CS227686B2

CS227686B2 - Způsob výroby protinádorově účinné antracyklinové glykosidové sloučeniny

Info

Publication number: CS227686B2
Application number: CS287782A
Authority: CS
Inventors: Antonio Suarato; Sergio Penco; Federico Arcamone; Anna M Casazza
Original assignee: Erba Farmitalia
Priority date: 1982-04-22
Filing date: 1982-04-22
Publication date: 1984-05-14

Abstract

Tento vynález se týká způsobu výroby protinádorově účinná antracyklinové glykosidové sloučeniny obecného vzorce I

Description

kde .

R znamená atom vodíku nebo hydroxyskupinu, který spočívá v tom, že se 4 -deoxy-4 -jod-N-trifluoracetyldaunorubicin obecného vzorce II

rozpuštěný v acetonu podrobí alkalické hydrolýze 0,1 N vodným roztokem hydroxidu sodného prováděné za mírných podmínek po dobu 3 hodin za teploty 0 °C, aby se získala volná glykosidová báze obecného vzorce I, kde R znamená vodík, která se zpracováním s metanolickým' roztokem kyseliny chlorovodíkové izoluje jako hydrochlorid a popřípadě se nechá reagovat rozpuštěna ve směsi dioxanu a metanolu, s roztokem bromu v chloroformu za vzniku 14-bromderivétu, ze kterého se zpracováním s vodným roztokem fonniátu sodného za teploty místnosti po 84 hodinách získá glykosidové sloučenina obecného vzorce I, kde R znamená hydroxyskupinu, která se potom izoluje jako hydrochlorid.

Oba nové glykosidy, to jest 4-deoxy-4joddaunorubicin a 4-deoxy-4-joddoxirubicin, vyrobitelné způsobem podle vynélezu mají vynikající děinek proti zhoubným nádorům.

Výchozím materiálem pro jejich výrobu je - jak již bylo uvedeno - 4*-deoxy-4-jod-N-trifluoracetyldaunorubicin. Tato sloučenina je popsána v publikované majitelově Evropské patentové přihlášce č. 81 10 7618.1 z 24. září 1981,

Nové antracyklinové glykosidy podle tohoto vynálezu projevují účinek proti zhoubným nádorům. Zvláště 4*-deoxy-4-joddoxorubicin (sloučenina obecného vzorce I, kde R znamená hydroxyskupinu) má zřetelný účinek při pokusech se zhoubným nádorem na myších.

Farmaceutické, prostředky obsahující terapeuticky účinné množství antřacyklinového glykosidu obecného vzorce I se pro léčebné účely podávají ve směsi s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem a používají se k ošetřování určitých zhoubných nádorů savců tím, že se podávají postiženému pacientovi terapeuticky účinná množství těchto sloučenin.

Vynález bude dále detailněji popsán pomocí výrobních příkladů a biologických údajů.

Přikladl

4’-deoxy-4 -joddaunorubicin (1}R = Η) (XOO-0138)

Roztok 2,0 g 4-jod-N-trip.uoracetyldaunorubicinu v 10 ml acetonu se zpracuje s 80 ml 0,1 N vodného roztoku hydroxidu sodného. Po tříhodinovém stání za teploty 0 °C se roztok upraví na pH 4,5 pomocí 0,1 N vodné kyseliny chlorovodíkové a extrahuje chloroformem, aby se odstranily aglykony.

Vodný roztok se potom upraví na pH 8,6 a extrahuje chloroformem.

Spojené extrakty se suší bezvodýnt síranem sodným, odpaří na malý objem a okyselí ne pH 4,5 0,1 M metanolickým roztokem kyseliny chlorovodíkové, aby vykryštelovala titulní sloučenina ve formě jejího hydrochloridu. Výtěžek činí 1,5 g, teplota tání: ,57 °C (rozklad), hmot. spektrum: 637 (M⁺).

