karbamoilom, mono(nižji alkiljkarbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alikil)amino, karboksi-nižji alkanoilamino, pirolidino ali morfolino, R^O pa predstavlja vodik ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, zaščitenim aminom, di(nižji alkiljaminom, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkiljkarbamoilom, di(nižji alkil)-karbamoilom, di(nižji alkoksi)fosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino, s spojino s splošno formulo

H₂N-OZ (III) kjer Z predstavlja vodik, tri(nižji alkil)silil ali difenil(nižji alkil)silil, ali, če je potrebno, z odcepitvijo katerekoli difenil (nižji alkil)sililne skupine prisotne v reakcijskem produktu, ali

b) s katalitičnim hidrogeniranjem spojine s splošno formulo

(IV) kjer je benziloksiformamido, R^ ima prej navedeni pomen in R^l ima katerokoli prej dano vrednost za R^O ali predstavlja nitrogvanidino, ali

c) z reakcijo amina s splošno formulo

(V)

H₂N

CO- NH—R²⁰ kjer ima R?0 prej navedeni pomen, s kislino s splošno formulo

(VI) kjer imajo R^, r5 in RlO prej definiran pomen in R^O predstavlja vodik ali nižji alkil, po potrebi substituiran z zaščiteno hidroksi ali zaščiteno amino skupino, ali

d) z obdelavo spojine s splošno formulo

(VH) kjer imajo Rl, R^, r3, r4 j_n r5 p_rej dani pomen in R^ predstavlja nižji alkil, s kislino ali halotri(nižji alkil)silanom, ali

e) z reakcijo spojine s splošno formulo (VHD

kjer imajo R^, r5 in R^O prej dani pomen, s spojino s splošno formulo

(IX) kjer imajo RlO in R^O prej dani pomen, ali

f) z bromiranjem spojine s formulo I, v kateri A predstavlja skupino s formulo (b), v kateri je R^ hidroksi in R^ vodik, ali

g) z odcepitvijo zaščitnih skupin iz spojine s formulo I, kjer Ri predstavlja zaščiten amino ali nižji alkil substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino in/ali R²predstavlja nižji alkil substituiran z zaščitenim amino ali zaščitenim karboksilom in/ali R^ predstavlja nižji alkil substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino, ali

h) z obdelavo spojine s formulo I, v kateri R² predstavlja di(nižji alkoksi)fosfinil-(nižji alkil), s kislino ali z halotri(nižji alkil)silanom, ali

i) z aciliranjem spojine s formulo I, v kateri Rl predstavlja amino ali amino-nižji alkil, ali

j) z odprtjem obroča spojine s formulo I, v kateri Rl predstavlja ftalimido(nižji alkil) ali sukcinimido-(nižji alkil), in

k) v kolikor je potrebno, s pretvorbo dobljene spojine s formulo I v farmacevtsko sprejemljivo sol.

Reakcijo kisline s formulo II s spojino s formulo III v skladu z izvedbo a) tega postopka lahko izvedemo na znan način, npr. v inertnem organskem topilu, kot je dimetilformamid ali podobno, z uporabo hidroksibenzotriazola v prisotnosti kondenzacijskega sredstva, kot je npr. l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid, pri temperaturi od okoli 0 °C do sobne temperature. Prednostne spojine s formulo III so tiste, pri katerih Z predstavlja vodik, terc.-butildimetilsilil ali terc.-butildifenilsilil. Kadar uporabimo spojino s formulo III, pri kateri Z predstavlja tri(nižji alikil)silil, to skupino odcepimo v teku reakcije in direktno dobimo spojino s formulo I. Po drugi strani pa kadar uporabimo spojino s formulo III, v kateri Z predstavlja diaril(nižji alkil)silil, ta skupina ostane v reakcijskem produktu in jo je treba nato odcepiti na znan način, npr. s pomočjo fluoridnih ionov.

Katalitsko hidrogenacijo spojine s formulo IV v skladu z izvedbo b) tega postopka lahko vršimo na znan način; npr. v inertnem organskem topilu, ob uporabi vodika v prisotnosti plemenite kovine kot katalizatorja. Primerna organska topila so na primer nižji alkanoli, kot je metanol, etanol in drugi, katalizator pa je lahko platina, paladij ali rodij, ki se nahajajo na ustreznem nosilnem materialu. Paladij na oglju predstavlja najboljši katalizator. Temperatura in tlak nista kritična, čeprav je običajno, da se katalitsko hidrogeniranje vrši pri sobni temperaturi in pod atmosferskim tlakom.

Reakcija amina s formulo V s kislino s formulo VI v skladu z izvedbo c) po tem postopku se lahko odvija s segrevanjem amina s kislino v inertnem organskem topilu, kot je aromatski ogljikovodik, posebno toluen ali ksilen, pri temperaturi od okoli 30 °C do 150 °C, in nabolj prednostno pri temperaturi refluksa reakcijske zmesi. V kolikor je potrebno, se segrevanje lahko vrši v prisotnosti terciarne organske baze. Alternativno lahko reakcijo vršimo na znan način, najprej z reagiranjem kisline s formulo VI z reagentom, kot je oksalil klorid, in nato s kondenzacijo z aminom s formulo V, v prisotnosti terciarne organske baze. Ta postopek lahko izvedemo na primer v inertnem organskem topilu, kot npr. halogeniranem alifatskem ogljikovodiku, npr. diklorometanu ali podobnem, v aromatskem ogljikovodiku, kot je toluen ali podobnem, ali v zmesi takih topil, pri temperaturi med -25 °C in sobno temperaturo in najbolj primerno pri sobni temperaturi.

Obdelavo spojine s formulo VII s kislino ali s halotri(nižji alkil)silanom, najbolj primerno s halotrimetilsilanom, kot je bromotrimetilsilan, v skladu z izvedbo d) tega postopka, izvedemo na znan način. Tako npr. spojine s formulo VII lahko obdelamo s hidrogen halidom, najbolj primerno z vodikovim bromidom, v nižji alkanojski kislini, najprimerneje v ocetni kislini in to pri sobni temperaturi, ali s trifluorocetno kislino v inertnem organskem topilu npr. halogeniranem ogljikovodiku, kot je diklorometan ali podobnem, najprimerneje pri sobni temperaturi. Prav tako npr. spojino s formulo VII lahko obdelamo s halotri(nižji alkiljsilanom v inertnem organskem topilu, npr. halogeniranem alifatskem ogljikovodiku, kot diklorometanu ali podoben, najprimerneje pri sobni temperaturi.

Reakcijo spojine s formulo VIII s spojino s formulo IX v skladu z izvedbo e) tega postopka lahko izvedemo na znan način. Reakcijo lahko npr. izvedemo v inertnem organskem topilu, kot je halogenirani alifatski ogljikovodik, npr. kloroform ali podobno, v prisotnosti sredstva za sililiranje, kot npr. bis(trimetilsilil)acetamida, pri čemer zmes nakisamo, npr. z mineralno kislino, kot je klorovodikova kislina, po opravljeni reakciji. To reakcijo primerno izvedemo pri zvišani temperaturi, npr. pri okoli 50-60 °C.

Bromiranje v skladu z izvedbo f) tega postopka lahko izvedemo na znan način. Bromiranje primerno izvedemo z uporabo broma v inertnem organskem topilu kot je alkanojska kislina, npr. ocetna kislina in podobno, z bromom v halogeniranem ogljikovodiku npr. diklorometanu in podobnim. Bromiranje hitro izvedemo pri sobni temperaturi.

Cepitev zaščitnih skupin v skladu z izvedbo g) tega postopka lahko izvedemo z uporabo znanih metod iz kemije peptidov. Tako npr. cepitev zaščitene amino skupine v amino skupino lahko izvedemo z acidolizo ob uporabi mineralne kisline, npr. klorovodikove kisline ali trifluorocetne kisline, kadar je zaščitna skupina terc.-butoksikarbonil, s katalitsko hidrogenolizo kadar je zaščitna skupina benziloksikarbonil, ali s hidrazinolizo kadar je zaščitna skupina ftaloil. Prav tako npr. cepitev zaščitene hidroksi skupine v hidroksi skupino lahko izvedemo z acidolizo, kadar je zaščitna skupina terc.-butil, s katalitsko hidrogenolizo, kadar je zaščitna skupina benzil, ali z naalkaljenjem, kadar je zaščitna skupina v obliki estra npr. acetata. Prav tako npr. cepitev zaščitene karboksi skupine lahko izvedemo z naalkaljenjem, npr. z vodno raztopino hidroksida alkalijske kovine, kot je vodna raztopina natrijevega hidroksida ali kalijevega hidroksida.

Obdelavo v skladu z izvedbo h) tega postopka lahko izvedemo na znan način. Tako npr. lahko obdelavo izvedemo ob uporabi halogenovodika, najbolj prednostno bromovodika, v nižji alkanojski kislini, nabolj prednostno ocetni kislini in to pri sobni temperaturi, ali z uporabo trifluorocetne kisline v inertnem organskem topilu, npr.

halogeniranem ogljikovodiku kot je diklorometan ali podobno, najprimerneje pri sobni temperaturi. Prav tako npr. obdelavo lahko izvršimo v inertnem organskem topilu na primer halogeniranem ogljikovodiku, kot diklorometanu ali podobnem, najbolj prednostno pri sobni temperaturi.

Aciliranje v skladu z izvedbo i) tega postopka lahko izvedemo na znan način; npr. z uporabo kislinskega halida, npr. acetil halida, ali prednostno kislinskega anhidrida npr. anhidrida ocetne kisline itd., v inertnem organskem topilu in v prisotnosti baze. Prednostna je organska baza posebno piridin, ki ga lahko primerno uporabimo v prebitku in tako istočasno služi kot topilo. Aciliranje prikladno poteka pri sobni temperaturi.

Odprtje obročev spojin s formulo I pri katerih predstavlja ftalimido(nižji alkil) ali sukcinimido (nižji alkil) v skladu z izvedbo j) tega postopka, vodi do ustrezne spojine s formulo I, v kateri Rl predstavlja (2-karboksibenzoil)amino-(nižji alkil) ali 3-karboksipropionamido-(nižji alkil). Odprtje obročev lahko izvedemo na znan način, npr. z obdelavo z litijevim hidroksidom pod znanimi pogoji, npr. v nižjem alkanolu in najbolj prednostno pri okoli sobni temperaturi.

V skladu z izvedbo k) tega postopka lahko kislinske spojine s formulo I pretvorimo v farmacevtsko sprejemljive soli z obdelavo z bazami, bazične spojine s formulo I pa lahko pretvorimo v farmacevtsko sprejemljive soli z obdelavo s kislinami. Takšno obdelavo lahko izvedemo na običajen način.

Kisline s formulo II, ki jih uporabimo za izhodni material v izvedbi a) tega postopka, predstavljajo novost in drugi predmet tega izuma.

Kisline s formulo II lahko pripravimo v skladu s postopkom prikazanim v reakcijski shemi I, pri čemer imata RlO in R^O prej definirani pomen in R^ predstavlja zaščitno skupino, kot npr. terc.-butil, benzil ali podobno:

Reakcijska shema I

R¹⁰ (X)

HOOC

R⁷OOC

CO — NH

CO— NH—R²⁰ (ΧΠ) (Π)

Z ozirom na reakcijsko shemo I v prvi stopnji kislino s formulo X kondenziramo z aminom s formulo XI. To kondenzacijo izvedemo na način znan v kemiji peptidov. Tako npr. kondenzacijo izvedemo po dobro znani metodi s kislinskim halidom, kislinskim anhidridom, aktiviranim amidom, mešanim anhidridom ali aktiviranim estrom. Pri prednostni izvedbi kondenzacijo izvedemo po metodi z aktiviranim estrom, zlasti z uporabo hidroksibenzotriazola v prisotnosti sredstva za kondenzacijo, kot je N,N’-dicikloheksilkarbodiimid.

V naslednji stopnji spojino s formulo XII prevedemo v kislino s formulo II s cepitvijo zaščitne skupine R². To cepitev izvedemo na znan način, npr. z obdelavo s kislino, kot je bromovodik v ledocetni kislini ali trifluorocetni kislini, pri čemer R² predstavlja terc.butil, ali s hidrogenolizo kadar R² predstavlja benzil.

Spojine s formulo III, kijih uporabimo kot izhodni material v izvedbi a) tega postopka, so znane spojine.

Spojine s formulo IV, ki jih uporabimo kot izhodne materiale v izvedbi b) tega postopka, predstavljajo novost in so nadaljnji predmet tega izuma.

Spojine s formulo IV lahko pripravimo z reakcijo kisline s formulo II ali ustrezne kisline, pri katerih R²0 predstavlja nitrogvanidino, z O-benzilhidroksilaminom. To reakcijo lahko izvedemo na običajen način, na primer v inertnem organskem topilu kot je kloriran alifatski ogljikovodik, na primer diklorometan ali podobno, v prisotnosti kondenzacijskega sredstva, kot je di(l-benzotriazolil)karbonat, in pri sobni temperaturi.

Amini s formulo V, kijih uporabimo kot izhodni material v izvedbi c) tega postopka, so znane spojine ali analogi znanih spojin, ki jih pripravimo na analogen način kot znane spojine.

Kisline s formulo VI, ki jih uporabimo kot izhodni material v izvedbi c) tega postopka, predstavljajo novost in so prav tako predmet tega izuma.

Kisline s formulo VI lahko pripravimo po postopku, prikazanem v reakcijski shemi II, v kateri imajo R^ in R⁵ in R¹⁰ prej definiran pomen, R^ predstavlja nižji alkil ali aril(nižji alkil) in R^O predstavlja vodik ali nižji alkil, po potrebi substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino:

Reakcijska shema II

COOR®

(VI)

Z ozirom na reakcijsko shemo II v prvi stopnji hipofosforasta kislina s formulo XIII reagira s spojino s formulo XIV na znan način, na primer v inertnem organskem topilu, kot je halogeniran alifatski ogljikovodik, na primer diklorometan ali podobno, v prisotnosti sredstva za sililiranje, kot je bis(trimetilsilil)acetamid, in amina, kot je 1,1,3,3-tetrametilgvanidin, pri temperaturi od 0 °C do sobne temperature, pri čemer reakcijsko zmes nakisamo npr. s klorovodikovo kislino po končani reakciji.

Spojino s formulo XV nato pretvorimo v spojino s formulo XVI z reakcijo z izobutilbromidom ali -jodidom. To reakcijo izvedemo na običajen način, npr. v inertnem organskem topilu, kot je dimetil sulfoksid in podobno, in v prisotnosti baze npr. hidrida alkalijske kovine, kot je natrijev hidrid, pri temperaturi od 5 °C do sobne temperature.

Spojino s formulo XVI lahko prevedemo bodisi v drugo spojino s formulo XVII ali v spojino s formulo XVIII. Razen tega spojina s formulo XVI predstavlja primerno stopnjo za izvedbo ločbe na optične izomere.

Pretvorba spojine s formulo XVI v spojino s formulo XVII lahko poteka na analogen način, kot smo ga opisali prej pri reakciji spojine s formulo VIII s spojino s formulo IX v izvedbi d) postopka tega izuma.

Spojino s formulo XVII prevedemo v kislino s formulo VI s hidrolizo in dekarboksilacijo po znanih postopkih. Konkretno uporabljene metode so odvisne od narave substituentov prisotnih v molekulah in so za strokovnjaka običajne. Razen tega lahko hidrolizo in dekarboksilacijo izvajamo stopenjsko v določenih okoliščinah.

Pretvorba spojine s formulo XVI v spojino s fromulo XVIII lahko poteka na analogen način, kot smo ga opisali za konverzijo spojine s formulo XVII v kislino s formulo VI, in konverzija spojine s formulo XVIII v kislino s formulo VI lahko poteka na analogen način, kot smo opisali za konverzijo spojine s formulo XVI v spojino s formulo XVII.

Dobljeno kislino s formulo VI lahko po potrebi funkcionalno modificiramo. Na primer kislino s formulo VI, pri kateri R^ predstavlja benziloksi in R^ predstavlja vodik, lahko katalitsko hidrogeniramo, tako da dobimo kislino s formulo VI, v kateri R^ predstavlja hidroksi in R^ predstavlja vodik in slednjo lahko bromiramo, da dobimo kislino s formulo VI, v kateri R^ predstavlja hidroksi in R$ predstavlja brom. Bromiranje se lahko izvede na analogen način, kot smo ga prej opisali v v zvezi z izvedbo e) postopka izuma.

Spojine s formulo VII, kijih uporabimo kot izhodni material v izvedbi c) tega postopka, predstavljajo novost in pomenijo nadaljnji predmet tega izuma.

Spojine s formulo VII lahko pripravimo po postopku prikazanem v reakcijski shemi III. pri čemer imajo Rl, R², R^, RlO, r20 in R^O prej definiran pomen.

Reakcijska shema III

O,

H

OR⁶

(XIX) /

COO-benzyl

(XX) (XXI) (VH)

Z ozirom na reakcijsko shemo III v prvi stopnji spojina s formulo XIX reagira s spojino VIII tako, da dobimo spojino s formulo XX. Ta reakcija poteka na analogen način, kot smo prej opisali pri reakciji s formulo VIII s spojino s formulo IX.

Spojino s formulo XX nato debenziliramo s katalitskim hidrogeniranjem na običajen način, da dobimo spojino s formulo XXI.

Nato spojino s formulo XXI pripajamo z aminom s formulo V po metodah, znanih v kemiji peptidov, in po potrebi prevedemo po znanih metodah morebitno zaščiteno amino, zaščiteno hidroksi ali zaščiteno karboksi skupino, prisotno v produktu, v amino, hidroksi ali karboksi skupino.

Alternativni postopek za pripravo spojin s formulo XXI, kjer predstavlja nižji alkil substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino, kot smo prikazali v naslednji reakcijski shemi IV, pri čemer imajo R^, R^, R^ in RlO prej naveden pomen in R^l predstavlja nižji alkil substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino, kjer zaščitna skupina ne more biti taka, da sejo da hidrogenolitsko odstraniti.

Reakcijska shema IV

(XIX) (XXII) (xxm) (XXIa)

Z ozirom na reakcijsko shemo IV pretvorimo spojino s formulo XIX v spojino s formulo XXII s pomočjo reakcije z aldehidom s formulo R^l-CHO, pri čemer ima R^l prej dani pomen, ob aktiviranju hidroksi skupine v dobljenem produktu in z reagiranjem aktiviranega produkta z azidom alkalijske kovine. Te stopnje vršimo na znan način. Tako npr. reakcija spojine s formulo XIX z aldehidom lahko poteka v inertnem organskem topilu, kot je aromatski ogljikovodik npr. toluen ali podobno, v prisotnosti baze, kot je 1,1,3,3-tetrametil-gvanidin pri sobni temperaturi. Aktiviranje hidroksi skupine izvedemo s pretvorbo v ustrezno alkansulfoniloksi npr. metansulfoniloksi spojino z uporabo alkansulfonil halida npr. metansulfonil klorida, v prisotnosti sredstva, ki veže kislino, na primer piridina ali podobega in v inertnem organskem topilu, na primer halogeniranem alifatskem ogljikovodiku, kot je diklorometan ali podobno, pri temperaturi od 0 °C do sobne temperature. Reakcijo z azidom alkalijske kovine, najbolj prednostno z natrijevim azidom, prednostno izvedemo v inertnem organskem topilu, kot je dimetilformamid ali podobno, pri zvišani temperaturi, na primer 60-80 °C.

Zatem spojino s formulo XXII pretvorimo v spojino s formulo XXIII na znan način, na primer z obdelavo v inertnem organskem topilu, kot je nižji alkanol na primer metanol in podobno, z alkanditiolom, na primer 1,3-propan-ditiolom, v prisotnosti tri(nižji alkil)amina, npr. trietil-amina ali podobnega, pri sobni temperaturi.

Spojina s formulo XXIII nato reagira s spojino s splošno formulo

kjer imata R^ in R^ prej definirani pomen in dobljeni reakcijski produkt debenziliramo.

Reakcijo spojine s formulo XXIII s spojino s formulo XXIV lahko izvedemo na znan način, na primer v inertnem organskem topilu, kot je halogeniran alifatski ogljikovodik, na primer diklorometan in podobno, in v prisotnosti terciarnega amina kot je N-etilmorfolin ali podobno, pri sobni temperaturi. Kasnejše debenziliranje izvedemo na običajen način.

Dobljeno spojino s formulo XXI ali XXIa lahko po potrebi funkcionalno modificiramo.

Na primer spojino s formulo XXI ali XXIa, kjer R^ predstavlja benziloksi in R⁵ predstavlja vodik, lahko katalitsko hidrogeniramo, da dobimo spojino s formulo XXI ali

XXIa, kjer R^ predstavlja hidroksi in R^ predstavlja vodik in to drugo spojino lahko bromiramo na analogen način, kot smo opisali pri izvedbi e) postopka izuma, tako, da dobimo spojino s formulo XXI ali XXIa, kjer R^ predstavlja hidroksi in R^ predstavlja brom.

Razen tega lahko zaščitno skupino, kije prisotna v R^l, zamenjamo v katerikoli stopnji postopka prikazanega v shemi IV.

Spojine s formulo VIII, ki predstavljajo izhodne materiale v izvedbi d) tega postopka, predstavljajo znane spojine ali analoge znanih spojin, ki jih lahko pripravimo na podoben način kot znane spojine.

Spojine s formulo IX, ki prav tako predstavljajo izhodne materiale v izvedbi d) tega postopka, predstavljajo novosti in so prav tako predmet tega izuma.

Spojine s formulo IX lahko pripravimo na primer z reakcijo spojine s formulo XVIII z aminom s formulo V. To reakcijo lahko izvedemo na analogen način, ki smo ga prej opisali pri reakciji amina s formulo V s kislino s formulo VI v izvedbi c) postopka, ki ga predvideva ta izum.

Spojine s formulami X, XI, XIII, XIV in XIX, kijih uporabljamo kot izhodne materiale v prešnjih reakcijskih shemah, in spojine s formulo XXIV so znane spojine, ki jih lahko pripravimo na podoben način, kot znane spojine ali kot smo to opisali v naslednjih primerih ali po analogiji z njimi.

Kot smo že omenili, so spojine s formulo I in njihove farmacevtsko sprejemljive soli inhibitorji kolagenaze. Inhibicijsko aktivnost na kolagenaze teh spojin in soli in vitro lahko prikažemo z uporabo kolagenaze dobljene iz kulture humanih sinovialnih fibroblastov po metodi Dayer J-M et al, Proč. Natl. Acad. Sci. USA (1976), 73 945, po aktiviranju pro-kolagenaze v kondicioniranem mediju z obdelavo s tripsinom. Kolagenazna aktivnost je merjena z uporabo ^C-acetiliranega kolagena tipa I iz tetive repa podgan kot substrata in z uporabo poskusne metode mikrotitrov na plošči po Johnson-Wint, B, Anal. Biochem. (1980), 104,175 . IC50 predstavlja tisto koncentracijo spojine ali soli v skladu z izumom pri encimski digestiji, ki zmanjša cepitev substrata in solubilizacijo na 50 % vrednosti, ki jo dobimo samo z encimom.

