SI8210860A8 - Postopek za pripravo 4’-jodo derivatov antraciklinskih glikozidov - Google Patents

Description

POSTUPAK ZA DOBIJANJE 4'-JODO DERIVATA ANTRACIKLINSKIH GLIKOZIDA

Oblast tehnike

Pronalazak je iz oblasti sinteze organskih jedinjenja, bliže policiklišnih glikozidnih jedinjenja. Oznaka pronalaska prema Medjunarodnoj klasifikaciji je C 07 H 15/24; A 61 K 31/71.

Tehniški problem

Pronalaskom je rešen tehniški problem postupka za sintezu ης>vih antibiotski aktivnih 4'-jodo derivata antraciklinskih glikozida, polazeči od podesno odabranih odgovarajuših derivata rubicina.

Stanje tehnike

Pronalazak se odnosi na postupak za dobijanje novih jedinjenja, koja nisu do sada opisana u nauči. Postupci za dobijanje slišnih analoga su, medjutim, poznati iz U.S. patenata 4,303,785 (Umezawa i saradnici) i 4,345,070 (Suarato i saradnici).

U U.S. patentu 4,303,785 opisan je postupak za dobijanje jedinjenja formule:

1987

- la eterifikacijom hidroksilne grupe u C-4' položaju polaznog materijala daunomicina, odnosno eterifikacijom hidroksilnih grupa u C-4' i C-14 položajima polaznog materijala adriamicina. 1 2

Primer značenja za R i R je tetrahidropiranil.

U.S. patent 4,345,070 odnosi se na postupak za dobijanje 4'deoksidoksorubicina i 4'-deoksidaunorubicina. U ovom patentu, koji odgovara jugoslovenskoj prijavi P-2300/81, naslovna jedinjenja se dobijaju prema sledečoj reakcionoj šemi:

- Ib -

Intermedijerno jedinjenje (V) koristi se kao polazna materija za dobijanje 4'-jodo jedinjenja prema sadašnjem pronalasku.

Opis rešenja tehničkog problema sa primerima izvodjenja

Postupkom iz sadašnjeg pronalaska dobijaju se jedinjenja formule:

u kojoj je R atom vodonika ili hidroksilna grupa.

Utvrdjeno je da glikozidi dobljeni postupkom prema sadašnjem pronalasku ima ju i.zvanrednu ant itumornn .ί’.Ήνη^·Η·.

Polazni materijal za njihovo pravljenje je 4*-dsoksi-4’-Jodo-Ntrif luoroacetildaunorubicin, intermedijerno jedinjenje koje je. več opisano u našoj Evropakoj Patentnoj Prijavi N. 81107618.1 (24.9.81).

Blaga alkalna hidroliza pomenutog intermediJera sa vodenim raetvorom o.1 N NaOH obezbedjuje novi 4^,-deoksi-4'-Jododaunorublcln koji. kaenljom reakcijom sa bromom prelazi, preko 14-bromo derivata, u njegov 4'-deoksi-4'-jododokaorubicinaki analog.

Novi antraciklinski analozi iz pronalaska iepoljavaju antitumornu aktivnost. Odredjeno, 4’-deoksi-4'-Jododoksorubicin (Ij R » OH) i8poljava značajnu aktivnost na eksperimentalnom tumoru na miševima.

Prema torne, pronalazak u daljam aspektu, obezbedjuje farmaoeuteke preparate koji obuhvataju terapeutski efikasnu količinu antraciklinskog glikozida formule 1 u smeši sa farmaceutski prihvatljivim razblaživačem ili nosačem, i poetupke za tretiranje izvesnlh turnora na sisarima koji obuhvataju davanje pacijentu koji je napadnut tumorom, terapeutski efikasne količine pomenutih jedinjenje.

Pronalažak Če sada biti opiaan detaljnije u sledečim preparativnlm prlmerima i sa biološkim podečima.

