SE416204B - Forfarande for framstellning av cefalosporiner av laktoltyp - Google Patents

Description

7316419-s 2 10 15 20 25 30 35 oxidation av motsvarande 3-hydroximetylestrarp exempelvis den ameri- kanska patentskriften 3 351 596, den amerikanska patentskriften 3 682 903, tyska Offenlegungsschrift 2128605 och Journal of the Meaicinal cnemistry io, 966, (1967), har man ej kan: :in någon lämp- lig metod för framställning av föreningen (I) som är en hydrolyserad form av nämnda estrar. c I Fastän man kanske skulle tänka på möjligheten att hydrolys av 3-formyl-3-cefenrü-karboxylsyraestrar skulle ge föreningarna (I) är detta förfarande olämpligt av praktiska skäl om förestring av 3-for- myl-3-cefenßü-karboxylsyror avses utan samtidig övergång av dubbel- bindníngen från A3 till A2, kan förfarandet endast genomföras med diazoföreningar såsom diazometan, diazoetan, difenyldiazometan och fenyldiazoetan. Dessutom fordrar hydrolysen av estrarna så drastiska betingelser att den oundvikligen åtföljs av sönderdelning av estrar- na vilket leder till komplexa resultat. Även om man genomför förestringen utgående från 3-acetoximetyl- -3-cefem-4-karboxylsyror följt av selektiv hydrolys av 3-acetoxigrup- pen, selektiv oxidation av 3-hydroximetylgruppen och hydrolys av U-karboxylsyraestern kan dessa svårigheter ej undvikas.

En möjlig alternativ metod är isomerisering av en 7-fenylacetyl- amino-3-formyl-2-cefem-U-karboxylsyra (den amerikanska patentskrif- ten 3 682 903) men detta är olämpligt eftersom utbytet av utgångsma- terialet som skall framställas från en kommersiellt tillgänglig före- ning och utbytet av övergångsreaktionen båda är mycket låga.

Enligt föreliggande uppfinning har det efter intensivt forsk- ningsarbete visat sig att föreningarna (I) kan erhållas lätt och med utmärkta utbyten genom att en förening med allmänna formeln (II) I - ._ -COOH ,. _,_ - - vari H1 och R2 har ovan angiven betrdelse, eller salter därav bringas att reagera vid 0-30°C med kromsyraanhydrid i ett organiskt lösningsmedel under det att reaktionsblandningens pH-värde upprätt- hålles vid ett värde nära pKa-värdet för Ä-karboxylsyran av utgångs- föreningen och att därefter erhållen produkt utvinnes ur reaktions- lösningen pä i och för sig känt sätt medelst lösníngsmedelsextraktion.

Utgångsföreningen (II) som användes enligt uppfinningen ut- sättes för oxidation antingen i form av fri syra eller i form av 10 15 20 25 30 35 H0 73164194 3 ett salt därav. Saltet av föreningarna (II) utgöres vanligen av ett alkalimetallsalt, exempelvis natrium- eller kaliumsalt, fastän saltet av en organisk bas som ej har speciellt ogynnsam effekt på oxidationsreaktionen, såsom trietylamin, pyridin och så vidare kan användas.

De lösningsmedel som rutinmässigt kan användas enligt upp- finningen omfattar bland andra aceton, acetonitril, tetrahydro- furan, etylacetat, kloroform, diklorometan, eter, dioxan, dimetyl- formamid, dimetylacetamid, ättiksyra och blandningar av sådana lösningsmedel. Dessa lösningsmedel skall lämpligen vara väsentli- gen vattenfria.

För att oxidationsreaktionen skall gynnas användes kromsyra- anhydriden i kombination med en syra såsom svavelsyra, fosforsyra eller isättika. Man bör emellertid tänka på att eftersom använd- ningen av en syra i överskott kan inducera laktonisering är det lämpligt att när utgångsföreningen (II) användes i form av ett salt syran ej användes i större mängd än vad som är nödvändigt för att saltet skall överföras till den fria karboxylsyran. Efter- som laktoniseringsreaktionen sker snabbt vid ett pH-värde nära eller lägre än pKa-värdet (nära 2,90) för U-karboxylsyran bibe- hälles pH-värdet för reaktionsblandningen nära pKa-värdet för H-karboxylsyran. Följaktligen är, när ett salt av utgångsföre- ningen (II) användes, exempelvis förhållandet av kromsyraanhydrid (per oxidationsekvivalent): syra (per mol): förening som skall. oxideras (II) (per mol) företrädesvis 2:1:1 när föreningen som skall oxideras (II) utgöres av en monobasisk karboxylsyra eller 2:2:1 när föreningen (II) utgöres av en dibasisk syra.

Sålunda kan förhållandet allmänt uttryckas såsom 2:n:1 vari n är lika med antalet syragrupper i utgängsföreningen (II). God- tagbara resultat erhålles följaktligen när kromsyraanhydriden tillåts inverka på saltet av utgångsföreningen (II) i närvaro av en tillräcklig mängd av syra för att saltet skall överföras till fri karboxylsyra. När föreningen (II) användes i form av fri karboxylsyra är det också nödvändigt att kromsyraanhydriden reagerar under det att pH-värdet för reaktionsblandningen bibe- hâlles vid ett värde nära pKa-värdet för H-karboxylsyran. För detta ändamål användes en mängd av kromsyraanhydriden per oxida- tionsekvivalent som är lika med 2 gånger mängden av utgängsföre- ningen (II) (per mol).

Vidare oxideras föreningen (II) föPeïPäd@SVíS i f°Pm av ett '7316419-6 U salt -med- natrium eller kalium och saltet är uppslammat i finför- delat tillstånd i reaktionslösningsmedlet. Kromsyraanhydriden är företrädesvis löst i reaktionslösninšsmedlet som innehåller en liten mängd vatten som är nödvändig för upplösning av föreningen. _ 5 Såsom denna vattenmängd kan den i reaktionssystemet inneslutna fuktigheten, nämligen fuktigheten i exempelvis en syra, ett lös- ningsmedel, kromsyraanhydriden, etc., vara tillräcklig.

Vanligen genomföres reaktionen vid rumstemperatur under kylning med is till 0°-30°C och fullbordas vanligen inom en rela- 10 tivt kort tidsperiod, exempelvis cirka 10 minuter. i X I Den sålunda erhållna reaktionsblandningen innehåller den avsed- da föreningen (I) såsom en jämviktsblandning av förening (I) och _3-formyl-4-karboxylsyra med allmänna formeln (III): nl s R2>I~flf Of~-N,1a*- cao (III) I coon (vari Bl och Ra har tidigare angiven betydelse), som är en tautomer __ till laktolformen (I), I vatten, etanol, eller metanol vid ett pH- 15 värde av cirka 3,0 föredrar föreningarna 3-formylkarboxylsyrafdflmm GIII 10 w 25 30 ät s 7316419~6 _"_üñdëï_dët_aÉt vid ett pH-värde av cirka ÉQÖ eller mindre föredrar de laktolformen (I) i samma lösningsmedel. Kärnmagnetisk-resonans- spektrum för den fria syran av 3-formylcephalosporiner i d6-dimetyl- sulfoxid visar att de företrädesvis uppträder i laktolformen (I) under det att ultraviolett-absorptionsspektrum för samma föreningar i etanol visar att de huvudsakligen existerar i 3-formylkarboxylsyra formen (III). Detta är beviset för ett jämviktsförhållande mellan formerna (I) och (III).