Rezultati dobljeni pri proučevanju predstavnikov spojin in soli tega izuma so zbrani v

Tabeli I:

Tabela I

Spojina s formulo I	IC₅₀ (nM)
A	4
B	4
C	9
D	2
E	0.5
F	0.9
G	1.9
H	0.5

Spojina A: N²-[(R)-[hidroksikarbamoilmetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamid;

Spojina B: N²-[2(R ali S)-[[[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamid;

Spojina C: N²-[(R ali S)-[[(R)-(amino)[5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N^,l-dimetil-Lvalinamid hidrobromid;

Spojina D: N²-[2(R ali S)-[l(S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetilvalinamid;

Spojina E: N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid;

Spojina F: N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid;

Spojina G: N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-4-fenilbutil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid;

Spojina H: N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-sukcinimidoetil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid;

Spojine s formulo I in njihove farmacevtsko sprejemljive soli lahko uporabimo kot zdravila, na primer v obliki farmacevtskih preparatov. Farmacevtske preparate lahko dajemo oralno na primer v obliki tablet, prevlečenih tablet, dražejev, trdih in mehkih želatinastih kapsul, raztopin, emulzij ali suspenzij. Prav tako jih lahko dajemo rektalno na primer v obliki supozitorijev, ali parenteralno na primer v obliki injekcijskih raztopin.

Za izdelavo farmacevtskih preparatov lahko spojine s formulo I in njihove farmacevtsko sprejemljive soli formuliramo s terapevtsko inertnimi anorganskimi ali organskimi nosilci. Lahko uporabimo laktozo, koruzni škrob ali njegove derivate, smukec, stearinsko kislino ali njene soli, na primer kot nosilce za tablete, prevlečene tablete, dražeje in trde želatinaste kapsule. Primerni nosilci za mehke želatinaste kapsule so na primer rastlinska olja, voski, masti, poltrdi in tekoči polioli in podobno. V odvisnosti od narave aktivne sestavine običajno ni potreben nosilec za mehke želatinaste kapsule. Primerni nosilci za izdelavo raztopin in sirupov so na primer voda, polioli, saharoza, invertni sladkor, glukoza in podobno. Primerni nosilci za izdelavo injekcijskih raztopin so na primer voda, alkoholi, polioli, glicerin, rastlinska olja in podobno. Naravna in strjena olja, voski, masti, poltekoči polioli in podobno predstavljajo primerne nosilce za izdelavo supozitorijev.

Farmacevtski pripravki prav tako lahko vsebujejo zaščitna sredstva, stabilizatorje, vlažilna sredstva, emulgatorje, sladila, barve, sredstva za izboljšanje okusa, soli za uravnavanje osmotskega tlaka, pufre, prevlečna sredstva in antioksidante.

Zdravila, ki vsebujejo spojine s formulo I ali njihove farmacevtsko sprejemljive soli, kot tudi postopek za proizvodnjo takih zdravil prav tako predstavljajo predmet tega izuma. Ta postopek obsega pretvorbo spojine s formulo I ali njenih farmacevtsko sprejemljivih soli v obliko za galensko dajanje skupaj s terapevtsko inertnim nosilnim materialom in, v kolikor je potrebno, z eno ali več drugih terapevtsko aktivnih snovi.

Kot smo že omenili, spojine s formulo I in njihove farmacevtsko sprejemljive soli lahko uporabimo za zdravljenje ali preventivo pred boleznimi, posebno za zdravljenje ali preventivo degenerativnih bolezni sklepov ali za zdravljenje invazivnih tumorjev, ateroskleroze ali multiple skleroze. Doziranje lahko variira v širokem območju in je seveda prilagojeno zahtevam posameznega primera. Na splošno je v primeru dajanja odraslim dnevna doza od 5 do 30 mg, najbolj prednostno od 10 do 15 mg, pri čemer se zgornja meja lahko prekorači, v kolikor bi bilo to koristno. Dnevno dozirno množino lahko dajemo naenkrat ali razdeljeno v manjše dozirne množine.

Naslednji Primeri podrobneje prikazujejo izum. V naslednjih Primerih so vse temperature v stopinjah Celzija.

Primer 1

Raztopino 1.93 g N²-[2(R)-[benziloksikarbamoilmetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v 150 ml etanola smo hidrogenirali v prisotnosti 590 mg 5 % paladija na oglju v teku 1.5 ure. Katalizator smo odstranili s filtriranjem in raztopino uparili z dodatkom 1.52 g N²-[(R)-[hidroksikarbamoil-metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 4.22 (s,IH); 3.0-2.9 (m,IH), 2.73 (s,3H); 2.3 (d,d, 1H,J= 14.8); 2.16 (d,d,IH,J= 14.6); 1.62-1.42 (m,2H); 1.24-1.13 (m,IH); 0.99 (s,9H); 0.94 (d,3H); 0.88 (d,3H); MS: 316(M+H)+

Izhodni material smo pridobili kot sledi:

i) 3.3 g 4-terc.-butil 2(R)-izobutil sukcinata in 2.1 g (S)-terc.-butilglicin metilamida smo raztopili v 50 ml dimetilformamida in raztopino ohladili do 0 °C. Dodali smo 2.66 g hidroksibenzotriazola in 3.25 g Ν,Ν’-dicikloheksilkarbodiimida. Zmes smo pustili segreti do sobne temperature in mešali preko noči. Dicikloheksilsečnino smo odstranili s filtriranjem in zmes uparili do bledo-oranžno obarvanega olja, ki smo ga raztopili v diklorometanu. Organsko fazo smo izprali 5 % raztopino citronske kisline, 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata in nasičeno raztopino natrijevega klorida in nato osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom. Topilo smo odstranili z uparjenjem, da smo dobili oranžno obarvano peno. S prečiščenjem s pomočjo kromatografije na silikagelu ob uporabi 3 % metanola/diklorometana za eluiranje smo dobili 4.49 g N²-[2(R)-[terc.-butoksikarbonilmetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele pene; nmr (CDCI3) 6.55-6.48 (m,2H); 4.32 (d,lH,J=10); 2.8 (d,3H,J=5); 2.76-2.65 (m,IH), 2.58 (d,d,IH,J=15,10); 2.34 (d,d,lH,J=15.5); 1.6-1.45 (m,2H); 1.43 (s,9H); 1.3-1.27 (m,lH);1.0 (s,9H); 0.9 (d,3H,J=5); 0.86 (d,3H,J=5).

ii) N²-[2(R)-[terc.-butoksikarbonilmetil]-4-metil]valeril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid smo raztopili v 7 ml ledocetne kisline in obdelali z 10.5 ml raztopine 4M vodikovega bromida v ledocetni kislini. Po mešanju 1.5 ure pri sobni temperaturi smo zmes uparili in dobljeno gumo ponovno trikrat uparili s vsakič po 100 ml toluena. Ostanek smo raztopili v dietiletru in dvakrat ekstrahirali s 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata. Vodne ekstrakte smo nakisali do pH 2 s klorovodikovo kislino in ekstrahirali dvakrat z diklorometanom. Združene organske ekstrakte smo sušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata in uparili, da smo dobili 3.26 g surove bele pene, ki je vsebovala N²-[2(R)-karboksimetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.

iii) 2.4 g Zgornje bele pene smo raztopili v 60 ml suhega diklorometana in raztopino ohladili do 0 °C. Nato smo zapored dodajali 0.65 ml piridina in 3.38 g di(l-benzotriazolil)karbonata. Zmes smo mešali 1 uro pri 0 °C in nato dodali 1.18 g O-benzil hidroksilamina. Raztopino smo pustil segreti do sobne temperature in mešali preko noči. Zmes smo ekstrahirali trikrat s 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata, 2M klorovodikovo kislino in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Organsko fazo smo sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili belo peno. S prečiščenjem s pomočjo flash kromatografije na silikagelu ob uporabi 2 % metanola/diklorometana za eluiranje smo dobili 2.26 g N2-[2(R)-[benziloksikarbamoilmetil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetilvalinamida v obliki bele pene; nmr (CDCI3): 9.3 (s,IH); 7.35 (s,5H); 6.78 (d,lH,J=8); 6.28 (br.s,lH); 4.86 (s,2H); 4.24 (d,lH,J=8); 3.0-2.8 (m,IH), 2.76 (d,3H,J=5); 2.42-2.14 (m,2H); 1.56-1.42 (m,2H); 1.27-1.15 (m,IH); 0.99 (s,9H); 0.88 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J=6); MS: 406 (M+H)+.

Primer 2

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 300 mg N^-[2(R ali S)-[l(S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida, izomer 1, dobili 230 mg N^-[2(R ali S)-[l-(S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-valinamida, izomer 1, v obliki bele trdne snovi in iz 300 mg N^-[2(R ali S)-[l(S)-(benziloksikarbamoil)etil)-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida, izomer 2, smo dobili 215 mg N^-[2(R ali S)-[l-(S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-N^,3dimetil-L-valinamida, izomer 2, v obliki bele trdne snovi.

Podatki o nuklearni magnetni rezonanci in masnem spektru teh izomerov so naslednji:

Izomer 1:

Nmr (CD3OD): 4.1 (s,lH); 2.75-2.64 (m,4H); 2.36-2.27 (m,IH); 1.65-1.42 (m,2H); 1.321.12 (m,4H); 1.02 (s,9H); 0.95 (d,3H,J=5); 0.9 (d,3H,J=5); MS: 330 (M+H)+.

Izomer 2:

Nmr (CD3OD): 4.27 (s,IH); 2.72-2.62 (m,4H); 2.32-2.2 (m,IH); 1.58-1.45 (m,IH); 1.431.28 (m,IH); 1.13-1.05 (m,4H); 1.02 (s,9H); 0.89 (d,3H,J=5); 0.83 (d,3H,J=5); MS: 330 (M=H)+

Izhodne materiale smo pripravili na naslednji način:

i) 18.78 g Anhidrida trifluorometansulfonske kisline smo po kapljicah dodajali ob mešanju raztopini benzil (S)-laktata in 3.51 g piridina v 190 ml diklorometana pri 0 °C. Zmes smo še 2.5 ure mešali pri 0 °C, nato izprali z vodo in nasičeno raztopino natrijevega klorida, osušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata in koncentrirali do 100 ml. To raztopino smo po kapljicah dodajali v raztopino, ki smo jo mešali in je vsebovala 9.6 g di-terc.-butil malonata in 1.33 g 80 % natrijevega hidrida v 110 ml dimetilformamida pri 0 °C. Zmes smo mešali 72 ur pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v etil acetatu. Raztopino smo izprali s 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata, vodo in nasičeno raztopino natrijevega klorida, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili do olja. S prečiščenjem s pomočjo flash kromatografije na silikagelu ob uporabi 5 % etil acetata/n-heksana za eluiranje smo dobili 9.75 g l-benzil-3-terc.-butoksikarbonil-4-terc.butil-2(S)-metilsukcinata v obliki rumenega olja, nmr (CDCI3): 7.38-7.34 (m,5H); 5.15 (dd,2H,J=20,15); 3.55 (d,lH,J = 15); 3.17-3.07 (m,IH); 1.45 (s,9H); 1.43 (s,9H); 1.23 (d,3H,J=7); MS: 379 (M + H) ⁺ .

ii) 1.16 g 80 % Natrijevega hidrida smo ob mešanju dodali raztopini 9.72 g l-benzil-3terc.-butoksikarbonil-4-terc.-butil-2(S)-metilsukcinata v 75 ml dimetilformamida. Po končanem burnem penjenju smo dodali 7.09 g izobutil jodida in raztopino 5 ur mešali pri 80 °C. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v etil acetatu. Zmes smo izprali s 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata, vodo in nasičeno raztopino natrijevega klorida, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili do olja. S prečiščevanjem s pomočjo flash kromatografije na silikagelu smo dobili 4.9 g l-benzil-4terc.-butil-3-terc.-butoksikarbonil-3-izobutil-2(S)-metilsukcinata v obliki olja; nmr (CDCI3): 7.38-7.30 (m,5H); 5.14 (dd,2H,J=20,12); 3.16 (q,lH,J=7); 1.92-1.7 (m,3H); 1.45 (s, 18H); 1.34 (d,3H,J=7); 0.9 (d,3H,J=6); 0.86 (d,3H,J=6); MS: 435 (M+H)+.

iii) 6.67 g l-Benzil-4-terc.-butil-3-terc.-butoksikarbonil-3-izobutil-2(S)-metilsukcinata smo mešali s 40 ml trifluorocetno kislino 2 uri, zmes smo nato uparili in ostanek raztopili v toluenu in segrevali pod refluksom 3 ure. Topilo smo odstranili z uparjenjem, pri čemer smo dobili 4.2 g l-benzil-3(RS)-izobutil-2(S)-metilsukcinata v obliki rumenega olja; Rf 0.83.

iv) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru li)-ii), smo iz 5.3 g l-benzil-3(RS)izobutil-2(S)-metilsukcinata dobili 2.4 g N²-[2(RS)-[l-(S)-(benziloksi-karbamoil)etil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida kot zmes diastereoizomerov.

Izomere smo ločili s preparativnim HPLC na Dynamax 60A koloni z uporabo 10 % izopropanola v n-heksanu kot mobilni fazi in s pretokom 15ml/min. Dobili smo 908 mg izomera 1 (retencijski čas 14 minut) in 300 mg izomera 2 (retencijski čas 17 minut).

Podatki o nuklearni magnetni resonanci in masnem spektru teh izomerov so naslednji:

Izomer 1:

Nmr (CDC1₃): 9.63 (br.s,IH) 7.43-7.30 (m,5H); 6.45-6.30 (m,2H); 4.35(br.s.,2H), 4.12 (d,lH,J=8); 2.66 (d,3H,J=5); 2.58-2.48 (m,IH); 2.43-2.30 (m,IH); 1.65-1.48 (m,2H);

1.3-1.2 (m,IH); 1.16 (d,3H,J=7); 1.02 (s,9H); 0.96-0.88 (m,6H); MS: 420 (M+H) + .

Izomer 2:

Nmr (CDCI3): 9.43 (s,IH); 7.43-7,32 (m,5H); 6.85 (d,lH,J=9); 6.5 (br.q,lH,J=4); 4.93 (s,2H); 4.3 (d,lH,J=9); 2.74 (d,3H,J=4); 2.72-2.63 (m,IH); 2.43-2.33 (m,IH); 1.571.32 (m,2H); 1.18-1.05 (m,4H); 1.01 (s,9H); 0.85 (d,3H,J=7); 0.8(d,3H,J = 7);

MS: 420 (M+H)+.

Primer 3

Zmes 132 mg N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)-[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N¹,3-dimetil-Lvalinamida in 2 ml trifluorocetne kisline v 2 ml suhega diklorometana smo mešali pri sobni temperaturi čez noč. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek uparili dvakrat iz 1:1 zmesi metanola in diklorometana in nato dvakrat iz diklorometana. Preostalo trdno snov smo triturirali v suhem dietiletru in sušili v vakuumu, pri čemer smo dobili 90 mg N²-[2(R ali S)-[[[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metil-valeril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki rumene trdne snovi; nmr (dgDMSO): 8.68 (d,lH,J=8); 8.52 (d,lH,J=8); 8.49 (s,IH); 7.92-7.83 (m,2H); 7.63 (d,lH,J=10); 4.42 (d,2H,J=8); 4.15 (d,lH,J=10); 3.95-3.05 (br); 2.95-2.8 (m,IH); 2.55 (d,3H,J=4); 2.12-1.98 (m,IH); 1.861.73 (m,IH); 1.55-1.32 (m,3H); 0.96-0.75 (m,15H); MS: 624, 626.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) 1.37 g 2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)-(ftalimidometil)fosfinil]metil]-4-metil-valerianske kisline v 20 ml diklorometana smo ohladili na 0 °C in nato zaporedoma dodali 0.29 ml piridina in 1.52 g di(l-benzotriazolil)-karbonata. Zmes smo mešali 1 uro pri 0 °C in nato dodali 0.52 g (S)-terc.-butilglicin N-metilamida. Zmes smo pustili segreti do sobne temperature in mešali preko noči. Raztopino smo razredčili z diklorometanom, izprali trikrat s 5% raztopino natrijevega hidrogen karbonata, enkrat z 2M klorvodikovo kislino in enkrat z nasičeno raztopino natrijevega klorida in nato osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 3% metanola/diklorometana za eluiranje, pri čemer smo dobili 952 mg N²-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)ftalimidometil)(fosfinil)]metil]4-metilvaleril]-Nl,3-dirnetil-L-valinamida v obliki bele pene;

nmr (CDCI3): 7.94-7.72 (m,4H); 6.85-6.55 (m,IH); 6.18-6.0 (m,IH); 4.3-4.05 (m,5H);

2.94-2.76 (m,4H); 2.36-2.13 (m,IH); 2.05-1.85 (m,2H); 1.7-1.58 (m,IH), 1.56-1.46 (m,IH); 1.45-1.26 (m,3H); 1.06-0.85 (m,15H); MS: 508 (M+H) ⁺ .

ii) Raztopino 820 mg N²-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)-(ftalimidometil)(fosfinil)]metil]-4metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida in 0.23 ml hidrazin hidrata v 10 ml etanola smo mešali preko noči pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek uparili trikrat iz toluena. Ostanek smo raztopili v zmesi, ki je bila sestavljena iz 10 ml diklorometana in 0.4 ml ledocetne kisline, in dobljeno raztopino mešali 2 uri pri sobni temperaturi. Zmes smo uparili in ostanek razdelili med dietileter in 5 % raztopino citronske kisline. Vodno fazo smo izprali z dietiletrom, nevtralizirali s koncentrirano raztopino amoniaka in vodno fazo dvakrat ekstrahirali z diklorometanom. Organske ekstrakte smo sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, uparili in ponovno raztopili v 10 ml diklorometana. Dodali smo zaporedoma 0.13 ml N-etil-morfolina in 300 mg anhidrida 4-benziloksi-l,8-naftojske kisline in zmes mešali pri sobni temperaturi 2 dni. Raztopino smo izprali z 2M klorovodikovo kislino, 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata in nasičeno raztopino natrijevega klorida in nato sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 3 % metanola/diklorometana za eluiranje, pri čemer smo dobili 433 mg N²-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)-[(6-benziloksi2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il-metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki rumene trdne snovi; nmr (CDCI3): 8.68-8.58 (m,3H); 7.76-7.7 (m,IH); 7.56-7.4 (m,4H); 7.16 (d,d,lH,J=8.4); 7.08 (d,0.6H,J=10); 6.9 (d,0.4H,J=10); 6.23-5.96 (m,IH); 5.4 (s,2H); 4.78-4.7 (m,IH); 4.56-4.48 (m,IH); 4.344.15 (m,3H); 3.08-2.85 (m,IH); 2.8 (d,lH,J=5); 2.72 (d,2H,J=5); 2.45-2.28 (m,IH); 2.21.95 (m,IH); 1.8-1.66 (m,2H); 1.63-1.4 (m,2H); 1.34 (q,2H,J=6); 1.0 (s,6H); 0.95 (s,3H); 0.92-0.85 (m,6H); MS: 664 (M+H)+.

iii) Raztopino 400 mg N²-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)-[6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v 40 ml etanola smo hidrogenirali v prisotnosti 100 mg 10 % paladija na oglju kot katalizatorju. Katalizator smo odstranili s filtriranjem, filtrat ponovno uparili in ostanek dvakrat uparili iz toluena, da smo dobili 334 mg N²-[2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-ilmetil]fosfinil]metil]-4-metil-aleril]-Nl,3-dimetiI-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (CDCI3): 11.1 (brs.lH); 8.38-8.32 (m,IH); 7.83-7.72 (m,2H); 7.23-6.95 (m,3H); 6.64-6.56 (m,IH); 6.06-5.9 (m,IH); 4.88-4.73 (m,IH); 4.45-4.26 (m,2H); 4.25-4.13 (m,2H); 3.05-2.9 (m,IH); 2.8-2.75 (m,3H); 2.72-2.52 (m,IH,); 2.4-2.08 (m,IH); 1.8-1.4 (m,6H); 1.02-0.88 (m,15H); MS: 574 (M+H)+.

iv) Raztopino iz 300 mg N²-[2(R ali S)[[(RS)-(etoksi)[(2.3-dihidro-6-hidroksi-1.3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl-,3-dimetil-Lvalinamida v 10 ml suhega diklorometana smo ohladili do 0 °C in dodali raztopino 83 mg broma v 2 ml diklorometana. Po 10 minutah smo raztopino dvakrat izprali s 5 % raztopino natrijevega tiosulfata, osušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata in uparili ter dobili 350 mg N²-[2(R ali S)[[(RS)-(etoksi)[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksil,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N^-,3-dimetilL-valinamida v obliki rumene trdne snovi; nmr (CDCI3): 10.5-10.2 (br s.lH); 8.5-8.42 (m,IH); 8.3 (d, 1H,J=9); 7.53-7.46 (m,IH); 6.95 (d,0.6H,J=8); 6.68 (d,0.4H,J=8); 6.025.85 (m,IH); 4.92-4.77 (m,IH); 4.46-4.22 (m,4H); 3.08-2.95 (m,IH); 2.83 (d,3H,J=5);

2.7-2.51 (m,IH,); 2.43-2.12 (m,IH); 1.84-1.45 (m,8H,(6H+H₂0)); 1.06-0.92 (m,15H); MS: 651,653.