Primer 1

4*-deoksi-4*-jododaunorublcln (I> R « H)(Χ00-0138)

Rastvor 2.0 g 4’-Jodo-N-trifluoroaoetlldaunorubicina u 10 ml acetona tretira se sa 80 ml anhidrovanog rastvora 0.1 N NaOH. Poale 3 časa na 0°C, rastvor se podeai na pH 4.5 sa 0.1N vodenim HC1 i ekstrahuje se sa hloroformom radi eliminisanja aglikona.

Vodena faza se tada podesi na pH 8.6 i ekstrahuje se sa hloroformom. Spojeni ekstrakti se suše preko anhidrovanog natrijum-sulfata, kon3 centruju se na malu zapraminu i zakieele na pH 4.5 aa 0.1 N metanolnim hlorovodonikom tako da se omoguči kristalizacija naslovnog jedinjenja u obliku hlorhidrate. Prinoe 1.5 g, t.t. 157° (rasp.)j FD-MS«

637 (M⁺)

TLC na Kieselgel pločarna F^^ (Merck) koriščenjem

CHClgiMeOH« H₂0 « AcOH (80»20i7«3) v/v) Rf - 0.72.

Primer 2 *-deoksl-4'-jododoksorublcln (Ij R « 0H)(X00 - 0163)

Rastvor 4'-daoksi-4'-jododaunorubicina u smeši metanola i dioksana, prema postupku koji je opisan u U.S.P. 3.603.124, tretira se sa bromom tako da se formira 14-bromo derivat, koji tretiranjem sa vodenim rastvorom natrijum-formiJ ata daje 4'-deokei-4’-Jododoksorubicin koji ee lzoluje kao hlorhidrat.

T.t. 230°C (rasp.)j FD-MS: 653 (M⁺)

TLC na Kieselgel pločama ^54 (Merck) koriščenjem

CHClg « MeOH : H₂0 1 AcOH (80:20:7:3 v/v) Rf - 0.5.

BloloSka aktivnost jedinjenja Χ00-0138 i Χ00-0163

Jedinjenja su testirana uporedjivanjem aa daunorubicinom (DNR) 1 deoksirubicinom (DX) protiv HaLa čelija in vitro. Podacl navedeni u Tablici 1 pokazuju da je Χ00-0138 manj e oitotoksičan od DNR, dok Je Χ00-0163 citotoksičniji od DX. Antitumorna aktivnost Je precenjena ln vlvo na miSevima koji imaju Ρ38Θ ascitnu leukemiju. Rezultati au navedeni u Tablici 2. Oba nova derivata su aktivni protiv Ρ3Θ8 leukemije. Naročito Je interesanten rezultat dobiven tretiranjem tumornih miSeva sa Jedinjenjem Χ00-0163 t pod optimalnim uslovima, ne-tokaična doza od 15 mg/kg, Χ00-163 izločila je viSe od 50% miSeva (6/10), a doza od mg/kg izlačila je 3/10 miSeva i dala Je značajno povečanja livotnog veka u porodjanju aa kontrolama (205%)· Zbog toga aa antitumorna

- 4 aktivnost Χ00-0163 definiža kao bolja od DX koji, pod optimalnim uslovima sa ne-toksičnom dozom od 10 mg/kg leči samo povremeno tumore na miSevima.

Jedinjenje Χ00-13Θ je takodje testirano protiv Gross leukemije (tretiranje na Dan 1 posle inokulaoije turnora).

Podaoi koji su navedeni u Tablici 3 pokazuju da je pri optimalnoj na-toksičnoj dozi od 11.6 mg/kg, Χ00-013Θ pokazao antitumornu aktivnost koja je bolja od DNR i slična sa 0X.