När föreningen förekommer i 3-formyl-karbokylsyraformen (III) är den alltför instabil för att kunna isoleras medelst rutínmässiga förfaranden beroende på instabiliteten hos de fria formyl- och a-lak- tamgrupperna. När föreningen däremot förekommer i laktolformen (I) är den tillräckligt stabil för att kunna separeras enligt rutinmässi- ga metoder. _ _ Vid isolering av föreningen kan man extrahera reaktionsblandningen med ett organiskt lösningsmedel såsom etylacetat, butylacetat, metyl- isobutylketon eller liknande. Extraktet kan vanligen renas genom exempelvis destillation eller omkristallisation. Förutom dessa för- faranden kan föreningen renas genom sådana rutinmässiga metoder så- som vätskekromatografi, tunnskiktskromatografi och så vidare.

Föreningen (I) behandlas med en alkohol såsom metanol, etanol, .propanol eller butanol i närvaro av en syra eller med ett acylerings- medel såsom acetylklorid, acetylbromid eller ättiksyraannydrid varvid laktolnydroxigruppen i föreningen (I) substitueras med en alkoxi el- ler acyloxígrupp.

Utgångsföreningen (II) eller ett salt därav kan framställas ge- nom avlägsnande av aeetylgruppen från föreningar med allmänna formeln: Bl 2 S R ï _ . 0 COOH (vari R1 och R2 har tidigare angiven betydelse), varvid avlägsnandet av acetylgruppen åstadkommas genom enzymatisk eller kemisk hydrolys av föreningarna med denna allmänna formel. Av dessa kan 3-desacetyl- cephalosporin C erhållas direkt genom jäsningsmetoder och kan använ- das sâsom utgångsmaterial i oxidationsreaktionen.

(IV) 10 15 20 25 }0 35 7316419'5 6 Produktföreningarna (I) har antišiotisk verkan mot penicillin; känsliga eller penicillinresistenta stammar av Mícrococcus pyrogenes var. aureus, pneumobacillus och typhoid bacillus. Dessa föreningar kan därför exempelvis användas såsom läkemedel eller baktericider i syfte att förhindra infektioner på grund av dessa mikroorganismer eller såsom fodertillsatser i syftet att konservera näringsmedel.

För dessa ändamål kan dosen, beredningsformen osv. lätt bestämmas genom rutinmässiga och etablerade metoder för antibiotisk teknik.

Vidare är produkten (I) eller alkoxi- eller acyloxíderivat där- avxanvändbara såsom mellanprodukter för framställning av andra cepha- losporinföreningar. Exempelvis kan de reageras med aminoföreningar, exempelvis hydrazin, hydraziner av alkyl-, aryl- eller heterocyklis- ka föreningar såsom metylhydrazin, etylhydrazin, isopropylhydrazin, fenylhydrazin, p-nitrofenylhydrazin, 3,5-dímetylhydrazin, pyridyl- hydrazin, tienylhydrazin, 1-amino-H-metylhydrazin, etc., acylhydrazi- ner med alifatiska, aromatiska eller heterocykliska karboxylsyraacyl- grupper såsom acetyl, propionyl, butylyl, valeryl, bensoyl, toluoyl, salicyloyl, cinnamoyl, pikolyl, tienylacetyl, fenylacetyl, fenyltio- acetyl, fenylpropionyl, pyridyltioacetyl, cyanoacetyl, cyklohexyl- acetyl, a-hydroxifenylacetyl, etc.; tiosemíkarbazider såsom tiosemi- karbazid, fenyltiosemikarbazid, etyltiosemikarbazid, acetyltiosemi- karbazid, klorofenyltiosemikarbazid, etc., aminoguanidin och derivat därav; hydroxylaminer såsom nydroxylamin, o-metylhydroxylamin, o-ace- tylhydroxylamin, o-propropoxihydroxylamin, hydroxylamin-o-sulfonsyra, etc., primär-alkyl-, allyl- eller arylaminer eller heterocykliska aminer, exempelvis_etylamin, propylamin, allylamin, cyklohexylamin, anilin, p-nitroanilin, o,p-dínítroanilin, o-kloroanilin, naftylamin, pyridylamin, tienylamin, U-metylpiperazylamín, furylamin, etc.; och N-iminer, exempelvis pyridín-N-imin, kinolin-N-imin, etc. i ett lös- ningsmedel, exempelvis vatten, metanol, etanol, etc. i närvaro av en i syrakatalysator, exempelvis svavelsyra, klorvätesyra, etc., varvid man erhåller den substituerade iminometylföreningen med allmänna for- mel!!! 2 a* I 1 w ~ o \j;L*cH=N-H3 (v) coon - vari Rl och R2 har tidigare angiven betydelse, R3 betecknar väte, nydroxi, aminc, -osoöfl eller en organisk grupp- Föreningen (V) har Ht- 10 15 20 25 30 35 40 '7316419-6 7 märkta egenskaper såsom antibiotika, exempelvis aktivitet mot gram-positiva, gram-negativa och penicillinresistenta bakterier och kan användas på liknande sätt som föreningen (I).

Föreliggande uppfinning belyses ytterligare av följande exempel.

Många variationer och modifikationer av de däri belysta utföringsfor- merna är dock möjliga. I exemplen är samtliga temperaturer okorrige- rade och samtliga procentvärden angivna på viktsbasis förutom om annat angives.

NMR-spektra i exemplen har uppmätts med användning av en Varian T60 eller en HAlO0 spektrometer med tetrametylsilan såsom in- tern referens. Värdena för 6 uttryckes i ppm. Om ej annat angives har deuteriokloroform använts såsom lösningsmedel. Symbolen "s" be- tecknar singlett, "d" dubblett, "t" triplett, "q" kvartett, "AB q" kvartett av AB-typ, "m" multiplett och "J" betecknar en kopplinge- konstant i Hz.

Exempel l. (1) N-isobornyloxikarbonyl-deacetylcephalosporin-C-dinatrium Till ü7,4 g cephalosporin-C-mononatrium sattes 500 ml vatten och 150 ml aceton och erhållen blandning hölls vid 3-400. Under det att blandningen omrördes justerades dess pH-värde till 9,0 genom tillsats av natriumkarbonatpulver varefter ü3,3 g isobornylkloro- karbonat tillsattes droppvis under en period av 1,5 timmar. Under denna tidsperiod tillsattes natriumkarbonatpulver då och då för bi- behållande av systemets pH-värde vid 9,0. Blandningen omrördes vid 3-ü°C och pH 9,0 under ytterligare 1,5 timmar. Därefter justerades pH-värdet till 7,0 genom tillsats av fosforsyra och större delen av acetonen avdrives under reducerat tryck. Koncentratet tvättas två gånger med H00 ml etylacetat och vattenskiktet kyles till 5°C och under omröring justeras pH-värdet till 2,5 med fosforsyra. Därefter extraherar man med 600 ml etylacetat tre gånger. Extraktet torkas över vattenfritt natriumsulfat och indunstas därefter till torrhet under reducerat tryck. Förfarandet ger N-isobornyloxikarbonyl-cepha- losporin C (55.4 g).