Primer 4

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 3, smo iz 600 mg N²[2(R ali S)[[(RS)-(etoksi)[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2il)-metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl-,3-dimetil-L-valinamida, pripravljenega kot smo opisali v Primeru 3iii), dobili 411 mg N²-[2(R ali S)[[[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N^-,3dimetil-L-valinamida v obliki rumene pene; nmr (d^DMSO): 11.98 (brs,lH); 8.56 (d,lH,J=8); 8.52 (d,lH,J=8); 8.4 (d,lH,J=8); 7.9 (q,lH,J=5); 7.8 (t,lH,J=6); 7.63 (d,lH,J=10); 7.18 (d,lH,J=8); 4.44 (d,2H,J=9); 4.15 (d,lH,J=10); 4.10-3.10 (brs);

2.95-2.82 (m,IH); 2.56 (d,3H,J=5); 2.12-2.0 (m,IH); 1.85-1.72 (m,IH); 1.55-1.32 (m,3H); 0.86-0.78 (m,15H); MS: 546 (M+H)+

Primer 5

Raztopino 550 mg Nl-(N-benziloksikarbonil-4-aminobutil)-N²-[2(R ali S)[[(RS)29 (etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-l)metil]fosfiniljmetil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valinamida v 2 ml 4M bromovodikove kisline v ocetni kislini smo mešali 1 uro pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in preostalo olje uparili iz toluena. Nato smo dodali metanol in kasneje dietil eter, nastalo usedlino smo odfiltrirali, izprali z dietiletrom in sušili v vakuumu, da smo dobili 462 mg Nl-(4-aminobutil-N2-[2(R ali S)-[[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valinamid hidrobromida v obliki svetlo oranžno obarvane trdne snovi; nmr (d^DMSO): 8.53 (t,4H,J=7); 8.04 (t,lH,J=5); 7.94 (t,2H,J=7); 7.72 (brs,2H); 7.65 (d,lH,J=9); 5.26 (brs); 4.48 (d,2H,J=9); 4.15 (d,lH,J=9); 3.15-2.72 (m,5H); 2.16-2.0 (m,IH); 1.9-1.75 (m,IH); 1.58-1.35 (m,7H); 0.92-0.78 (m,15H); MS: 586 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Raztopino 5g N-(terc.-butoksikarbonil)-terc.-butil glicina in 1.75 ml piridina v 100 ml suhega diklorometana smo ohladili do 0 °C in ob mešanju dodali 9.14 g di-(l-benzotriazolil)karbonata. Po 1 uri smo dodali raztopino 5.42 g N^-benziloksikarbonil-1,4diaminobutana in dodali 1.75 ml piridina v 10 ml diklorometana in zmes mešali preko noči pri sobni temperaturi. Zmes smo dvakrat izprali s 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata, enkrat z 2M klorovodikovo kislino in enkrat z vodo in nato osušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata. Topilo smo odstranili z uparjenjem, pri čemer smo dobili 8.4 g N¹-(4-(benziloksikarbonilamino)butil)-N2-(terc.-butoksikarbonil)-3-metil-valinamida v obliki bele pene; nmr (CDCI3): 7.35 (s,5H); 6.38 (br.s,lH); 5.4-5.08 (m,4H); 3.97-3.83 (m,IH); 3.30-3.1 (m,4H); 1.5 (br.s,4H); 1.42 (s,9H); 0.96 (s,9H); MS:436 (M+H)+.

ii) Raztopino 1.6 g N¹-(4-benziIoksikarbonilamino)-butil-N^-(terc.-butoksikarbonil)-3metilvalinamida v 50 ml 4M klorovodikove kisline/etil acetata smo mešali pri sobni temperaturi 2 uri. Topilo smo odstranili z uparjenjem, da smo dobili 1.42 g bele pene, ki je nato reagirala z 1.58 g 2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)](2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvalerianske kisline na analogen način, kot smo opisali v Primeru 3i), pri čemer smo dobili 1.54 g Nl-(N-benziloksikarbonil-4aminobutil-N^-[2(R ali S)[[(RS)-(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol2-il)metil]fosfinil]metil]-4[metilvaleril]-3-metil-L-valinamida v obliki bele pene;

nmr (CDCI3): 8.64 (d,2H,J=6); 8.27-8.22 (m,2H); 7.82-7.74 (m,2H); 7.38-7.27 (m,5H);

6.77 (d,0.33H,J=9); 6.84 (d,0.66H,J=9); 6.25 (br.s,0.33H); 6.07 (br.s,0.66H); 5.13-4.95 (m,3H); 4.78-4.67 (m,IH); 4.55-4.43 (m,IH); 4.3-4.06 (m,3H); 3.29-3.07 (m,4H); 3.0530

2.8 (m,IH); 2.43-2.26 (m,IH); 2.17-1.94 (m,IH); 1.78-1.62 (m,3H); 1.6-1.25 (m,8H); 1.00.83 (m,15H); MS: 749 (M+H)+

Primer 6

Raztopino 300 mg NL(4-nitrogvanidinobutil)-N²-[2(RaliS)-[[(RS)-(etoksi)[2,3-dihidrol,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-Lvalin-amida v 20 ml 80 % ocetne kisline smo hidrogenirali v prisotnosti 30 mg 10 % paladija na oglju kot katalizatorja. Katalizator smo odstranili s filtriranjem, filtrat uparili do suhega in ostanek raztopili v 5 ml diklorometana in 5 ml trifluorocetne kisline in raztopino preko noči mešali pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek uparili dvakrat z 2 ml metanola in 2ml diklorometana in 2 krat z 2 ml diklorometana. Preostalo trdno snov smo triturirali z dietiletrom, filtrirali in osušili v vakuumu, pri čemer smo dobili 180 mg trifluoracetata Nl-(4-gvanidinobutil)-N²-[2(R ali S)-[[[2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4metilvaleril]-3-metil-L-valinamida; nmr (dgDMSO): 8.53 (t,4H,J=8) 8.03 (t,lH,J=7);

7.92 (t,2H,J=8); 7.75 (br.s,IH); 7.1 (br.s, 3H); 4.42 (d,2H,J = 10); 4.07 (d,lH,J=7); 3.142.72 (m,5H); 2.12-1.98 (m,IH); 1.85-1.72 (m,IH); 1.6-1.25 (m,8H); 0.95-0.7 (m,15H); MS: 629 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Raztopino 1 g NL(N-benziloksikarbonil-4-aminobutil)metil valinamida v 10 ml etanola smo hidrogenirali 1 uro v prisotnosti 100 mg 5 % paladija na oglju kot katalizatorju. Katalizator smo odstranili s filtriranjem in filtratu dodali 342 mg 3,5dimetil-N-nitro-lH-pirazol-l-karboksimidamida in zmes segrevali pod refluksom 12 ur. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v diklorometanu. Raztopino smo izprali z 2M klorovodikovo kislino in 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata, osušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata in uparili, da smo dobili belo peno. Prečistili smo jo s pomočjo flash kromatografije na silikagelu ob uporabi 5 % metanola/diklorometana za eluiranje, da smo dobili 538 mg N²-(terc.-butoksikarbonil)Nl-[4-(nitrogvanidino)butil]-3-metilvalinamida v obliki bele pene; nmr (CDCI3): 8.55 (br.s,IH); 7.68 (br.s,2H); 6.66 (br.s,IH); 5.26 (br.s,IH); 3.95 (br.s,IH), 3.55-3.2 (m,4H); 1.66-1.54 (m,4H); 1.43 (s,9H); 1.0 (s,9H); MS: 389 (M+H)+.

ii) 500 mg N²-(terc.-butoksikarbonil)-NL[4-(_nitrogvanidino)butil]-3-metilvalinamida smo obdelali s 554 mg 2 (R ali S) -[[(RS)-(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e)izokinolil-2-il)metil]fosfinil]metil-4-metilvalerianske kisline na analogen način, kot smo opisali v Primeru 3i), da smo dobili 322 mg Nl-(4-nitrogvanidinobutil)-N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valinamida v obliki bele pene; nmr (CDCI3): 8.62 (d,2H,J=7); 8.32-8.25 (m,2H); 7.83-7.75 (m,2H); 7.55 (br,lH); 7.15-6.88 (m,2H); 4.844.72 (m,IH); 4.52-4.4 (m,IH); 4.3-4.15 (m,3H); 3.48 (q,2H,J=7); 3.3-2.8 (m,3H); 2.52.22 (m,2H); 1.6-1.18 (m,14H); 1.02-0.8 (m,15H); MS: 702 (M+H)+.

Primer 7

Raztopino 500 mg [N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[5-terc.-butoksikarbonilamino-l-(RS)(2,3-dihidro-lH-benz-[d,e]izokinolin-2-il)pentil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl-,3dimetil-L-valinamida v 1 ml ledocetne kisline in 4 ml 45 % bromovodika v ledocetni kislini smo mešali 4 ure pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek uparili dvakrat iz toluena, da smo dobili bledorumen prah kot zmes diastereoizomerov. Diastereoizomere smo odločili s preparativno reverzno-fazno HPLC na Sphensorb S5 koloni z uporabo 50% metanola/0.05M amonijevega formiata pri pretoku 8 ml/min kot mobilne faze in dobili:

i) 78 mg [N2-[2(R ali S)-[[[5-amino-l(R ali S)-(2,3-dihidro-lH-benz-[d,e]izokinolin-2il)pentil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvalerilj-N^-,3-dimetil-L-valinamida, izomer 1; retencijski čas 22 min; nmr (CD3OD): 8.56 (d,lH,J=6); 8.50 (d,lH,J=6); 8.32 (t,2H,J=7); 7.81 (t,lH,J=7); 7.73 (t,lH,J=7); 5.36-5.25 (m,IH); 4.16 (s,IH); 3.02-2.82 (m,3H); 2.7 (s,3H); 2.48-2.33 (m,IH); 2.2-1.98 (m,3H); 1.78-1.64 (m,3H); 1.60-1.35 (m,4H); 0.97 (s,9H); 0.9 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J=6) MS: 601 (M+H)+;

in ii) 70 mg N^-[2(R ali S)-[[[5-amino-l(R ali S)-(2,3-dihidro-lH-benz[d,e]izokinolin-2il)penti 1](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N 1,3-dimetil-L-valinamida, izomer 2: retencijski čas = 34 minut; nmr (CD3OD): 8.58 (d,2H,J=7); 8.36-8.29 (m,2H); 7.857.75 (m,2H); 5.4-5.26 (m,IH); 4.18 (s,IH); 2.96-2.84 (m,3H); 2.68 (s,3H); 2.47-2.32 (m,2H); 2.19-2.04 (m,IH); 1.92-1.65 (m,4H); 1.63-1.37 (m,4H); 1.01 (s,9H); 0.87 (t,6H,J=6); MS: 601(M+H) + .

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Raztopino 11.7 g benzil 2(R ali S)-[(etoksifosfinil)-metil]-4-metilvalerata in 13.0 g 5ftalimido-pentan-l-ala v 100 ml toluena smo obdelali s 4.7 ml 1,1,3,3-tetrametilgvanidina in zmes mešali pri sobni temperaturi 12 ur. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata/n-heksana (2:1) za eluiranje, da smo dobili 8.8 g bele pene. To peno smo raztopili v 150 ml etanola, dodali 2.36 ml hidrazinhidrata in zmes mešali preko noči pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v diklorometanu. Dodali smo 5 ml ledocetne kisline in zmes mešali pri sobni temperaturi 1 uro. Zmes smo nato filtrirali, uparili do suhega in ostanek razdelili med dietileter in 2M klorovodikovo kislino. Vodno fazo smo naalkalili s koncentrirano raztopino amoniaka in ekstrahirali trikrat z diklorometanom. Združene ekstrakte smo sušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata, uparili in ponovno raztopili v 100 ml dioksana in 100 ml vode. Nato smo dodali 2.49 g natrijevega hidrogen karbonata in nato 3.87 g diterc.-butil dikarbonata in zmes mešali preko noči pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek razdelili med vodo in etil acetat. Organsko fazo smo izprali s 5 % raztopino citronske kisline, sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom, uparili in ponovno raztopili v 100 ml suhega diklorometana. Raztopino smo ohladili do 0 °C in obdelali z 10.93 ml piridina in nato po kapljicah z 1.58 ml metansulfonilklorida. Dobljeno zmes smo mešali pri 0 °C 2 uri in nato pri sobni temperaturi preko noči. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata/n-heksana (3:1) za eluiranje, da smo dobili 5.5 g benzil(2-(R ali S))-[[(RS)-(etoksi)[l(RS)-metansulfoniloksi-5-(terc.-butilkarbonilamino)pentil]fosfinil]metil]-4-metilvalerata v obliki bele pene.

Zgornji benzil ester smo raztopili v 100 ml dimetilformamida in raztopini dodali 1.21 g natrijevega azida. Zmes smo segrevali na 70 °C 48 ur, topilo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v 50 ml diklorometana. Organski sloj smo izprali s 50 ml raztopine natrijevega hidrogen karbonata in s 50 ml nasičene raztopine natrijevega klorida, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili olje rumene barve. S prečiščenjem s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata/n-heksana (3:1) za eluiranje smo dobili 3.65 g benzil 2-(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[l-(RS)-azido-5(terc.-butoksikarbonilaminopentil]fosfinil]metil]-4-metilvalerata v obliki bele pene; nmr (CDC1₃): 7.37 (s,5H); 5.2-5.1 (m,2H); 4.56 (brs.lH); 4.17-4.03 (m,2.5H); 3.43-3.33 (m,0.5H); 3.25-3.05 (m,2H); 3.02-2.87 (m,IH); 2.39-2.15 (m,IH); 1.98-1.75 (m,2H); 1.71.23 (m,20H); 0.92 (d,3H,J=6); 0.87 (d,3H,J=6); MS: 539 (M+H)+.

ii) 2.04 ml 1,3-propanditiola smo po kapljicah in ob mešanju dodali raztopini 3.65 g benzil 2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[-l-(RS)-azido-5-terc.-butoksikarbonilaminopentiljfosflnil]-metil]-4-metilvaIerata in 2.83 ml trietilamina v 80 ml metanola. Zmes smo mešali preko noči pri sobni temperaturi, topilo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 4 % metanola/diklorometana za eluiranje, pri čemer smo dobili 3.25 g benzil 2 (R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[-l-(RS)33 amino-5-terc.-butoksikarbonilaminopentil]fosfinil]metil]-4-metilvalerata v obliki bele pene; nmr (CDCI3): 7.36 (s,5H); 5.2-5.08 (m,2H), 4.6 (brs,lH), 4.2-3.98 (m,2H), 3.173.08 (m,2H); 3.0-2.76 (m,2H); 2.4-2.13 (m,IH), 2.0-1.25 (m,25H); 0.98-0.86 (m,6H);

MS: 513 (M+H)+.

iii) Raztopino 3.25 g benzil 2-(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[l-(RS)-amino-5-terc.-butoksikarbonilaminopentil]fosfinil]metil]-4-metilvalerata in 1.52 g anhidrida 1,8-naftalen anhidrida v 50 ml dimetilformamida smo obdelali z 0.96 ml 1,1,3,3-tetrametilgvanidina. Zmes smo segrevali 48 ur pri 50 °C, topilo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v diklorometanu. Raztopino smo izprali z 2M klorovodikovo kislino, 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata in nasičeno raztopino natrijevega klorida, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili gumi podobno rumeno snov. S prečiščenjem s pomočjo flash kromatografije na silikagelu ob uporabi 2 % metanola/diklorometana za eluiranje smo dobili 1.78 g benzil 2-(R ali S)-[[(etoksi)-5terc.-butoksikarbonilamino-l-(RS)-(2,3-dihidro-lH-benz[d,e]-izokinolin-2-il)pentiljfosfinil]metil]-4-metilvalerata v obliki rumene pene.

Predhodni benzil ester smo raztopili v 20 ml izopropanola in raztopino hidrogenirali v prisotnosti 300 mg 10 % paladija na oglju. Katalizator smo odstranili s filtriranjem in filtrat uparili ter ostanek raztopili v suhem diklorometanu in ohladili na 0 °C. Raztopino smo obdelali z 0.2 ml piridina in nato z 1.09 g di-(l-benzotriazolil)karbonata. Zmes smo mešali 1 uro pri 0 °C nato pa dodali 0.4 g Nl,3-dimetil-Lvalinamida v 1 ml diklorometana. Zmes smo mešali pri 0 °C 2 uri in nato pri sobni temperaturi preko noči. Zmes smo razredčili z diklorometanom, izprali trikrat s 5 % raztopino natrijevega hidrogen karbonata, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili rumeno peno.

S prečiščenjem s pomočjo flash kromatografije na silikagelu ob uporabi 3 % metanola/diklorometana za eluiranje smo dobili 1.12 g [N²-[2(R ali S)-(etoksi)[5-terc.butoksikarbonilamino-l-(RS)-(2,3-dihidro-lH-benz[d,e]izokinolin-2-il)pentil]fosfiniljrnetil]-4-rnetilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bledorumene pene; nmr (CDCI3): 8.66-8.46 (m,2H); 8.3-8.22 (m,2H); 7.83-7.72 (m,2H), 7.12-6.73 (m,IH), 6.286.17 (m,IH), 5.68-5.4 (m,IH); 4.6-4.48 (m,IH); 4.3-4.06 (m,3H), 3.1-2.96 (m,2H); 2.932.73 (m,4H); 2.6-2.04 (m,3H); 1.78-1.3 (m,18H); 1.28-0.82 (m,15H); MS: 729 (M+H)+

Primer 8

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 3, smo iz 120 mg N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[l-(RS)-(2,3-dihidro-lH-benz[d,e]izokinolin-2-il)-2-hidroksietil]-fosfinil]metil]-4-metiIvaleriI]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 105 mg N^-[2(R ali S)-[[[l(RS)-(2,3-dihidro-lH-benz-[d,e]izokinolin-2-il)-2-hidroksietil]-(hidroksi)-fosfiniljmetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida kot zmes 2:1 diastereoizomerov v obliki bele pene; nmr (CD3OD): 8.78-8.66 (m,2H); 8.43-8.35 (m,2H); 7.90-7.8 (m,2H),

5.93-5.8 (m,0.5H), 5.72-5.6 (m,0.5H); 5.15-5.06 (m,IH); 4.32-4.13 (m,2H); 3.13-2.9 (m,IH); 2.72 (s,3H); 2.64-1.95 (m,3H); 1.72-1.37 (m,3H); 1.05-0.84 (s,15H); MS: 558 (M-H)'.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 7(i-iii), smo iz l-(difenil-terc.butilsililoksi)etan-l-ala dobili N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)]l(RS)-(2,3-dihidro-lHbenz[d,e]izokinolin-2-iI)-2-hidroksietil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele pene; nmr (CDCI3): 8.66-8.58 (m,2H); 8.3-8.23 (m,2H); 7.837.75 (m,2H), 6.99-6.8 (m,IH), 6.11-5.9 (m,IH); 5.8-5.57 (m,IH); 4.58-4.35 (m,IH); 4.324.05 (m,4H); 3.52 (brs,0.5H); 3.16 (br.s,0.5H); 2.96-2.72 (m,4H); 2.7-2.3 (m,2H); 2.251.92 (m,IH); 1.55-1.23 (m,5H); 1.05-0.82 (m,15H); MS: 588 (M+H) + .

Primer 9

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 7, smo iz 250 mg N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[3-terc.-butoksikarbonilamino-l-(RS)-(2,3-dihidro-l,3-dioksolH-benz-[d,e]izokinol-2-il)propil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 205 mg N^-[2(R ali S)-[[[3-amino-l-(RS)-(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz-[d,e]izokinol-2-il)propil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalin-amida v obliki zmesi 1:1 diastereoizomerov kot belo peno; nmr (CD3OD): 8.55 (t,2H,J=7); 8.34 (d,2H,J=7); 7.82-7.74 (m,2H), 5.42-5.26 (m,IH); 4.34 (d,lH,J=5);

3.02-2.85 (m,3H); 2.63-2.44 (m,5H); 2.42-2.14 (m,2H); 2.01-1.98 (m,IH); 1.65-1.3 (m,3H); 0.95-0.76 (m,15H); MS: 573 (M+H)+

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 7 (i-iii), smo iz 3-(terc.butoksikarbonilamino)-propan-l-ala dobili N^’[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[3-terc.butoksikarbonilamino-l-(RS)-(2,3)-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)propil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamid kot 1:1 zmes diastereo35 izomerov kot belo peno; nmr (CDCI3): 8.63-8.56 (m,2H); 8.3-8.22 (m,2H); 7.85-7.74 (m,2H); 7.07 (d,0.5H,J=9); 6.92 (d,0.5H,J=9); 6.71 (br. q,0.5H,J=4); 6.17 (br.

q,0.5H,J=4), 5.57-5.4 (m,IH); 5.2 (br. t,lH,J=5); 4.3-4.07 (m,3H); 3.49 (br. s,IH);

3.02-2.46 (m,5H); 2.4-2.22 (m,IH); 2.18-2.06 (m,IH); 1.89-1.56 (m,4H); 1.46-1.32 (m,12H); 1.06-0.86 (m,15H); MS: 701 (M+H)+.

Primer 10

Zmes 0.276 g [2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-il)-)metil]-(hidroksi)fosfilnil]metil]-4-metilvalerianske kisline in 0.144 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida v 25 ml toluena smo segrevali 7 ur pod refluksom (temperatura kopeli 140° C) v atmosferi dušika. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v 15 ml diklorometana, ki je vseboval 0.3 g trifluorocetne kisline in ponovno uparili. Po dveh nadaljnjih uparjenjih iz 10 ml etanola smo ostanek raztopili v 4 ml etanola in produkt oborili s postopnim dodajanjem 10 ml vode. Tako smo dobili 0.26 g N²-[2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-l,3diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfilnil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne zmesi; MS: 679 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Zmes 19.8 g kristalne hipofosforaste kisline in 36 g trimetil ortoformiata smo mešali pri sobni temperaturi 1.5 ur v atmosferi dušika. Raztopini smo dodali 27.6 g dietil acetamidometilenmalonata in mešanico ohladili na 0 °C. Nato smo dodali raztopino

11.5 g 1,1,3,3-tetrametil-gvanidina v 20 ml diklorometana s tem, da smo vzdrževali temperaturo med 0 in 10 °C. Ko smo končali z dodajanjem, smo zmes mešali pri sobni temperaturi 3 ure, nato smo razredčili z diklorometanom in izlili k zmesi 250 ml 2M klorovodikove kisline in ledu. Organsko fazo smo odločili in vodno fazo ekstrahirali trikrat z diklorometanom. Organske raztopine smo združili in uparili, da smo dobili 40 g bledo-rumenega olja, ki smo ga raztopili v zmesi 70 ml diklorometana in 60 ml trifluorocetne kisline. Raztopino smo pustili stati pri sobni temperaturi 24 ur in nato uparili. Ostanku smo dodali toluen in dobljeno raztopino uparili. Ostanek smo raztopili v etru in pustili 24 ur kristalizirati. Trdno snov smo filtrirali in osušili v vakuumu, pri čemer smo dobili 29.34 g dietil 2-[(acetamido)(hidroksifosfinil)metil]malonata v obliki bele trdne snovi, s tal. 113-114° C.

ii) 12.0 g Dietil 2-[(acetamido) (hidroksifosfinil)metiljmalonata smo raztopili v 100 ml suhega dimetil sulfoksida in raztopino ohladili do 10 °C ob mešanju in v atmosferi dušika. Dodali smo 3.2 g 60% natrijevega hidrida v mineralnem olju in zmes mešali pri sobni temperaturi 2 uri in nato dodali 8 g izobutil jodida. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi in v temi 20 ur ter nato dodali 20 ml ledocetne kisline. Hlapne snovi smo odstranili z uparjenjem v visokom vakuumu in dobljeni poltrdni ostanek raztopili v 100 ml vode, ki je vsebovala 15 ml 50 % hipofosforaste kisline. Raztopino smo ekstrahirali osemkrat z etil acetatom in združene ekstrakte sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo raztopili v diklorometanu in raztopino postopno izprali z vodo in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Raztopino v diklorometana smo osušili nad natrijevim sulfatom in uparili ter ostanek kristalizirali iz dietiletra/nheksana, da smo dobili 6.28 g dietil 2-[(acetamido) (hidroksifosfinil)metil]-2izobutilmalonata v obliki bele trdne snovi; MS: 352 (M+H) ⁺ .