Chromatografie na tenkých deskách ze silikagelu ^F254 (^firniy Merck) za použití směsi chloroformu, metanolu, vody a kyseliny octové v objemovém poměru 80:20:7:3 má R^ = 0,72.

Příklad 2

4*-deoxy-4joddoxorubicin (I; R = OH) (XOO-0163)

K 1,26 g (1,87 mmol) hydrochloridu 4*-deoxy-4 -joddaunorubicinu rozpuštěného ve 14 ml metanolu a 36 ml dioxanu se přidá 1 ml etylorthoformiátu. Roztok se za teploty 10 °C zpracuje s 1,96 mmol bromu ve 3 ml chloroformu a 1,17 mmol chlorovodíku v metanolu.

Po jedné hodině se roztok vylije na směs 100 ml petroléteru a 200 ml dietyléteru. Vzniklá sraženina se odfiltruje, rozpustí ve 150 ml dioxanu a 150 ml 0,25 N kyseliny bromovodíkové a udržuje za teploty 25 °C přes noc. K roztoku se přidá 11 g mravenčenu sodného ve 110 ml vody. Za 24 hodiny se roztok odpaří ve vakuu a odparek rozpustí ve směsi 200 ml chloroformu s metanolem, přičemž obě rozpouštědla jsou v objemovém poměru 13:6. Organická fáze se promyje 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Po odpaření rozpouštědla sejja odparek působí ekvivalentním množstvím chlorovodíku v metanolu. Získá se 0,65 g hydrochloridu é^-deoxy-é^-joddoxorubicinu, který má teplotu tání 230 °C (rozklad); hmotnostní spektrum 653 (M⁺) a podle chromatografie na tenké vrstvě (silikagelové desky ^254 (^Merok) ^za použití směsi chloroformu, metanolu, vody a kyseliny octové v objemovém poměru 80:20:7:3 má R^. = 0,5.

Biologická aktivita sloučenin XOO-0138 a XOO-0163:

Sloučeniny byly testovány v porovnání s daunorubičinem (DNR) a doxorubicinem (DX) in vitro proti HeLa buňkám. Údaje uvedené v tabulce I ukazují, že sloučenina XOO-0138 je méně cytotoxická než DNR, zatímco sloučenina XOO-0,63 je cytotoxičtějěí než DX. Účinek proti zhoubnému nádoru se hodnotil in vivo na myších, které trpí P 388 ascitickou leukémií. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2. Oba nové deriváty jsou účinné proti leukémii.P 388. Zvláště zajímavý je výsledek dosažený ošetřením myši trpící zhoubným nádorem, který byl proveden sloučeninou XOO-0,63: při optimální netoxické dávce 15 mg/kg se sloučeninou XOO-0163 vyléčí více než 50 % myší (6/10) a při dávce 10 mg/kg se vyléčí 3/10 myší a dosáhne se zřetelně vyšší délky života v porovnání s kontrolní skupinou (205 %). Proto protinádorový účinek sloučeniny XOO-0163 je rozhodně větší než u sloučeniny DX, která při optimální netoxické dávce 10 mg/kg léčí pouze nahodile zhoubný nádor myší.

Sloučeniny XOO-0138 byla také testována proti Gross leukémii (ošetření v den 1 po naočkování zhoubného nádoru). Údaje uvedené v tabulce 3 ukazují, že při optimální netoxické dávce 11,8 mg/kg sloučeniny XOO-0138 vykazuje protinádorový účinek, který předči účinek DNR a je podobný jako u sloučeniny DX.