A (2) N-isobornyloxikarbonyl-cephalosporin C (5,96 g) överföres till dinatriumsaltet genom tillsats av 20 ml vatten och 1,68 g natriumbi- karbonat. Till denna vattenhaltiga lösning sättes fosfatbuffert (pH 7,2, 100 ml) och 9,50 g av lipas från Rhizopus NRH00, framställd av Osaka Saikin Kenkyusho och saluföres under beteckningen "Saíken 100". Vid en konstant temperatur av 30°C och varvid pH-värdet hålles vid cirka 7,2 omröres systemet under 16 timmar. Reaktíonsblandningen 10 15 20 25 30 35 7315419-6 8 filtreras därefter under vattensug med användning av diatomacêjord som framställts av Johns-Manville Sales Corp. och saluföres under beteckningen “Hyflo-Super-Cel" såsom filtreringshjälpmedel och filt- ratet koncentreras genom lyofilisering. Koncentratet påföres en ko- lonn av polystyren-divínylbensen-sampolymer som framställts av Lörm & Hass under beteckningen "Amberlite XAD-2". Kolonnen påföres först vatten och därefter 5-procentig vattennaltig etanol (volym/vo- lym). Fraktionerna innehållande produkten sammanslås och koncentre- ras under reducerat tryck för avlägsnande av etanolen.

Därefter lyofiliseras koncentratet varvid man erhåller N-iso- bornyloxikarbonyl-deacetylcephalosporin-C-dinatrium (ü,87 S, smp. 165-l70°C, sönderdelas). ß Magnetisktkärnresonansspektrum (D20): i s u,u3(2H,s, 3-cnzon), 5,26(1H,a, J=sflz, 6-H), 5,77(1H,d, J=5HZ, 7'H) Infrarödabsorptionsspektrum (KBr-skiva): l760(ß-laktamring), 1599 cm_l(-C02Na) Ultraviolett absorptionsspektrum: H o H o Amåx 261,5 nm; xmšn 255,5 nm. (3) 7-8-{D-5-(isobornyloxikarbonyl)amino-5-karboxivaleramido}-3-for- myl-3-cefem-H-karboxylsyra. 80 ml aceton sattes till N-isobornyloxikarbonyl-deacetylcephalo- sporin-C-dinatrium (2,99 g) och erhållen suspension omrördes under kylning vid 5°C. Därefter tillsattes 1,88 ml av en lösning (beteck- nas i det följande såsom reagens B) bestående av 2,67 g kromsyraanhyd- rid (valfri renhetsgrad), 5,52 ml koncentrerad svavelsyra (l,77 g HZSOH/ml) och vatten upp till 15,0 ml, droppvis under en period av 3 minuter, följt av omröring under ytterligare 20 minuter vid 5°C.

Efter det att reaktionen har fullbordats avdrives större delen av acetonen, varefter 30 ml vatten tillsättes. Lösningen extraheras med 50 etylacetat tre gånger. Etylacetatskiktet torkas över vattenfritt natriumsulfat och indunstas därefter till torrhet under reducerat _ tryck. Förfarandet ger 7-ß-(D-5-(isobornyloxikarbonyl)amino-5-karb- oxivaleramido)-3-formyl-3-cefem-H-karboxylsyra (2,06 g).

Magnetísktkärnresonansspektrum (d6-dimetylsulfoxid + D2O): 65,07 (lH,d, J=5Hz, 6-H), 5,75 (lH,d, J=5Hz, 7-H), 6:23 (J-Has» ) . O \O OH Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skiva): 1797 cm'1 (8-laktamring) 10 15 20 25 50 55 7316419~6 9 Ultraviolett-absorptionsspektrum: H 0 _ H 0 _ Amåx 300 nm, Amšn 238 nm iH2°"H2s°4 260 mn; AH2°"H2S°4 233 mn. max min Magnetiskt kärnresonansspektrum för denna produkt i d5-dimetyl- sulfoxid visar att produkten har laktolformen som är en tautomer till 3-formylkarboxylsyra under det att ultraviolett-absorptionsspektrum Qör samma produkt i vattenhaltig lösning visar att produkten har Bëfqrmyl-karboxylsyraformen. Ultraviolett-absorptionsspektrum av samma produkt i utspädd svavelsyralösning indikerar att den existe- rar i laktolformen.

Exempel 2. (l) N-fenylacety1-deacetylcephalosporin-C-dinatrium A) Cephalosporin-C-mononatrium (ü,20 g) löses i 50 ml vatten och lösningen bibehålles vid 3°C under omröring. Lösningen justeras till pH 8,5 med natriumkarbonatpulver följt av gradvis tillsats av en lös- ning av 1,60 g fenylacetylklorid i 10 ml aceton. Efter det att den droppvisa tillsatsen är fullständig under det att pH hålles vid 8,5 omröres blandningen ytterligare under samma betingelser under 2 tim- mar. I Reaktionsblandningen justeras till pH 7,20 med fosforsyra och koncentreras under reducerat tryck till cirka 30 ml.

Till detta koncentrat sättes fosfatbuffert till ett pH-värde av 7,20 och en volym av 70 ml. H Till denna lösning sättes lipas "Saiken 100" (5,0 g) och under det att vätskans temperatur hâlles vid 30°C omröres systemet under 20 timmar. Efter reaktionen filtreras olösligt material av och filtra- tet koncentreras under reducerat tryck till cirka 15 ml. Koncentratet kromatograferas på en kolonn av Amberlite XAD-2, som begjutes med vatten för avlägsnande av enzymet och oorganiskt salt samt därefter med en 1-procentig vattenhaltig lösning av etanol.

Eluatet lyofilisèras för utvinning av ett vitt finfördelat pul- ~ ver av N-fenylacetyl-deacetylcephalosporin-C-dinatrium (3.82 g).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (D¿O): ' 6 2,1-1,5 (UH), 2,S~2,} (ZH), 3,US och 3,72 (2H, J=l8 Hz, 2-H), },7H (2H), U,28 (IH, t), fl,38 (2H, 3-CHZOH), 5,17 (IH, d, J=ÄHz), 5,68 (IH, d, J=ÄHz), 7,H7 (SH). V B) Deacetylcephalosporin-C-mononatríum (},72 g) löses i NO ml vat- ten och under det att lösningen omröres vid konstant temperatur av 3°C 10 15 20 25 -30 35 vswms-e 1,, justeras pH till 8,5 med natriumkarbonat. Till denna lösning sättes därefter droppvis en lösning av 1,60 g fenylacetylklorid i 10 ml aceton. Efter det att den droppvisa tillsatsen är fullbordad omröres blandningen ytterligare under samma betingelser under 2 timmar. Ef- ter reaktionen justeras blandningens pH till 7,0 med fosforsyra och blandningen koncentreras under reducerat tryck till 15 ml. Koncentra- tet kromatograferas på en kolonn av Amberlite XAD-2-harts (500 ml).