Tablica 1. Efekat na efikasnost kloniranja HeLa čelija®

Jedinjenje	Doza (ng/ml)	t
Daunorubicin	12.5	7	7
	6.25	53
	3.1	110
Χ00-0136	100	0	15
4 ’-deoksi-4*-jododaunorubicin	25	5
	6.2	109
Oeoksirubicin	25	0
	12.5	16
	6.2	70
Χ00-0163	25	0	5.5
4'-deoksi-4’-Jodo-	6.2	16
doksorubicin	1.5	91
	0.39	104

^aTretiranje tokom 24 časa

- 5 Tablica 2. Efekat protiv P 3Θ8 aecitne leukemije⁸

JedinJenJa	Doza*3 (mg/kg)	T/Cc *	LTSd	Toksični efekti & uginuča
Oaunorubicin	2.9	160, 165	0/10,0/10	0/10,0/10
	4.4	160, 185	0/10,0/10	1/10,0/10
	6.6	175, 135	0/10,0/10	7/10,7/10
Χ00-0138	4.4	140	0/10	0/10
	6.6	155	1/10	0/10
	10	165,75	0/10,0/10	0/10,6/10
	15	70	0/10	8/10
	22.5	60	0/10	10/10
Doksorubicin	4.4	210	0/10	0/10
	6.6	260	0/10	0/10
	10	265	1/10	0/10
Χ00-0163	6.6	240	0/10	0/10
	10	305	3/10	0/10
	15	>620	6/10	0/10
	22.5	390	3/10	1/10

^aEkepetimenti su vrženi na BDFa ili CDF 1 ndževima, ionokuliranim sa 10 čelija leukemije i.p.

I.p. tretiranje na Dan 1 posle inokulacije tuTora.

°Ρτο8θ6ηο vreme preživljavanja tretiranih miževa/proaečno vreme preživljavanja kontrola. x 100

Dugotrajno preživele životinje (preko 60 dana) ⁸Prooenjena na bazi nalaza autopsije.

Tablica 3. Efekat protiv Gross laukamije^fl

Dedinjenje	Dozab (mg/kg)	T/C %C	LTSd	Toksični efekti® uginuča
Daunorubioin	15	191	0/8	0/8
	22.5	158	0/8	4/8
Oaksorubicin	7.7	150	0/10	0/10
	10	175	0/10	0/10
	13	200	0/10	0/10
	16.9	233	0/10	0/10
	22	266	0/10	1/10
Χ00-0138	11.8	208	0/10	0/10 .
	15.4	208	0/10	2/10
4*-jododaunorubicin	20	175,117	0/8,0/10	4/8,6/10
	30	100	0/8	8/8
	40	92	0/8	8/8

^flC3H miSevi inektirani su i.v. sa 2 χ 10θ leukemičnih čelija

I.v.

tratiranjs na Dan 1 posle inokuliranja tunora.

c.d^e vidi Tablicu 2

Claims (1)

1. Postupak za dobivanje novih 4'-jodo derivata antraciklinskih glikozida opšte formule u kojoj je R vodonik ili hidroksilna grupa, naznačen time, što se 4'-deoksi-4'-jodo-N-trifluoroacetildaunorubicin, rastvoren u acetonu, podvrgava blagoj alkalnoj hidrolizi tretiranjem sa 0.1 N vodenim rastvorom NaOH, na temperaturi od oko 0°C, da bi se dobilo jedinjenje formule (I) u kojoj R predstavlja vodonik u obliku slobodne glikozidne baze, koje se na kraju izoluje u obliku hlorhidratne soli? i što se,prema potrebi, tako dobljeno jedinjenje formule (I), rastvoreno u smeši metanol/dioksan, na temperaturi oko 10°C i u prisustvu etil ortoformata, podvrgava reakciji sa rastvorom broma u hloroformu da bi se dobio 14-bromo derivat koji nakon toga hidrolizuje, na sobnoj temperaturi, sa vodenim rastvorom natrijum formata, da bi dao jedinjenje formule (I) u kojoj R predstavlja OH, u obliku slobodne baze, koje se takodje izoluje u obliku hlorhidratne soli tretiranjem sa metanolskim rastvorom HC1.