Tabulka 1

Účinek na HeLa buňky⁸)

Sloučenina	Dávka (mg/ml)	%	Dávka (mg/ml)
daunorubiein	12,5	7	7
	6,25	53
	3,1	110
sloučenina XOO-0138	100,0	0	15
(4 ^,-deoxy-4joddaunorubicin)	25,0	5
	6,2	109
doxorubicin	25,0	0	8
	’2,5	16
	6,2	70
sloučenina XOO-0163	25,0	0	5,5
(4-deoxy-4-joddoxorubiein)	6,2	16
	1,5	91
	0,39	104

^a) ožetřování po 24 hodiny *

Tabulka 2

Účinek proti P 388 ascitioké leukémii⁸)

Sloučenina	Dávka^b) (mg/kg)	T/C^c) %	LTS^d)	Toxické uhynutí·)
daunorubiein	2,9	160, 165	0/10,0/10	0/10,0/10
	4,4	160, 185	0/10,0/10	1/10,0/10
	6,6	175, 135	0/10,0/10	7/10,7/10
sloučenina XOO-0138	4,4	140	0/10	0/10
	6,6	155	1/10	0/10
	10,0	185,75	0/10,0/10	0/10,6/10
	15,0	70	0/10	8/10
	22,5	60	0/10	10/10
doxorubicin	4,4	210	0/10	0/10
	6,6	260	0/10	0/10
	10,0	265	1/10	0/10
sloučenina XOO-OI63	6,6	240	0/10	0/10
	10,0	305	3/10	0/10
	15,0	>620	6/10	0/10
	22,5	390	3/10	1/10

Vysvětlivky k tabulce 2:

^a) Pokusy se prováděly na myších BDP 1 nebo CDF 1, kterým bylo intraperitoneálně naočkováno 10® buněk leukemie.

®) Ošetřeni intrapritoneálně v den 1 po naočkování zhoubného nádoru.

^c) Střední doba přežití ošetřených myěí/střední doba přežití kontrolní skupiny x 100.

^d) Dlouhodobé přežití (delší než 60 dní).

^e) Hodnoceno na základě pitevního nálezu.

Tabulka 3

Účinek proti Gross leukémii“)

Sloučenina	Dávka®) (mg/kg)	T/C^c) *	LTS^d)	Toxické uhynutí*)
daunorubicin	15,0	191	0/8	0/8
	22,5	158	0/8	4/8
doxorubicin	7,7	150	0/10	0/10
	10,0	175	0/10	0/10-
	13,0	200	0/10	0/10
	16,9	233	0/10	0/10
	22,0	266	0/10	1/10
sloučenina XOO-0138	11,8	208	0/10	0/10
	’5,4	208	0/10	2/10
4joddaunorubicin	20,0	175,117	0/8,0/10	4/8,6/10
	30,0	100	0/8	8/8
	40,0	92	0/8	8/8

^a) Myši C3H obdržely intravenózní injekcí 2 x 10® buněk leukemie. ®) Ošetřeno intravenózně v den 1 po naočkování zhoubného nádoru.

^c) Viz tabulka 2.

^d) Viz tabulka 2.

*) Viz tabulka 2.

Claims

pSedmét vynálezu

1» Způsob výroby protinádorové účinné antracyklinové glykosidové sloučeniny obecného vzorce I kde

R znamená atom vodíku nebo hydroxyskupinu, ve formě hydrochloridu, vyznačující se tím, že se 4*-deoxy-4'-jod-N-trifluoracetyldaunorubicin obecného vzorce II rozpuštěný v acetonu podrobí alkalické hydrolýze 0,1 N vodným roztokem hydroxidu sodného prováděné za mírných podmínek po dobu 3 hodin za teploty 0 °C, aby se získalá volná glykosidová báze obecného vzorce I, kde R znamená vodík, která se zpracováním s metanolickým roztokem kyseliny chlorovodíkové izoluje jako hydrochlorid a popřípadě se nechá reagovat rozpuštěna ve směsi dioxanu a metanolu, s roztokem bromu v chloroformu za vzniku 14-bromderivátu, ze kterého se zpracováním s vodným roztokem formiátu sodného za teploty místnosti po 24 hodinách získá glykosidová sloučenina obecného vzorce I, kde R znamená hydroxyskupinu, která se potom izoluje jako hydrochlorid.