Kolonnen begjutes med vatten och därefter med en l-procentig vatten- altig lösning av etanol (volym/volym). Eluatet lyofiliseras varvid mañflerhåller ett vitt finfördelat pulver av N-fenylacetyl-deacetyl- cephalosporin-C-dinatrium (U,l8 g). Denna produkt identifierades med det tidigare framställda N-fenylacetyl-deacetylcephalosporin-C-di- natriumprovet enligt metod A genom jämförelse av respektive infra- röd-absorptionsspektrum. (2) 7-B-(5-karboxi-5-fenylacetylaminobutyramido)-3-formyl-3-cefem- -B-karboxylsyra I 10 ml aceton suspenderades N-fenylacetyl-deacetyl-cephalospo- rin-C-dinatrium (510 mg) och blandningen kyldes till 5°C med is under omröring. Till denna suspension sattes reagenset B enligt exempel 1 (0,375 ml) under en period av 10 minuter och därefter koncentrerades reaktionsblandningen under reducerat tryck. Till återstoden sattes 10 ml vatten, följt av extraktion med tre 30-ml portioner av etylacetat.

De organiska skikten sammanslogs, tvättades med vatten, dehydratise- rades (över vattenfritt natriumsulfat) och indunstades. Förfarandet gav ett nästan rent prov av 7-3-(5-karboxi-5-fenylacetylaminobutyr- amido)-3-formyl-3-cefenr U-karboxylsyra (312 mg) i laktol-formen.

Magnetiskt kärnresonansspektrum (dö-dimetylsulfoxid): \ï¿Äï>>\\§ 5-,o7(1H, a, J=5Hz), 5,76(1H, a, J=5Hz), 6,23(1H, s, CAC OH Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skiva): l79H cm-1 (B-laktamring) Et0H max Magnetiskt kärnresonansspektrum för denna produkt i d6-dimetyl- sulfoxid indikerar att föreningen föreligger i laktolformen under det att ultraviolett-absorptionsspektrum för samma produkt i etanol anger att föreningen föreligger i formylformen.

Exempel 3. f (1) I 200 ml fosfatbuffert (pH 7,2) löses 7-ß-(2-tienylacetamido)- -3-acetoximetyl-5-cefem-4-karboxylsyranatriumsalt (l0,l2 g). Till denna lösning sättes lípas “Saiken 100" (l0 g) och systemet får reage- ra på ett vattenbad vid 30°C under 16 timmar under konstant omröring.

Ultraviolett absorptionsspektrum:A 299 nm 10 15 20 25 30 35 11 7z1eu19-6 ' Under denna period sättes en vattenhaltig lösning av natrium- vätekarbonat till systemet så att pH-värdet ej sjunker under 7,2.

Efter det att reaktionen är fullbordad filtreras systemet med diato- macêjord som erhållits från Johns-Manville Sale Corp. under varube- teckningen "Celite". Filtratet koncentreras under reducerat tryck till cirka 50 ml och koncentratet påföres en kolonn av Amberlite XAD-2 (5x57 cm). Kolonnen begjutes först med 500 ml vatten och där- efter med en 10-procentig vattenhaltig lösning av etanol (volym/vo- lym). Eluatet lyofiliseras varvid ett vitt finfördelat pulver erhål- les av 7-8-(2-tíenylacetamido)-3-hydroximetyl-3-cefem-U-karboxylsy- ranatrium ( 7,8 g).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (D20): 6 3,Ä8 och 3,72(2H, J=l8Hz), U,00(2H, s), fl,39(2H, s), 5,l7(lH, d, J=5H2), 5,72(1H, G, J=5H2), 7,l5(2H), 7»"5(lH)- Infraröd-absorptíonsspektrum (KBr-skiva): 3270, 1752, 1659, 1595, 15a6 cm'l.

Ultraviolett-absorptionsspektrum: 1 ägg 235 nm (==11,ooo) (2) 7-3-(2-tienylacetamido)-3-formyl-3-cefem-4-karboxylsyra h I 60 ml aceton suspenderades 7-3-(2-tíenylacetamido)-3-hyd- roximetyl-3-cefem-4-karboxylsyranatrium (l,l28 g). Därefter tillsat- tes gradvis och droppvis under kylning med is och omröring 0,75 ml av en lösning (som i det följande betecknas reagens A) bestående av 2,67 g kromsyraanhydrid (valfri renhetsgrad), 2,26 ml koncentrerad svavelsyra (H2SO4-halt 1,77 g/ml) och vatten upp till 10 ml, till suspensionen.

Efter det att den droppvisa tillsatsen fullbordats omrördes blandningen under samma betingelser under ytterligare 10 minuter.

Därefter koncentrerades reaktionsblandningen och vatten sattes till koncentratet. Blandningen extraherades två gånger med 70 ml etylacetat och de organiska skikten tvättades två gånger med 50 ml vatten, dehydratiserades över vattenfritt natriumsulfat och etylace- taten avdrevs under reducerat tryck. Förfarandet gav 7-ß-(2-tienyl- acetamido)-3-formyl-3-cefem-U-karboxylsyra (576 mg).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (ds-DMSO): 6 3,68(2H), 3,7u(2H, s), 3,80-4,6o(1H, m.), 5,o6(1n, d, J=5Hz), 5,82(1H, q, J=5 och 8 Hz), 6,23(1H, s, / I ,»fi ), 6,9o(2H), 0;>~0'” OH 7,29(lH), 9,l5(lH, d, J=8Hz) 7316419-6 a 12 '1"“""*rrïfi-zu="<§ï-'aß'§örpticnespekcrum (kBrQskivai) z 'iiiíšcíj 'ïïïol,míïíïišj“Éšwënzl 1 Ultraviolett-absorptionsspektrum: H O _ H 0 A måx 23h nm, A måx 299,5 nm Ultraviolett:absorptionsspektrum för denna produkt avslöjar 1 5 aldehydstrukturen. Däremot bekräftar infraröd-absorptions- och magne- tiskt kärnresonansspektrum för samma produkt laktolstrukturen som är en tautomer till aldehydstrukturen.

'" Exemgel U. (1) 7~8~{D-d-(B-metylsulfonyletoxikarbonyl)aminofenylacetamido}-3- 10 -hydroximetyl-3-cefem-U-karboxylsyranatrium.

Till 7-8-(D-u-aminofenylacetamido)-3-acetoximetyl-3-cefem~ü- -karboxylsyra (8,l0 g) sättes 100 ml vatten och 20 ml aceton.