Združene izpirke vode in natrijevega klorida, nastale pri prejšnjem odstavku, smo ekstrahirali z diklorometanom, da smo dobili po uparjenju topila in kristalizaciji ostanka iz dietiletra/n-heksana dodatnih 1.68 g produkta.

iii) 1.5 g S-(-)-a-metilbenzilamina in 0.2 g vode smo dodali ob mešanju suspenziji 3.51 g dietil 2-[(acetamido) (hidroksifosfinil)metil]-2-izobutilmalonata v 50 ml dietiletra. Zmes smo mešali in pustili stati 4 ure, da je kristalizirala. Belo trdno snov smo zbrali in prekristalizirali iz 50 ml etil acetata, ki je vseboval 0.2 g vode. Dobili smo 1.7 g 1(S)feniletilaminske soli dietil 2-[(R)-acetamido) (hidroksifosfinil)metil]-2-izobutilmalonata v obliki belih kristalov s tališčem 108-110° C; [a]²⁰5g9= -13,3° (c = 0.5 % v metanolu).

Suspenzijo, ki je vsebovala 15 g zgornje soli v 150 ml etil acetata, smo mešali z 200 ml 4% vodne raztopine natrijevega hidrogen karbonata, dokler se vsa trdna snov ni raztopila. Vodno fazo smo odločili, fazo z etil acetatom pa dvakrat ekstrahirali s 4% vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata. Združene vodne ekstrakte smo nakisali s koncentrirano klorovodikovo kislino do pH vrednosti pod 1 in ekstrahirali osemkrat z diklorometanom. Združene ekstrakte smo sušili nad brezvodnim natrijevim sulfatom in uparili, da smo dobili brezbarvno gumeno snov, ki je izkristalizirala iz dietiletra/n-heksana. Po 2 urah smo trdno snov zbrali in osušili, da smo dobili 10.1 g dietil 2-[(R)-(acetamido) (hidroksifosfinil)-metil]-2-izobutilmalonata v obliki belih kristalov s tališčem 105-106° C; [o]²⁰589⁼ '8,1° (c = 0.5 % v metanolu).

iv) Zmes 0.58 g N-bromometil-l,8-naftalimida in 0.7 g dietil 2-[(R)-(acetamido) (hidroksifosfinil)-metil]-2-izobutilmalonata v 20 ml suhega kloroforma smo obdelali z 10 ml 1,1,1,3,3,3-heksametildisilazina in 10 ml bis(trimetilsilil)acetamida. Zmes smo mešali 20 ur pri 50 °C pod atmosfero dušika, ohladili in izlili k zmesi 2M klorovodikove

3Ί kisline in ledu. Po mešanju smo izločili kloroformno fazo in vodno fazo ekstrahirali dvakrat s kloroformom. Ekstrakte smo združili, osušili nad magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili ostanek, ki smo ga očistili s pomočjo kromatografije na silikagelu ob uporabi diklorometana/metanola/ocetne kisline/vode (240:24:3:2) za eluiranje. Po kristalizaciji produkta iz etil acetata smo dobili 0.64 g dietil 2-[(R)-(acetamido)[[(2,3dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]metil]-2izobutilmalonata v obliki belega prahu s tališčem 202-203 °C.

v) 2.8 g dietil 2-[(R)-(acetamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]metil]-2-izobutilmalonata smo raztopili v 25 ml dimetil sulfoksida, ki je vseboval 0.09 g vode in 0.88 g litijevega klorida. Zmes smo segrevali 3.5 ur pri 180 °C ob mešanju in pod atmosfero dušika. Po ohlajenju smo zmes izlili v 150 ml 2M klorovodikove kisline in ekstrahirali štirikrat z diklorometanom. Združene ekstrakte smo dvakrat izprali z vodo, osušili nad magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili oranžno obarvano peno, ki smo jo kromatografirali na silikagelu ob uporabi diklorometana/metanola/ocetne kisline/vode (120:15:3:2) za eluiranje. Dobili smo 2.03 g etil 2(R ali S)-[(R)-(acetamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvalerata, ki smo ga raztopili v zmesi 27 ml ocetne kisline, 24.5 ml koncentrirane klorovodikove kisline in 16 ml vode. Raztopino smo segrevali 8 ur pod refluksom, ohladili in uparili. Ostanek smo nekajkrat uparili v prisotnosti 10 % metanola v toluenu in dobljeni ostanek triturirali z acetonitrilom. Dobili smo 1.6 g 2(R ali S)-[(R)-(amino)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol2-il)-metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metil valerianske kisline, ki smo jo suspendirali v zmesi 120 ml vode in 20 ml tetrahidrofurana. Dodali smo 3.4 g kalijevega karbonata in 2.34 ml benzil kloroformiata in zmes mešali 20 ur pri sobni temperaturi v atmosferi dušika. Dodali smo 100 ml 10 % metanola v diklorometanu in pH vrednost vodnega sloja naravnali na pod 1 z dodajanjem koncentrirane klorovodikove kisline. Organsko fazo smo odločili in vodno fazo ekstrahirali trikrat z diklorometanom. Združene organske raztopine smo izprali z vodo, osušili nad magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili rjav ostanek, ki smo ga kristalizirali iz etil acetata/dietiletra. Dobili smo 1.2 g 2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metil valerianske kisline v obliki bele trdne snovi; MS: 553 (M+H)+.

Primer 11

Suspenzijo 0.6 g N²-[2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-l,3-dioksolH-benz-[d,e]izokinol-2-il)-metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L38 valinamida in 0.2 g 10 % paladija na oglju v 150 ml metanola smo mešali 20 ur v atmosferi vodika. Katalizator smo odstranili s filtriranjem in filtrat uparili, da smo dobili belo peno, ki smo jo triturirali z dietiletrom, filtrirali in izprali z n-heksanom. Po sušenju v vakuumu smo dobili 0.47 g N²-[2(R ali S)-(R)-(amino)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz-[d,e]izokinol-2-il)-metilj(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril-N^,3-dimetil-Lvalinamida v obliki belega prahu; MS: 545 (M+H) ⁺ .

Primer 12 mg N²-[2(R ali S)-(R)-(amino)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril-Nl,3-dimetil-L-valinamida smo raztopili v 2 ml suhega piridina in dodali 100 mg anhidrida ocetne kisline. Raztopino smo mešali 3 ure pri sobni temperaturi pod atmosfero dušika in nato izlili v zmes 50 % klorovodikove kisline in dietiletra ob mešanju. Dobljeno oborino smo filtrirali in sušili v vakuumu, da smo dobili 95 mg N²-[2(R ali S)-(R)-(acetamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki belega prahu; MS: 587 (M+H)⁺.

Primer 13

Zmes 0.568 g [2(R ali S)-(R)-(benziloksiformamido)-[[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metilj-4-metilvalerianske kisline in 0.29 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida v 45 ml toluena in 10 ml 3-metil-3pentanola smo segrevali 21 ur pod refluksom (temperatura kopeli je bila 140 °C) v atmosferi dušika. Topila smo odstranili z uparjenjem, ostanek raztopili v metanolu in raztopino filtrirali. Filtrat smo koncentrirali do 5 ml in dodali po kapljicah in ob mešanju 10 ml 5M klorovodikove kisline. Po 30 minutah smo trdno usedlino zbrali s filtriranjem, izprali z vodo, dietiletrom in n-heksanom in sušili v vakuumu pri 60 °C. Dobili smo 0.506 g N²-[2(R ali S)-(R)-(benzilkarboniloksiamino)-[[(2,3-dihidro-6hidroksi-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki rumene trdne snovi; MS: 695 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 10 (iv), smo iz 1.76 g dietil 2-[(R)(acetamido)(hidroksifosfinil)-metil]-2-izobutilmalonata in 2.0 g 4-benziloksi-N-bromometil-l,8-naftalimida dobili 1.51 g 2-[(R)-(acetamido)[[(6-benziIoksi-2,3-dihidro-l,339 diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-2-izobutilmalonata v obliki rumene trdne snovi; MS: 667 (M+H)⁺.

ii) Zmes 5.29 g dietil 2[(R)-(acetamido)[[(6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-2-izobutilmalonata in 1.0 g 10 % paladija na oglju v 100 ml etanola smo mešali v atmosferi vodika, dokler ni prenehala absorpcija vodika. Katalizator smo odstranili s filtriranjem in filtrat uparili, da smo dobili 4.48 g dietil 2[(R)-(acetamido)[[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-2-izobutilmalonata v obliki rumene pene; MS: 577 (M+H) + .

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 10 (v), smo ob uporabi l-metil-2pirolidinona namesto dimetilsulfoksida kot topila v prvi stopnji dobili iz 7.89 g dietil 2[(R)-(acetamido)[[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-metilj(hidroksi)fosfinil]metil]-2-izobutilmalonata 2.8 g 2-[2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-metilj(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvalerianske kisline v obliki rumene trdne snovi;

MS: 569 (M+H)+.

Primer 14

Zmes 0.284 g N²-[2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)(hidroksifosfinil)metil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida in 0.48 g 4-benziloksi-N-bromometil-l,8-naftalimida v 16 ml suhega kloroforma smo segrevali pol ure pri 60 °C ob mešanju in pod atmosfero argona. Dodali smo 0.7 ml bis(trimetilsilil)acetamida in segrevanje nadaljevali še 4.9 ur. Raztopino smo ohladili in izlili v 50 ml razredčene klorovodikove kisline. Zmes smo ekstrahirali trikrat z diklorometanom in združene ekstrakte uparili, da smo dobili ostanek, ki smo ga prečistili s kromatografijo na silikagelu z diklorometanom/metanolom/ocetno kislino/vodo (240:24:3:2) za eluiranje. Dobili smo 0.4 g N²'[2(R ali S)-[[(6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]-(R)-(benziloksiformamido)-metil-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetilL-valinamida v obliki rumenega prahu; MS: 785 (M+H) ⁺ .

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) 7.02 g dietil 2[(R)-(acetamido)(hidroksifosfinil)-metil]-2-izobutilmalonata smo suspendirali v 20 ml vode in dodali 1.76 g litijevega hidroksida monohidrata. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi 3 dni in nato nakisali z dodajanjem 6 ml koncentrirane klorovodikove kisline. Raztopino smo nato nasitili z natrijevim kloridom in ekstrahirali desetkrat z diklorometanom. Združene ekstrakte smo osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 6.0 g etil hidrogen 2[(R)(acetamido)(hidroksifosfinil)-metil]-2(RS)-izobutilmalonata v obliki bele pene kot zmesi 3 : 1 diastereoizomerov; MS 324 (M+H)⁺.

ii) Zmes 13.47 g etil hidrogen 2[(R)-(acetamido)(hidroksifosfinil)-metil]-2(RS)izobutilmalonata in 8.42 g trietilamina v 420 ml suhega toluena smo segrevali pod refluksom 2 uri. Po ohlajenju smo topilo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v zmesi 96 ml vode in 144 ml koncentrirane klorovodikove kisline in raztopino 4 ure segrevali pod refluksom in v atmosferi dušika. Raztopino smo uparili do suhega in dobljeno 2-[(R)-(amino)(hidroksifosfinil)-metil]-4-metilvaleriansko kislino raztopili v 225 ml vodne nasičene raztopine natrijevega hidrogen karbonata in 45 ml tetrahidrofurana. Dodali smo 30 g trdnega natrijevega hidrogen karbonata in 45 ml benzil kloroformiata in zmes mešali pri sobni temperaturi 48 ur v atmosferi dušika. Raztopino smo dvakrat ekstrahirali z dietiletrom in vodno raztopino nakisali s previdnim dodajanjem klorovodikove kisline ter ekstrahirali petkrat z diklorometanom, ki je vseboval 10 % metanola. Ekstrakte smo sušili nad magnezijevim sulfatom in jih uparili, da smo dobili brezbarvno gumasto snov, ki je kristalizirala iz etil acetata. Dobili smo 7.0 g 2(R ali S)-[(R)-benziloksiformamido)(hidroksifosfinil)metil]-4-metilvalerianske kisline kot en sam diastereoizomer v obliki bele trdne snovi;

MS: 344 (M+H)+.

Nadaljnjih 0.52 g omenjenega diastereoizomera smo dobili iz matične tekočine omenjene kristalizacije s pomočjo frakcioniranih kristalizacij iz etil acetata.

Zmes 1.37 g 2(R ali S)-[(R)-benziloksiformamido)(hidroksifosfinil)metil]-4-metilvalerianske kisline, 0.67 g L-2-(terc.-butil)glicin N-metilamida in 0.24 g N-etil-morfolina v 40 ml suhega toluena smo segrevali 12 ur pod refluksom (temperatura kopeli 140 °C) in pod dušikom. Raztopino smo ohladili in topilo odstranili z uparjenjem. Ostanek smo raztopili v 30 ml etil acetata in raztopino mešali s 30 ml 50 % klorovodikove kisline. Vodni sloj smo izločili in ekstrahirali osemkrat iz diklorometana. Organske raztopine smo združili in uparili, ostanek pa triturirali s 25 ml vročega etil acetata. Po ohlajenju smo netopno snov filtrirali in sušili v vakuumu. Dobili smo 1.74 g N^-2(R ali S)-[(R)benziloksiformamido)(hidroksifosfinil)metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 493 (M+Na)+.

Primer 15

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 11, smo iz 0.5 g N²-2(R ali S)-[(R)benzilkarboniloksiamino[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili (kot smo opisali v prvem odstavku Primera 13), 0.29 g N²-2(R ali S)-[[(R)-(amino)-[(2,3-dihidro6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril-N^,3-dimetil-L-valinamida; MS: 561 (M+H)⁺.

Primer 16

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 11, smo iz 0.28 g N²-2-(R ali S)-[[[(6-benziloksi)-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH*benz[d,e]izokinol-2-il)'metil](hidroksi)fosfinil]-(R)-(benziloksiformamido)-metil]-4-metilvaleril-N^,3-dimetil-Lvalinamida, dobljenega kot smo opisali v Primeru 14, dobili 0.19 g N²-2(R ali S)-[[(R)(amino)-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-metil](hidroksi)fosfinil]-metil]-4-metilvaleril-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki rumenega prahu; MS: 561 (M+H) + .

Primer 17

0.45 g N²-2(R ali S)-[[(R)-(amino)-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,ejizokinol-2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]-metil]-4-metilvaleril-Nl,3-dimetil-L-valinamida smo raztopili v 10 ml ledocetne kisline in dodali po kapljicah v teku 10 minut 7.6 ml raztopine broma, ki smo jo pripravili z raztapljanjem 2 g broma v 100 ml diklorometana. Zmes smo mešali 4 ure pri sobni temperaturi in topilo odstranili z uparjenjem. Ostanek smo raztopili v metanolu in uparili. Postopek smo dvakrat ponovili in trdni ostanek nato triturirali z etil acetatom, filtrirali in sušili v vakuumu tako, da smo dobili 595 mg N2-2(R ali S)-[[(R)-(amino)-[(5-bromo-2,3-dihidro-6hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)-metil]-(hidroksi)fosfinil]-metilj-4metilvaleril-Nl,3-dimetil-L-valinamid hidrobromida v obliki rumenega prahu;

MS: 639/641 (M+H)⁺.

Primer 18

0.062 g 3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]2-izobutil-8-ftalimido-oktanojske kisline (diastereoizomer 1) smo suspendirali v zmesi 2 ml diklorometana in 4 ml toluena. Dodali smo 0.5 ml oksalil klorida in kapljico dimetilformamida in zmes mešali 5 ur pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v suhem diklorometanu. Dodali smo raztopino 0.1 g Netilmorfolina in 0.04 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida v 1 ml diklorometana in zmes mešali pri sobni temperaturi 1 uro. Nato smo izlili v 10 ml IM klorovodikove kisline, mešali in izločila se je diklorometanska faza. Vodno fazo smo ekstrahirali dvakrat z diklorometanom in združene diklorometanske raztopine uparili. Dobili smo 0.058 g 1:1 zmesi diastereoizomerov 1A in IB N2-3(R,S)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimido-oktanoil]-N^,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele pene; MS:745 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pridobili kot sledi:

i) Raztopino 2.95 ml titanovega tetraklorida v 8 ml ogljikovega tetraklorida smo po kapljicah dodajali ob mešanju in pod atmosfero dušika v 50 ml suhega tetrahidrofurana pri 0 °C. Dobljeno rumeno suspenzijo smo obdelali z raztopino 2.45 g 6-ftalimidoheksan-l-ala in 3.55 g dibenzil malonata v 40 ml tetrahidrofurana in zmes mešali 2 uri pri 0 °C. Po kapljicah smo dodali raztopino 4.5 g suhega piridina v 12 ml suhega tetrahidrofurana, da smo dobili krvavo-rdečo suspenzijo. Zmes smo pustili, da je dosegla sobno temperaturo in mešali 18 ur ob vzdrževanju dušikove atmosfere. Dodali smo 200 ml 2M žveplove kisline in zmes ekstrahirali štirikrat z diklorometanom. Združene ekstrakte smo izprali z raztopino natrijevega klorida, sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo prečistili s kromatografijo na silikagelu z uporabo etil acetata/n-heksana (1:2) za eluiranje, da je dal 3.6 g dibenzil 2-(6ftalimidoheksililiden)malonata v obliki brezbarvnega olja.

ii) 3.6 g dibenzil 2-(6-ftalimidoheksililiden)malonata smo dodali raztopini 0.88 g kristalne hipofosforaste kisline v 10 ml suhega diklorometana, raztopino ohladili do °C in dodali 2.8 g trietilamina in 2.8 g trimetilsilil klorida. Po mešanju 3 ure pri sobni temperaturi smo zmes izlili v 60 ml IM klorovodikove kisline in dobljeno raztopino štirikrat ekstrahirali z diklorometanom. Združene ekstrakte smo osušili in uparili, da smo dobili 3.9 g brezbarvne gumene snovi, ki je vsebovala surovi dibenzil 2-[l(RS)(hidroksifosfinil)-6-ftalimidoheksil]malonat, ki smo ga raztopili v 40 ml suhega dimetil sulfoksida in reagirali z izobutil jodidom na analogen način, kot smo opisali v Primeru 10 (ii). Po prečiščenju surovega proizvoda s kromatografijo na silikagelu z uporabo diklorometana/metanola/ocetne kisline/vode (240:24:3:2) za eluiranje, smo dobili 2.0 g dibenzil 2-[l(RS)-(hidroksifosfinil)-6-ftalimidoheksil]-2-izobutilmalonata v obliki brezbarvne gumene snovi.

iii) 5.85 g dibenzil 2-[l(RS)-(hidroksifosfinil)-6-ftalimidoheksil]-2-izobutilmalonata in

2.7 g N-bromometil-l,8-naftalimida je medsebojno reagiralo na analogen način, kot smo opisali v Primeru 10 (iv), da smo dobili 3.74 g dibenzil 2-[l(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]-6-ftalimidoheksil]-2-izobutilmalonata v obliki bele pene; MS: 843 (M+H)⁺.

iv) 1.0 g dibenzil 2-[l(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-6-ftalimidoheksil]-2-izobutilmalonata smo raztopili v 40 ml suhega kloroforma in dodali 4 ml trimetilsilil bromida. Zmes smo segrevali 1.5 ure pri 60 °C pod atmosfero dušika, ohladili in izlili v 50 ml vode. Zmes smo mešali in izločil se je kloroformni sloj. Vodni sloj smo dvakrat ekstrahirali z diklorometanom in združene organske faze uparili. Ostanek smo prečistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma-/metanola/ocetne kisline/vode (240:24:3:2) za eluiranje. Po kristalizaciji produkta iz etil acetata smo dobili 0.57 g enega samega diastereoizomera benzil hidrogen 2-[l(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-l-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-6-ftalimidoheksilj-2-izobutilmalonata v obliki belih kristalov;

MS: 753 (M+H)+.

v) 0.2 g benzil hidrogen 2-[l(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-l-benz[d,e]-izokinol-2il)metil](hidroksi)fosfinil]-6-ftalimidoheksil]-2-izobutiImalonata smo suspendirali v 2 ml suhega kloroforma in dodali 3 ml trimetilsilil bromida. Zmes smo nato obdelali z 2 kapljicama vode in 2 kapljicama 48 % bromovodika v ocetni kislini. Raztopino smo pustili stati 3 dni pri sobni temperaturi in jo nato izlili v 50 ml vode. Produkt smo ekstrahirali trikrat z diklorometanom in združene ekstrakte sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo raztopili v zmesi 16 ml ksilena in 4 ml nheksana, ki je vsebovala 4 kapljice vode in nato segrevali 4 ure pri 145 °C. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek očistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (240:24:3:2) za eluiranje. Po kristalizaciji iz etil acetata smo dobili 0.09 g 3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2il)metil](hidroksi)fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimidooktanojske kisline (96 % diastereoizomera 1) v obliki belega prahu; MS: 641 (M+Na)⁺.

Primer 19

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 18, smo iz 0.15 g 3-[[(2,3dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-2-izobutil-8ftalimido-oktanojske kisline (diastereoizomer 2) in 0.12 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida dobili 0.197 g 1:1 zmesi diastereoizomerov 2A in 2B N²-[3(RS)-[[(2,344 dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinilj-2-izobutil-8ftalimidooktanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bledo-rumene pene;

MS: 745 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) 0.5 g benzil hidrogen 2-[l(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2il)metil](hidroksi)fosfinil]-6-ftalimidoheksil]-2-izobutilmalonata, pripravljenega kot smo opisali v Primeru 18 (iv), smo suspendirali v zmesi 40 ml ksilena, 10 ml dioksana in 0.25 ml vode in suspenzijo segrevali 4.5 ur pri 145 °C pod atmosfero dušika. Topilo smo odstranili z uparjenjem, ostanek pa prečistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (240:24:3:2) za eluiranje. Po kristalizaciji iz etil acetata smo dobili 0.44 g enega samega diastereoizomera benzil 3-[[(2,3-dihidro-l,3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimidooktanoata v obliki bele trdne snovi s tališčem 144-145 °C.

ii) 0.3 g benzil 3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimidooktanoata smo suspendirali v zmesi 100 ml metanola in 20 ml diklorometana, kije vsebovala 0.1 g 10 % paladija na oglju. Zmes smo mešali 20 ur pod atmosfero vodika, katalizator odfiltrirali in filtrat uparili. Preostala gumasta snov je kristalizirala iz etil acetata in dobili smo 0.2 g 3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,ejizokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimidooktanojske kisline (95 % diastereoizomera 2) v obliki bele trdne snovi; MS: 641 (M+H)+.