Denna lösning kyles till 3-ü°C och under omröring tillsattes kaliumkarbonat till lösningen varigenom dess pH-värde justeras till Å 15 8,5. Därefter tillsättes droppvis en lösning av 8-metylsulfonyletoxi~ karbonylklorid (4,48 g) i 20 ml aceton under en period av 1 timme.

Under denna period tillsättes kaliumkarbonatpulver då och då så att pH-värdet bibehålles vid 8,5. Därefter omröres reaktionsblandningen under ytterligare 1 timme vid en konstant temperatur av 3-4°C. Vär- 20 det på_pH justeras därefter till 7,0 med fosforsyra och större delen av acetonen destilleras av under reducerat tryck. Koncentratet tvät- tas därefter med etylacetat (100 ml) två gånger och under omröring vid 5°C korrigeras pH till 2,5 med fosforsyra. Erhållen fällning extraheras med etylacetat (150 ml) två gånger. Extrakten sammansla- 25 ges och torkas över vattenfritt natriumsulfat, följt av indunstning till torrhet under reducerat tryck. Förfarandet ger 7-B-{D-a-(ß-mety1- sulfonyletoxikarbonyl)-aminofenylacetamido}-3-acetoximety1-3-cefem- -H-karboxylsyra (l0,50 g). ' Denna 7-B-{D-a-(B-metylsulfonyletoxikarbonyl)aminofenvlacet- 30 amido}-3-acetoximetyl-3-cefem-U-karboxylsyra (5,00 g) överföres till motsvarande natriumsalt genom tillsats av vatten (30 ml) och natrium- bikarbonat (0,755 g).

Till denna vattenhaltiga lösning tillsättes 100 ml fosfatbuf- fer (pH 7,2) och 800 g lipas "Saiken 100" och systemet omröres vid 35 en konstant temperatur av 30°C under 13 timmar varvid pH regleras till cirka 7,2. Erhållen reaktionsblandning_påföres en kolonn av Amberlite XAD-2. Kolonnen begjutes först med vatten och därefter med en 10-procentig (volym/volym) vattenhaltig lösning av etanol. Frak- tionerna innehållande den avsedda produkten sammanslages och induns- H0 tas under reducerat tryck för avlägsnande av etanolen. Koncentratet !._._- 10 20 25 30 35 7316419~6 13 lyofiliseras varigenom man utvinner 7-6-{D-a-(B-mety1sulfonyletoxi- karbonyl)-amínofenylacetamido}-3-hydroxmety1-3-cefem-ü-karboxylsyra- natrium <3,73 s). i Smältpunkt: 166-l69°C (sönderdelning).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (D2O): 6 5,ll(3H, S, -SO2CH3), U,3Å(2H, S, 3-CH20H), 5,l2(lH), 5,"2(lH), 5,75(lH), 7,36(5H).

Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skiva): 176ü cm' 1602 cm'1 (~co2Na) Ultraviolett-absorptionsspektrum: x “2° 262 nm, A H2° 239 nm. max min (2) 7-6-{D-a-(B-metylsulfonyletoxikarbonyl)aminofenylacetamido}-3- -formyl-3-eefem-M-karboxylsyra - 16 ml aceton sättes till 535 mg 7-B-{D-u-(ß-mety1sulfonyletoxi- karbcnyl)aminofenylacetamído}-3-hydroximetyl-3-cefem-H-karboxylsyra- 1 (B-laktamring), :natrium och erhållen suspension omröres under kylning till 5°C. Där- efter tillsättes oxidationsreagenset A framställt enligt exempel 3 (0,250 ml) droppvis till suspensíonen under en period av 3 minuter och blandningen omröres ytterligare vid 5°C under 20 minuter. Efter det att reaktionen har fullbordats avdestilleras en större del av aceto- nen under reducerat tryck och H0 ml vatten tillsättes. Blandningen extraheras därefter två gånger med etylacetat (50 ml). Etylacetatlös- ningen dehydratiseras över vattenfritt natríumsulfat och indunstas därefter till torrhet under reducerat tryck. Förfarandet ger 7-ß-{D- -u-(8-metylsulfonyletoxikarbonyl)aminofenylacetamido}-3-formyl-3- -cefem-N-karboxylsyra (266 mg).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (dö-dimetylsulfoxid + D20):~63,04(3H, S, -so2cH3), 5,ou(1H, a, J=5fl;,u6-H), 5,uo(1n, S, <5 \,_CH_), _ TJ' I 5,s3(1H, a, J=5nz, 7-a), 6,22(1H,\WfJÉ,» ) - ¿?~o \on Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skiva): 1794 cm'l (B-laktamring) Ultraviolett-absorptionsspektrum: A H20 299 mm; x H2° zu; nm ' max min H - _ Ä 20 HZSOH 259 nm; A H20 HZSOU' 239 nm max min . 0 7316419-6 p 10 lä Magnetiskt kärnresonansspektrum för denna produkt i d6-dimetyl- sulfoxid bekräftar att produkten föreligger i laktolformen som är en tautomer till 3-formylkarboxylsyraformen under det att ultravio- lett absorptionsspektrum för samma produkt i vattenhaltig lösning visar att den föreligger i.3-formylkarboxylsyraformen. Ultraviolett- absorptionsspektrum för samma produkt i utspädd svavelsyra indikerar Jnatt produkten förekommer i laktolformen.

Exempel 5. (1) 7-3-(D-a-sulfofenylacetamido)-3-hydroximetyl-3-cefem-N- -karboxylsyradinatrium I fosfatbuffert (15 ml) löses 7-B-(D-c-sulfofenylacetamikü -3- -acetoximetyl-3-cefem-U-karboxylsyradinatrium (1,0 g). Efter det att lösningen justeras till pH 7,20 tillsättes lipas "Saiken 100" (1,0 g) - vid 30°C och blandningen omröres under 20 timmar. Reaktionsblandning- 15 20 25 en koncentreras under reducerat tryck till 5 ml och koncentratet kro- matograferas på en kolonn av metylerat dextran från Pharmacia med varubeteckningen SephadexCâ5LH-20. Kolonnen begjutes med vatten för avlägsnande av enzymet och den aktiva fraktionen lyofiliseras varvid ett vitt pulver (2,53 g) erhålles. Denna produkt omfattar oorganisk substans. Produkten kromatograferas därför ytterligare på en kolonn av Amberlite XAD-2-harts och elueras omsorgsfullt med vatten. Frak- tionen som är fri från oorganisk substans lyofiliseras varigenom man utvinner vita pulverformiga kristaller av 7-6-(D-a-sulfofenylacetami- do)-3-hydroximetyl-3-cefem-H-karboxylsyradinatrium (512 mg).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (D20, 100 MHz); 6 3,36 och 3,65(2H, AB-mönster q, J=l8 Hz), ß,33(2H), 5,l5(lH, d, J=5,0 Hz), 5,l8(lH), 5,76(lH,_d, J=5,0 Hz), 7,Ä6-7,79(5H). 10 15 20 25 30 35 7fïnfrarädïaosorptionsspektrum (KBr-skiva): 7316419-6 15 1755 cm-1 (B-laktamring), 1220 och l0ü5 cm'1 (SO3'). (2) 7-8-(D-u-sulfofenylacetamido)-3-formyl-3-cefem-U-karboxy1syra- mononatrium _ I 5 ml aceton suspenderas 7-6-(D-u-sulfofenylacetamido)-3-hyd- roximetyl-3-cefem-H-karboxylsyradínatrium (225 mg) och erhållen sus- pension omröres under kylning till 5°C. Till denna suspension sättas reagenset B enligt exempel l (0,l87 ml) under en period av 1 minut.

Efter det att den droppvisa tillsatsen fullbordats omröres blandningen under ytterligare 10 minuter och därefter indunstas reak- tionsblandningen under reducerat tryck.

Till återstoden sättes vatten (2 ml) följt av tillsats av nat- riumvätekarbonat så att lösningens pH-värde justeras till 2,5. Lös- ningen kromatograferas därefter på en kolonn av Amberlite XAD-2-harts och desorberas med vatten. Från eluatet som är fritt från oorganiska ljoner tillvaratages fraktioner innehållande den avsedda produkten och dessa lyofiliseras. Förfarandet ger pulverformiga kristaller av 7-5-(D-u-sulfofenylacetamido)-3-formyl-3-cefem-ü-karboxylsyramononat- rium (106 mg).

Magnetiskt kärnresonansspektrum (D20, 100 MHz): 6 3,68(2H), 5,06(lH, d, J=5Hz), 5,77(lH, d, J=5Hz), 5,l8(lH), 6,22(1H, S, :Ii OH ). 7.U6-7,79(5H) 0/ O H Exempel 6. (1) N-{P'(t-butyl)-bensensulfonyl}-cephalosporin C.

I metoden från exempel l(l) användes p-(t-butyl)-bensensulfonyl- klorid i stället för isobornylklorokarbonat och reaktionen får ske vid 15-20°C varigenom önskvärd förening erhålles.

Infrarödeabsorptionsspektrum (KBr-skiva): 1770, 1728, 1710, 1660 cm'l Magnetiskt kärnresonansspektrum (dö-dimetylsulfoxíd): s 1,29(9H), 2,o1(3n), 3,40 och 3,6h(2H, Aßq), u,7o och 5,o2(2H, ABq), 5,06(lH, d), S,6U(lH, q), 1,50 Och 7,58(UH, ABq), 'Igglul-H» fn: 8a72(lH, d)- (2) Dinatrium-7B-{5-(p-t-butylbensensulfonamid)-5-karboxivalerami- do}-3-hydroximetyl-3-cefem-U-karboxylat .

N-{P“(fi~butyl)-bensensulfonyl1-cephalosporin C (50 g) bringas att reagera på liknande sätt som i exempel l(2),och reaktionsbland- ningen kyles till 5°C, följt av justering av pH-värdet till 2,90.

Till lösningen sättes 1 liter etylacetat och blandningen omröres nog- grant, varefter den filtreras med användning av Celite. Celite-mate- 7316419-6 G 16 rialet tvättas med etvlaeetat_(500 ml) och tvättïäšnin en kombineras- med filtratet. Det separerade etylacetatskiktet tvättas med vatten (100 ml x 3) och en lösning av 3-procentig vattenhaltig natriumväte- L karbonat tillsättes til1spH-värdet av det vattenhaltiga skiktet är - 5 5,5, varefter det vattenhaltiga skiktet separeras. Det vattenhaltiga skiktet justeras till 7,0 och lyofiliseras varvid önskvärd förening erhålles (35,6 g). ' Infraröd-absorptionsspektrpm (KBr-skiva): 1754, 1660, 1595 cm'1.

Magnetiskt kärnresonansspektrum (D20): ¶ 10 6 l,30(9H), 4,}6(2H), 5,l5(lH, d), 5,68(1H, d), 7,50 och 7,86(üH, ABq). . (3) 7ß-{5-(p-t-butylbensensulfonamído)-5-karboxivaleramido)-9-oxo- --ll-hydroxi-llH-furano{ü,3-c)-3-cefem Hydroximetylderivatet från (2) behandlas på liknande sätt som 15 i exempel l(3) varvid önskvärd förening erhålles. i Infraröd-absorptionsspektrum (Kßr-skíva): 1788, lT28, 1665, l53ü, 1323, 1158 cnfl. ' Magnetiskt kärnresonansspektrum (dö-DMSO): 6 1,29(9H, S), 1,3-l,9(6H, m), 3,4-3,8(2H, m), 5,06(1H, d, fx eo 351m), 5,8o(1H,l q, J=s och ßaz), 6,2u(1H, bred s, *y /g ), of-*o on 7,5l(2H, d, J=8Hz), 1,69(2H, d, J=8Hz), 7,93(1H, d, J=8Hz), 8,8o(1H, a, J=8flz).

Exemgel 7. K (1) N-bensoyl-3-deacetylcefalosporin-C-dinatrium "S N-bensoylcefalosporin C behandlas på liknande sätt som i exem- pel l (2) varvid önskvärd förening erhålles.

Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skiva)= 1757, 1645, 1600, 1535 cm'l. ;_ Magnetiskt kärnresonansspektrum (D2O): i e 1,9o(1|H, m), 2,5o(2H, m), 3,30 och 3,65(2H, Asq), M,33(2H), 30 5,15{lH» 6), 5,53(lH, d), 7,53(3H), 7,90(2H)- Ultraviolett-absorptionsspektrum: x H2° 230, 260 mn. max (2) 7ß-(5-bensamido-5-karboxivaleramido)~9rcxo-ll-hydroxi-1lH-fura- no{ü,3-c]-3-cefem. . 35 N-bensoyl-3-deacetylcefalosporin-C-dinatrium behandlas analogt med exempel l (3) varvid önskvärd förening erhålles.

Infraröd-absorptionsspektrum (kßr-skiva): 1790, 1730, löül, 1535 cm'1. ..\ 10 15 20 30 35 m“MagnéfiíšEfi0kärnresonánsspektrum (dö-DMSO): 17 6 1,40-1,90(HH, m), 2,00-2,ho(2n, m), 3,u5 och 3,76(2H, Aßq, J=18Hz), M,37(1H, m), 5,c5(1H, d, J=5Hz), 5,82(1H, q, J=5 een 8 Hz), 6,2u(1H, m, “ï4Å>¿f3 ), 7,30-7,55 _ o4**0 OH _ (BH, m), 7,75-8,00(2H, m), 8,55(lH, d, J=8Hz), 8,90(lH, d, J=8Hz).

Ultraviolett-absorptionsspektrum: Ä H20 l max Exengel 8. (1) N-tosyl-3-deacetylcefalosporin-C-dínatrium N-tosylcefalosporín-C-dinatrium behandlades analogt med exempel 1 (2) varvid önskvärd förening erhölls.

Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skíva): 1760, 1160 cm_1.