Primer 20

Zmes iz 0.1 g diastereoizomera 1 in 0.1 g diastereoizomera 2 spojine 3-[[(2,3-dihidrol,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-7-ftalimidoheptanojnske kisline in 0.049 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida v 10 ml ksilena smo segrevali 2 uri pri 140 °C. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek očistili s kromatografijo na silikagelu s kloroformom/metanolom/ocetno kislino/vodo (240:24:3:2) za eluiranje. Dobili smo 0.216 g zmesi diastereoizomerov 1A, IB, 2A in 2B spojine N2-[3(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-2-izobutil-7-ftalimidoheptanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bledorumene pene.

Na analogen način, kot smo opisali v prejšnjem odstavku, smo iz 0.278 g diastereoizomera 2 spojine 3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)45 metil]-(hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-7-ftalimidoheptanojske kisline in 0.068 g L-2-(terc.butil)glicin metilamida dobili 0.242 g zmesi diastereoizomerov 2A in 2B s formulo N²[3(RS)-[[(2,3-dihidro-l, 3-diokso-lH-benz[d, e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2izobutil-7-ftalimidoheptanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki rumene pene.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 18 (i-v), smo iz dibenzil malonata in 5ftalimidopentan-ala dobili diastereoizomera 1 in 2 spojine 3-[[(2,3-dihidro-l,3-dioksolH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-7-ftalimidoheptanojske kisline v obliki bele trdne snovi.

Primer 21

0.17 g 1:1 zmesi diastereoizomerov 2A in 2B N²-[3(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimidooktanoil]-Nl,3dimetil-L-valinamida, pripravljenega kot smo opisali v prvem odstavku Primera 19, smo raztopili v 2 ml etanola, ki je vseboval 0.08 g hidrazin hidrata. Zmes smo mešali 24 ur pri sobni temperaturi in nato filtrirali. Filtrat smo uparili in dobljeno peno porazdelili med destilirano vodo in etil acetatom. Vodno fazo smo nekajkrat izprali s 15 ml deleži etil acetata in nato uparili, da smo dobili 0.12 g zmesi diastereoizomerov 2A in 2B N²[8-amino-3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-2-izobutiloktanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki rumene pene; MS: 615 (M+H)+.

Primer 22

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 21, smo iz 0.245 g 1:1 zmesi diastereoizomerov IA in IB N²-[3(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-8-ftalimidooktanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.18 g zmesi izomerov IA in IB N²-[8-amino-3-[[(2,3-dihidro-l,3-dioksolH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]-2-izobutil-oktanoil]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki rumene pene; MS: 615 (M+H)⁺.

Primer 23

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 10, smo iz 0.414 g 2 (R ali

S)-[(R)-(benziloksiformamido)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)46 metil](hidroksi)-fosfinil]metil-4-metilvalerianske kisline, pripravljene kot smo opisali v

Primeru 10 (i-v), in 0.552 g L-2(terc.-butil)glicin a(S)-metilbenzilamida dobili 0.484 g

N²-[2(R ali S)-[(R)-(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,ejizokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfiniI]-metil]-4-metilvalerii]-3-metil-Nl(cy(S)-metilbenzil)-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 769 (M+H) ⁺ .

L-2-(terc.-butil)gIicin a(S)-metilbenzilamid, ki smo ga uporabili kot izhodni material, smo pripravili na naslednji način:

i) Raztopino 1.76 g N-benziloksikarbonil-L-2-(terc.-butil)-glicina v 30 ml suhega dikloro-metana smo ohladili do - 5 °C in dodali 2,8 g di(l-benzotriazolil)-karbonata in 0.54 ml piridina. Zmes smo mešali 2.5 ur pri - 5 °C in nato smo po kapljicah dodajali 1,6 g (S)-a-metilbenzilamina, pri čemer smo vzdrževali temperaturo v območju - 5 do 0 °C. Po mešanju preko noči pri sobni temperaturi smo raztopino dvakrat izprali z nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata, dvakrat z IM klorovodikovo kislino in na koncu z nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata. Po odstranjenju topila smo z uparjenjem dobili trdno snov, ki smo jo triturirali z n-heksanom tako, da smo dobili 2.05 g N²'(benziloksikarbonil)-3-metil-Nl-(a(S)-metilbenzil)-L-valinamida v obliki bele trdne snovi s tališčem 137 - 139 °C.

ii) 0.5 g N²'(benziloksikarbonil)-3-metil-Nl-(a(S)-metilbenzil)-L-valinamida smo obdelali na analogen način, kot smo opisali v Primeru 11, da smo dobili 0.31 g L-2(terc.-butil)-glicin a(S)-metilbenzilamida v obliki brezbarvne gumaste snovi.

Primer 24

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 33, smo iz 0.1 g N²-[2(R ali S)[(R)(benziloksiformamido)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-metil]-4-metilvaleril]-3-metil-Nl(a(S)-metilbenzil)-L-valinamida dobili 0.045 g hidrobromida N²-[2(R ali S)[(R)-(amino)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]-izokinol'2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-metil]-4-metilvaleril]-3-metil-Nl(a(S)metilbenzil)-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 635 (M+H)⁺.

Primer 25

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 18, smo iz 0.6 g diastereoizomera 2 racemne 2-[l-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-etil]-4-metilvalerianske kisline in 0.45 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida dobili 0.9 g surove zmesi diastereoizomerov 2(i) in 2(ii) N²-[2-[l-[[(2,3dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele pene.

Zmes diastereoizomerov smo kromatografirali na silikagelu ob uporabi kloroforma//metanola/ocetne kisline/vode (120:15:3:2) za eluiranje. Prvi eluirani produkt je 0.12 g izomera 2(i) v obliki bele pene; MS: 544 (M+H) ⁺ .

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 18(ii do iii), smo iz dietil etilidenmalonata in kristalne hipofosforaste kisline dobili dietil 2-[l-(RS)-[[(2,3-dihidrol,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]etil]izobutilmalonat v obliki bele trdne snovi s tališčem 172-174 °C.

ii) 1 g Dietil 2-[l(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-etil]izobutilmalonata smo raztopili v zmesi 5 ml koncentrirane žveplove kisline, 5 ml vode in 10 ml ocetne kisline in raztopino segrevali 20 ur pri 110 °C. Po ohlajenju smo raztopino petkrat ekstrahirali z 10 % metanolom v diklorometanu. Združene ekstrakte smo izprali z nasičeno raztopino natrijevega klorida in uparili. Ostanek smo triturirali z 20 ml etil acetata in trdno snov odfiltrirali. Dobili smo 0.54 g zmesi diastereoizomerov 1 in 2 spojine 2-[l[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]-etil]-4-metilvalerianske kisline v obliki bele trdne snovi. Zmes smo izločili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (120:15:3:2) za eluiranje. Dobili smo 75 mg diastereoizomera 1 racemne 2-[l-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]-etil]-4-metilvalerianske kisline v obliki bele trdne snovi s tališčem 192-194 °C in 225 mg diastereoizomera 2 racemne 2-[l-[[(2,3-dihidro-l,3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]-etil]-4-metilvalerianske kisline v obliki bele trdne snovi s tališčem 202-204 °C.

Primer 26

0.13 g Zmesi štirih izomerov N²'[7-acetoksi-3(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-2(RS)-izobutil-heptanoil]-Nl,3-dimetilL-valinamida smo dali v 20 ml metanola, kije vseboval 0.06 g 60 % natrijevega hidrida v mineralnem olju. Zmes smo mešali 2.5 ur pri sobni temperaturi in nato metanol odstranili z uparjenjem. Ostanek smo raztopili v 30 ml diklorometana in raztopino dvakrat izprali z IM klorovodikovo kislino in dvakrat z nasičeno raztopino natrijevega klorida, osušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata in uparili. Ostanek smo triturirali z dietiletrom in trdno snov odfiltrirali in dobili 0.071 g bele trdne snovi, ki smo jo prečistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (120:15:3:2) za eluiranje. Dobili smo 0.026 g zmesi štirih diastereoizomerov N^[3(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-hidroksi)fosfinil]-7-hidroksi-2(RS)-izobutilheptanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi. MS: 602 (M+H)⁺.

Primer 27

Na analogen način, kot smo opisalli v prvem odstavku Primera 10, smo iz 0.283 g zmesi dveh diastereoizomerov 7-acetoksi-3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2il)metil]hidroksi)fosfinil]-2-izobutilheptanojske kisline in 0.16 g L-2-(terc.-butil)glicin metilamida dobili s prečiščevanjem s pomočjo kromatografije na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (240:24:3:2) za eluiranje, 0.133 g zmesi štirih diastereoizomerov N2-[7-acetoksi-3-(RS)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]hidroksi)fosfinil]-2(RS)-izobutilheptanoil]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi: MS: 644 (M+H) ⁺ .

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 18(i-iii), smo iz 5-benzoiloksi-pentanala in dibenzil malonata dobili dibenzil 2-[5-benziloksi-l-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]-izokinol-2-il)metil]hidroksi)fosfinil]-pentil]-2-izobutilmalonat v obliki gume; MS: 790 (M+H)+.

ii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 25 (ii), smo iz 0.625 g dibenzil 2-[5benziloksi-l-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]hidroksi)fosfinil]-pentil]-2-izobutilmalonata dobili 0.33 g 1:1 zmesi 2 diastereoizomerov 7acetoksi-3-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-hidroksi)-fosfinilj-2-izobutilheptanojske kisline v obliki gumaste snovi; MS: 540: (M+Na)⁺.

Primer 28

Raztopino 0.3 g N^-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,ejizokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v zmesi 10 ml trifluorocetne kisline in 10 ml diklorometana smo mešali čez noč pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek triturirali z zmesjo izopropanola in dietiletra. Dobljeno trdno snov smo odfiltrirali in sušili, da smo dobili

0.195 g N2-[2(R ali S)-[[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metilj(hidroksi)-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-N\3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 530 (M+H) ⁺ .

Izhodni material smo pripravili kot sledi:

i) Zmes 0.3 g benzil 2(R ali S)-[(etoksifosfinil)metil]-4-metilvalerata in 0.13 g diizopropiletilamina v 10 ml diklorometana smo ohladili v ledeni kopeli ob mešanju in pod atmosfero dušika. Dodali smo 2 ml 1,1,1,3,3,3-heksametildisilazana in 1 ml bis(trimetilsilil)acetamida in nato 0.3 g N-bromometil-l,8-naftalimida. Hladilno kopel smo odstranili in zmes mešali 18 ur pri sobni temperaturi, izprali z 10 % žveplovo kislino in raztopino natrijevega klorida, osušili preko brezvodnega magnezijevega sulfata in uparili, da smo dobili 0.6 g rumene gumaste snovi, ki smo jo prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata/n-heksana (3:1) za eluiranje. Dobili smo 0.15 g benzil 2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,ejizokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvalerata v obliki bele trdne snovi;

MS: 522 (M+H)+.

ii) 1 g Benzil 2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2il)metil]fosfinil]metil]-4-metiIvalerata smo suspendirali v zmesi 10 ml metanola in 10 ml etanola, ki je vsebovala 60 mg 10 % paladija na oglju. Zmes smo stresali 24 ur v atmosferi vodika in topilo odstranili z uparjenjem in ostanek triturirali z dietiletrom. Trdno snov smo odfiltrirali in sušili, da smo dobili 0.61 g 2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)[(2,3dihidro-l,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvalerianske kisline v obliki bele trdne snovi; MS: 432 (M+H)⁺.

iii) 0.43 g 2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvalerianske kisline smo suspendirali v 10 ml diklorometana, kije vseboval 0.095 g piridina. Zmes smo ohladili na 0 °C in dodali 0.48 g di-(lbenzotriazolil)-karbonata. Po mešanju pri 0 °C v teku 1.75 ur smo dodali raztopino iz 0.15 g L-2-(terc.-butil)glicina v 10 ml diklorometana. Zmes smo pustili, da je dosegla sobno temperaturo in mešali dodatnih 24 ur. Raztopino smo izprali z nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in IM klorovodikovo kislino in nato uparili. Ostanek smo prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 3% raztopine metanola v diklorometanu za eluiranje. Dobili smo 0.319 g N^-[2(R ali S)-[[(RS)50 (etoksi)[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele pene; MS: 558 (M+H)⁺.

Primer 29

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 28, smo iz 0.436 g 6-[[N-[2(R ali S)[[(RS)-(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4metilvaleril]-3-metil-L-valil]aminoheksanojske kisline dobili 0.42 g 6-[[N-[2(R ali S)[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4metilvaleril]-3-metil-L-valil]aminoheksanojske kisline v obliki bele trdne snovi;

MS: 630 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Raztopino 9.04 g N-terc.-butoksikarbonil-L-2-(terc.-butil)glicina v 200 ml diklorometana smo ohladili na 0 °C in dodali 4.52 g N-hidroksisukcinimida. Po 10 minutah mešanja smo dodali 8.07 g dicikloheksilkarbodiimida in zmes mešali pri sobni temperaturi 20 ur. Trdno snov smo odfiltrirali, filtrat uparili in ostanek raztopili v 110 ml dimetilformamida. Raztopini smo po kapljicah dodali ohlajeno raztopino 5.14 g 6aminokaprojske kisline in 4.52 g tetrametilgvanidina v zmesi iz 42 ml dimetilformamida in 17 ml vode. Dobljeno zmes smo pustili stati, da je dosegla sobno temperaturo in mešali še dodatnih 20 ur. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek porazdelili med 10 % klorovodikovo kislino in etil acetatom. Vodno fazo smo ekstrahirali trikrat z etil acetatom in združene organske raztopine osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 6-[[N²-(terc.-butil-oksikarbonil)-3-metil-Lvaliljaminoj-heksanojsko kislino v obliki bele trdne snovi.

ii) 2.58 g predhodne kisline smo raztopili v 25 ml suhega tetrahidrofurana, ki je vseboval 0.57 g benzil alkohola. Dodali smo 1.08 g dicikloheksilkarbodiimida in 0.064 g N,Ndimetilaminopiridina in zmes mešali 20 ur pri sobni temperaturi. Zmes smo filtrirali in filtrat uparili. Ostanek smo raztopili v 100 ml etil acetata in raztopino izprali z 10% klorovodikovo kislino, nasičeno raztopino natrijevega klorida, nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in raztopino natrijevega klorida. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo raztopino uparili, da smo dobili brezbarvno olje, ki smo ga prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata/nheksana (2:3) za eluiranje. Dobili smo 1.73 g benzil 6-[[N²-(terc.-butiloksikarbonil)-3metil-L-valil]amino]heksanoata v obliki brezbarvne gumaste snovi.

iii) 10 ml dioksana, nasičenega s klorovodikom, smo dodali k raztopini, ki je vsebovala 1.05 g benzil 6-[[N²-(terc.-butiloksikarbonil)-3-metil-L-valil]amino]heksanoata v 5 ml diklorometana. Raztopino smo mešali 20 minut in nato uparili. Ostanek smo raztopili v 25 ml IM klorovodikove kisline in raztopino izprali z dietiletrom. Vodno fazo smo obdelali s trdnim natrijevim hidrogen karbonatom do nasičenja in ekstrahirali trikrat z diklorometanom. Združene ekstrakte smo uparili, da smo dobili 0.565 g olja in olje smo dodali zmesi, kije vsebovala 0.729 g (R ali S)-[[(RS)(etoksi)[2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metil-valerianske kisline pripravljene na način, kot smo opisali v Primeru 28(ii), 0.134 g piridina in 0.716 g di-(l-benzotriazolil)karbonata, ki smo ga predhodno stresali 1 uro pri 0 °C. Zmes smo stresali 24 ur pri sobni temperaturi, razredčili z nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata, IM klorovodikovo kislino in nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata. Diklorometansko fazo smo osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili ostanek, ki smo ga prečistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata za eluiranje. Dobili smo 0.65 g benzil 6-[[N[2-(R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3metil-L-valil]aminoheksanoata, ki smo ga raztopili v 50 ml etanola, ki je vseboval 0.1 g paladija na oglju. Po mešanju v atmosferi vodika 7 ur smo katalizator odfiltrirali in filtrat uparili, da smo dobili 0.436 g 6-[[N[2-(R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3diokso4H-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]aminoheksanojske kisline v obliki brezbarvne pene; MS: 658 (M+H)+,

Primer 30

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 28, smo iz 0.25 g N-[(R ali S)-[[(RS)etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-ilmetil)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-N-(5-morfolinopentil)-L-valinamid hidroklorida dobili 0.21 g N-[2(R ali S)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-ilmetil)-(hidroksi)fosfinil]metil]-4metilvaleril]-3-metil-N-(5-morfolinopentil)-L-valinamid hidroklorida v obliki brezbarvne trdne snovi; MS: 522 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Raztopino 5.81 g 6-[[N²-(terc.-butiloksikarbonil)-3-metil-L-valil]amino]heksanojske kisline v suhem tetrahidrofuranu smo ohladili do - 30 °C in obdelali z 2.15 g N-etilmorfolina in nato po kapljicah dodajali k raztopini 2.54 g izobutilkloroformiata v 5 ml tetrahidrofurana. Raztopino smo mešali 0.25 ur pri - 25 °C in nato dodali 2.12 ml 33 % vodne raztopine amonijevega hidroksida. Zmes smo mešali 3 ure in nato uparili.

Produkt smo ekstrahirali z diklorometanom in ekstrakte osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 5.44 g 6-[[N²-(terc.-butoksikarbonil)-3metil-L-valil]amino]heksanamida v obliki gumaste snovi. To snov smo raztopili v zmesi acetonitrila in vode, raztopino mešali in dodali 10.25 g bis(trifluoroacetoksijjodobenzena. Zmes smo mešali v temi 20 ur in jo nato izlili v 5 % klorovodikovo kislino. Raztopino smo dvakrat izprali z dietiletrom, ki smo ga povratno ekstrahirali s 5 % klorovodikovo kislino. Združene kisle frakcije smo obdelali s 14.18 g trdnega natrijevega hidrogen karbonata, dodali 2.96 g benzil kloroformiata in zmes mešali 4 ure pri sobni temperaturi. Raztopino smo ekstrahirali trikrat z diklorometanom in ekstrakte izprali s 50 ml IM klorovodikove kisline in vodo. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo topilo odstranili in dobili 6.07 g N²-(terc.butiloksikarbonil)-3-metil-Nl-[5-(benziloksiformamido)pentil]-L-valinamida v obliki gumaste snovi.

ii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 29(iii), smo iz 3.06 g N²-(terc.butoksikarbonil)-3-metil-Nl-[5-(benziloksiforrnamido)pentil]-L-valinamida in 2.198 g 2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metilfosfinil]metil]-4-metilvalerianske kisline, pripravljene po metodi opisani v Primeru 28(ii), dobili 1.68 g N-[2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2il)metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-N-[(5-benziloksiformamido)pentil]-Lvalinamida v obliki brezbarvne pene.

iii) 0.254 g Zgoraj omenjene pene smo raztopili v 20 ml etanola, ki je vseboval 0.35 g % klorovodikove kisline in 0.05 g 10 % paladija na oglju. Zmes smo stresali 6 ur v atmosferi vodika, katalizator odfiltrirali in filtrat uparili, da smo dobili N-[2(R ali S)[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-ilmetil)fosfinil]metil]-4metilvaleril]-3-metil-N-(5-aminopentil)-L-valinamida. To smo raztopili v zmesi 2 ml diklorometana in 1.05 g bis(2-jodoetil)etra in dodali 0.247 g diizopropiletilamina. Raztopino smo mešali v temi 3 dni in nato izlili v 5 % klorovodikovo kislino. Vodno raztopino smo izprali z dietiletrom in nato nevtralizirali z dodajanjem trdnega natrijevega hidrogen karbonata. Dodajali smo natrijev klorid dokler raztopina ni postala nasičena in zmes ekstrahirali trikrat z diklorometanom. Ekstrakte smo uparili in dobili gumasto snov, ki smo jo prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 6 % metanola v diklorometanu za eluiranje. Po dodajanju nekaj kapljic 2M klorovodikove kisline in uparjenju topila smo dobili 0.131 g N-[2(R ali S)[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-ilmetil)fosfinil]metil]-4metilvaleril]-3-metil-N-(5-morfolinopentil)-L-valinamid hidroklorida v obliki bledorumene pene; MS: 699 (M+H)⁺.

Primer 31

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 28, smo iz 0.317 g 5-[[N[2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-ilmetil)fosfinil]-metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]pentilamin hidroklorida dobili 0.298 g 5-[[N-[2(R ali S)-[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-ilmetil)(hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]pentilamin hidroklorida v obliki bele trdne snovi; MS: 601 (M+H)⁺.

Primer 32

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 28, smo iz 0.5 g dietil [[N[2(R ali S)-[[(RS)(etoksi)-(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]aminometil]fosfonata dobili 0.318 g dietil [[N-[2(R ali S)-[[[[(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil)-(hidroksifosfinil]-metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]aminometil]fosfonata v obliki bele trdne snovi, ki ima tališče nad 120 °C (razpad); MS: 666 (M+H) ⁺ .

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 28(i)-(ii), smo iz dietil(aminometil) fosfonat hidroklorida in N-benziloksikarbonil-L-2-(terc.-butil)glicina dobili dietil [N-(3metil-L-valil)aminometil]fosfonat v obliki gume.

ii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 29(iii), smo iz 1.1 g dietil [N-(3-metilL-valil)aminometil]fosfonata in 1.5 g 2 (R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-dioksolH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvalerianske kisline dobili 1,6 g dietil [[N-[2(R ali S)-[[(RS)-(etoksi)((2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]-aminometil]fosfonata v obliki bele trdne snovi; MS: 694 (M+H) + .

Primer 33

0.5 g Dietil [[N-[2 (R ali S)-[[(RS)(etoksi)(2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol2-il)metil]fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]aminometil]-fosfonata smo raztopili v 15 ml 45 % raztopine bromovodika v ocetni kislini. Po 3 urah smo zmes uparili in ostanek ponovno uparili štirikrat s toluenom. Dobljeni ostanek smo triturirali z dietiletrom in trdno snov odfiltrirali, da smo dobili 0.35 g [[N-[2(R ali S)-[[[[2,3-dihidro54 l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metilj-4-metilvaleril]-3metil-L-valil]-aminometil]-fosfonske kisline v obliki bele trdne snovi s tališčem nad 150 °C (razpad); MS: 610 (M+H)+

Primer 34

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 10, smo iz 0.51 g 2(R ali S)-[(R)-[[(6-benziloksi-l,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metilj(hidroksi)-fosfinil](benziloksiformamido)metil]-4-metilvalerianske kisline in 0.32 g 3metil-Nl-(3-morfolinopropil)-L-valinamida dobili po dodatku klorovodika 0.416 g N²[2(R ali S)-[(R)-[[(6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil](benziloksiformamido)metil]-4-metilvaleril]-3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-L-valinamid hidroklorida v obliki rumene trdne snovi; MS: 898 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 23(i)-(ii), smo iz N-benziloksikarbonilL-2-(terc.-butil)glicina in 4-(3-aminopropil)morfolina dobili 3-metil-N^-(3-morfolinopropil)-L-valinamid.

ii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 14, smo iz 4-benziloksi-N-bromometil1,8-naftalimida in 2 (R ali S)-[(R)(benziloksiformamido)(hidroksifosfinil)metil]-4-metilvalerianske kisline pripravljene kot smo opisali v Primeru 14(ii), dobili 2 (R ali S)-[(R)[[6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil](benziloksiformamido)metil]-4-metilvalerianske kisline v obliki rumene trdne snovi; MS: 659 (M+H)+.

Primer 35

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 11, smo iz 0.75 g N²-[2-(R ali S)-[(R)-[[(6benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinilj(benziloksiformamido)metil]-4-metilvaleril]-3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-Lvalinamid hidroklorida dobili 0.596 g N²-[2-(R ali S)-[(R)-(amino)[[(2,3-dihidro-6hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-L-valinamid hidroklorida v obliki rumene trdne snovi; MS: 674 (M+H)⁺.

Primer 36

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 10, smo iz 0.349 g 2(R ali S)-[[[(5-bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metilj(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvalerianske kisline in 0.18 g 3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-L-valinamida dobili po dodajanju klorovodika 0.532 g N^-[2-(R ali S)-[[[(5bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-Nl-(morfolinopropil)-L-valinamid hidroklorida v obliki rumene trdne snovi; MS: 737 (M+H)⁺.

Primer 37

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 10, smo iz 0.051 g 2(R ali S)-[[[(6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvalerianske kisline in 0.055 g (2 ekvivalenta) 3-metil-Nl-(3morfolinopropil)-L-valinamida dobili po dodajanju klorovodika 0.081 g N^-[2(R ali S)[[[(6-benziloksi-2,3-dehidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-N^-(3-morfolinopropil)-L-valinamid hidroklorida v obliki bledo-rumene trdne snovi; MS: 749 (M+H) ⁺ .

Primer 38

Suspenzijo 0.354 g 2(R ali S)-[[[(2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,ejizokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvalerianske kisline in 0.217 g 3-metilNl-(3-morfolinopropil)-L-valinamida v zmesi 25 ml toluena, 5 ml 3-metil-3-pentanola in 0.32 ml N-etilmorfolina, smo segrevali pod refluksom 24 ur. Raztopino smo ohladili, topilo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (60:18:2:3) za eluiranje. Dobili smo (po dodajanju klorovodikove kisline) 0.301 g N^-2(R ali S)-[[[(2,3-dihidro-6-hidroksil,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3metil-Nl-(3-morfolinilpropil)-L-valinamid hidroklorida v obliki rumene trdne snovi; MS: 659 (M+H)+.

Primer 39

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 11, smo iz 0.775 g N^-2(R ali S)-[[[6benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)-fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-N^-(morfolinopropil)-L-valinamid hidroklorida dobili 0.6 g

N^-2(R ali S)-[[[2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-N^-(3-morfolinopropil)-L-valinamid hidroklorida v obliki rumene trdne snovi; MS: 659 (M+H)⁺.

Primer 40

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 38, smo iz 0.59 g 2(R ali S)-[[[(6benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metil-valerianske kisline in 0.38 g 4-[(3-metil-L-valil)-amino]maslene kisline dobili 0.775 g 4-[[N^-[2(R ali S)-[[[(6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]-amino]maslene kisline v obliki bledo-rumene trdne snovi; MS: 708 (M+H)⁺.

Primer 41

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 38, smo iz 0.51 g 2(R ali S)-[[[(6benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metil-valerianske kisline in 0.38 g benzil[4-[(3-metil-L-valil)-amino]propil]karbamata dobili 0.616 g benzil [4-[[N^-2(R ali S)-[[[[(6-benziloksi-2,3-dihidro-l,3diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil-4-metil-valeril]-3-metilL-valil]amino]propil]karbamata v obliki bledo-rumene trdne snovi;

MS: 813 (M+H) + .

Primer 42

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 11, smo iz 0.8 g 4-[[N^-2(R ali S)-[[[(6benziloksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]maslene kisline dobili 0.57 g 4-[[N^-2(R ali S)-[[[(6-hidroksi-2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz[d,e]-izokinol-2-il)metil]-(hidroksi)fosfinil]metil-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]maslene kisline v obliki rumene trdne snovi; MS: 618 (M+H) ⁺ .

Primer 43

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.223 g N^[2(R)-[(benziloksikarbamoil)metil-4-metilvaleril]-3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-Lvalinamida dobili 0.12 g N2-[2(R)-[hidroksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-3-metil-Nl(3-morfolinopropil)-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 4.20 (s,IH);

3.70 (t,4H,J=5.5); 3.23 (t,2H,J=7.5); 2.95 (m,IH); 2.54 (br,s,4H); 2.45 (t,2H,J=9); 2.33 (dd,2H,J=14.9); 2.18 (dd,2H,J=14.7); 1.80-1.66 (m,2H); 1.63-1.42 (m,2H), 1.25-1.13 (m,IH); 0.99 (s,9H); 0.92 (d,3H,J=6); 0.87 (d,3H,J=6); MS: 429 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(i)-(ii), smo iz 1.109 g 4-terc.-butil 2(R)izobutilsukcinata in 1.264 g 3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-L-valinamida dobili 1.128 g N2-[2(R)-[(benziloksikarbamoil)metil-4-metilvaleril]-3-metil-Nl-(3-morfolinopropil)-Lvalinamida v obliki bele pene; MS: 519 (M+H) ⁺ .

Primer 44

6.3 g n2-[2(R ali S)-(karboksi)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida, izomer 1, pripravljenega kot smo opisali v Primeru 45(i)-(iv), in 4.5 g o-(terc.butildimetilsilil)hidroksilamina, smo raztopili v 70 ml suhega dimetilformamida in raztopino ohladili do 0 °C ob mešanju in pod atmosfero dušika. Dodali smo 3.75 g hidroksibenzotriazola, 3.0 ml N-metilmorfolina in 4.13 g l-(3-dimetilaminopropil)-3etilkarbodiimid hidroklorida in zmes pustili, da se je segrela do sobne temperature in mešali čez noč. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek obdelali z 200 ml 5 % vodne raztopine natrijevega hidrogen karbonata. Produkt smo trikrat ekstrahirali z etil acetatom in združene ekstrakte izprali s 5 % vodno raztopino citronske kisline in nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo topilo odstranili z uparjenjem in ostanek triturirali z zmesjo etil acetata in dietiletra. Trdno snov smo filtrirali in sušili, da smo dobili 4.6 g N2-[2(R)[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-Nl’3-dimetil-L-valinamida v obliki belega prahu; nmr (MeOD): 8.14 (d,exch,lH,J=9); 7.95 (m,exch,lH); 7.18 (m,2H); 7.09 (m,3H,); 4.20 (d,lH,J=9); 2.67 (d,3H,J = 5); 2.64 (m,IH); 2.58-2.47 (m,2H); 2.21-2.13 (m,IH); 1.65-1.45 (m,4H); 1.41-1.28 (m,2H); 1.08-1.00 (m,IH); 0.94 (s,9H); 0.85 (d,3H,J=6); 0.80 (d,3H,J=6); MS: 434 (M+H) + .

Primer 45

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.19 g N^[2(R)-[1(R ali S)(benziloksikarbamoil)-4-fenilbutil]metilvaleril]-N l>3-metil-L-valinamida dobili 0.115 g N2-[2(R)-[l(hidroksikarbamoil)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-Nl>-3dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 434 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) 0.048 g 60 % Natrijevega hidrida smo dodali ob mešanju raztopini 0.45 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v 10 ml suhega dimetilformamida v atmosferi dušika. Zmes smo mešali 0.75 ur pri 0 °C in ponovno 2.5 ur pri sobni temperaturi. Zmes smo ponovno ohladili do 0 °C preden smo dodali 0.236 g cinamil bromida. Pustili smo, da je zmes dosegla sobno temperaturo in mešali 2 dni pri sobni temperaturi. Zmes smo izlili k 5 % vodni raztopini citronske kisline in produkt ekstrahirali štirikrat z dietiletrom. Združene etrske ekstrakte smo izprali z vodo in raztopino natrijevega klorida in jih sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/etra (9:1) za eluiranje. Dobili smo 0.542 g 1,2-dibenzil 1terc.-butil-4-metil-l-(3-fenilprop-2-en-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja; MS: 571 (M + H) ⁺ .

ii) 2.5 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(3-fenilprop-2-en-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata smo raztopili v 100 ml metanola, ki je vseboval 0.55 g 10 % paladija na oglju kot katalizatorju. Zmes smo mešali v atmosferi vodika dokler se ni končala absorpcija vodika. Katalizator smo odfiltrirali in topilo odstranili z uparjenjem, da smo dobili 1.94 g l-terc.-butil 4-metil l-(3-fenilprop-l-il)-l,l,2(R)-pentan-trikarboksilata v obliki brezbarvne gumaste snovi. To snov smo raztopili v 120 ml toluena, ki je vseboval 0.6 g N-etilmorfolina. Zmes smo segrevali pod refluksom 5.5 ur, ohladili, raztopino dvakrat izprali z raztopino citronske kisline in enkrat z vodno raztopino natrijevega klorida, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo očistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/dietiletra (10:1) za eluiranje. Po začetnem eluiranju 0.524 g anhidrida, ki ustreza začetni dikislini, smo dobili 0.74 g 4terc.-butil 2(R)-izobutil 3-[(R ali S)-(3-fenilprop-l-il)]-sukcinata, izomer 1, v obliki brezbarvne gume in 0.126 g zmesi izomerov 1 in 2 v obliki gume.

iii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 1 (i), smo iz 0.741 g 4-terc.-butil 2(R)izobutil 3-[(R ali S)-(3-fenilprop-l-il)]-sukcinata, izomer 1, in 0.32 g (S)-terc.-butil-glicin metilamida dobili 0.93 g N2-[2(R)-[l-(terc.-butoksi-karbonil)-4-fenilbutil]4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki brezbarvne pene.

iv) 0.93 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(terc.-butoksikarbonil)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida smo raztopili v zmesi 28 ml diklorometana in 4 ml trifluorocetne kisline in raztopino mešali 6 ur pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek ponovno uparili z zmesjo metanola in etil acetata. Po dodatnem uparjenju z etil acetatom smo ostanek triturirali z dietiletrom, da smo dobili 0.7 g N²[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetiI-L-valinamida, izomer 1, v obliki bele trdne snovi; MS: 419 (M+H)⁺.

v) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(iii), smo iz 0.228 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-4-fenilbutil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida in 0.077 g o-benzilhidroksilamina dobili 0.192 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-fenilbutil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele pene; MS: 524 (M+H)⁺.

Primer 46

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.135 g N²[2(R)-[(R ali S)-(benzil)(benziloksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 0.097 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(benzil)(hidroksikarbamoil)metil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.287.07 (m,5H); 4.34 (s,IH); 2.89-2.63 (m,3H); 2.72 (s,3H); 1.62-1.48 (m,IH); 1.47-1.34 (m,IH); 1.18-1.07 (m,IH); 1.04 (s,9H), 0.91 (d,3H,J=6); 0.84 (d,3H,J=6); MS: 406 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-v), smo iz 2.0 g 1,2-dibenzil 1-terc.butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 0.53 ml benzil bromida dobili 0.77 g N²[2(R)-[(R ali S)-(benzil)(benziloksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-N 1,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 496 (M+H)⁺.

Primer 47

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.135 g N²[2(R)-[ 1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)butil]-4-metilvaleril]-N 1,3dimetil-L-valinamida dobili 0.10 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)-butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD); 4.25 (s, IH); 3.62 (s,3H); 2.74-2.62 (m,4H); 2.28 (2H,t,J=7); 2.21-2.11 (m,IH); 1.70-1.29 (m,6H); 1.12-1.04 (m,IH); 1.02 (s,9H), 0.89 (d,3H,J=6); 0.83 (d,3H,J=6); MS: 416 (M+H)+

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v primeru 45 (i-v), smo iz 1.82 g 1,2-dibenzil 1-terc.butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 0.8 g metil 4-bromokrotonata dobili

0.37 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)butil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 506 (M+H)⁺.

Primer 48

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.135 g N²[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 0.07 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD); 7.88-7.75 (m,4H); 4.33 (s,IH); 4.08 (dd, IH, J=14,10); 3.57 (dd,lH,J= 14,4); 2.93-2.75 (m,2H); 2.74 (s,3H); 1.66-1.55 (m,IH); 1.52-1.37 (m,IH); 1.18-1.09 (m,IH); 1.08 (s,9H); 0.93 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J = 6); MS: 475 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-iv), smo iz 1.82 g 1,2-dibenzil 1terc.-butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 0.96 g N-bromometilftalamida dobili 0.73 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 460 (M+H) ⁺ .

ii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 1 (iii), smo iz 0.17 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-2-ftaIimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida in 0.061 g Obenzilhidroksilamina dobili 0.161 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

MS: 565 (M+H)+.

Primer 49

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 44, smo iz 6.44 g N²-[2(R)-[1(R ali S)(karboksi)-2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 4.74 g N²[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi.

Primer 50

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.115 g zmesi izomerov N^-[2(R)-[l(benziloksikarbamoil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.06 g N2-[2(R)-[l(hidroksikarbamoil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 358 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in alil bromida dobili N2-[2(R)-[l(benziloksikarbonil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki zmesi izomerov.

Primer 51

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.198 g N^[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-(2,6-dimetilfenil)etil]-4-metilvaleril]-N^,3dimetil-L-valinamida dobili 0.139 g N^-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-(2,6dimetilfenil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD); 6.92 (s,3H); 4.32 (s,IH); 3.11 (dd,IH,J=14,12); 2.92-2.82 (m,IH); 2.72 (s,3H); 2.64 (dd,lH,J=14,3); 2.52-2.43 (m,IH); 2.27 (s,6H); 1.61-1.50 (m,IH); 1.48-1.33 (m,IH); 1.17-1.08 (m,IH); 1.07 (s,9H); 0.93 (d,3H,J=6); 0.83 (d,3H,J=6); MS: 434 (M+H) + .

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 2,6-dimetilbenzil bromida dobili N^-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-(2,6-dimetilfenil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 524 (M+H) + .

Primer 52

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.18 g N^[2(R)-[2-(4-etilfenil)-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 0.132 g N2-[2(R)-[2-(4-etilfenil)-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etil-4metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 7.18-6.96 (m,4H); 4.33 (s,IH); 2.84-2.70 (m,5H); 2.65-2.52 (m,3H); 2.442.35 (m,IH); 1.58-1.50 (m,IH); 1.46-1.35 (m,IH); 1.18 (t,3H,J=7); 1.17-1.05 (m,IH);

1.04 (s,9H); 0.90 (d,3H,J=6); 0.84 (d,3H,J=6); MS: 434 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 4-etilbenzil bromida dobili N²-[2(R)-[2-(4etilfenil)-l(R ali S)-(benziloksikarbamoiletil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 524 (M+H)⁺.

Primer 53

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.1 g N²-[2(R)1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-3-metibutill-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.057 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-3-metilbutil]-4-metilvaleril]N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 4.35 (s,IH); 4.70 (s,3H); 4.68-4.57 (m,IH); 2.31-2.19 (m,IH); 1.75-1.29 (m,4H); 1.14-0.95 (m,llH); 0.91-0.78 (m,12H); MS: 372 (M+H)+.

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in metalil bromida dobili N²-[2(R)-1(R ali S)(benziloksikarbamoil]-3-metilbutil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid v obliki bele trdne snovi; MS: 462 (M+H)⁺.

Primer 54

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 44, smo iz 0.127 g N²·[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-2-(l-naftil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.033 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-l-naftil)etil]-4-metil-valeril]Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.99 (m,IH); 7.83 (m,IH); 7.71 (d,lH,J=7); 7.52-7.23 (m,4H); 4.46 (s,IH); 3.16 (t,lH,J=12); 3.00-2.88 (m,IH); 2.77 (s,3H); 2.75-2.62 (m,2H); 1.62-1.38 (m,2H); 1.21-1.10 (m,IH); 1.08 (s,9H); 0.95 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J=6); MS: 456 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-iv), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil

4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in l-(bromometil)naftalena dobili N²-[2(R)-1(R ali S)-(karboksi)-2-(l-naftil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 441 (M+H)⁺.

Primer 55

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45 (i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 2-(bromometil)naftalena in z uporabo O-(terc.butildifenilsilil)hidroksilamina v delu (v) dobili N²-[2(R)-1(R ali S)-(terc.-butildifenilsililoksikarbamoil)-2-(2-naftil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 694 (M+H)⁺.

0.102 g N²-[2(R)-1(R ali S)-(terc.-butildifenilsililoksikarbamoil)-2-(2-naftil)etil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida smo raztopili v 3 ml suhega tetrahidrofurana in dodali 0.15 ml IM tetrabutilamonijevega fluorida. Po enournem mešanju pri sobni temperaturi smo zmes izlili v IM klorovodikovo kislino in produkt nekajkrat ekstrahirali z etil acetatom. Ekstrakte smo združili in izprali z IM klorovodikovo kislino in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo topilo odstranili z uparjenjem in ostanek triturirali z dietiletrom. Dobili smo 0.049 g N²[2(R)-1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-(2-naftil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 7.76 (m,3H); 7.57 (s,IH); 7.42 (m,2H); 7.26 (dd,lH,J=7,2); 4.39 (s,IH); 3.01 (t,lH,J=12); 2.92-2.79 (m,2H); 2.73 (s,3H); 2.61-2.49 (m,IH); 1.65-1.52 (m,lH); 1.50-1.37 (m,IH); 1.19-1.09 (m,IH); 1.07 (s,9H); 0.92 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J=6); MS: 456 (M+H) + .

Primer 56

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 44, smo iz 0.127 g N²[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-(2,3-dihidro)-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)etil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.055 g N²-[2(R)-[2-(2,3-dihidro)-l,3diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.99 (d,2H,J=7.5); 8.28 (d,2H,J=7.5); 7.75 (t,2H,J=7.5); 4.72 (dd,lH,J=14,10), 4.42 (s,IH); 4.02 (dd,lH,J=14,4); 3.03-2.93 (m,IH); 2.90-2.80 (m,IH), 2.74 (s,3H9, 1.70-1.57 (m,IH), 1.53-1.38 (m,IH); 1.23-1.14 (m,IH), 1.10 (s,9H); 0.94 (d,3H,J=6), 0.85 (d,3H,J=6);

MS: 525 (M+H) + .

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način kot smo opisali v Primeru 45(i)-(iv), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil

4-metil-l,l,2(R)-(karboksi)-2,3-dipentantrikarboksilata in N-(bromometil)-naftalimida dobili N2-[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-(2,3-dihidro)-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2il)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dirnetil-L-vaIinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 570 (M+H)+.

Primer 57

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.15 g N^[2(R)-[2-benzamido-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetilL-valinamida dobili 0.112 g N2-[2(R)-[2-benzamido-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etilj4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.77 (m,2H); 7.56-7.40 (m,3H); 4.28 (s,IH); 3.60-3.46 (m,2H); 2.86-2.76 (m,IH); 2.72 (s,3H), 2.70-2.58 (m,IH) 1.66-1.55 (m,lH9, 1.50-1.36 (m,IH); 1,20-1.08 (m,IH); 1.04 (s,9H); 0.92 (d,3H,J=6.5); 0.85 (J=6.5); MS: 449 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

i) Raztopino 0.226 g N2-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v 5 ml metanola smo obdelali z 8 ml 0.33M raztopino hidrazin hidrata v metanolu. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi čez noč in topilo odstranili z uparjenjem. Ostanek smo mešali s 4 ml kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (120:15:3:2) in netopno trdno snov odfiltrirali. Filtrat smo očistili s kromatografijo na silikagelu ob uporabi kloroforma/metanola/ocetne kisline/vode (120:15:3:2) za eluiranje. Frakcije, ki so vsebovale produkt, smo uparili in ponovno nekajkrat uparili v prisotnosti toluena za odstranitev vode in ocetne kisline. Dobili smo 0.203 g N2-[2(R)-[2-amino-l(R ali S)benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD); 7.50-7.33 (m,5H); 4.93 (m,2H); 4.23 (s,IH); 3.03 (dd,lH,J=14,9); 2.832.70 (m,2H); 2.68 (s,3H); 2.44-2.32 (m,IH); 1.58-1.47 (m,IH); 1.45-1.29 (m,IH); 1.101.02 (m,IH); 0.99 (s,9H); 0.88 (d,3H,J=7); 0.84 (d,3H,J=6);

ii) 0.2 g N^-[2(R)-[2-amino-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida raztopili v 5 ml suhega dimetilformamida, ki je vseboval 0.05 g Nmetilmorfolina. Raztopino smo ohladili do 0 °C in dodali 0.077 g benzoil klorida. Po mešanju 20 ur pri sobni temperaturi smo zmes izlili v 5 % vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in produkt ekstrahirali z etil acetatom. Ekstrakte smo izprali s 5 % vodno raztopino citronske kisline in nasičeno raztopino natrijevega klorida, sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata za eluiranje. Dobili smo 0.145 g N^65

0.145 g N²-[2(R)-[2-benzamido-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 7.80 (m,2H), 7.59-7.42 (m,3H); 7.33-7.19 (m,5H); 4.86 (d,lH,J=12); 4.70 (d,lH,J=12); 4.28 (s,IH); 3.61-3.46 (m,2H); 2.88-2.77 (m,IH); 2.71 (s,3H); 2.65-2.55 (m,IH); 1.60-1.48 (m,IH); 1.46-1.31 (m,IH); 1.11-0.96 (m,10H); 0.90 (d,3H,J=6); 0.83 (d,3H,J=6);

Primer 58

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 57(i), smo po obdelavi produkta z klorovodikom za tvorbo hidroklorida iz 0.1 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksi-karbamoil)2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.08 g N²-[2(R)-(2amino-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid hidroklorida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 4.24 (s,IH); 3.23 (dd,IH,J=12.5,10); 2.92 (dd,IH,J=12.5,3); 2.84-2.76 (m,IH); 2.69 (s,3H); 2.61-2.53 (m,IH), 1.66-1.55 (m,IH); 1.20-1.12 (m,IH); 1.01 (s,9H); 0.89 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J=6); MS: 345 (M+H)+.

Primer 59

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.105 g N²[2(R)-[2-acetamido-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 0.08 g N²-[2(R)-(2-acetamido-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 4.16 (s,IH); 3.29 (dd,IH,J=14,3.5); 3.14 (dd,lH,J=14,9); 2.66-2.57 (m,4H); 2.42-2.33 (m,IH); 1.80 (s,3H), 1.51-1.43 (m,IH); 1.36-1.25 (m,IH); 1.04-0.95 (m,IH), 0.93 (s,9H); 0.80 (d,3H,J=6); 0.74 (d,3H,J=6); MS: 387 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 57(ii), smo iz N²-[2(R)-[2-amino-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida in anhidrida ocetne kisline dobili N²-[2(R)-[2-acetamido-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 477 (M+H)⁺.

Primer 60

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.18 g N^[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-(morfolino)etil]-4-metilvaleril]-N 1,3-dimeti 1L-valinamida dobili 0.11 g N2-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-(morfolino)etilj4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 4.23 (s,IH); 3.60 (m,4H); 2.74 (t,lH,J=12); 2.68 (s,3H); 2.63 (dt,lH,J=10,4); 2.53-2.42 (m,3H); 2.27-2.20 (m,2H); 2.14 (dd,IH,J= 14,3.5); 1.55-1.45 (m,IH); 1.42-1.30 (m,IH); 1.14-1.05 (m,IH), 1.01 (s,9H); 0.86 (d,3H,J=6); 0.82 (d,3H,J=6); MS: 415 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Zmes iz 0.27 g N^-[2(R)-[2-amino-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]N^,3-dimetil-L-valinamida, 0.25 g Ν,Ν-diizopropiletilamina in 0.5 ml bis(2-jodoetil)etra v 4 ml dimetilformamida smo pustili stati 3 dni pri sobni temperaturi v temi. Zmes smo izlili v vodo in produkt ekstrahirali z etil acetatom. Etil acetatni ekstrakt smo zapored izprali z vodo, vodno raztopino natrijevega tiosulfata, vodo in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Raztopino smo osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Po obdelavi z dietiletrom smo dobili 0.18 g N^-[2(R)-[1(R ali S)(benziloksikarbamoil)-2-(morfolino)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi.; MS: 505 (M+H) ⁺ .

Primer 61

0.04 g Litijevega hidroksida monohidrata smo dodali raztopini 0.141 g N^-[2(R)-[1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-(ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v zmesi 4 ml metanola in 8 ml vode. Po 15 minutah smo zmes izlili v IM klorovodikovo kislino in raztopino ekstrahirali večkrat z etil acetatom, ki je vseboval 5 % metanol. Združene ekstrakte smo izprali z vodo in jih nato uparili. Po obdelavi ostanka z dietiletrom smo dobili 0.121 g N^-[2(R)-[2-karboksibenzamido)-l(R ali S)(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.98 (dd,lH,J=7.5,2); 7.59 (dt,lH,J=7.5,2) 7.52 (dt,lH,J=7.5,2); 7.44 (dd,lH,J=7.5,2); 4.28 (s,IH); 3.55 (dd,IH,J= 14.6,5); 3.45 (dd,lH,J= 14,4); 2.952.87 (m,IH); 2.71 (s,3H); 2.70-2.62 (m,IH); 1.63-1.54 (m,IH); 1.44-1.34 (m,IH), 1.151.06 (m,IH); 1.03 (s,9H); 0.88 (dd,lH,J=6); 0.84 (dd,lH,J=6); MS: 493 (M+H)+.

Primer 62

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.11 g N“[2(R)-[ 1(R ali S)-(benziIoksikarbamoil)-2-(3-karboksipropionamido)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.075 g N^-[2(R)-[2-(3-karboksi-propionamido)-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 4.23 (s,IH); 3.39-3.21 (m,2H); 2.77-2.69 (m,IH); 2.68 (s,3H); 2.55 (t,2H,J=7); 2.49-2.37 (m,3H); 1.58-1.49 (m,IH); 1.42-1.321 (m,IH); 1.12-1.03 (m,IH); 0.99 (s,9H); 0.86 (d,3H,J=6); 0.81 (d,3H,J=6); MS: 445 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 57(ii), smo iz N2-[2(R)-2-amino-l(R ali S)-(benziloksikarbonil)-etil-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida in anhidrida jantarne kisline dobili N^-[2(R)-1(R ali S)-(benziloksikarbonil)-2-(3-karboksipropionamido)-etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 535 (M+H) + .

Primer 63

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.15 g N^[2(R)-[ 1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-sukcinimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida dobili 0.11 g N^-[2(R)-1(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-2-sukcinimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 3.88 (dd,lH,J= 14,10); 3.37 (dd,lH,J=14,4) 2.80 (dt,IH,J= 14,3.5); 2.72 (s,3H); 2.65 (m,5H); 1.60-1.51 (m,IH); 1.46-1.35 (m,IH); 1.14-1.05 (m,IH); 1.03 (s,9H); 0.88 (d,3H,J=6); 0.82 (d,3H,J=6); MS: 427 (M+H)+.

Izhodni material smo pridobili na naslednji način:

Raztopino 0.318 g N^-[2(R)-1(R ali S)-(benziloksikarbonil)-2-(3-karboksi-propionamido)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v 6 ml suhega dimetilformamida smo obdelali zapored z 0.09 g hidroksibenzotriazola, 0.09 g N-metil-morfolina in 0.144 g l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimida. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi 20 ur in nato izlili v 5 % vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata. Produkt smo ekstrahirali z etil acetatom in ekstrakt izprali s 5 % raztopino citronske kisline in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo topilo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 5 % metanola v diklorometanu za eluiranje. Dobili smo 0.16 g

N²-[2(R)-1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-2-sukcinimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 517 (M+H)⁺.

Primer 64

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.12 g N²[2(R)-[ 1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-(karboksi)butil]-4-metiIvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida dobili 0.088 g N²-[2(R)-[4-karboksi-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)butil-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 4.14 (s,IH); 2.63-2.54 (m,4H); 2.12 (t,2H,J=7) 2.10-2.02 (m,IH); 1.581.22 (m,6H); 1.02-0.93 (m,IH); 0.91 (s,9H); 0.78 (d,3H,J = 6); 0.73 (d,3H,J=6); MS: 402 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Zmes 0.09 g N²-[2(R)-1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)butil-4metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida, 0.012 g litijevega hidroksida monohidrata, 0.55 ml tetrahidrofurana in 0.36 ml vode smo mešali pri sobni temperaturi 3 dni. Tetrahidrofuran smo odstranili z uparjenjem in ostanek razredčili z etil acetatom in izprali z dvema deležema 0.5M klorovodikove kisline in nato z nasičeno raztopino natrijevega klorida. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo odstranili topilo z uparjenjem in dobili 0.078 g N²-[2(R)-1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4(karboksi)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

MS: 492 (M+H) + .

Primer 65

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.094 g zmesi izomerov N²-[2(R)-(l-benziloksikarbamoil)-4-(l-pirolidinil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamida dobili 0.066 g N²-[2(R)-(l-hidroksikarbamoil)-4-(l-pirolidinil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi, kot zmesi diastereoizomerov; MS: 441 (M+H)⁺.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i), smo iz 5.0 g 1,2-dibenzil 1-terc.butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 3.3 g propargil bromida dobili 5.58 g 1,269 dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(prop-2-in-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja; MS: 493 (M+H)⁺.

ii) Zmes, ki je sestavljena iz 0.501 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(prop-2-in-l-il)l,l,2(R)-pentantrikarboksilata, 0.17 ml pirolidina, 0.083 g paraformaldehida, 0.39 ml ledocetne kisline in 0.004 g bakrovega klorida v 7 ml dioksana, smo mešali 15 minut pri sobni temperaturi in pod atmosfero dušika in nato segrevali do refluksa 2 uri. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi še 2 uri in jo uparili, ostanek pa razdelili med vodo in diklorometanom. Vrednost pH vodne faze smo naravnali na 10 z dodajanjem amonijevega hidroksida in diklorometanski sloj odločili. Vodno fazo smo ekstrahirali s tremi deli diklorometana in združene ekstrakte izprali z vodo, osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili rjavo olje, ki smo ga prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi etil acetata/heksana (4:1) za eluiranje. Dobili smo 0.489 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(4-pirolidinil)but-2-in-l-il)-l,l,2(R)pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja; MS: 576 (M+H) ⁺ .

iii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(ii-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.butil 4-metil-l-(4-pirolidinilbut-2-in-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata dobili N²[2(R)-l-(benziloksikarbamoil)-4-(l-pirolidinil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamid v obliki bele trdne snovi, kot zmesi diastereoizomerov; MS: 531 (M+H)⁺.

Primer 66

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku primera 44, smo iz 0.14 g N²[2(R)-[1(R ali S)-(karboksi)-6-fenilheksil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.046 g N²-[2(R)-[1-(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-6-fenilheksil]-4-metilvaleriljN^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD); 7.24 (m,2H); 7.13 (m,3H); 4.25 (s,IH); 2.69 (s,3H); 2.3 (m,IH); 2.55 (t,2H,J=7); 2.17-2.09 (m,IH); 1.641.45 (m,4H); 1.42-1.13 (m,6H); 1.10-1.02 (m,IH); 0.98 (s,9H); 0.88 (d,3H,J=6); 0.83 (d,J=6); MS: 462 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i), smo iz 7.28 g 1,2-dibenzil l-terc.butil 4-metil-1,1,2(R)-pentantrikarboksilata in 3.88 g alil bromida dobili 7.234 g 1,2dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(prop-2-en-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja; MS: 495 (M+H)⁺.

ΊΟ ii) Zmes iz 1.23 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(prop-2-en-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata, 3 ml 1 % vodne raztopine osmijevega tetroksida, 2.44 g natrijevega perjodata, 15 ml dietiletra in 15 ml vode, smo mešali 1 uro pri sobni temperaturi. Dodali smo še 3.25 g natrijevega perjodata in zmes mešali pri sobni temperaturi 24 ur. Etrski sloj smo odločili in vodni sloj ekstrahirali z dietiletrom. Združene etrske sloje smo večkrat izprali s 5 % vodno raztopino askorbinske kisline in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Po sušenju nad brezvodnim magnezijevim sulfatom smo raztopino uparili in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/dietiletra (8:1) za eluiranje. Dobili smo 0.955 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 1(formilmetil)-4-metil-l,l,2(R)-pentan trikarboksilata v obliki brezbarvnega olja;

MS: 497 (M+H)+.

iii) Zmes 0.496 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil (l-formilmetil)-4-metil-l,l,2(R)-pentan trikarboksilata, 0.176 g kalijevega karbonata in 0.576 g 3-fenilpropiltrifenilfosfonijevega bromida v 8 ml suhega tetrahidrofurana smo segrevali ob refluksu pod atmosfero dušika 3 dni. Topilo smo odstranili z uparjenjem in mešali z dietiletrom. Trdno snov smo odločili s filtriranjem in filtrat uparili. Ostanek smo prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/etil acetata (6:1) za eluiranje. Dobili smo 0.397 g 1,2dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(5-fenilpent-2-en-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja.

iv) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(ii-iv), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.butil 4-metil-l-(5-fenilpent-2-en-l-il)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata dobili N²-[2(R)[1(R ali S)-(karboksi)-6-fenilheksil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid v obliki bele trdne snovi; MS: 447 (M+H)⁺.

Primer 67

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 44, smo iz 0.15 g N²[2(R)-[4-acetoksi-l(R ali S)-(karboksi)-butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.043 g N²-[2(R)-[4-acetoksi-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-butil]-4-metilvaleril]Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

nmr (MeOD): 4.22 (s,IH); 4.02-3.68 (m,2H); 2.68-2.60 (m,4H); 2.2 (dt,IH,J=11,3.5);

1.93 (s,3H); 1.65-1.37 (m,5H); 1.36-1.26 (m,IH); 1.06-0.98 (m,IH); 0.96 (s,9H); 0.84 (d,3H,J=7); 0.77 (d,3H,J=7); MS: 416 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Raztopino 2.47 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(prop-2-en-l-il)-l,l,2(R)pentantrikarboksilata v 5 ml suhega dietiletra smo ohladili do 0 °C in dodali 0.325 ml kompleksa monokloroborana z metil sulfidom. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi 2 uri, jo nato ohladili do 0 °C in dodali 0.5 ml vode, 2.3 ml 1.5M vodne raztopine natrijevega hidroksida in 2.3 ml 30 % vodne raztopine vodikovega peroksida. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi 3 ure in nato nakisali s 5 % vodno raztopino citronske kisline. Produkt smo ekstrahirali z dietiletrom in ekstrakt izprali z nasičeno raztopino natrijevega klorida, sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo očistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/etil acetata (5:1) za eluiranje. Dobili smo 1.098 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil l-(3-hidroksipropil)-4-metill,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja; MS: 513 (M+H)⁺.

iii) Raztopino 1.069 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil l-(3-hidroksipropiI)-4-metil-l,l,2(R)pentantrikarboksilata v 10 ml piridina pri 0 °C smo obdelali z 0.643 g anhidrida ocetne kisline. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi 20 ur in uparili. Ostanek smo raztopili v etil acetatu in raztopino izprali z IM klorovodikovo kislino in nasičeno vodno raztopino natrijevega hidroksida in sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom. Topilo smo odstranili z uparjenjem in dobili 1.155 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil l-(3-acetoksipropil)-4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki olja.

iv) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(ii-iv), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.butil l-(acetoksipropil)-4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata dobili N²-[2(R)-[4acetoksi-l(R ali S)-(karboksi)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid v obliki bele trdne snovi; MS 401 (M+H)⁺.

Primer 68

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.058 g N²[2(R)-[1-(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-hidroksibutil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 0.027 g N²-[2(R)-[4-hidroksi-l-(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-butil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 4.25 (s,IH); 3.46 (t,2H,J=6); 2.70 (s,3H); 2.67 (dt,lH,J= 11,4); 2.16 (dt,IH,J=11,3.5); 1.671.31 (m,6H); 1.12-1.04 (m,IH); 1.01 (s,9H); 0.88 (d,3H,J=6); 0.83 (d,3H,J=6);

MS: 374 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(iii), smo iz N2-[2(R)-[4-acetoksi-l-(R ali S)-(karboksi)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili N²-[2(R)-[4-acetoksi-l-(R ali S)-(benziloksikarbamoil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid v obliki bele trdne snovi.

ii) Na analogen način, kot smo opisali v zadnjem odstavku Primera 64, smo iz 0.1 g N²[2(R)-[4-acetoksi-l-(R ali S)-(benziloksikarbamoil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida dobili 0.058 g N²-[2(R)-[(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-hidroksibutil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD); 7.46 (m,2H), 7.37 (m,3H); 4.88 (m,2H); 4.23 (s, IH); 3.44 (t,2H,J = 7); 2.74-2.65 (m,4H); 2.142.06 (m,IH); 1.63-1.55 (m,IH); 1.50-1.29 (m,6H); 1.04-0.95 (m,10H); 0.87 (d,3H,J=7); 0.82 (d,3H,J=7).

Primer 69

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 44, smo iz 0.1 g N²[2(R)-[1-(R ali S)-(karboksi)-3-ftalimidopropil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.060 g N²-[2(R)-[1-(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-3-ftalimidopropil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.877.76 (m,4H), 4.20 (s,IH); 3.68-3.51 (m,2H); 2.74-2.65 (m,4H9, 2.22 (dt,lH,J=10.3,5); 2.05-1.93 (m,IH); 1.85-1.75 (m,IH); 1.54-1.45 (m,IH); 1.41-1.29 (m,IH); 1.13-1.04 (m,IH); 1.06 (s,9H), 0.86 (d,3H,J=6); 0.81 (d,3H,J=6); MS: 489 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) 8.2 ml IM raztopine borana v tetrahidrofuranu smo dodali raztopini 4.055 g 1,2dibenzil l-terc.-butil l-(formilmetil)-4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v 40 ml suhega tetrahidrofurana. Po 5 minutnem mešanju smo zmes nakisali s 5 % vodno raztopino citronske kisline in dvakrat ekstrahirali z etil acetatom. Združene ekstrakte smo izprali z nasičeno raztopino natrijevega klorida, sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili. Ostanek smo prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/etil acetata za eluiranje. Dobili smo 2.518 g 1,2-dibenzil

l.terc.-butil l-(hidroksimetil)-4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja.

ii) Zmes 2.911 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil l-(hidroksimetil)-4-metil-l,2,2(R)-pentantrikarboksilata, 3.04 g trifenilfosfina in 1.755 g ftalimida v 50 ml suhega tetrahidrofurana smo ohladili do 0 °C in dodali 2.047 g dietil azodikarboksilata. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi pod atmosfero dušika 20 ur. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/etil acetata (5:1) za eluiranje. Dobili smo 3.001 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l-(2ftalimidoetil)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvne gumaste snovi.

iii) Na analogen način, kot smo oisali v Primeru 45 (ii-iv), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.butil 4-metil-l-(2-ftalimidoetil)-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata dobili N2-[2(R)-[1-(R ali S)-(karboksi)-3-ftalimidopropil]-4-metil]-N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS 474 (M+H)⁺.

Primer 70

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.075 g 1:1 zmesi izomerov N2-[2(R)-[l-(benziIoksikarbamoil)-2-metilpropil]-4-metil-valeril]-Nl,3dimetil-L-valinamida dobili 0.041 g N2-[2(R)-[l-(hidroksi-karbamoil)-2-metilpropil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS 358 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i), smo iz 1-benzil 4-terc.-butil 3terc.-butoksikarbonil-2(R) izobutilsukcinata in izopropil jodida dobili 1-benzil 4-terc.butil-3-terc.-butoksikarbonil-2(R)-izobutil-3-izopropilsukcinata v obliki olja;

MS: 463 (M+H) + .

ii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 2(iii), smo iz 1-benzil 4-terc.-butil 3terc.-butoksikarbonil-2(R)-izobutilsukcinata dobili 1-benzil 2(R)-izobutil 3-(RS)-izopropilsukcinat v obliki brezbarvnega olja; MS: 306 (M)⁺.

iii) 0.19 g 1-Benzil 2(R) izobutil 3-(RS)-izopropilsukcinata smo raztopili v 5 ml diklorometana in raztopino ohladili do -70 °C. Dodali smo 5 ml izobutena, nato pa dve kapljici koncentrirane žveplove kisline. Bučko smo hermetično zaprli in zmes mešali 3 dni pri sobni temperaturi. Zmes smo izlili v 5 % vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in produkt ekstrahirali štirikrat z dietiletrom. Združene ekstrakte smo izprali s 5 % vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in nato z nasičeno vodno raztopino natrijevega klorida. Raztopino smo sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili ter ostanek prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi heksana/dietiletra (8:1) za eluiranje. Dobili smo 0.134 g 1-benzil 4-terc.-butil 2(R)izobutil-3-(RS)-izopropilsukcinata v obliki brezbarvnega olja, MS: 363 (M+H)⁺.

iv) 0.134 g 1-Benzil 4-terc.-butil 2(R)-izobutil-3-(RS)-izopropilsukcinata smo raztopili v 10 ml metanola, ki je vseboval 0.08 g 10 % paladija na oglju. Po mešanju v atmosferi vodika v teku 8 ur smo katalizator odfiltrirali in topilo odstranili z uparjenjem, da smo dobili 4-terc.-butil 2(R)-izobutil 3-(RS)-izopropilsukcinata v obliki brezbarvne gumene snovi; MS: 273 (M+H) + .

v) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(i-iii), smo iz 4-terc.-butil 2(R)izobutil 3-(RS)-izopropilsukcinata dobili 1:1 zmes izomerov N²-[2(R)-[l-benziloksikarbamoil)-2-metilpropil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 399 (M+H)⁺.

Primer 71

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.115 g N²[2(R)-[2-(4-bifenilil)-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetilL-valinamida dobili 0.065 g N²-[2(R)-[2-(4-bifenilil)-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etilj4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.607.17 (m,9H), 4.36 (s,3H); 2.94-2.68 (m,6H); 2.53-2.42 (m,IH); 1.63-1.52 (m,IH), 1.501.33 (m,IH); 1.19-1.08 (m,IH); 1.07 (s,9H); 0.94 (d,3H,J=6); 0.85 (d,3H,J=6); MS: 482 (M+H)+.

Izhodni material smo dobili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 4-fenilbenzil bromida dobili N²-[2(R)-[2-(4bifenilil)-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid v obliki bele trdne snovi; MS: 572 (M+H)⁺.

Primer 72

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.155 g N²[2(R)-[2-(3-bifenilil)-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetilL-valinamida dobili 0.105 g N²-[2(R)-[2-(3-bifenilil)-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)etilj4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD): 7.58 (m,2H), 7.46-7.28 (m,6H); 7.05 (m,IH); 4.34 (s,IH); 2.98-2.68 (m,6H), 2.54-2.43 (m,IH); 1.62-1.52 (m,IH); 1.49-1.37 (m,IH); 1.23-1.10 (m,IH); 1.07 (s,9H); 0.93 (d,3H,J=6H); 0.85 (d,3H,J=6H); MS: 482 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i-v), smo iz 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata in 3-fenilbenzil bromida dobili N2-[2(R)-[2-(3bifenilil)-l(R ali S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamid v obliki bele trdne snovi; MS: 572 (M+H)⁺.

Primer 73

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 5.52 g N^[2(R)-[l-(S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili

3.92 g N2-[2(R)-[l-(S)-(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi; nmr (CD3OD): 4.27 (s,IH), 2.72-2.62 (m,4H), 2.32-2.2 (m,IH); 1.58-1.45 (m,IH); 1.43-1.28 (m,IH); 1.13-1.05 (m,4H); 1.02 (s,9H); 0.89 (d,3H,J=5); 0.83 (d,3H,J=5); MS: 330 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

i) 400 g D-levcina smo raztopili v 5 L vode, ki je vsebovala 296 ml koncentrirane žveplove kisline, in ohladili do -2 °C. Počasi smo dodajali raztopino 421 g natrijevega nitrita v 1.25 1 vode ob vzdrževanju temperature pri - 2 °C. Zmes smo mešali 1.5 ure pri 0 °C in jo nato pustili stati preko noči, da smo jo segreli do sobne temperature. Zmes smo trikrat ekstrahirali z etil acetatom. Združene organske ekstrakte smo izprali z raztopino natrijevega klorida, sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 168 g D-levcinske kisline v obliki bledo-rumenega olja.

Vodno fazo, pridobljeno na način opisan v prejšnjem odstavku, smo ohladili do - 2 °C in obdelali z natrijevim nitritom na enak način, kot smo to opisali v istem odstavku, tako, da smo dodali še 222 g D-levcinske kisline v obliki rumenega olja (skupen dobitek 390

g)· ii) 278 g Benzil bromida smo dodali ob mešanju raztopini 215 g D-levcinske kisline in 246 g trietilamina v 2.5 L etil acetata. Zmes smo nato segrevali pod refluksom 5 ur, ohladili in filtrirali za odstranitev trietilamin hidrobromida. Filtrat smo dvakrat izprali z 2M klorovodikovo kislino, vodo, nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in na koncu še z nasičeno raztopino natrijevega klorida. Organski ekstrakt smo sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 225 g benzil estra Dlevcinske kisline v obliki rumene tekočine.

iii) Raztopino 177 g benzil estra D-levcinske kisline in 69.5 g piridina v 500 ml diklorometana smo dodajali k mešani raztopini 248 g anhidrida trifluormetansulfonske kisline v 1 L diklorometana v teku 1.5 ur pri 0 °C. Zmes smo mešali pri 0 °C čez noč in nato dvakrat izprali z vodo, nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in nasičeno slanico. Organske ekstrakte smo osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 258 g rjavega olja. S flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 2 % etil acetata v heksanu za eluiranje, smo dobili 223 g benzil 2-(R)trifluorometansulfonil-4-metil-valerata v obliki rumenega olja; Rf = 0.52 (10 % etil acetat/heksan).

iv) Raztopino 147 g benzil t-butilmalonata v 150 ml suhega Ν,Ν-dimetilformamida smo dodali po kapljicah in ob mešanju v suspenzijo 14.9 g natrijevega hidrida v 800 ml Ν,Νdimetilformamida v teku 30 minut. Raztopino smo mešali pri sobni temperaturi 1 uro do prenehanja burnega izločanja plina. Raztopino smo ohladili do 0 °C in obdelali z raztopino benzil 2-(R)-trifluorometansulfonil-4-metilvalerata v 750 ml suhega diklorometana. Raztopino smo mešali 1 uro pri 0 °C in nato preko noči pri sobni temperaturi. Topilo smo odstranili z uparjenjem in ostanek raztopili v 2 L diklorometana. Raztopino smo izprali z vodo, nasičeno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in raztopino natrijevega klorida. Organske ekstrakte smo sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 276 g rumenega olja. S flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 5 % etil acetata v heksanu za eluiranje smo dobili 230.5 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v obliki brezbarvnega olja.

v) Raztopino 17.05 g 1,2-dibenzil l-terc.-butil 4-metil-l,l,2(R)-pentantrikarboksilata v 212 ml izopropanola smo hidrogenirali v prisotnosti 5.2 g 10 % paladija na oglju. Katalizator smo odstranili s filtriranjem, filtrat obdelali z 10.36 ml piperidina in 43.7 ml 40 % vodne raztopine formaldehida. Zmes smo mešali pri sobni temperaturi 4 dni, uparili do suhega in ostanek raztopili v etil acetatu. Raztopino smo izprali s 5 % raztopino citronske kisline in nasičeno raztopino natrijevega klorida in nato sušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom. Topilo smo odstranili z uparjenjem in dobljeno olje prečistili s flash kromatografijo na silikagelu ob uporabi 1.5 % metanola/diklorometana za elucijo, da smo dobili 7.98 g 4-terc.-butil-2(R)-izobutil-3-metilensukcinata v obliki olja, MS: 243 (M+H)+.

vi) Raztopino 7.92 g 4-terc.-butil-2(R)-izobutil-3-metilensukcinata v 400 ml etil acetata smo hidrogenirali v prisotnosti 790 mg 10 % paladija na oglju. Katalizator smo odstranili s filtriranjem, prostornino filtrata pa smo zmanjšali na 70 ml. Raztopino smo segrevali do 70 °C in nato obdelali s 6 ml dicikloheksilamina. Trdno snov smo raztopili v 150 ml etil acetata in raztopino pustili, da se ohladi preko noči. Trdno snov smo odfiltrirali, izprali z manjšo količino suhega dietiletra in enkrat prekristalizirali iz etil acetata. Raztopino smo dvakrat izprali z 0.5M žveplovo kislino, vodo in nasičeno raztopino natrijevega klorida. Organski sloj smo osušili nad brezvodnim magnezijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 3.32 g 4-terc.-butil-2(R)-izobutil-3(S)-metilsukcinata; MS: 245 (M+H)+.

vii) Na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(i-iii), smo iz 3.32 g 4-terc.-butil2(R)-izobutil-3(S)-metilsukcinata dobili 5.52 g N²-[2(R)-[l-(S)-(benziloksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki bele trdne snovi;

MS: 420(M+H) + .

Primer 74

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 44, smo iz 1.34 g N²[2(R)-[l-(RS)-(karboksi)-5-ftalimidopentil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida, pripravljenega na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i-iv), dobili 0.42 g N²[2(R)-[1-(R ali S)-(hidroksikarbamoil)-5-ftalimidopentil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-Lvalinamida v obliki bele trdne snovi; MS: 517 (M+H)⁺. nmr (CD3OD): 8.07 (d,lH,J=10); 7.95 (m,IH); 7.84-7.75 (m,4H); 4.24 (m,IH); 3.59 (t,2H,J=7), 2.7-2.63 (m,4H); 2.13 (m,IH); 1.68-15.4 (m,3H); 1.52-1.46 (m,IH); 1.4-1.28 (m,3H); 1.24-1.13 (m,IH); 1.09-1.02 (m,IH); 1.00 (s,9H); 0.85 (d,3H,J=6); 0.80 (d,3H,J=6).

Primer 75

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 125 mg N²[2(R)-[(R ali S)amino(benziloksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-N 1,3-dimetil-L-valinamid hidroklorida, pripravljenega na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i-v), dobili 62 mg N²-[2(R)-[(R ali S)amino)(hidroksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-Nl,3dimetil-L-valinamid hidroklorida v obliki rjavkaste trdne snovi; MS: 331.2345.

Primer 76

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 60 mg N²· [2(R)-[(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-(2-fenacetilamido)metil]-4-metilvaleril]-N 1,3dimetil-L-valinamida, pripravljenega na analogen način, kot smo opisali v Primeru 45(i78

v), dobili 46 mg N2-[2(R)-[(R ali S)-(hidroksikarbamoil)(2-fenacetilamido)metil]-4metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida v obliki rjavkasto obarvane trdne snovi;

MS: 449 (M+H)+. nmr (CD₃OD): 7.32-7.20 (m,5H); 4.45 (d,lH,J=8); 4.23 (s,IH); 3.58-3.46 (m,2H); 3.07-2.90 (m,IH); 2.72 (s,3H); 1.52-1.26 (m,3H); 1.21-1.02 (m,IH); 0.98 (s,9H); 0.86-0.78 (m,6H).

Primer 77

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 200 mg 4-[[N[2(R)-(benziloksikarbamoilmetil)-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]-maslene kisline, pripravljene na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(i-iii), dobili 162 mg 4-[[N[2(R)-(hidroksikarbamoilmetil)-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]-maslene kisline v obliki belega prahu; MS: 388 (M+H)⁺. nmr (CD3OD): 7.83 (d,lH,J=9); 4.22 (m,IH); 3.26-3.15 (m,2H); 2.98-2.90 (m,IH); 2.35-2.26 (m,3H); 2.20-2.13 (m,IH); 1.83-1.74 (m,2H); 1.62-1.42 (m,2H); 1.24-1.14 (m,IH); 1.0 (s,9H); 0.92 (d,3H,J=7); 0.86 (d,3H,J=7).

Primer 78

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 200 mg metil-4[[N-[2(R)-[(benziloksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]-butirata, pripravljenega na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(i-iii), dobili 156 mg metil4-[[N-[2(R)-[(hidroksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]-butirata v obliki belega prahu; nmr (CD3OD): 4.22 (s,IH); 3.66 (s,3H); 3.26-3.13 (m,2H); 2.982.89 (m,IH); 2.38-2.26 (m,3H); 2.20-2.13 (m,IH); 1.85-1.71 (m,2H); 1.62-1.42 (m,2H); 1.22-1.13 (m,IH); 1.0 (s,9H); 0.91 (d,3H,J=8); 0.86 (d,3H,J=8).

Primer 79

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 200 mg 4-[[N[2(R)-[(benziloksikarbamoil)metil]-4-metilvaleril]-3-metil-L-valiI]amino]-N-metil butiramida, pripravljenega na analogen način, kot smo opisali v Primeru l(i-iii), dobili 139 mg 4-[[N-[2(R)-[(hidroksikarbamoil)metil)-4-metilvaleril]-3-metil-L-valil]amino]-Nmetil butiramida v obliki bele trdne snovi; nmr (CD3OD): 4.19 (s,IH); 3.25-3.10 (m,2H); 3.0-2.89 (m,IH); 2.62 (s,3H); 2.35-2.27 (m,IH); 2.22-2.15 (n,2H); 1.82-1.72 (m,2H); 1.62-1.41 (m,2H); 1.23-1.14 1.0 (s,9H); 0.91 (d,3H,J=8); 0.86 (d,3H,J=8).

Primer 80

Na analogen način, kot smo opisali v prvem odstavku Primera 1, smo iz 0.165 g N²[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-(karbamoil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida dobili 0.11 g N²-[2(R)-4-karbamoil-l(R ali S)-(hidroksikarbamoil)butil-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida, v obliki bele trdne snovi; nmr (MeOD); 4.15 (s,IH); 2,61 (s,3H); 2.58 (dt,lH,J=11,3), 2.12-2.02 (m,3H); 1.58-1.45 (m,4H); 1.33-1.18 (m,2H); 1.02-0.93 (m,IH); 0.92 (s,9H); 0.78 (d,3H,J=6); 0.73 (d,3H,J=6); MS: 401 (M+H)+.

Izhodni material smo pripravili na naslednji način:

Zmes 0.177 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4-(karboksi)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamida, 0.062 g amonijeve soli 1-hidroksibenzotriazola, 0.05 ml N-metilmorfolina in 0.078 g l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidroklorida v 5 ml suhega dimetilformamida smo mešali 1 uro pri 0 °C in nato še 2 dni pri sobni temperaturi. Raztopino smo izlili v vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata in produkt ekstrahirali s štirimi deli etil acetata. Združene etil acetatne ekstrakte smo izpirali zapored z vodno raztopino natrijevega hidrogen karbonata, IM klorovodikovo kislino in nasičeno raztopino natrijevega klorida, sušili nad brezvodnim natrijevim sulfatom in uparili, da smo dobili 0.166 g N²-[2(R)-[1(R ali S)-(benziloksikarbamoil)-4(karboksi)butil]-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamida v obliki brezbarvne gumaste snovi; MS: 491 (M+H)⁺.

Naslednji Primeri prikazujejo farmacevtske pripravke, ki vsebujejo derivate aminokislin v smislu predloženega izuma:

Primer A

Tablete, ki vsebujejo naslednje sestavine, lahko pripravimo na običajen način:

Sestavina	Na tableto
Derivat amino kisline	10.0 mg
Laktoza	125.0 mg
Koruzni škrob	75.0 mg
Smukec	4.0 mg
Magnezijev stearat	1.0 mg
Skupna masa	215.0 mg

Primer B

Kapsule, ki vsebujejo naslednje sestavine, lahko pripravimo na običajen način:

Sestavina	Na kapsulo
Derivat amino kisline	10.0 mg
Laktoza	165.0 mg
Koruzni škrob	20.0 mg
Smukec	5.0 mg
Masa polnitve za kapsulo	200.0 mg

Za:

Claims

PATENTNI ZAHTEVKI

1. Derivati aminokislin s splošno formulo

Rl predstavlja vodik, amino, zaščiten amino, acilamino ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino, zaščitenim amino, acilamino, maleimido, sukcinimido, naftalimido, 2,3-dihidro-l,3-diokso-lHbenz[d,e]izokinol-2-ilom, karboksilom, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)aminom, karboksi-nižji alkanoilaminom, pirolidino ali morfolino;

R^ predstavlja vodik ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, amino, zaščitenim amino, di(nižji alkil)amino, gvanidino, karboksilom, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkiljkarbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkoksi)fosfinilom, dihidroksifosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino;

R3 predstavlja vodik ali nižji alkil po potrebi substituiran s hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino ali zaščitenim amino;

R4 predstavlja vodik, hidroksi, nižji alkoksi ali benziloksi, in

RS predstavlja vodik ali halogen, in njihove farmacevtsko sprejemljive soli.
2. Spojine po zahtevku 1, kjer predstavlja vodik, amino, acetilamino ali nižji alkil, po potrebi substituiran s hidroksi, zaščitenim hidroksi, amino ali zaščitenim amino, in R² predstavlja vodik ali nižji alkil, po potrebi substituiran z arilom, amino, zaščitenim amino, acetilamino, di(nižji alkiljamino, gvanidino, karboksi, zaščitenim karboksi, di(nižji alkoksi)fosfinilom, dihidroksifosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino.
3. Spojine po zahtevku 1 ali 2, označene s tem, da R^ predstavlja vodik, amino, acetilamino, benziloksikarbonilamino, ali nižji alkil po potrebi substituiran z amino, fenilom, ftalimido, sukcinimido, karboksi, alkoksikarbonilom, morfolino, hidroksi ali acetoksi.
4. Spojine po zahtevku 3, označene s tem, da R^ predstavlja vodik, amino, acetilamino, benziloksikarbonilamino, metil, 5-amino-pentil, 4-ftalimidobutil, 5ftalimidopentil, 5-hidroksipentil, 5-acetoksi-pentil, aminometil, ftalimidometil, sukcinimidometil, benzil, 3-fenilpropil, 3-karboksi-propil, 3-metoksikarbonilpropil, benzoilaminometil, morfolinometil, acetilaminometil, 2-ftalimidoetil, 3-hidroksipropil ali 3-acetoksipropil.
5. Spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 4, označene s tem, da R²predstavlja nižji alkil po potrebi substituiran z amino, aril, gvanidino, karboksi, di(nižji alkoksi)fosfinil, dihidroksifosfinil ali morfolino.
6. Spojine po zahtevku 5, označene s tem, da R² predstavlja metil, 4-aminobutil, 1feniletil, 5-karboksipentil, dietoksifosfinilmetil, dihidroksifosfinilmetil ali 5morfolinopentil.
7. Spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 6, označene s tem, da R^ predstavlja vodik, hidroksimetil, 2-aminoetil ali 4-aminobutil.
8. Spojine po zahtevku 7, označene s tem, da R^ predstavlja vodik.
9. Spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 8, označene s tem, da R^ predstavlja vodik, hidroksi ali benziloksi.
10. Spojine po zahtevku 9, označene s tem, da R^ predstavlja vodik ali hidroksi.
11. Spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 10, označene s tem, da R^ predstavlja vodik ali brom.
12. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N2-[(R)-[hidroksikarbamoilmetilj4-metilvaleriI]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
13. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R ali S)-[1(S)(hidroksikarbamoil)etil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid (izomer 1).
14. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R ali S)-[[[(5-bromo-2,3dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]-metil]4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
15. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R ali S)-[[(R)-(amino)[(5bromo-2,3-dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)fosfinil]metil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
16. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R ali S)-[[(R)-(amino)[(2,3dihidro-6-hidroksi-l,3-diokso-lH-benz[d,e]izokinol-2-il)metil](hidroksi)-fosfinil]metil]4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
17. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R)-[1(R ali S)(hidroksikarbamoil)-2-ftalimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
18. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R)-[1(R ali S)(hidroksikarbamoil)-4-(metoksikarbonil)butil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
19. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N2-[2(R)-[1(R ali S)(hidroksikarbamoil)-4-fenilbutilj-4-metilvaleril]-N^,3-dimetil-L-valinamid.
20. Spojina po zahtevku 1, označena s tem, da je N^-[2(R)-[1(R ali S)· (hidroksikarbamoil)-2-sukcinimidoetil]-4-metilvaleril]-Nl,3-dimetil-L-valinamid.
21. Kisline, označene s tem, da imajo splošno formulo

R¹⁰ kjer RlO predstavlja vodik, zaščiten amino, acilamino ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, zaščitenim hidroksi, zaščitenim amino, acilamino, maleimido, sukcinimido, naftalimido, 2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il, zaščitenim karboksi, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alikil)amino, karboksi-nižji alkanoilamino, pirolidino ali morfolino, R^O pa predstavlja vodik ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, zaščitenim amino, di(nižji alkil)amino, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)-karbamoilom, di(nižji alkoksi)fosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino.
22. Spojine, označene s tem, da imajo splošno formulo kjer je benziloksiformamido, R^ ima pomen naveden v zahtevku 21 in R^l ima katerokoli vrednost za R^O navedeno v zahtevku 21, ali predstavlja nitrogvanidino.
23. Kisline, označene s tem, da imajo splošno formulo kjer imata R^ in pomen naveden v zahtevku 1 in ima RlO v zahtevku 21 definirani pomen, pa predstavlja vodik ali nižji alkil po potrebi substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino.

(Vlij

CO— NH—R²
24. Spojine, označene s tem, da imajo splošno formulo kjer imajo R^, R^, r3, r4 j_n r5 _v zahtevku 1 navedeni pomen in R^ predstavlja nižji alkil.
25. Spojine, označene s tem, da imajo splošno formulo kjer imata R^ in R^O v zahtevku 21 navedeni pomen.
26. Spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 20, označene s tem, da so namenjene za uporabo kot terapevtsko aktivne snovi.
27. Spojine po kateremkoli izmed zahtevkov od 1 do 20, označene s tem, da so namenjene za uporabo za zdravljenje ali preventivo degenerativnih bolezni sklepov ali za zdravljenje invazivnih tumorjev, ateroskleroze ali multiple skleroze.
28. Postopek za pripravo spojin po kateremkoli izmed zahtevkov od 1 do 20, označen s tem, da je izveden

a) z reakcijo kisline s splošno formulo

HOOC

R¹⁰ (ID kjer RJO predstavlja vodik, zaščiten amino, acilamino ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, zaščitenim hidroksi, zaščitenim amino, acilamino, maleimido, sukcinimido, naftalimido, 2,3-dihidro-l,3-diokso-lH-benz-[d,e]izokinol-2-il, zaščitenim karboksi, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alikiljamino, karboksi-nižji alkanoilamino, pirolidino ali morfolino, R²^ pa predstavlja vodik ali nižji alkil, kateri je po potrebi substituiran z arilom, zaščitenim amino, di(nižji alkil)amino, zaščitenim karboksilom, karbamoilom, mono(nižji alkil)karbamoilom, di(nižji alkil)-karbamoilom, di(nižji alkoksi)fosfinilom, pirolidino, piperidino ali morfolino, s spojino s splošno formulo

H₂N-OZ (III) kjer Z predstavlja vodik, tri(nižji alkil)silil ali difenil(nižji alkil)sili 1, ali, če je potrebno, z odcepitvijo katerekoli difenil (nižji alkil)sililne skupine prisotne v reakcijskem produktu, ali

b) s katalitičnim hidrogeniranjem spojine s splošno formulo

A¹

R¹⁰

CO — NH

CO — NH—R²¹ (IV) kjer je benziloksiformamido, R-^θ ima v tem zahtevku prej navedeni pomen in R²^ ima katerokoli v tem zahtevku prej dano vrednost za R²Q ali predstavlja nitrogvanidino, ali

c) z reakcijo amina s splošno formulo

H₂N

NH—R²⁰ (V) kjer ima R²^ prej v tem zahtevku navedeni pomen, s kislino s splošno formulo (VI) kjer imata R^ in R^ pomen naveden v zahtevku 1, R^ ima v tem zahtevku prej definirani pomen, R-^θ pa predstavlja vodik ali nižji alkil po potrebi substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino.

ali

d) z obdelavo spojine s splošno formulo (vn) kjer imajo Rl, R², R², R^ in R^ v zahtevku 1 definirani pomen in R^ predstavlja nižji alkil, s kislino ali halotri(nižji alkil)silanom, ali

e) z reakcijo spojine s splošno formulo kjer imata R^ in R² pomen naveden v zahtevku 1 in ima R^ v tem zahtevku prej definirani pomen, s spojino s splošno formulo

R¹⁰ (IX) kjer imata R^ in R²^ v tem zahtevku prej definirani pomen, ali

f) z bromiranjem spojine s formulo I, v kateri A predstavlja skupino s formulo (b), v kateri je R^ hidroksi in R^ vodik, ali

g) z odcepitvijo zaščitne skupine ali skupin iz spojine s formulo I, kjer Rl predstavlja zaščiten amino ali nižji alkil substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino in/ali R² predstavlja nižji alkil substituiran z zaščitenim amino ali zaščitenim karboksilom in/ali R² predstavlja nižji alkil substituiran z zaščitenim hidroksi ali zaščitenim amino, ali

h) z obdelavo spojine s formulo I, v kateri R² predstavlja di(nižji alkoksi)fosfinil-(nižji alkil), s kislino ali s halotri(nižji alkil)silanom, ali

i) z aciliranjem spojine s formulo I, v kateri R¹ predstavlja amino ali amino-nižji alkil, ali

j) z odprtjem obroča spojine s formulo I, v kateri R^ predstavlja ftalimido(nižji alkil) ali sukcinimido-(nižji alkil), in

k) v kolikor je potrebno, s pretvorbo dobljene spojine s formulo I v farmacevtsko sprejemljivo sol.
29. Postopek po zahtevku 28, označen s tem, da spojine iz zahtevka 2 proizvedemo na način b), c), d), e), f), g), h), i) in/ali k) postopka.
30. Farmacevtske zmesi, označene s tem, da vsebujejo spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 20 in terapevtsko sprejemljiv material kot nosilec zmesi.
31. Postopek za proizvodnjo farmacevtske zmesi, označen s tem, da obsega formuliranje učinkovite množine spojine po kateremkoli izmed zahtevkov 1 do 20 v galensko obliko skupaj s terapevtsko sprejemljivim nosilnim materialom.