Magnetiskt absorptíonsspektrum (D20): s 1,6-1,9(hH, m), 2,1-2,5(2H, m), 2,h9(3H), 3,6(1H), 3,u9 och 3,7U(2H, ABq), 4,35(2H), 5,l6(1H, d), 5,63(lH, d), 7,ü7(2H, d), 7,80(2H, d). (2) 76-(5-bosylamido-5-karboxivaleramído)-9-oxo-ll~hydroxí-llH-fu- rano{ß;3-cl-3-cefem.

N-tosyl-3-desacetylcefalosporin-Cfdínatrium upphettas analogt som i exempel l (3) varvid önskvärd förening erhölls. smä1tpunxc= 157-16o°c Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skíva): 1800, 1160 cm7l.

Magnetiskt kärnresonansspektrum (d6~DMS0, 100 MHz): 6 1,h-1,9(uH, m, -(cH2)2-), 1,9-2,3(2H, m, -cnz-), 2,3h(3H, s, CH3),f° 3,65(3H, s, 2-CH2, och metin), 5,0ü(lH, d, J=5,0Hz), snzøu-H; bred 51 \ /\ /Ä ): Sarnl-Ha qi J=9 Och SHZL 0 o \on l ~ 302 nm.

Elementaranalysz Funnet: C 47,19; H 4,32; Beräknat (för C2lH2uN309S2): G H7.99; H 4,fl1a N 1,30 N 8,00 _Exemgel 9. _ N-{p-(t-butyl)-bensoy1}-cefalosporin-C I förfarandet i exempel 1 (1) användes p-(t-buty1)-bensoylklo- rid i stället för isobornylklorokarbønat och reaktionen genomföras vid l5°C varvid önskvärd förening erhålles. (1) ~- 7z1su19-6 7316419-6 e 1,, "'fïñfrafödïäbsorptionsspektrum (KBr-skiva): 1778, l730, 1708, 1680, 7 1660, l5U0 cm_l.

Magnetiskt kärnresonansspektrum (da-dimety1su1foxid); 5 l,28(9H), ca 1,5-l,9(UH), 2,01(3H), 2,10-2,35(2H), 3,35 Och 5 ' 3,61(2H, Aßq), 4,37(1H), 4,68 och H,99(2fl, Aag), 5,o6(1H), 5,67(lH), 7,36 Och 1,82(UH, ABq), 8,Nl(lH), 8,79(lH). (2) Dinatrium-78*{5~(p~t-butylbensamido)-5-karboxivaleramido}-3- -hydroximetyl-3-cefem-U-karboxylat N-(p-(t-butyl)-bensoyl}-cefalosporin-C behandlades på likartat 10 sätt som i exempel 3 (1) varvid önskvärd förening erhölls.

Infraröd-absorptionsspektrum (KBr-skiva): 1760 cmfl.

Magnetískt kärnresonansspektrum (D20): 5 1;25(9H)a 3:27 Och 3:57(2H: ABCÜ: u:3Ü(2H-): SsOTÜJÜ: _ 5,68(lH), 7,50 och 7,8ü(UH, ABq). _ 15 (3) 7ß-{5-(p-t-butylbensamido)-5-karboxivaleramidp}-9-oxo-ll-hyd- ( roxi-llH-furano{H,3-c}-3-cefem - Dinatrium-78-{5-(p-t-butylbensamido)-5-karboxivaleramido}-3- - -hydroximetyl-Svcefem-H-karboxylat behandlas analogt med exempel 3 (2) varvid önskvärd förening erhölls. 20 Infrarëd-absorptionsspektrum (KBr-skiva): 1790, 1730, 1640, 1534 cm-1.

Magnetiskt kärnresonansspektrum (dö-DMSO): 6 1,29(9H, s), 1,50-1,95(HH, m), 2,10-2,Ho(2H, m), 5,36 och },58(2H, ABQ), U,36(lH, m), S,06(1H, d, J=5Hz), 5,60(lH, m, lege 0,/f o \oH 3 . 'J=8Hz), 8,Ä3(lH, d, J=8Hz), 8,86(lH, d, J=8Hz). ), 5,81(1H, q, J=5 och 8 Hz), 7,u5 och 7,83(hH, Aaq, ...-_. - Exempel'l0Äk Nanium-7/3"(2-tienylacetamido)-706-metoxi-3~hydroximetyl-3-cefem-H- karboxylat (300 mg) uppslammades i aceton (10 ml). Till suspensionen sattes reagens A (0,6 ml) som framställts i överensstämmelse med 30 exempel 3 under kylning med ett isbad och omröring. Efter tillsatsen av reagenset omrördes det hela under ytterligare 10 minuter under samma beüngelserß Efter avdrivning av lösningsmedlet sattes vatten och etylaoetat till återstoden. Det organiska skiktet tvättades med vatten, torkades och avdrevs i vakuum, vilket gav 7/3-(2-tienylacet- 35 amido)f70b-metoxi-9-oxo-ll-hydroxi-llH-furano-Zfi,3-c]-3-cefem efter 'omkristallisation ur en blandning av metylenklorid och etyleter.

IR (ker-skiva)= 1790, 1770, 1670, 1535 cm'1 _ _ NMR (ds-nMso)= 3,38(5H), 3,69(2H), 3,75<2H), 3,9««u,u(1H), 5,17 (lH), 6,25(lH), 6,90(2H), 7,29(lH), 9,l0(lH)dl' a 10 15 20 25 30 35 NO vz1sh19-6 19 UV (H20):Ä~max 234 och 299,5 nm.

Ultraviolett-spektret visade att det var en Yëaldehydkarboxyl- syrastruktur. Vid tillsats av klorvätesyra ändrades spektret till absorptioner på grund av en X-laktol vid]\max 234 nm och 255 nm_i stället för Ämax 2314 och 299,5 nm. _ Detta indikerar ett förhållande mellan Ycaldehydkarboxylsyra- strukturen och “Y-laktolstrukturen.

Exempel 11. ' _ Natrium-7ß-(2~feny1tioacetamido)-3-hydroximetyl-3-cefem-U-karboxylat (l,2H4 g) uppslammades i aceton (30 ml) under kylning till lägre än 5°C. Till den omrörda lösningen sattes en standardlösning av reagenset A (0,995 ml) droppvis. Efter omröring under en timme avdrevs lösnings- medlet i vakuum tills en liten volym uppnåtts. Till återstoden sattes etylacetat (100 ml) och en mättad vattenhaltig lösning av natrium- klorid (50 ml). Det organiska skiktet separerades, tvättades, torka- des och avdrevs i vakuum vilket gav fiß -(2-fenyltioacetamido)-9-oxo- ll-hydroxi-llH-furano[fi,3-Q]-3-cefem (NHR mg) efter kristallisation i eter.

In (man: 1790 en* (ß-laktam), 1676, 1530 en* (-coNn-).

Exempel 12.

Dinatrium-7/3-[D-5-karboxi-5-(p-toluensulfonyl)aminovaleramid§-5- hydroximetyl-3-cefem-H-karboxylat (l2,9 g) uppslammades i aceton (226 ml) under kylning. Till den omrörda lösningen sattes en standard- lösning av reagens B (1l,03 ml) under en period av 5 minuter. Reaktions- blandningen blev omedelbart grön. Efter ytterligare 20 minuter avdrevs lösningsmedlet i vakuum. Till återstoden sattes etylacetnt och en mättad vattenhaltig lösning av natríumklorid. Det organiska skiktet separerades, ,tvättades, torkades och indunstades i vakuum vilket gav 7(3-lD-5-karboxí-5-(D-toluensulfonyl)aminovaleramidQ7'9'0X°'1l“ hydroxi-llh-furanolfl,3-ë7-3-cefem (6,1" 3), SMP- l57“l50°C, effier kristallisation ur eter.

Exempel 13.

Nedan angivna föreningar framställdes enligt ett förfarande likartat det som beskrivits i exempel ll. a) Av Yfl -(2-fenoxibutyremido)-3-hydroxímétyl-3-cefem-U-karboxylat (ü,lü g) erhölls 7/3-(2-fenoxibutyramido)-9-oxo-ll-hydroxi-llH-furano- [Ä,3-Q]-3-cefem (l,696 g).

IR (KBr): 1791 cm_1 (fiïlaktam), 1680, 1520 cm'1(~C0NH-). b) Av natrium-7/3-benzamido-3-hydroximetyl-3-cefem-H-karboxylat (3,32 g) erhölls Yß -benzamido-9-oxo-ll-hydroxi-llfl-furanolï,3'§2"3' 2316419-6 ' å 10 15 _ '20 _25 .e) 20 ecefem (l,06 g).

IR (xar): 1789 cm'¥ c) Av natríum-7;å-nitrofenylacetamído)-3-hydroximetyl-3-cefem-U- karboxylat (3,20 g) erhölls zß -(p-nítrofenylacetamído)-9-oxo-ll- hydroxí-llH-furano[4,3-Q]-3-cefem (l,30 g).

IR (KBIÛ: 1792 cm-l (ß -laktam), 1665, 1515 cin-l (-CO1\IIí-), 13165 cm-1 (N02). _ d) Av natrium-@ß-cyanoacetamido-3-hydroximetyl-3-cefem-U~karboxylat (2,26 g) erhölls 7/Q-cyanoacetamido-9-oxo-ll-hydroxí-llH-furanolfl,3-Q? -3-cefem (O,7H g). _ IR (KBr): 1785 cm_l ((3-laktam), 1681, l5üü cm_l (-CONH-), 2260 _ cm'1 (cm).

Av natríum-LA -fenylacetamido-3-hydroxímetyl-3-cefem-4-karboxylat (3 70 mg) erhölls fiß -fenylacetamido-9-óxó-11-hydroxi-llflffuranolü,3-ç7- -3-cefem (220 mg). 5 IR (xBr): 17oo cm'1 (/G-laxcam), 166u, 1530 cm"1 (-comfl-). f) Av natríum-fiß -fenoxiacetamido-3-hydroximetyl-3-cefem-U-karboxy- lat (386 mg) erhölls 716-fenoxi-acetamido-9-oxo-ll-hydroxi-llH-furano- [fl,3-Q]-3-cefem (261 mg).

IR (xBr)= 1790 cm'1 (/6-laxcam), 1678, 1520 cm'1 (-coun-). g) Av natrium-7/Ö-(D-OC-hydroxífenylacetamido)-3-hydroxímetyl-3- _ cefem-H-karboxylat (5,02 g) erhölls Wß;-(D-OC-hyfiroxifenylacetamido) 9-oxo-11-hydroxí~llH-furano[¶,3-Q]-3-cefem (ü,02 g).' IR (KBr): 1787 cm_1 (/3-laktam), 1673, 1520 cm_l (-CONH-). h) Av natrium-nå -tetrazolylacetamído-3-hydroxímetyl-3-cefem-Ä- karboxylat (3ü8 mg) erhölls zß -tetrazolylacetamido-9-oxo-ll-hydroxí- llfl-furanolfi,3-Q?-3-cefem (205 mg).

In (xBr)= 1788 cm'l (/5-laktam), 1665, 1630 cm';_(-confi-).

Claims (8)

'7316l+19~6 21 _ ...å_ ____f_______? __ 7 _ _ '_« - -~ *^ ^-' *f Patentkrav
1. l. Förfarande för framställning av en förening med allmänna --------- ""T6?meln: ' 1 R \ ,s n2'! ' 3 . -;,A'_ fOH (I) 0 I ï~H ,»--»O 0 vari Rl betecknar väte eller metoxi, och R2 betecknar Ru-CHCONH-, I H5 vari Ru betecknar med en konventionell skyddsgrupp N-skyddad 3- amino-3-karboxipropyl, fenyl, fenyltio, fenoxi, nitrofenyl, bensoyl, cyano, tienyl eller tetrazolyl, och R5 betecknar väte, med en konventionell skyddsgrupp skyddad_amino, sulfo, lågalkyl eller hydroxi, k ä n n e t e c k n a t därav, att en utgångs- förening med allmänna formeln: R1_ S Ra *~""1” l* 0 ~~~-N ¿--~cH2ofl ø (II) ___ _"”bQOH 1 och H2 har ovan angiven betydelse eller salter därav vari R bringas att reagera vid 0-3000 med kromsyraanhydrid i ett orga- niskt lösningsmedel under det att reaktionsblandningens pH-värde upprätthålles vid ett värde nära pKa-värdet för U-karboxylsyran av utgångsföreningen och att därefter erhâllen produkt utvinnes ur reaktionslösningen på i och för sig känt sätt mewst lösnings- medelsextraktion. '
2. 2. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att det organiska lösningsmedlet utgöres av aceton, acetonitril, tetrahydrofuran, etylacetat, kloroform, díklorometan, eter, di- oxan, dimetylformamid, dimetylacetamid, ättiksyra eller bland- ningar därav.
3. 3. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att det organiska lösningsmedlet är väsentligen vattenfritt.
4. H. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t därav, att reaktionen genomföres vid pH cirka 2,90.
5. 5. Förfarande enligt krav 1; k ä n n e t e c k n a t därav, att utgångsföreningen användes i saltform av en alkalinetall eller en organisk amin. 7316lr19~6
6. 6. Förfarande enligt krav 5, k ä n n e t e c k n a t därav, att kromsyraanhydriden bringas att reagera i närvaro av en syra, varvid förhållandet av kromsyraanhydrid (per oxida- tionsekvivalent): syra (per mol): utgångsförening som skall óxideras är 2:n:1 vari n betecknar antalet syragrupper i ut- gângsföreningen.
7. 7. Förfarande enligt krav 6, k ä n n e t e c k n a t därav, att syran utgöres av svavelsyra, fosforsyra eller isät- tika.
8. 8. Förfarande enligt krav 6,_ k ä n n e t e c k n a t därav, att syran utgöres av køncentrerad svavelsyra. 22 ANFÖRDA PUBLIKATIONER: